Статья жк 30: Ст. 30 ЖК РФ. Права и обязанности собственника жилого помещения

Содержание

Ст. 30 ЖК РФ. Права и обязанности собственника жилого помещения

1. Собственник жилого помещения осуществляет права владения, пользования и распоряжения принадлежащим ему на праве собственности жилым помещением в соответствии с его назначением и пределами его использования, которые установлены настоящим Кодексом.

2. Собственник жилого помещения вправе предоставить во владение и (или) в пользование принадлежащее ему на праве собственности жилое помещение гражданину на основании договора найма, договора безвозмездного пользования или на ином законном основании, а также юридическому лицу на основании договора аренды или на ином законном основании с учетом требований, установленных гражданским законодательством, настоящим Кодексом.

3. Собственник жилого помещения несет бремя содержания данного помещения и, если данное помещение является квартирой, общего имущества собственников помещений в соответствующем многоквартирном доме, а собственник комнаты в коммунальной квартире несет также бремя содержания общего имущества собственников комнат в такой квартире, если иное не предусмотрено федеральным законом или договором.

4. Собственник жилого помещения обязан поддерживать данное помещение в надлежащем состоянии, не допуская бесхозяйственного обращения с ним, соблюдать права и законные интересы соседей, правила пользования жилыми помещениями, а также правила содержания общего имущества собственников помещений в многоквартирном доме.

5. Собственник жилого дома или части жилого дома обязан обеспечивать обращение с твердыми коммунальными отходами путем заключения договора с региональным оператором по обращению с твердыми коммунальными отходами. Под обращением с твердыми коммунальными отходами для целей настоящего Кодекса и иных актов жилищного законодательства понимаются транспортирование, обезвреживание, захоронение твердых коммунальных отходов.

См. все связанные документы >>>

1. Термин «право собственности», о котором идет речь в главе 5 комментируемого Кодекса, понимается в двух значениях: право собственности в объективном смысле и право собственности в субъективном смысле.

Право собственности в объективном смысле — совокупность правовых норм, регулирующих отношения собственности. Право собственности в субъективном смысле — это юридически обеспеченная возможность лица осуществлять правомочия владения, пользования и распоряжения принадлежащей ему вещью. Содержание права собственности — это совокупность входящих в него правомочий. Эта совокупность включает три правомочия: владения, пользования и распоряжения. Право владения — это право фактически обладать вещью, содержать ее в собственном хозяйстве. Поскольку такое владение основывается на законном основании (титуле), его называют титульным владением. Право пользования — это право извлекать из вещи ее полезные свойства, удовлетворять свои потребности, получать выгоду. Правомочие пользования вещью собственник может передать другому лицу на основании заключенного договора.

Право распоряжения — это право определять юридическую и фактическую судьбу вещи.

Вещными правами лиц, не являющихся собственниками, являются права, производные и зависимые от права собственности, возникающие по воле собственника или по указанию закона и осуществляемые в пределах, установленных договором с собственником или законом. К вещным правам относятся прежде всего права, предусмотренные ст. 216 ГК: право хозяйственного ведения, оперативного управления, пожизненного наследуемого владения земельным участком, постоянного (бессрочного) пользования земельным участком, сервитуты.

Жилые помещения могут быть объектом различных вещных прав (хотя и не всех, в частности, они не могут быть объектом пожизненного наследуемого владения, постоянного бессрочного пользования земельного участка и некоторых других). Прежде всего, они представляет собой особый объект такого основополагающего вещного права, как право собственности. Все остальные вещные права являются производными от него, и, кроме того, они ограничены по объему правомочий по сравнению с правом собственности.

В п. 10 Постановления Пленума Верховного Суда РФ от 2 июля 2009 г. N 14 «О некоторых вопросах, возникших в судебной практике при применении Жилищного кодекса Российской Федерации» было отмечено, что при рассмотрении споров, возникающих в связи с реализацией собственником своих правомочий по владению, пользованию и распоряжению принадлежащим ему жилым помещением, «судам следует учитывать, что законом установлены пределы осуществления права собственности на жилое помещение, которые заключаются в том, что собственник обязан: использовать жилое помещение по назначению, то есть для проживания граждан (часть 1 статьи 17 ЖК РФ, пункт 2 статьи 288 ГК РФ), поддерживать жилое помещение в надлежащем состоянии, не допуская бесхозяйственного обращения с ним, соблюдать права и законные интересы соседей, правила пользования жилыми помещениями, а также правила содержания общего имущества собственников помещений в многоквартирном доме (часть 4 статьи 30 ЖК РФ). Использование жилого помещения для осуществления профессиональной деятельности или индивидуальной предпринимательской деятельности допускается с соблюдением положений, установленных частями 2 и 3 статьи 17 ЖК РФ, пунктом 3 статьи 288 ГК РФ.

Нарушение установленных законом пределов осуществления права собственности на жилое помещение влечет применение к собственнику различного рода мер ответственности, предусмотренных законодательством, например административной в виде предупреждения или штрафа (статьи 7.21, 7.22 Кодекса Российской Федерации об административных правонарушениях), гражданско-правовой в виде лишения права собственности на жилое помещение (статья 293 ГК РФ)».

2. В ч. 2 комментируемой статьи говорится об особенностях заключения договоров о передаче жилых помещений в пользование в зависимости от того, кому они передаются в пользование. Так, собственник жилого помещения может предоставить его гражданину по договору найма, договору безвозмездного пользования или на ином законном основании.

Юридическому же лицу жилое помещение может передаваться только по договору аренды с обязательным условием использования этого помещения для проживания граждан.

Порядок заключения таких договоров регулируется гражданским законодательством, и в первую очередь ГК РФ.

3. Под бременем содержания жилого помещения понимается прежде всего обязанность собственника оплачивать коммунальные услуги, связанные с поддержанием в надлежащем состоянии не только самого жилого помещения, но и общего имущества в доме (лифты, лестницы и др.), а если речь идет о комнате в коммунальной квартире, то имеются в виду места общего пользования (коридоры, туалеты и др.).

Бремя содержания жилого помещения также включает в себя обязанность по уплате налогов на имущество.

Исключения из этого общего правила могут быть предусмотрены договором или федеральным законом. В качестве примера можно привести ст. 16 Закона РФ от 4 июля 1991 г. N 1541-1 «О приватизации жилищного фонда в Российской Федерации», согласно которой за бывшим наймодателем сохраняется обязанность производить капитальный ремонт дома в соответствии с нормами содержания, эксплуатации и ремонта жилищного фонда в порядке, установленном жилищным законодательством Российской Федерации. В последнем случае речь идет о ст. 158 ЖК РФ (см. комментарий к ней), согласно которой собственники жилых помещений несут расходы по оплате капитального ремонта только частично.

4. В ч. 4 комментируемой статьи говорится в общем виде об обязанности собственника жилого помещения поддерживать данное помещение в надлежащем состоянии, не допуская бесхозяйственного обращения с ним, соблюдать права и законные интересы соседей, правила пользования жилыми помещениями, а также правила содержания общего имущества собственников.

Речь идет о Правилах пользования жилыми помещениями, утвержденных Постановлением Правительства РФ от 21 января 2006 г. N 25, и Правилах содержания общего имущества в многоквартирном доме, установленных Постановлением Правительства РФ от 13 августа 2006 г. N 491.

5. Отдельно в ч. 5 комментируемой статьи говорится о дополнительной обязанности собственника жилого помещения обеспечивать обращение с твердыми коммунальными отходами (ТКО) путем заключения договора с региональным оператором по обращению с ТКО. В нем также раскрывается понятие обращения с твердыми коммунальными отходами.

Ситуация с ТКО является непростой прежде всего в отношении собственников индивидуальных жилых домов. Повсеместно собственники индивидуальных жилых домов, а также дачных, садовых и огородных земельных участков либо председатели и иные уполномоченные лица соответствующих некоммерческих объединений (садовых некоммерческих товариществ, дачных некоммерческих товариществ и партнерств и т.п.) не заключают соответствующих договоров на оказание услуг по вывозу, транспортированию и размещению отходов. Граждане нередко пользуются для указанных целей мусорными контейнерами, установленными органами местного самоуправления или специализированными организациями, или даже выбрасывают свой мусор и иные отходы на близлежащие земельные участки, полосы отвода автомобильных дорог или в лесу, образовывая многочисленные стихийные свалки, нередко вблизи городских и сельских поселений.

Как правильно отмечено в литературе, остаются недостаточно ясными формы правового воздействия на граждан в целях заключения с ними таких договоров, а также возможность привлечения к юридической ответственности тех граждан, которые уклоняются от их заключения. Отсюда вполне закономерно вытекают вопросы: надо ли будет доказывать, что эти граждане фактически пользуются муниципальными контейнерами, либо в силу обязательности закона этот факт не требует доказательств, а также на каком основании взыскивать стоимость оказанных услуг при отсутствии договора на сбор, транспортирование и размещение ТКО?

———————————

Пономарев М.В., Филаткина Ю.Е. Правовое регулирование обращения с твердыми коммунальными отходами: практика, проблемы, перспективы // Адвокат. 2016. N 1. С. 24.

Ответа на этот вопрос пока нет.

Статья 30 ЖК РФ. Права и обязанности собственника жилого помещения

1. Собственник жилого помещения осуществляет права владения, пользования и распоряжения принадлежащим ему на праве собственности жилым помещением в соответствии с его назначением и пределами его использования, которые установлены настоящим Кодексом.2. Собственник жилого помещения вправе предоставить во владение и (или) в пользование принадлежащее ему на праве собственности жилое помещение гражданину на основании договора найма, договора безвозмездного пользования или на ином законном основании, а также юридическому лицу на основании договора аренды или на ином законном основании с учетом требований, установленных гражданским законодательством, настоящим Кодексом.3. Собственник жилого помещения несет бремя содержания данного помещения и, если данное помещение является квартирой, общего имущества собственников помещений в соответствующем многоквартирном доме, а собственник комнаты в коммунальной квартире несет также бремя содержания общего имущества собственников комнат в такой квартире, если иное не предусмотрено федеральным законом или договором.4. Собственник жилого помещения обязан поддерживать данное помещение в надлежащем состоянии, не допуская бесхозяйственного обращения с ним, соблюдать права и законные интересы соседей, правила пользования жилыми помещениями, а также правила содержания общего имущества собственников помещений в многоквартирном доме.5. Собственник жилого дома или части жилого дома обязан обеспечивать обращение с твердыми коммунальными отходами путем заключения договора с региональным оператором по обращению с твердыми коммунальными отходами. Под обращением с твердыми коммунальными отходами для целей настоящего Кодекса и иных актов жилищного законодательства понимаются транспортирование, обезвреживание, захоронение твердых коммунальных отходов.

Комментарии к статье

Постатейный комментарий к Жилищному кодексу Российской Федерации (Гришаев С.П.) (Подготовлен для системы КонсультантПлюс, 2018)

Комментарий изменений в Жилищный кодекс Российской Федерации (Гришаев С.П.) (Подготовлен для системы КонсультантПлюс, 2019)

Жилищный кодекс Российской Федерации. Постатейный комментарий. Путеводитель по судебной практике (Беспалов Ю.Ф., Беспалов А.Ю., Касаткина А.Ю.) (отв. ред. Ю.Ф. Беспалов) («Проспект», 2018)

Жилищное право (12-е издание, переработанное и дополненное) (Крашенинников П.В.) («Статут», 2020)

Общее собрание собственников помещений в многоквартирном доме: проблемы правового статуса и реализации отдельных полномочий (Юрьева Л.А.) («Актуальные проблемы российского права», 2019, № 10)

Защита прав владельцев недвижимости при реконструкции и реновации (3-е издание, переработанное и дополненное) (Ильин Б.В., Кальгина А.А.) («Юстицинформ», 2019)

Общее имущество многоквартирного дома (Подготовлен для системы КонсультантПлюс, 2020)

Какие есть способы управления многоквартирным домом? («Электронный журнал «Азбука права», 2020)

Статья 30 ЖК РФ и комментарии к ней

1. Собственник жилого помещения осуществляет права владения, пользования и распоряжения принадлежащим ему на праве собственности жилым помещением в соответствии с его назначением и пределами его использования, которые установлены настоящим Кодексом.

2. Собственник жилого помещения вправе предоставить во владение и (или) в пользование принадлежащее ему на праве собственности жилое помещение гражданину на основании договора найма, договора безвозмездного пользования или на ином законном основании, а также юридическому лицу на основании договора аренды или на ином законном основании с учетом требований, установленных гражданским законодательством, настоящим Кодексом.
3. Собственник жилого помещения несет бремя содержания данного помещения и, если данное помещение является квартирой, общего имущества собственников помещений в соответствующем многоквартирном доме, а собственник комнаты в коммунальной квартире несет также бремя содержания общего имущества собственников комнат в такой квартире, если иное не предусмотрено федеральным законом или договором.

4. Собственник жилого помещения обязан поддерживать данное помещение в надлежащем состоянии, не допуская бесхозяйственного обращения с ним, соблюдать права и законные интересы соседей, правила пользования жилыми помещениями, а также правила содержания общего имущества собственников помещений в многоквартирном доме.
5. Собственник жилого дома или части жилого дома обязан обеспечивать обращение с твердыми коммунальными отходами путем заключения договора с региональным оператором по обращению с твердыми коммунальными отходами. Под обращением с твердыми коммунальными отходами для целей настоящего Кодекса и иных актов жилищного законодательства понимаются сбор, транспортирование, обезвреживание, захоронение твердых коммунальных отходов.(Часть дополнительно включена с 1 января 2016 года Федеральным законом от 29 декабря 2014 года N 458-ФЗ)

Комментарий к статье 30 ЖК РФ

Статья 30 ЖК РФ устанавливает основные права и обязанности лица, имеющего на праве собственности жилое помещение. Регулирование прав и обязанностей собственников жилых помещений является своего рода новеллой жилищного законодательства. Ранее действовавший ЖК РСФСР не регулировал данную группу общественных отношений в силу специфики гражданского оборота, сложившегося в условиях советского государства.

Понятие собственности, в том числе и на жилое помещение, а также права и обязанности собственника впервые наиболее четко были урегулированы Гражданском Кодексе, а первые попытки регулирования вопросов собственности были сделаны в Законе СССР «О собственности в СССР».

В современных условиях развитие жилищных отношений немыслимо без института собственности на жилые помещения. Это обстоятельство обусловило появление в ЖК РФ целого раздела, посвященного праву собственности и иным вещным правам на жилые помещения.

Право собственности включает в себя три основных составляющих: право владения, право пользования, право распоряжения. Пункт 1 комментируемой статьи в этой связи установил, что собственник жилого помещения осуществляет в отношении него права владения, пользования и распоряжения в соответствии с назначением жилого помещения и пределами его использования. Назначение и пределы использования жилых помещений установлены в ст. 17 ЖК РФ (см. комментарий).

Пункт 2 ст. 30 ЖК РФ посвящен одному из полномочий собственности — праву распоряжения жилым помещением. Так, собственник вправе предоставить принадлежащее ему жилое помещение другому гражданину или юридическому лицу во владение и (или) пользование.

Для распоряжения жилым помещением в данном случае используются различные виды договоров. Гражданам жилые помещения могут быть предоставлены во владение и (или) пользование на основании договоров найма, безвозмездного пользования и т.д. Юридическому лицу жилое помещение предоставляется во владение и (или) пользование на основании договора аренды либо на других законных основаниях.

В ЖК РФ внимание уделено лишь передаче владения и (или) пользования жилым помещением другому лицу. При этом не идет речь о договорах, юридическим последствием которых является переход права собственности на жилое помещение, иными словами — отчуждение. Дело в том, что переход права собственности на жилые помещения — это предмет регулирования в большей степени гражданского, а не жилищного законодательства, и его регулирование сосредоточено в ГК РФ.

В пункте 3 данной статьи находит свое отражение гражданско-правовой принцип «бремени собственности». Бремя собственности, т.е. обязанность по содержанию имущества в надлежащем виде, уплата различных платежей, налогов, сборов и пошлин по общему правилу всегда лежит на собственнике вещи.

Жилищное законодательство в этом смысле не является исключением. Собственник жилого помещения несет бремя содержания этого помещения. Если же такое помещение является квартирой и расположено в многоквартирном жилом доме, то собственник несет еще и бремя содержания общего имущества собственников в многоквартирном доме. Если помещение не является отдельной квартирой, а представляет собой, допустим, комнату в коммунальной квартире, то его собственник несет еще и бремя содержания общего имущества собственников комнат.

Пункт 4 ст. 30 ЖК РФ посвящен основным, наиболее общим обязанностям собственников жилых помещений. Собственники жилых помещений обязаны:

поддерживать помещение в надлежащем состоянии;

не допускать бесхозяйственного обращения с жилым помещением;

соблюдать права и законные интересы соседей;

соблюдать правила пользования жилыми помещениями;

соблюдать правила содержания общего имущества собственников помещений в многоквартирном доме.

Другой комментарий к статье 30 Жилищного Кодекса РФ

1. Любой собственник (в том числе собственник жилого помещения) имеет право владения, пользования и распоряжения своим имуществом (ст. 209 ГК).

Право владения есть обеспеченная законом возможность удерживать вещь (в данном случае — жилое помещение) в своем обладании. Право пользования представляет собой обеспеченную законом возможность извлечения из вещи ее полезных свойств (применительно к жилому помещению — использовать его для проживания) (см. также п. 7 комментария к ст. 1 ЖК). Право распоряжения есть обеспеченная законом возможность определять юридическую судьбу вещи (п. 3 комментария к рассматриваемой статье).

Указание на то, что названные правомочия собственника обеспечены законом, означает их охрану и защиту законом. Так, жилище неприкосновенно; никто не может быть произвольно лишен жилища; жилищное законодательство основывается на необходимости беспрепятственного осуществления вытекающих из отношений, регулируемых жилищным законодательством, прав; основными началами жилищного законодательства являются в том числе необходимость обеспечения восстановления нарушенных жилищных прав, их судебной защиты и т.д. (см. также п. п. 6 — 10 комментария к ст. 1 ЖК).

2. В ЖК РФ (ч. 1 комментируемой статьи) говорится о пределах использования жилищного помещения. На самом деле, конечно, правильнее говорить о пределах осуществления права собственности на жилье. Во-первых, понятие «осуществление права» более широкое, и, стало быть, в содержание понятия «осуществление права собственности на жилое помещение» в том числе входит возможность использования жилого помещения. Во-вторых, говоря об использовании жилья, следует помнить, что всегда есть риск быть неправильно понятым: идет ли речь только о реализации права пользования, или имеется в виду также и осуществление правомочий владения и распоряжения <1>. Ну и, наконец, в-третьих, вряд ли верно заменять устоявшуюся терминологию («осуществление права», «владение, пользование и распоряжение имуществом»), если на то нет особой необходимости.

———————————
<1> Так, А.В. Венедиктов вместо понятий указанных трех правомочий предлагал применять понятие «использование» (см.: Венедиктов А.В. Государственная социалистическая собственность. М.: Юрид. лит., 1948. С. 34). Но эта точка зрения не получила широкого распространения.

Пределы осуществления права собственности на жилые помещения представляют собой установленные федеральным законодательством определенные границы, в которых собственник по своему усмотрению владеет, пользуется и распоряжается принадлежащим ему помещением.

Вопреки утверждению, содержащемуся в ч. 1 комментируемой статьи, осуществление права собственности на жилые помещения (по терминологии Кодекса — «использование жилого помещения») происходит в пределах, очерченных не только ЖК РФ, но и иными актами, причем не только актами жилищного законодательства. Так, в силу ч. 3 ст. 17 Конституции РФ осуществление прав и свобод человека и гражданина не должно нарушать права и свободы других лиц. В соответствии с п. 1 ст. 10 ГК РФ не допускаются действия граждан и юридических лиц, осуществляемые исключительно с намерением причинить вред другому лицу, а также злоупотребление правом в иных формах. (Кстати, ст. 10 ГК имеет титул «Пределы осуществления гражданских прав», а право собственности, в том числе на жилое помещение, есть право гражданское.) В ст. 209 ГК РФ предусмотрено, что собственник может по своему усмотрению совершать в отношении принадлежащего ему имущества любые действия, не противоречащие закону и иным правовым актам и не нарушающие права и охраняемые законом интересы других лиц. В ст. 288 ГК РФ указывается, что собственник должен использовать жилое помещение по назначению (для проживания граждан), отмечается недопустимость размещения в жилых домах промышленных производств и т.д. и т.п.

Многие названные и другие положения, определяющие пределы осуществления права собственности (в том числе на жилые помещения), в той или иной форме воспроизводятся в ЖК РФ. Так, в ст. 1 Кодекса предписывается, что при осуществлении гражданами жилищных прав и исполнении вытекающих из жилищных отношений обязанностей не должны нарушаться права, свободы и законные интересы других граждан. В ст. 17 ЖК РФ повторяется известное правило о предназначении жилого помещения (для проживания). Здесь же делается некоторое «послабление» для лиц, использующих жилье для осуществления профессиональной или индивидуальной предпринимательской деятельности, но тут же устанавливается традиционный «ограничитель»: при этом нельзя нарушать права и законные интересы других граждан, а также требования, которым должно отвечать жилое помещение. Воспроизводится и положение о недопустимости размещения в жилых помещениях промышленных производств и т.д.

В комментируемой статье называются такие пределы осуществления права собственности на жилое помещение, как необходимость использовать его только по назначению (ч. 1), недопустимость бесхозяйственного обращения с ним, необходимость соблюдения прав и законных интересов соседей, правил пользования жилыми помещениями, а также правил содержания общего имущества собственников помещений в многоквартирном доме (ч. 4).

Как уже отмечалось, пределы осуществления права собственности на жилые помещения очерчиваются не только ЖК РФ, но и иными актами, в том числе актами жилищного законодательства. Так, к компетенции Российской Федерации отнесено установление правил пользования жилыми помещениями (п. 13 ст. 12 ЖК). Они утверждаются уполномоченным Правительством РФ федеральным органом исполнительной власти (ч. 4 ст. 17 ЖК).

При нарушении установленных законодательством пределов осуществления права собственности на жилое помещение к нарушителям применяются различного рода санкции (начиная от штрафа и заканчивая лишением права собственности на жилое помещение) <1>.

———————————
<1> О пределах осуществления и ограничения права собственности на жилые помещения см. также: Крашенинников П.В. Право собственности и иные вещные права на жилые помещения. М.: Статут, 2000. С. 9 — 21.

3. В ч. 2 комментируемой статьи названы некоторые действия, которые может совершать собственник жилого помещения, реализуя принадлежащее ему правомочие распоряжения. Распоряжаясь своим жильем, собственник помимо действий, предусмотренных в ч. 2 этой статьи, может передать принадлежащее ему жилое помещение в залог, передать или подарить его и т.д.

Все действия, перечисленные в ч. 2 комментируемой статьи, объединяет то, что под ними подразумевается распоряжение своим жильем путем предоставления его кому-либо в пользование <1> (для проживания граждан).

———————————
<1> Хотя в Законе речь идет о передаче жилого помещения «во владение и (или) в пользование», думается, использование союза «или» неуместно. Никому не нужно жилье во владении, если нет права пользования. Невозможно пользоваться жильем, не владея им. По-видимому, в данном случае (в ч. 2 комментируемой статьи) ошибочно воспроизведено положение п. 2 ст. 671 ГК РФ.

Передача жилого помещения гражданину на основании договора найма регламентируется (ст. ст. 671, 673 — 688) <1>.

———————————
<1> С легкой руки П.В. Крашенинникова данный договор получил наименование «коммерческий наем». См.: Крашенинников П.В. Наем жилого помещения // Гражданский кодекс Российской Федерации. Часть вторая: Текст, комментарий, алфавитно-предметный указатель. М., 1996. С. 350 — 357.

Предоставление жилья по договору безвозмездного пользования осуществляется также по правилам, установленным ГК РФ (ст. ст. 689 — 701). Естественно, что при этом «работают» и жилищно-правовые нормы (о назначении жилого помещения (использование только для проживания), недопустимости нарушения прав и охраняемых законом интересов других граждан и т.д.).

Под предоставлением жилого помещения собственником другим лицам «на ином законном основании» можно понимать, в частности, передачу жилья в пользование на основании соглашений, законом не предусмотренных, но ему не противоречащих (см. ст. 10 ЖК и комментарий к ней).

В быту достаточно широко распространено словосочетание «аренда квартиры» в том случае, когда кто-либо «снимает жилье». Если перевести это на язык, понятный юристам, то окажется, что речь идет о коммерческом найме жилого помещения (ст. ст. 671, 673 — 688 ГК). В аренду жилье может передаваться только юридическим лицам (п. 2 ст. 671 ГК). При этом юридическое лицо — арендатор может использовать жилое помещение только для проживания граждан.

4. Любой собственник несет бремя содержания принадлежащего ему имущества, если иное не предусмотрено законом или договором (ст. 210 ГК). Это известное положение гражданского законодательства воспроизведено в ч. 3 комментируемой статьи. При этом, во-первых, осуществлена «привязка» к объекту жилищных прав. Собственник жилого помещения несет бремя его содержания. Во-вторых, собственникам квартир в многоквартирном доме принадлежат на праве общей долевой собственности общие помещения и несущие конструкции дома, механическое, электрическое, санитарно-техническое и иное оборудование за пределами или внутри квартиры, обслуживающее более одной квартиры (ст. 290 ГК и ст. 36 ЖК). Стало быть, собственники квартир несут также бремя содержания этого общего имущества (см. также ст. 39 ЖК и комментарий к ней). В-третьих, собственникам комнат в коммунальной квартире принадлежат на праве общей долевой собственности помещения в данной квартире, используемые для обслуживания более одной комнаты (ч. 1 ст. 41 ЖК). Естественно, на собственников комнат возлагается бремя содержания этих помещений (см. также ст. 43 ЖК и комментарий к ней). В-четвертых, указание ст. 210 ГК РФ о несении собственником бремени содержания своего имущества сопровождается оговоркой — «если иное не предусмотрено законом или договором». В комментируемой статье в соответствующем месте говорится о федеральном законе или договоре. Несмотря на кажущееся отличие, можно утверждать, что в ЖК РФ «дословно» воспроизводится положение ГК РФ. Гражданское законодательство относится к ведению Российской Федерации (ст. 71 Конституции). Понятно, что в ГК РФ под законом подразумевается только федеральный законодательный акт (п. 2 ст. 3). Жилищное законодательство находится в совместном ведении Российской Федерации и ее субъектов (ст. 72 Конституции). Жилищные отношения регулируются как федеральными законами, так и законами субъектов Федерации (см. ст. 5 ЖК и комментарий к ней). Но поскольку в комментируемой статье воспроизводится гражданско-правовая норма, то логично, что общее правило, в ней содержащееся, может быть изменено только федеральным законом (или договором), но не законом субъекта Федерации.

Собственник должен поддерживать жилое помещение в надлежащем состоянии, с тем чтобы оно соответствовало установленным требованиям, его можно было использовать для проживания и т.п. Собственники помещений в многоквартирном доме обязаны участвовать в расходах по содержанию общего имущества (ст. 39 ЖК). Аналогичную обязанность несет собственник комнаты в коммунальной квартире: он участвует в расходах по содержанию общего имущества в коммунальной квартире.

Сравнительно редко закон полностью отменяет общее правило о несении бремени содержания имущества его собственником и возлагает такое бремя на иное лицо. Так, если жилые помещения находятся в хозяйственном ведении государственных или муниципальных унитарных предприятий либо в оперативном управлении учреждений, то именно на эти субъекты возлагается обязанность содержать такие помещения. Иногда закон распределяет бремя содержания имущества между различными лицами. Например, наймодатель по договору социального найма обязан осуществлять капитальный ремонт жилого помещения (п. 3 ч. 2 ст. 65 ЖК). На нанимателя возлагается обязанность проведения текущего ремонта (п. 4 ч. 3 ст. 67 ЖК).

Договором можно перенести бремя содержания жилого помещения на иное лицо. Например, договором коммерческого найма жилого помещения может быть предусмотрена обязанность нанимателя осуществлять как капитальный, так и текущий ремонт жилого помещения. Однако усмотрение сторон договора, как правило, существенно ограничивается императивными нормами. Так, осуществление капитального ремонта жилого помещения, являющегося предметом договора социального найма, возлагается на наймодателя (п. 3 ч. 2 ст. 65 ЖК) и не иначе (нельзя изменить данное правило договором).

ЖК РФ. Ст.30. Права и обязанности собственника жилого помещения

Законы и кодексы » Жилищный кодекс Российской Федерации N 188-ФЗ » Раздел II. Право собственности и другие вещные права на жилые помещения » Глава 5. Права и обязанности собственника жилого помещения и иных проживающих в принадлежащем ему помещении граждан » Статья 30. Права и обязанности собственника жилого помещения

 

1. Собственник жилого помещения осуществляет права владения, пользования и распоряжения принадлежащим ему на праве собственности жилым помещением в соответствии с его назначением и пределами его использования, которые установлены настоящим Кодексом .

