Тк рф статья 272: ТК РФ Статья 272. Особенности трудоустройства лиц в возрасте до восемнадцати лет / КонсультантПлюс

Содержание

Статья 272 ТК РФ. Особенности трудоустройства лиц в возрасте до восемнадцати лет

Статья 272 ТК РФ. Особенности трудоустройства лиц в возрасте до восемнадцати лет

Актуально на:

18 января 2022 г.

Трудовой кодекс, N 197-ФЗ | ст. 272 ТК РФ

Особенности трудоустройства лиц в возрасте до восемнадцати лет определяются трудовым законодательством, коллективным договором, соглашением.

Постоянная ссылка на документ

  • URL
  • HTML
  • BB-код
  • Текст

URL документа [скопировать]

<a href=»»></a>

HTML-код ссылки для вставки на страницу сайта [скопировать]

[url=][/url]

BB-код ссылки для форумов и блогов [скопировать]

в виде обычного текста для соцсетей и пр. [скопировать]

Скачать документ в формате

Изменения документа

Постоянная ссылка на документ

  • URL
  • HTML
  • BB-код
  • Текст

URL документа [скопировать]

<a href=»»></a>

HTML-код ссылки для вставки на страницу сайта [скопировать]

[url=][/url]

BB-код ссылки для форумов и блогов [скопировать]

в виде обычного текста для соцсетей и пр. [скопировать]

Скачать документ в формате

Составить подборку

Анализ текста

Идет загрузка…

Глава 42. Особенности регулирования труда работников в возрасте до восемнадцати лет

Статья 265. Работы, на которых запрещается применение труда лиц в возрасте до восемнадцати лет

Запрещается применение труда лиц в возрасте до восемнадцати лет на работах с вредными и (или) опасными условиями труда, на подземных работах, а также на работах, выполнение которых может причинить вред их здоровью и нравственному развитию (игорный бизнес, работа в ночных кабаре и клубах, производство, перевозка и торговля спиртными напитками, табачными изделиями, наркотическими и иными токсическими препаратами).

(в ред. Федерального закона от 30.06.2006 N 90-ФЗ)

Запрещаются переноска и передвижение работниками в возрасте до восемнадцати лет тяжестей, превышающих установленные для них предельные нормы.

Перечень работ, на которых запрещается применение труда работников в возрасте до восемнадцати лет, а также предельные нормы тяжестей утверждаются в порядке, установленном Правительством Российской Федерации с учетом мнения Российской трехсторонней комиссии по регулированию социально-трудовых отношений.

Статья 266. Медицинские осмотры (обследования) лиц в возрасте до восемнадцати лет

(в ред. Федерального закона от 30.06.2006 N 90-ФЗ)

Лица в возрасте до восемнадцати лет принимаются на работу только после предварительного обязательного медицинского осмотра (обследования) и в дальнейшем, до достижения возраста восемнадцати лет, ежегодно подлежат обязательному медицинскому осмотру (обследованию).

(в ред. Федерального закона от 30.06.2006 N 90-ФЗ)

Предусмотренные настоящей статьей обязательные медицинские осмотры (обследования) осуществляются за счет средств работодателя.

(в ред. Федерального закона от 30.06.2006 N 90-ФЗ)

Статья 267. Ежегодный основной оплачиваемый отпуск работникам в возрасте до восемнадцати лет

Ежегодный основной оплачиваемый отпуск работникам в возрасте до восемнадцати лет предоставляется продолжительностью 31 календарный день в удобное для них время.

Статья 268. Запрещение направления в служебные командировки, привлечения к сверхурочной работе, работе в ночное время, в выходные и нерабочие праздничные дни работников в возрасте до восемнадцати лет

Запрещаются направление в служебные командировки, привлечение к сверхурочной работе, работе в ночное время, в выходные и нерабочие праздничные дни работников в возрасте до восемнадцати лет (за исключением творческих работников средств массовой информации, организаций кинематографии, теле- и видеосъемочных коллективов, театров, театральных и концертных организаций, цирков и иных лиц, участвующих в создании и (или) исполнении (экспонировании) произведений, в соответствии с перечнями работ, профессий, должностей этих работников, утверждаемыми Правительством Российской Федерации с учетом мнения Российской трехсторонней комиссии по регулированию социально-трудовых отношений).


(в ред. Федеральных законов от 30.06.2006 N 90-ФЗ, от 28.02.2008 N 13-ФЗ)

Статья 269. Дополнительные гарантии работникам в возрасте до восемнадцати лет при расторжении трудового договора

Расторжение трудового договора с работниками в возрасте до восемнадцати лет по инициативе работодателя (за исключением случая ликвидации организации или прекращения деятельности индивидуальным предпринимателем) помимо соблюдения общего порядка допускается только с согласия соответствующей государственной инспекции труда и комиссии по делам несовершеннолетних и защите их прав.

(в ред. Федерального закона от 30.06.2006 N 90-ФЗ)

Статья 270. Нормы выработки для работников в возрасте до восемнадцати лет

Для работников в возрасте до восемнадцати лет нормы выработки устанавливаются исходя из общих норм выработки пропорционально установленной для этих работников сокращенной продолжительности рабочего времени.

Для работников в возрасте до восемнадцати лет, поступающих на работу после окончания общеобразовательных учреждений и образовательных учреждений начального профессионального образования, а также прошедших профессиональное обучение на производстве, в соответствии с трудовым законодательством и иными нормативными правовыми актами, содержащими нормы трудового права, коллективным договором, соглашениями, локальными нормативными актами, трудовым договором могут устанавливаться пониженные нормы выработки.


(в ред. Федерального закона от 30.06.2006 N 90-ФЗ)

Статья 271. Оплата труда работников в возрасте до восемнадцати лет при сокращенной продолжительности ежедневной работы

При повременной оплате труда заработная плата работникам в возрасте до восемнадцати лет выплачивается с учетом сокращенной продолжительности работы. Работодатель может за счет собственных средств производить им доплаты до уровня оплаты труда работников соответствующих категорий при полной продолжительности ежедневной работы.

Труд работников в возрасте до восемнадцати лет, допущенных к сдельным работам, оплачивается по установленным сдельным расценкам. Работодатель может устанавливать им за счет собственных средств доплату до тарифной ставки за время, на которое сокращается продолжительность их ежедневной работы.

Оплата труда работников в возрасте до восемнадцати лет, обучающихся в общеобразовательных учреждениях, образовательных учреждениях начального, среднего и высшего профессионального образования и работающих в свободное от учебы время, производится пропорционально отработанному времени или в зависимости от выработки.

Работодатель может устанавливать этим работникам доплаты к заработной плате за счет собственных средств.

Статья 272. Особенности трудоустройства лиц в возрасте до восемнадцати лет

Особенности трудоустройства лиц в возрасте до восемнадцати лет определяются трудовым законодательством, коллективным договором, соглашением.

(в ред. Федерального закона от 30.06.2006 N 90-ФЗ)

Статья 272 ТК РФ 2016-2019. Особенности трудоустройства лиц в возрасте до восемнадцати лет. ЮрИнспекция

Обращаться в службу опеки вашего района — они дадут подробнейшую консультацию на основании чего это можно сделать, какие документы собрать, помогут написать заявление в суд и будут там представлять ваши интересы в ходе заседания, коли оно состоится. Скажу только, что дело это сложное, муторное и долгое Если Вам очень хочется лишить мужа родительских прав, то можно это сделать, подав заявление в суд. В подтверждении представите справку о задолженности (либо как вариант решение суда, где будет установлена злостность неуплаты алименетов) , показания свидетелей, которые подтвердят, что отец ребёнком не занимается, не участвует в его воспитании, содержании. Если это возможно в силу возраста ребёнка, то и сам ребёнок может высказаться в суде по отношениям с папой (есть они или их нет) . Лишению родительских прав посвящена ст. 69 Семейного кодекса РФ. При этом в числе оснований для лишения прав есть и уклонение «от выполнения обязанностей родителей, в том числе при злостном уклонении от уплаты алиментов» . Для того чтобы лишить по данному основанию родительских прав необязательно, чтобы факт злостного уклонения от алиментов был подтвержден приговором суда (ст. 157 УК РФ) . Достаточно убедиться в постоянном стремлении уклониться от уплаты алиментов, материальной поддержки своих детей. Но если родитель по объективным причинам платить алименты не может, нет оснований по этому признаку лишать его родительских прав. Сам по себе факт существования у родителей (одного из них) тяжелых бытовых условий подлежит критической оценке в каждой конкретной ситуации. Как уже было указано выше, злостное уклонение от алиментов — уголовно-наказуемое деяние. Ответственностью за него предусмотрена ст. 157 Уголовного Кодекса РФ. Под уклонением родителей от уплаты средств на содержание детей понимается не только прямой отказ от уплаты присужденных судом алиментов, но и сокрытие лицом своего действительного заработка, смену работы или места жительства с целью избежать удержаний по исполнительному листу и т. п. Вопрос о том, является ли уклонение злостным, должен решаться судом в каждом конкретном случае с учетом продолжительности и причин неуплаты лицом алиментов и всех других обстоятельств дела. О злостном уклонении могут свидетельствовать, в частности, повторность совершения аналогичного преступления, уклонение от уплаты алиментов, несмотря на соответствующее предупреждение, розыск лица, обязанного выплачивать алименты, ввиду сокрытия им своего места нахождения и т. д. Суды не должны ограничиваться в приговоре общей ссылкой на то, что уклонение от уплаты алиментов носило злостный характер, а обязаны указывать, в чем конкретно эта злостность выражалась. Федеральным законом от 27 ноября 2007 г. N 272-ФЗ в ст. 151 Уголовно-процессуального кодекса Российской Федерации внесены изменения, в соответствии с которыми с 1 февраля 2008 г. к подследственности Федеральной службы судебных приставов (далее — ФССП России) отнесены преступления, предусмотренные статьей 157 Уголовного кодекса Российской Федерации. В соответствии со ст. 140 Уголовно-процессуального кодекса Российской Федерации поводом для возбуждения уголовного дела могут являться рапорт судебного пристава-исполнителя об обнаружении признаков преступления, предусмотренного ст. 157 Уголовного кодекса Российской Федерации, заявление взыскателя, а также сообщение о совершенном или готовящемся преступлении, полученное из иных источников. Таким образом, Вам необходимо подать заявление судебному приставу-исполнителю о возбуждении уголовного дела в отношении должника (я считаю, что данное действие необходимо) , а после вынесения приговора, Вы можете подать заявление о лишении бывшего супруга родительских прав. Удачи Вам!

Регулирование труда работников в возрасте до 18 лет

                              РЕГУЛИРОВАНИЕ ТРУДА РАБОТНИКОВ

                                           В ВОЗРАСТЕ ДО 18 ЛЕТ

         Глава 42 Трудового кодекса РФ  регулирует труд работников в возрасте до 18 лет. В ней содержится комплекс специальных норм по труду несовершеннолетних работников, образующий особую охрану их труда с учетом психофизиологических особенностей неокрепшего подросткового организма и необходимости для многих несовершеннолетних продолжения образования.

        Трудовые льготы направлены на охрану здоровья несовершеннолетних от производственных факторов и предусмотрены ст.ст. 265-272 Трудового кодекса. Все другие права ( на труд, оплату по трудовому вкладу, социальное страхование по болезни и др.) они имеют наравне с совершеннолетними.

       Часть первая ст. 265 ТК запрещает применять труд несовершеннолетних работников на работах с вредными  и (или) опасными условиями труда.

       Перечень тяжелых работ и работ с вредными и опасными условиями труда, при выполнении которых запрещается применение труда лиц моложе 18 лет, утвержден Постановлением Правительства РФ от 26.02.2000г. № 163.

      В случае, если подросток просит использовать его труд на этих видах работ, администрация не имеет права это делать, иначе она несет ответственность за нарушение трудового законодательства (дисциплинарную, административную, а при тяжелых для подростка последствиях – и уголовную).

      Кроме работ, запрещенных ст. 265 ТК РФ для несовершеннолетних, они не могут привлекаться к работам: по совместительству (ч.6 ст. 282 ТК), по письменному договору о полной материальной ответственности ( ст. 244 ТК), по вахтовому методу, поскольку эти работы связаны с отъездом в другую местность и с длительным рабочими сменами, что запрещается несовершеннолетним ( ст. 298 ТК).

      Лица до 18 лет не могут использоваться при погрузочно-разгрузочных работах.

      Статьей 92 Трудового кодекса ля работников в возрасте до 18 лет, не обучающихся в образовательных учреждениях, установлена сокращенная продолжительность рабочего времени. Нормальная продолжительность рабочего времени для лиц в возрасте до 16 лет не должна превышать 24 часа в неделю, 36 часов в неделю – для работников в возрасте от 16 до 18 лет.

      Лица, обучающиеся в образовательных учреждениях начального и среднего профессионального образования и работающие в течение учебного года в свободное от учебы время, устанавливается сокращенное рабочее время продолжительностью: в возрасте от 16 до 18 лет – не более 18 часов, в возрасте от 14 до 16 лет – не более 12 часов в неделю.

       При повременной оплате труда заработная плата работника в возрасте до 18 лет при сокращенном рабочем дне выплачивается с учетом сокращенной продолжительности работы, а при сдельной оплате труда по установленным сдельным расценкам.

       При приеме на работу лиц моложе 18 лет ст. 266 устанавливает обязательные предварительные  медицинские осмотры. Эти осмотры осуществляются за счет средств работодателя.

      Установленные трудовым законодательством ежегодный отпуск продолжительностью в 31 календарный день предоставляется всем несовершеннолетним работникам, в том числе занятым неполное рабочее время.

       Статья 269 ТК предусматривает гарантию при увольнении работников моложе 18 лет. Увольнение помимо общего порядка увольнения производится лишь с согласия соответствующей государственной инспекции труда и комиссии по делам несовершеннолетних и защите их прав.

 

Помощник прокурора района                                                                     И.Е. Зайцева

Федеральная таможенная служба

  1. 1.

Согласно п. 2 статьи 277 ТК ЕАЭС в отношении судов зарегистрированных в международном реестре судов РФ не применяется пп.1 п.1 статьи 277 ТК ЕАЭС и в отношении таких судов допускается проведение операций по их техническому обслуживанию и ремонту.

Что имеется в виду под фразой «техническое обслуживание и ремонт»?

Является ли капитальный ремонт и модернизация этим самым «техническим обслуживанием и ремонтом»?

На практике вопрос в следующем — будет ли судовладелец судна зарегистрированного  в международном реестре судов РФ платить пошлину и ремонт если во время нахождения за границей в отношении такого судна были произведены плановый (не аварийный) капитальный ремонт, модернизация или ремонтные работы в связи с предъявлением судна морскому регистру?

Или за какие конкретно операции по техническому обслуживанию и ремонту совершенные за границей судовладельцы судов зарегистрированных в международном реестре судов РФ не будут платить, а за какие будут платить таможенные платежи.

Во избежание необоснованного привлечения судовладельца к административной ответственности и четкого понимания сторонами своих прав и обязанностей просим дать развернутый ответ на данный вопрос.

В соответствии с пунктом 1 статьи 272 Таможенного кодекса Евразийского экономического союза (далее – ТК ЕАЭС) транспортные средства международной перевозки (далее – ТСМП) перемещаются через таможенную границу Евразийского экономического союза (далее – Союз) и используются на таможенной территории Союза или за ее пределами в порядке, установленном главой 38 ТК ЕАЭС, а в части, не урегулированной данной главой, — в порядке, установленном иными главами ТК ЕАЭС.

Согласно пункту 2 статьи 272 ТК ЕАЭС положения главы 38 ТК ЕАЭС применяются, в том числе, в отношении временно вывозимых с таможенной территории Союза для завершения и (или) начала международной перевозки за пределами таможенной территории Союза ТСМП.

Временно вывозимые ТСМП вывозятся  с таможенной территории Союза и ввозятся обратно без уплаты ввозных таможенных пошлин, налогов при соблюдении условий нахождения и использования временно вывезенных ТСМП за пределами таможенной территории Союза (пункт 1, 3 статьи 276 ТК ЕАЭС).

Условия использования за пределами таможенной территории Союза временно вывезенных ТСМП определены в статье 277 ТК ЕАЭС.

Так согласно пункту 1 статьи 277 ТК ЕАЭС за пределами таможенной территории Союза с временно вывезенными ТСМП допускается совершение ряда операций, определенных положениями данной статьи.

При этом положения подпункта 1 пункта 1 статьи 277 ТК ЕАЭС не распространяются на временно вывезенные в качестве ТСМП водные суда, зарегистрированные в международных реестрах судов государств-членов. В отношении таких судов допускается проведение операций по их техническому обслуживанию и (или) ремонту (пункт 2 статьи 277 ТК ЕАЭС).

Исходя из изложенного, в отношении временно вывезенных в качестве ТСМП водных судов, зарегистрированных в международных реестрах судов государств-членов (в Российской Федерации — Российский международный реестр судов), помимо операций, определенных положениями подпунктов 2, 3 пункта 1 статьи 277 ТК ЕАЭС, допускается проведение операций по техническому обслуживанию и  (или) ремонту, вне зависимости от времени возникновения необходимости в них. При этом рассматриваемым пунктом не вводятся ограничения по виду проводимого ремонта, в отличие от подпункта 1 пункта 1 статьи 277 ТК ЕАЭС.

Таким образом, полагаем, что с учетом положений пункта 2 статьи 277               ТК ЕАЭС в отношении временно вывезенного ТСМП, включенного в Российский международный реестр судов, можно проводить капитальный ремонт судна, а также модернизацию без возникновения обязанности по его таможенному декларированию в соответствии с пунктом 3 статьи 277 ТК ЕАЭС.

  1. 2.

В соответствии с подпунктом 1 пункта 1 статьи 277 ТК ЕАЭС за пределами таможенной территории Союза с временно вывезенными транспортными средствами международной перевозки допускается совершение операций по техническому обслуживанию и (или) ремонту (за исключением капитального ремонта, модернизации), необходимые для обеспечения их сохранности, эксплуатации и поддержания в состоянии, в котором они находились на день вывоза с таможенной территории Союза, если потребность в таких операциях возникла во время использования этих транспортных средств международной перевозки за пределами таможенной территории Союза.

В соответствии с пунктом 2 статьи 277 ТК ЭАЭС положения подпункта 1 пункта 1 настоящей статьи не распространяются на временно вывезенные в качестве транспортных средств международной перевозки водные суда, зарегистрированные в международных реестрах судов государств-членов. В отношении таких судов допускается проведение операций по их техническому обслуживанию и (или) ремонту.

В соответствии с пунктом 3 статьи 277 ТК ЭАЭС совершение операций, не предусмотренных пунктами 1 и 2 статьи 277 ТК ЕАЭС, в отношении находящихся за пределами таможенной территории Союза временно вывезенных транспортных средств международной перевозки допускается при условии помещения этих транспортных средств под таможенную процедуру переработки вне таможенной территории.

Подлежат или нет помещению под таможенную процедуру переработки вне таможенной территории временно вывезенные в качестве транспортных средств международной перевозки водные суда, зарегистрированные в международных реестрах судов государств-членов суда, в отношении которых совершены операции по капитальному ремонту или модернизации?

В соответствии с пунктом 1 статьи 272 ТК ЕАЭС транспортные средства международной перевозки (далее – ТСМП) перемещаются через таможенную границу Евразийского экономического союза (далее – Союз) и используются на таможенной территории Союза или за ее пределами в порядке, установленном главой 38 ТК ЕАЭС, а в части, не урегулированной данной главой, — в порядке, установленном иными главами ТК ЕАЭС.

Согласно пункту 2 статьи 272 ТК ЕАЭС положения главы 38 ТК ЕАЭС применяются, в том числе, в отношении временно вывозимых с таможенной территории Союза для завершения и (или) начала международной перевозки за пределами таможенной территории Союза ТСМП.

Временно вывозимые ТСМП вывозятся с таможенной территории Союза и ввозятся обратно без уплаты ввозных таможенных пошлин, налогов при соблюдении условий нахождения и использования временно вывезенных ТСМП за пределами таможенной территории Союза (пункт 1, 3 статьи 276 ТК ЕАЭС).

Условия использования за пределами таможенной территории Союза временно вывезенных ТСМП определены в статье 277 ТК ЕАЭС.

Так согласно пункту 1 статьи 277 ТК ЕАЭС за пределами таможенной территории Союза с временно вывезенными ТСМП допускается совершение ряда операций, определенных положениями данной статьи.

При этом положения подпункта 1 пункта 1 статьи 277 ТК ЕАЭС не распространяются на временно вывезенные в качестве ТСМП водные суда, зарегистрированные в международных реестрах судов государств-членов. В отношении таких судов допускается проведение операций по их техническому обслуживанию и (или) ремонту (пункт 2 статьи 277 ТК ЕАЭС).

Исходя из изложенного, в отношении временно вывезенных в качестве ТСМП водных судов, зарегистрированных в международных реестрах судов государств-членов (в Российской Федерации — Российский международный реестр судов), помимо операций, определенных положениями подпунктов 2, 3 пункта 1 статьи 277 ТК ЕАЭС, допускается проведение операций по техническому обслуживанию и  (или) ремонту, вне зависимости от времени возникновения необходимости в них.