2. Собственник жилого помещения вправе предоставить во владение и (или) в пользование принадлежащее ему на праве собственности жилое помещение гражданину на основании договора найма, договора безвозмездного пользования или на ином законном основании, а также юридическому лицу на основании договора аренды или на ином законном основании с учетом требований, установленных гражданским законодательством , настоящим Кодексом.

3. Собственник жилого помещения несет бремя содержания данного помещения и, если данное помещение является квартирой, общего имущества собственников помещений в соответствующем многоквартирном доме, а собственник комнаты в коммунальной квартире несет также бремя содержания общего имущества собственников комнат в такой квартире, если иное не предусмотрено федеральным законом или договором.

4. Собственник жилого помещения обязан поддерживать данное помещение в надлежащем состоянии, не допуская бесхозяйственного обращения с ним, соблюдать права и законные интересы соседей, правила пользования жилыми помещениями, а также правила содержания общего имущества собственников помещений в многоквартирном доме.

5. Собственник жилого дома или части жилого дома обязан обеспечивать обращение с твердыми коммунальными отходами путем заключения договора с региональным оператором по обращению с твердыми коммунальными отходами. Под обращением с твердыми коммунальными отходами для целей настоящего Кодекса и иных актов жилищного законодательства понимаются сбор, транспортирование, обезвреживание, захоронение твердых коммунальных отходов.

 

Вопросы по теме:

Возмещение ущерба при заливе квартиры

В соответствии с п. 1 ст. 30 Жилищного кодекса РФ  собственник жилого помещения осуществляет права владения, пользования и распоряжения принадлежащим ему на праве собственности жилым помещением.

В случае если права владельца квартиры нарушаются повреждением его квартиры вследствие залития квартиры то в соответствии со ст. 1064 ГК РФ Вред, причиненный имуществу гражданина подлежит возмещению в полном объеме лицом, причинившим вред.

В 90% случаях виновниками залива оказываются граждане проживающие выше так как в соответствии с п. 3 ст. 30 ЖК РФ «Собственник жилого помещения несет бремя содержания данного помещения», а в соответствии с п. 4 ст. 30 ЖК РФ «Собственник жилого помещения обязан поддерживать данное помещение в надлежащем состоянии, не допуская бесхозяйственного обращения с ним, соблюдать права и законные интересы соседей, правила пользования жилыми помещениями, а также правила содержания общего имущества собственников помещений в многоквартирном доме.»

Однако бывают случаи когда виновниками залива квартиры оказываются управляющие компании в ведении которой находится содержание жилого дома, к примеру если залив квартиры произошел по причине по причине прорыва стояка или иного имущества находившегося в ведении управляющей компании.

Однако не всегда виновниками залития квартиры оказываются соседи сверху, к примеру причина залив мог возникнуть из-за прорыва батареи горячего водоснабжения, стояка, и т.п. Соответственно, причинитель вреда может быть иной например управляющая компания ответственная за содержание данного дома, поскольку вины соседей в этом может и не быть.

Юристы компании Юридическая Москва профессионально помогут вам разобраться в сложностях определения лица виновного в заливе квартиры.

Что нужно делать если произошел залив квартиры:

1. Зафиксировать сам факт залива квартиры, как это сделать:

  • Обратиться в управляющую компанию с требование составить Акт обследования квартиры (позаботьтесь  о том чтобы в нем было указано все имущество пострадавшее в результате залива, и обязательно чтобы была указана причина залива).
  • Сфотографировать все поврежденное имущество.
  • В некоторых случаях можно обратиться в полицию с целью фиксации повреждения имущества в результате залива квартиры.

2. После чего провести независимую экспертизу о стоимости восстановительного ремонта квартиры, (важно знать что экспертиза должна рассчитываться на дату залива и по ценам того региона где произошел залив)

Компания Юридическая Москва сотрудничает с несколькими экспертными организациями компетентными в проведении независимой экспертизы, в связи с чем наша компания может вести ваше дела с начала проведения экспертизы и до получения возмещения на ваш счет.

3. Обратиться с досудебным претензионным письмом к лицу ответственному за залив квартиры, данная процедура не обязательна однако есть вероятность того что можно будет получить денежные средства за залив квартиры без суда.

«Юристы компании Юридическая Москва могут профессионально составить досудебное претензионное письмо .

Грамотно составленное претензионное письмо увеличивает шансы разрешить вопрос в кратчайшие сроки без обращения в суд, так как лицо получившее данное письмо будет осознавать свою ответственность за залив и неизбежность взыскания с него стоимости восстановительного ремонта.»

4. Обратиться с исковым заявлением в суд с требование о взыскании ущерба причиненного в результате залива квартиры.

Для того что бы суд удовлетворил ваши требования нужно либо: Грамотно составить исковое заявление в котором должны быть указаны доказательства и статьи закона обосновывающие ваши требования, к исковому заявлению обязательно должны быть приложены следующие документы:
  • Документы подтверждающие право собственности на квартиру пострадавшего лица.
  • Акт обследования квартиры составленный управляющей компанией.
  • Независимую экспертизу о стоимости восстановительного ремонта.
  • В случае если виновником является сосед сверху документы подтверждающие что квартира принадлежит ему на праве собственности.
  • Оплаченную государственную пошлину при обращении в суд и т.д.

Имейте в виду что исковое заявление с приложением подается в суд по числу лиц участвующих в деле к примеру если ответчик 1 то два экземпляра для суда и ответчика, если ответчиков двое то 3 экземпляра 1 для суда и 2 для ответчиков.

Либо найти компетентного и грамотного юриста который грамотно составит исковое заявление, соберет все необходимые доказательства по делу и грамотно будет отстаивать ваши интересы в суде.

Юристы компании Юридическая Москва имеют большой опыт по взысканию ущерба в результате залива квартиры в связи с чем могут дать объективную оценку рассматриваемому делу, грамотно выстроить позицию в суде и взыскать причиненный материальный ущерб.

 

 

Что должны делать собственники, если их дом исключили из реестра лицензий у управляющей компании?

Что должны делать собственники, если их дом исключили из реестра лицензий у управляющей компании?

В соответствии с ч. 6 ст. 198 ЖК РФ, исключение сведений о многоквартирном доме из реестра лицензий субъекта Российской Федерации является основанием для прекращения лицензиатом деятельности по управлению таким домом в порядке, установленном статьей 200 настоящего Кодекса.

В течение пятнадцати дней со дня получения уведомления от органа государственного жилищного надзора об исключении сведений о многоквартирном доме из реестра лицензий субъекта Российской Федерации, о прекращении действия лицензии, о ее аннулировании орган местного самоуправления созывает общее собрание собственников помещений в многоквартирном доме для решения вопроса о выборе способа управления таким домом (часть 4 статьи 200 ЖК РФ).

Таким образом, орган местного самоуправления в течение 15 дней организовывает общее собрание собственников помещений для решения вопроса о выборе способа управления. С учетом этого, собственники помещений должны выбрать один из трех способов управления (управление УК, создание ТСЖ, непосредственный способ, при условии количество квартир не превышает 30).

Если собственники помещений не примут решение, орган местного самоуправления обязан провести конкурс в течение 1 месяца со дня его объявления.

Если же и в результате конкурсных мероприятий управляющая организация не определится, то орган местного самоуправления должен самостоятельно своим решением определить такую организацию.

Так, 12 января 2019 года вступили в силу изменения, внесенные в Жилищный кодекс Российской Федерации Федеральным законом от 31.12.2017 № 485-ФЗ «О внесении изменений в Жилищный кодекс Российской Федерации и отдельные законодательные акты Российской Федерации», в соответствии с которыми управление многоквартирным домом, в отношении которого собственниками помещений в многоквартирном доме не выбран способ управления таким домом в порядке, установленном Жилищным кодексом Российской Федерации, или выбранный способ управления не реализован, не определена управляющая организация, в том числе по причине признания несостоявшимся открытого конкурса по отбору управляющей организации, проводимого органом местного самоуправления в соответствии с Жилищным кодексом Российской Федерации, осуществляется управляющей организацией, имеющей лицензию на осуществление предпринимательской деятельности по управлению многоквартирными домами, определенной решением органа местного самоуправления в порядке и на условиях, которые установлены Правительством Российской Федерации.

Порядок и условия определения управляющих организаций содержатся в новых правилах, утвержденных постановлением Правительства РФ от 21.12.2018 № 1616.

Что касается вопроса  обслуживания дома до выбора новой управляющей организации либо реализации другого способа упарвления, то эта обязанность продолжает осуществлять действующая управляющая компания до того момента, пока не будет выбрана другая управляющая организация или пока не будет изменен способ управления домом. При этом данная организация продолжает нести полную ответственность за качество предоставляемых услуг собственникам помещений.


Кто может быть инициатором общего собрания собственников помещений в многоквартирном доме?

Инициатором общего собрания может быть любой собственник помещения в многоквартирном доме (Жилищный кодекс, ст. 45, ч. 4) или группа собственников (часто такая группа называет себя инициативной группой).

Начиная с 30 июня 2015 года собственники помещений, обладающие не менее чем 10 процентами голосов от общего количества голосов собственников помещений в многоквартирном доме, вправе обратиться в письменной форме в управляющую организацию или правление товарищества собственников жилья, жилищного или жилищно-строительного кооператива, иного специализированного потребительского кооператива для организации проведения общего собрания собственников помещений в многоквартирном доме (Жилищный кодекс, ст. 45, ч. 6). При этом именно собственники формулируют вопросы, подлежащие внесению в повестку дня собрания. Поэтому, хотя мероприятия, необходимые для проведения общего собрания, осуществляет управляющая организация или правление ТСЖ, жилищного кооператива, фактическими инициаторами общего собрания являются собственники помещений.

Начиная с 1 января 2016 г. инициатором общего собрания может быть управляющая организация, осуществляющая управление многоквартирным домом по договору управления (Жилищный кодекс, ст. 45, ч. 7).

Жилищный кодекс определил обязанность органов местного самоуправления в отдельных случаях созвать общее собрание собственников помещений в многоквартирном доме. Например, общее собрание для решения вопроса о выборе способа формирования фонда капитального ремонта созывается органом местного самоуправления не позднее чем за месяц до окончания срока, установленного для принятия такого решения собственниками помещений, если такое решение не было принято самими собственниками ранее (Жилищный кодекс, ст. 170, ч. 6).

Инициатором общего собрания может быть владелец специального счета, на котором формируется фонд капитального ремонта многоквартирного дома, в случае если необходимо принятие решения общего собрания о порядке погашения задолженности по уплате взносов на капитальной ремонт (Жилищный кодекс, ст. 173, ч. 9).

Принципы и применения жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии в клинической биохимии

Clin Biochem Rev. 2009 Февраль; 30 (1): 19–34.

Патология VCGS, Детский научно-исследовательский институт Мердока, Королевская детская больница, Мельбурн, Вик. 3052, Австралия

Содержание статей или рекламных объявлений в журнале «Клинический биохимик — обзоры» не следует рассматривать как официальные заявления, оценки или одобрения со стороны AACB, его официальных органов или его агентов. Изложения мнения в публикациях AACB принадлежат авторам.Печатная публикация утверждена — PP255003 / 01665. Авторское право © 2005 Австралазийская ассоциация клинических биохимиков, Inc. Никакие литературные материалы в «Клиническом биохимике — обзоры» не должны воспроизводиться, храниться в поисковой системе или передаваться в любой форме электронными или механическими средствами, фотокопированием или записью без разрешения. Запросы на это следует направлять редактору. ISSN 0159 — 8090Эта статья цитируется в других статьях PMC.

Abstract

Жидкостная хроматография-масс-спектрометрия (ЖХ-МС) в настоящее время является рутинным методом с развитием ионизации электрораспылением (ESI), обеспечивающей простой и надежный интерфейс.Его можно применять к широкому кругу биологических молекул, а использование тандемного МС и внутренних стандартов стабильных изотопов позволяет разрабатывать высокочувствительные и точные анализы, хотя для минимизации эффектов подавления ионов требуется некоторая оптимизация метода. Высокая скорость сканирования обеспечивает высокую степень мультиплексирования, и многие соединения могут быть измерены за один аналитический цикл. С развитием более доступных и надежных инструментов ЖХ-МС начинает играть важную роль в нескольких областях клинической биохимии и конкурировать с традиционной жидкостной хроматографией и другими методами, такими как иммуноанализ.

Введение

Сочетание МС с хроматографическими методами всегда было желательно из-за чувствительности и высокоспецифической природы МС по сравнению с другими хроматографическими детекторами. Связь газовой хроматографии с МС (ГХ-МС) была достигнута в 1950-х годах с помощью коммерческих инструментов, доступных с 1970-х годов. Относительно дешевые и надежные системы ГХ-МС в настоящее время являются особенностью многих лабораторий клинической биохимии и незаменимы в некоторых областях, где требуется анализ сложных смесей и однозначная идентификация. E.грамм. скрининг образцов мочи на наличие врожденных нарушений обмена веществ или наркотиков. Соединение МС с ЖХ (ЖХ-МС) было очевидным продолжением, но прогресс в этой области был ограничен в течение многих лет из-за относительной несовместимости существующих источников ионов МС с непрерывным потоком жидкости. Было разработано несколько интерфейсов, но они были громоздкими в использовании и ненадежными, поэтому внедрение в клинические лаборатории было очень ограниченным. Эта ситуация изменилась с разработкой Fenn источника ионов с электрораспылением в 1980-х годах. 1 Производители быстро разработали инструменты, оснащенные источниками электроспрея, которые оказали большое влияние на биохимию белков и пептидов. Фенн был удостоен Нобелевской премии в 2002 году вместе с Коити Танака, который разработал матричную лазерную десорбционную ионизацию, еще один чрезвычайно полезный метод ионизации с помощью МС для анализа биологических молекул. 2

К середине 1990-х годов цена и характеристики инструментов ЖХ-МС улучшились настолько, что лаборатории клинической биохимии смогли воспользоваться преимуществами новой технологии.Биохимическая генетика была одной из первых областей, сделавших это, и анализ проб высушенной крови новорожденных на наличие ряда врожденных нарушений метаболизма был одним из первых ее приложений. 3 Существует ряд других клинических применений ЖХ-МС, и этот метод более широко применим, чем ГХ-МС, благодаря более широкому диапазону биологических молекул, которые могут быть проанализированы, и более широкому использованию ЖХ-разделения в клинических лабораториях. Причины выбора ЖХ-МС вместо ЖХ с обычными детекторами по существу те же, что и для ГХ-МС, а именно высокая специфичность и способность работать со сложными смесями.Применение МС с электрораспылением было рассмотрено в журнале The Clinical Biochemist Reviews в 2003 году. 4 В текущем обзоре основное внимание уделяется принципам ЖХ-МС, практическим соображениям при настройке анализов ЖХ-МС и обзору некоторых основных приложений в клинической биохимии. , концентрируясь на малых молекулах.

Приборы для масс-спектрометрии

Масс-спектрометры работают путем преобразования молекул анализируемого вещества в заряженное (ионизированное) состояние с последующим анализом ионов и любых фрагментных ионов, которые образуются в процессе ионизации, на основе отношения их массы к заряду ( м / з ).Доступно несколько различных технологий как для ионизации, так и для ионного анализа, что приводит к появлению множества различных типов масс-спектрометров с различными комбинациями этих двух процессов. На практике некоторые конфигурации гораздо более универсальны, чем другие, и следующие описания сосредоточены на основных типах источников ионов и масс-анализаторов, которые могут использоваться в системах ЖХ-МС в клинических лабораториях.

Источники ионов

Источник ионизации электрораспылением

Компания Fenn разработала ESI в виде надежного источника ионов, способного взаимодействовать с ЖХ, и продемонстрировала его применение для ряда важных классов биологических молекул. 1 ESI хорошо работает с умеренно полярными молекулами и, таким образом, хорошо подходит для анализа многих метаболитов, ксенобиотиков и пептидов. Жидкие образцы прокачиваются через металлический капилляр, в котором поддерживается напряжение от 3 до 5 кВ, и распыляются на кончике капилляра с образованием тонкой струи заряженных капель. Капилляр обычно расположен перпендикулярно входу в масс-спектрометр или вне его оси, чтобы минимизировать загрязнение. Капли быстро испаряются под действием тепла и сухого азота, а остаточный электрический заряд на каплях передается аналитам. 5 Ионизированные аналиты затем переносятся в высокий вакуум масс-спектрометра через серию небольших отверстий и фокусирующих напряжений. Источник ионов и последующая ионная оптика могут использоваться для обнаружения положительных или отрицательных ионов, и может выполняться переключение между этими двумя режимами в рамках аналитического цикла.

В нормальных условиях ESI считается «мягким» источником ионизации, что означает, что аналиту передается относительно небольшая энергия и, следовательно, происходит небольшая фрагментация.Это отличается от других источников ионов МС, например источника электронного удара, обычно используемого в ГХ-МС, который вызывает обширную фрагментацию. Можно увеличить фрагментацию ESI «в источнике» путем увеличения напряжения в источнике, чтобы увеличить столкновения с молекулами азота. Это использовалось в анализах ЖХ-МС для идентификации компонентов с общими структурными особенностями, например. гликаны в гликопептидах могут быть фрагментированы прямо в источнике с получением 204 m / z репортерных ионов. Эта особенность была использована для идентификации гликопептидов в триптических перевариваемых белках, чтобы охарактеризовать структуру гликанов. 6 Хотя это полезно для некоторых аналитов, фрагментация в источнике ограничена для других, и требуются более последовательные методы фрагментации, такие как диссоциация, вызванная столкновением (см. Ниже), чтобы вызвать обширную фрагментацию, необходимую для структурных исследований и тандемного МС.

Небольшие молекулы (≈ <500 Да) с одной функциональной группой, способные нести электрический заряд, дают преимущественно однозарядные ионы. Это может включать добавление протона к аналиту (M + H + ), когда источник ионов работает в режиме положительных ионов, или потерю протона (M-H ) при работе в режиме отрицательных ионов.Аддукция катионов (например, M + NH 4 + , M + Na + , M + K + ) и анионов (например, M + формиат , M + ацетат ) может происходить, когда соли присутствуют. Более крупные молекулы и молекулы с несколькими функциональными группами, несущими заряд, такие как белки и пептиды, могут проявлять многократный заряд, в результате чего образуются ионы, такие как M + 2H 2+ , M + 3H 3+ и т. Д. Для белков это приводит к оболочка из ионов с разным зарядовым состоянием. Это свойство можно использовать для точного определения аналитов с высокой молекулярной массой, включая белки до 100 кДа, на масс-спектрометрах, которые сканируют только до 4000 m / z .В самом деле, необычно обнаружить ионы со значениями m / z выше этого.

В то время как ESI является наиболее широко используемым источником ионов для биологических молекул, нейтральные и низкополярные молекулы, такие как липиды, не могут быть эффективно ионизированы этим методом. Ниже описаны два альтернативных метода ионизации, разработанные для таких аналитов.

Источник химической ионизации при атмосферном давлении

При химической ионизации при атмосферном давлении (APCI), как и в случае с ESI, жидкость прокачивается через капилляр и распыляется на наконечнике.Коронный разряд происходит около конца капилляра, первоначально ионизирующего газа и молекул растворителя, присутствующих в источнике ионов. Затем эти ионы вступают в реакцию с аналитом и ионизируют его посредством переноса заряда. Этот метод полезен для небольших термически стабильных молекул, которые плохо ионизируются ESI. 7 , 8 Например, свободные стероиды плохо ионизируются при использовании ESI, потому что они являются нейтральными и относительно неполярными молекулами, лишенными функциональной группы, способной нести заряд.Поэтому APCI использовался для повышения чувствительности ЖХ-МС анализа свободных стероидов. 9 11 В отличие от ESI, множественная зарядка не является особенностью APCI, и преобладают однозарядные ионы. Доступны одиночные ионные источники, способные переключаться между APCI и ESI. Этот метод также применялся к липидам и жирорастворимым витаминам. 7 , 12 16

Фотоионизация при атмосферном давлении

При фотоионизации при атмосферном давлении (APPI) фотоны используются для возбуждения и ионизации молекул после распыления.Энергия фотонов выбирается так, чтобы минимизировать одновременную ионизацию растворителей и газов-источников ионов. Метод также дает преимущественно однозарядные ионы и использовался для анализа нейтральных соединений, таких как стероиды 17 , 18 , и был пересмотрен. 19

Масс-анализаторы

Квадрупольные анализаторы

Квадрупольный анализатор состоит из четырех параллельных металлических стержней (). Комбинация постоянного и переменного (радиочастотного) напряжения позволяет передавать узкую полосу значений m / z вдоль оси стержней.Изменяя напряжения во времени, можно сканировать в диапазоне m / z значений, в результате чего получается масс-спектр. Большинство квадрупольных анализаторов работают при скорости <4000 m / z и скорости сканирования до 1000 m / z в секунду или более являются обычными. Обычно они работают с разрешением на единицу массы, что означает, что точность измерения массы редко бывает лучше 0,1 m / z .

Тройной квадрупольный масс-спектрометр. Q1 и Q3 действуют как фильтры масс и могут независимо фиксироваться, сканироваться или ступенчато.Q2 — это коллизионная ячейка, содержащая инертный газ низкого давления.

В качестве альтернативы сканированию, квадруполи можно настроить на мониторинг определенного значения m / z , затем настроить на мониторинг другого значения m / z и так далее. Это достигается ступенчатым изменением напряжений. Этот метод полезен для улучшения пределов обнаружения целевых аналитов, поскольку больше времени детектора можно посвятить обнаружению конкретных ионов вместо сканирования ионов, которые не образуются аналитом.Пошаговое переключение может быть выполнено за несколько миллисекунд, а панель значений m / z может быть пошагово пройдена для обнаружения нескольких аналитов.

Ионы могут подвергаться фрагментации в результате столкновений с инертным газом, например азотом или аргоном. Этот процесс называется диссоциацией, вызванной столкновением. Одним из типов столкновительной ячейки является квадруполь, который был разработан для поддержания низкого давления столкновительного газа, необходимого для диссоциации, и передачи большей части образующихся ионов-фрагментов.Особенно полезную конфигурацию масс-спектрометра можно получить, поместив коллизионную ячейку между двумя квадрупольными масс-анализаторами. Эта комбинация называется тройным квадрупольным масс-спектрометром и является примером тандемной масс-спектрометрии, в которой независимо применяются две или более стадии масс-анализа (). Преимущество тандемной масс-спектрометрии заключается в значительно большей специфичности анализа по сравнению с одностадийным масс-анализом. Например, 25-гидрокси-витамин D3 производит основной ион M + H + 401 m / z во время ESI, который теряет воду во время индуцированной столкновением диссоциации с образованием основного иона-продукта 383 m / z . 12 Высокоспецифичное обнаружение 25-гидрокси-витамина D3 достигается, если первый и третий квадруполи настроены на пропускание ионов только 401 и 383 m / z соответственно. Этот метод называется мониторингом одной реакции, а фрагментация обозначается 401> 383. Будут обнаружены только аналиты с такой комбинацией ионов-предшественников и продуктов. В сложном биологическом образце могут быть другие компоненты, которые производят ион-предшественник с m / z 401 во время ESI, но существует малая вероятность того, что они также будут фрагментироваться до иона-продукта 383 m / z .

Первый и третий квадруполи также могут быть одновременно переведены на разные значения m / z , и могут быть созданы панели ионных пар предшественник / продукт для специфического обнаружения большого количества целевых аналитов. Этот процесс, называемый мониторингом множественных реакций (MRM), обычно используется в анализах ЖХ-МС. Для тройных квадрупольных масс-спектрометров доступен ряд других полезных режимов работы, которые перечислены в. Большинство инструментов имеют возможность сбора данных, зависящего от данных, что означает, что можно переключаться между различными режимами работы в рамках цикла на основе получаемых результатов.Например, если конкретный сигнал MRM обнаруживается выше установленного порогового значения, затем может быть выполнено сканирование ионов продукта для подтверждения идентичности.

Таблица

Режимы работы трехквадрупольных масс-спектрометров.

структурно
Название Первый квадруполь Третий квадруполь Приложения
Сканирование продукта Фиксированное Сканированное Структурные исследования , определение спектрального соответствия , стандартное подтверждение , спектральное соответствие Сканирование предшественников Сканирование Фиксированное Обнаружение структурно связанных аналитов, которые производят общий фрагментарный ион
Сканирование нейтральной потери (или усиления) Сканировано Сканировано с фиксированным смещением относительно первого квадруполя Обнаружение связанные аналиты, которые устраняют (или получают) общую нейтральную молекулу при столкновении
Мониторинг множественных реакций Фиксированный Фиксированный Высокочувствительное обнаружение панели целевых аналитов

Сканирование ионов продукта не только содержит структурная информация об аналите, но они также действуют как «отпечатки пальцев», которые можно использовать для подтверждения личности с большой уверенностью e.грамм. если требуется подтверждение незаконного наркотика. Этот процесс аналогичен тому, который используется для идентификации GC-MS. Однако внешний вид сканирования ионов продукта значительно различается между различными приборами, и, в отличие от ГХ-МС, стандартизовать условия для разных платформ инструментов труднее. 20 Таким образом, хотя можно запускать стандарты и создавать внутреннюю библиотеку спектров ионов-продуктов для компьютерного поиска, трудно использовать эту библиотеку на других приборах.Это препятствовало созданию больших библиотек, аналогичных тем, которые широко доступны для поиска на основе ГХ-МС.

Квадрупольные анализаторы в конфигурации с одним или тремя квадруполями широко используются в приложениях ЖХ-МС в клинической биохимии благодаря простоте сканирования и получению качественных количественных данных. Доступны несколько других типов анализаторов, и некоторые из наиболее часто встречающихся из них описаны ниже.

Анализаторы времени пролета

Анализатор времени пролета (TOF) работает путем ускорения ионов с помощью высокого напряжения. 21 Скорость ионов и, следовательно, время, необходимое для прохождения по пролетной трубе до детектора, зависит от их значений m / z . Если начальное ускоряющее напряжение импульсное, выходной сигнал детектора как функция времени может быть преобразован в масс-спектр. Анализатор TOF может очень быстро регистрировать спектры с высокой чувствительностью. Он также имеет высокую точность определения массы, что позволяет определять молекулярные формулы для небольших молекул. 22

Анализаторы ионных ловушек

Анализаторы ионных ловушек используют три гиперболических электрода для захвата ионов в трехмерном пространстве с использованием статических и радиочастотных напряжений. 23 Затем ионы последовательно выбрасываются из ловушки на основе их значений m / z для создания масс-спектра. В качестве альтернативы, конкретный ион может быть изолирован в ловушке путем приложения возбуждающего напряжения, в то время как другие ионы выбрасываются. В ловушку также можно ввести инертный газ, чтобы вызвать фрагментацию. Интересной особенностью этих анализаторов с ионной ловушкой является способность фрагментировать и выделять ионы несколько раз подряд до получения окончательного масс-спектра, что приводит к так называемым возможностям MS n . 24

Гибридные анализаторы

Также были разработаны тандемные масс-спектрометры, в которых используются комбинации различных масс-анализаторов. Ниже описаны две конфигурации, которые особенно полезны для ЖХ-МС. Третий квадруполь тройного квадрупольного МС может быть заменен анализатором TOF для создания гибридного квадрупольного времяпролетного масс-спектрометра (QTOF). 25 , 26 Инструменты QTOF широко используются в области протеомики, но имеют более ограниченные функции сканирования, чем инструменты тройного квадруполя.Также возможно разработать инструменты, в которых третий квадруполь тройного квадрупольного МС работает в другом режиме, в котором ионы захватываются и затем последовательно выбрасываются на основе их значений m / z . Это известно как линейная ионная ловушка, а общую конфигурацию часто называют прибором QTrap. 27 Концевой квадруполь можно переключать между режимом ионной ловушки и обычным квадрупольным режимом, поэтому прибор сочетает в себе полезные функции как тройного квадрупольного анализатора, так и анализатора ионной ловушки.При использовании в режиме ионной ловушки чувствительность сканирования ионов продукта значительно повышается, и внутри ионной ловушки может быть вызвана дополнительная фрагментация, что позволяет провести дополнительную стадию фрагментации и масс-анализа (MS 3 ).

Подавление ионов

Одновременное присутствие более чем одного компонента в ионном источнике может привести к конкуренции в процессе ионизации и последующему снижению сигналов МС, т.е. сигнал компонента в смеси будет меньше, чем сигнал чистый компонент в той же концентрации.Это явление называется ионным подавлением и может ограничивать предельную чувствительность любого анализа ЖХ-МС. Соли и другие компоненты в образцах плазмы, сыворотки и мочи являются особым ограничением для методов прямого введения. Буферы и другие добавки подвижной фазы также являются источниками подавления.