При этом рассматриваемым пунктом не вводятся ограничения по виду проводимого ремонта, в отличие от подпункта 1 пункта 1 статьи 277 ТК ЕАЭС.

Таким образом, полагаем, что с учетом положений пункта 2 статьи 277               ТК ЕАЭС в отношении временно вывезенного ТСМП, включенного в Российский международный реестр судов, можно проводить капитальный ремонт судна, а также модернизацию без возникновения обязанности по его таможенному декларированию в соответствии с пунктом 3 статьи 277 ТК ЕАЭС.

Обязанность по помещению ТСМП под соответствующую таможенную процедуру возникает в случае совершения операций, не предусмотренных пунктами 1, 2 статьи 277 ТК ЕАЭС (за исключением, ТСМП, указанных в абзаце четвертом подпункта 2 пункта 2 статьи 272 ТК ЕАЭС).

Обратный ввоз временно вывезенного ТСМП осуществляется в порядке, определенном главой 38 ТК ЕАЭС.

Глава 42 Трудовой кодекс РФ статья: 265

скачать Трудовой кодекс ТК РФ бесплатно

Глава 42. Особенности регулирования труда работников в возрасте до восемнадцати лет

Статья 265. Работы, на которых запрещается применение труда лиц в возрасте до восемнадцати лет

Запрещается применение труда лиц в возрасте до восемнадцати лет на работах с вредными и (или) опасными условиями труда, на подземных работах, а также на работах, выполнение которых может причинить вред их здоровью и нравственному развитию (игорный бизнес, работа в ночных кабаре и клубах, производство, перевозка и торговля спиртными напитками, табачными изделиями, наркотическими и иными токсическими препаратами).

(в ред. Федерального закона от 30.06.2006 N 90-ФЗ)

Запрещаются переноска и передвижение работниками в возрасте до восемнадцати лет тяжестей, превышающих установленные для них предельные нормы.

Перечень работ, на которых запрещается применение труда работников в возрасте до восемнадцати лет, а также предельные нормы тяжестей утверждаются в порядке, установленном Правительством Российской Федерации с учетом мнения Российской трехсторонней комиссии по регулированию социально-трудовых отношений.

Статья 266. Медицинские осмотры (обследования) лиц в возрасте до восемнадцати лет

(в ред. Федерального закона от 30.06.2006 N 90-ФЗ)

Лица в возрасте до восемнадцати лет принимаются на работу только после предварительного обязательного медицинского осмотра (обследования) и в дальнейшем, до достижения возраста восемнадцати лет, ежегодно подлежат обязательному медицинскому осмотру (обследованию).

(в ред. Федерального закона от 30.06.2006 N 90-ФЗ)

Предусмотренные настоящей статьей обязательные медицинские осмотры (обследования) осуществляются за счет средств работодателя.

(в ред. Федерального закона от 30.06.2006 N 90-ФЗ)

Статья 267. Ежегодный основной оплачиваемый отпуск работникам в возрасте до восемнадцати лет

Ежегодный основной оплачиваемый отпуск работникам в возрасте до восемнадцати лет предоставляется продолжительностью 31 календарный день в удобное для них время.

Статья 268. Запрещение направления в служебные командировки, привлечения к сверхурочной работе, работе в ночное время, в выходные и нерабочие праздничные дни работников в возрасте до восемнадцати лет

Запрещаются направление в служебные командировки, привлечение к сверхурочной работе, работе в ночное время, в выходные и нерабочие праздничные дни работников в возрасте до восемнадцати лет (за исключением творческих работников средств массовой информации, организаций кинематографии, теле- и видеосъемочных коллективов, театров, театральных и концертных организаций, цирков и иных лиц, участвующих в создании и (или) исполнении (экспонировании) произведений, в соответствии с перечнями работ, профессий, должностей этих работников, утверждаемыми Правительством Российской Федерации с учетом мнения Российской трехсторонней комиссии по регулированию социально-трудовых отношений).

(в ред. Федеральных законов от 30.06.2006 N 90-ФЗ, от 28.02.2008 N 13-ФЗ)

Статья 269. Дополнительные гарантии работникам в возрасте до восемнадцати лет при расторжении трудового договора

Расторжение трудового договора с работниками в возрасте до восемнадцати лет по инициативе работодателя (за исключением случая ликвидации организации или прекращения деятельности индивидуальным предпринимателем) помимо соблюдения общего порядка допускается только с согласия соответствующей государственной инспекции труда и комиссии по делам несовершеннолетних и защите их прав.

(в ред. Федерального закона от 30.06.2006 N 90-ФЗ)

Статья 270. Нормы выработки для работников в возрасте до восемнадцати лет

Для работников в возрасте до восемнадцати лет нормы выработки устанавливаются исходя из общих норм выработки пропорционально установленной для этих работников сокращенной продолжительности рабочего времени.

Для работников в возрасте до восемнадцати лет, поступающих на работу после окончания общеобразовательных учреждений и образовательных учреждений начального профессионального образования, а также прошедших профессиональное обучение на производстве, в соответствии с трудовым законодательством и иными нормативными правовыми актами, содержащими нормы трудового права, коллективным договором, соглашениями, локальными нормативными актами, трудовым договором могут устанавливаться пониженные нормы выработки.

(в ред. Федерального закона от 30.06.2006 N 90-ФЗ)

Статья 271. Оплата труда работников в возрасте до восемнадцати лет при сокращенной продолжительности ежедневной работы

При повременной оплате труда заработная плата работникам в возрасте до восемнадцати лет выплачивается с учетом сокращенной продолжительности работы. Работодатель может за счет собственных средств производить им доплаты до уровня оплаты труда работников соответствующих категорий при полной продолжительности ежедневной работы.

Труд работников в возрасте до восемнадцати лет, допущенных к сдельным работам, оплачивается по установленным сдельным расценкам. Работодатель может устанавливать им за счет собственных средств доплату до тарифной ставки за время, на которое сокращается продолжительность их ежедневной работы.

Оплата труда работников в возрасте до восемнадцати лет, обучающихся в общеобразовательных учреждениях, образовательных учреждениях начального, среднего и высшего профессионального образования и работающих в свободное от учебы время, производится пропорционально отработанному времени или в зависимости от выработки. Работодатель может устанавливать этим работникам доплаты к заработной плате за счет собственных средств.

Статья 272. Особенности трудоустройства лиц в возрасте до восемнадцати лет

Особенности трудоустройства лиц в возрасте до восемнадцати лет определяются трудовым законодательством, коллективным договором, соглашением.

(в ред. Федерального закона от 30.06.2006 N 90-ФЗ)

о чём хочет забыть Die Welt? – WARHEAD.SU

Когда о каком-то факте или событии неожиданно и внешне немотивированно вспоминают, у людей в теме возникает вопрос: «О чём же они хотят забыть?». Статья в Die Welt о Прохоровке — именно такая. Самый лёгкий способ заставить о чём-то забыть — потопить воспоминания в крике и хайпе на постороннюю тему.

Помни лето 1944 года!

Первый ответ совершенно очевиден: хотят ещё на пять лет забыть о страшном для Третьего рейха лете 1944-го. В этом году как раз 75-летний юбилей. Прежде всего речь идёт о катастрофе группы армий «Центр» в Белоруссии, ставшей началом обвала всего фронта от Прибалтики до Румынии. Ведь иначе придётся вспомнить, как окружённые войска недрогнувшей рукой ещё живыми списывали в безвозвратные потери, сосредотачиваясь на восстановлении фронта. Придётся вспомнить о заблуждениях командующих всех рангов, о вынужденной смене Эрнста Буша на Вальтера Моделя. Всё это будет работать против любовно создаваемого имиджа умелой армии, преданной бесноватым фюрером.

О чём вообще речь?

Сразу оговорюсь: 12 июля 1943 года на Прохоровском поле произошло совсем не то, что планировали командование фронта и представитель Ставки А. М. Василевский. Всё пошло не так. Да, немцам удалось добиться успеха в обороне и предотвратить, например, отсечение и окружение «Мёртвой головы» на плацдарме за Псёлом. Бой на Прохоровском поле произвёл настоящее опустошение в рядах двух танковых корпусов 5-й гв. танковой армии. 29-й танковый корпус потерял подбитыми и сгоревшими 153 танка и 17 СУ-76 и СУ-122, что составило 77% участвовавших в атаках боевых машин. В 18-м танковом корпусе было подбито и сожжено 84 танка, то есть 56% от числа участвовавших в бою. Донесение о потерях немецкой эсэсовской дивизии «Лейбштандарт» за 12 июля 1943 года отсутствует. Все приводимые за немцев данные — это расчёты по наличию. Немецкие историки, в частности Фризер, предпочитают брать наименьшую возможную расчётную величину, растягивая до предела допущение. Допущению больно. Таковы факты. Но исчерпывается ли этим разговор о Прохоровке?

Ошибка на ошибку

Крики «а вот Прохоровка!» рассчитаны на оценку обстановки только с одной стороны. Однако документы открывались не только советские. Если заглянуть в написанное по другую сторону фронта (и доступное тому же Фризеру), то выясняется, что 5-я гв. танковая армия стала для немцев сюрпризом, и сюрпризом неприятным. Заблаговременной подготовки к советскому контрудару не велось, и только взвившиеся над передовыми окопами фиолетовые сигнальные ракеты («атакованы танками!») утром 12 июля 1943-го сообщили о его начале. Кто приехал и нумерацию частей выяснили уже вечером.

Но это только цветочки. Ягодки в том, что 5-я гв. ТА, переданная Воронежскому фронту из резерва, совершала марш к фронту среди бела дня. При этом противопоставить авиаударам армия П. А. Ротмистрова могла достаточно ограниченное количество зенитных стволов. Например, длина колонны 29-го тк составляла 15 км. Для её прикрытия имелось 32 37-мм зенитных автомата и 32 пулемёта ДШК. Примерно по две пушки и пулемёта на километр колонны. При массированном ударе пикировщиков их подавят в первые минуты, а даже если и не подавят, сорвать налёт они не смогут. Танки-то, может, и не пострадают. Но вот «кишка» из грузовиков с мотопехотой, с боеприпасами и цистерн с горючим станут адом на земле.

Прикрытие с воздуха было, но над бесконечными колоннами нельзя было висеть целыми авиаполками, как лампочка. Патрули же «лавочкиных» могли быть вытеснены крупной группой истребителей люфтваффе с созданием локального господства в воздухе на полчаса. Более того, на переправах через р. Оскол колонны 5-й гв. ТА семь часов стояли неподвижно гигантской пробкой. Но никто не прилетел и не разбомбил. Ни колонны, ни переправы. Именно об этом хочется забыть немецким историкам. О невскрытом и совершенно безнаказанном выдвижении ключевого резерва. Совершенно невозможном в 1941-м или 1942-м. Деградация‑с!

5-я гв. танковая армия приехала вовремя, и её появление делало все богатые идеи о наступлении на Курск совершенно бесперспективными. Невыполнение поставленных ей задач 12 июля ситуацию радикально не меняло. Баланс сил изменился. Выход на оперативный простор и даже захват армейских складов 6-й гв. армии под Прохоровкой становился для немцев нереальным. Лишь то, что Модель на северном фасе провалился и застрял раньше, позволяло командующему ГА «Юг» Манштейну делать хорошую мину при откровенно плохой игре.

Где стоит памятник?

Памятник в Прохоровке стоит на том месте, где остановилось последнее немецкое наступление на русской земле, преследовавшее цель стратегического масштаба. Операция «Цитадель» должна была переломить ход войны. Для «Цитадели» к лету 1943-го под ружьё были поставлены массы солдат, собрана новейшая техника, но всё это пошло прахом. Это был последний рывок, на повторение которого Германия уже была неспособна. Рывок, надо сказать, дорого обошёлся в убитых и раненых солдатах и офицерах, сожжённой и брошенной технике. Именно потери и снижение численности «активных штыков» заставило немцев поспешно откатываться к Днепру.

(Фото: Андрей Луфт)

Поэтому Курская дуга стала одним из поворотных пунктов Второй мировой войны. Памятник напоминает именно об этом.

Мнение редакции не всегда совпадает с мнением автора.

Упадацитиниб улучшает исходы, о которых сообщают пациенты, у пациентов с ревматоидным артритом и неадекватным ответом на обычные синтетические противоревматические препараты, модифицирующие заболевание: результаты SELECT-NEXT | Arthritis Research & Therapy

  • 1.

    Smolen JS, Aletaha D, McInnes IB. Ревматоидный артрит. Ланцет. 2016; 388:2023–38.

    КАС Статья пабмед Google Scholar

  • 2.

    Хьюлетт С., Кокшот З., Байрон М. , Китчен К., Типлер С., Поуп Д. и др.Восприятие усталости пациентами при ревматоидном артрите: подавляющее, неконтролируемое, игнорируемое. Ревмирующий артрит. 2005; 53: 697–702.

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 3.

    Kirwan JR, Hewlett S. Взгляд пациента: причины и методы измерения усталости при ревматоидном артрите. J Ревматол. 2007; 34:1171–3.

    ПабМед Google Scholar

  • 4.

    да Силва Дж.А., Филлипс С., Буттгерайт Ф.Влияние нарушения утренней функции на жизнь и самочувствие больных ревматоидным артритом. Scand J Rheumatol Suppl. 2011; 125:6–11.

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 5.

    Halls S, Dures E, Kirwan J, Pollock J, Baker G, Edmunds A, et al. Скованность — это больше, чем просто продолжительность и тяжесть: качественное исследование у людей с ревматоидным артритом. Ревматология (Оксфорд). 2015;54:615–22.

    КАС Статья Google Scholar

  • 6.

    Поллард Л.С., Чой Э.Х., Гонсалес Дж., Хошаба Б., Скотт Д.Л. Усталость при ревматоидном артрите отражает боль, а не активность болезни. Ревматология (Оксфорд). 2006; 45:885–9.

    КАС Статья Google Scholar

  • 7.

    Matcham F, Scott IC, Rayner L, Hotopf M, Kingsley GH, Norton S, et al. Влияние ревматоидного артрита на качество жизни, оцененное с помощью SF-36: систематический обзор и метаанализ. Семин Артрит Реум. 2014;44:123–30.

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 8.

    Strand V, Khanna D. Влияние ревматоидного артрита и лечения на жизнь пациентов. Клин Эксперт Ревматол. 2010;28:С32–40.

    ПабМед Google Scholar

  • 9.

    Taylor PC, Moore A, Vasilescu R, Alvir J, Tarallo M. Структурированный литературный обзор бремени болезни и неудовлетворенных потребностей у пациентов с ревматоидным артритом: современная перспектива. Ревматол Интерн. 2016; 36: 685–95.

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 10.

    Tang K, Beaton DE, Gignac MA, Lacaille D, Zhang W, Bombardier C. Шкала нестабильности работы для ревматоидного артрита позволяет прогнозировать связанные с артритом смены работы в течение 12 месяцев. Res помощи артрита (Hoboken). 2010;62:1578–87.

    Артикул Google Scholar

  • 11.

    Сокка Т., Каутиайнен Х., Пинкус Т., Ферстаппен С.М., Аггарвал А., Альтен Р. и др. Нетрудоспособность остается серьезной проблемой при ревматоидном артрите в 2000-х годах: данные исследования QUEST-RA из 32 стран. Артрит Res Ther. 2010;12:R42.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 12.

    Westhoff G, Buttgereit F, Gromnica-Ihle E, Zink A. Утренняя скованность и ее влияние на ранний выход на пенсию у пациентов с недавним ревматоидным артритом. Ревматология (Оксфорд). 2008;47:980–4.

    КАС Статья Google Scholar

  • 13.

    van Tuyl LH, Sadlonova M, Hewlett S, Davis B, Flurey C, Goel N, et al. Взгляд пациента на отсутствие активности заболевания при ревматоидном артрите: опрос для определения ключевых областей ремиссии, воспринимаемой пациентом. Энн Реум Дис. 2017;76:855–61.

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 14.

    Nikiphorou E, Radner H, Chatzidionysiou K, Desthieux C, Zabalan C, van Eijk-Hustings Y, et al. Глобальная оценка пациента при измерении активности заболевания при ревматоидном артрите: обзор литературы. Артрит Res Ther. 2016;18:251.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 15.

    Orbai AM, Bingham CO 3rd. Пациенты сообщали о результатах клинических испытаний ревматоидного артрита. Curr Rheumatol Rep. 2015; 17:28.

    Артикул КАС пабмед Google Scholar

  • 16.

    Бурс М., Кирван Дж.Р., Уэллс Г., Битон Д., Госсек Л., д’Агостино М.А. и др. Разработка основных наборов показателей результатов для клинических испытаний: фильтр OMERACT 2.0. Дж. Клин Эпидемиол. 2014;67:745–53.

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 17.

    Kirwan JR, Tugwell PS. Обзор точки зрения пациента на OMERACT 10 — концептуализация методов разработки результатов, о которых сообщают пациенты.J Ревматол. 2011; 38:1699–701.

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 18.

    Sanderson T, Morris M, Calnan M, Richards P, Hewlett S. Какие результаты фармакологического лечения важны для людей с ревматоидным артритом? Создание основы для основного набора пациента. Res помощи артрита (Hoboken). 2010;62:640–6.

    КАС Статья Google Scholar

  • 19.

    Fautrel B, Alten R, Kirkham B, de la Torre I, Durand F, Barry J, et al. Призыв к действию: как улучшить использование результатов, о которых сообщают пациенты, для принятия клинических решений при ревматоидном артрите. Ревматол Интерн. 2018; 38: 935–47.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 20.

    Burmester GR, Blanco R, Charles-Schoeman C, Wollenhaupt J, Zerbini C, Benda B, et al. Тофацитиниб (CP-690,550) в комбинации с метотрексатом у пациентов с активным ревматоидным артритом с неадекватным ответом на ингибиторы фактора некроза опухоли: рандомизированное исследование 3 фазы.Ланцет. 2013; 381:451–60.

    КАС Статья пабмед Google Scholar

  • 21.

    Genovese MC, Kremer J, Zamani O, Ludivico C, Krogulec M, Xie L, et al. Барицитиниб у пациентов с рефрактерным ревматоидным артритом. N Engl J Med. 2016; 374:1243–52.

    КАС Статья пабмед Google Scholar

  • 22.

    Кавано А., Кремер Дж., Понсе Л., Чеуз Р., Решетко О.В., Станиславчук М. и соавт.Филготиниб (GLPG0634/GS-6034), пероральный селективный ингибитор JAK1, эффективен в качестве монотерапии у пациентов с активным ревматоидным артритом: результаты рандомизированного исследования по подбору дозы (DARWIN 2). Энн Реум Дис. 2017;76:1009–19.

    КАС Статья пабмед Google Scholar

  • 23.

    Westhovens R, Taylor PC, Alten R, Pavlova D, Enriquez-Sosa F, Mazur M, et al. Филготиниб (GLPG0634/GS-6034), пероральный селективный ингибитор JAK1, эффективен в комбинации с метотрексатом (MTX) у пациентов с активным ревматоидным артритом и недостаточным ответом на MTX: результаты рандомизированного исследования по подбору дозы (DARWIN 1).Энн Реум Дис. 2017;76:998–1008.

    КАС Статья пабмед Google Scholar

  • 24.

    Burmester GR, Kremer JM, Van den Bosch F, Kivitz A, Bessette L, Li Y, et al. Безопасность и эффективность упадацитиниба у пациентов с ревматоидным артритом и неадекватным ответом на обычные синтетические противоревматические препараты, модифицирующие болезнь (SELECT-NEXT): рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование 3 фазы. Ланцет. 2018; 391:2503–12.

    КАС Статья пабмед Google Scholar

  • 25.

    Genovese MC, Smolen JS, Weinblatt ME, Burmester GR, Meerwein S, Camp HS, et al. Эффективность и безопасность ABT-494, селективного ингибитора JAK-1, в исследовании фазы IIb у пациентов с ревматоидным артритом и неадекватным ответом на метотрексат. Артрит Ревматолог. 2016;68:2857–66.

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 26.

    Брюс Б., Фрайс Дж. Ф. Анкета оценки здоровья (HAQ). Клин Эксперт Ревматол. 2005; 23:S14–8.

    КАС пабмед Google Scholar

  • 27.

    Ramey D, Fries JF, Singh G. Анкета оценки состояния здоровья 1995 г. – статус и обзор. 2-е изд. Филадельфия: Липпинкотт-Рэйвен; 1996.

    Google Scholar

  • 28.

    Kitchen H, Hansen B, Abetz L, Højbjerre L, Strandber-Larsen M.Показатели результатов лечения ревматоидного артрита, сообщаемые пациентами: обзор минимальных важных различий. Ревмирующий артрит. 2013;65(Приложение 10):аннотация 2268.

    Google Scholar

  • 29.

    Strand V, Boers M, Idzerda L, Kirwan JR, Kvien TK, Tugwell PS, et al. Хорошо чувствовать себя лучше, но лучше чувствовать себя хорошо и еще лучше чувствовать себя хорошо как можно скорее и как можно дольше. Критерии реагирования и важность изменений на OMERACT 10.J Ревматол. 2011;38:1720–7.

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 30.

    Кришнан Э., Сокка Т., Хаккинен А., Хуберт Х., Ханнонен П. Нормативные значения индекса инвалидности по опроснику оценки состояния здоровья: сравнительный анализ инвалидности среди населения в целом. Ревмирующий артрит. 2004; 50: 953–60.

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 31.

    Селла Д., Юнт С., Соренсен М., Чарташ Э., Сенгупта Н., Гробер Дж.Валидация функциональной оценки шкалы усталости от терапии хронических заболеваний по сравнению с другими приборами у пациентов с ревматоидным артритом. J Ревматол. 2005; 32:811–9.

    ПабМед Google Scholar

  • 32.

    Кавано А., Гладман Д.Д., Эдвардс С.Дж., Подер А., Лиоте Ф., Берд П. и др. Апремиласт, пероральный ингибитор фосфодиэстеразы 4, связан с долгосрочным (104 недели) улучшением утомляемости у пациентов с псориатическим артритом: объединенные результаты 3 рандомизированных контролируемых исследований фазы III.Энн Реум Дис. 2016; 75 (Приложение 2): 346.

    Google Scholar

  • 33.

    Ware JE Jr, Sherbourne CD. Краткий обзор состояния здоровья MOS, состоящий из 36 пунктов (SF-36). I. Концептуальная основа и выбор элементов. Мед уход. 1992; 30: 473–83.

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 34.

    Бразьер Дж. Э., Харпер Р., Джонс Н. М., О’Кэтейн А., Томас К. Дж., Ашервуд Т. и др. Валидация анкеты обследования состояния здоровья SF-36: новый критерий результатов для первичной медико-санитарной помощи.БМЖ. 1992; 305:160–4.

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 35.

    Herdman M, Gudex C, Lloyd A, Janssen M, Kind P, Parkin D, et al. Разработка и предварительное тестирование новой пятиуровневой версии EQ-5D (EQ-5D-5L). Качество жизни Res. 2011;20:1727–36.

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 36.

    Шоу Дж.В., Джонсон Дж.А., Кунс С.Дж. Оценка состояний здоровья EQ-5D в США: разработка и тестирование модели оценки D1. Мед уход. 2005;43:203–20.

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 37.

    Gilworth G, Chamberlain MA, Harvey A, Woodhouse A, Smith J, Smyth MG, et al. Разработка шкалы нестабильности работы при ревматоидном артрите. Ревмирующий артрит. 2003; 49: 349–54.

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 38.

    Ревицкий Д., Чифальди М.А., Сафихани С., Чен Н., Гангули А. Реагирование и минимальное важное различие шкалы ревматоидного артрита и нестабильности работы (RA-WIS). Энн Реум Дис. 2013;72:A867.

    Артикул Google Scholar

  • 39.

    Ара Р., Брейзер Дж. Разработка алгоритма преобразования восьми средних показателей измерения SF-36 в средний показатель предпочтений EQ-5D из опубликованных исследований (где данные на уровне пациентов недоступны).Цените здоровье. 2008; 11:1131–43.

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 40.

    Ара Р., Брейзер Дж. Прогнозирование индекса на основе предпочтений в краткой форме 6D с использованием восьми средних показателей здоровья в краткой форме 36: оценка полезностей, связанных со здоровьем, на основе предпочтений, когда данные на уровне пациентов недоступны. Цените здоровье. 2009;12:346–53.

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 41.

    Сивек Дж., Ньюман Д.Х. Представляем медицину в цифрах: сотрудничество группы NNT и AFP. Ам семейный врач. 2015;91:434–5.

    ПабМед Google Scholar

  • 42.

    Breedveld FC, Han C, Bala M, van der Heijde D, Baker D, Kavanaugh AF, et al. Связь между исходным рентгенологическим повреждением и улучшением физической функции после лечения пациентов с ревматоидным артритом. Энн Реум Дис. 2005; 64:52–5.

    КАС Статья пабмед Google Scholar

  • 43.

    Wolfe F, Michaud K. Предсказание депрессии при ревматоидном артрите: важность сигнала степени боли и усталости, а также сопутствующая патология. Ревмирующий артрит. 2009; 61: 667–73.

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 44.

    Lacaille D, White MA, Backman CL, Gignac MA. Проблемы, возникающие на работе из-за воспалительного артрита: новые идеи, полученные благодаря пониманию точки зрения пациентов. Ревмирующий артрит. 2007; 57: 1269–79.

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 45.

    Reilly MC, Zbrozek AS, Dukes EM. Валидность и воспроизводимость инструмента оценки производительности труда и активности. Фармакоэкономика. 1993; 4: 353–65.

    КАС Статья пабмед Google Scholar

  • 46.

    Walter MJM, Kuijper TM, Hazes JMW, Weel AE, Luime JJ. Утомляемость у пациентов с ревматоидным артритом, получающих интенсивное лечение и жесткий контроль, возникает часто и постоянно: проспективное исследование. Ревматол Интерн.2018; 38: 1643–50.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 47.

    ван Стенберген Х.В., Цонака Р., Хейзинга Т.В., Боонен А., ван дер Хельм-ван Мил А.Х. Усталость при ревматоидном артрите; постоянная проблема: большое лонгитюдное исследование. РМД открыт. 2015;1:e000041.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 48.

    Николаус С., Боде С., Таал Э., ван де Лаар М.А.Усталость и факторы, связанные с усталостью при ревматоидном артрите: систематический обзор. Res помощи артрита (Hoboken). 2013;65:1128–46.

    Артикул Google Scholar

  • Детский туберкулез | Медицинский журнал последипломного образования

    Туберкулез у детей должен быть в первую очередь связан с профилактикой. По большому счету в развитых странах это так и заболеваемость туберкулезом у детей (то есть до 16 лет) невелика. 1 Ребенок с туберкулезом – это возможность проанализировать недостатки системы профилактики. Стратегии профилактики заболеваний (в порядке убывания важности):

    1. Выявление и лечение инфекционных случаев.

    2. Отслеживание контактов и лечение неинфекционных заболеваний и латентной инфекции.

    3. Вакцинация БЦЖ.

    Естественная история нелеченого туберкулеза была хорошо описана в медицинской литературе в долечебную эпоху, 2, 3 , и это особенность нашего литературного прошлого, так что любой, кто кашляет в исторической драме можно с уверенностью диагностировать неизлечимую форму туберкулеза.

    ЕСТЕСТВЕННАЯ ИСТОРИЯ И ЭПИДЕМИОЛОГИЯ

    Анализ детского туберкулеза важен для эпидемиологических целей. Нормальное естественное течение инфекционного заболевания от контакта до заражения и заболевания часто приостанавливается при туберкулезе, поэтому существует множество инфицированных людей, которые содержат бактерии и не имеют симптомов. Это сдерживание может не сработать, что часто приводит к заболеванию через много лет после первичного заражения. Различить заболевание, возникающее в результате первичной инфекции, и реактивацию дремлющего туберкулеза сложно, поэтому больной с заболеванием может быть инфицирован в любой момент своей жизни.Туберкулез у молодых, таким образом, дает представление о степени недавнего распространения среди населения.

    Приблизительная шкала времени развития различных проявлений туберкулеза приведена в таблице 1. Дети имеют более высокий риск перехода от инфекции к заболеванию, чем взрослые (рис. 1), а также имеют более высокий риск развития диссеминированного заболевания (милиарного и менингеального ). 4 Причина этого связана с качественной и количественной незрелостью иммунной системы. 5 Снижение хемотаксиса, активации и представления антигена макрофагами, а также снижение специфичности созревания Т-клеток и специфического ответа были зарегистрированы у младенцев раннего возраста — все эти факторы могут предрасполагать к распространению туберкулеза в организме. Это увеличение риска является основанием для лечения латентной инфекции (или химиопрофилактики) у детей, но не у взрослых.

    Таблица 1

    График развития туберкулеза

    Рисунок 1

    На графике показаны пациенты с нормальной туберкулиновой реакцией, которые наблюдались для оценки последующего риска развития туберкулеза (данные взяты из исследования, проведенного в Пуэрто-Рико 14 ).

    В целом постпервичная болезнь с полостями легких является инфекционной формой заболевания и наблюдается у взрослых и иногда у подростков. Туберкулез у детей обычно бывает первичным и малобактериальным. Поэтому передача туберкулеза даже при близких контактах маловероятна. Однако рекомендация для госпитализированных детей состоит в том, чтобы держать их в изоляции, и особенно держать их посетителей изолированными от других пациентов, поскольку недиагностированный родственник может быть источником заболевания и риском заражения. 6

    ДИАГНОСТИКА

    Основная проблема при диагностике туберкулеза заключается в том, чтобы думать о нем в первую очередь. Это не так уж сложно, если есть история контактов и пациент из зоны высокого риска или этнической группы. При отсутствии этих факторов диагноз часто запаздывает. В одном отчете о случаях из трех пациентов с диссеминированным туберкулезом двое были белыми детьми, у которых у исходного случая (матери и тети) были недиагностированные респираторные симптомы в течение нескольких месяцев до того, как диагноз был поставлен ребенку. 7 В 2001 году в школе Краун-Хиллз в Лестере была зарегистрирована самая крупная вспышка туберкулеза в школах Великобритании. Исходным случаем был белый ребенок 13 лет, у которого в течение почти года были симптомы астмы (личное наблюдение).

    Туберкулез может проявляться практически в любом органе с таким разнообразием симптомов, что он находится в дифференциальной диагностике большинства проявлений (но ближе к концу списка). Общие проявления у детей с симптомами:

    Увеличение лимфатических узлов у детей редко бывает вызвано туберкулезом у жителей Великобритании, но заслуживает внимания у иммигрантов из стран с высокой распространенностью.

    Все вышеперечисленные симптомы обычны в педиатрической практике, но при туберкулезе они обычно проявляются постепенно в течение более трех недель, имеют непрекращающийся характер и нарастают по степени тяжести. Наличие в анамнезе контакта с туберкулезом или родственника с хроническим продуктивным кашлем полезно, но не всегда.

    После возникновения подозрения основой диагностики остается рентгенография органов грудной клетки и туберкулиновая проба (см. ниже). Посев мокроты редко бывает положительным, но это важный фактор для прогнозирования инфекционности, лекарственной устойчивости и в эпидемиологических целях.Прямое тестирование мокроты с использованием методов полимеразной цепной реакции не оправдало надежд 8 , но как только микроорганизм был выделен с использованием обычной культуры (2–3 недели жидкой культуры или 4–6 недель твердой среды), можно типировать штамм и идентифицировать очень быстро известны гены устойчивости к антибиотикам. 9 Для большинства клинических ситуаций это еще слишком долго, чтобы повлиять на начальное лечение, если только мазок мокроты не будет положительным.

    Клиническая практика различается по степени агрессивности погони за положительной культурой.Следует учитывать следующие факторы:

    1. Коэффициент культивирования составляет всего 50% даже в оптимальных условиях. 10

    2. Лучшее восстановление после нескольких желудочных аспиратов по сравнению с бронхоскопией. 10

    3. Вероятность получения положительного образца от предполагаемого исходного случая.

    4. Клиническое состояние больного.

    5. Риск того, что микроорганизм является нетуберкулезной микобактерией или резистентной.

    6. Необходимость выявления возможной вспышки.

    В целом, растущая распространенность лекарственной устойчивости за последние несколько лет и возможность типирования штаммов для определения путей заражения сделали больший упор на сбор образцов.

    Очевидно, что при внелегочных проявлениях можно получить и культивировать биопсийную ткань. Однако большинство лабораторий избирательно относятся к посеву туберкулеза, поэтому нет ничего необычного в том, что ребенка направляют к врачу с биопсией гранулематозного лимфатического узла, а образец не отправляется на посев.

    Рентгенография грудной клетки

    Ряд признаков может свидетельствовать о туберкулезе, но ни один из них не является диагностическим, за исключением милиарного туберкулеза (рис. 2). Типичный постпервичный кавитационный туберкулез редко встречается у детей, но иногда наблюдается у подростков (рис. 3). Наиболее типичным признаком является внутригрудная (рис. 4) или паратрахеальная (рис. 5) лимфаденопатия. Это может происходить при коллапсе/консолидации (рис. 6), при локальной гиперинфляции из-за частичной бронхиальной обструкции (рис. 7) или, особенно у младенцев, при бронхопневмонии (рис. 8).Кроме того, подростки особенно предрасположены к туберкулезу плевры (рис. 9). В некоторых случаях интерпретация обычной рентгенограммы грудной клетки может быть затруднена, и компьютерная томограмма с контрастом может помочь решить, действительно ли присутствуют увеличенные узлы, и может быть доказана, даже если рентгенограмма грудной клетки нормальна. 11 Дифференциальный диагноз прикорневого/паратрахеального увеличения у детей в основном проводится между другими инфекционными причинами (например, микоплазмой) и неопластическими изменениями (Т-клеточная лимфома, нейробластома), саркоидоз чрезвычайно редко встречается в детстве.В большинстве случаев не возникает путаницы из-за клинического контекста, но иногда необходимы дальнейшие исследования или пробная противотуберкулезная терапия.

    Рисунок 2

    Милиарный туберкулез: легочные поля усеяны мелкими затемнениями одинакового размера.

    Рисунок 3

    Постпервичный туберкулез: правая верхняя доля очень аномальна с областями коллапса/консолидации и множественными рентгенопрозрачными полостями. У этого 15-летнего пациента был положительный мазок.

    Рисунок 4

    Туберкулез ворот легкого: в левых воротах легкого имеется заметный узел.

    Рисунок 5

    Туберкулез паратрахеи: опухоль правой паратрахеи, нормальное расстояние между трахеей и правым легким составляет около 1 см.

    Рисунок 6

    Коллапс/консолидация: имеется большое образование правого прикорня с коллапсом консолидации латерального сегмента правой средней доли.Также имеется небольшой правосторонний плеврит.

    Рисунок 7

    Частичная бронхиальная обструкция: имеется большое образование правых корней и верхнего средостения с затемнением в правой верхней зоне. Трахея и главные бронхи деформированы, имеется гиперинфляция правой нижней зоны.

    Рисунок 8

    Туберкулезная бронхопневмония: широко распространенное пятнистое затенение воздушного пространства; ребенок интубирован.

    Рисунок 9

    Туберкулез плевры: имеется большой левый плевральный выпот с некоторым смещением средостения.

    ТУБЕРКУЛИНОВЫЕ ТЕСТЫ

    Туберкулиновая проба не идеальна и, как и большинство клинических тестов, должна интерпретироваться в контексте.

    Тест измеряет кожную реакцию на внутрикожное очищенное белковое производное. Обычными методами введения в этой стране являются пробы Хефа и Манту со 2-й степенью Хефа, эквивалентной 5 мм индурации из 5 туберкулиновых единиц (ТЕ) Манту. 12 Номенклатура проб Манту несколько сбивает с толку. Термины 1 на 1000 и 1 на 10 000 (для 100 и 10 ТЕ/мл соответственно) лучше избегать. Стандартный тест составляет 0,1 мл 100 ТЕ/мл (то есть 10 ТЕ), но в ситуациях, когда возможна сильная реакция, дается 1 ТЕ. В США 5 TU является стандартной крепостью. Отсечка для положительного теста также варьируется, и руководство США дает критический размер 5, 10 или 15 мм в зависимости от степени риска. 13 При измерении через 48–72 часа регистрируется диаметр уплотнения, а не степень эритемы.Это делается пальпацией (и при необходимости пометкой края шариковой ручкой) и измерением в двух плоскостях под прямым углом. Чем больше результат Манту, тем больше вероятность того, что у пациента уже есть или разовьется туберкулез. 14 При более низких уровнях реакции трудно отличить туберкулёзную инфекцию от «нормальной», поэтому неудивительно, что существуют различия в дозах туберкулина и рекомендуемых пороговых значениях. Это особенно актуально при распространении нетуберкулезной микобактериальной инфекции (включая вакцинацию БЦЖ).Хотя есть предположение, что небольшие реакции на пробу Манту могут быть защитными, 15 лучше всего рассматривать пробу Манту как показатель риска заболевания, а не свидетельство наличия иммунитета. Моя собственная практика состоит в том, чтобы использовать 10 ТЕ в качестве стандарта, но использовать 1 ТЕ с отсечкой 5 мм после БЦЖ (что в местном населении, с которым я работаю, включает большинство пациентов). Было показано, что это дает достаточную дифференциацию туберкулезного заболевания 16 и приемлемо низкий уровень ложноотрицательных ответов 17

    Перечень причин ложноположительных и ложноотрицательных реакций Манту приведен в таблице 2.Из-за трудностей интерпретации туберкулиновых тестов существует значительный интерес к поиску более специфического теста на туберкулезную инфекцию. Тесты с использованием лимфоцитов периферической крови дали обнадеживающие результаты. 18 Лимфоциты подвергаются воздействию туберкулезного антигена, и у инфицированных лиц компетентные Т-клетки продуцируют интерферон-γ, который можно измерить. Тест может отличить туберкулез от БЦЖ и может вернуться к отрицательному результату после адекватного лечения. Однако из-за сложности и дороговизны этого и подобных тестов они вряд ли полностью заменят туберкулиновую кожную пробу.

    Стол 2

    Интерпретация туберкулиновых проб

    ЛЕЧЕНИЕ

    Список противотуберкулезных препаратов включает изониазид (H), рифампицин (R), этамбутол (E) и пиразинамид (Z) в качестве препаратов первого ряда, а также ципрофлоксицин, кларитромицин, циклосерин, парааминосалицилат (ПАС), протионамид , стрептомицин (или амикацин) в качестве второй линии. Примечания по препаратам первого ряда приведены в таблице 3.

    Стол 3

    Противотуберкулезные препараты

    Было проведено множество исследований лечения, но относительно мало исследований у детей. Тем не менее, большая часть работы у взрослых, вероятно, применима к детям с соответствующими изменениями дозировки и мерами предосторожности. Шестимесячный курс лечения достаточен для легочного туберкулеза 19 и, возможно, для локализованного внелегочного заболевания, при условии хорошего соблюдения режима лечения, но все пациенты, получающие противотуберкулезное лечение, должны находиться под наблюдением врача, имеющего опыт лечения туберкулеза. 20 Лечение тремя препаратами H 6 R 6 Z 2 (цифры указывают продолжительность лечения в месяцах) или H 6 R 6 E 2 является стандартным, если риск лекарственной устойчивости низкий но четыре или более препаратов показаны с индивидуальной схемой, если она высока. 21 Лечение туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью выходит за рамки данной статьи, но принципы остаются теми же; лечение адекватным количеством препаратов, к которым чувствителен организм, обеспечение соблюдения режима лечения, мониторинг осложнений и профилактика перекрестной инфекции.

    Существует множество схем лечения латентных инфекций (также называемых химиопрофилактикой). В Великобритании лечение рекомендуется бессимптомным детям в возрасте до 16 лет с положительной туберкулиновой пробой. 21 В США возрастной ценз составляет 35 лет. 22 Девять месяцев лечения изониазидом эффективны 23 , но ведется поиск более коротких схем для улучшения соблюдения режима лечения. Шесть месяцев изониазида имеют более высокую частоту рецидивов, а два месяца пиразинамида / рифампицина эффективны, но были сообщения о токсичности для печени. 24 В Великобритании рекомендуется рифампицин и изониазид в течение трех месяцев. Хотя нет рандомизированных исследований эффективности, он кажется безопасным, 25 , и имеется большой опыт применения обоих препаратов. Пиридоксин для противодействия периферической нейропатии изониазида не требуется, за исключением случаев, когда ребенок недоедает, недоношен или находится на грудном вскармливании. Учитывая длительный характер лечения и важность соблюдения режима лечения, чем меньше назначено лекарств, тем лучше.

    Побочные реакции на лекарства (наиболее серьезная печеночная недостаточность) у детей встречаются редко.Умеренное повышение уровня трансаминаз не является редкостью, но значительная гепатотоксичность более вероятна у тех, кто недоедает или серьезно болен на момент постановки диагноза. Другая группа детей, подверженных риску, — это те, кто одновременно принимает лекарства, чаще всего противосудорожные препараты. Сообщаемые в литературе для взрослых случаи развития печеночной недостаточности обычно сопровождались нераспознанными симптомами в течение некоторого времени, 26 , и при ранней диагностике симптомы улучшаются после прекращения приема лекарств. Моя личная практика заключается в том, чтобы не проверять функцию печени рутинно до или во время лечения, если только пациент не входит в группу высокого риска.Однако пациентов и родителей следует предупредить о возможных побочных эффектах и ​​дать контактные телефоны противотуберкулезной службы на случай, если они будут обеспокоены. Возможно, удивительно, что этой поддержкой редко злоупотребляют. Введение препаратов по одному в низкой дозе и повышение при тщательном наблюдении может быть необходимо, если высок риск гепатотоксичности.