Сравнение откликов площади пиков для чистых стандартов, калибраторов, изготовленных в подвижной фазе, образцов с добавками и экстрактов образцов с добавками, можно использовать для изучения эффектов подавления ионов.Различные компоненты матрицы (например, лекарственные препараты, физиологические изменения в уровнях эндогенных метаболитов) могут вызывать различия в подавлении между разными образцами, что приводит к ненадежным количественным результатам. Если не используются внутренние стандарты стабильных изотопов (см. Ниже), необходимо применять стратегии подготовки образцов, чтобы минимизировать эти источники переменного подавления. Были рассмотрены причины подавления ионов и стратегии оценки и минимизации его влияния на результаты. 28 30

Методы прямого ввода

При использовании высокоспецифичного детектирования, такого как тандемный МС, часто можно напрямую вводить образцы в ионный источник без какого-либо хроматографического разделения и измерять аналиты в сложной матрице .Обычно это делается с помощью мониторинга нескольких реакций для аналитов и внутренних стандартов, и его преимущество заключается в сокращении времени анализа, обычно до двух минут или меньше. В наиболее экстремальной форме образцы иногда можно просто разбавить внутренними стандартами и проанализировать, так называемые методы «разбавить и отстрелить». Этот подход использовался для анализа образцов мочи, 31 , но его труднее применить к плазме и другим образцам с высоким содержанием белка. Большинство анализов с прямым впрыскиванием выигрывают от той или иной формы подготовки проб, которая удаляет компоненты матрицы, такие как белки и соли.Даже после удаления этих компонентов большинство биологических образцов все еще содержат сложную смесь компонентов, а эффекты подавления ионов обычно ограничивают подход прямого введения аналитов с относительно высокими концентрациями. Пределы обнаружения сильно зависят от природы анализируемого вещества, его фрагментации и матрицы образца, но, как правило, трудно обнаружить аналиты при концентрации <0,1 мкмоль / л с использованием методов прямого впрыска. Еще одним ограничением методов прямого впрыска является невозможность различить изомеры e.грамм. изомерные аминокислоты лейцин, изолейцин и алло -изолейцин имеют очень схожие спектры и не могут быть дифференцированы во время скрининга пятен крови новорожденных с использованием тандемной MS с прямой инъекцией. 32

Рекомендации по жидкостной хроматографии

Современные источники ионов способны работать с широким диапазоном скоростей потока и составов подвижной фазы, поэтому существующие разделения ЖХ часто можно напрямую связать с масс-спектрометром. Однако ряд факторов может повлиять на качество данных МС, и может быть желательна некоторая модификация разделения ЖХ для улучшения характеристик анализа.

Скорость потока

В то время как стандартные источники ESI обычно могут работать со скоростью потока до 1 мл / мин, более низкие скорости потока в диапазоне от 0,05 до 0,2 мл / мин приводят к повышению чувствительности. Поэтому колонки диаметром 1,0 или 2,1 мм хорошо подходят для прямого соединения с этими ионными источниками. Преобразование колонок с 4,6 мм на 1,0 или 2,1 мм, как правило, легко управляемо и предсказуемо, а результирующее снижение потребления подвижной фазы является полезным побочным преимуществом. Еще более высокая чувствительность и разрешение могут быть получены с капиллярными колонками и расходом менее мкл / мин.Эти разделения обычно более сложны, поскольку требуются различные источники ионов и насосы LC, а также требуется осторожность при подключении колонок. Эти разделения полезны в области протеомики, где требуется высокая чувствительность и разрешение для идентификации как можно большего числа компонентов. Однако они, вероятно, менее подходят для рутинной клинической лабораторной работы.

Подвижная фаза

Типичные растворители, используемые в ЖХ с обращенной и нормальной фазой (например, вода, ацетонитрил, метанол, этанол, хлороформ), совместимы с ESI.Следует отметить, что сорт растворителя (включая воду), который подходит для обычного разделения ЖХ, может не всегда подходить для разделения на основе ЖХ-МС, например растворитель может быть прозрачным для УФ-излучения до 210 нм, но может содержать следы соединений, влияющих на качество измерений ЖХ-МС. Например, одно исследование обнаружило большие различия между товарными сортами метанола. 33

Следует избегать использования буферов, содержащих неорганические ионы, такие как фосфат и ацетат натрия.Они вызывают значительное подавление ионов, могут создавать MS-аддукты натрия и калия и могут быстро загрязнять источник ионов. Как правило, возможна замена буферов, более совместимых с МС, таких как буферы на основе ацетата аммония, формиата аммония или бикарбоната аммония. Даже в этом случае эти буферы по-прежнему вызывают подавление ионов, поэтому концентрация используемого буфера должна быть минимальной, необходимой для получения удовлетворительной хроматографии. Реагенты для образования пары ионов, такие как трифторуксусная кислота и другие фторированные карбоновые кислоты, также приводят к подавлению ионов, поэтому их концентрации также должны быть минимизированы, насколько это возможно.

Более высокое содержание органических веществ в подвижной фазе может привести к повышению эффективности ионизации в ESI, и это может повлиять на выбор режима разделения. Например, полярные молекулы плохо удерживаются на колонках с обращенной фазой и элюируются в начале хроматограммы с низким содержанием органических веществ. Это приведет к относительно низкой эффективности ионизации, и полярные помехи с большей вероятностью будут совместно элюироваться в этой области, вызывая подавление ионов. Одним из способов преодоления этого является использование хроматографии гидрофильного взаимодействия (HILIC), при которой полярные аналиты удерживаются и элюируются с более высоким содержанием органических веществ в подвижной фазе. 34 , 35

Разрешение и пропускная способность

Базовое разделение пиков обычно требуется в обычных ЖХ с УФ-детектированием из-за неспецифической природы детектора, особенно при использовании длин волн ниже 250 нм. Напротив, если пики имеют независимые сигналы МС, полное хроматографическое разделение при ЖХ-МС не требуется. Поэтому в анализах ЖХ-МС часто используются более короткие колонки с более низким разрешением и, следовательно, более короткое время анализа, хотя эффекты подавления ионов могут быть ограничением.Защитные колонны иногда могут обеспечить достаточное отделение от помех. Другой подход, используемый для ускорения аналитического процесса, заключается в использовании коротких колонок с небольшими размерами частиц (<2 мкм) и специальных насосных систем высокого давления (так называемая сверхэффективная ЖХ). 36 38 Эти колонки также способны генерировать хроматограммы высокого разрешения с лучшим соотношением сигнал / шум, чем колонки с более крупными размерами частиц. 39

Хроматографическое разрешение также влияет на скорость сканирования масс-спектрометра.Для достижения точной интеграции желательно иметь по крайней мере 10 сканирований по хроматографическому пику. Поэтому может возникнуть необходимость в использовании высоких скоростей сканирования с высоко разрешенными пиками, что может снизить чувствительность при мониторинге нескольких ионов. Это можно до некоторой степени минимизировать, разделив хроматограмму на меньшие окна и используя меньшие панели ионов, специфичных для анализируемых веществ, элюируемых в этих окнах.

Количественное определение

Как правило, трудно выполнить количественные определения с использованием абсолютных откликов МС.Это происходит из-за большого количества факторов, которые влияют на абсолютный отклик МС, таких как чистота источника ионов, ионной оптики и ячейки столкновений, подавление ионов, скорость потока источника ионов, давление ячейки столкновения и предельный вакуум МС. Все эти факторы трудно контролировать, и, как следствие, абсолютные ответы МС подвержены значительным ежедневным колебаниям. Поэтому для получения надежных и точных количественных результатов обычно требуются внутренние стандарты.Стабильные изотопные версии аналита являются идеальными внутренними стандартами, поскольку они имеют почти идентичные химические свойства, но легко различимы во время МС. Кроме того, они корректируют любые потери или неэффективность в процессе пробоподготовки () и корректируют подавление ионов. Этот метод называется разбавлением стабильных изотопов и позволяет проводить очень точные и точные анализы. По этим причинам методы ЖХ-МС с разведением стабильных изотопов часто подходят в качестве эталонных методов.Рисунок 2 показывает, что количественный анализ без калибровки возможен, если известно количество добавленного внутреннего стандарта. Это делается в некоторых анализах, где производство калибраторов не является прямым, например образцы сухих пятен крови. Однако этот подход основан на 100% чистоте внутреннего стандарта стабильного изотопа и такой же молярной чувствительности, что и аналит. Для получения точных результатов по-прежнему требуются калибровочные кривые, отображающие соотношение отклика аналита: внутреннего стандарта в зависимости от концентрации аналита.Были рассмотрены соображения по использованию и выбору внутренних стандартов стабильных изотопов. 40 , 41

Принцип разбавления стабильными изотопами. В начале анализа добавляют четыре нмоля внутреннего стандарта, фиксируя соотношение внутренний стандарт: аналит (в данном случае 1: 2). Аналит и внутренний стандарт теряются на последующих этапах обработки, но соотношение остается прежним. ЖХ-МС = жидкостная хроматография-масс-спектрометрия.

Оптимизация метода

При настройке анализа ЖХ-МС необходимо принять во внимание и оптимизировать значительное количество условий и параметров.Фактические условия сильно зависят от природы анализируемого вещества и разделения ЖХ, что затрудняет определение общих условий. Каждый аналит требует индивидуальной оптимизации. Хотя опубликованные методы являются ценной отправной точкой, эффективность анализа и оптимальные условия могут сильно различаться для разных инструментов и матриц образцов. Чувствительность сильно зависит от используемого инструмента и условий анализа. Производители приборов постоянно улучшают чувствительность своих масс-спектрометров и обычно предлагают ряд моделей с разной чувствительностью.Поэтому важно оценить, обладает ли прибор необходимой чувствительностью для достижения желаемых пределов обнаружения.

Природа анализируемого вещества в значительной степени определяет оптимальный метод ионизации и используемую полярность. Обнаружение некоторых аналитов также можно улучшить за счет дериватизации. 42 44 Например, свободные стероиды дают относительно слабые ответы при использовании ESI, потому что у них отсутствует функциональная группа, способная нести заряд. Кетогруппа кетостероидов, таких как 17α-гидроксипрогестерон, может быть модифицирована группами, которые дают гораздо более высокую реакцию на электрораспыление, что приводит к более низким пределам обнаружения. 45

Параметры источника ионов и энергия столкновения могут быть оптимизированы во время непрерывной инфузии разбавленного раствора аналита, предпочтительно в той же подвижной фазе, которая используется для разделения ЖХ. Выбор иона фрагмента для мониторинга требует некоторого размышления, поскольку наиболее распространенный фрагмент не всегда может быть лучшим выбором. Если встречаются другие важные ионы-фрагменты, рекомендуется также оценить их, поскольку они могут фактически обеспечить более чистые хроматограммы с превосходным соотношением сигнал / шум. Также рекомендуется контролировать второй ион-фрагмент, чтобы проверить возможные помехи.Если присутствует интерференция, соотношение двух фрагментных ионов отличается от стандартного.

Некоторые аспекты оптимизации метода проиллюстрированы на рисунке 3 на примере измерения метилмалоната в тканях мышей. 46 , 47 Дериватизация с образованием бутиловых эфиров была использована для повышения чувствительности. Некоторая аддукция аммония (248 m / z ) из ​​ацетатного буфера аммония, используемого для разделения ЖХ, была очевидна при однократном МС (), но M + H + (231 m / z ) был наиболее распространенным ионом и использовался. для тандемных МС.Затем напряжения источника ионов и энергия столкновения были оптимизированы для получения иона-фрагмента 119 m / z в спектре ионов-продуктов (). Для ЖХ-МС MRM 231> 119 и аналогичные 234> 122 ( 2 H 3 -метилмалонат внутренний стандарт) контролировали для количественного определения метилмалоната. Второй MRM для метилмалоната (231> 175) также контролировался в качестве проверки на наличие помех (). Соотношение ответов MRM 231> 119 и 231> 175 для пика метилмалоната при 9.46 минут были аналогичны спектру иона продукта, тогда как такое же соотношение для пика сукцината на 9,23 минуте было совершенно другим.

Пример анализа метилмалоната в почках мыши методом жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС). Образцы были модифицированы бутилированием для повышения чувствительности. A : одиночный МС-спектр метилмалоната (буфер ацетата аммония M + H. Обратите внимание на присутствие M + NH 4 + = 231) в + = 248. B : тандемный масс-спектр метилмалоната. C : Хроматограммы мониторинга множественных реакций (MRM) метилмалоната (231> 119 и 231> 175) и внутреннего стандарта 2 H 3 -метималоната (234> 122). Небольшой пик на 9,23 мин обусловлен сукцинатом, изомером метилмалоната.

Ранняя часть хроматограмм с обращенной фазой часто содержит большое количество солей и других потенциальных загрязнителей. Отведение этой части хроматограммы в отходы может быть полезным для минимизации загрязнения источника ионов при анализе «грязных» образцов.При использовании высокоспецифичного целевого анализа, такого как MRM, присутствие этих и других компонентов в образце обычно не очевидно, поскольку хроматограммы часто содержат один хорошо разрешенный пик с минимальным шумом базовой линии. Это может заставить аналитика подумать, что образцы чище, чем они есть на самом деле, когда на самом деле могут присутствовать значительные количества материала, элюирующего совместно с представляющим интерес аналитом, что вызывает подавление ионов и плохие пределы обнаружения. Подавление ионов можно оценить путем сравнения абсолютных откликов внутреннего стандарта в стандартах и ​​образцах.Если отклик в образцах значительно ниже, это указывает на значительное подавление, и может возникнуть необходимость изменить подготовку образца или хроматографию, чтобы минимизировать совместное элюирование этих подавляющих веществ. Хотя подавление ионов может иметь пагубный эффект на предельный предел обнаружения анализа, все же возможно получить приемлемые количественные данные при условии использования подходящих внутренних стандартов стабильных изотопов и наличия достаточного сигнала для измерения в образцах.

Еще одно соображение — использовать ли одиночную МС или тандемную МС.Тандемная MS фактически приводит к уменьшению абсолютного сигнала из-за потерь в коллизионной ячейке и того факта, что сигнал может распространяться на несколько фрагментов, когда обнаруживаются только один или два. Преимущество тандемной МС заключается в ее очень высокой специфичности, а это означает, что химический шум значительно снижается, а отношение сигнал / шум, как правило, превосходит одиночную МС, несмотря на уменьшение сигнала. Однако, если имеется большое уменьшение сигнала из-за того, что анализируемое вещество плохо фрагментируется или дает много фрагментов с низкой интенсивностью, отношение сигнал / шум тандемной МС может фактически быть хуже, чем обнаружение одиночной МС.

Мониторинг производительности и практические соображения

Многие факторы могут повлиять на текущую производительность систем ЖХ-МС, и важно иметь протоколы для обнаружения отклонений от нормальной производительности. Мониторинг абсолютного отклика, формы пика и времени удерживания внутренних стандартов — простой способ проверить чувствительность масс-спектрометра и целостность системы ЖХ. Применение формальных правил контроля качества к ответу внутреннего стандарта может оказаться непрактичным из-за больших ежедневных вариаций абсолютного ответа MS, но важно визуально проверять графики ответа, чтобы обнаружить снижение чувствительности, которое может указывать на необходимость. для очистки ионного источника или ионной оптики.Проверка отклика внутреннего стандарта каждого образца в партии также является полезным способом выявления проблем с отдельными образцами. Чистота реагентов и растворителей также может иметь значительное влияние на качество результатов и должна оцениваться при оптимизации метода и при использовании различных источников. Пластиковая посуда (например, пробирки для первичных образцов, микротитровальные планшеты), используемая в любом месте аналитического процесса, также является потенциальным источником помех.

Хотя производительность и надежность систем ЖХ-МС продолжают улучшаться, они по-прежнему требуют большего внимания и обслуживания, чем обычные системы ЖХ.Время от времени случаются простои продолжительностью один день или более, и второй прибор может потребоваться для приложений, в которых время оборота имеет решающее значение. Кроме того, для эксплуатации и обслуживания систем ЖХ-МС требуется относительно высококвалифицированный персонал.

Приложения

Биохимический скрининг генетических заболеваний

Ранняя работа Millington et al. установили потенциал скрининга неонатальных пятен засохшей крови на широкий спектр врожденных нарушений метаболизма (IEM). 48 , 49 Развитие ESI ускорило этот процесс, и были разработаны методы обработки большого количества образцов, необходимых для тестирования всех новорожденных. 3 , 50 Австралия стала лидером в этой области, и в настоящее время все австралийские младенцы проходят тестирование с использованием этого метода. 51 Количество маркерных аминокислот и ацилкарнитинов измеряется в сухих пятнах крови после экстракции и дериватизации в микротитровальных планшетах с использованием режимов прямой инъекции и MRM или сканирования. С помощью этого метода можно обнаружить около 20 наушников. Повышение чувствительности последних инструментов MS позволило пропустить стадию дериватизации.Стратегии скрининга новорожденных на основе МС были также разработаны на предмет галактоземии, 52 серповидно-клеточной анемии 53 и лизосомных заболеваний. 54 59 В случае лизосомных нарушений активность ферментов, а не метаболитов, измеряется с использованием специально разработанных субстратов, и этот метод может быть мультиплексирован. 58

Положительная прогностическая ценность некоторых аналитов во время скрининга новорожденных относительно низка. Поэтому для этих расстройств было предложено тестирование второго уровня, в котором образцы с уровнями выше порогового значения повторно анализируются с использованием более конкретного метода ЖХ-МС.Например, уровни тирозина при тирозинемии типа 1 могут быть лишь незначительно повышенными и подобными уровням у недоношенных или желтушных детей. Был разработан тест второго уровня на сукцинилацетон, гораздо более специфический маркер тирозинемии типа 1, в сухих пятнах крови. 60 62 Подобные тесты второго уровня были разработаны для болезни мочи кленовым сиропом 32 и метилмалоновой ацидемии. 63 , 64 Тестирование методом ЖХ-МС второго уровня на 17α-гидроксипрогестерон также было разработано для минимизации ложноположительных результатов иммунологических анализов первого уровня во время скрининга новорожденных на дефицит стероидной 21-гидроксилазы. 65 68 Эти тесты второго уровня добавляют еще один уровень сложности и потребность в дополнительных ресурсах, поэтому будет интересно посмотреть, насколько успешно они могут быть включены в программы скрининга новорожденных.

Высокопроизводительные методы прямой инъекции также были разработаны для скрининга широкого спектра IEM в образцах мочи от пациентов с симптомами. 31 , 69 Было разработано множество других приложений биохимической генетики, включая скрининг нарушений порфирина, 70 , 71 пурина и пиримидина, 72 74 пероксисом 75 77 и метаболизм желчных кислот. 78

Терапевтический мониторинг лекарственных средств и токсикология

Неудовлетворенность высокой стоимостью коммерческих иммуноанализов, используемых для мониторинга терапевтических лекарственных средств, и их изменчивой перекрестной реактивностью с метаболитами стимулировала разработку методов ЖХ-МС в качестве альтернативы. Были разработаны анализы для иммунодепрессантов, таких как циклоспорин, такролимус, сиролимус, эверолимус и микофеноловая кислота, и эта область была изучена. 79 , 80 Анализы ЖХ-МС на аминогликозиды, 35 антиретровирусные препараты 81 83 и противоопухолевые препараты 84 .Возможность мультиплексирования анализов ЖХ-МС, позволяющая измерить несколько лекарств и метаболитов за один запуск, является полезной особенностью этих анализов, которая может упростить лабораторные рабочие процессы и предоставить дополнительную фармакокинетическую информацию.

Использование тандемной ЖХ-МС для токсикологического скрининга привлекательно, поскольку по сравнению с ГХ-МС-скринингом он может обеспечить большую уверенность в идентификации, обнаруживать более широкий спектр лекарств, токсинов и их метаболитов, а также упростить подготовку проб. .Однако есть некоторые проблемы, которые в настоящее время ограничивают его широкое распространение в качестве рутинной техники. Спектры продуктовых ионов могут значительно различаться в зависимости от прибора, а исчерпывающие спектральные библиотеки недоступны. 20 Другое ограничение состоит в том, что, в отличие от ГХ-МС, нет общего набора рабочих условий МС, подходящих для большинства аналитов. Различные аналиты имеют разные оптимальные параметры (ион-прекурсор, напряжение источника ионов, энергия столкновения и т. Д.), Которые обычно необходимо определять в каждом конкретном случае.Поэтому большинство токсикологических стратегий ЖХ-МС основано на разработке целевой панели, содержащей до 301 лекарства и метаболитов. 85 Сбор данных и быстрое сканирование ионов продукта с использованием набора различных условий могут помочь в этом процессе, но усложняют анализ. Несколько стратегий ЖХ-МС для клинического и посмертного токсикологического скрининга были опубликованы, 85 91 , а также были рассмотрены эти области. 92 95 Возможен прямой анализ образцов мочи. 96 , 97 Были отмечены некоторые потенциальные подводные камни и неправильная идентификация, но они могут быть устранены путем тщательного согласования времени удерживания и масс-спектров со стандартом и использования соотношений ионов-квалификаторов. 98 Чувствительность текущих инструментов также позволяет анализировать жидкости полости рта 99 и образцы волос. 100 , 101

Витамины и родственные метаболиты

Использование ЖХ-МС для измерения витамина D представляет значительный интерес из-за различных реакций коммерческих иммуноанализов на различные формы витамина D и его метаболитов.Несколько анализов ЖХ-МС для 25-гидроксивитамина D3 и 25-гидроксивитамина D2 в сыворотке и плазме были описаны с использованием ESI 102 , 103 и APCI. 12 , 104 Дериватизация использовалась для повышения чувствительности к метаболитам низкого уровня, таким как 1,25- и 24,25-дигидроксиметаболиты, 36 метаболиты слюны 105 и метаболиты мочи. 106 Было опубликовано несколько сравнений ЖХ-МС и иммуноанализов. 107 109

Разработаны методы ЖХ-МС для других жирорастворимых витаминов, таких как различные формы витамина Е 13 , 15 и витамин К 15 . В одном анализе были объединены различные формы витаминов A, D, E и K. 110 Также доступны методы для водорастворимых витаминов, таких как пиридоксин, рибофлавин 111 и витаминов фолиевой кислоты. 112

Общий гомоцистеин является индикатором риска сердечно-сосудистых заболеваний, а общий гомоцистеин и метилмалоновая кислота являются важными функциональными индикаторами статуса витамина B12.Анализы ЖХ-МС были описаны для метилмалоновой кислоты в плазме 47 , 113 , 114 и общего гомоцистеина в плазме. 115 119 Также были разработаны анализы, подходящие для определения сухих пятен крови. 120 , 121 Клиническую ценность измерения общего гомоцистеина можно улучшить, комбинируя его с родственными аминокислотами, такими как метион и цистеин 122 , 123 или метилмалонат 124 и фолиевая кислота. 125

Стероидные гормоны

Анализ ЖХ-МС имеет отношение к нескольким областям биохимии стероидов. Трудности с измерением низких уровней тестостерона и дигидротестостерона у женщин и детей с помощью обычных иммуноанализов побудили к разработке нескольких высокочувствительных анализов LC-MS, способных обеспечить надежные измерения в этих группах. 37 , 126 129 Анализы на свободный кортизол в моче, 130 133 эстрогены 10 и мультиплексированные анализы для различных стероидов надпочечников. 9 , 68 , 134 , 135

Профилирование стероидов в моче с помощью ГХ-МС используется для исследования врожденных нарушений метаболизма стероидов и других нарушений метаболизма стероидов. Эти стероиды обычно выводятся в форме глюкуронидных или сульфатных конъюгатов, которые требуют ферментативного гидролиза и последующей дериватизации для ГХ-МС. Профилирование интактных конъюгатов мочи с помощью ЖХ-МС упростило бы этот процесс, и методы, демонстрирующие это, начинают появляться. 69 , 136 , 137

Выводы

МС с использованием ESI и других методов ионизации может применяться к гораздо более широкому кругу биологических молекул, чем ГХ-МС, и, таким образом, найдет большее применение в клинической практике. биохимия. Методы прямого впрыска могут определять многие аналиты с высокой пропускной способностью, если для обнаружения используется высокоспецифичный тандемный МС. ЖХ-МС обеспечивает превосходную специфичность и чувствительность по сравнению с методами прямого впрыска.В сочетании с разбавлением стабильными изотопами ЖХ-МС можно использовать для разработки высокоточных и воспроизводимых анализов. Современные масс-спектрометры очень чувствительны, и анализы ЖХ-МС в настоящее время являются жизнеспособной заменой многих иммуноанализов. Несмотря на то, что начальные затраты относительно высоки, затраты на реагенты низкие, если они приготовлены на месте, и может быть значительная долгосрочная экономия затрат, когда существующий коммерческий анализ может быть заменен ЖХ-МС. Также появляются стратегии ЖХ-МС для чувствительных количественных мультиплексных анализов пептидов и белков плазмы. 138 , 139 По мере того, как чувствительность МС продолжает улучшаться, анализы ЖХ-МС будут представлять все больший интерес в качестве потенциальной замены существующих иммуноанализов.

Еще одним преимуществом анализа ЖХ-МС является возможность мультиплексирования нескольких аналитов в одном аналитическом цикле с минимальными дополнительными затратами. Это может упростить настройку лаборатории (например, создание тестовых панелей) и предоставить дополнительную полезную информацию (например, профили метаболитов).Были продемонстрированы приложения, которые обнаруживают сотни аналитов за один запуск, и возможности мультиплексирования в значительной степени ограничены только воображением и изобретательностью аналитика. ЖХ-МС анализы, вероятно, будут наиболее полезными в лаборатории клинической биохимии при использовании для мультиплексных анализов и анализов скринингового типа, когда полученная дополнительная информация оправдывает затраты на покупку и эксплуатацию прибора.

Сноски

Конкурирующие интересы: Не заявлены.