    КОМБИНИРОВАННЫЙ ТУБЕРКУЛЕЗ/ВИЧ-ИНФЕКЦИЯ

    Туберкулез и ВИЧ синергичны, репликация каждого усиливается другим.Коинфекция представляет собой огромную проблему в большинстве развивающихся стран, особенно в странах Африки к югу от Сахары. В Соединенном Королевстве совпадение невелико, в основном оно наблюдается у наркоманов и иммигрантов из районов с высокой распространенностью. Последние обеспечивают большинство случаев в детской возрастной группе. Ведение этих случаев является узкоспециализированным и широко освещается в других источниках. 27

    Ключевые моменты:

    1. Как и в случае с туберкулезом у ВИЧ-отрицательных пациентов, большинство данных о лечении относятся к взрослым, но результаты в целом применимы к детям.

    2. Дифференциальный диагноз туберкулеза с ВИЧ гораздо шире, включая оппортунистические инфекции, в том числе нетуберкулезные микобактерии.

    3. Лекарственные взаимодействия между рифампицином и ингибиторами протеазы и ненуклеозидными ингибиторами обратной транскриптазы неизбежны, и при использовании этих препаратов может потребоваться альтернативная противотуберкулезная терапия.

    4. Лечение туберкулеза стандартной продолжительности обычно адекватно.

    5. Парадоксальное ухудшение на фоне лечения не редкость, поскольку иммунный ответ восстанавливается.

    СОБЛЮДЕНИЕ ЛЕЧЕНИЯ

    Большинство людей, прошедших недельный курс антибиотиков, не смогут его пройти. Обеспечение разумного соблюдения 3–6-месячного курса лечения является серьезной проблемой, особенно когда пациент не проявляет симптомов в течение большей части этого времени. Существует несколько способов оценки соблюдения режима лечения, включая сбор анамнеза у ребенка.Дети в возрасте 5 лет и старше могут отвечать на такие вопросы, как «принимаете ли вы лекарства каждый день» и «какого цвета лекарства, которые вы принимаете». Младшие дети часто могут указывать ответы на более наводящие вопросы. Ответы можно сопоставить с ответами родителей, чтобы оценить последовательность. В целом, дети до 10 лет стараются отвечать прямо и правдиво, в то время как подростки чаще оценивают значение вопроса, прежде чем сформулировать ответ.

    Проверка мочи на красный цвет рифампицина при каждом посещении клиники является стандартной практикой (рис. 10).Однако цвет исчезает через несколько часов, что может быть проблемой для дневных клиник. Кроме того, если слишком много внимания уделяется анализу мочи, пациенты, не соблюдающие режим, могут принимать лекарства только в дни приема.

    Рисунок 10

    Сравнение мочи двух пациентов, принимавших и не принимавших рифампицин.

    Визиты на дом, объявленные или необъявленные, медсестрами по туберкулезу полезны для оценки ситуации на дому и вынесения суждения о вероятности отказа от лечения.Очень важно хорошее общение между командой больницы, врачом общей практики и медсестрами по туберкулезу. Также можно подсчитывать количество таблеток и проверять рецептурные записи.

    Хитрость в обеспечении соблюдения рекомендаций заключается в том, чтобы заставить семью и ребенка поверить в то, что прием лекарства — самый простой вариант. Для большинства родителей достаточно понимания характера лечения и осведомленности о наблюдении. Тем не менее, для некоторых семей их хаотичный образ жизни или враждебность к властям делают необходимым лечение под непосредственным наблюдением (DOT).Существуют утвержденные схемы лечения три раза в неделю, которые могут контролироваться школьными, окружными, противотуберкулезными и педиатрическими службами по месту жительства. 28 Местная практика заключается в том, чтобы начинать лечение с помощью DOT только в том случае, если есть очевидные опасения или прошлые случаи невыполнения обязательств, и переходить на DOT, если на более позднем этапе обнаруживается несоблюдение. Это отчасти прагматично, поскольку DOT очень трудоемок.

    БКГ

    Уже несколько лет ведутся споры об эффективности вакцинации БЦЖ.Эффективность в разных исследованиях колеблется от нуля до 80%. 29 Частично из-за этого политика БЦЖ в разных странах варьируется между отсутствием иммунизации (США), иммунизацией высокого риска при рождении со всеобщей иммунизацией в 13 лет (Великобритания), всеобщей неонатальной иммунизацией (Индийский субконтинент и большая часть Африки) и многократной иммунизацией (большая часть Восточной Европы).

    БЦЖ кажется более эффективным в испытаниях в умеренных, а не в тропических регионах. Была предложена теория, объясняющая изменчивость БЦЖ, основанная на иммунитете, генерируемом естественными почвенными микобактериями, более распространенными в тропиках, что может быть достаточно, чтобы свести на нет любой дополнительный эффект БЦЖ. 30

    Сторонники БЦЖ укажут на тот факт, что она чрезвычайно безопасна 31 и оказывает определенное влияние на снижение диссеминированных (и опасных для жизни) форм туберкулеза 32 , даже если общие результаты неубедительны. Противники возражают, что польза от БЦЖ незначительна, и она увеличивает реакцию на туберкулиновые тесты 33 , что затрудняет выявление инфицированных людей. Универсальная неонатальная БЦЖ также потенциально опасна для тех редких новорожденных с тяжелым комбинированным иммунодефицитом или другими врожденными Т-клеточными аномалиями.Иммунизация в возрасте 12–13 лет в Великобритании является продолжением протокола национальных испытаний БЦЖ 50-летней давности и нелогична, учитывая повышенную восприимчивость детей раннего возраста. Если необходимо ввести БЦЖ, имеет смысл сделать это вскоре после рождения и защитить группу, подверженную наибольшему риску диссеминированного заболевания. Продолжительность времени, в течение которого защищает БЦЖ, неизвестна. В исследовании Совета по медицинским исследованиям было отмечено снижение эффективности БЦЖ с 80% до 59% через 10–15 лет, 29 , но в долгосрочной перспективе достоверных данных нет.

    Искали альтернативы БЦЖ, пока безрезультатно, но секвенирование генома туберкулеза открывает возможности для ДНК и субъединичных вакцин. 34 Не следует недооценивать трудности разработки и тестирования антигенов или бактерий, которые обеспечат иммунитет против факультативного внутриклеточного организма, способного оставаться бездействующим в течение многих лет.

    ЗАКЛЮЧЕНИЕ

    Туберкулез встречается в Соединенном Королевстве гораздо реже, чем в прошлых поколениях, и уровень заболеваемости среди детей низок.Однако нет места для самоуспокоенности, поскольку существуют угрозы в виде высоких показателей коинфекции ВИЧ в большинстве развивающихся стран. Резистентность к лекарственным препаратам, главным образом в результате неадекватного лечения, также растет. Кроме того, диагностика клинического туберкулеза затруднена при низкой заболеваемости. Эпидемия ВИЧ привела к проведению обширных исследований иммунного ответа человека на заболевание, которые потенциально могут открыть новые возможности для профилактики и лечения туберкулеза.Секвенирование генома туберкулеза может в конечном итоге привести к лучшему пониманию того, как и почему организм вызывает заболевание, и повысить вероятность разработки более эффективной вакцины, чем БЦЖ. Борьба с туберкулезом по-прежнему основывается на высоком уровне подозрительности при постановке диагноза и мотивации отдельных лиц, работающих в команде, для обеспечения соблюдения режима лечения.

    Дальнейшее чтение
    • Rose AMC, Watson JM, Graham C, и др. .Туберкулез в конце 20 века в Англии и Уэльсе: результаты национального обследования 1998 г.

    • Кампманн Б. Янг Д. Детский туберкулез: достижения в области иммунопатогенеза, лечения и профилактики.

      Curr Opin Inf Dis1998;11:331–5.

    • Лалвани А., Патан А.А., МакШейн Х., и др. . Быстрое выявление инфекции Mycobacterium tuberculosis путем подсчета антигенспецифических Т-клеток.

      Am J Respir Crit Care Med2001;163:824–8.

    • Объединенный комитет по туберкулезу Британского торакального общества. Химиотерапия и лечение туберкулеза в Соединенном Королевстве: рекомендации 1998 г.

    • Центры по контролю и профилактике заболеваний. Таргетное туберкулиновое тестирование и лечение латентной туберкулезной инфекции.

      MMWR Morb Mortal Wkly Rep2000;49(RR6):1–55.

    Веб-сайты

    • http://www.cdc. gov/nchstp/tb>

    Это подразделение правительства США по ликвидации туберкулеза, которое имеет множество руководств и обновлений. Также связанный http://www.cdc.gov/mmwr/, который дает доступ к Еженедельному отчету о заболеваемости и смертности.

    • http://www.who.int/gtb/

    Веб-сайт Всемирной организации здравоохранения о туберкулезе.

    ПОВЕРНИТЕЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ И ОТВЕТЫ

    Q1. Чем отличается спектр детского туберкулеза от взрослого?

    • Более высокий риск диссеминированного заболевания

    • Более высокий риск плеврального выпота у подростков

    • Меньший риск кавитационной (инфекционной) болезни

    • 17 9. Почему лечение латентной туберкулезной инфекции подходит ребенку, а не взрослому?

      • Риск прогрессирования заболевания в ближайшем будущем выше

      • Их ожидаемая продолжительность жизни выше, поэтому пожизненный риск заболевания выше

      • Риск диссеминированного заболевания (и, следовательно, заболеваемость/смертность) выше

      Q3. Каковы причины ложноотрицательной туберкулиновой пробы?

        • Неисправная подготовка туберкулина

        • неисправная введение (экстравазация, подкожная инъекция)

        • неисправное чтение (неправильное время, использование эритемы не устранение)

        • Иммунодепрессия

        Q4. Вы видите ребенка в клинике с положительной реакцией Манту и отклонениями от нормы на рентгенограмме грудной клетки.Какие факторы заставят вас принять ребенка для проведения бактериологической диагностики вместо того, чтобы тут же начать лечение?

          • Отсутствие известного исходного корпуса

          • Паренхимальная болезнь легких или кавитация

          • Недавний иммигрант из зоны высокого риска для лекарственной устойчивости

          • Известен ВИЧ-положительный

          • Часть кластера корпусов туберкулеза

          Q5. Какие методы можно использовать для оценки приверженности лечению?

          ССЫЛКИ

          1. Роуз АМС , Уотсон Дж.М., Грэм С., и др. .Туберкулез в конце 20-го века в Англии и Уэльсе: результаты национального обследования в 1998 г. Thorax2001;56:173–179.

          2. Миллер FJW . Туберкулез у детей. Эдинбург: Черчилль Ливингстон, 1982: глава 1.

          3. Майерс Дж. А. , Бирман Дж. Э., Диксон Х. Г. Естественное течение туберкулеза в организме человека. V. Прогноз у детей с туберкулинореакцией от рождения до 5 лет.Am Rev Respir Dis1963; 87: 354–69.

          4. Бивен PW . Анализ туберкулезной инфекции от рождения до старости: ее связь с клинической формой туберкулеза и смертностью от туберкулеза. Болезни грудной клетки 1950; 17: 280–92.

          5. Smith S , Jacobs RF, Wilson CB. Иммунобиология детского туберкулеза: взгляд на онтогенез клеточного иммунитета. J Pediatr1997;131:16–26.

          6. Джордж Р.Х. , Галли П.Р., Гилл О.Н., и др. . Вспышка туберкулеза в детской больнице. J Hosp Infect1986;8:129–42.

          7. Walia R , Hoskyns W. Туберкулезный менингит у детей: проблема, которую необходимо эффективно решать путем тщательного отслеживания контактов. Eur J Pediatr2000;159:535–8.

          8. Smith KC , Starke JR, Eisenach K, и др. .Выявление микобактерий туберкулеза в клинических материалах от детей методом полимеразной цепной реакции. Педиатрия1996;97:155–60.

          9. Дробневский Ф. А. , Позняк А.Л. Молекулярная диагностика, выявление лекарственной устойчивости и эпидемиология туберкулеза. Br J Hosp Med1996;56:204–8.

          10. Abadco DL , Steiner P. Промывание желудка лучше, чем бронхоальвеолярный лаваж для выделения микобактерий туберкулеза при туберкулезе легких у детей.Pediatr Infect Dis J1992;11:735–8.

          11. Delacourt C , Mani TM, Bonnerot V, и др. . Компьютерная томография с нормальной рентгенограммой органов грудной клетки при туберкулезной инфекции. Arch Dis Child1993;69:430–2.

          12. Британская противотуберкулезная ассоциация . Единый туберкулиновый тест для эпидемиологического применения: сравнение четырех тестов. Туберкул 1958; 39: 76–83.

          13. Американское торакальное общество . Диагностические стандарты и классификация туберкулеза. Am Rev Respir Dis1990; 142: 725–35.

          14. Comstock GW , Livesay VT, Woolpert SF. Прогноз положительной туберкулиновой реакции в детском и подростковом возрасте. Am J Epidemiol1974;99:131–8.

          15. Fine PEM , Sterne JAC, Ponnighaus JM, и др. . Гиперчувствительность замедленного типа, микобактериальные вакцины и протективный иммунитет.Ланцет1994;344:1245–9.

          16. Karalliedde S , Katugaha LP, Uragoda CG. Туберкулиновая реакция детей из Шри-Ланки после вакцинации БЦЖ при рождении. Туберкул 1987; 68: 33–8.

          17. Hoskyns EW , Simpson H, Monk P. Использование 1 туберкулиновой единицы (1TU) теста Манту для оценки туберкулезной инфекции у детей после неонатальной вакцинации БЦЖ. Thorax1994;49:1006–9.

          18. Лалвани А. , Патан А. А., МакШейн Х., и др. . Быстрое выявление инфекции Mycobacterium tuberculosis путем подсчета антигенспецифических Т-клеток. Am J Respir Crit Care Med2001;163:824–8.

          19. Snider DE , Graczyk J, Bek E, и др. . Курировал шестимесячное лечение вновь диагностированного туберкулеза легких с использованием изониазида, рифампицина и пиразинамида со стрептомицином и без него.Am Rev Respir Dis1984;130:1091–4.

          20. Объединенный комитет по туберкулезу Британского торакального общества . Контроль и профилактика туберкулеза в Соединенном Королевстве: свод правил 2000 г. Thorax2000;55:887–901.

          21. Объединенный комитет по туберкулезу Британского торакального общества . Химиотерапия и лечение туберкулеза в Соединенном Королевстве: рекомендации 1998 г.Thorax1998;53:536–48.

          22. Центры по контролю и профилактике заболеваний Целевое туберкулиновое тестирование и лечение латентной туберкулезной инфекции. MMWR Morb Mortal Wkly Rep2000;49(RR6):1–55.

          23. Комсток GW . Сколько изониазида необходимо для профилактики ТБ среди иммунокомпетентных взрослых? Int J Tuberc Lung Dis1999;3:847–50.

          24. Центры по контролю и профилактике заболеваний .Обновление: смертельные и тяжелые поражения печени, связанные с рифампицином и пиразинамидом при латентной туберкулезной инфекции, и пересмотр рекомендаций Американского торакального общества/CDC — США, 2001 г. MMWR Morb Mortal Wkly Rep2001;50(34):733–5.

          25. Ормерод ЛП . Профилактическая химиотерапия рифампицином и изониазидом при туберкулезе. Arch Dis Child1998;78:169–71.

          26. Митчелл И. , Вендон Дж., Фитт С., и др. .Противотуберкулезная терапия и острая печеночная недостаточность. Ланцет1995;345:555–6.

          27. Центры по контролю и профилактике заболеваний . Разработка новых вакцин против туберкулеза. MMWR Morb Mortal Wkly Rep1998;47(RR-13).

          28. Сингапурская противотуберкулезная служба и Британский совет медицинских исследований . Клинические испытания трех 6-месячных режимов химиотерапии с перерывами в фазе продолжения лечения туберкулеза легких.Am Rev Respir Dis1985; 132: 374–8.

          29. Медицинский исследовательский совет . Комитет по клиническим испытаниям противотуберкулезных вакцин. Вакцины БЦЖ и палочки полевки в профилактике туберкулеза в подростковом и раннем взрослом возрасте. Bull World Health Organ1972;46:371–85.

          30. Springett VH , Sutherland I. Повторное изучение различий в эффективности вакцинации БЦЖ против туберкулеза в клинических испытаниях.Tuber Lung Dis1994;75:227–33.

          31. Lotte A , Wasz-Hockert O, Poisson N, и др. . Второе исследование Международного союза по борьбе с туберкулезом и болезнями легких, посвященное осложнениям, вызванным внутрикожной вакцинацией БЦЖ. Bull Int Union Tuberc1988; 63:47–59.

          32. Colditz GA , Brewer TF, Berkley CS, и др. . Эффективность вакцины БЦЖ в профилактике туберкулеза: метаанализ опубликованной литературы.JAMA1994;271:698–702.

          33. Гульд Дж. , Ваалер Х., Сундаресан Т.К., и др. . Продолжительность индуцированной БЦЖ туберкулиновой чувствительности у детей и ее неактуальность для ревакцинации: результаты двух 5-летних проспективных исследований. Bull World Health Organ1968;39:829–36.

          34. Центры по контролю и профилактике заболеваний . Профилактика и лечение туберкулеза у больных, инфицированных вирусом иммунодефицита человека: принципы терапии и пересмотренные рекомендации.MMWR Morb Mortal Wkly Rep1998; 47 (RR-20).

          Новый взгляд на активацию транскетолазы путем связывания кофактора идентифицирует две местные субпопуляции видов

          Новый анализ связывания кофактора на основе тушения флуоресценции Наш дальнейший анализ показал, что TPP имеет две сильные полосы поглощения при 233 нм и 266 нм и сам слабо флуоресцирует при возбуждении на любой из этих длин волн.Поэтому было принято решение возбуждать образцы в нижней полосе поглощения (λ

          ex  = 240 нм; λ em  = 330 нм). Как сообщалось ранее для возбуждения на длине волны 280 нм, мы наблюдали, что флуоресценция транскетолазы гасилась при связывании TPP после возбуждения на длине волны 240 нм (рис. S1, дополнительная информация). Сгенерированный сигнал был скорректирован с учетом эффекта внутреннего фильтра (IFE), который возникает из-за сильного поглощения части падающего света свободным лигандом (TPP) до того, как он сможет возбудить образец («первичный» IFE), и который, следовательно, снижает наблюдается флуоресценция.Поправочный коэффициент определяли эмпирически по интенсивности флуоресценции свободного TPP в буфере 50 мМ Tris-HCl, как описано MacDonald et al. . 33 (рис. S2, дополнительная информация).

          Характеристика связывания TPP с транскетолазой дикого типа

          E. coli

          С момента первоначального обнаружения связывания TPP в отсутствие двухвалентных катионов 26,27 сообщений о связанных параметрах связывания не поступало. Поэтому мы определили их, в дополнение к проведению первого всестороннего исследования связывания TPP в больших диапазонах концентраций кофактора, для очищенного E. coli транскетолазы.

          Было обнаружено, что форма изотермы связывания TPP с ТК зависит от [Mg 2+ ] и указывает на сдвиг кооперативности связывания в сторону более высоких значений [Mg 2+ ] (рис. 2a–d). Было обнаружено, что взвешенная сумма двух функций Хилла (функция двойного Хилла; раздел 3, дополнительная информация), описывающая два независимых события связывания, оба кооперативных по своей природе, значительно лучше соответствует изотермам связывания TPP по сравнению со стандартным Функция Хилла (рис. 2ai; S3, дополнительная информация) и, таким образом, использовалась для определения параметров связывания TPP при различных [Mg 2+ ] в диапазоне 0–18 мМ.Это определило две константы диссоциации K d(high) и K d(low) , которые были независимы друг от друга, отражая две различные популяции, TK high и TK 9 , как описано ниже. На рисунке 2b представлен пример взвешенного вклада связывания TPP с высоким ТК и низким ТК (пунктирные пурпурные линии), которые в сумме дают общее соответствие двойной функции Хилла (сплошная пурпурная линия) при 9  мМ Mg . 2+ .Чтобы визуализировать и сравнить отдельные функции Хилла, полученные из двойной функции Хилла, которая описывает связывание TPP с TK high (рис. 2c) и TK low (рис. 2d) между 0–18 мМ Mg 2+ , каждый взвешенный вклад был нормализован к единице.

          Рисунок 2

          Экспериментальные данные о связывании 0,05 мг/мл ТК дикого типа с TPP при 0 мМ (черный), 1 мМ (красный), 4,5 (синий), 9 мМ (пурпурный) и 18 мМ (зеленый) Mg 2+ . Точки экспериментальных данных ( и ) во всех [Mg 2+ ] соответствуют двойной функции Хилла; ai) при концентрации 9  мМ Mg 2+ , нанесенные на логарифмическую  × ось и приспособленные к одной функции Хилла (тонкий черный цвет) и двойной функции Хилла (толстый черный цвет), чтобы показать лучшее соответствие последней функции.Также показаны вклады сайтов связывания с высокой (красный) и низкой аффинностью (синий) функции двойного Хилла; ( b ) при 9  мМ Mg 2+ (двойная функция Хилла) с участием сайтов связывания с высоким и низким сродством, показанных пунктирными линиями; нормированные вклады в функции двойного Хилла ( c ) высокоаффинного и ( d ) низкоаффинного сайтов связывания в каждом [Mg 2+ ]. Для справки: данные в ( b d ) были получены из экспериментальных данных и соответствующих подгонок, нанесенных на график ( a ).

          Аффинность связывания TK
          высокая

          Данные по тушению флуоресценции выявили событие высокоаффинного связывания TPP с константой диссоциации, K ; Таблица 1) при 0  мМ Mg 2+ , что согласуется с единственными сопоставимыми значениями, доступными в литературе для транскетолазы E. coli K d   =   29 мкМ и при 8,0,0,0 мкМ мМ Mg 2+ соответственно), которые были получены косвенно из данных кинетической ферментативной активности 34 .

          Таблица 1 Сводка параметров связывания сайта связывания с высокой аффинностью, TK high , при подгонке к функции двойного Хилла.

          Сродство TK high к ТФП заметно улучшилось в присутствии Mg 2+ с 86-кратным уменьшением константы диссоциации при 18  мМ Mg 2+ по сравнению с таковой в отсутствие Mg 2+ (рис. 2; табл. 1). Путем подгонки полученных констант диссоциации к функции Хилла (рис. 3а) константа диссоциации при полном насыщении [Mg 2+ ] была оценена равной 0.93 ± 0,27 мкМ, улучшение в 121 раз по сравнению с отсутствием Mg 2+ . Наибольшее уменьшение K d(high) наблюдалось при низких концентрациях Mg 2+  < 1 мМ, как отмечено Кочетовым и др. . 26 . Зависимость K d(high) от [Mg 2+ ] соответствует функции Хилла с ионов со слегка положительной кооперативностью между двумя сайтами связывания Mg 2+ .Рис. 3 мМ, 9 мМ и 18 мМ Mg 2+ . ( a , b ) константы диссоциации и коэффициенты Хилла сайта связывания с высокой (TK high ) аффинностью соответственно. ( c , d ) — константы диссоциации и коэффициенты Хилла сайта связывания с низкой (TK low ) аффинностью соответственно.Сплошные линии представляют собой количественные, подогнанные графики; пунктирные линии представляют четкие, неопределенные количественно тенденции.

          Кооперативность связывания ТК
          высокая

          В отсутствие Mg 2+ коэффициент Хилла, показатель степени кооперативности, указывает на отрицательную кооперативность между сайтами связывания ТРР ( n высокая 0,69 ± 0,30), что означает, что в отсутствие Mg 2+ связывание первой молекулы ТФП снижает сродство ко второй молекуле ТФП (рис.3б).

          Присутствие ионов Mg 2+ в низких концентрациях, по-видимому, увеличивает кооперативность связывания TPP. Однако при все более высоких значениях [Mg 2+ ] > 4 мМ коэффициент Хилла для связывания TPP смещается от проявления сильной положительной кооперативности с теоретическим общим связыванием двух молекул TPP обратно к отрицательной кооперативности (рис. 3b; Таблица 1).

          Сложная зависимость кооперативности от [Mg 2+ ], таким образом, объясняет, почему ранее не существовало единого мнения, поскольку в каждом из предыдущих исследований использовались разные концентрации Mg 2+ . Тем не менее, коллективный обзор исследований дрожжевой транскетолазы, в котором был опубликован коэффициент Хилла, показал аналогичную тенденцию, хотя и при более низком уровне [Mg 2+ ], учитывая более низкое внутриклеточное свободное [Mg 2+ ] дрожжей по сравнению с E. Coli 35 35 : Сильная положительная кооперативность ( N ≈ 2) при 1 мм мг 2+ 2+ , легкая негативная кооперативность при 2 мм мг 2+ 19 и сильная негативная кооперативность ( N = 0.61) при 3 мМ Mg 2+ 7 .

          Молекулярная основа обращения тренда при [Mg 2+ ] > 4 мМ неясна, но может отражать противоположные эффекты связывания первого и второго ионов Mg 2+ на связывание TPP. В то время как связывание первого иона Mg 2+ может привести к совместному связыванию двух молекул TPP и значительному повышению аффинности, связывание второго Mg 2+ может устранить положительное взаимодействие между первым и вторым сайтами связывания TPP. и, следовательно, ввести отрицательную кооперативность между активными сайтами.Вполне вероятно, что оба сайта связывания TPP заняты даже при высоком [Mg 2+ ], потому что одинаковое максимальное изменение необработанного флуоресцентного сигнала наблюдалось для всех [Mg 2+ ]. Отсюда следует, что при более высоких значениях [Mg 2+ ] кажущиеся константы диссоциации на самом деле могут быть сверткой параметров связывания двух неэквивалентных сайтов. Учитывая чувствительность измерений флуоресценции, можно сконцентрировать точки данных в гораздо меньшем диапазоне при низких концентрациях TPP и выполнить деконволюцию двух отдельных констант диссоциации.

          Обнаружение и характеристика нового вида с низким сродством, TK

          low

          Данные по тушению флуоресценции лучше всего соответствуют взвешенной сумме двух функций Хилла (двойная функция Хилла; раздел 3, дополнительная информация), которые описывают две независимые события связывания нескольких лигандов; один с константой диссоциации с высоким сродством (описан выше) и один с константой диссоциации с низким сродством (рис. 2d; таблица 2). Это событие связывания TPP с низким сродством никогда ранее не было охарактеризовано у E.coli или S. cerevisiae транскетолазы. Поскольку транскетолаза существует как в виде мономера, так и в виде димера, в зависимости от [TPP] и [TK], и если предположить, что формы TK high и TK low уже существуют в виде мономеров, то теоретически возможны три вида димеров: TK высокий -TK высокий , TK низкий -TK низкий и смешанные виды димеров, TK высокий -TK низкий . В этом сценарии относительные популяции TK high и TK low в виде мономеров, гомо- и гетеродимеров до связывания TPP могут потенциально влиять на кажущиеся константы диссоциации и коэффициенты Хилла TK high и TK. младшая субъединицы.Функция двойного Хилла, используемая для подгонки данных, не делала предположений относительно конформационного расположения TK high и TK low , и поэтому полученные параметры связывания представляют собой свертку истинных параметров связывания TK high и TK . low в каждом конформационном расположении. Мы попытались подогнать данные под функцию тройного Хилла, но не удалось разрешить третье событие привязки. Возможно, каждый из мономеров TK high и TK low только самоассоциируется и не образует смешанный димер.Однако разрешение только двух наборов параметров связывания не исключает существования третьего, представляющего виды смешанных димеров, поскольку каждая субъединица в смешанном димере может просто иметь идентичные или почти идентичные параметры связывания с параметрами в пределах одного из гомодимеров.

          Таблица 2 Сводка параметров связывания сайта связывания с низким сродством, TK low , при подгонке к функции двойного Хилла.
          Сродство связывания ТК
          низкое

          Интересно, что добавление Mg 2+ к ТК низкое оказывало противоположный эффект на связывание ТРР по сравнению с ТК высокое .Присутствие Mg 2+ снижало сродство ТК low к ТФП, хотя и в гораздо меньшей степени, с увеличением в 2,4 раза K d(low) as [Mg 2+ ] увеличилась с 0 мМ до 18 мМ (рис. 3c; таблица 2). Хотя константа диссоциации явно увеличивалась с [Mg 2+ ], было трудно определить что-либо, кроме общей тенденции, при подгонке к функции Хилла.

          Кооперативность связывания TK
          low

          Тенденция кооперативности связывания TK low была также обратной относительно TK high .При низком [Mg 2+ ], n низком первоначально уменьшалось до 1 и, следовательно, устраняло кооперативность между активными центрами; выше 2  мМ Mg 2+ n низкое незначительно, но незначительно (рис. 3d; таблица 2). Как правило, кооперативность связывания с TK low была менее кооперативной, чем с TK high , что может указывать на нарушение перекрестных помех и связи между активными сайтами в димере TK low , возможно, из-за нарушения протонной проволоки. .

          Отношение [TK
          high ]:[TK low ] было инвариантным к [Mg 2+ ]

          Подгоняя данные к двойной функции Хилла, мы могли определить отношение связывания TPP к ТК высокий и ТК низкий ( B макс соотношение), что отражало соотношение [ТК высокий ]:[ТК низкий ]. Для ясности отныне % B max(high) будет представлять процент всех ТЗ, которые являются ТЗ high .Доля тушения флуоресценции, связанная с событием высокого сродства, не зависела от [Mg 2+ ] (таблицы 1 и 2). Кроме того, глобальный % B max(high) , полученный из глобальной подгонки всех наборов данных, связывающих TPP, с функцией двойного Хилла с общим параметром B max , составил 33,6 ± 2,9% по всем [Mg 2+ ].

          %B
          max(высокий) был инвариантным по отношению к [TK] и равновесию мономера-димера апоТК

          Данные аналитического ультрацентрифугирования (AUC) показали, что увеличение [ТК] сместило равновесие между мономерной и димерной формами апоТК в сторону димерной апоТК (фиг.4; S4, дополнительная информация). Увеличение [ТК] с 0,05 мг/мл, концентрации ТК в предыдущих анализах связывания, до 0,2 мг/мл увеличило долю исходного димера апоТК с 62,4% до 83,4%. Напротив, когда анализ связывания TPP был повторен при 0,2 мг/мл, %B max(high) составил 32,9 ± 1,5% (рис. 4) по сравнению с 33,6 ± 2,9% при 0,05 мг/мл. мл TK, и, следовательно, %B max(high) был инвариантным как к [TK], так и к результирующему сдвигу в равновесии мономер-димер перед связыванием TPP.Таким образом, относительная популяция TK high и TK low , измеренная в конечных гомодимерных формах, не подвергалась влиянию мономерно-димерного равновесия до связывания TPP, а являлась результатом непосредственно существовавшей ранее популяции TK high . и ТК младшие субъединицы.

          Рисунок 4

          Сравнение образования апо-димера ( a ) в зависимости от [apoTK] и ( b ) связывания TPP при 0,2 мг/мл. ( a ) Изменение коэффициента седиментации, S w,20 , что эквивалентно изменению доли димера (правая ось) при pH 7. 0 как функция [апо-ТК]. Экспериментальные данные подгоняли к взвешенной сумме двух функций димеризации 45 , описывающих двухдимерную систему, состоящую из ТК high — TK high и TK low — TK low , как описано. ( b ) Экспериментальные данные о связывании 0,2 мг/мл ТК дикого типа с TPP при 9 мМ Mg 2+ , соответствующие двойной функции Хилла.

          TK

          high и TK low представляют собой две разные формы транскетолазы

          Сосуществование двух различных форм TK с разным сродством к TPP, но без предшествующих структурных данных, позволяющих предположить, чем они отличаются, побудило нас искать химические изменения с помощью масс-спектрометрии.

          Обнаружение посттрансляционной модификации транскетолазы с помощью масс-спектрометрии

          Жидкостная хроматография с электрораспылением ионизационная масс-спектрометрия (LC-ESI-MS) очищенной транскетолазы дикого типа выявила основные немодифицированные виды транскетолазы с прогнозируемой молекулярной массой 73 035 Da и два виды с более высокой молекулярной массой с меньшей площадью пика (рис. 5а). При еще более высоких молекулярных массах присутствовали другие, еще более мелкие пики, хотя большинство из них не были хорошо разрешены. Пики были приспособлены к сумме нескольких функций Гаусса для определения площади пика и, следовательно, количества немодифицированных видов транскетолазы, TK , немодифицированного , по сравнению с первыми двумя, лучше всего определенными видами с более высокой молекулярной массой, определенными как TK , модифицированный . (я.е. два и три пика вместе взятые). %TK , модифицированный , составил 31,0 ± 1,7%, что сравнимо с %TK high (33,6 ± 2,9%), полученным из глобального % B max(high) (таблицы 1 и что TK low представляет собой вид немодифицированной транскетолазы, тогда как TK high образуется в результате посттрансляционного окисления во время ферментации или очистки. Средняя разница в молекулярной массе между каждым из первых трех пиков транскетолазы составляла 15. 8 Да, эквивалент атома кислорода. Кроме того, чрезмерное окисление сульфеновых кислот приводит к образованию сульфиновых и сульфокислот, каждая из которых приводит к дальнейшему увеличению молекулярной массы на 16  Да за одно окисление.

          Рисунок 5

          Масс-спектры очищенной транскетолазы дикого типа, выраженные в ( a ) отсутствии и ( b ) присутствии 0,005% CHP, добавленного в середине восьмичасовой ферментации, приспособлены к сумма нескольких функций Гаусса. Главный пик (зеленый) соответствует немодифицированной транскетолазе, а следующие два пика (синий и голубой) соответствуют модифицированной транскетолазе.Пики с более высокой молекулярной массой соответствуют неактивным, чрезмерно окисленным ТК. ( c ) Экспериментальные данные по связыванию TPP 0,05 мг/мл ТК дикого типа, выраженные в присутствии (черный) и отсутствии (красный) 0,005% CHP, с 9 мМ Mg 2+ , приспособленные к двойному Функция Хилла. Пунктирные линии представляют вклад от TK high и, следовательно, %B max(high) . ( d ) Данные об активности очищенной 0,067 мг/мл транскетолазы дикого типа; черный: 50 мкМ TPP, 9 мМ Mg 2+ ; красный: 2.4 мМ TPP, 9 мМ Mg 2+ ; синий: ТК дикого типа выражает присутствие 0,005% CHP, с 2,4 мМ TPP, 9 мМ Mg 2+ .

          Одних только данных масс-спектрометрии недостаточно, чтобы категорически исключить ТК , модифицированный , как совокупность однократно окисленных частиц, модифицированных по ряду различных остатков, расположенных рядом с сайтом связывания TPP (например, Met153, Cys157, Met158, Met159, Цис167). Точно так же более окисленные, неактивные виды с пиками наивысшей молекулярной массы потенциально представляют собой комбинацию переокисленных состояний этих остатков.Поэтому мы попытались точно определить модификацию окисления путем повторного анализа ранее опубликованных рентгеновских кристаллических структур.

          Кристаллографические доказательства сульфенилирования по Cys157

          Ранее из данных рентгеноструктурного анализа 9 было показано, что Cys157, расположенный рядом с сайтом связывания TPP, присутствует в необычной форме сульфеновой кислоты, которая должна иметь повышенную молекулярную вес 16 Да относительно немодифицированного цистеина 36 . Более поздняя работа показала, что прямое окисление воздухом in vitro дезактивировало ТК, хотя только в присутствии TPP 36 , и авторы предположили, что кристаллографические данные о сульфенилированном Cys157 могли быть артефактом процесса кристаллизации.Наши данные масс-спектрометрии показали, что на самом деле сульфенилирование Cys157 не было артефактом кристаллизации, а скорее происходило во время экспрессии или очистки фермента. Интересно, что мы обнаружили, что по крайней мере одно из окисленных состояний было более активным, чем немодифицированный ТК, что означает, что инактивированный продукт окисления воздухом наблюдался ранее Mitra et al . 36 , не было TK high , и что два механизма окисления различны, или, возможно, что окисление воздухом привело к снижению активности из-за чрезмерного окисления в одном и том же месте.

          Обнаружение окисления транскетолазы с помощью масс-спектрометрии побудило нас повторно изучить опубликованные карты электронной плотности для определения кристаллической структуры голотранскетолазы E. coli дикого типа (1QGD). В опубликованной структуре Cys157 был сохранен в виде немодифицированного сульфгидрила. Тем не менее, более внимательное изучение карт разности электронной плотности 2F 0 F C и F 0 F C вокруг остатка Cys157 в субъединице A и B на уровне 3σ опущено (рис.6а, б), предполагает наличие значительной электронной плотности, которая не учитывалась в структурной модели. Эту разницу в электронной плотности можно объяснить наличием популяций однократно и дважды окисленного Cys157 с образованием сульфеновой кислоты и сульфиновой кислоты соответственно, что также было обнаружено с помощью LC-ESI-MS.

          Рисунок 6

          2F 0 F C (зеленый) и F 0 F C (оранжевый) карты разницы электронной плотности вокруг остатка Cys157 в субъединице A и B дикого типа E.coli TK (1QGD) на уровне 3σ опускают. Карты 2F 0 F C иллюстрируют подобранную электронную плотность решенной структурной модели. Карты F 0 F C иллюстрируют электронную плотность, которая не учитывалась в структурной модели.

          Cys157 сохраняется во многих бактериях, дрожжах, простейших и растениях, но не у видов животных, таких как Homo sapiens или Mus musculus . Поэтому вполне вероятно, что многие домены жизни активируют транскетолазы посредством окисления Cys157.

          Окислительный стресс во время ферментации увеличился %TK
          модифицированный , %TK высокий и активность фермента

          Влияние увеличения клеточного окислительного стресса на %TK модифицированный , % B 1 и удельную активность исследовали путем добавления 0,005% гидропероксида кумола (ГГП) к клеткам E. coli в середине восьмичасовой ферментации. Данные LC-ESI-MS, TPP-связывания и удельной активности выявили пропорциональное увеличение %TK модифицированного , % B max(high) и активности примерно на 37% (фиг. 5б–г; Таблица 3). Эти данные не только подтверждают, что TK low и TK high эквивалентны TK немодифицированному и TK модифицированному соответственно, но и обеспечивают сильную причинно-следственную связь, при которой более активный TK high формируется как прямой ответ. к окислительному стрессу во время ферментации.

          Таблица 3 Сводка %B max(high) , % TK модифицированный и удельная активность транскетолазы дикого типа в присутствии и в отсутствие 0.005% ТЭЦ.

          Мы также исследовали добавление восстанавливающего агента (10  мМ β-меркаптоэтанола) во время лизиса и очистки ТК из клеток, выращенных в отсутствие ГПК (рис. S5, дополнительная информация). Это не повлияло на %TK , модифицированный , как определено с помощью LC-ESI-MS, что убедительно показало, что окисление TK low (TK немодифицированный ) до TK high (TK модифицированный ) происходило внутриклеточно во время ферментации, а не на стадиях лизиса и/или очистки. Однако восстанавливающий агент уменьшал долю чрезмерно окисленных видов транскетолазы. Это согласуется с отдельным путем окисления из-за воздействия воздуха после ферментации, что приводит к инактивации фермента, наблюдаемой ранее.

          Обнаружение и локализация образования сульфеновой кислоты с помощью мечения димедона

          Димедон специфически реагирует с сульфеновыми кислотами, но не с тиоловыми группами или их переокисленными состояниями, такими как сульфоны, и, следовательно, использовался для обнаружения присутствия сульфеновой кислоты (кислот) через интактный белок LC-ESI-MS.Первоначально аподимерную транскетолазу дикого типа реагировали с димедоном в 50 мМ трис-HCl. Сдвига молекулярной массы не наблюдалось, предположительно из-за того, что любые сульфеновые кислоты не подвергались достаточному воздействию растворителя в правильно уложенной аподимерной транскетолазе (рис. 7). Чтобы повысить доступность любых сульфеновых кислот для растворителя, реакцию повторили в 3,8 M мочевине, самой высокой концентрации транскетолазы, которую может выдержать, не вызывая необратимой денатурации 37 , с йодацетамидом для улавливания любых открытых сульфгидрилов и минимизации их окисления в сульфеновые кислоты. Уменьшение относительной площади немодифицированного пика на 53 % и эквивалентной площади вновь образованного карбамидометилированного пика соответствовало мечению йодацетамидом незащищенного сульфгидрила (рис. 7). Образовались два новых пика, соответствующие одной и двум сульфеновым кислотам, меченым димедоном. Первый также был карбамидометилирован, что позволяет предположить, что он одновременно содержал меченый сульфгидрил. Второй содержал только две этикетки с димедоном. Мечение димедоном сопровождалось значительным уменьшением относительной площади пика однократно окисленной ( + 16 Da) транскетолазы дикого типа, которая, таким образом, соответствовала сульфеновой кислоте TK high .В отличие от этого, вторая, дважды окисленная относительная площадь пика ( + 32 Da), которая соответствовала двум сульфеновым кислотам или одной модификации сульфиновой кислоты на молекулу ТК, осталась неизменной, предположительно потому, что димедоновое мечение первого примерно равно образованию сульфона из сульфеновых кислот. который избежал маркировки димедона в присутствии мочевины.

          Рисунок 7

          Доказательства существования модификаций сульфиновой кислоты. Интактные масс-спектры транскетолазы дикого типа реагировали с 2 мМ димедона в отсутствие (черный) и в присутствии (красный) 3.8 M мочевины и 2 мМ йодацетамида (IAM), нормированные на общую интегрированную площадь пика. Спектры показывают сдвиг молекулярной массы в результате реакции между молекулами димедона и белково-сульфиновыми кислотами. -Ox1 соответствует одной модификации сульфиновой кислоты; -Ox2 соответствует двум сульфиновым кислотам или одной модификации сульфокислоты; -IAM соответствует карбамидометилированию; и –Dim соответствует модификации димедона по сульфиновым кислотам.

          Не наблюдалось сдвига пика, соответствующего реакции с двумя молекулами димедона и одной молекулой йодацетамида, что означает, что пик, соответствующий реакции с двумя молекулами димедона, на самом деле может быть артефактом окисления сульфгидрила в сульфеновую кислоту, который впоследствии был захвачен молекулой димедона.