Ссылки

1. Фенн Дж. Б., Манн М., Мэн С. К., Вонг С. Ф., Уайтхаус К. М.. Ионизация электрораспылением для масс-спектрометрии больших биомолекул. Наука. 1989; 246: 64–71. [PubMed] [Google Scholar] 3. Рашед М.С., Бакнелл М.П., ​​Литтл Д., Авад А., Джейкоб М., Аламуди М. и др. Скрининг пятен крови на наличие врожденных ошибок метаболизма с помощью тандемной масс-спектрометрии с электрораспылением с периодической обработкой микропланшетов и компьютерным алгоритмом для автоматической маркировки аномальных профилей. Clin Chem. 1997; 43: 1129–41.[PubMed] [Google Scholar] 4. Ho CS, Lam CWK, Chan MHM, Cheung RCK, Law LK, Lit LCW и др. Масс-спектрометрия с ионизацией электрораспылением: принципы и клиническое применение. Clin Biochem Rev.2003; 24: 3–12. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 5. Кебарле П. Краткий обзор современного состояния механизмов, задействованных в масс-спектрометрии с электрораспылением. J. Mass Spectrom. 2000; 35: 804–17. [PubMed] [Google Scholar] 6. Карр С.А., Хаддлстон М.Дж., Бин М.Ф. Селективная идентификация и дифференциация N- и O-связанных олигосахаридов в гликопротеинах методом жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии.Protein Sci. 1993; 2: 183–96. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 7. Бердвелл WC. Масс-спектрометрия с химической ионизацией при атмосферном давлении для анализа липидов. Липиды. 2001; 36: 327–46. [PubMed] [Google Scholar] 8. Розенберг Э. Возможности органических (электрораспыление и химическая ионизация при атмосферном давлении) масс-спектрометрии в сочетании с жидкофазным разделением для анализа состава. J Chromatogr A. 2003; 1000: 841–89. [PubMed] [Google Scholar] 9. Карвалью В.М., Накамура Огайо, Виейра JGH.Одновременное количественное определение семи эндогенных стероидов надпочечников C-21 методом жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии в сыворотке крови человека. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2008; 872: 154–61. [PubMed] [Google Scholar] 10. Нельсон Р. Э., Греб С. К., OKane DJ, Сингх Р. Дж. Жидкостная хроматография-тандемный масс-спектрометрический анализ для одновременного измерения эстрадиола и эстрона в плазме крови человека. Clin Chem. 2004. 50: 373–84. [PubMed] [Google Scholar] 11. Rauh M, Groschl M, Rascher W, Dorr HG. Автоматическое, быстрое и чувствительное количественное определение 17 альфа-гидроксипрогестерона, андростендиона и тестостерона с помощью тандемной масс-спектрометрии с экстракцией в реальном времени.Стероиды. 2006. 71: 450–8. [PubMed] [Google Scholar] 12. Чен Х., Маккой Л.Ф., Шлейхер Р.Л., Пфайфер С.М. Измерение 25-гидроксивитамина D3 (25OHD3) и 25-гидроксивитамина D2 (25OHD2) в сыворотке крови человека с помощью жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии и его сравнение с методом радиоиммуноанализа. Clin Chim Acta. 2008; 391: 6–12. [PubMed] [Google Scholar] 13. Андреоли Р., Манини П., Поли Д., Бергамаски Е., Мутти А., Ниссен WMA. Разработка упрощенного метода одновременного определения ретинола, альфа-токоферола и бета-каротина в сыворотке крови методом жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии с химической ионизацией при атмосферном давлении.Anal Bioanal Chem. 2004; 378: 987–94. [PubMed] [Google Scholar] 14. Лауридсен С., Леонард С.В., Гриффин Д.А., Либлер, округ Колумбия, МакКлюр Т.Д., Трабер М.Г. Количественный анализ с помощью жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии меченного дейтерием и немеченого витамина Е в биологических образцах. Анальная биохимия. 2001; 289: 89–95. [PubMed] [Google Scholar] 15. Надь К., Курте-Компонду М.-С, Холст Б., Куссманн М. Комплексный анализ компонентов витамина Е в плазме крови человека с помощью жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии. Anal Chem.2007. 79: 7087–96. [PubMed] [Google Scholar] 16. Сухара Ю., Камао М., Цугава Н., Окано Т. Метод определения гомологов витамина К в плазме человека с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии. Anal Chem. 2005; 77: 757–63. [PubMed] [Google Scholar] 17. Го Т., Чан М., Сольдин С.Дж. Профили стероидов с использованием жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии с источником фотоионизации при атмосферном давлении. Arch Pathol Lab Med. 2004; 128: 469–75. [PubMed] [Google Scholar] 18. Лейнонен А., Кууранне Т., Костиайнен Р.Жидкостная хроматография / масс-спектрометрия в анализе анаболических стероидов — оптимизация и сравнение трех методов ионизации: ионизация электрораспылением, химическая ионизация при атмосферном давлении и фотоионизация при атмосферном давлении. J. Mass Spectrom. 2002; 37: 693–8. [PubMed] [Google Scholar] 19. Рафаэлли А., Саба А. Масс-спектрометрия с фотоионизацией при атмосферном давлении. Mass Spectrom Rev.2003; 22: 318-31. [PubMed] [Google Scholar] 20. Янсен Р., Лашатр Г., Марке П. Систематический токсикологический анализ ЖХ-МС / МС: сравнение спектров МС / МС, полученных с помощью различных инструментов и настроек.Clin Biochem. 2005; 38: 362–72. [PubMed] [Google Scholar] 21. Уильямсон LN, Бартлетт MG. Количественная жидкостная хроматография / времяпролетная масс-спектрометрия. Biomed Chromatogr. 2007; 21: 567–76. [PubMed] [Google Scholar] 22. Бристоу АВТ. Точное измерение массы для определения элементарной формулы — учебное пособие. Масс-спектром. Ред. 2006; 25: 99–111. [PubMed] [Google Scholar] 23. Пейн А.Х., Глиш Г.Л. Тандемная масс-спектрометрия в квадрупольных ионных ловушках и масс-спектрометрах с ионным циклотронным резонансом. Методы Энзимол.2005; 402: 109–48. [PubMed] [Google Scholar] 24. Тозука З., Канеко Х., Ширага Т., Митани Й., Беппу М., Терашита С. и др. Стратегия структурного выяснения лекарств и метаболитов лекарств с использованием (MS) n фрагментации в ионной ловушке с электрораспылением. J. Mass Spectrom. 2003. 38: 793–808. [PubMed] [Google Scholar] 25. Чернушевич И.В., Лобода А.В., Томсон Б.А. Введение в квадрупольную времяпролетную масс-спектрометрию. J. Mass Spectrom. 2001; 36: 849–65. [PubMed] [Google Scholar] 26. Ens W, Standing KG. Гибридные квадрупольные / времяпролетные масс-спектрометры для анализа биомолекул.Методы Энзимол. 2005; 402: 49–78. [PubMed] [Google Scholar] 27. Хопфгартнер Г, Варесио Э., Чаппат В, Гривет Ц., Бургонь Э, Лейтхольд Л.А. Тройной квадрупольный масс-спектрометр с линейной ионной ловушкой для анализа малых молекул и макромолекул. J. Mass Spectrom. 2004; 39: 845–55. [PubMed] [Google Scholar] 28. Тейлор П.Дж. Матричные эффекты: ахиллесова пята количественной высокоэффективной жидкостной хроматографии-электроспрей-тандемной масс-спектрометрии. Clin Biochem. 2005. 38: 328–34. [PubMed] [Google Scholar] 29.Аннесли TM. Подавление ионов в масс-спектрометрии. Clin Chem. 2003; 49: 1041–4. [PubMed] [Google Scholar] 30. Матушевский BK, Constanzer ML, Chavez-Eng CM. Стратегии оценки матричного эффекта в количественных биоаналитических методах на основе ВЭЖХ-МС / МС. Anal Chem. 2003. 75: 3019–30. [PubMed] [Google Scholar] 31. Питт Дж. Дж., Эггингтон М, Калер С. Г.. Комплексный скрининг образцов мочи на наличие врожденных нарушений метаболизма методом тандемной масс-спектрометрии с электрораспылением. Clin Chem. 2002; 48: 1970–80. [PubMed] [Google Scholar] 32.Оглсби Д., Сандерс К.А., Лейси Дж.М., Магера М.Дж., Касетта Б., Штраус К.А. и др. Тест второго уровня для количественного определения аллоизолейцина и аминокислот с разветвленной цепью в сухих пятнах крови для улучшения скрининга новорожденных на болезнь мочи кленового сиропа (MSUD) Clin Chem. 2008; 54: 542–9. [PubMed] [Google Scholar] 33. Аннесли TM. Связанные с метанолом матричные эффекты в тандемной масс-спектрометрии с электрораспылением и ионизацией. Clin Chem. 2007; 53: 1827–34. [PubMed] [Google Scholar] 34. Martens-Lobenhoffer J, Bode-Boger SM. Быстрое и эффективное определение аргинина, симметричного диметиларгинина и асимметричного диметиларгинина в биологических жидкостях с помощью тандемной масс-спектрометрии жидкостной хроматографии с электрораспылением гидрофильных взаимодействий.Clin Chem. 2006; 52: 488–93. [PubMed] [Google Scholar] 35. Oertel R, Neumeister V, Kirch W. Хроматография гидрофильного взаимодействия в сочетании с тандемно-масс-спектрометрией для определения шести аминогликозидов в сыворотке. J Chromatogr A. 2004; 1058: 197–201. [PubMed] [Google Scholar] 36. Аронов П.А., Холл Л.М., Деттмер К., Стефенсен С.Б., Гамак Б.Д. Метаболическое профилирование основных метаболитов витамина D с использованием дериватизации Дильса-Альдера и сверхэффективной жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии. Anal Bioanal Chem.2008; 391: 1917–30. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 37. Licea-Perez H, Wang S, Szapacs ME, Yang E. Разработка высокочувствительного и селективного метода UPLC / MS / MS для одновременного определения тестостерона и 5альфа-дигидротестостерона в сыворотке крови человека для поддержки заместительной терапии тестостероном при гипогонадизме. Стероиды. 2008; 73: 601–10. [PubMed] [Google Scholar] 38. Вентура Р., Роиг М., Монфор Н., Саез П., Бергес Р., Сегура Дж. Высокопроизводительный и чувствительный скрининг с помощью сверхэффективной жидкостной хроматографии, тандемной масс-спектрометрии диуретиков и других допинговых агентов.Eur J Mass Spectrom (Чичестер, Англия), 2008; 14: 191–200. [PubMed] [Google Scholar] 39. Nordstrom A, O’Maille G, Qin C, Siuzdak G. Нелинейное сопоставление данных для метаболомики на основе UPLC-MS и HPLC-MS: количественный анализ эндогенных и экзогенных метаболитов в сыворотке крови человека. Anal Chem. 2006; 78: 3289–95. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 40. Даксбери К., Оуэн Л., Гиллингвотер С., Кивил Б. Встречающиеся в природе изотопы аналита могут мешать измерению дважды дейтерированного внутреннего стандарта.Энн Клин Биохим. 2008; 45: 210–2. [PubMed] [Google Scholar] 41. Стоквис Э., Розинг Х., Бейнен Дж. Х. Стабильные меченые изотопами внутренние стандарты в количественном биоанализе с использованием жидкостной хроматографии / масс-спектрометрии: необходимость или нет? Масс-спектрометр Rapid Commun. 2005; 19: 401–7. [PubMed] [Google Scholar] 42. Гао С., Чжан З.П., Карнес Х.Т. Повышение чувствительности в жидкостной хроматографии / масс-спектрометрии с ионизацией атмосферного давления с использованием дериватизации и добавок подвижной фазы. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci.2005; 825: 98–110. [PubMed] [Google Scholar] 43. Заикин В.Г., Халкет Ю.М. Дериватизация в масс-спектрометрии — 8. Мягкая ионизационная масс-спектрометрия малых молекул. Eur J Mass Spectrom (Chichester, Eng) 2006; 12: 79–115. [PubMed] [Google Scholar] 44. Джонсон DW. Модифицированный дериватизирующий реагент Жирара для универсального профилирования и анализа следов альдегидов и кетонов методом тандемной масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением. Масс-спектрометр Rapid Commun. 2007; 21: 2926–32. [PubMed] [Google Scholar] 45. Джонсон DW.Профилирование кетостероидов с использованием производных Girard T и тандемной масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением: прямой анализ плазмы на андростендион, 17-гидроксипрогестерон и кортизол. Масс-спектрометр Rapid Commun. 2005; 19: 193–200. [PubMed] [Google Scholar] 46. Петерс Х., Нефедов М., Сарсеро Дж., Питт Дж., Фаулер К.Дж., Газеас С. и др. Нокаутная модель на мышах для метилмалоновой ацидурии, приводящей к неонатальной летальности. J Biol Chem. 2003; 278: 52909–13. [PubMed] [Google Scholar] 47. Магера MJ, Helgeson JK, Matern D, Rinaldo P.Метилмалоновая кислота измеряется в плазме и моче с помощью разведения стабильных изотопов и тандемной масс-спектрометрии с электрораспылением. Clin Chem. 2000; 46: 1804–10. [PubMed] [Google Scholar] 48. Миллингтон Д.С., Кодо Н., Норвуд Д.Л., Роу CR. Тандемная масс-спектрометрия: новый метод профилирования ацилкарнитина с возможностью неонатального скрининга на врожденные нарушения метаболизма. J Inherit Metab Dis. 1990; 13: 321–4. [PubMed] [Google Scholar] 49. Миллингтон Д.С., Норвуд Д.Л., Кодо Н., Роу С.Р., Иноуэ Ф. Применение бомбардировки быстрыми атомами с тандемной масс-спектрометрией и жидкостной хроматографией / масс-спектрометрией для анализа ацилкарнитинов в моче, крови и тканях человека.Анальная биохимия. 1989; 180: 331–9. [PubMed] [Google Scholar] 50. Зиаде Р., Хоффман Е.П., Finegold DN, Hoop RC, Brackett JC, Strauss AW и др. Дефицит ацил-КоА-дегидрогеназы со средней длиной цепи в Пенсильвании: скрининг новорожденных показывает высокую частоту встречаемости и неожиданные частоты мутаций. Pediatr Res. 1995; 37: 675–8. [PubMed] [Google Scholar] 51. Wilcken B, Wiley V, Hammond J, Carpenter K. Скрининг новорожденных на врожденные ошибки метаболизма с помощью тандемной масс-спектрометрии. N Engl J Med. 2003; 348: 2304–12. [PubMed] [Google Scholar] 52.Дженсен У. Г., Брандт Н. Дж., Кристенсен Э., Сковби Ф., Норгард-Педерсен Б., Симонсен Х. Неонатальный скрининг галактоземии путем количественного анализа монофосфатов гексозы с использованием тандемной масс-спектрометрии: ретроспективное исследование. Clin Chem. 2001; 47: 1364–72. [PubMed] [Google Scholar] 53. Boemer F, Ketelslegers O, Minon JM, Bours V, Schoos R. Скрининг новорожденных на серповидноклеточную анемию с использованием тандемной масс-спектрометрии. Clin Chem. 2008; 54: 2036–41. [PubMed] [Google Scholar] 54. Blanchard S, Sadilek M, Scott CR, Turecek F, Gelb MH.Тандемная масс-спектрометрия для прямого анализа лизосомальных ферментов в сухих пятнах крови: применение для скрининга новорожденных на мукополисахаридоз I. Clin Chem. 2008; 54: 2067–70. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 55. Клементс П. Масс-спектрометрия как платформа для диагностики лизосомных заболеваний. Clin Chem. 2004; 50: 1723–4. [PubMed] [Google Scholar] 56. Дайноки А., Мюль А., Фекете Дж., Койцер Дж., Орсини Дж., Деджесус В. и др. Скрининг новорожденных на болезнь Помпе путем измерения активности кислой альфа-глюкозидазы с помощью тандемной масс-спектрометрии.Clin Chem. 2008; 54: 1624–9. [PubMed] [Google Scholar] 57. Ван Д., Вуд Т., Садилек М., Скотт К.Р., Туречек Ф., Гелб М.Х. Тандемная масс-спектрометрия для прямого анализа ферментов в сухих пятнах крови: применение для скрининга новорожденных на мукополисахаридоз II (болезнь Хантера) Clin Chem. 2007; 53: 137–40. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 58. Zhang XK, Elbin CS, Chuang WL, Cooper SK, Marashio CA, Beauregard C и др. Мультиплексный ферментный анализ, скрининг сухих пятен крови на лизосомные нарушения накопления с использованием тандемной масс-спектрометрии.Clin Chem. 2008; 54: 1725–8. [PubMed] [Google Scholar] 59. Чжоу X, Туречек Ф., Скотт ЧР, Гелб М.Х. Количественная оценка активности клеточной кислой сфингомиелиназы и галактоцереброзид-бета-галактозидазы с помощью масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением. Clin Chem. 2001; 47: 874–81. [PubMed] [Google Scholar] 60. Magera MJ, Gunawardena ND, Hahn SH, Tortorelli S, Mitchell GA, Goodman SI и др. Количественное определение сукцинилацетона в сухих пятнах крови для скрининга новорожденных на тирозинемию I типа. Mol Genet Metab.2006; 88: 16–21. [PubMed] [Google Scholar] 61. Johnson DW, Gerace R, Ranieri E, Trinh M-U, Fingerhut R. Анализ сукцинилацетона, как производного Girard T, в моче и высушенных пятнах крови с помощью тандемной масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением с потоком. Масс-спектрометр Rapid Commun. 2007; 21: 59–63. [PubMed] [Google Scholar] 62. Аль-Дирбаши О.Ю., Рашед М.С., Бринк Х.И.Т., Якобс С., Филимбан Н., Аль-Ахайдиб Л.Й. и др. Определение сукцинилацетона в сухих пятнах крови и жидкой моче в виде дансилгидразона методом тандемной масс-спектрометрии с жидкостной хроматографией.J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2006; 831: 274–80. [PubMed] [Google Scholar] 63. Матерн Д., Торторелли С., Оглесби Д., Гаврилов Д., Ринальдо П. Снижение количества ложноположительных результатов при скрининге новорожденных за счет внедрения тестов второго уровня на основе МС / МС: опыт клиники Майо (2004–2007) J Inherit Metab Дис. 2007; 30: 585–92. [PubMed] [Google Scholar] 64. la Marca G, Malvagia S, Pasquini E, Innocenti M, Donati MA, Zammarchi E. Экспресс-тест 2-го уровня для измерения 3-OH-пропионовой и метилмалоновой кислот на сухих пятнах крови: снижение частоты ложноположительных результатов для пропионилкарнитина во время расширенного обследование новорожденных методом жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии.Clin Chem. 2007; 53: 1364–9. [PubMed] [Google Scholar] 65. Минутти Ч.З., Лейси Дж. М., Магера М. Дж., Хан Ш., Макканн М., Шульце А. и др. Профилирование стероидов с помощью тандемной масс-спектрометрии повышает положительную прогностическую ценность скрининга новорожденных на врожденную гиперплазию надпочечников. J Clin Endocrinol Metab. 2004; 89: 3687–93. [PubMed] [Google Scholar] 66. Лейси Дж. М., Минутти С. З., Магера М. Дж., Таушер А. Л., Касетта Б., Макканн М. и др. Повышенная специфичность скрининга новорожденных на врожденную гиперплазию надпочечников путем определения стероидного профиля второго уровня с использованием тандемной масс-спектрометрии.Clin Chem. 2004; 50: 621–5. [PubMed] [Google Scholar] 67. Янзен Н., Питер М., Сандер С., Стойервальд Ю., Терхардт М., Холткамп Ю. и др. Скрининг новорожденных на врожденную гиперплазию надпочечников: дополнительный стероидный профиль с использованием жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии. J Clin Endocrinol Metab. 2007. 92: 2581–9. [PubMed] [Google Scholar] 68. Янзен Н., Сандер С., Терхардт М., Питер М., Сандер Дж. Быстрое и прямое количественное определение стероидов надпочечников с помощью тандемной масс-спектрометрии в сыворотке и сухих пятнах крови. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci.2008; 861: 117–22. [PubMed] [Google Scholar] 69. Питт Дж. Высокопроизводительный скрининг мочи на синдром Смита-Лемли-Опица и церебротендинный ксантоматоз с использованием тандемной масс-спектрометрии с отрицательным электрораспылением. Clin Chim Acta. 2007; 380: 81–8. [PubMed] [Google Scholar] 70. Дантон М, Лим СК. Профили порфиринов в крови, моче и фекалиях с помощью тандемной масс-спектрометрии с ионизацией ВЭЖХ и электрораспылением. Biomed Chromatogr. 2006; 20: 612–21. [PubMed] [Google Scholar] 71. Ford RE, Magera MJ, Kloke KM, Chezick PA, Fauq A, McConnell JP.Количественное измерение порфобилиногена в моче методом жидкостной хроматографии с разведением стабильных изотопов и тандемной масс-спектрометрии. Clin Chem. 2001; 47: 1627–32. [PubMed] [Google Scholar] 72. ван Ленте Х., ван Куйленбург А.Б., Ито Т., Бутсма А.Х., ван Крухтен А., Вада Y и др. Дефекты разложения пиримидина, идентифицированные тандемной масс-спектрометрией ВЭЖХ-электроспрей образцов мочи или полосок фильтровальной бумаги, пропитанных мочой. Clin Chem. 2000; 46: 1916–22. [PubMed] [Google Scholar] 73. Hartmann S, Okun JG, Schmidt C, Langhans CD, Garbade SF, Burgard P и др.Комплексное выявление нарушений метаболизма пуринов и пиримидинов методом ВЭЖХ с тандемной масс-спектрометрией с электрораспылением и ионизацией. Clin Chem. 2006; 52: 1127–37. [PubMed] [Google Scholar] 74. Ито Т., ван Куйленбург А.Б., Бутсма А.Х., Хааснот А.Дж., ван Крухтен А., Вада Y и др. Быстрый скрининг пациентов из группы высокого риска на предмет нарушений метаболизма пуринов и пиримидинов с использованием тандемной масс-спектрометрии ВЭЖХ-электроспрей жидкой мочи или полосок фильтровальной бумаги, пропитанных мочой. Clin Chem. 2000; 46: 445–52. [PubMed] [Google Scholar] 75.Аль-Дирбаши О.Ю., Санта Т., Рашед М.С., Аль-Хасснан З., Шимозава Н., Чедрави А. и др. Быстрый метод UPLC-MS / MS для рутинного анализа пристанных, фитанических и очень длинноцепочечных жирных кислот в плазме на маркеры пероксисомных расстройств. J Lipid Res. 2008. 49: 1855–62. [PubMed] [Google Scholar] 76. Джонсон DW. Быстрая процедура скрининга для диагностики пероксисомальных расстройств: количественное определение жирных кислот с очень длинной цепью, таких как диметиламиноэтиловые эфиры, в плазме и пятнах крови с помощью тандемной масс-спектрометрии с электрораспылением.J Inherit Metab Dis. 2000. 23: 475–86. [PubMed] [Google Scholar] 77. Johnson DW, Trinh M-U, Oe T. Измерение пристанных, фитановых и очень длинноцепочечных жирных кислот в плазме с помощью тандемной масс-спектрометрии жидкостной хроматографии и электрораспыления для диагностики пероксисомальных расстройств. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2003; 798: 159–62. [PubMed] [Google Scholar] 78. Юсеф IM, Perwaiz S, Lamireau T, Tuchweber B. Профиль желчных кислот в моче у детей с врожденными ошибками метаболизма желчных кислот и хроническим холестазом; метод скрининга с использованием тандемной масс-спектрометрии с электрораспылением (ES / MS / MS) Med Sci Monit.2003; 9: MT21–31. [PubMed] [Google Scholar] 79. Тейлор П.Дж. Терапевтический лекарственный мониторинг иммунодепрессантов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии. Ther Drug Monit. 2004; 26: 215–9. [PubMed] [Google Scholar] 80. Ян З., Ван С. Последние разработки в области применения тандемной масс-спектрометрии с жидкостной хроматографией высокого разрешения в терапевтическом лекарственном мониторинге иммунодепрессантов. J Immunol Methods. 2008; 336: 98–103. [PubMed] [Google Scholar] 81. ter Heine R, Alderden-Los CG, Rosing H, Hillebrand MJX, van Gorp ECM, Huitema ADR и др.Быстрое и одновременное определение дарунавира и одиннадцати других антиретровирусных препаратов для терапевтического мониторинга лекарств: разработка и валидация метода для определения всех одобренных в настоящее время ингибиторов протеазы ВИЧ и ненуклеозидных ингибиторов обратной транскриптазы в плазме крови человека с помощью жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией с ионизацией электрораспылением . Масс-спектрометр Rapid Commun. 2007. 21: 2505–14. [PubMed] [Google Scholar] 82. Гериг А.К., Микус Дж., Хафели В.Е., Бурхенне Дж.Тандемная масс-спектроскопия с электрораспылением 18 антиретровирусных препаратов и одновременное количественное определение 12 антиретровирусных препаратов в плазме. Масс-спектрометр Rapid Commun. 2007; 21: 2704–16. [PubMed] [Google Scholar] 83. Коал Т., Сибум М., Костер Э., Реш К., Кейвер В. Прямое и быстрое определение антиретровирусных препаратов с помощью автоматизированной онлайн-твердофазной экстракции, жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии в плазме крови человека. Clin Chem Lab Med. 2006; 44: 299–305. [PubMed] [Google Scholar] 84. Стоквис Э., Розинг Х., Бейнен Дж. Х.Жидкостная хроматография-масс-спектрометрия для количественного биоанализа противоопухолевых препаратов. Mass Spectrom Rev.2005; 24: 887–917. [PubMed] [Google Scholar] 85. Мюллер К.А., Вайнманн В., Дресен С., Шрайбер А., Гергов М. Разработка многоцелевого скринингового анализа для 301 лекарства с использованием системы жидкостной хроматографии / тандемной масс-спектрометрии QTrap и автоматического поиска в библиотеке. Масс-спектрометр Rapid Commun. 2005; 19: 1332–8. [PubMed] [Google Scholar] 86. Гергов М., Оянпера И., Вуори Э. Одновременный скрининг 238 препаратов в крови с помощью тандемной масс-спектрометрии жидкостной хроматографии и ионного распыления с мониторингом множественных реакций.J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2003; 795: 41–53. [PubMed] [Google Scholar] 87. Херрин Г.Л., Маккарди Х.Х., Уолл WH. Исследование метода LC-MS-MS (QTrap) для быстрого скрининга и идентификации лекарств в образцах цельной крови посмертной токсикологии. J Anal Toxicol. 2005; 29: 599–606. [PubMed] [Google Scholar] 88. Deveaux M, Cheze M, Pepin G. Роль жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии (LC-MS / MS) для тестирования образцов крови и мочи для токсикологического расследования преступлений, связанных с наркотиками.Ther Drug Monit. 2008. 30: 225–8. [PubMed] [Google Scholar] 89. Sauvage F-L, Saint-Marcoux F, Duretz B, Deporte D, Lachatre G, Marquet P. Скрининг лекарств и токсичных соединений с помощью тандемной масс-спектрометрии с жидкостной хроматографией и линейной ионной ловушкой. Clin Chem. 2006; 52: 1735–42. [PubMed] [Google Scholar] 90. Марке П., Сен-Марку Ф., Гэмбл Теннесси, Леблан Дж. Си. Сравнение предварительной процедуры для общего неизвестного скрининга лекарств и токсичных соединений с использованием квадрупольно-линейного масс-спектрометра с ионной ловушкой с эталонным методом жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии.J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2003; 789: 9–18. [PubMed] [Google Scholar] 91. Павлич М., Либиселлер К., Оберахер Х. Комбинированное использование ESI-QqTOF-MS и ESI-QqTOF-MS / MS с поиском масс-спектральной библиотеки для качественного анализа лекарств. Anal Bioanal Chem. 2006; 386: 69–82. [PubMed] [Google Scholar] 92. Марке П. Прогресс жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии в клинической и судебной токсикологии. Ther Drug Monit. 2002; 24: 255–76. [PubMed] [Google Scholar] 93. Марке П. Подходит ли ЖХ-МС для всестороннего скрининга лекарств и ядов в клинической токсикологии? Ther Drug Monit.2002; 24: 125–33. [PubMed] [Google Scholar] 94. Maurer HH. Мультианализируемые процедуры для скрининга и количественного определения лекарств в крови, плазме или сыворотке с помощью одностадийной жидкостной хроматографии или тандемной масс-спектрометрии (ЖХ-МС или ЖХ-МС / МС), относящиеся к клинической и судебной токсикологии. Clin Biochem. 2005; 38: 310–8. [PubMed] [Google Scholar] 95. Maurer HH. Современная роль жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии в клинической и судебной токсикологии. Anal Bioanal Chem. 2007; 388: 1315–25. [PubMed] [Google Scholar] 96.Фитцджеральд Р.Л., Ривера Д.Д., Герольд Д.А. Идентификация лекарств широкого спектра действия непосредственно из мочи с использованием тандемной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии. Clin Chem. 1999; 45: 1224–34. [PubMed] [Google Scholar] 97. Нордгрен Х.К., Бек О. Многокомпонентный скрининг на наркотики, вызывающие злоупотребление: прямой анализ мочи с помощью ЖХ-МС-МС. Ther Drug Monit. 2004; 26: 90–7. [PubMed] [Google Scholar] 98. Sauvage F-L, Gaulier J-M, Lachatre G, Marquet P. Ловушки и стратегии предотвращения для жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии в выбранном режиме мониторинга реакции для анализа наркотиков.Clin Chem. 2008; 54: 1519–27. [PubMed] [Google Scholar] 99. Oiestad EL, Johansen U, Christophersen AS. Скрининг консервированной ротовой жидкости на наркотики методом жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии. Clin Chem. 2007; 53: 300–9. [PubMed] [Google Scholar] 100. Хегстад ​​С., Хиабани Х.З., Кристофферсен Л., Куноэ Н., Лобмайер П.П., Кристоферсен А.С. Скрининг волос на лекарства методом жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии. J Anal Toxicol. 2008. 32: 364–72. [PubMed] [Google Scholar] 101. Миллер Э.И., Уайли Ф.М., Оливер Дж. С.. Одновременное обнаружение и количественное определение амфетаминов, диазепама и его метаболитов, кокаина и его метаболитов, а также опиатов в волосах с помощью LC-ESI-MS-MS с использованием одного метода экстракции.J Anal Toxicol. 2008. 32: 457–69. [PubMed] [Google Scholar] 102. Маунселл Z, Райт DJ, Радуга SJ. Обычный анализ жидкостной хроматографии с изотопным разбавлением и тандемной масс-спектрометрии для одновременного измерения 25-гидроксиметаболитов витаминов D2 и D3. Clin Chem. 2005; 51: 1683–90. [PubMed] [Google Scholar] 103. Saenger AK, Laha TJ, Bremner DE, Sadrzadeh SMH. Количественное определение 25-гидроксивитамина D (2) и D (3) в сыворотке крови с помощью тандемной масс-спектрометрии ВЭЖХ и исследования референсных интервалов для диагностики дефицита витамина D.Am J Clin Pathol. 2006; 125: 914–20. [PubMed] [Google Scholar] 104. Цугава Н., Сухара Ю., Камао М., Окано Т. Определение 25-гидроксивитамина D в плазме человека с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии — тандемной масс-спектрометрии. Anal Chem. 2005; 77: 3001–7. [PubMed] [Google Scholar] 105. Хигаши Т., Шибаяма Ю., Фудзи М., Шимада К. Жидкостная хроматография-тандемный масс-спектрометрический метод для определения 25-гидроксивитамина D3 в слюне: неинвазивный инструмент для оценки статуса витамина D. Anal Bioanal Chem.2008; 391: 229–38. [PubMed] [Google Scholar] 106. Хигаши Т., Хомма С., Ивата Х, Шимада К. Характеристика метаболитов витамина D (3) с мочой у человека в физиологических условиях с использованием жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии. J Pharm Biomed Anal. 2002; 29: 947–55. [PubMed] [Google Scholar] 107. Рот Х. Дж., Шмидт-Гайк Х., Вебер Х., Нидерау С. Точность и клинические последствия семи методов 25-гидроксивитамина D по сравнению с жидкостной хроматографией-тандемной масс-спектрометрией в качестве эталона. Энн Клин Биохим.2008; 45: 153–9. [PubMed] [Google Scholar] 108. Ленсмейер Г.Л., Вибе Д.А., Бинкли Н., Дрезнер М.К. Метод ВЭЖХ для измерения 25-гидроксивитамина D: сравнение с современными анализами [см. Комментарий] Clin Chem. 2006; 52: 1120–6. [PubMed] [Google Scholar] 109. Терри А.Х., Сандрок Т., Мейкл А.В. Измерение 25-гидроксивитамина D с помощью Nichols ADVANTAGE, DiaSorin LIAISON, DiaSorin RIA и жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии. Clin Chem. 2005. 51: 1565–6. [PubMed] [Google Scholar] 110. Приего Капоте Ф., Хименес-младший, Гранадос Дж.М.М., де Кастро MDL.Идентификация и определение жирорастворимых витаминов и метаболитов в сыворотке крови человека с помощью жидкостной хроматографии / тройной квадрупольной масс-спектрометрии с мониторингом множественных реакций. Масс-спектрометр Rapid Commun. 2007; 21: 1745–54. [PubMed] [Google Scholar] 111. Midttun O, Hustad S, Solheim E, Schneede J, Ueland PM. Мультианалитическое количественное определение видов витаминов B6 и B2 в наномолярном диапазоне в плазме крови человека методом жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии. Clin Chem. 2005; 51: 1206–16. [PubMed] [Google Scholar] 112.Пфайффер К.М., Фазили З., Маккой Л., Чжан М., Гюнтер Е.В. Определение витамеров фолиевой кислоты в сыворотке крови человека тандемной масс-спектрометрией с разведением стабильных изотопов и сравнение с радиоанализом и микробиологическим анализом. Clin Chem. 2004. 50: 423–32. [PubMed] [Google Scholar] 113. Кушнир М.М., Комаромы-Хиллер Г., Шушан Б., Урри Ф.М., Робертс В.Л. Анализ дикарбоновых кислот методом тандемной масс-спектрометрии. Высокопроизводительное количественное измерение метилмалоновой кислоты в сыворотке, плазме и моче. Clin Chem. 2001; 47: 1993–2002.[PubMed] [Google Scholar] 114. Шмедес А., Брандслунд I. Анализ метилмалоновой кислоты в плазме с помощью тандемной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии. Clin Chem. 2006. 52: 754–7. [PubMed] [Google Scholar] 115. Магера М.Дж., Лейси Дж. М., Касетта Б., Ринальдо П. Метод определения общего гомоцистеина в плазме и моче с помощью разбавления стабильных изотопов и тандемной масс-спектрометрии с электрораспылением. Clin Chem. 1999; 45: 1517–22. [PubMed] [Google Scholar] 116. Kuhn J, Gotting C, Kleesiek K. Быстрый микромасштабный анализ гомоцистеина методом жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии.Clin Biochem. 2006. 39: 164–6. [PubMed] [Google Scholar] 117. Арндт Т., Гессреген Б., Холь А., Хейке Б. Общий гомоцистеин плазмы, измеренный методом жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии с использованием 96-луночных планшетов. Clin Chem. 2004. 50: 755–7. [PubMed] [Google Scholar] 118. Tuschl K, Bodamer OA, Erwa W., Muhl A. Быстрый анализ общего гомоцистеина плазмы с помощью тандемной масс-спектрометрии. Clin Chim Acta. 2005; 351: 139–41. [PubMed] [Google Scholar] 119. Ли С., Цзя Дж., Лю Дж., Ван В., Цай И, Ван И и др. Улучшенный и упрощенный метод LC-ESI-MS / MS для определения гомоцистеина в плазме крови человека: приложение для изучения сердечно-сосудистых заболеваний.J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2008; 870: 63–7. [PubMed] [Google Scholar] 120. Макканн С.Дж., Гиллингвотер С., Кивил Б.Г., Купер Д.П., Моррис М.Р. Измерение общего гомоцистеина в плазме и пятнах крови с помощью жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии: сравнение с методом Abbott IMx в плазме. Энн Клин Биохим. 2003. 40: 161–5. [PubMed] [Google Scholar] 121. Гемпель К., Гербиц К.Д., Касетта Б., Бауэр М.Ф. Быстрое определение общего гомоцистеина в пятнах крови методом жидкостной хроматографии, электрораспылительной ионизации и тандемной масс-спектрометрии.Clin Chem. 2000; 46: 122–3. [PubMed] [Google Scholar] 122. Ткачество G, Скалы Б.Ф., Иверсен С.А., Титерадж М.А. Одновременное количественное определение гомоцистеина, цистеина и метионина в плазме и моче методом жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии. Энн Клин Биохим. 2006; 43: 474–80. [PubMed] [Google Scholar] 123. Рафии М., Эланго Р., Кортни-Мартин Дж., Дом JD, Фишер Л., Пенчарц ПБ. Высокопроизводительное и одновременное измерение гомоцистеина и цистеина в плазме и моче человека с помощью тандемной масс-спектрометрии жидкостной хроматографии и электрораспыления.Анальная биохимия. 2007; 371: 71–81. [PubMed] [Google Scholar] 124. Hempen C, Wanschers H, van der Sluijs Veer G. Тандемный масс-спектрометрический метод быстрой жидкостной хроматографии для одновременного определения общего гомоцистеина и метилмалоновой кислоты. Anal Bioanal Chem. 2008; 391: 263–70. [PubMed] [Google Scholar] 125. Нельсон BC, Саттерфилд МБ, Сниегоски Л.Т., Уэлч М.Дж. Одновременное количественное определение гомоцистеина и фолиевой кислоты в сыворотке или плазме человека с использованием жидкостной хроматографии / тандемной масс-спектрометрии.Anal Chem. 2005; 77: 3586–93. [PubMed] [Google Scholar] 126. Кушнир М.М., Роквуд А.Л., Робертс В.Л., Паттисон Э.Г., Бункер А.М., Фицджеральд Р.Л. и др. Рабочие характеристики нового тандемного масс-спектрометрического анализа сывороточного тестостерона. Clin Chem. 2006; 52: 120–8. [PubMed] [Google Scholar] 127. Cawood ML, Field HP, Ford CG, Gillingwater S, Kicman A, Cowan D, et al. Измерение тестостерона с помощью жидкостной хроматографии с изотопным разбавлением и тандемной масс-спектрометрии: валидация метода для повседневной клинической практики.Clin Chem. 2005; 51: 1472–9. [PubMed] [Google Scholar] 128. Моал В., Матье Э, Рейнир П., Мальтьери И., Галлуа Ю. Низкий уровень тестостерона в сыворотке, определенный методом жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии. Сравнение с пятью методами иммуноанализа. Clin Chim Acta. 2007; 386: 12–9. [PubMed] [Google Scholar] 129. Shiraishi S, Lee PW, Leung A, Goh VH, Swerdloff RS, Wang C. Одновременное измерение сывороточного тестостерона и дигидротестостерона методом жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии. Clim Chem. 2008; 54: 1855–63.[PubMed] [Google Scholar] 130. Кушнир М.М., Роквуд А.Л., Нельсон Г.Дж., Терри А.Х., Мейкл А.В. Жидкостная хроматография-тандемный масс-спектрометрический анализ свободного кортизола в моче. Clin Chem. 2003. 49: 965–7. [PubMed] [Google Scholar] 131. Макканн С.Дж., Гиллингвотер С., Кивил Б.Г. Измерение свободного кортизола в моче с помощью жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии: сравнение с адаптированным для мочи ACS: 180 хемилюминесцентный иммуноанализ кортизола в сыворотке и разработка нового эталонного диапазона. Энн Клин Биохим. 2005; 42: 112–8.[PubMed] [Google Scholar] 132. Тейлор Р.Л., Мачачек Д., Сингх Р.Дж. Валидация метода высокопроизводительной жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии для определения кортизола и кортизона в моче. Clin Chem. 2002; 48: 1511–9. [PubMed] [Google Scholar] 133. Wood L, Ducroq DH, Fraser HL, Gillingwater S, Evans C., Pickett AJ, et al. Измерение свободного кортизола в моче с помощью тандемной масс-спектрометрии и сравнение с результатами, полученными с помощью газовой хроматографии-масс-спектрометрии и двух коммерческих иммуноанализов. Энн Клин Биохим.2008. 45: 380–8. [PubMed] [Google Scholar] 134. Гуо Т., Тейлор Р.Л., Сингх Р.Дж., Солдин С.Дж. Одновременное определение 12 стероидов с помощью тандемной масс-спектрометрии жидкостной хроматографии с ионизацией изотопов с ионизацией изотопов. Clin Chim Acta. 2006; 372: 76–82. [PubMed] [Google Scholar] 135. Кушнир М.М., Роквуд А.Л., Робертс В.Л., Паттисон Э.Г., Оуэн В.Е., Бункер А.М. и др. Разработка и оценка эффективности тандемного масс-спектрометрического анализа для 4 стероидов надпочечников. Clin Chem. 2006. 52: 1559–67. [PubMed] [Google Scholar] 136.Buiarelli F, Coccioli F, Merolle M, Neri B, Terracciano A. Разработка метода тандемной масс-спектрометрии с жидкостной хроматографией для идентификации природных андрогенных стероидов и их конъюгатов в образцах мочи. Анальный Чим Акта. 2004; 526: 113–20. [Google Scholar] 137. Посо О.Дж., Ван Иноо П., Ван Туин В., Девентер К., Дельбеке Ф.Т. Прямое количественное определение стероидных глюкуронидов в моче человека с помощью тандемной масс-спектрометрии жидкостной хроматографии и электрораспыления. J Chromatogr A. 2008; 1183: 108–18. [PubMed] [Google Scholar] 138.Кешишян Х., Аддона Т., Берджесс М, Кун Э., Карр С.А. Количественные мультиплексные анализы белков с низким содержанием в плазме с помощью целевой масс-спектрометрии и разведения стабильных изотопов. Протеомика клеток Mol. 2007; 6: 2212–29. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 139. Хортин Г.Л. Новая эра количественного определения белка в клинических лабораториях: применение тандемной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии. Clin Chem. 2007; 53: 543–4. [PubMed] [Google Scholar]