          TK

          низкая представляет собой низкоактивную форму транскетолазы

          Активность транскетолазы дикого типа в отношении 50 мМ гликолевого альдегида (GA) и 50 мМ HPA при 2,4 мМ TPP и 9 мМ Mg 2+ (TK 1) и TK , низкий , насыщенный) увеличился только на 9,0% по сравнению с активностью при 50  мкМ TPP (только TK , высокий , насыщенный) (рис. 5d). Это было значительно меньше, чем ожидаемое увеличение примерно на 230%, если бы активность holoTK low была равна активности holoTK high .Данные об активности были объединены с фракционным насыщением TK high (98,5% и 100%) и TK low (12,2% и 92,4%) из данных связывания TPP при 9 мМ Mg 2+ и 50 мкМ или 2,4 мМ TPP, соответственно, и активность каждого вида, которая внесла свой вклад в общее наблюдаемое, рассчитывали с использованием пары одновременных уравнений. Решение этих уравнений показало, что активность TK low по отношению к GA составляла всего 4,5% по сравнению с активностью TK high . Следовательно, димер TK low был фактически неактивным, и окисление TK с образованием TK high независимо приводило к повышенному образованию димера, более высокому сродству к TPP, а также изначально более высокой активности.

          Исключение альтернативного возможного происхождения %B

          макс.(высокий)

          В то время как различия в массе напрямую коррелируют с наблюдаемым соотношением ТК высокий :TK низкий от % B макс(высокий) можно предположить несколько других потенциальных механизмов, объясняющих наблюдаемое поведение TPP-связывания.К ним относятся: i) аллостерия; ii) асимметричное связывание TPP с неидентичными активными сайтами во всех гомодимерах; iii) заселение промежуточных состояний при связывании TPP. Однако ни один из этих механизмов не соответствует наблюдениям, сделанным в нашей работе, и мы подробно рассмотрели каждый из них в дополнительной информации (раздел 6). Мы также исследовали, может ли отсутствие TPP во время сверхэкспрессии обеспечить условия, при которых TK дифференцируется в формы TK high и TK low . E. coli , как известно, образует примерно 6% голо-ТК из сверхэкспрессированной ТК, если полагаться только на доступный клеточно синтезированный ТРР 38 . Однако было обнаружено, что добавление в ферментационную культуру 0,5 мМ тиамина, который E. coli может импортировать и впоследствии преобразовывать в ТФП, не оказывает существенного влияния на полученные % B max(high) (рис. . S6, Дополнительная информация).

          Двухвидовая модель активации транскетолазы

          Наконец, мы предлагаем двухвидовую модель активации транскетолазы (рис.8), который описывает связывание TPP с ТК high и TK low , а также превращение неактивного TK low в активный TK high посредством окисления Cys157.

          Рисунок 8

          Схематическая диаграмма двухвидовой модели активации ТК. Модель основана на комбинированных данных по связыванию TPP, AUC, масс-спектрометрии и активности ферментов. L (голубой) представляет мономер TK с низким содержанием , а H (темно-синий) представляет собой мономер TK с высоким содержанием . TK low превращается в TK high посредством окисления (коричневого цвета) метионина или цистеина в активном центре.Наиболее вероятным сайтом модификации является Cys157.

          Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

          Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


          Настройка браузера для приема файлов cookie

          Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее распространенные причины:

          • В вашем браузере отключены файлы cookie.Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
          • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
          • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
          • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie.Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
          • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

          Почему этому сайту требуются файлы cookie?

          Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


          Что сохраняется в файле cookie?

          Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

          Как правило, в файле cookie может храниться только та информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

          Диагностика лейшманиоза: обновленная информация об использовании паразитологических, иммунологических и молекулярных методов населения региона Кохат в Хайбер-Пахтунхве.

          Биомед Рез Инт Сударшан 2014:2014. https://doi.org/10.1155/2014/861831

          Google Scholar

        • Abdallah KA, Nour BY, Schallig HD, Mergani A, Hamid Z, Elkarim AA, Saeed OK, Mohamadani AA (2004) Оценка реакции прямой агглютинации на основе лиофилизированных промастигот Leishmania donovani для серодиагностики висцеральный лейшманиоз у суданских пациентов.Trop Med Int Health 9 (10): 1127–1131. https://doi.org/10.1111/j.1365-3156.2004.01308.x

          ПабМед Google Scholar

        • Adams ER, Schoone G, Versteeg I, Gomez MA, Diro E, Mori Y, Perlee D, Downing T, Saravia N, Assaye A, Hailu A (2018) Разработка и оценка нового метода LAMP для диагностики кожного и висцерального лейшманиоза. Дж. Клин Микробиол. https://doi.org/10.1128/jcm.00386-18

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Акбари М., Орян А. , Хатам Г. (2017) Применение нанотехнологий в лечении лейшманиоза: обзор.Acta Trop 172: 86–90. https://doi.org/10.1016/j.actatropica.2017.04.029

          КАС пабмед Google Scholar (2010) Гнездовой ПЦР из образцов кожи грызунов-резервуаров. Опыт Паразитол 126 (4): 552–556. https://doi.org/10.1016/j.exppara.2010.06.003

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Akhoundi B, Mohebali M, Shojaee S, Jalali M, Kazemi B, Bandehpour M, Keshavarz H, Edrissian GH, Eslami MB, Malekafzali H, Kouchaki A (2013) Быстрое выявление висцерального лейшманиоза человека и собак: оценка реакция латексной агглютинации на основе антигена А2 амастиготных форм Leishmania infantum . Опыт Паразитол 133 (3): 307–313.https://doi.org/10.1016/j.exppara.2012.12.002

          КАС пабмед Google Scholar

        • Ахунди М., Даунинг Т. , Вотыпка Дж., Кулс К., Лукеш Дж., Каннет А., Равель С., Марти П., Делоне П., Касбари М., Грануйак Б. (2017) Инфекции Leishmania : молекулярные мишени и диагностика. Мол Асп Мед 57: 1–29. https://doi.org/10.1016/j.mam.2016.11.012

          КАС Google Scholar

        • Alemayehu B, Alemayehu M (2017) Лейшманиоз: обзор паразита, переносчика и резервуарного хозяина.Health Sci J 11 (4): 1. https://doi.org/10.21767/1791-809X.1000519

          Google Scholar

        • Аль-Салем В.С., Феррейра Д.М., Дайер Н.А., Альямани Э.Дж., Балгонаим С.М., Аль-Мехна А.Ю., Аль-Зубиани С., Ибрагим Э.К., Аль Шахрани А.М., Альхуайлед Х., Алдахан М.А. (2014) Обнаружение высоких уровней анти-α-галактозильные антитела в сыворотке пациентов с кожным лейшманиозом Старого Света: возможный инструмент для диагностики и биомаркер для лечения в условиях элиминации.Паразитология 141 (14): 1898–1903. https://doi.org/10. 1017/S0031182014001607

          КАС пабмед Google Scholar

        • Alvar J, Aparicio P, Aseffa A, Den Boer M, Canavate C, Dedet JP, Gradoni L, Ter Horst R, López-Vélez R, Moreno J (2008) Связь между лейшманиозом и СПИДом: второе 10 годы. Clin Microbiol Rev 21 (2): 334–359. https://doi.org/10.1128/CMR.00061-07

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Alvar J, Velez ID, Bern C, Herrero M, Desjeux P, Cano J, Jannin J, den Boer M, Группа ВОЗ по борьбе с лейшманиозом (2012 г.) Лейшманиоз во всем мире и глобальные оценки его заболеваемости.ПЛОС ОДИН 7(5):e35671. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0035671

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Andreadou M, Liandris E, Kasampalidis IN, Taka S, Antoniou M, Ntais P, Vaiopoulou A, Theodoropoulos G, Gazouli M, Ikonomopoulos J (2012) Оценка эффективности выбранных внутренних и имеющихся в продаже ПЦР и ПЦР в реальном времени для обнаружения ДНК Leishmania в клинических образцах собак. Опыт Паразитол 131 (4): 419–424. https://doi.org/10.1016/j.exppara.2012.05.012

          КАС пабмед Google Scholar

        • Андреаду М., Лиандрис Э., Газули М., Така С., Антониу М., Теодоропулос Г., Тахцидис И., Гутас Н., Влаходимитропулос Д., Касампалидис И., Икономопулос Дж. (2014) Новый анализ без амплификации для обнаружения Лейшмании видов. в клинических образцах с использованием наночастиц золота. J Microbiol Methods 96:56–61.https://doi.org/10.1016/j.mimet.2013.10.011

          КАС пабмед Google Scholar

        • Antinori S, Calattini S, Longhi E, Bestetti G, Piolini R, Magni C, Orlando G, Gramiccia M, Acquaviva V, Foschi A, Corvasce S (2007) Клиническое использование полимеразной цепной реакции на периферической крови и образцы костного мозга для диагностики и мониторинга висцерального лейшманиоза у ВИЧ-инфицированных и ВИЧ-неинфицированных пациентов: одноцентровый 8-летний опыт в Италии и обзор литературы. Clin Infect Dis 44 (12): 1602–1610. https://doi.org/10.1086/518167

          КАС пабмед Google Scholar

        • Antinori S, Schifanella L, Corbellino M (2012) Лейшманиоз: новые взгляды на старую и забытую болезнь. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 31(2):109–118. https://doi.org/10.1007/s10096-011-1276-0

          КАС пабмед Google Scholar

        • Antoine JC, Prina E, Lang T, Courret N (1998) Биогенез и свойства паразитофорных вакуолей, которые содержат Leishmania в мышиных макрофагах.Тенденции микробиол 6 (10): 392–401. https://doi.org/10.1016/s0966-842x(98)01324-9

          КАС пабмед Google Scholar

        • Антонио Л.Д., Фагундес А., Оливейра Р.В., Пинто П.Г., Бедоя-Пачеко С.Дж., Васконселлос Э.Д., Валете-Росалино М.С., Лира М.Р., Пассос С.Р., Пиментел М.И., Шубах А.Д. (2014) Кожный тест Черногории и возраст кожи поражения как предикторы неэффективности лечения при кожном лейшманиозе. Rev Inst Med Trop Sao Paulo 56 (5): 375–380. https://дои.орг/10.1590/S0036-46652014000500002

          Центральный пабмед Google Scholar

        • Ашрафмансури М., Саркари Б., Хатам Г., Хабиби П., Хабиси С.А. (2015)Полезность вестерн-блоттинга для диагностики кожного лейшманиоза. Иран Дж Паразитол 10(4):599. https://doi.org/10.1016/j.trstmh.2012.03.001

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Attar ZJ, Chance ML, el-Safi S, Carney J, Azazy A, El-Hadi M, Dourado C, Hommel M (2001) Реакция латексной агглютинации для обнаружения антигенов в моче при висцеральном лейшманиозе.Acta Trop 78 (1): 11–16. https://doi.org/10.1016/S0001-706X(00)00155-8

          КАС пабмед Google Scholar

        • Azizi K, Soltani A, Alipour H (2012) Молекулярное обнаружение Leishmania , выделенного от пациентов с кожным лейшманиозом в округе Джаск, провинция Хормозган, Южный Иран, 2008. Asian Pac J Trop Med 5(7):514– 517. https://doi.org/10.1016/S1995-7645(12)60090-X

          КАС пабмед Google Scholar

        • Bangert M, Flores-Chávez MD, Llanes-Acevedo IP, Arcones C, Chicharro C, García E, Ortega S, Nieto J, Cruz I (2018) Валидация иммунохроматографического теста rK39 и теста прямой агглютинации для диагностики Средиземноморский висцеральный лейшманиоз в Испании.PLoS Negl Trop Dis 12(3):e0006277. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0006277

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Barbosa Junior WL, Ramos de Araujo PS, Dias de Andrade L et al (2015)Экспресс-тесты и диагностика коинфекции висцерального лейшманиоза и вируса иммунодефицита человека/синдрома приобретенного иммунодефицита. Am J Trop Med Hyg 93 (5): 967–969. https://doi.org/10.4269/ajtmh.14-0798

          КАС пабмед Google Scholar

        • Barrett MP, Croft SL (2012) Лечение трипаносомоза и лейшманиоза. Бр Мед Булл 104: 175–196. https://doi.org/10.4269/ajtmh.14-0798

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Basiye FL, Mbuchi M, Magiri C, Kirigi G, Deborggraeve S, Schoone GJ, Saad AA, El-Safi S, Matovu E, Wasunna MK (2010) Чувствительность и специфичность теста Leishmania OligoC-TesT и Олигохроматография NASBA для диагностики висцерального лейшманиоза в Кении. Trop Med Int Health 15 (7): 806–810.https://doi.org/10.1111/j.1365-3156.2010.02548.x

          ПабМед Google Scholar

        • Бенш С., Окессон М. (2005) Десять лет AFLP в области экологии и эволюции: почему так мало животных? Мол Экол 14: 2899–2914. https://doi.org/10.1111/j.1365-294X.2005.02655.x

          КАС пабмед Google Scholar

        • Бхаргава П., Сингх Р. (2012) Разработки в области диагностики и противолейшманиальных препаратов. Междисциплинарная перспектива Infect Dis 2012:2012. https://doi.org/10.1155/2012/626838

          Google Scholar

        • Boelaert M, Rijal S, Regmi S, Singh R, Karki B, Jacquet D, Chappuis F, Campino L, Desjeux P, Le Ray D, Koirala S (2004) Сравнительное исследование эффективности диагностических тестов для висцеральный лейшманиоз. Am J Trop Med Hyg 70 (1): 72–77. https://doi.org/10.4269/ajtmh.2004.70.72

          ПабМед Google Scholar

        • Boelaert M, Bhattacharya S, Chappuis F, El Safi SH, Hailu A, Mondal D, Rijal S, Sundar S, Wasunna M, Peeling RW (2007) Оценка быстрых диагностических тестов: висцеральный лейшманиоз.Nat Rev Microbiol 5: S30–S39. https://doi.org/10.1038/nrmicro1766

          КАС Google Scholar

        • Boggild AK, Miranda-Verastegui C, Espinosa D, Arevalo J, Martinez-Medina D, Llanos-Cuentas A, Low DE (2008) Оптимизация микрокультуры и оценка миникультуры для выделения паразитов Leishmania из кожи поражений в Перу. Am J Trop Med Hyg 79(6):847–852

          CAS пабмед Google Scholar

        • Bossolasco S, Gaiera G, Olchini D, Gulletta M, Martello L, Bestetti A, Bossi L, Germagnoli L, Lazzarin A, Uberti-Foppa C, Cinque P (2003) Анализ ПЦР в реальном времени для клинического ведения инфицированных вирусом иммунодефицита человека больных висцеральным лейшманиозом.J Clin Microbiol 41(11):5080–5084. https://doi.org/10.1128/jcm.41.11.5080-5084.2003

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Botilde Y, Laurent T, Tintaya WQ, Chicharro C, Cañavate C, Cruz I, Kuhls K, Schönian G, Dujardin JC (2006) Сравнение молекулярных маркеров для типирования штамма Leishmania infantum . Заразить Genet Evol 6(6):440–446. https://doi.org/10.1016/j.meegid.2006.02.003

          КАС пабмед Google Scholar

        • Carvalho SF, Lemos EM, Corey R, Dietze R (2003) Эффективность рекомбинантного антигена K39 в диагностике бразильского висцерального лейшманиоза. Am J Trop Med Hyg 68 (3): 321–324. https://doi.org/10.4269/ajtmh.2003.68.321

          ПабМед Google Scholar

        • Carvalho AM, de Oliveira Mendes TA, Coelho EA, Duarte MC, Menezes-Souza D (2018)Новые антигены для серологической диагностики висцерального лейшманиоза человека, выявленные с помощью иммуногеномного скрининга. PLoS ONE 13(12):e0209599. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0209599

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • CDC (2018) Leishmania эпидемиология и факторы риска.https://www.cdc.gov/parasites/leishmaniasis/epi.html. По состоянию на 26 июля 2019 г.

        • Chappuis F, Sundar S, Hailu A, Ghalib H, Rijal S, Peeling RW, Alvar J, Boelaert M (2007) Висцеральный лейшманиоз: каковы потребности в диагностике, лечении и контроле? Nat Rev Microbiol 5(11supp):S7. https://doi.org/10.1038/nrmicro1748

          Google Scholar

        • Chhabra MB, Singla LD (2014) Лейшманиоз. В: Гарг С.Р. (ред.) Зооноз: паразитарные и грибковые заболевания.Издательство Daya, Нью-Дели, стр. 134–147

          Google Scholar

        • Coleman RE, Edman JD, Semprevivo LH (1998) Взаимодействие между Plasmodium yoelii и Leishmania mexicana amazonensis у мышей C57B1/6, устойчивых к Leishmania . Am J Trop Med Hyg 39 (6): 540–544. https://doi.org/10.4269/ajtmh.1988.39.540

          Google Scholar

        • Коупленд Н.К., Аронсон Н.Е. (2015)Лейшманиоз: обновления лечения и обзор руководств по клинической практике.Curr Opin Infect Dis 28 (5): 426–437. https://doi.org/10.1097/QCO.0000000000000194

          КАС пабмед Google Scholar

        • Кота Г.Ф., Де Соуза М.Р., Демарки Ф.Н., Рабелло А. (2012) Диагностическая точность серологических и молекулярных методов выявления висцерального лейшманиоза у ВИЧ-инфицированных пациентов: метаанализ. PLoS Negl Trop Dis 6(5):e1665. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0001665

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Cota GF, de Sousa MR, de Freitas Nogueira BM, Gomes LI, Oliveira E, Assis TS, de Mendonça AL, Pinto BF, Saliba JW, Rabello A (2013) Сравнение паразитологических, серологических и молекулярных тестов на висцеральный лейшманиоз у ВИЧ-инфицированных пациентов: перекрестное исследование замедленного типа.Am J Trop Med Hyg 89 (3): 570–577. https://doi.org/10.4269/ajtmh.13-0239

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • da Silva Solcà M, Guedes CE, Nascimento EG, de Sá vOliveira GG, dos Santos WL, Fraga DB, Veras PS (2012) Качественная и количественная полимеразная цепная реакция (ПЦР) для обнаружения Leishmania в образцах селезенки от собак, инфицированных естественным путем. Вет Паразитол 184 (2–4): 133–140. https://doi. org/10.1016/ж.ветпар.2011.08.026

          КАС Google Scholar

        • де Пайва-Кавальканти М., де Мораис Р.С., Пессоа-э-Силва Р., Силва Л.А., да Кунья Гонсалвеш-де-Альбукерке С., Тавареш Д.Д., Брелаз-де-Кастро М.С., Сильва Р.Д., Перейра В.Р. (2015 ) Диагностика лейшманиозов: обновленная информация об использовании иммунологических и молекулярных инструментов. Cell Biosci 5(1):31. https://doi.org/10.1186/s13578-015-0021-2

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • de Pita-Pereira D, Cardoso MA, Alves CR, Brazil RP, Britto C (2008) Обнаружение естественной инфекции у Lutzomyia cruzi и Lutzomyia forattinii (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae) by в эндемичной по висцеральному лейшманиозу зоне в Бразилии с использованием мультиплексного анализа ПЦР.Acta Trop 107 (1): 66–69. https://doi.org/10.1016/j.actatropica.2008.04.015

          КАС пабмед Google Scholar

        • de Vries HJ, Reedijk SH, Schallig HD (2015)Кожный лейшманиоз: последние достижения в диагностике и лечении. Am J Clin Dermatol 16 (2): 99–109. https://doi.org/10.1007/s40257-015-0114-z

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Dhanji S, Teh HS (2003) IL-2-активированные CD8 + CD44 высокие клетки экспрессируют рецепторы как адаптивной, так и врожденной иммунной системы и демонстрируют специфичность в отношении сингенных опухолевых клеток.Дж. Иммунол 171(7):3442–3450. https://doi.org/10.4049/jimmunol.171.7.3442

          КАС пабмед Google Scholar

        • Dhiman RC (2014) Новые трансмиссивные зоонозы: экоэпидемиология и последствия для общественного здравоохранения в Индии. Фронт общественного здравоохранения 2:168. https://doi.org/10.3389/fpubh.2014.00168

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Diro E, Lynen L, Gebregziabiher B, Assefa A, Lakew W, Belew Z, Hailu A, Boelaert M, van Griensven J (2015)Клинические аспекты педиатрического висцерального лейшманиоза на северо-западе Эфиопии. Trop Med Int Health 20 (1): 8–16. https://doi.org/10.1111/tmi.12407

          КАС пабмед Google Scholar

        • Donnelly JJ, Liu MA, Ulmer JB (2000) Презентация антигена и ДНК-вакцины. Американский журнал респираторной и реаниматологической медицины 162 (дополнение_3): S190–S193. https://doi.org/10.1164/ajrccm.162.supplement_3.15tac10

          КАС пабмед Google Scholar

        • Dunning N (2009) Leishmania Вакцины: от лейшманизации к эре технологии ДНК.Biosci Horiz 2 (1): 73–82. https://doi.org/10.1093/biohorizons/hzp004

          КАС Google Scholar

        • Эльмахаллави Э.К., Мартинес А.С., Родригес-Грейнджер Дж., Хойос-Маллекот Ю., Агил А., Мари Дж.М., Фернандес Дж.Г. (2014) Диагностика лейшманиоза. J Infect Dev Ctries 8 (08): 961–972. https://doi.org/10.3855/jidc.4310

          ПабМед Google Scholar

        • Freitas-Junior LH, Chatelain E, Kim HA, Siqueira-Neto JL (2012) Лечение висцерального лейшманиоза: что у нас есть, что нам нужно и как его проводить? Int J Parasitol Drugs Drug Resist 2:11–19. https://doi.org/10.1016/j.ijpddr.2012.01.003

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Gadisa E, Custodio E, Canavate C, Sordo L, Abebe Z, Nieto J et al (2012) Полезность rK39-иммунохроматографического теста, прямой реакции агглютинации и кожной пробы с лейшманином для выявления бессимптомной инфекции Leishmania у детей в новом очаге висцерального лейшманиоза в штате Амхара, Эфиопия. Am J Trop Med Hyg 86 (5): 792–798.https://doi.org/10.4269/ajtmh.2012.11-0196

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Galluzzi L, Ceccarelli M, Diotallevi A, Menotta M, Magnani M (2018) Применение ПЦР в реальном времени для диагностики лейшманиоза. Векторы-паразиты 11 (1): 273. https://doi.org/10.1186/s13071-018-2859-8

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Горбани М. , Фархуди Р. (2018) Лейшманиоз у людей: лекарственная или вакцинная терапия? Наркотик Дес Дев Тер 12:25.https://doi.org/10.1186/s13071-018-2859-8

          КАС Google Scholar

        • Ghosh P, Hasnain MG, Hossain F, Khan MA, Chowdhury R, ​​Faisal K, Mural MA, Baker J, Nath R, Ghosh D, Maruf S (2018) Оценка ПЦР в реальном времени для диагностики пост- кала-азарский кожный лейшманиоз в эндемичных очагах Бангладеш. Открытый форум Infect Dis 5(10):ofy234. https://doi.org/10.1093/ofid/ofy234

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Goto H, Lindoso JA (2010) Текущая диагностика и лечение кожного и слизисто-кожного лейшманиоза.Expert Rev Anti-infect Ther 8(4):419–433. https://doi.org/10.1586/eri.10.19

          ПабМед Google Scholar

        • Гупта Г., Огуму С., Сатоскар А.Р. (2013) Механизмы уклонения от иммунитета при лейшманиозе. Appl Microbiol Biotechnol 82:155–184. https://doi.org/10.1016/B978-0-12-407679-2.00005-3

          КАС Google Scholar

        • Hailu A, Schoone GJ, Diro E, Tesfaye A, Techane Y, Tefera T, Assefa Y, Genetu A, Kebede Y, Kebede T, Schallig HD (2006) Полевая оценка быстрого анализа обнаружения антител против Leishmania в Эфиопии.Trans R Soc Trop Med Hyg 100 (1): 48–52. https://doi.org/10.1016/j.trstmh.2005.07.003

          КАС пабмед Google Scholar

        • Hide M, Singh R, Kumar B, Bañuls AL, Sundar S (2007) Метод микрокультуры для выделения живых паразитов Leishmania из периферической крови больных висцеральным лейшманиозом. Acta Trop 102 (3): 197–200. https://doi.org/10.1016/j.actatropica.2007.04.015

          КАС пабмед Google Scholar

        • Хоссейн Ф., Гош П., Хан М.А., Дати М.С., Валлур А.С., Пиконе А., Ховард Р. Ф., Рид С.Г., Мондал Д. (2017) ПЦР в реальном времени для обнаружения и количественного определения Leishmania donovani для диагностики Пациенты с висцеральным лейшманиозом и мониторинг их ответа на лечение.PLoS ONE 12(9):e0185606. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0185606

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Ismail N, Kaul A, Bhattacharya P, Gannavaram S, Nakhasi HL (2017) Иммунизация живыми аттенуированными паразитами Leishmania donovani Centrin -/- эффективна при бессимптомной инфекции. Фронт Иммунол 8:1788. https://doi.org/10.3389/fimmu.2017.01788

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Jamjoom MB, Ashford RW, Bates PA, Chance ML, Kemp SJ, Watts PC, Noyes HA (2004) Leishmania donovani является единственной причиной висцерального лейшманиоза в Восточной Африке; предыдущие описания L. infantum и « L. archibaldi » из этого региона являются следствием конвергентной эволюции в изоферментных данных. Паразитология 129 (4): 399–409. https://doi.org/10.1017/s0031182004005955

          КАС пабмед Google Scholar

        • Jensen AT, Gasim S, Moller T, Ismail A, Gaafar A, Kemp M, El Hassan AM, Kharazmi A, Alce TM, Smith DF, Theander TG (1999) Серодиагностика инфекций Leishmania donovani: оценка ферментативных связанные иммуносорбентные анализы с использованием рекомбинантного L.donovani гена белка В (GBP) и пептидной последовательности L. donovani GBP. Trans R Soc Trop Med Hyg 93 (2): 157–160. https://doi.org/10.1016/s0035-9203(99)-2

          КАС пабмед Google Scholar

        • Jorquera A, González R, Marchán-Marcano E, Oviedo M, Matos M (2005) Мультиплексная ПЦР для обнаружения естественной инфекции Leishmania в Lutzomyia spp. пойман в эндемичном по кожному лейшманиозу регионе в штате Сукре, Венесуэла.Мем Инст Освальдо Круз 100 (1): 45–48. https://doi.org/10.1590/S0074-02762005000100008

          ПабМед Google Scholar

        • Kaul P, Malla N, Kaur S, Mahajan RC, Ganguly NK (2000) Оценка амастигот-специфического антигена L. donovani с молекулярной массой 200 кДа с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) для диагностики висцеральный лейшманиоз. Trans R Soc Trop Med Hyg 94(2):173–175

          CAS пабмед Google Scholar

        • Kaur J, Kaur S (2013) ELISA и вестерн-блоттинг для обнаружения антигенов Hsp70 и Hsp83 Leishmania donovani .J Parasit Dis 37(1):68–73

          PubMed Google Scholar

        • Халил Э.А., Айед Н.Б., Муса А.М., Ибрагим М.Е., Мухтар М.М., Зийлстра Э.Е. и др. (2005) Дихотомия защитных клеточных иммунных реакций на висцеральный лейшманиоз человека. Clin Exp Immunol 140(2):349–353. https://doi.org/10.1111/j.1365-2249.2005.02768.x

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Хан М.Г., Бхаскар К.Р., Салам М.А., Актер Т., Плюшке Г., Мондал Д. (2012) Диагностическая точность петлевой изотермической амплификации (LAMP) для обнаружения ДНК Leishmania в лейкоцитарной пленке у пациентов с висцеральным лейшманиозом.Векторы-паразиты 5(1):280. https://doi.org/10.1186/1756-3305-5-280

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Хатун М., Алам С.С., Хан А.Х., Хоссейн М.А., Хак Дж.А., Джилани М.С., Рахман М.Т., Карим М.М. (2017) Новые праймеры для ПЦР для диагностики висцерального лейшманиоза с использованием аспиратов периферической крови, селезенки или костного мозга. Asian Pac J Trop Med 10 (8): 753–759. https://doi.org/10.1016/j.apjtm.2017.08.002

          КАС пабмед Google Scholar

        • Kotb Elmahallawy E, Agil A (2015) Лечение лейшманиоза: обзор и оценка последних исследований. Curr Pharm Des 21 (17): 2259–2275. https://doi.org/10.2174/1381612821666141231163053

          КАС Google Scholar

        • Kothalawala HS, Karunaweera ND (2016) Петлевой анализ изотермической амплификации как чувствительный диагностический инструмент для инфекций Leishmania donovani в Шри-Ланке. Цейлон Мед Дж. https://doi.org/10.4038/cmj.v61i2.8286

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Kumar A, Boggula VR, Misra P, Sundar S, Shasany AK, Dube A (2010) Анализ полиморфизма длин амплифицированных фрагментов (AFLP) полезен для различения видов Leishmania висцеральных и кожных форм.Acta Trop 113 (2): 202–206. https://doi.org/10.1016/j.actatropica.2009.10.006

          КАС пабмед Google Scholar

        • Lemma W, Bizuneh A, Tekie H, Belay H, Wondimu H, Kassahun A, Shiferaw W, Balkew M, Abassi I, Baneth G, Hailu A (2017) Предварительное исследование по изучению зоонозного висцерального лейшманиоза в эндемичных очагах Эфиопии путем выявления инфекций Leishmania у грызунов. Asian Pac J Trop Dis 10 (4): 418–422.https://doi.org/10.1016/j.apjtm.2017.03.018

          Google Scholar

        • Li XX, Zhou XN (2013)Коинфекция туберкулеза и паразитарных заболеваний у людей: систематический обзор. Векторы-паразиты 6(1):79. https://doi.org/10.1186/1756-3305-6-79

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Lima IP, Müller MC, Holanda TA, Harhay M, Costa CH, Costa DL (2013)Вирус иммунодефицита человека/ Leishmania infantum в первых очагах городского американского висцерального лейшманиоза: клиническая картина с 1994 по 2010 год.Rev Soc Bras Med Trop 46 (2): 156–160. https://doi.org/10.1590/0037-8682-0033-2012

          ПабМед Google Scholar

        • Линдосо Дж. А., Кота Г. Ф., да Круз А. М., Гото Х., Майя-Элхури А. Н., Ромеро Г. А., де Соуза-Гомес М. Л., Сантос-Оливейра Дж. Р., Рабелло А. (2014) Висцеральный лейшманиоз и коинфекция ВИЧ в Латинской Америке. PLoS Negl Trop Dis 8(9):e3136. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0003136

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Lindoso JA, Cunha MA, Queiroz IT, Moreira CH (2016)Коинфекция лейшманиоз-ВИЧ: текущие проблемы.ВИЧ/СПИД (Окленд, Новая Зеландия) 8:147. https://doi.org/10.2147/ВИЧ.S93789

          Google Scholar

        • Liu D, Uzonna JE (2012) Раннее взаимодействие Leishmania с макрофагами и дендритными клетками и его влияние на иммунный ответ хозяина. Front Cell Infect Microbiol 2:83. https://doi.org/10.3389/fcimb.2012.00083

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Maizels RM, Hewitson JP, Smith KA (2012) Восприимчивость и иммунитет к гельминтозам.Curr Opin Immunol 24(4):459–466. https://doi.org/10.1016/j.coi.2012.06.003

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Manna L, Reale S, Vitale F, Picillo E, Pavone LM, Gravino AE (2008) Анализ ПЦР в реальном времени у собак, инфицированных Leishmania , получавших антимониат меглюмина и аллопуринол. Vet J 177 (2): 279–282. https://doi.org/10.1016/j.tvjl.2007.04.013

          КАС пабмед Google Scholar

        • Martin SK, Thuita-Harun L, Adoyo-Adoyo M, Wasunna KM (1998) Диагностический ИФА для висцерального лейшманиоза, основанный на антигене из среды, кондиционированной промастиготами Leishmania donovani .Энн Троп Мед Паразитол 92 (5): 571–577. https://doi.org/10.1080/00034989859267

          КАС пабмед Google Scholar

        • Maurya R, Mehrotra S, Prajapati VK, Nylén S, Sacks D, Sundar S (2010) Оценка микротитровальных планшетов с кровяным агаром для культивирования паразитов Leishmania для титрования паразитарной нагрузки в селезенке и периферической крови пациентов с висцеральным лейшманиозом . J Clin Microbiol 48 (5): 1932–1934. https://дои.орг/10.1128/JCM.01733-09

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Mettler M, Grimm F, Capelli G, Camp H, Deplazes P (2005) Оценка твердофазного иммуноферментного анализа, иммунофлуоресцентного теста на антитела и двух экспресс-тестов (иммунохроматографический тест с полосками и гель-тесты) для серологической диагностики симптоматических и бессимптомных инфекций Leishmania у собак. J Clin Microbiol 43(11):5515–5519

          CAS пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Mikaeili F, Fakhar M, Sarkari B, Motazedian MH, Hatam G (2007) Сравнение серологических методов (ELISA, DAT и IFA) для диагностики висцерального лейшманиоза с использованием эндемического штамма.Иран J Immunol 4(2):116–121

          PubMed Google Scholar

        • Мохаммадиха А., Мохебали М., Хагиги А., Махдиан Р., Абади А.Р., Зарей З., Еганех Ф., Каземи Б., Тагипур Н., Ахунди Б. (2013) Сравнение ПЦР в реальном времени и традиционной ПЦР с двумя ДНК-мишенями для обнаружение инфекции Leishmania ( Leishmania ) у младенцев в образцах крови человека и собаки. Опыт Паразитол 133 (1): 89–94. https://doi.org/10.1016/j.exppara.2012.10.017

          КАС пабмед Google Scholar

        • Mohapatra TM, Singh DP, Sen MR, Bharti K, Sundar S (2010) Сравнительная оценка антигенов rK9 rK26 и rK39 в серодиагностике индийского висцерального лейшманиоза. J Infect Dev Cries 4: 114–117. https://doi.org/10.3855/jidc.544

          ПабМед Google Scholar

        • Mondal S, Bhattacharya P, Ali N (2010) Текущая диагностика и лечение висцерального лейшманиоза.Expert Rev Anti-infect Ther 8(8):919–944. https://doi.org/10.1586/eri.10.78

          ПабМед Google Scholar

        • Moody A, Chiodini P (2000) Методы обнаружения паразитов крови. Clin Lab Haematol 22(4):189–201. https://doi.org/10.1046/j.1365-2257.2000.00318.x

          КАС пабмед Google Scholar

        • Moreira MA, Luvizotto MC, Garcia JF, Corbett CE, Laurenti MD (2007) Сравнение паразитологических, иммунологических и молекулярных методов диагностики лейшманиоза у собак с различными клиническими признаками.Вет Паразитол 145 (3–4): 245–252. https://doi.org/10.1016/j.vetpar.2006.12.012

          КАС пабмед Google Scholar

        • Mugasa CM, Deborggraeve S, Schoone GJ, Laurent T, Leeflang MM, Ekangu RA, El Safi S, Saad AF, Basiye FL, De Doncker S, Lubega GW (2010) Соответствие и соответствие PCR и NASBA с последующим олигохроматография для молекулярной диагностики Trypanosoma brucei и Leishmania . Trop Med Int Health 15 (7): 800–805.https://doi.org/10.1111/j.1365-3156.2010.02547

          ПабМед Google Scholar

        • Мухтар М.М., Шариф А.Х., Эль-Саффи С.Х., Харит А.Е., Хигаззи Т.Б., Адам А.М., Абдалла Х.С. (2000) Обнаружение антител к Leishmania donovani у животных в эндемичном регионе Кала-Азар в Восточном Судане: a предварительный отчет. Trans R Soc Trop Med Hyg 94: 33–36. https://doi.org/10.1016/s0035-9203(00)-2

          КАС пабмед Google Scholar

        • Mukhtar M, Ali SS, Boshara SA, Albertini A, Monnerat S, Bessell P, Mori Y, Kubota Y, Ndung’u JM, Cruz I (2018) Чувствительный и менее инвазивный подтверждающий диагноз висцерального лейшманиоза в Судане с использованием петлевая изотермическая амплификация (LAMP).PLoS Negl Trop Dis 12(2):e0006264. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0006264

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Musa A, Khalil E, Hailu A, Olobo J, Balasegaram M, Omollo R и др. (2012) Комбинация стибоглюконата натрия (SSG) и паромомицина по сравнению с SSG при висцеральном лейшманиозе в Восточной Африке: рандомизированное контролируемое исследование. PLoS Negl Trop Dis 6:e1674. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0001674

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Neogy AB, Nandy A, Chowdhury AB (1990) Тест Лейшманина при посткалаазарском кожном лейшманиозе. Trans R Soc Trop Med Hyg 84 (1): 58. https://doi.org/10.1016/0035-9203(90)

        • -N

          КАС пабмед Google Scholar

        • Nylén S, Sacks D (2007) Интерлейкин-10 и патогенез висцерального лейшманиоза человека.Тенденции Иммунол 28(9):378–384. https://doi.org/10.1016/j.it.2007.07.004

          КАС пабмед Google Scholar

        • Oliva G, Scalone A, Manzillo VF, Gramiccia M, Pagano A, Di Muccio T, Gradoni L (2006). когорта наивных собак, подвергшихся трем последовательным сезонам передачи вируса. J Clin Microbiol 44(4):1318–1322.https://doi.org/10.1128/jcm.44.4.1318-1322.2006

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Olliaro PL, Shamsuzzaman TA, Marasini B, Dhariwal AC, Be-Nazir A, Mondal D, Banjara MR, Das P, Sundar S, Rijal S, Arana B (2017) Необходимы инвестиции в исследования и надзор невозможно ликвидировать и остановить передачу Leishmania на Индийском субконтиненте. PLoS Negl Trop Dis 11:e0005190. https://дои.org/10.1371/journal.pntd.0005190

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Ovalle-Bracho C, Camargo C, Díaz-Toro Y, Parra-Muñoz M (2018) Молекулярное типирование Leishmania ( Leishmania ) amazonensis и видов подрода V в Колумбии: исследование соответствия. Биомедика 38 (1): 86–95. https://doi.org/10.7705/biomedica. v38i0.3632

          ПабМед Google Scholar

        • Palatnik-de-Sousa CB (2008) Вакцины против лейшманиоза на ближайшие 25 лет. Вакцина 26 (14): 1709–1724. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2008.01.023

          КАС пабмед Google Scholar

        • Parolo C, Merkoci A (2013) Нанобиосенсоры на бумажной основе для диагностики. Chem Soc Rev 42: 450–457. https://doi.org/10.1039/c2cs35255a

          КАС пабмед Google Scholar

        • Passos V, Barreto SM, Romanha AJ, Krettli AU, Volpini AC, Costa MF (2000) Американский кожный лейшманиоз: использование кожного теста в качестве предиктора рецидива после лечения.Bull World Health Organ 78: 968–974. https://doi.org/10.1590/S0042-96862000000800006

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Паттабхи С., Уиттл Дж. , Мохамат Р., Эль-Сафи С., Моултон Г.Г., Гудериан Дж.А., Коломбара Д., Абдун А.О., Мухтар М.М., Мондал Д., Эсфандиари Дж., Кумар С., Чун П., Рид С.Г., Бхатия А. (2010)Дизайн, разработка и оценка тестов на месте оказания медицинской помощи на основе rK28 для улучшения экспресс-диагностики висцерального лейшманиоза.PLoS Negl Trop Dis 14(9):e822. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0000822

          КАС Google Scholar

        • Pennisi MG, Reale S, Giudice SL, Masucci M, Caracappa S, Vitale M, Vitale F (2005) ПЦР в реальном времени у собак, получавших аллопуринол от лейшманиоза. Ветеринарная коммуна 29(2):301–303. https://doi.org/10.1007/s11259-005-0067-4

          ПабМед Google Scholar

        • Пинтадо В., Мартин-Рабадан П., Ривера М.Л., Морено С., Буза Э. (2001)Висцеральный лейшманиоз у пациентов, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), и пациентов, не инфицированных ВИЧ: сравнительное исследование. Медицина 80 (1): 54–73. https://doi.org/10.1097/00005792-200101000-00006

          КАС пабмед Google Scholar

        • Радж В.С., Гош А., Доул В.С., Мадхубала Р.Е., Майлер П.Дж., Стюарт К.Д. (1999) Серодиагностика лейшманиоза с помощью рекомбинантного антигена ORFF. Am J Trop Med Hyg 61 (3): 482–487. https://doi.org/10.4269/ajtmh.1999.61.482

          КАС пабмед Google Scholar

        • Равиндран Р., Анам К., Байраги Б.С., Саха Б., Праманик Н., Гуха С.К., Госвами Р.П., Банерджи Д., Али Н. (2004) Характеристика иммуноглобулина G и его подкласса в ответ на инфекцию индийского кала-азара до и после химиотерапия.Infect Immun 72(2):863–870. https://doi.org/10.1128/IAI.72.2.863-870.2004

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Ready PD (2013) Биология москитов-флеботоминов как переносчиков возбудителей болезней. Анну Рев Энтомол 58: 227–250. https://doi.org/10.1146/annurev-ento-120811-153557

          КАС пабмед Google Scholar

        • Ready P (2014) Эпидемиология висцерального лейшманиоза.Клин Эпидемиол 6: 147–154. https://doi.org/10.2147/CLEP.S44267

          ПабМед Google Scholar

        • Reis LE, Coura-Vital W, Roatt BM, Bouillet LÉ, Ker HG, de Brito RC, de Melo Resende D, Carneiro M, Giunchetti RC, Marques MJ, Carneiro CM (2013) Молекулярная диагностика висцерального лейшманиоза собак : сравнительное исследование трех методов с использованием кожи и селезенки собак с естественной инфекцией Leishmania infantum . Вет Паразитол 197 (3–4): 498–503.https://doi.org/10.1016/j.vetpar.2013.07.006

          КАС пабмед Google Scholar

        • Reithinger R (2008) Диагностика и лечение кожного лейшманиоза. Эксперт преподобный Дерматол 3(3):315–327. https://doi.org/10.1586/17469872.3.3.315

          Google Scholar

        • Reithinger R, Dujardin JC (2007)Молекулярная диагностика лейшманиоза: текущее состояние и применение в будущем.J Clin Microbiol 45 (1): 21–25. https://doi.org/10.1016/S1473-3099(07)70209-8