веб-семинаров LC и LCMS — 30-я неделя

На неделе, начиная с 26 июля 2021 г., вас ждут следующие веб-семинары в области LC и LCMS.Более подробную информацию и регистрацию можно найти в разделе ВЕБИНАРЫ:

Поиск и фильтрация в более чем 1 000 вебинаров LC и GC .

1. Agilent Technologies: Три колонки хроматографии: выбор колонки, метод и уход

Вебинар предоставит вам обзор распространенных типов колонок, выделит различия между полностью и частично пористыми частицами и рассмотрит способы устранения неисправностей в вторая часть.

2.Thermo Fisher Scientific: Анализ неповрежденных и количественное определение терапевтических белков

Здесь мы описываем рабочие процессы для количественного определения и определения характеристик на неповрежденном уровне.

3. Знакомство с экспертами — Часть 6 — Совместимое готовое решение для анализа E&L

На этом веб-семинаре будет представлен обзор совместимого готового решения для анализа E&L с использованием прибора Waters Xevo G2 XS QTof в сочетании с новой системой Waters_connect informatics Платформа.

4. Наука о разделении / UCT: Решения для тестирования PFAS и как лучше всего минимизировать внешние источники загрязнения

Вебинар, на котором докладчик предоставит решения для тестирования PFAS в соответствии с обновленным методом EPA 533 и объяснит, какие меры могут быть приняты. приняты для уменьшения внешних источников загрязнения.

5. Agilent Technologies: повысьте продуктивность вашей лаборатории с помощью двунаправленной LIMS и интеграции OpenLab CDS

Будучи надежным партнером вашей лаборатории, мы стремимся и дальше предоставлять вам НАДЕЖНЫЕ аналитические возможности для обеспечения ВЫСОКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ и повышения вашей ПРОИЗВОДИТЕЛЬНОСТИ И ПРИБЫЛЬНОСТИ .

6. Agilent Technologies: для получения превосходных результатов требуются превосходные столбцы… Сделайте правильный выбор для своего приложения GPC

Присоединяйтесь к нам в этом интерактивном вебинаре, чтобы обсудить различные аспекты выбора столбцов GPC.

7. Agilent Technologies: не только колонка; Подготовка и локализация проб

В этой презентации мы обсудим методы подготовки проб; какой и когда использовать, чтобы получить наилучшую хроматографию, продлить срок службы колонки и защитить ваш прибор.

8. Mestrelab Research: «Оцифровка своей химической лаборатории»

Демонстрация охватывает этапы от первого входа химика в систему до написания экспериментов, их повторения и сохранения аналитических данных (ЯМР, ЖХ, УФ).

9. Waters Corporation: Подготовьтесь к липидомике 2.0 с помощью Waters 2nd Edition

В этой второй серии вебинаров мы обсудим некоторые из последних аналитических подходов, которые были разработаны для устранения препятствий в липидомике.

10. Agilent Technologies: Расширьте свои знания о каннабисе с добавлением ЖХ / МС IQ для тестирования конопли

Технический взгляд на данные УФ и МС в продуктах из натуральной конопли, сравнивающих результаты для обеих форм обнаружения.

11. C & EN / Macmod: Анализ нитрозаминов в API

Этот вебинар начнется с краткого обзора образования нитрозаминов. Затем мы сосредоточимся на разработке метода ЖХ-МС / МС для анализа восьми целевых нитрозаминов.

12. Bruker Daltonics: масс-спектрометрическая визуализация с использованием Bruker timsTOF fleX с MALDI 2

Присоединяйтесь к нашей виртуальной прямой трансляции из лаборатории.

Выбросы речного пластика в мировые океаны

Поступление речной пластической массы в океаны

По нашим оценкам, от 1,15 до 2,41 миллиона тонн пластика в настоящее время попадает из глобальной речной системы в океаны ежегодно (рис. 1). 20 крупнейших рек-загрязнителей расположены в основном в Азии (таблица 1) и на них приходится более двух третей (67%) глобального годового поступления, при этом покрывая 2 реки.2% площади континентальной поверхности и 21% мирового населения. Кроме того, на 122 основных реки-загрязнителя (4% общей площади суши и 36% мирового населения) приходилось> 90% поступлений пластика, причем 103 реки расположены в Азии, восемь — в Африке, восемь — в Южной и Центральной Америке и один в Европе.

Рис. 1: Масса речного пластика, впадающего в океаны, в тоннах в год.

Вклад рек рассчитывается на основе индивидуальных характеристик водосбора, таких как плотность населения (в жилом км -2 ), неумелое производство пластиковых отходов (MPW) на страну (в кг, в жилом районе -1 г -1 ) и среднемесячное значение сток (в мм d −1 ).Модель откалибрована по измерениям концентрации пластика в реках из Европы, Азии, Северной и Южной Америки.

Таблица 1 Топ-20 рек-загрязнителей по прогнозам глобальной модели поступления пластика в реки.

Наша модель была откалибрована по данным о концентрациях микро- и макропластика в поверхностных водах рек Европы, Азии, Северной и Южной Америки (Таблица 2). Исследования, использованные для этой оценки, отражают только часть широкого спектра размеров пластикового мусора: от частиц больше, чем их чистый размер ячеек (обычно 0.3 мм) на объекты, размер которых меньше размера отверстия их устройств для отбора проб (обычно 0,5 м). Поэтому наша глобальная оценка поступления пластика в реки является консервативной, поскольку мы пренебрегаем вкладом мусора за пределами диапазона размеров выборки и ниже устройств для отбора проб на поверхности. Как плавучие, так и неплавучие речные пластмассы могут быть взвешены в толще воды и перенесены в море из-за турбулентных речных течений и крупных наводнений. 25 .

Таблица 2 Список наблюдательных исследований, использованных при калибровке глобальной модели поступления пластика в реки.

Концентрации пластической массы в реках из литературы (таблица 3) продемонстрировали статистически значимую положительную корреляцию с произведением годовой производительности ПДВ внутри водосбора ниже искусственных барьеров и среднемесячного стока с водосбора (тест на момент произведения Пирсона, r = 0,4132, P <0,05, n = 29). Корреляционный тест был проведен после удаления данных измерений из реки Янцзы, считающейся выбросом.При включении данных по реке Янцзы мы логически получили гораздо более высокую, но смещенную корреляцию ( r = 0,99, P <0,05, n = 30).

Таблица 3 Концентрация пластика в отобранных реках и характеристики водосборов.

Произведение годового производства ПДС внутри водосбора ниже искусственных барьеров и среднемесячного стока с водосбора за месяц, соответствующий периоду выборки, был использован для формулировки эмпирической модели.При оценке линейной регрессии учитывались неопределенности, связанные с оценкой суточных поступлений потока по измерениям концентрации. Мы определили три параметрических уравнения, соответствующих нижней, средней и верхней оценкам модели, чтобы наилучшим образом спрогнозировать диапазоны оценок на основе наблюдений и учесть эти неопределенности (дополнительная таблица 1). Наши расчеты средней точки продемонстрировали хорошую взаимосвязь с входными потоками массы, полученными из измерений по порядкам величины с коэффициентом детерминации r 2 = 0.93 ( n = 30; рис.2).

Рис. 2: Сравнение модели притока реки и измерений.

Кружки показывают средние оценки суточного поступления пластмасс из реки в океаны в кг d −1 . Усы простираются от нижних до верхних оценок, основанных на диапазоне средней массы частиц и соотношении между численными концентрациями макропластика и микропластика. Регрессионный анализ был проведен с 30 записями из 13 рек, представленными в семи исследованиях. Расположение 13 рек указано на карте.

Расчетные выбросы пластика из азиатских рек составили 86% от общего глобального поступления. Значительно высокая плотность населения в сочетании с относительно высокими уровнями производства ПДВ и эпизодами сильных дождей привели к этому доминирующему вкладу со стороны азиатского континента с расчетным ежегодным поступлением 1,21 (диапазон 1,00–2,06) миллиона тонн в год. Наша модель предсказала, что река Янцзы в Китае является крупнейшим водосборным бассейном с годовым притоком 0,33 (диапазон 0.31–0,48) миллиона тонн пластика сбрасывается в Восточно-Китайское море, за которым следует водосбор реки Ганг, между Индией и Бангладеш, с расчетным поступлением 0,12 (диапазон 0,10–0,17) миллиона тонн в год. Совокупный приток рек Си, Донг и Чжуцзян в Китае, впадающих в Южно-Китайское море в дельте Жемчужной реки, оценивается в 0,106 (диапазон 0,091–0,169) миллиона тонн в год, что ставит больший водосбор на третье место.

Индонезия также была определена как один из основных вкладчиков на азиатском континенте, при этом особую озабоченность вызывают четыре яванские реки.Реки Брантас, Соло, Сераю и Прого, соответственно, выбрасывают примерно 38 900 (диапазон 32 300–63 700), 32 500 (диапазон 26 500–54 100), 17 100 (диапазон 13 300–29 900) и 12 800 (диапазон 9 800–22 900) тонн пластика в год. В целом, мы рассчитали среднюю годовую эмиссию в 200 000 тонн (14,2% от общемирового объема) из индонезийских рек и ручьев, в основном с островов Ява и Суматра. Этот результат отражает уровни плотности населения, а также неправильное обращение с отходами в регионе, учитывая, что площадь поверхности этих водосборов на два-три порядка меньше, чем у других крупных рек в списке.

Остальные страны мира разделяют оставшиеся 14% поступления пластической массы реки, при этом 7,8% приходится на Африку с 109 200 (диапазон 85 700–192 000) тонн в год, 4,8% — на Южную Америку с 67 400 (диапазон: 52 700–119 000). тонн в год, 0,95% из Центральной и Северной Америки с 13,400 (диапазон: 8,880–28,200) тонн в год, 0,28% из Европы с 3,900 (диапазон: 2,310–9,320) тонн в год, а оставшиеся 0,02% из Австралии — Тихоокеанский регион с 300 (диапазон: 193–707) тонн в год.В частности, в Западной Африке: Кросс-Ривер — 40 300 (диапазон: 33 800–65 100) тонн в год, река Имо — 21 500 (диапазон: 17 500–35 100) тонн в год и река Ква Ибо — 11 900 (диапазон: 9 300–20 800) тонн. в год все они попали в список двадцати наиболее загрязняющих водосборов рек. В Южной Америке, по нашим оценкам, ежегодный приток в 38 900 (диапазон 32 200–63 800) тонн в год поступает из реки Амазонки, самой большой реки на земле по расходу воды, с притоками в Перу, Колумбии, Эквадоре и Бразилии.Также в Южной Америке мы прогнозировали значительный вклад реки Магдалена в Колумбии: 16 700 (диапазон 12 900–29 500) тонн в год впадает в Мексиканский залив.

Сезонность поступления пластика из рек в океаны

Используя среднемесячный дневной сток за период 2005–2014 гг., Мы оценили сезонные колебания смоделированного поступления пластика из рек в океаны во всем мире. По нашим оценкам,> 74,5% общего поступления пластика в реку приходится на период с мая по октябрь. Наша модель показала пик глобальных поступлений в августе, оцениваемый в 228 800 (диапазон 193 000–375 000) тонн, и самый низкий уровень в январе месяце, когда он составил 46 200 (диапазон 34 200–87 500) тонн.Эти сезонные результаты были в основном обусловлены значительными поступлениями из Китая, которые регулируются восточноазиатскими муссонами. В азиатском регионе противоположные сезоны между северным и южным полушариями создают различные муссонные режимы, разделенные Южно-Китайским морем 26 , с летними муссонами в Индии и Восточной Азии (с июня по сентябрь) в Северной и Юго-Восточной Азии Летний муссон ( С ноября по март) на юге 27 (рис. 3а).

Рисунок 3: Сезонность региональных выбросов речного пластика в океаны.

( a ) Места выхода реки обозначены трехместным периодом, когда происходит соответствующий пиковый вход. Пиковые сезоны для количества осадков из GLDAS 21 нанесены на карту континентальной суши, показывая четкую корреляцию с нашими предсказанными входными данными. ( b ) Относительная сезонность поступления пластика из рек в океан по континентам. Континентальные взносы выражаются в процентах от соответствующих годовых массовых поступлений.

Изменения в интенсивности осадков, связанные с муссонами, нашли отражение в прогнозируемых ежемесячных поступлениях пластика рек в океаны.Река Янцзы внесла среднюю оценку в 76 000 тонн в месяц в июле, но <2 500 тонн в месяц в январе. Аналогичным образом, наша модель показала средние оценки поступлений из реки Ганг, достигающие пика в августе и составившего 44 500 тонн в месяц, в то время как сток реки в период с декабря по март составляет <150 тонн в месяц. Однако в Юго-Восточной Азии максимальное попадание пластика в реки произошло в начале года, во время регионального сезона дождей. В Индонезии, например, смоделированные поступления архипелага достигли пика средней оценки в феврале и составили 35 000 тонн в месяц, по сравнению с 1800 тоннами в месяц в августе во время засушливого сезона.

Если посмотреть на сезонные поступления во всем мире, кажется, что относительные вариации в ежемесячных поступлениях с азиатского субконтинента не столь выражены, как для других континентов (рис. 3b). Это вызвано балансом между вкладом из Восточной Азии и Индийского субконтинента в течение лета в северном полушарии и вкладом из Юго-Восточной Азии в течение лета в южном полушарии. Для других частей света наша модель показала два различных пика поступления пластика в реки: один приходится на период с июня по октябрь для рек Африки, Северной и Центральной Америки, а другой — с ноября по май для рек Европы, Южной Америки и Австралии и Тихого океана.

Tesla заняла 30-е место в неофициальном дебюте по результатам исследования JD Power Dependability Study

Lexus LC 500 2018 года

Мак Хоган | CNBC

Согласно новому исследованию J.D. Power, тремя самыми надежными автомобильными брендами в США являются Lexus, Porsche и Kia. Три наименее надежных — это Jaguar, Alfa Romeo и Land Rover.

Tesla, впервые представленная в исследовании надежности автомобилей в этом году, заняла 30-е место из 33 автопроизводителей. Он приземлился на одно место позади Chrysler и на одно перед Jaguar.

Исследования J.D. Power служат отраслевым эталоном, а их результаты могут стимулировать продажи и влиять на страховые взносы владельцев. В исследовании надежности транспортных средств США в 2021 году были проанализированы ответы 33 251 подтвержденного владельца автомобилей 2018 модельного года, проданных в США. В исследовании оценивалось около 150 различных моделей, включая легковые автомобили, грузовики и внедорожники.

Рейтинг Tesla в 32-летнем ежегодном исследовании этого года считается неофициальным, сказал Дэйв Сарджент, вице-президент по автомобильному качеству J.D. Power.Это связано с тем, что предприятие Илона Маска по производству электромобилей не дает J.D. Power разрешения на проведение опроса своих владельцев в 15 штатах, в которых это требуется.

Одним из исключенных штатов является Калифорния, базовая станция Tesla и огромный рынок для компании. Тем не менее, в исследование J.D. Power было включено 756 респондентов Tesla из 35 различных штатов, включая крупные рынки со сравнительно теплой погодой, такие как Флорида и Техас.

В то время как Tesla получила неофициально низкую оценку надежности, она неофициально превзошла J.Опрос D. Power’s APEAL 2020 года, в котором марки автомобилей оцениваются по эмоциональной привязанности владельцев и уровню энтузиазма в отношении своих новых автомобилей.

Кто на высоте, кто проиграл

В ходе обследования надежности водителей спрашивают, сколько и каких проблем испытали их автомобили, грузовики или внедорожники за последний год, и присваивают баллы, основанные на проблемах, обнаруженных на 100 автомобилей. Чем ниже оценка, тем надежнее автопроизводитель.

Наибольшее количество проблем, о которых сообщили владельцы автомобилей всех марок и моделей, касалось аудио, коммуникационных, развлекательных и навигационных систем.

«Поскольку приложения для смартфонов все чаще предоставляют владельцам альтернативу, некоторые откажутся от встроенных систем автомобиля, которые вызвали это первоначальное разочарование. Это проблематично для автопроизводителей, поскольку большая часть стоимости автомобиля связана с этими системами, а они не «не хочу передавать этот бизнес третьим лицам», — сказал Сарджент.

Porsche 911 получил самую высокую оценку в исследовании 2021 года.

Lexus, принадлежащий Toyota, возглавил список среди всех брендов с 81 проблемой на 100 автомобилей.

Автомобили Kia заметно выросли из наименее надежных автомобильных брендов в США до самых надежных всего за десять лет, в среднем 97 проблем на 100 автомобилей. Лидирует Toyota с 98 проблемами на 100 автомобилей.

Volkswagen, представивший в 2018 году две новые модели, опустился в рейтинге надежности. Сарджент отметил: «На результаты может повлиять тот факт, что производитель только что выпустил кучу новых продуктов. Они, как правило, являются наиболее проблемными в первый год выпуска.«

Владельцы Tesla 3-летней давности сообщили о 176 проблемах на 100 автомобилей, по сравнению со средним показателем по отрасли в США, равным 121 проблеме на 100 автомобилей. Владельцы Tesla сообщили о большем количестве проблем с их внешним видом и интерьером, чем с другими системами, такими как силовая установка, аккумулятор или информационно-развлекательная система и навигация. Тем не менее, некоторые действительно жаловались на проблемы с распознаванием голоса в автомобиле Tesla.

В целом, по данным JD Power, надежность автомобиля улучшилась примерно на 10% в год. Частично это было связано с меньшим использованием и злоупотреблением транспортных средств на фоне пандемии Covid, которая ограничила поездки на работу и поездки в США в 2020 году.

«Мы знаем, что чем больше людей используют автомобиль, тем больше у них проблем», — сказал Сарджент. В прошлом году в среднем потребители проезжали около 32 000 миль за три года владения новым автомобилем. В этом году они проехали 29 000 миль, что представляет собой сокращение на 10% за трехлетний период и подразумеваемое сокращение на 30% за последний год.

— Майкл Вэйланд из CNBC внес свой вклад в этот отчет.

Влияние низкожировой и низкоуглеводной диеты на 12-месячную потерю веса у взрослых с избыточным весом и связь с генотипом или секрецией инсулина: рандомизированное клиническое испытание DIETFITS | Образ жизни | JAMA

Ключевые моменты

Вопрос Какое влияние оказывает здоровая диета с низким содержанием жиров (HLF) по сравнению со здоровой диетой с низким содержанием углеводов (HLC) на изменение веса через 12 месяцев, и связаны ли эти эффекты с генотипом или секрецией инсулина?

Выводы В этом рандомизированном клиническом исследовании с участием 609 взрослых с избыточной массой тела изменение веса за 12 месяцев существенно не отличалось для участников группы, принимавшей HLF-диету (−5.3 кг) по сравнению с группой диеты HLC (-6,0 кг), и не было значительного взаимодействия диета-генотип или диета-инсулин с 12-месячной потерей веса.

Значение Не было существенной разницы в 12-месячной потере веса между диетами HLF и HLC, и ни генотип, ни исходная секреция инсулина не были связаны с диетическим влиянием на потерю веса.

Важность Модификация диеты остается ключом к успешной потере веса.Тем не менее, ни одна из диетических стратегий для населения в целом не превосходит другие. Предыдущие исследования показывают, что генотип или динамика инсулина и глюкозы могут влиять на влияние диеты.

Объектив Определить влияние здоровой диеты с низким содержанием жиров (HLF) по сравнению со здоровой диетой с низким содержанием углеводов (HLC) на изменение веса и связь генотипа или секреции инсулина с диетическим влиянием на потерю веса.

Дизайн, обстановка и участники В рандомизированное клиническое исследование диетических вмешательств, изучающих факторы, влияющие на успех лечения (DIETFITS), участвовали 609 взрослых в возрасте от 18 до 50 лет без диабета с индексом массы тела от 28 до 40.Набор в исследование проходил с 29 января 2013 г. по 14 апреля 2015 г .; Дата окончательного наблюдения — 16 мая 2016 г. Участники были рандомизированы на 12-месячную диету HLF или HLC. В исследовании также проверялось, связаны ли три мультилокусных генотипа реактивности с тремя однонуклеотидными полиморфизмами или секреция инсулина (INS-30; концентрация инсулина в крови через 30 минут после введения глюкозы) с потерей веса.

Вмешательства Инструкторы по санитарному просвещению провели вмешательство по модификации поведения участникам HLF (n = 305) и HLC (n = 304) с помощью 22 занятий в малых группах, посвященных диете, которые проводились в течение 12 месяцев.Сессии были сосредоточены на способах достижения минимального потребления жиров или углеводов, которое можно поддерживать в течение длительного времени, и на качестве диеты.

Основные результаты и мероприятия Первичным результатом было 12-месячное изменение веса и определение наличия значительных взаимодействий между типом диеты и генотипом, диетой и секрецией инсулина, диетой и потерей веса.

Результаты Среди 609 рандомизированных участников (средний возраст 40 [SD, 7] лет; 57% женщин; средний индекс массы тела 33 [SD, 3]; 244 [40%] имели генотип с низким содержанием жиров; 180 [30%] имели низкоуглеводный генотип; средний исходный уровень INS-30, 93 мкМЕ / мл), 481 (79%) завершили исследование.В диетах HLF и HLC, соответственно, среднее распределение макронутриентов за 12 месяцев составило 48% против 30% для углеводов, 29% против 45% для жира и 21% против 23% для белка. Изменение веса через 12 месяцев составило -5,3 кг для диеты HLF по сравнению с -6,0 кг для диеты HLC (средняя разница между группами 0,7 кг [95% ДИ, от -0,2 до 1,6 кг]). Не было значимого взаимодействия диета-генотип ( P = 0,20) или взаимодействия диета-секреция инсулина (INS-30) ( P = 0,47) при 12-месячной потере веса. Было 18 нежелательных явлений или серьезных нежелательных явлений, которые были равномерно распределены между 2 группами диеты.

Выводы и значимость В этом 12-месячном исследовании диеты для похудания не было значительных различий в изменении веса между здоровой диетой с низким содержанием жиров и здоровой диетой с низким содержанием углеводов, и ни генотип, ни исходная секреция инсулина не были связаны с диетическим влиянием на потерю веса. . В контексте этих двух распространенных диетических подходов к снижению веса ни один из двух предполагаемых предрасполагающих факторов не помог определить, какая диета для кого была лучше.

Регистрация пробной версии Clinicaltrials.gov Идентификатор: NCT01826591

Quiz Ref IDObesity — серьезная проблема общественного здравоохранения 21 века. 1 , 2 Среди множества изученных стратегий похудания общим контрастом были диеты с низким содержанием жиров и диеты с низким содержанием углеводов. 3 -5 В большинстве исследований диет сообщалось о умеренной (т.е. <5%) средней потере веса через 12 месяцев и незначительной разнице в средней потере веса между группами диеты. 6 Напротив, в этих исследованиях индивидуальные потери веса широко варьировались в пределах диетических групп, в пределах от примерно 25 кг до примерно 5 кг. 3 -5

Существенная вариабельность реакции на снижение веса предполагает, что некоторые стратегии могут работать для одних людей лучше, чем для других, и что ни одна диета не может быть рекомендована повсеместно. 7 Тем не менее, индивидуальные различия в реакции на диету плохо изучены.В некоторых исследованиях сообщается, что вариации генотипа могут предрасполагать людей к дифференциальной потере веса, которая зависит от типа диеты. 8 , 9

В предварительном ретроспективном исследовании наблюдалась трехкратная разница в 12-месячной потере веса у первоначально полных женщин, у которых было определено, что они соответствовали друг другу (средняя потеря веса 6 кг) и не соответствовали друг другу (средняя потеря веса 2 кг). к диете с низким содержанием жиров или углеводов на основе мультилокусных генотипов с однонуклеотидными полиморфизмами (SNP) из 3 генов ( PPARG , ADRB2 и FABP2 ), имеющих отношение к метаболизму жиров и углеводов (предполагаемый низкий -чувствительный к жирам генотип и генотип с низким уровнем углеводов).Было замечено, что участники с генотипом с низким содержанием жиров теряли больше веса при назначении диеты с низким содержанием жиров, чем участники с низким содержанием углеводов, и наоборот, с генотипом с низким содержанием углеводов. 9 , 10

Quiz Ref ID Аналогичным образом, в нескольких исследованиях 11 -14 сообщалось, что исходная динамика инсулина может объяснить различный успех в потере веса, достигнутый с помощью диеты с низким содержанием жиров по сравнению с диетой с низким содержанием углеводов.Например, люди с более высокой инсулинорезистентностью могут иметь больший успех при использовании низкоуглеводных диет из-за снижения потребности в инсулине для очистки меньшего количества пищевых углеводов, поступающих в кровоток. Однако эти исследования были ограничены относительно небольшими размерами выборки или ретроспективным анализом результатов.

Основная цель исследования диетических вмешательств, посвященных изучению факторов, влияющих на успех лечения (DIETFITS), заключалась в том, чтобы проверить, есть ли (1) набор из 3 паттернов генотипа SNP или (2) базовые различия в секреции инсулина (концентрация инсулина в крови через 30 минут). после введения глюкозы; INS-30), 12 , 13 или оба, предрасположенные к различному успеху в изменении веса за 12 месяцев при соблюдении диеты с низким содержанием жиров по сравнению с диетой с низким содержанием углеводов.

Комитет Стэнфордского университета по гуманитарным предметам одобрил исследование. Все участники исследования предоставили письменное информированное согласие.

Это одноцентровое исследование диеты для снижения веса в параллельных группах рандомизировало людей на здоровую диету с низким содержанием жиров или здоровую диету с низким содержанием углеводов в течение 12 месяцев. Набор участников начался 29 января 2013 г. и продолжался до 14 апреля 2015 г. Дата окончательного наблюдения — 16 мая 2016 г.Вмешательства состояли в основном из обучения в классе. В период с марта 2013 г. по март 2015 г. даты начала пяти волн набора (когорт) были перенесены. Первичным результатом было изменение веса за 12 месяцев.

Первая основная гипотеза заключалась в том, что существует значимое взаимодействие диеты и модели генотипа для снижения веса. Вторая основная гипотеза заключалась в том, что существует значительное взаимодействие диеты и секреции инсулина для похудания. Вторичные результаты включали антропометрические измерения, уровни липидов в плазме, уровни инсулина и глюкозы, а также уровни артериального давления.План обновления протокола и статистического анализа включен в Приложение 1, а полный протокол исследования был опубликован ранее 10 (протокол включал подробности относительно отбора проб крови, хранения и конкретных лабораторных анализов).

Мы стремились набрать 600 взрослых из областей Калифорнии в Стэнфорде и Сан-Франциско, используя рекламу в средствах массовой информации и списки адресов электронной почты от предыдущего набора для исследований питания, проведенных нашей лабораторной группой.Мы рассматривали мужчин и женщин в пременопаузе в возрасте от 18 до 50 лет с индексом массы тела (рассчитанным как вес в килограммах, разделенный на рост в метрах в квадрате) от 28 до 40.

Основными критериями исключения были неконтролируемая гипертензия или нарушение обмена веществ; диабет; рак; болезнь сердца, почек или печени; и беременность или кормление грудью. Исключались лица, принимавшие гипогликемические, гиполипидемические, гипотензивные, психиатрические или другие лекарства, которые, как известно, влияют на массу тела или расход энергии.Допускался любой неуказанный тип лекарств, если пациент оставался стабильным при приеме таких лекарств не менее 3 месяцев до сбора исходных данных.

Рандомизация на здоровую диету с низким содержанием жиров или здоровую диету с низким содержанием углеводов была выполнена с использованием последовательности распределения, определенной с помощью компьютеризированной генерации случайных чисел (Blockrand в R версии 3.4.0; R Project for Statistical Computing) в блоках размером 8 ( с 4 людьми, соблюдающими каждую диету) статистиком, не участвующим в проведении вмешательства или сборе данных.Участники не узнали о назначении своей группы диеты, пока они не завершили все базовые измерения и не посетили свой первый класс вмешательства (Рисунок 1).

Первоначальный дизайн исследования представлял собой факторный план 2 × 2 (диета × соответствие генотипа и паттерну). Однако ближе к началу исследования первоначальное финансирование было увеличено более чем вдвое, что позволило увеличить размер выборки на 50%, добавить вторую основную гипотезу для оценки взаимодействия диеты и секреции инсулина и расширить набор критериев. измерения.Чтобы проверить обе основные гипотезы, исследование было изменено на простой параллельный групповой дизайн с тестированием на 2 взаимодействия (более подробно описано в eAppendix 1 в Приложении 2).

Протокол включал 1-месячный вводный период, в течение которого участников проинструктировали соблюдать их обычную диету, уровень физической активности и массу тела. Мероприятие включало 22 учебных занятия, проведенных в течение 12 месяцев в группах, ориентированных на определенную диету, примерно по 17 человек в классе.Сеансы проводились еженедельно в течение 8 недель, затем каждые 2 недели в течение 2 месяцев, затем каждые 3 недели до шестого месяца, а затем ежемесячно. Занятия возглавляли 5 зарегистрированных диетологов, занимающихся санитарным просвещением, каждый из которых преподавал 1 класс здорового питания с низким содержанием жиров и 1 класс здорового питания с низким содержанием углеводов на когорту. Диетологи не знали всех лабораторных показателей и генотипа.

Диетические вмешательства были описаны ранее. 10 Вкратце, основные цели заключались в достижении максимальной дифференциации потребления жиров и углеводов между двумя диетическими группами при сохранении в остальном одинаковой интенсивности лечения и упора на высококачественные продукты питания и напитки.Таким образом, участникам было рекомендовано снизить потребление общих жиров или усвояемых углеводов до 20 г / день в течение первых 8 недель. Более высокие приоритеты для сокращения были отданы конкретным продуктам питания и группам продуктов, которые получают свою энергетическую ценность в основном за счет жиров или углеводов. Например, сокращение потребления пищевых масел, жирного мяса, цельножирных молочных продуктов и орехов было приоритетным для группы здоровых продуктов с низким содержанием жиров, тогда как сокращение употребления злаков, зерна, риса, крахмалистых овощей и бобовых было приоритетным для здорового минимума. -углеводная группа.

Затем люди медленно добавляли жиры или углеводы в свой рацион с приращениями от 5 до 15 г / день в неделю, пока они не достигли самого низкого уровня потребления, который, по их мнению, можно было поддерживать бесконечно. Никаких четких инструкций по ограничению энергии (килокалорий) не было. Обе диетические группы были проинструктированы: (1) максимально увеличить потребление овощей; (2) минимизировать потребление добавленных сахаров, рафинированной муки и транс-жиров ; и (3) сосредоточьтесь на цельных продуктах, которые были минимально обработаны, насыщены питательными веществами и по возможности приготовлены дома.Другие компоненты акцента на высококачественную пищу для обеих диетических групп описаны в другом месте. 10

Участникам было рекомендовано следовать текущим рекомендациям по физической активности. 15 Педагоги по санитарному просвещению уделяли особое внимание эмоциональной осведомленности и модификации поведения, чтобы поддержать соблюдение диеты и потерю веса. Стратегии модификации поведения включали эмпирически подтвержденные принципы саморегулируемого изменения поведения (например, постановка целей, построение самоэффективности, поддерживающая среда и предотвращение рецидивов), основанные на социальной когнитивной теории и транстеоретической модели. 10 , 16 -18

Все данные были собраны на исходном уровне и на 3, 6 и 12 месяцах для всех когорт, если не указано иное. Персонал, который измерял исходы, не имел информации о назначении диеты, структуре генотипа, INS-30 и назначении диеты. Потребление пищи в каждый момент времени оценивалось с помощью 3 необъявленных 24-часовых интервью с многократным повторением (2 в будние дни и 1 в выходные дни). 19

Общие энергетические затраты оценивались с помощью Стэнфордского опросника по воспоминаниям о семидневной физической активности. 20 И диетическое потребление, и отзыв о физической активности были самооценками. Вес измерялся цифровой шкалой в Стэнфордском отделении клинических трансляционных исследований, и основным результатом было изменение веса за 12 месяцев.

Генотип и секреция инсулина оценивались для тестирования взаимодействия. Микроматрицу Affymetrix UK Biobank Axiom использовали для анализа 820967 SNP и вставок или делеций. В массив входили 2 SNP из первоначального дизайна исследования: PPARG (rs1801282) и ADRB2 (rs1042714). FABP2 (rs1799883) было вменено с помощью оценки качества вменения ( r 2 = 0,99). Дополнительные сведения представлены в приложении 2 к Приложению 2. Ранее были исследованы 3 мультилокусных генотипа SNP. 9

Из 27 возможных 3-локусных генотипов, которые могли возникнуть в результате комбинации 3 SNP, 15 наблюдались с частотой генотипа 1% или выше в ранее изученных выборках взрослых. Мультилокусные генотипы были сгруппированы на те, которые, по прогнозам, более чувствительны к жирам (генотип с низким содержанием жира; образцы 1-5), более чувствительны к углеводам (генотип с низким содержанием углеводов; образцы 6-14) или чувствительны ни к одному из генотипов (образец 15 ).Дополнительные сведения доступны в Приложении 3 в Приложении 2.

Перед рандомизацией и через 6 и 12 месяцев каждый участник прошел пероральный тест на толерантность к глюкозе с дозой 75 г. Это включало измерение концентрации инсулина через 30 минут после потребления глюкозы (т.е. INS-30, который является косвенным показателем секреции инсулина). 10 , 21 , 22 Когда это исследование было впервые разработано, необходимо было измерить чувствительность к инсулину и использовать ее в качестве предиктора успеха дифференциальной потери веса.После начала исследования были опубликованы отчеты 12 , 13,23 , 24 , показывающие, что INS-30 был успешным средством прогнозирования потери веса в контексте низкоуглеводных диет или подобных диет. Также были доказательства 25 , что ранняя фаза секреции инсулина заметно различалась между диетами, которые были аналогичны тем, которые были протестированы в исследовании DIETFITS. Перед изучением каких-либо данных мы изменили основную гипотезу нашего исследования и протестировали исходный INS-30, а не показатель чувствительности к инсулину в качестве предполагаемого модификатора эффекта.Никакие другие переменные глюкозы или инсулина на предмет модификации эффекта не тестировались.

Был оценен набор связанных вторичных исходов. Концентрации липидов, глюкозы и инсулина в плазме измеряли в образцах натощак, окружность талии измеряли с помощью измерительной ленты, артериальное давление измеряли с помощью автоматического устройства, и все это оценивалось с использованием стандартных методов оценки. 10

Состав тела оценивали с помощью двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии и коэффициента дыхательного обмена (ограниченного 0.7 [использование только жира в качестве топлива] и 1,0 [использование только глюкозы в качестве топлива]) и расход энергии в состоянии покоя оценивались метаболической тележкой (т. Е. Измеряется дыхательный обмен кислорода и углекислого газа, когда участник лежит на спине и отдыхает) на исходном уровне и при 6 и 12 месяцев в когортах 2–5. Достаточное финансирование для двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии, коэффициента респираторного обмена и расхода энергии в состоянии покоя стало доступным только после включения в группу 1. Метаболический синдром был определен с использованием рекомендаций группы III по лечению взрослых Национальной образовательной программы по холестерину. 26

Исходя из первоначального дизайна исследования, предполагающего 100 участников в каждой из 4 релевантных групп (генотип и диетическое назначение) и нормально распределенные значения изменения веса через 12 месяцев, было 80% вероятности обнаружения клинически значимых различий в эффекте лечения путем генотип (например, повлияло ли назначение диеты на изменение веса через 12 месяцев, за исключением тех, кто был назначен на низкоуглеводную диету, у которых есть низкоуглеводный генотип, потому что такие люди теряют 3.В среднем 2 кг). Этот расчет был основан на моделировании и предполагал двусторонний тест Вальда, проведенный на уровне значимости 0,05.

При аналогичных предположениях относительно статистического тестирования и ошибки типа I, а также при условии, что размер выборки составляет всего 400 участников (200 в каждой группе лечения), была более 80% мощности для обнаружения различий в эффекте лечения с секрецией инсулина, в том числе для Например, если на каждую 1-ю единицу увеличения секреции инсулина потеря веса через 12 месяцев увеличивается на 0.8 фунтов (0,36 кг). Эти расчеты мощности были выполнены априори для первоначально запланированного размера выборки в 400. Как более подробно описано в электронном приложении 1 в Приложении 2, после первоначального финансирования Национальными институтами здравоохранения и Национальным институтом диабета, болезней органов пищеварения и почек в США. В 2012 году было получено дополнительное финансирование для расширения исследования, которое включало, среди прочего, увеличение размера выборки с 400 до 600 и добавление INS-30 в качестве второй переменной для тестирования взаимодействия.При большем размере выборки исследование имело еще большую статистическую мощность, оцененную на уровне 90% на основе апостериорных расчетов.

Основные гипотезы касались 12-месячного изменения веса в зависимости от диеты, диеты и генотипа, а также диеты и исходного уровня INS-30. Все гипотезы были рассмотрены с использованием обобщенных линейных моделей со смешанными эффектами. 27 , 28 Мы применили модифицированные принципы лечения. Это означает, что все участники, которые были рандомизированы и имели исходную информацию, были включены в анализ и проанализированы в соответствии с первоначальным назначением лечения, независимо от приверженности лечению или отказа от последующего наблюдения (рис. 1).Для гипотезы о влиянии группы диеты на 12-месячное изменение веса использовалась линейная модель смешанных эффектов для веса, учитывающая недостающие данные при гибких предположениях относительно пропущенных данных, с фиксированными эффектами для диеты, времени (исходный уровень, 3, 6, и 12 месяцев), а также их взаимодействие со случайным эффектом для участника. Для гипотез, касающихся диеты и генотипа (или диеты и исходного уровня INS-30), был добавлен дополнительный фиксированный эффект для генотипа (или исходного уровня INS-30), наряду со всеми 2- и 3-сторонними взаимодействиями (модель представлена ​​в приложении 4 электронного приложения). Дополнение 2).

Достоверность такого анализа основывается на предположении, что отсутствующие данные о результатах, измеренные при последующем наблюдении, не связаны с ненаблюдаемыми значениями веса, обусловленными наблюдаемыми переменными, такими как назначение лечения, исходные и периодические значения веса. Гипотеза о диете была проверена с помощью теста Вальда на двустороннее взаимодействие между 12-месячной временной точкой и диетой. Гипотеза о генотипе (или исходном уровне INS-30) была проверена с использованием теста Вальда для трехстороннего взаимодействия между 12-месячной временной точкой, диетой и генотипом (или исходным уровнем INS-30).Генотип был определен как соответствующий для тех участников с комбинацией 3-SNP, свидетельствующих об успехе на низкоуглеводной диете, которые были рандомизированы на низкоуглеводную диету, или для тех участников с комбинацией 3-SNP, предполагающей успех на низкожировой диете. которые были рандомизированы на диету с низким содержанием жиров. В противном случае генотип был определен как несовпадающий и описан в eAppendices 2 и 3 в Приложении 2.

Было 185 человек, которые не были классифицированы как имеющие генотип с низким содержанием жиров или с низким содержанием углеводов (146 человек с другими паттернами 3-SNP и 39 с отсутствующими или скомпрометированными данными генотипирования), которые были исключены из анализа генотипа. для первой гипотезы, как планировалось изначально. 10 Был проведен дополнительный анализ генотипа диеты, ограничив исследуемую популяцию только белыми и сосредоточив внимание только на одной группе происхождения, как первоначально планировалось. 10 Вторая гипотеза была проверена с использованием теста Вальда на взаимодействие между диетой, 12-месячной временной точкой и исходным уровнем INS-30. Переменная INS-30 была проанализирована как непрерывная переменная, но представлена ​​в виде тертилей для простоты представления параллельно с представлением данных паттерна генотипа. Границы для тертилей были определены с использованием исходных концентраций инсулина для всех 609 участников.

Приближение Саттертуэйта для степеней свободы знаменателя использовалось во всех тестах Вальда. 29 Все тесты были двусторонними и проводились с уровнем значимости 0,05. Формальная проверка гипотез проводилась только для двух основных гипотез. Все остальные значения P , которые были получены, носили чисто описательный характер и соответствуют вторичному и исследовательскому анализу. Статистический анализ был выполнен с использованием R версии 3.4.0 (R Project for Statistical Computing).В частности, пакет lme4 30 использовался для моделей со смешанными эффектами, а пакет lmerTest 29 использовался для проверки гипотез в моделях со смешанными эффектами.

Среди 609 рандомизированных участников (средний возраст 40 [SD, 7] лет; 57% женщин; средний индекс массы тела 33 [SD, 3]; 244 [40%] имели генотип с низким содержанием жиров; 180 [30%] имели низкоуглеводный генотип; средний исходный уровень INS-30, 93 мкМЕ / мл), 481 (79%) завершили исследование. Схема участников испытания представлена ​​на Рисунке 1.Исходные характеристики по группам диеты представлены в таблице 1. Среди участников группы здоровой диеты с низким содержанием жиров 130 (42,6%) имели генотип с низким содержанием жиров, а 83 (27,2%) имели генотип с низким содержанием углеводов, тогда как в группе здоровых людей с низким содержанием жира. -углеводная группа, 114 (37,5%) имели генотип с низким содержанием жиров, а 97 (31,9%) имели генотип с низким содержанием углеводов.

Из 22 назначенных занятий с инструкциями по вмешательству для полной выборки исследования среднее количество посещенных занятий составило 14,4 (стандартное отклонение, 5,3) для группы здоровой диеты с низким содержанием жиров и 14.6 (SD, 5.1) для группы здоровой низкоуглеводной диеты, которая включает выбывшие. Удержание через 12 месяцев, которое было определено как участники, предоставившие какие-либо данные через 12 месяцев, составило 79% для обеих групп. Оценки участников за энтузиазм преподавателей здоровья и знание материала были высокими и одинаковыми в разных диетических группах. Средние оценки составляли от 4,6 до 5,0 по шкале от 1 до 5, при этом 5 — самая высокая оценка.

Общее потребление энергии не отличалось между группами диеты на исходном уровне или в любой последующий момент времени ( P ≥.10 для всех; Таблица 2). Несмотря на отсутствие указаний следовать определенному ограничению потребления энергии (килокалорий), среднее зарегистрированное снижение потребления энергии относительно исходного уровня составляло приблизительно от 500 до 600 ккал / день для обеих групп в каждый момент времени после рандомизации.

На исходном уровне не было значительных различий между группами по каким-либо исследуемым питательным веществам. Напротив, после рандомизации в каждой временной точке наблюдались значительные различия между группами (все P ≤.001) для процента энергии; потребление углеводов, жиров, белков, насыщенных жиров, клетчатки и добавленных сахаров; гликемический индекс и гликемическая нагрузка (Таблица 2). При здоровой диете с низким содержанием жиров и здоровой диете с низким содержанием углеводов, соответственно, среднее 12-месячное распределение макронутриентов составляло 48% против 30% для углеводов, 29% против 45% для жира и 21% против 23% для белка.

Среднее изменение веса за 12 месяцев составило -5,3 кг (95% ДИ, от -5,9 до -4,7 кг) для группы здоровой диеты с низким содержанием жиров и -6.0 кг (95% ДИ, от -6,6 до -5,4 кг) для группы со здоровой низкоуглеводной диетой, что не различается статистически (таблица 3). Был подобный диапазон изменения веса примерно на 40 кг в каждой группе (от -30 кг до 10 кг; см. Рисунок 1 в Приложении 2).

Тест на взаимодействие между диетой, генотипом и 12-месячной временной точкой не был статистически значимым. Интерпретация коэффициента бета для 3-стороннего взаимодействия (коэффициент бета, 1.38 [95% ДИ, от -0,72 до 3,49], P = 0,20) заключается в том, что изменение веса за 12 месяцев увеличивается (оценивается на 1,38 кг) при переходе от здоровой низкоуглеводной диеты и низкоуглеводного генотипа на здоровая диета с низким содержанием жиров и генотип с низким содержанием жиров, помимо основных эффектов перехода со здоровой диеты с низким содержанием углеводов на диету с низким содержанием жиров и с генотипа с низким содержанием углеводов на генотип с низким содержанием жиров (рис. 2A). Это указывает на то, что не было значительной разницы в изменении веса среди участников, которые соответствовали и не соответствовали назначенной диете на основе их 3-SNP генотипа.В анализах, ограниченных только участниками европейского происхождения, не наблюдалось значительного взаимодействия по структуре генотипа (трехстороннее взаимодействие для основной диеты, генотипа и времени дало коэффициент бета 2,58 [95% ДИ, от -0,18 до 5,34]; P = 0,07).

Аналогичным образом, тест на взаимодействие между диетой, исходной секрецией инсулина (INS-30) и 12-месячной временной точкой не был статистически значимым. Интерпретация коэффициента бета для 3-стороннего взаимодействия (коэффициент бета, 0.08 [95% ДИ, от -0,13 до 0,28], P = 0,47) заключается в том, что изменение веса за 12 месяцев увеличивается (оценивается как 0,08 кг) при переходе от здоровой низкоуглеводной диеты и x единиц базового INS -30 к здоровой диете с низким содержанием жиров и x + 10 единиц исходного INS-30 помимо эффектов перехода от здоровой низкоуглеводной диеты к здоровой низкожировой диете и увеличения исходного INS-30 на 10 мкМЕ / мл (рис. 2В). Траектории изменения веса для подгрупп диеты-генотипа представлены на электронном рисунке 2A, а для диеты и тертильных подгрупп INS-30 на электронном рисунке 2B в Приложении 2 .

Было отмечено улучшение вторичных результатов для обеих диетических групп. Однако значительных различий между группами по индексу массы тела, процентному содержанию телесного жира и окружности талии не наблюдалось (таблица 3). Через 12 месяцев относительно исходного уровня обе диеты улучшили липидный профиль и снизили артериальное давление, уровень инсулина и глюкозы, за исключением концентрации холестерина липопротеинов низкой плотности, которая увеличилась у участников из здоровой низкоуглеводной группы (таблица 3).12-месячные изменения концентрации холестерина липопротеинов низкой плотности в значительной степени способствовали здоровой диете с низким содержанием жиров. Концентрации холестерина липопротеинов высокой плотности увеличились значительно больше, а концентрации триглицеридов снизились значительно больше в группе здоровой низкоуглеводной диеты, чем в группе здоровой диеты с низким содержанием жиров. Снижение распространенности метаболического синдрома существенно не различалось между группами, соблюдающими диету.

Коэффициент респираторного обмена существенно не отличался между группами на исходном уровне, но был ниже для группы со здоровой низкоуглеводной диетой, чем для группы со здоровой низкожировой диетой в каждый момент времени после рандомизации ( P <.001; eТаблица 1 в Приложении 2). Расход энергии в состоянии покоя существенно не отличался между группами на исходном уровне, через 6 или 12 месяцев, но значительно снизился по сравнению с исходным уровнем в обеих диетических группах. Общий расход энергии существенно не отличался между группами на исходном уровне или в любой другой момент времени. Относительно исходного уровня наблюдалось небольшое абсолютное среднее увеличение расхода энергии для обеих диетических групп, которое существенно не отличалось от исходного уровня.

В ходе исследования было зарегистрировано 7 серьезных нежелательных явлений, все из которых потребовали госпитализации; 2 из них могли быть связаны с исследованием (камни в почках и дивертикулит, требующие хирургического вмешательства).Было 11 нежелательных явлений; 9 из них были связаны с исследованием или, возможно, связаны (например, гипогликемия после перорального теста на толерантность к глюкозе). Комбинированные серьезные нежелательные явления и нежелательные явления были равномерно распределены между двумя диетическими группами.