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Reithinger R, Quinnell RJ, Alexander B, Davies CR (2002) Быстрое выявление инфекции Leishmania infantum у собак: сравнительное исследование с использованием иммунохроматографического теста с полосками, твердофазного иммуноферментного анализа и ПЦР. J Clin Micro-Biol 40:2352–2356. https://doi.org/10.1128/jcm.40.7.2352-2356.2002

          КАС Google Scholar

        • Reithinger R, Dujardin JC, Louzir H, Pirmez C, Alexander B, Brooker S (2007)Кожный лейшманиоз. Ланцет Infect Dis 7 (9): 581–596. https://doi. org/10.1016/S1473-3099(07)70209-8

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Restrepo CM, De La Guardia C, Sousa OE, Calzada JE, Fernández PL, Lleonart R (2013) Полиморфизмы AFLP позволяют провести генетический анализ с высоким разрешением возбудителей американского тегументарного лейшманиоза, циркулирующих в Панаме, и других представителей рода Leishmania .ПЛОС ОДИН 8(9):e73177. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0073177

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Rezvan H, Hamoon Navard S (2017) Обзор диагностики Leishmania . J Med Microbiol Infect Dis 5(1):1. https://doi.org/10.29252/JoMMID.5.1.2.1

          Google Scholar

        • Riera C, Fisa R, Lopez-Chejade P, Serra T, Girona E, Jimenez M et al (2008) Бессимптомная инфекция Leishmania infantum у доноров крови с Балеарских островов (Испания). Переливание 48 (7): 1383–1389. https://doi.org/10.1111/j.1537-2995.2008.01708

          КАС пабмед Google Scholar

        • Rivas L, de la Escosura-Muñiz A, Serrano L, Altet L, Francino O, Sánchez A, Merkoci A (2015) Трехлинейный анализ бокового потока на основе наночастиц золота для расширенного и одновременного обнаружения ДНК Leishmania и эндогенный контроль. Нанорез 8(11):3704–3714. https://doi.org/10.1007/s12274-015-0870-3

          КАС Google Scholar

        • Romero LI, Paz HM, Ortega-Barría E et al (2004) Оценка серологических анализов на основе нового препарата выделяемого антигена для диагностики кожного лейшманиоза в Панаме.J Microbiol Methods 57(3):391–397. https://doi.org/10.1016/j.mimet.2004.02.008

          ПабМед Google Scholar

        • Ryan JR, Smithyman AM, Rajasekariah GH, Hochberg L, Stiteler JM, Martin SK (2002) Иммуноферментный анализ на основе растворимого промастиготного антигена выявляет иммуноглобулин M (IgM) и антитела IgG в сыворотке при висцеральных и кожный лейшманиоз. J Clin Microbiol 40(3):1037–1043. https://doi.org/10.1128/jcm.40.3.1037-1043.2002

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Саад А.А., Ахмед Н.Г., Осман О.С., Аль-Башир А.А., Хамад А., Деборграев С., Бюшер П., Шун Г.Дж., Шаллиг Х.Д., Лоран Т., Халим А. (2010) Точность диагностики Leishmania OligoC- Test и NASBA-олигохроматография для диагностики лейшманиоза в Судане. PLoS Negl Trop Dis 4(8):e776. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0000776

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Садлова Дж., Себлова В., Вотыпка Дж., Варбург А., Вольф П. (2015) Ксенодиагностика Leishmania donovani у мышей BALB/c с использованием Phlebotomusorientalis: новая лабораторная модель.Векторы-паразиты 8(1):158. https://doi.org/10.1186/s13071-015-0765-x

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Салам М. А., Хан М.Г., Бхаскар К.Р., Афрад М.Х., Худа М.М., Мондал Д. (2012)Мазок лейкоцитарной пленки периферической крови: многообещающий инструмент для диагностики висцерального лейшманиоза. J Clin Microbiol 50(3):837–840. https://doi.org/10.1128/JCM.05067-11

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Саркари Б., Ашрафмансури М., Хатам Г., Хабиби П., Абдолахи Хабиси С. (2014) Эффективность ИФА и непрямого иммунофлуоресцентного анализа в серологической диагностике зоонозного кожного лейшманиоза в Иране.Междисциплинарная перспектива Infect Dis. https://doi.org/10.1155/2014/505134

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Schallig HD, Cardoso L, Hommers M, Kroon N, Belling G, Rodrigues M, Semiao-Santos SJ, Vetter H (2004) Разработка тест-полоски для обнаружения Leishmania -специфических собачьих антител. J Clin Microbiol 42(1):193–197. https://doi.org/10.1128/jcm.42.1.193-197.2004

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Schönian G, Kuhls K, Mauricio IL (2011) Молекулярные подходы для лучшего понимания эпидемиологии и популяционной генетики Leishmania .Паразитология 138 (4): 405–425. https://doi.org/10.1017/S0031182010001538

          КАС пабмед Google Scholar

        • Schoone GJ, Hailu A, Kroon CC, Nieuwenhuys JL, Schallig HD, Oskam L (2001) Скрининговый тест быстрой агглютинации (FAST) для обнаружения антител против Leishmania . Trans R Soc Trop Med Hyg 95 (4): 400–401. https://doi.org/10.1016/S0035-9203(01)

          -8

          КАС пабмед Google Scholar

        • Shahbazi F, Shahabi S, Kazemi B, Mohebali M, Abadi AR, Zare Z (2008) Оценка ПЦР-анализа в диагностике и идентификации кожного лейшманиоза: сравнение с паразитологическими методами. Parasitol Res 103 (5): 1159–1162. https://doi.org/10.1007/s00436-008-1111-4

          ПабМед Google Scholar

        • Sharma U, Singh S (2008) Насекомые-переносчики Leishmania : распространение, физиология и борьба с ними. J Vector Borne Dis 45 (4): 255–272. https://doi.org/10.1201/9781420088489

          ПабМед Google Scholar

        • Шириан С., Орян А., Хатам Г.Р., Панахи С., Данешбод Й. (2014) Сравнение традиционных, молекулярных и иммуногистохимических методов диагностики типичного и атипичного кожного лейшманиоза.Arch Pathol Lab Med 138 (2): 235–240. https://doi.org/10.5858/arpa.2013-0098-OA

          КАС пабмед Google Scholar

        • Швета С.Б., Гупта А.К., Мурти К., Пандей К. (2014)Коинфекция висцерального лейшманиоза и туберкулеза легких: тематическое исследование. Asian Pac J Trop Med 4 (1): 57. https://doi.org/10. 1016/S2222-1808(14)60315-7

          Google Scholar

        • Siewe N, Yakubu AA, Satoskar AR, Friedman A (2016) Иммунный ответ на инфекцию Leishmania : математическая модель.Math Biosci 276: 28–43. https://doi.org/10.1016/j.mbs.2016.02.015

          КАС пабмед Google Scholar

        • Singh S (2006) Новые разработки в диагностике лейшманиоза. Indian J Med Res 123(3):311

          PubMed Google Scholar

        • Singh S (2014) Изменение тенденций в эпидемиологии, клинических проявлениях и диагностике коинфекции Leishmania -ВИЧ в Индии.Int J Infect Dis 29: 103–112. https://doi.org/10.1016/j.ijid.2014.07.011

          ПабМед Google Scholar

        • Singh S, Sivakumar R (2003) Последние достижения в диагностике лейшманиоза. J Postgrad Med 49 (1): 55. https://doi.org/10.4103/0022-3859. 927

          КАС пабмед Google Scholar

        • Singh OP, Sundar S (2015) Развитие диагностики висцерального лейшманиоза в эпоху ликвидации.Дж Параситол Рес 2015:2015. https://doi.org/10.1155/2015/239469

          КАС Google Scholar

        • Сингх С., Дей А., Сивакумар Р. (2005) Применение молекулярных методов для борьбы с Leishmania . Expert Rev Mol Diagn 5 (2): 251–265. https://doi.org/10.1586/14737159.5.2.251

          КАС пабмед Google Scholar

        • Сингх Д.П., Гоял Р.К., Сингх Р.К., Сундар С., Мохапатра ТМ (2010) В поисках идеального теста для диагностики и прогноза кала-азар.J Health Popul Nutr 28: 281–285. https://doi.org/10.3329/jhpn.v28i3.5557

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Сивакумар Р., Шарма П., Чанг К.П., Сингх С. (2006) Клонирование, экспрессия и очистка нового рекомбинантного антигена из Leishmania donovani . Protein Expr Purif 46(1):156–165. https://doi.org/10.1016/j.pep.2005.07.027

          КАС пабмед Google Scholar

        • Smyth AJ, Ghosh A, Hassan MQ, Basu D, De Bruijn MHL, Adhya S, Mallik KK, Barker DC (1992) Быстрое и чувствительное обнаружение кинетопластной ДНК Leishmania в образцах селезенки и крови кала-азара пациенты.Паразитология 105 (2): 183–192. https://doi.org/10.1017/S0031182000074096

          КАС пабмед Google Scholar

        • Solano-Gallego L, Miró G, Koutinas A, Cardoso L, Pennisi MG, Ferrer L, Bourdeau P, Oliva G, Baneth G, The LeishVet Group (2011) Руководство LeishVet по практическому лечению лейшманиоза собак. Векторы-паразиты 4:86. https://doi.org/10.1186/1756-3305-4-86

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Шривастава П., Даяма А., Мехротра С., Сундар С. (2011) Диагностика висцерального лейшманиоза. Trans R Soc Trop Med Hyg 105 (1): 1–6. https://doi.org/10.1016/j.trstmh.2010.09.006

          ПабМед Google Scholar

        • Шривидья Г., Кулшреста А., Сингх Р., Салотра П. (2012) Диагностика висцерального лейшманиоза: развитие за последнее десятилетие. Parasitol Res 110: 1065–1078. https://doi.org/10.1007/s00436-011-2680-1

          ПабМед Google Scholar

        • Steverding D (2017) История лейшманиоза.Векторы-паразиты 10 (1): 82. https://doi.org/10.1186/s13071-017-2028-5

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Stockdale L, Newton R (2013) Обзор методов профилактики заражения человека лейшманиозом. PLoS Negl Trop Dis 7(6):e2278.58. https://doi.org/10.1186/s13071-017-2028-5

          Google Scholar

        • Сударшан М., Сундар С. (2014)Оценка паразитарной нагрузки с помощью количественной ПЦР различает бессимптомную и симптоматическую инфекцию при индийском висцеральном лейшманиозе. Diagn Microbiol Infect Dis 80(1):40–42. https://doi.org/10.1016/j.diagmicrobio.2014.01.031

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Sundar S, Rai M (2002) Лабораторная диагностика висцерального лейшманиоза. Clin Diagn Lab Immunol 9(5):951–958. https://doi.org/10.1128/CDLI.9.5.951-958.2002

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Sundar S, Singh A (2016) Последние разработки и перспективы на будущее в лечении висцерального лейшманиоза.The Adv Infect Dis 3–4: 98–109. https://doi.org/10.1177/2049936116646063

          КАС Google Scholar

        • Сундар С., Гупта Л.Б., Растоги В., Агравал Г., Мюррей Х.В. (2000) Краткосрочный и экономически эффективный курс лечения амфотерицином В-жировой эмульсией излечивает висцеральный лейшманиоз. Trans R Soc Trop Med Hyg 94: 200–204. https://doi. org/10.1016/s0035-9203(00)

        • -3

          КАС пабмед Google Scholar

        • Sundar S, Jha TK, Thakur CP, Engel J, Sindermann H, Fischer C et al (2002a) Пероральный милтефозин при индийском висцеральном лейшманиозе.N Engl J Med 347: 1739–1746. https://doi.org/10.1056/NEJMoa021556

          КАС пабмед Google Scholar

        • Сундар С., Пай К., Саху М., Кумар В., Мюррей Х.В. (2002b) Иммунохроматографический стрип-тест для выявления антител против K39 при индийском висцеральном лейшманиозе. Энн Троп Мед Паразитол 96 (1): 19–23. https://doi.org/10.1179/000349802125000466

          КАС пабмед Google Scholar

        • Teixeira DE, Benchimol M, Rodrigues JC, Crepaldi PH, Pimenta PF, de Souza W (2013) Клеточная биология Leishmania : как обучать с помощью анимации.PLoS Pathog 9(10):e1003594. https://doi.org/10.1371/journal. ppat.1003594

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Thakur L, Singh KK, Shanker V, Negi A, Jain A, Matlashewski G, Jain M (2018) Атипичный лейшманиоз: глобальная перспектива с акцентом на Индийский субконтинент. PLoS Negl Trop Dis 12(9):e0006659. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0006659

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Thomaz-Soccol V, Ferreira da Costa ES, Karp SG, Junior Letti LA, Soccol FT, Soccol CR (2018) Последние достижения в области вакцин против Leishmania на основе патентных заявок.Недавний патент Pat Biotechnol 12(1):21–32. https://doi.org/10.2174/1872208311666170510121126

          КАС пабмед Google Scholar

        • Tlamcani Z (2016) Висцеральный лейшманиоз: обновление лабораторной диагностики. Asian Pac J Trop Dis 6 (7): 505–508. https://doi. org/10.1016/S2222-1808(16)61077-0

          Google Scholar

        • Torres-Guerrero E, Quintanilla-Cedillo MR, Ruiz-Esmenjaud J, Arenas R (2017) Лейшманиоз: обзор.F1000 Рез. https://doi.org/10.12688/f1000research.11120.1

          Google Scholar

        • Van der Meide WF, Schoone GJ, Faber WR, Zeegelaar JE, de Vries HJ, Özbel Y, Fat RFLA, Coelho LI, Kassi M, Schallig HD (2005) Количественный анализ на основе последовательности нуклеиновых кислот как новый молекулярный инструмент для обнаружения и количественного определения паразитов Leishmania в образцах биопсии кожи. J Clin Microbiol 43(11):5560–5566. https://doi.org/10.1128/JCM.43.11.5560-5566.2005

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Верма С., Авишек К., Шарма В., Неги Н.С., Рамеш В., Салотра П. (2013) Применение петлевого анализа изотермической амплификации для чувствительной и быстрой диагностики висцерального лейшманиоза и посткалаазарского кожного лейшманиоза. Diagn Microbiol Infect Dis 75(4):390–395. https://doi.org/10.1016/j.diagmicrobio.2013.01.011

          КАС пабмед Google Scholar

        • Винк М.М., Нахзат С.М., Рахими Х., Бюлер С., Ахмади Б.А., Надер М., Зазай Ф.Р., Юсуфзай А.С., ван Лоенен М., Шаллиг Х.Д., Пикадо А. диагностика лейшманиоза в Кабуле, Афганистан.E Биомедицина 37: 453–460. https://doi.org/10.1016/j.ebiom.2018.10.063

          Google Scholar

        • Wang JY, Ha Y, Gao CH, Wang Y, Yang YT, Chen HT (2011) Распространенность собачьей инфекции Leishmania infantum в западном Китае, обнаруженная с помощью ПЦР и серологических тестов. Вектор-паразит 4(1):69. https://doi.org/10.1186/1756-3305-4-69

          КАС Google Scholar

        • Welch RJ, Anderson BL, Litwin CM (2008) Быстрый иммунохроматографический полосковый тест для обнаружения антител к иммуноглобулину G против K39 для диагностики висцерального лейшманиоза. Clin Vaccine Immunol 15 (9): 1483–1484. https://doi.org/10.1128/CVI.00174-08

          КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

        • ВОЗ (2016) Эпидемиологические ситуации по лейшманиозу. https://www.who.int/leishmaniasis/en. По состоянию на 20 мая 2018 г.

        • Yang J, Zhang L, Yu C, Yang XF, Wang H (2014) Дифференциация моноцитов и макрофагов: циркулирующие воспалительные моноциты как биомаркер воспалительных заболеваний.Биомарк Рез 2(1):1. https://doi.org/10.1186/2050-7771-2-1

          ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

        • Yasinzai M, Khan M, Nadhman A, Shahnaz G (2013) Лекарственная устойчивость при лейшманиозе: современные системы доставки лекарств и перспективы на будущее. Future Med Chem 5 (15): 1877–1888. https://doi.org/10.4155/fmc.13.143

          КАС пабмед Google Scholar

        • Zanoli L, Spoto G (2013) Методы изотермической амплификации для обнаружения нуклеиновых кислот в микрожидкостных устройствах. Биосенсоры 3(1):18–43. https://doi.org/10.3390/bios3010018

          КАС пабмед Google Scholar

        • Zeyrek FY, Töz S, Yuksel F, Turgay N, Ozbel Y (2018) Сравнение кинетопластидной ДНК ПЦР и паразитологических методов диагностики кожного лейшманиоза с использованием клинических образцов подозреваемых пациентов в Турции. Int J Infect Dis 73:317. https://doi.org/10.1016/j.ijid.2018.04.4135

          Google Scholar

        • Зийлстра Э.Э., Али М.С., Эль-Хассан А.М., Эль-Тум И.А., Сатти М., Галиб Х.В., Кагер П.А. (1992) Кала-азар: сравнительное исследование паразитологических методов и прямой реакции агглютинации в диагностике.Trans R Soc Trop Med Hyg 86 (5): 505–507. https://doi.org/10.1016/0035-9203(92)

        • КАС пабмед Google Scholar

        • Zijlstra EE, Khalil EA, Kager PA, El-Hassan AM (2000)Посткалаазарский кожный лейшманиоз в Судане: клиническая картина и дифференциальный диагноз. Бр Дж. Дерматол 143(1):136–143. https://doi.org/10.1046/j.1365-2133.2000.03603.x

          КАС пабмед Google Scholar

        • Общая анестезия и гладкая мускулатура сосудов | Анестезиология

          В зависимости от кровеносных сосудов, концентраций или экспериментальных условий ( e.г.  , наличие эндотелия), сократительные ответы усиливались, ингибировались или не подвергались влиянию анестетиков. Однако существуют некоторые тенденции наблюдаемого действия анестетиков на вазоконстрикторные реакции в изолированных сосудах.

          Большинство летучих и внутривенных анестетиков подавляли сократительную реакцию на KCl или норэпинефрин как в присутствии эндотелия, так и в его отсутствие , 143-150etomidate, 151diazepam, 152morphine153,154; норэпинефрина ответ : галотан, 123,125,128,155-157enflurane, 157-160isoflurane, 27,123,125,128,132,133,157,160-162sevoflurane, 25,135,160,163,164ketamine, 26,138,139,141,165propofol, 144,145,147,166-168etomidate, 151diazepam, 152midazolam, 169,170morphine, 153,154fentanyl171) (Таблица 1). Однако все ранее исследованные внутривенные анестетики ингибировали эти ответы только при концентрациях, превышающих клинически значимые концентрации свободного анестетика ( ответ KCl : барбитураты,136,137 ≥ 100 мкм; кетамин,26,138–142 ≥ 100 мкм; пропофол,143–150 ≥ 10 мкМ; EtomatiD, 151 ≥ 100 мкм; диазепам, 152 ≥ 30 мкм; морфин, 153,154 ≥ 30 мкм; реакция норэпинефрина : кетамин, 26,138,139,141,165 ≥ 10 мкм; пропофол, 144,145,147,166-168 ≥ 1 мкм; Etomative, 151 ≥ 100 мкМ; ; диазепам,152 ≥ 100 мкм; мидазолам,169,170 ≥ 1 мкм; морфин,153,154 ≥ 10 мкм; фентанил,171 ≥ 1 мкм).

          Предыдущие исследования in vitro 123,133–135,156,172–175 дали противоречивые результаты относительно эндотелиальной зависимости анестезирующего действия от сосудосуживающих реакций, что, возможно, отражает видовые или региональные различия или различия в экспериментальных условиях ( например, , тест-стимуляторы). Однако было ясно показано, что в некоторых сосудах галотан, энфлуран, изофлуран и севофлуран усиливали сократительные реакции на норадреналин или фенилэфрин эндотелий-зависимым образом,133,135,174,176, хотя лежащие в их основе механизмы еще не выяснены. В малых брыжеечных артериях крыс усиление галотаном, изофлураном или севофлураном все еще наблюдалось после ингибирования путей оксида азота, EDHF, циклооксигеназы и липоксигеназы или после блокады рецепторов ET-1, AT-II или серотонина.133,135,176 Таким образом, , оксид азота, EDHF, продукты циклооксигеназы, продукты липоксигеназы, ET-1, AT-II и серотонин не будут участвовать в усилении действия этих анестетиков.

          В изолированных мелких брыжеечных артериях крыс, подвергшихся воздействию галотана, изофлурана или севофлюрана, сократительная реакция на норадреналин усиливалась в присутствии эндотелия, но подавлялась или не изменялась в его отсутствие.133,135,176 Однако, независимо от наличия или отсутствия эндотелия, реакция норадреналина ингибировалась после удаления любого из анестетиков из внеклеточного пространства. зависимое усиливающее и эндотелийнезависимое тормозное действие. А именно, первое, вероятно, преобладает или противодействует второму во время воздействия этих анестетиков, тогда как только последнее, по-видимому, сохраняется после их удаления.

    Оставить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.