Quiz Ref ID В этом клиническом испытании 609 в целом здоровых взрослых с избыточным весом или ожирением без диабета, которым случайным образом были назначены здоровая диета с низким содержанием жиров и здоровая диета с низким содержанием углеводов, не было значительных различий в потере веса через 12 месяцев.Кроме того, не было значительных взаимодействий между диетой и 3-мя мультилокусными генотипами SNP или диетой и исходной секрецией инсулина при 12-месячной потере веса. Эти результаты наблюдались в контексте аналогичной средней 12-месячной потери веса в обеих диетических группах, которая составляла более 5% от исходного веса тела, и аналогичного и значительного диапазона изменения веса, отражающего примерно 40 кг в каждой диетической группе (от потеря примерно 30 кг до набора примерно 10 кг).

Диетическое потребление жиров и углеводов было хорошо дифференцировано между двумя диетическими группами, что подтверждено оценкой диеты и подтверждено изменениями липидных параметров крови и соотношения респираторного обмена, что указывает на высокую приверженность лечению.Благодаря большому размеру выборки, хорошему удержанию, значительной потере веса и вариабельности похудания, а также хорошему соблюдению и дифференциации диет, исследование было хорошо позиционировано для выявления значительных взаимодействий между основными интересующими переменными, если они существовали. Однако таких эффектов не наблюдалось. Различия в потере веса между двумя группами были незначительными и клинически значимыми.

Среди вторичных исходов клиническими переменными, которые значительно различались между группами диеты, были результаты липидов крови, которые были более благоприятными в группе здоровой диеты с низким содержанием жиров в отношении изменений холестерина липопротеинов низкой плотности и были более благоприятными в группе здоровых людей. группа низкоуглеводной диеты для изменения холестерина липопротеинов высокой плотности и триглицеридов.Величина различий между группами составляла 5% для холестерина липопротеинов низкой плотности, 5% для холестерина липопротеинов высокой плотности и 15% для триглицеридов.

Существует значительный научный интерес к идентификации генетических вариантов, которые помогают объяснить межиндивидуальные различия в успешной потере веса в ответ на диетические вмешательства, 31 , 32 особенно диеты с различным составом макроэлементов. Множественные вторичные анализы испытаний низкожировых и низкоуглеводных диет для похудания, включая испытания «Предотвращение избыточного веса с помощью новых диетических стратегий (POUNDS LOST)» и «Взаимодействие питательных веществ и генов при ожирении человека (NUGENOB)», 8 , 32 -34 сообщили об изменении эффекта SNP на ассоциации пищевых жиров и углеводов с потерей веса.

Например, Qi et al. 8 сообщили, что люди с генотипом IRS1, rs2943641 CC были более успешными в снижении веса, чем люди без этого генотипа, когда их назначили на диету с низким содержанием жиров и высоким содержанием углеводов, а не на низкоуглеводную и низкоуглеводную диету. жирная диета. Грау и др. 32 сообщили, что люди с генотипом FTO rs9939609 TT имели большее снижение в гомеостатической модели оценки инсулинорезистентности при диете с низким содержанием жиров по сравнению с диетами с низким содержанием углеводов; однако взаимодействие диеты и генотипа для снижения веса не было статистически значимым.В большинстве предыдущих исследований изучались одиночные SNP с небольшим количеством попыток репликации. Цель настоящего исследования состояла в том, чтобы воспроизвести результаты апостериорного исследования потери веса от А до Я (Аткинс, традиционное, Орниш, зона). 3

Обнаружение отсутствия существенной разницы в потере веса в группах с совпадающими генотипами и несовпадающими в текущем исследовании подчеркивает важность проведения крупных испытаний с соответствующей мощностью, таких как DIETFITS, для подтверждения ранних исследовательских анализов.В настоящее время проводится анализ всех полученных геномных данных, чтобы оценить, могут ли другие генетические сигнатуры демонстрировать изменение эффекта.

Несколько исследовательских групп ранее сообщали о наблюдении различного эффекта диет с низким содержанием жиров и низким содержанием углеводов на потерю веса в зависимости от исходного инсулинового статуса. Как в 6-месячном исследовании кормления с 32 участниками, так и в 18-месячном исследовании с участием 56 участников сообщалось об изменении эффекта между назначением диеты (с низким содержанием жиров в сравнении с низкоуглеводной или низкой гликемической нагрузкой) и INS-30. 12 , 13 Используя пороговые значения инсулина натощак в 4-месячном исследовании кормления с участием 20 участников, Корниер и др. 11 наблюдали значительное взаимодействие диеты и инсулина натощак для снижения веса. Апостериорный анализ исследования от А до Я выявил значительное взаимодействие диеты и инсулина натощак при 12-месячной потере веса среди 81 женщины с избыточным весом и ожирением. 14

Однако в недавнем пилотном исследовании, проведенном в рамках подготовки к исследованию DIETFITS, не было обнаружено значительного изменения эффекта для статуса INS-30. 35 В каждом случае, в котором сообщалось о значительном взаимодействии, исследователи предложили механизм, включающий статус секреции инсулина, чувствительность к инсулину или резистентность к инсулину, взаимодействующий с гликемической нагрузкой, чтобы по-разному влиять на реакцию потери веса на низкожировую диету с высоким содержанием углеводов по сравнению с высоким содержанием углеводов. жирные диеты с низким содержанием углеводов. 12 , 36

В этих исследованиях последовательный вывод результатов заключался в том, что диета с низким содержанием углеводов превосходила людей с более высокой секрецией инсулина или более высокой инсулинорезистентностью; предполагаемый механизм включает более низкую потребность или нагрузку на инсулино-опосредованную утилизацию глюкозы для людей с нарушенным метаболизмом инсулина при сохранении диеты с низким содержанием углеводов и высоким содержанием жиров.Несмотря на механистическую правдоподобность, исследования на сегодняшний день включают относительно небольшие размеры выборки.

Заявления о модификации эффекта, наблюдаемые в единичных рандомизированных испытаниях, часто бывают ложными, и этот результат встречается еще чаще, когда речь идет о небольших размерах выборки и апостериорном анализе; подтверждение таких требований нечасто. 37 -39 Текущее исследование с большей выборкой, низкоуглеводной диетой, которая также была диетой с низкой гликемической нагрузкой, и с использованием INS-30 не могло воспроизвести результаты предыдущих исследований с использованием меньшего числа пациентов или исследований с более короткая продолжительность.Quiz Ref ID Мы рассматриваем различия между текущими результатами и цитируемыми исследованиями, чтобы потенциально затрагивать качество диеты, помимо простой дифференциации потребления жиров и углеводов. В связи с этим рафинированное зерно имеет низкое содержание жира, но считается низким питательным качеством из-за низкой плотности питательных веществ по сравнению с содержанием энергии. Напротив, овощи имеют высокую плотность питательных веществ и относительно высокое содержание углеводов, но мало калорий. Обе диетические группы в текущем исследовании были проинструктированы минимизировать или исключить очищенное зерно и добавленный сахар и максимально увеличить потребление овощей.Мы пришли к выводу, что, когда равное внимание уделяется высокому качеству диеты как для низкожировой, так и для низкоуглеводной диеты, нецелесообразно предпочтительно направлять человека с высоким статусом секреции инсулина, стремящегося к снижению веса, придерживаться низкоуглеводной диеты. план вместо диеты с низким содержанием жиров.

Это исследование имело несколько сильных сторон. Сильные стороны дизайна исследования включали одинаково интенсивные требования к обеим диетическим группам при внесении изменений в исходный рацион, одинаковое внимание к качеству питания, повторяющиеся основные моменты времени сбора данных и широкий диапазон типов собираемых данных.Сильные стороны проведения исследования включали достижение и превышение целевого размера выборки в 600 участников, почти равное соотношение женщин и мужчин, высокое и эквивалентное сохранение для обеих диетических групп, а также сопоставимость изменений между группами в потенциально важных результатах, связанных с потерей веса. например, физическая активность. Кроме того, общая потеря примерно 3000 кг среди участников исследования и широкая индивидуальная вариабельность потери веса предоставили возможность значимо протестировать изменение эффекта.

Исследование также имеет несколько ограничений. Во-первых, обобщение результатов может быть ограничено проведением исследования в географической зоне с участием лиц, которые достигли относительно высокого уровня образования, имеют личные ресурсы и высокую доступность к высококачественным вариантам питания. Чтобы решить эту проблему, исследование было широко разрекламировано, и в нем были успешно включены участники с относительно хорошим этническим и расовым разнообразием, а также с диапазоном, хотя и ограниченным, уровня образования.

Во-вторых, что касается возможной роли динамики инсулина и глюкозы в качестве модификатора эффекта в исследованиях с низким содержанием жиров и низким содержанием углеводов, существует множество возможных показателей, которые следует учитывать, помимо INS-30, 36 как косвенную меру секреции инсулина. выбран по причинам, описанным в другом месте. 12 , 13 Но другие сообщали об обнаружении значительного изменения эффекта в соответствии с предварительными концентрациями инсулина натощак. 11 , 14

В-третьих, отсутствовали 3 вторичные антропометрические и метаболические переменные (процентное содержание жира в организме, расход энергии в состоянии покоя и коэффициент респираторного обмена) для первых 78 участников, включенных в исследование из-за недостаточного начального финансирования.Эта ситуация с финансированием впоследствии изменилась (описана в электронном приложении 1 в Приложении 2), что позволило добавить эти измерения для остальных участников.

В-четвертых, инструмент Стэнфордского семидневного отзыва о физической активности (который использовался для определения общих затрат энергии) дает только относительно грубую оценку общих затрат энергии. Другой метод измерения расхода энергии, такой как метод воды с двойной меткой, обеспечил бы большую точность; однако было установлено, что общая стоимость и дополнительная нагрузка на участников выходят за рамки исследования.Кроме того, известно, что все методы оценки диеты по самооценке имеют ограниченную точность; поэтому мы решили использовать Систему данных о питании для исследований, которая признана лучшим методом.

В-пятых, несмотря на то, что в этом исследовании была хорошо оценена чувствительность к инсулину, оценка генетических характеристик как факторов, влияющих на реакцию на диету, нуждается в улучшенных и расширенных исследованиях в будущем, поскольку с тех пор был достигнут значительный прогресс в понимании генетической архитектуры метаболических фенотипов, таких как ожирение. текущее испытание было спланировано.Другие объяснения неоднородности, помимо динамики инсулина и генетических характеристик, также нуждаются в оценке.

В-шестых, из-за отсутствия рандомизации или проведения стратификации в соответствии с генотипом или статусом секреции инсулина уровень причинно-следственных связей, который можно сделать из анализа взаимодействий, был ограничен; тем не менее, это позволило нам протестировать две основные взаимосвязи взаимодействия в одном исследовании.

Quiz Ref ID В этом 12-месячном исследовании диеты для похудения не было существенной разницы в изменении веса между здоровой диетой с низким содержанием жиров и здоровой диетой с низким содержанием углеводов, и ни генотип, ни исходная секреция инсулина не были связаны с диетическими эффектами. по похуданию.В контексте этих двух распространенных диетических подходов к снижению веса ни один из двух предполагаемых предрасполагающих факторов не помог определить, какая диета для кого была лучше.

Автор для переписки: Кристофер Д. Гарднер, доктор философии, Стэнфордский исследовательский центр по профилактике, медицинский факультет, Медицинская школа Стэнфордского университета, 1265 Welch Rd, Стэнфорд, Калифорния 94305 ([email protected]).

Принята к публикации: 17 января 2018 г.

Исправление: Эта статья была исправлена ​​3 апреля 2018 г., чтобы изменить единицы измерения для строк уровня липидов в Таблице 3 с ммоль / л на мг / дл и изменить соответствующие инструкции коэффициента преобразования СИ с деления на умножение. . Эта статья была исправлена ​​24 апреля 2018 г., чтобы изменить описание финансирования инициативы Nutrition Science Initiative.

Вклад авторов: Доктор Гарднер имел полный доступ ко всем данным в исследовании и берет на себя ответственность за целостность данных и точность анализа данных.

Концепция и дизайн: Гарднер, Ригдон, Иоаннидис, Десаи, Кинг.

Сбор, анализ или интерпретация данных: Все авторы.

Составление рукописи: Гарднер, Трепановски, Дель Гоббо, Хаузер, Ригдон, Десаи.

Критический пересмотр рукописи на предмет важного интеллектуального содержания: Все авторы.

Статистический анализ: Гарднер, Дель Гоббо, Хаузер, Ригдон, Иоаннидис, Десаи.

Получено финансирование: Gardner.

Административная, техническая или материальная поддержка: Gardner, Hauser, King.

Наблюдение: Гарднер, Десаи, Кинг.

Раскрытие информации о конфликте интересов: Авторы заполнили и отправили ICMJE Форму раскрытия информации о потенциальном конфликте интересов, и ни о чем не сообщалось.

Финансирование / поддержка: Это исследование было поддержано грантом 1R01DK0

Национального института диабета, болезней органов пищеварения и почек, финансированием Научной инициативы по питанию, грантами 1K12GM088033 и T32HL007034 Национального института сердца, легких и крови, а также Стэнфордская премия в области клинических и переводческих наук.

Роль спонсора / спонсора: Спонсоры не играли никакой роли в разработке и проведении исследования; сбор, управление, анализ и интерпретация данных; подготовка, рецензирование или утверждение рукописи; и решение представить рукопись для публикации.

Заявление об ограничении ответственности: Авторы несут исключительную ответственность за содержание и не обязательно отражают официальную точку зрения Национальных институтов здравоохранения или других спонсоров.

Дополнительные вклады: Это исследование было бы невозможно без работы следующих лиц, которые были связаны со Стэнфордским университетом на момент исследования и которые получили компенсацию за свою работу: Дженнифер Робинсон, доктор философии, и Антонелла Дьюэлл, MS, RD (служили координаторами исследования), Rise Cherin, MS, RD, Сьюзан Киркпатрик, RD, CDE, Jae Berman, MS, RD, CSSD, Далия Перельман, MS, RD, CDE, и Мэнди Мерфи Кэрролл, MPH, RD (преподаватели здоровья), Сара Фарзинкоу, магистр здравоохранения, Валери Алаймо, бакалавр медицины, Маргарет Шимер Лоутон, магистр здравоохранения, и Дайан Демис, бакалавр наук (группа оценки диеты), Жозефина Хау, магистр здравоохранения, доктор медицинских наук, Эрин Эйвери, магистр медицины, Александра Росси, бакалавр наук, Кэтрин Доттер, бакалавр наук, доктор медицинских наук, и Сара Мумма, доктор философии (участвует в наборе, скрининге, управлении образцами крови, инновациях и других задачах), Ариадна Гарсия, магистр медицины, Фейфей Цин, магистр здравоохранения, и Видхья Баласубраманян, магистр медицины (участвует в статистической поддержке) , Алана Келер, бакалавр наук (административная поддержка), и Люсия Ароника, доктор философии, Дженнифер Хартл e, DrPH, MHS, CIH, Лиза Оффринга, PhD, Кенджи Нагао, PhD, Мэрили Оппеццо, PhD, MS, RD, Бенджамин Крисинджер, MUEP, PhD, и Майкл Стэнтон, PhD (участвовал в различных этапах исследования).Мы также благодарим 609 участников исследования, без которых это исследование было бы невозможно.

1. легальный KM, Крушон-Моран D, Кэрролл MD, Фрайар CD, Огден CL. Тенденции ожирения среди взрослого населения США, 2005–2014 гг. JAMA . 2016; 315 (21): 2284-2291.PubMedGoogle ScholarCrossref 3. Гарднер CD, Киазанд А, Альхассан S, и другие. Сравнение диет Аткинса, Зона, Орниша и LEARN на предмет изменения веса и связанных с ним факторов риска среди женщин с избыточным весом в пременопаузе: Исследование потери веса от А до Я: рандомизированное исследование. JAMA . 2007; 297 (9): 969-977.PubMedGoogle ScholarCrossref 4. Мешки FM, Брей GA, Кэри VJ, и другие. Сравнение диет для похудения с различным составом жиров, белков и углеводов. N Engl J Med . 2009; 360 (9): 859-873.PubMedGoogle ScholarCrossref 5.Shai Я, Шварцфухс Д, Хенкин Y, и другие; Группа рандомизированного контролируемого исследования (DIRECT) диетических вмешательств. Похудение с помощью низкоуглеводной, средиземноморской или обезжиренной диеты. N Engl J Med . 2008; 359 (3): 229-241.PubMedGoogle ScholarCrossref 6.Джонстон. БК, Кантерс S, Bandayrel K, и другие. Сравнение похудания среди названных диетических программ у взрослых с избыточным весом и ожирением: метаанализ. JAMA . 2014; 312 (9): 923-933.PubMedGoogle ScholarCrossref 7. Поле AE, Камарго CA Младший, Огино С. Достоинства подтипа ожирения: всех под одну гребенку. JAMA . 2013; 310 (20): 2147-2148.PubMedGoogle ScholarCrossref 8.Qi Q, Брей Джорджия, Смит SR, Ху FB, Мешки FM, Ци L. Вариация гена субстрата 1 рецептора инсулина изменяет реакцию инсулинорезистентности на диеты для снижения веса в двухлетнем рандомизированном исследовании: «Предотвращение избыточного веса с помощью новых диетических стратегий» (POUNDS LOST). Тираж . 2011; 124 (5): 563-571.PubMedGoogle ScholarCrossref 9.

Dopler Nelson М, Прабакар П, Кондрагунта V, Корнман К.С., Гарднер CD.Генетические фенотипы предсказывают успех в похудании: правильная диета имеет значение. Доклад представлен на совместной конференции 50-й конференции «Эпидемиология и профилактика сердечно-сосудистых заболеваний, питание, физическая активность и обмен веществ»; 2-3 марта 2010 г .; Сан-Франциско, Калифорния.

10.Стэнтон М.В., Робинсон JL, Киркпатрик СМ, и другие. Исследование DIETFITS (Вмешательство в диету, исследующее факторы, влияющие на успех лечения): дизайн и методы исследования. Клинические испытания Contemp .2017; 53: 151-161.PubMedGoogle ScholarCrossref 11. Корнье Массачусетс, Донаху WT, Перейра Р, и другие. Чувствительность к инсулину определяет эффективность диетического состава макроэлементов в отношении похудания у женщин с ожирением. Obes Res . 2005; 13 (4): 703-709.PubMedGoogle ScholarCrossref 12.Ebbeling CB, Лейдиг ММ, Фельдман ГА, Ловески ММ, Людвиг DS. Эффекты низкой гликемической нагрузки по сравнению с диетой с низким содержанием жиров у молодых людей с ожирением: рандомизированное исследование. JAMA . 2007; 297 (19): 2092-2102. PubMedGoogle ScholarCrossref 13.Pittas AG, Das СК, Хайдук CL, и другие. Согласно исследованию CALERIE, диета с низкой гликемической нагрузкой способствует большей потере веса у взрослых с избыточным весом и высокой секрецией инсулина, но не у взрослых с избыточным весом и низкой секрецией инсулина. Уход за диабетом . 2005; 28 (12): 2939-2941.PubMedGoogle ScholarCrossref 14.McClain AD, Оттен JJ, Hekler Э.Б., Гарднер CD. Приверженность диете с низким содержанием жиров и низким содержанием углеводов зависит от статуса инсулинорезистентности. Диабет, ожирение, метаболизм . 2013; 15 (1): 87-90.PubMedGoogle ScholarCrossref 16.

Bandura А. Самоэффективность: осуществление контроля . Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: WH Freeman and Co; 1997.

18. Король AC, Фрей-Хьюитт B, Дреон DM, Дерево PD. Диета против упражнений для поддержания веса: влияние стратегий минимального вмешательства на долгосрочные результаты у мужчин. Arch Intern Med . 1989; 149 (12): 2741-2746. PubMedGoogle ScholarCrossref 19.Фесканич D, Sielaff BH, Чонг К, канюк Я. Компьютеризированный сбор и анализ информации о рационе питания. Программы вычислительных методов Биомед . 1989; 30 (1): 47-57.PubMedGoogle ScholarCrossref 20.Sallis JF, Haskell WL, дерево PD, и другие. Методика оценки физической активности в проекте «Пять городов». Am J Epidemiol . 1985; 121 (1): 91-106.PubMedGoogle ScholarCrossref 21.Chiu KC, Мартинес DS, Юн C, Чуанг LM.Относительный вклад чувствительности к инсулину и функции бета-клеток на концентрацию глюкозы и инсулина в плазме во время перорального теста на толерантность к глюкозе. Метаболизм . 2002; 51 (1): 115-120.PubMedGoogle ScholarCrossref 22.Phillips DI, Кларк PM, Хейлз CN, Осмонд C. Понимание пероральной толерантности к глюкозе: сравнение измерений глюкозы или инсулина во время перорального теста на толерантность к глюкозе со специфическими измерениями инсулинорезистентности и секреции инсулина. Диабет Мед . 1994; 11 (3): 286-292.PubMedGoogle ScholarCrossref 23.Hron. BM, Ebbeling CB, Фельдман HA, Людвиг DS. Связь динамики инсулина с составом тела и расходом энергии в покое после похудания. Ожирение (Серебряная весна) . 2015; 23 (11): 2216-2222.PubMedGoogle ScholarCrossref 24.Chaput JP, Tremblay А, Римм ЭБ, Бушар C, Людвиг DS. Новое взаимодействие между диетическим составом и секрецией инсулина: влияние на набор веса в Квебекском семейном исследовании. Am J Clin Nutr . 2008; 87 (2): 303-309.PubMedGoogle ScholarCrossref 25. Людвиг DS, Majzoub JA, Аль-Захрани А, Даллал GE, Blanco Я, Робертс SB. Продукты с высоким гликемическим индексом, переедание и ожирение. Педиатрия . 1999; 103 (3): E26.PubMedGoogle ScholarCrossref 26.Goni L, Куэрво М, Милагро FI, Мартинес JA. Будущие перспективы персонализированных вмешательств по снижению веса на основе нутригенетических, эпигенетических и метагеномных данных. J Nutr . 2016; 146 (4): 905S-912S.PubMedGoogle ScholarCrossref 27.

Diggle С. Анализ продольных данных . Оксфорд, Англия: Издательство Оксфордского университета; 2002.

28. Баттерхэм MJ, Tapsell LC, Чарльтон KE. Анализ исследований интервенций по снижению веса с отсутствующими данными: какие методы следует использовать? Питание . 2013; 29 (7-8): 1024-1029.PubMedGoogle ScholarCrossref 29. Кузнецова А, Брокхофф ПБ, Кристенсен RHB.lmerTest: тесты в линейных моделях со смешанными эффектами. Пакет R версии 2.0-33. https://cran.r-project.org/. По состоянию на 10 января 2018 г.. 30.Bates D, Mächler М, Болкер BM, Уокер SC. Подгонка линейных моделей смешанных эффектов с использованием lme4. J Stat Программное обеспечение . 2015; 67 (1): 1-48.Google ScholarCrossref 31.Bray МС, Лоос RJ, McCaffery JM, и другие; Рабочая группа конференции. Отчет рабочей группы NIH об использовании геномной информации для управления весом: от универсального к точному лечению. Ожирение (Серебряная весна) . 2016; 24 (1): 14-22. PubMedGoogle ScholarCrossref 32.Grau К., Каучи S, Холст C, и другие. TCF7L2 rs76 ​​взаимодействие макронутриентов в ответах тучных людей на 10-недельную рандомизированную гипоэнергетическую диету. Am J Clin Nutr . 2010; 91 (2): 472-479.PubMedGoogle ScholarCrossref 33.Heianza Y, Ma W, Хуанг Т, и другие. Связанный с потреблением макронутриентов генотип FGF21 изменяет влияние диет для похудания на двухлетние изменения центрального ожирения и состава тела: исследование POUNDS Lost. Уход за диабетом . 2016; 39 (11): 1909-1914.PubMedGoogle ScholarCrossref 34.Qi Q, Брей GA, Hu FB, Мешки FM, Ци L. Диеты для похудания изменяют влияние генотипа глюкозозависимого инсулинотропного полипептидного рецептора rs2287019 на изменения массы тела, уровня глюкозы натощак и инсулинорезистентности: исследование «Предотвращение избыточного веса с использованием новых диетических стратегий». Am J Clin Nutr . 2012; 95 (2): 506-513.PubMedGoogle ScholarCrossref 35.Gardner CD, Offringa LC, Хартл JC, Kapphahn К, Черин Р.Снижение веса на низкожировой и низкоуглеводной диетах в зависимости от статуса инсулинорезистентности среди взрослых с избыточным весом и взрослых с ожирением: рандомизированное пилотное исследование. Ожирение (Серебряная весна) . 2016; 24 (1): 79-86.PubMedGoogle ScholarCrossref 36.Pittas AG, Робертс SB. Состав диеты и потеря веса: можем ли мы индивидуализировать диетические рецепты в зависимости от чувствительности к инсулину или статуса секреции? Nutr Ред. . 2006; 64 (10 pt 1): 435-448.PubMedGoogle ScholarCrossref 37.солнце X, Иоаннидис JP, Agoritsas Т, Альба AC, Гайятт G. Как использовать анализ подгрупп: Руководство по медицинской литературе. JAMA . 2014; 311 (4): 405-411.PubMedGoogle ScholarCrossref 38.Wallach Джей Ди, Салливан П.Г., Трепановский JF, Steyerberg EW, Иоаннидис JPA. Различия в подгруппах по полу в рандомизированных контролируемых исследованиях: эмпирические данные Кокрановского метаанализа. BMJ . 2016; 355: i5826.PubMedGoogle ScholarCrossref 39.Brookes СТ, Уайтли Э, Эггер М., Смит GD, Mulheran PA, Peters TJ. Анализ подгрупп в рандомизированных исследованиях: риски анализов, специфичных для подгрупп; мощность и размер выборки для теста взаимодействия. Дж. Клин Эпидемиол . 2004; 57 (3): 229-236. PubMedGoogle ScholarCrossref

Газопроницаемость ЖК-пленок, наблюдаемая при расширении смектического пузырька

  • 1.

    Дж. Брандруп, Э.Х. Иммергут, Э.А. Grulke, Polymer Handbook , 4-е издание (John Wiley, New York, 1999).

    Google ученый

  • 2.

    Х. Чатем, Серф. Пальто. Tech. 78 , 1 (1996).

    Артикул Google ученый

  • 3.

    A.G. Brown, W.C. Туман, Дж. Mcbain, J. Colloid Sci. 8 , 508 (1953).

    Артикул Google ученый

  • 4.

    K. Sujatha, T.R. Дас, Р. Кумар, К.С. Ганди, Chem.Англ. Sci. 43, , 1261 (1988).

    Артикул Google ученый

  • 5.

    Р.М. Муруганатан, Р. Крустев, Н. Икеда, Х. Дж. Мюллер, Langmuir 19 , 3062 (2003).

    Артикул Google ученый

  • 6.

    G. Gregoriadis, A.T. Флоренс, H.M. Patel (редакторы), Liposomes in Drug Delivery (Harwood Academic Publishers, Амстердам, 1993).

    Google ученый

  • 7.

    P. Walde, S. Ichikawa, Biomol. Engin. 18 , 143 (2001).

    Артикул Google ученый

  • 8.

    Y. Tabe, H. Yokoyama, Nat. Матер. 2 , 806 (2003).

    Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ Google ученый

  • 9.

    H.M. Princen, J.Th.G. Overbeek, S.G. Mason, J. Colloid Interface Sci. 24, , 125 (1967).

    Артикул Google ученый

  • 10.

    J. Li, H. Schüring, R. Stannarius, Langmuir 18 , 112 (2002).

    Артикул Google ученый

  • 11.

    J.H. Хильдебранд, Р.Л. Скотт, Растворимость неэлектролитов , 3-е издание (Dover Pub. Inc., Нью-Йорк, 1964).

    Google ученый

  • 12.

    J.M. Prausnitz, F.H. Shair, AIChE J. 7 , 682 (1961).

    Артикул Google ученый

  • 13.

    M.H. Коэн, Д. Тернбулл, J. Chem. Phys. 31, , 1164 (1959).

    Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ Google ученый

  • 14.

    H. Fujita, Fortschr. Хочполым. Форш. 3 , 1 (1961).

    Артикул Google ученый

  • 15.

    D.L. Wise, G. Houghton, Chem. Англ. Sci. 21 , 999 (1966).

    Артикул Google ученый

  • 16.

    Д.Ф. Evans, T. Tominaga, C. Chan, J. Solution Chem. 8 , 461 (1979).

    Артикул Google ученый

  • 17.

    Поскольку обычные ЖК-соединения имеют простую химическую структуру, их можно рассматривать как представителя обычных органических жидкостей.

  • 18.

    H.M. Princen, S.G. Mason, J. Colloid Sci. 20 , 353 (1965).

    Артикул Google ученый

  • 19.

    Н. Рамчандран, А.К. Дидвания, К. Sirkar, J. Colloid Interface Sci. 83, , 94 (1981).

    Артикул Google ученый

  • 20.

    K. Araya, K. Iwasaki, Mol. Cryst. Liq. Cryst. 392 , 49 (2003).

    Артикул Google ученый

  • 21.

    Когда форма пузыря отклоняется от полусферы, уравнения следует немного изменить. В эксперименте внутренняя форма пузырьков всегда была почти полусферической, а внешняя форма маленьких пузырьков иногда отклонялась от полусферы.Для измерения абсолютной проницаемости важно поддерживать форму пузырьков почти полусферической, чтобы мы использовали более крупные пузырьки идеальной формы. В то время как для измерения коэффициента проницаемости внешняя форма не влияет на результат, мы использовали как маленькие, так и большие пузырьки.

  • 22.

    P. Mach, C.C. Хуанг, Т. Стоубе, Э. Wedell, T. Nguyen, W.H. de Jeu, F. Guittard, J. Naciri, R. Shashidhar, N. Clark, I.M. Jiang, F.J. Kao, H. Liu, H. Nohira, Langmuir 14 , 4330 (1998).

    Артикул Google ученый

  • 23.

    Дж. Ногучи, диссертация бакалавра, Университет Васэда, 2009.

  • 24.

    Поскольку перемешивание потоком чистого газа является умеренным, полусферическая форма пузырька вообще не подвержена влиянию конвекции.

  • 25.

    R. Stannarius, C. Cramer, Liq. Плачет. 23 , 371 (1997).

    Артикул Google ученый

  • 26.

    Для измерения абсолютной проницаемости мы должны использовать такие большие пузырьки, форма которых может быть хорошо аппроксимирована полусферой. С другой стороны, толщина больших пузырьков имеет тенденцию быть неоднородной с большими колебаниями, когда они достаточно толстые, , то есть > 100 нм [25]. Трудно сделать толстые пузыри достаточно большими, чтобы они были приблизительно полусферическими, и одновременно достаточно маленькими, чтобы сохранять однородную толщину. У нас могло быть только четыре пузыря, удовлетворяющие запросы.Принимая во внимание, что внешняя форма пузыря не влияет на x qeq , мы использовали такие маленькие пузырьки, как показано на рис. 3 для измерения коэффициента проницаемости, которые легко сделать.

  • 27.

    Р.Ф. Федорс, Полым. Англ. Sci. 14, , 147 (1974).

    Артикул Google ученый

  • 28.

    Д.А. Данмур, М.Р. Мэнтерфилд, В. Миллер, Дж. Данливи, Мол.Cryst. Liq. Cryst. 45, , 127 (1978).

    Артикул Google ученый

  • 29.

    M.E. Moseley, A. Loewenstein, Mol. Cryst. Liq. Cryst. 90, , 117 (1982).

    Артикул Google ученый

  • 30.

    T.C. Меркель, В. Бондарь, К. Нахай, Б. Freeman, I. Pinnau, J. Polym. Sci. 38, , 415 (2000).

    Google ученый

  • 31.

    J.C. Loudet, P. Hanusse, P. Poulin, Science 306 , 1525 (2004).

    Артикул Google ученый

  • 32.

    Х. Кнеппе, Ф. Шнайдер, Н.К. Шарма, Бер. Bunsenges. Phys. Chem. 85, , 784 (1981).

    Google ученый

  • 33.

    П. Освальд, П. Пиерански, Смектические и столбчатые жидкие кристаллы (Тейлор и Фрэнсис, Бока-Ратон, 2006).

    Google ученый

  • 34.

    J.P. Hansen, I.R. Макдональд, Теория простых жидкостей , 3-е издание (Academic Press, New York, 2006).

    Google ученый

  • 35.

    B.J. Alder, D.M. Гасс, Т. Wainwright, J. Chem. Phys. 53, , 3813 (1970).

    Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ Google ученый

  • 36.

    S. Bhattacharyya, B. Bagchi, J. Chem. Phys. 106, , 1757 (1997).

    Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ Google ученый

  • 37.

    H. Eyring, J. Chem. Phys. 4 , 283 (1936).

    Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ Google ученый

  • 38.

    H.C. Лонге-Хиггинс, Дж. Pople, J. Chem. Phys. 25, , 884 (1956).

    Артикул MathSciNet ОБЪЯВЛЕНИЯ Google ученый

  • 39.

    C.R. Wilke, Chem. Англ. Прогр. 45, , 218 (1949).

    Google ученый

  • Диабетические технологии за последние 30 лет: много изменений и в основном к лучшему

    Я закончил стажировку по педиатрической эндокринологии чуть более 30 лет назад. я могу действительно сказать, что я участвовал в революции в лечении диабета. В 1977 г., инсулин состоял из относительно нечистого обычного инсулина животного происхождения. и NPH (нейтральный протамин Hagedorn), Lente или PZI (протамин-цинковый инсулин), имена, которые многие молодые читатели даже не узнают.Лечение инсулином было считается продвинутым, если для типа 1 использовалось более одной инъекции.

    Мониторинг уровня глюкозы проводился с мочой, в основном в кипяченых таблетках Clinitest. моча, а также некоторые ленты для мониторинга глюкозы. Кетоны измеряли с помощью таблетки, меняющие цвет. Измерительные щупы для мочи только что были введен.

    Тем не менее, в самом конце моей стажировки в Университете Миннесота, доктор Дон Эцвилер отправил меня в Вайоминг с дюжиной подростков в поход. над линией деревьев.Тогда моей мантрой было: «Сохраните след глюкоза ». Я понятия не имею об истинных значениях глюкозы, но ожидаю, если измеренные значения гемоглобина A 1c (A1C) были бы> 9%. Мы все вернулись домой; Самую большую опасность представляла бушующая на юге гроза. Дакота на обратном пути.

    Это были простые времена, хотя мы думали, что тренируемся. «Современное» лечение диабета. Технологии действительно были отсутствует по сравнению с 2008 годом. Фактически, по сравнению с прошлыми 30 годами, 30 лет с 1947 по 1977 год действительно не принесли серьезных изменений в управление.Мониторинг мочи и фиксированная доза инсулина обычно один или два раза. раз в день было нормой. Что же нам нужно было делать в 1977 году и как это? по-другому в 2008? Каковы истинные затраты и реальная выгода за 30 лет управления диабетом и произошедших изменений?

    Возможно, лучший способ оценить истинную стоимость технологии — это жизни реальных пациентов. Их опыт может дать ключ к решению проблем, с которыми сталкиваются специалисты по диабету, поскольку мы пытаемся улучшить жизнь людей с диабетом.Когда это уместно, я проиллюстрирую точку управления диабетом с помощью график данных по глюкозе, взятых у пациента из моей практики. Спустя почти 30 годы лечения диабета у детей, примеры большинства вещей, которые могут пойти не так а некоторые из них легко найти. Примеры проиллюстрируют точка более полно основана на опубликованных доказательствах. Я бы ожидал много читателей имеют аналогичные примеры в своей собственной диабетической практике.

    Диабет 1 типа остается заболеванием, охватывающим все жизнь. 1–4 Диабет по-прежнему требует внимания несколько раз в день, независимо от того, проверяйте гликемию любыми способами или рассчитывайте каждый прием пищи и перекус. Пациенты должны всегда внимательно относиться к чувствам, которые могут указывать на гипогликемия. Немногие другие условия требуют такого уровня усердия. Этот факт не изменилась в истории современного лечения диабета. В данный момент в 2008 году нам не удалось существенно снизить объем необходимых проверок. к и неотъемлемое бремя управления диабетом.

    Медицинские работники, не страдающие диабетом, скорее всего, никогда не смогут знать всю глубину этого бремени. Хотя летний лагерь предоставляет момент и, в эпидемиологические условия, более года пациенто-дней для меня, я знаю в конец лагеря, мое время с диабетом закончилось на год. Это не тот чехол для членов семьи детей, страдающих диабетом. Возможно, самый важным утверждением всего является то, что, несмотря на все, что изменилось и стало лучше за последние 30 лет, человеческие затраты на адекватный уход за диабет не изменился.И бремя могло действительно увеличиться.

    В литературе по соответствию предполагается, что если пациенты действительно принимают лекарства 80% времени считается, что они соблюдают свои лечение. 5 В диабет, это даст вам A1C 9%, а если в 20% случаев что вы не принимаете лекарства несколько дней подряд, это принесет вам пребывание в больнице. Возможно, поскольку мы, профессионалы, сидим с пациентами, нам следует признать, что все, что мы предлагаем сегодня, ни на минуту не устраняет ожидается усердие в уходе за диабетом.Так было 60 лет назад и будет так будет и в обозримом будущем.

    Как детский эндокринолог, я сосредоточусь в основном на диабете 1 типа. В этой дискуссии будут рассмотрены основные вехи в технологии лечения диабета: используемые нами инсулины, способ измерения гликемии и наши методы доставка инсулина.

    Перед тем, как продолжить этот обзор воздействия технологий, немного обсудим диетотерапии. Можно даже сказать, что диетотерапия также пострадал от технологической революции в диабет. 6 Это тоже приходит с множеством противоречий. Я, конечно, здесь не специалист, но у меня есть участвовал в этих изменениях в руководстве. В основном есть два режима размышления о диетических советах и ​​их связи с инсулинотерапией. я буду не обсуждать другие вопросы, такие как типы жиров, гликемический индекс, Пищевая пирамида, средиземноморская диета или низкоуглеводные диеты. Реальный проблема, кажется, заключается в том, делаем ли мы инсулин подходящим для еды или с пищей инсулин.Мышление действительно фундаментально отличается от того, когда я начал заниматься диабетом. Я понимаю, что люди, возможно, обращались диетические советы по-другому, но я говорю в пользу основного детского диабета медицина, которую практикуют большинство моих сверстников.

    На протяжении большей части своей карьеры я предписывал диеты (или моя группа диетологов моя подпись). Пациенты встречались с диетологом, который придерживался режима дня. предписано. Как правило, пациенты получали лечение Американской диабетической ассоциации (ADA). обменяться списками или книгами со списками продуктов питания и углеводными ценностями.Еда была прописали, и доза инсулина была фиксированной. Телефонные разговоры с пациентами включал измерение глюкозы, а затем корректировку инсулина на основе глюкозы ценность, считая, что потребление пищи было постоянным. Десятки рассказов родителей умолять детей есть или дети просят большего — во всех наших истории. Беспокойство о потенциальном событии гипо- или гипергликемии из-за несоответствие инсулина и пищи было постоянной частью лечения диабета. Сила борьба между родителями и детьми была частью повседневной помощи при диабете.Посещения клиник были полны вопросов о том, как заставить ребенка есть. В то время как это обсуждение все еще является частой частью лечения диабета, это уже не о том, чтобы «заставить» кого-то съесть.

    Сегодня все изменилось, надеюсь, не слишком радикально, но фундаментально измененный. Одна ошибка, которую допускают врачи и другие медицинские работники, — это сказать: что сегодня с диабетом «вы можете есть все, что хотите, и принимать инсулин, соответствующий ему ». Это неправда, но сегодня подход состоит в том, чтобы попробовать чтобы инсулин соответствовал фактически съеденному.Я часто говорю пациентам что доза инсулина быстрого действия никогда не должна быть одинаковой от еды к еде или изо дня в день. Возможность вводить инсулин после еды делает этот подход намного привлекательнее и возможный. 7,8

    Но это ожидание связано с расходами, которые необходимо реализовать. Пациенты теперь просят потратить время на анализ блюд на предмет их содержания, типа и количества а затем вынесение суждения о том, сколько инсулина вводить. Ожидания набора навыков очевидны, и не все пациенты или их семьи способны такого анализа.Ожидается, что пациенты или их родители будут обладать абстрактные математические навыки, необходимые для расчета дозы инсулина. Подчеркивая этот факт очень важно, потому что каждый пациент не может выполнить сложную менеджмент ожидается сегодня. Тщательная оценка способностей имеет решающее значение для успех. Сегодня телефонные звонки говорят не о том, сколько нужно принимать инсулина, а о том, вместо этого об изменении углеводного соотношения для определенного приема пищи или закуски или изменение фактора чувствительности к инсулину на определенное время суток.

    Так как я каждое лето хожу в диабетический лагерь, я видел это в действии.В десятилетия назад дети получали инсулин перед едой, приходили в кафетерий, подобрал подносы с прописанным количеством еды (не совсем, но мы попробовали), съели еду (опять же, не совсем) и пошли по событиям день. Сегодня дети сначала приходят в кафетерий и выбирают себе выбор еды. После еды консультант и ребенок складывают еду. съедено и с учетом уровня глюкозы перед едой рассчитать доза инсулина. Сделав это в обоих направлениях, я могу сказать, что сегодня это займет больше времени. есть и давать инсулин.

    Однако сегодня акт сидения и побуждения ребенка закончить что-то он или она не любит (взрослые тоже так делают) — это история. Теперь мы пытаемся сопоставить инсулин к съеденной пище. Это фундаментальный сдвиг в нашем подходе к управление. Понимание этого имеет решающее значение для понимания ведения пациентов. в 2008 г.

    Сегодня ожидается, что пациенты будут принимать инсулин пролонгированного действия в дополнение к инсулин быстрого действия во время еды. Оба препарата являются аналогами инсулина. Уровень глюкозы в крови проверяется не реже четырех раз в день, кроме того, есть другие возможности для тестирования и введения инсулина в связи с изменением активности и поедание закусок.Отличия от десятилетней давности включают тип инсулина, а также новая концепция инсулина для еды. Многое другое пациенты принимают несколько доз инсулина, чем в прошлом. Дозы инсулина на обед больше не избегают, «чтобы спасти пациента от другого инъекция. » Необходимость управлять диабетом не только ради краткосрочной выгоды но и во избежание длительных осложнений универсален.

    Это мышление привело к увеличению объема работы для пациентов, а также для их вспомогательный персонал. Я использую этот термин, потому что теперь люди, кроме родителей или члены семьи должны взять на себя роль в управлении диабетом.Для детей, школы были вовлечены. Дети с диабетом рассчитывают на безопасность в школа. 9 ADA с помощью своих программ защиты внедрил «Безопасность в школе» инициатива, посредством которой школьный персонал обучается помогать с кровью тестирование глюкозы и введение инсулина в школе и во время мероприятия, спонсируемые школой.

    Хотя эти усилия и считаются необходимыми, их семьи и общество. Родители должны участвовать в школьной системе и часто проводите время, обучая людей диабету и правильному уходу.Школьные системы должен назначить квалифицированных специалистов и обучить их лечению диабета. Сегодня я ожидайте, что большинство родителей будут в пределах досягаемости сотового телефона, чтобы обсудить управление со своим ребенком и школьным персоналом, когда это необходимо. Совместная лечение детей с диабетом, членов их семей и школы преподаватели и сотрудники помогают детям с диабетом получить успешный опыт. ежедневно. Прошли те времена, когда людей с диабетом исключали из многих событий жизни.

    Типичным пациентам с диабетом 1 типа в конце 1970-х годов было предложено использовать два типа инсулина (обычный инсулин и инсулин длительного действия препарата), купить шприцы и сдать анализ мочи.Типичные пациенты протестированы они мочились один-четыре раза в день и давали инсулин один или два раза в день. Мышление в то время было таким: «Чем меньше вторжение в повседневную жизнь, лучше.» Врачи и пациенты старались не увеличивать нагрузку управления диабетом.

    Типичные пациенты в конце 1980-х все еще использовали обычные и пролонгированные препараты. инсулин, но, скорее всего, это был человеческий инсулин, а не инсулин животного происхождения в Соединенные Штаты. Продолжаются споры об относительной ценности человека по сравнению с инсулин животного происхождения; однако рынок вытеснил инсулин животного происхождения из лечение диабета в США Состояния. 10

    Основным изменением за это десятилетие стало введение самоконтроля уровень глюкозы в крови (SMBG). Правильное применение этой новой технологии было спорный. Я помню дискуссии в начале десятилетия с начальником медицинский сотрудник Голубого креста Флориды, во время которого мы спорили о необходимости проверить уровень глюкозы в крови в домашних условиях и при необходимости зачем каждый день давать в одиночестве несколько раз в день? В конце 1980-х отношение контроля к долгосрочные результаты все еще обсуждались и ожидали результатов Исследование по борьбе с диабетом и его осложнениям (DCCT) в 1993 г. 11,12

    Одним из очевидных сегодня результатов является то, что количество выполненных проверок SMBG в течение дня напрямую зависит от общего уровня глюкозы в крови контроль, как измеряется A1C. 13–16 Действительно, в долгосрочных исследованиях исходов интенсивность SMBG может быть наиболее важной. переменная, предсказывающая успех. Эта потребность имеет явное увеличение в стоимости лечения диабета. Полоски глюкозы в крови продаются в розницу почти по 1 доллару за штуку. тестовое задание. Это явно одна из истинных затрат на технологии за последние 30 лет. что приносит пользу людям с диабетом 1 типа.я напишу рецепты для пациентов, которые могут проходить тесты так часто, как они хотят.

    Аналогичным образом в 1980-е годы стали широко использоваться тесты A1C. Многие клиники проверяли каждое посещение, а некоторые предлагали тестирование A1C на месте, чтобы сэкономить посещения лаборатории и венепункция. 17

    Одним из интересных результатов лечения детского диабета стал продолжающийся Hvidore полученные результаты. Исследование, проведенное в основном в европейских педиатрических диабетических клиниках, зачисленные клиники и пациенты в течение десяти лет. Исход диабета, измеряемый A1C, зависит от клиники и, похоже, не изменится время. 18,19 Это несмотря на постоянное участие в изучении и знание результаты клиники. Продолжение исследования того, почему это так, может помочь нам понимать влияние индивидуальных стилей клинического ведения и результатов. Возможно, исследование Хвидора дает еще более интересные данные. Эти международные центры практиковали различные методы лечения диабета. Некоторые используют обычный и инсулин НПХ два раза в день. Другие используют несколько ежедневных инъекций и, конечно, некоторые используют инсулиновые помпы.Есть предположение, что контроль диабета включает в себя не только то, как вы управляете гликемией. Кажется, есть некоторые сочетание пациентов, профессионалов, руководства клиники, философии и другие факторы, которые вместе дают результат в лечении диабета. Я вставляю это здесь, потому что многие из достижений в технологии, описанные ниже, были доступны всем участникам исследования Hvidore; но результат как Свидетельство A1C настолько сильно различается среди центров, включенных в исследование.

    Рисунок 1.

    Две инъекции НПХ при гипогликемии на пиках инсулин.

    К концу 1990-х годов аналоги инсулина вышли на рынок США. Сегодня, быстродействующие аналоги играют важную роль в лечении диабета, особенно при Северная Америка и Европа. Компании рассматривают возможность вывода регулярных инсулин в некоторых западных странах. Аналогичным образом аналоги пролонгированного действия были введены на рубеже тысячелетий и получили широкое распространение использовать.

    В отличие от теста на глюкозу, использование аналогов не улучшает результаты, измеряемые A1C. 20,21 Это заставило некоторых предположить, что повышенная стоимость аналогов неоправданно. 22,23 Это должно быть смягчено явным снижением гипогликемии при использовании аналогов. и выгода для образа жизни от своевременных инъекций либо непосредственно перед, либо сразу после еда. 24–26 Вышеупомянутые преимущества были продемонстрированы как для краткосрочного, так и для краткосрочного использования. аналоги инсулина пролонгированного действия. Хотя общий контроль глюкозы, измеренный A1C — замечательный результат в лечении диабета и, несомненно, важен для долгосрочный успех, улучшения, которые помогают облегчить повседневную ношу не следует недооценивать лечение диабета.

    Аналоговые инсулины изменили мою практику. Мой первый пример 5-летняя девочка, которая пришла ко мне в практику на смешанный рапид аналог и НПХ. У нее был посещения отделения неотложной помощи по поводу гипогликемических припадков трижды в последние 2 года. Образец глюкозы (Рисунок 1) демонстрирует классическая проблема с двумя ежедневными инъекциями НПХ. У нее были интервалы значительная гипергликемия и много ночей, когда она была почти, если не на самом деле гипогликемический. фигура 2 показывает тот же ребенок при переключении на аналог длительного действия.Технология имеет помогли этому ребенку и ее матери.

    Рисунок 2.

    Ребенок в Рисунок 1 по аналогу инсулина длительного действия.

    Рисунок 3.

    Гипергликемия из-за отказа помпы, исправленная инсулином инъекция.

    Эволюция лечения диабета привела к внедрению сложные непрерывные подкожные инсулиновые насосы.Хотя технология почти 30 лет, широкое использование этих устройств является фактом мимо десятилетие. 27–30 Использование инсулиновых помп действительно стало мейнстримом, со статьями об их использовании. использовать сейчас в журналах первичной медико-санитарной помощи. Помповая терапия больше не используется. ограничивается специализированными центрами с преданным персоналом, включая медсестер, диетологи и группы психологической поддержки.

    Пациенты видят друзей и коллег, использующих насосы, и просят об этом. В литература понятна.Изделия из высокотехнологичных центров со специальным насосом Персонал добился выдающихся результатов даже у совсем маленьких детей. Там есть несомненно, что пациенты, у которых диабет хорошо контролируется с помощью инсулиновой помпы, имеют отличные результаты. Тем не менее, лучший долгосрочный контроль диабета, согласно измерениям на протяжении многих лет по A1C, не всегда возникает в результате использования инсулиновой помпы. Наверняка, как и все новое, новизна исчезает, и интенсивная работа диабета менеджмент должен продолжать добиваться хороших результатов полученные результаты. 31

    Следует упомянуть два атрибута инсулиновой помпы, потому что они верны подводные камни в использовании технологии.Во-первых, риск диабета. кетоацидоз (ДКА) нельзя игнорировать. Слишком многие пользователи помп забывают об этом риске пока все идет хорошо. Помпа подает небольшое количество инсулина на постоянная основа (базальные ставки). Сбой помпы, например, смещенный катетер или другой механический сбой, приводит к остановке доставки инсулина. Отсутствие каких-либо инсулин, у пациента резко повышается уровень глюкозы. Я говорю своим пациентам, что они действительно всего в 6 часах езды от отделения неотложной помощи в любой момент. Просыпаться в ДКА каждое утро — настоящая угроза.

    Важно знать, что помпа подает инсулин перед сном. Гипергликемия перед сном необходимо исправить и знать, что помпа работает и адекватность сайта — это важнейший навык, который нельзя переоценить. Изменение место помпы и сразу ложиться спать — ошибка, хотя это имеет смысл менять сразу после вечерней ванны. Пациенты должны быть уверены, что сайт будет доставить инсулин. Это пример, когда стоимость технологии — это время необходимо убедиться в доставке инсулина.Если инсулин не потерял свою силу, что случается, инъекция шприцем или ручкой — верный способ узнать инсулин доставлен. Это должно быть подчеркнуто и устранено в клинике. посещения. Я видел пациентов, которые годами успешно использовали помпу. противостоять этой ситуации и даже не иметь дома шприцев. В указания от всех производителей ясны, но их нужно учить заново регулярно.

    На рисунке 3 показаны данные из 12 лет и демонстрирует очень высокий уровень глюкозы.Ребенок получил инъекции, место было изменено, и уровень глюкозы исправился очень быстро. А потенциального кризиса удалось избежать. Внимание к деталям с управлением насосом также включает управление сайтом.

    Вторая ловушка — это то, что я называю «автопилотом» с насос. По сути, это забвение болюсного введения инсулина во время еды или «Живущие на базальном уровне». Это приведет к A1C ∼ 9% и плохому контроль, но без немедленных симптомов. К сожалению, это происходит слишком часто. Помпа требует больше, а не меньше внимания к лечению диабета.Программное обеспечение, включенное в современные помпы, помогает рассчитывать дозы инсулина на основе на съеденные углеводы способствует успеху и улучшает уровень глюкозы в крови. Мы должны Предположим, что задокументированные пропущенные болюсы с помпами не уникальны. Мы только не могли знать, что традиционный кадр был пропущен, потому что у нас не было реального пути чтобы задокументировать это. Некоторые врачи фактически увеличили базальную скорость до питание, чтобы помочь компенсировать пропущенные болюсы. Это просто менеджмент 1970-х с помпой. Отсроченный прием пищи будет иметь тот же эффект, что и тогда: гипогликемия.

    Иногда бывает трудно выбрать пациентов, которые являются хорошими кандидатами для помпы. Есть рекомендации, но на практике знания людей и их медицинская и психосоциальная ситуация — важные переменные для успешной помпы использовать. Неспособность или нежелание выделить необходимое время и запланировать Необходимые посещения для обучения и последующего наблюдения являются признаком потенциальных трудностей. Часть стоимости насоса, помимо значительных капиталовложений инвестиции пациента или страховой компании — это время, необходимое правильно научиться пользоваться помпой и осознать возможные подводные камни использования насоса.Небрежное или бесцеремонное отношение не сулит ничего хорошего.

    Некоторым врачам, в том числе и мне, требуется пробное использование помпы перед Актуальное решение о покупке помпы. Часто предыдущий опыт работы с помпой состоит не более чем в том, чтобы увидеть, как кто-то другой использует насос или читает газету или Интернет-описания насоса и его характеристик. Стоимость помпы и его необходимые запасы составляют несколько тысяч долларов в год в течение срока службы насос. Достаточно тщательный отбор кандидатов на помпу, а затем тщательный обучение действительно лучшее, что мы можем делать в настоящее время.К сожалению, без лечения работает для всех, и кажется большим позором, когда дорогая помпа прописали не тому пациенту. Даже с этой оговоркой, облегчение насоса терапия для пациентов, которые ее просят, оказалась полезной в большинстве случаи.

    Хотя личные знания пациентов об уровне глюкозы в крови эволюционировали что весьма существенно, каждый день в этих знаниях возникают значительные пробелы. Даже тестирование 8–10 раз в день не предотвращает эпизоды гипер- или гипогликемия. Внедрение систем непрерывного мониторинга глюкозы (CGM) позволил нам четко задокументировать значения глюкозы, чтобы увидеть, где гипер- или гипогликемия возникает в промежутках между тестами на глюкозу.

    Рис. 4.

    Гипергликемия после еды у пациента, тестировавшегося через 2 часа после еда.

    Рис. 5.

    Студент колледжа дома на День Благодарения и зимних каникул. боится гипергликемии в школе.

    Компания CGM развивалась за последние 5 лет. Сегодня доступны три системы для использования пациентами. Не на все вопросы об этой новой технологии даны ответы. Достаточно ли он добавляет данных, чтобы их можно было передать другому сайту (для насос юзеров) на корпусе для его размещения? Должен ли он использоваться все время или просто для сбора тенденций? Насколько это улучшает общий контроль глюкозы? Делает предотвращает скачки и падения уровня глюкозы? Это точно?

    Этим вопросам посвящены статьи о расследованиях устройств. 32–34 Был отмечен один результат: в течение нескольких дней CGM позволила пациенты с очень высоким уровнем глюкозы, чтобы снизить уровень глюкозы и снизить гликемические экскурсии. Меньший эффект был замечен у пациентов, которые уже имеют низкие уровни A1C и, следовательно, меньше выигрывают от новой технологии. Было сокращено количество времени, проводимого при гипер- или гипогликемии. продемонстрировал. Некоторые сомневаются в точности систем CGM, однако, особенно когда уровень глюкозы падение. 35

    Предлагаются для рассмотрения два примера потенциального использования CGM. Один из основных проблем при использовании помпы было то, что глюкоза имеет тенденцию повышаться до неприемлемые уровни гипергликемии после еды даже при следующем приеме пищи уровень глюкозы в норме. Точно так же коррекция вызывает гипогликемию. В Пациент, изображенный на Рисунке 4 демонстрирует общую картину гипергликемии после еды и случайных гипогликемия. Возможно, более четкое указание на CGM можно увидеть в Рисунок 5, из колледжа студент, живущий один впервые.Она делит квартиру с тремя друзья, но они не «контролируют» ее диабет. Они знают о диабет и может помочь в экстренных случаях. Значения глюкозы прошлой осенью рассказывают. Находясь дома на День Благодарения и зимних праздников, значения упала, но еще в школе она не хотела «падать». Она была желающие, однако, рассмотреть систему CGM.

    Перечисленные выше вопросы без ответа о системах CGM могли быть написано в начале 1980-х о SMBG. Подобно системам CGM сегодня, SMBG был технологии, пытающиеся вписаться в мир диабета, мало изменились с 1920-х годов.Я подозреваю, что это действительно потребовало DCCT — очень дорогого Национального института исследования Health — для подтверждения необходимости мониторинга и контроля диабета. В Сообществу диабетиков повезло, что участники DCCT пожелали продолжить свой вклад в исследования диабета в области эпидемиологии Последующие исследования по вмешательствам и осложнениям диабета, в которых расширил набор данных пациентов DCCT до> 20 лет. Долгосрочный контроль глюкоза в крови имеет решающее значение. По этому поводу нет никаких аргументов.Аргументы о том, как лучше всего туда добраться.

    Я бы никогда не предвидел некоторые изменения в лечении диабета видели за последние 30 лет. Лечение диабета хоть и лучше, но еще далеко от идеала.

    Оставить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *