Ст 709 п 5 гк рф: Статья 709 ГК РФ. Цена работы. Актуально в 2020 и 2021. Последняя редакция

Содержание

Статья 709 ГК РФ. Цена работы. Актуально в 2020 и 2021. Последняя редакция

Оглавление

Ч.1 статьи 709 ГК РФ

1. В договоре подряда указываются цена подлежащей выполнению работы или способы ее определения. При отсутствии в договоре таких указаний цена определяется в соответствии с пунктом 3 статьи 424 настоящего Кодекса.

Ч.2 статьи 709 ГК РФ

2. Цена в договоре подряда включает компенсацию издержек подрядчика и причитающееся ему вознаграждение.

Ч.3 статьи 709 ГК РФ

3. Цена работы может быть определена путем составления сметы.

В случае, когда работа выполняется в соответствии со сметой, составленной подрядчиком, смета приобретает силу и становится частью договора подряда с момента подтверждения ее заказчиком.

Ч.4 статьи 709 ГК РФ

4. Цена работы (смета) может быть приблизительной или твердой. При отсутствии других указаний в договоре подряда цена работы считается твердой.

Ч.5 статьи 709 ГК РФ

5. Если возникла необходимость в проведении дополнительных работ и по этой причине в существенном превышении определенной приблизительно цены работы, подрядчик обязан своевременно предупредить об этом заказчика. Заказчик, не согласившийся на превышение указанной в договоре подряда цены работы, вправе отказаться от договора. В этом случае подрядчик может требовать от заказчика уплаты ему цены за выполненную часть работы.

Подрядчик, своевременно не предупредивший заказчика о необходимости превышения указанной в договоре цены работы, обязан выполнить договор, сохраняя право на оплату работы по цене, определенной в договоре.

Ч.6 статьи 709 ГК РФ

6. Подрядчик не вправе требовать увеличения твердой цены, а заказчик ее уменьшения, в том числе в случае, когда в момент заключения договора подряда исключалась возможность предусмотреть полный объем подлежащих выполнению работ или необходимых для этого расходов.При существенном возрастании стоимости материалов и оборудования, предоставленных подрядчиком, а также оказываемых ему третьими лицами услуг, которые нельзя было предусмотреть при заключении договора, подрядчик имеет право требовать увеличения установленной цены, а при отказе заказчика выполнить это требование — расторжения договора в соответствии со статьей 451 настоящего Кодекса.

Является ли цена работ существенным условием договора подряда?

Среди юристов нет единого мнения по этому поводу. Судебная практика по этому вопросу противоречива. В отдельных случаях, суды делают вывод, что цена — это существенное условие договора. Однако ст. 709 ГК РФ предусматривает возможность заключения договора подряда без указания цены выполняемых работ, отсылая к норме п 3 ст 424 ГК РФ. Приверженцы позиции, согласно которой, цена является существенным условием, указывают в судебных решениях, что её несогласование и неопределение договором, наряду с нарушениями других условий, может привести к недействительности договора подряда. Существует множество примеров судебной практики, в которых суды, напротив, считают незаконным признание сделок незаключенными на основании отсутствия в них условия о цене. Получается, что два предложения в одном и том же пункте ст 709 ГК РФ противоречат друг другу, если рассматривать их отдельно, а не в совокупности. Судьи, придерживающиеся первой позиции, применяют лишь половину нормы, установленной в п 1 ст 709 ГК РФ. Второе предложение первого пункта ст 709 ГК РФ отсылает нас к другой статье кодекса. Согласно приведенной в ней норме, если цена не определена условиями договора, то за работу устанавливается цена, которая обычно взимается за аналогичные работы при сравнимых обстоятельствах. Поэтому, отменяя решения судов первой инстанции, кассационный суд обычно аргументирует это прямым указанием закона на то, что договор подряда считается заключенным и при отсутствии цены в его условиях.

Как поступать, если цена по акту приема-передачи работ отличается от твердой цены по договору?

По этому вопросу существуют две противоположные позиции. Статья 709 ГК РФ гласит, что заказчик должен уплатить твердую цену, указанную в договоре (если она прописана). Подрядчик может потребовать больше только в определенных случаях: когда цена возросла неожиданно из-за увеличения стоимости оборудования, материалов или услуг третьих лиц, о чём стороны не могли знать заранее. Согласно первой позиции, преимущественным считается применение указанной в договоре цены, если между ней и ценой в акте приема-передачи существует разница. Судьи полагают, что твердая цена в договоре не изменяется ни при каких обстоятельствах, за исключением внесения этих изменений в договор. Поэтому указанная в акте приема-передачи более высокая цена работ, даже при условии подписания заказчиком такого акта, не влечет его обязанности платить эту разницу. Бывают и полярные ситуации — когда в акте приема и передачи указана меньшая цена, чем в договоре. Подрядчик, обвиняя заказчика в неосновательном обогащении, пытается в суде взыскать с него разницу. Суд в удовлетворении такого иска на практике отказал. Вторая позиция прямо противоположна первой. Её приверженцы считают, что если в акте приема и передачи указана цена, отличная от обозначенной в договоре, то следует применять цену по акту. Не важно при этом, выше она или ниже указанной в договоре цены. Суды признают преимущество цены, указанной в акте или справке, если такой акт подписан обеими сторонами и без замечаний. Поэтому при возникновении споров, касающихся приоритета одной из цен (цены по договору или цены по акту), нельзя сказать заранее, какое решение примет суд.

Как определить цену работы, если договор подряда признан незаключенным, либо не заключался вовсе?

Если договор признан судом незаключенным, это не значит, что заказчик освобождается от оплаты принятых им работ. При этом получается, что в споре стороны не могут ссылаться на договор и установленную там цену. А в случае, если договор и вовсе не заключался, а работы заказчик принял, то их точная стоимость ставится под сомнение. Это опять же приводит к спорам. Исходя из решений судов, если договор признан незаключенным, то работы все же оцениваются исходя из указанной в нем суммы, если не будет доказано иное. Если же договор не заключался, то для оценки стоимости работ привлекается эксперт. Заключение экспертизы в этом случае будет определять конечную стоимость работ подрядчика.

Ст. 709 ГК РФ. Цена работы

1. В договоре подряда указываются цена подлежащей выполнению работы или способы ее определения. При отсутствии в договоре таких указаний цена определяется в соответствии с пунктом 3 статьи 424 настоящего Кодекса.

2. Цена в договоре подряда включает компенсацию издержек подрядчика и причитающееся ему вознаграждение.

3. Цена работы может быть определена путем составления сметы.

В случае, когда работа выполняется в соответствии со сметой, составленной подрядчиком, смета приобретает силу и становится частью договора подряда с момента подтверждения ее заказчиком.

4. Цена работы (смета) может быть приблизительной или твердой. При отсутствии других указаний в договоре подряда цена работы считается твердой.

5. Если возникла необходимость в проведении дополнительных работ и по этой причине в существенном превышении определенной приблизительно цены работы, подрядчик обязан своевременно предупредить об этом заказчика. Заказчик, не согласившийся на превышение указанной в договоре подряда цены работы, вправе отказаться от договора. В этом случае подрядчик может требовать от заказчика уплаты ему цены за выполненную часть работы.

Подрядчик, своевременно не предупредивший заказчика о необходимости превышения указанной в договоре цены работы, обязан выполнить договор, сохраняя право на оплату работы по цене, определенной в договоре.

6. Подрядчик не вправе требовать увеличения твердой цены, а заказчик ее уменьшения, в том числе в случае, когда в момент заключения договора подряда исключалась возможность предусмотреть полный объем подлежащих выполнению работ или необходимых для этого расходов.

При существенном возрастании стоимости материалов и оборудования, предоставленных подрядчиком, а также оказываемых ему третьими лицами услуг, которые нельзя было предусмотреть при заключении договора, подрядчик имеет право требовать увеличения установленной цены, а при отказе заказчика выполнить это требование — расторжения договора в соответствии со статьей 451 настоящего Кодекса.

См. все связанные документы >>>

1. Комментируемая статья посвящена цене договора подряда. Она складывается из издержек подрядчика, подлежащих компенсации, и вознаграждения подрядчику за его труд.

Условие о цене не является существенным в том смысле, что несогласование цены не влияет на заключенность договора (хотя в судебной практике встречается и противоположная позиция). В договоре может быть указана не конкретная стоимость работ, а порядок ее определения.

2. При значительности объема и сложности выполняемой работы, многочисленности и разнообразии включаемых в цену работы компонентов цена может определяться путем составления сметы — документа, объясняющего особенности формирования цены и внутренней ее структуры (например, какова в общей стоимости работы стоимость конкретных материалов и средств, каково вознаграждение подрядчика и т.п.) и тем самым определяющего себестоимость работы. Обычно смету составляет подрядчик, так как является специалистом, а кроме того, выполняет работу своим иждивением. Составленная им смета приобретает силу и становится частью договора с момента подтверждения ее заказчиком. В то же время смета может быть составлена заказчиком и подрядчиком совместно.

3. Изменение цены по видам работ в пределах сметной стоимости должно согласовываться сторонами договора.

4. Как следует из п. 4 комментируемой статьи, цена работы может быть твердой и приблизительной при наличии в договоре специальной оговорки; при отсутствии последней, а также при любых сомнениях надлежит исходить из твердости цены. Смысл установления приблизительной цены состоит в том, что она может быть разной на моменты заключения и исполнения договора.

5. В п. 5 комментируемой статьи урегулирован случай превышения приблизительной цены, когда такое превышение является существенным (значительным по стоимости и затратным для подрядчика) и вызвано необходимостью проведения дополнительных работ. О наличии двух этих обстоятельств, связанных между собой как причина и следствие, подрядчик должен своевременно предупредить заказчика, который несет риск увеличения приблизительной цены. Заказчик имеет право отказаться от договора подряда либо пересмотреть его условия и оплатить подрядчику стоимость дополнительных работ.

Заказчик вправе оспаривать наличие указанных обстоятельств и может требовать от подрядчика выполнения работы с оплатой в пределах приблизительной цены. Риск несущественного удорожания приблизительной цены, а также ее удорожания по иным причинам (например, из-за удорожания согласованных работ или материалов, изменений в системе налогообложения и пр.) несет подрядчик. Такие же последствия наступают и для того подрядчика, который хотя бы и в условиях существенного превышения приблизительной цены из-за необходимости проведения дополнительных работ своевременно не предупредит об этом заказчика.

Следует иметь в виду, что соглашение о проведении дополнительных работ может быть подписано сторонами договора уже после выполнения таких работ.

6. По общему правилу, изложенному в п. 6 комментируемой статьи, если цена является твердой, стороны не вправе требовать ее изменения, даже если при заключении договора исключалась возможность предусмотреть весь объем работ или необходимых расходов. Исключение из этого дано в абз. 2 п. 6, согласно которому возможность изменения твердой цены имеет место только при существенном возрастании стоимости материалов и оборудования, предоставленных подрядчиком, а также оказываемых ему третьими лицами услуг, которые нельзя было предусмотреть при заключении договора подряда. При наличии данных обстоятельств заказчик несет риск увеличения твердой цены, так как подрядчик вправе требовать ее увеличения или (при отказе заказчика выполнить это требование) судебного расторжения договора на основании ст. 451 ГК РФ.

Данное правило не применяется в случаях, если цена является приблизительной или удорожание твердой цены произошло вне связи с возрастанием стоимости материалов, оборудования подрядчика или услуг в его пользу со стороны третьих лиц, или если удорожание твердой цены можно было предусмотреть при заключении договора. В судебной практике сложилась позиция, согласно которой подрядчик вправе требовать увеличения твердой цены при существенном удорожании материалов только до подписания акта приема-передачи.

7. Судебная практика:

— Постановление ФАС Центрального округа от 25.02.2010 N Ф10-6018/09 по делу N А09-6210/2009;

— Определение ВАС РФ от 25.06.2010 N ВАС-7628/10 по делу N А76-24607/2008-10-616/92;

— Постановление ФАС Поволжского округа от 09.11.2010 по делу N А65-19098/2009;

— Определение ВАС РФ от 23.12.2010 N ВАС-16857/10 по делу N А07-21862/2009;

— Определение ВАС РФ от 07.12.2010 N ВАС-14026/10 по делу N А07-3572/2009.

Должен ли подрядчик по договору, заключенному по Закону N 223-ФЗ, документально подтверждать стоимость работ субподрядчиков

Организация является заказчиком по Закону N 223-ФЗ. Контролирующие органы требуют от организации представления первичных документов субподрядчиков по договору с генподрядчиком.

Имеет ли организация право и на каком основании запрашивать первичные документы субподрядчиков, учитывая, что такое право предусмотрено законом?

Рассмотрев вопрос, мы пришли к следующему выводу:

Закон не обязывают подрядчика представлять заказчику документы, подтверждающие произведенные им затраты, в том числе в части стоимости работ судподрядчиков. Если договором предусмотрена твердая цена работ по договору подряда (не оговорено, что цена является ориентировочной), требование о представлении таких документов не только не основано на законе, но и не имеет смысла.

Обоснование вывода:

В силу ч. 2 ст. 2 Федерального закона от 18.07.2011 N 223-ФЗ “О закупках товаров, работ, услуг отдельными видами юридических лиц” (далее – Закон N 223-ФЗ) порядок заключения и исполнения договоров, а также иные связанные с обеспечением закупки положения должны содержаться в положении о закупке, которое является документом, регламентирующим закупочную деятельность заказчика. Иными словами, большая часть регулирования процесса закупки, в том числе установление требований к форме и содержанию договора, порядку его заключения, исполнения, изменения и расторжения, оставляется на усмотрение заказчика.

В любом случае к договорам, заключаемым в соответствии с Законом N 223-ФЗ, применяются нормы Гражданского кодекса РФ, что следует из ч. 1 ст. 2 указанного Закона. При этом представляется очевидным, что положение о закупке не может устанавливать требований к содержанию договора, порядку его исполнения, изменения и расторжения, противоречащих требованиям Гражданского кодекса РФ (п. 1 ст. 422 ГК РФ).

Некоторые требования относительно содержания договора вытекают из отдельных указаний Закона N 223-ФЗ и иных нормативных актов. В частности, Закон N 223-ФЗ неоднократно указывает на необходимость установления цены договора (ч. 5, п. 5 ч. 9, п. 5 ч. 10 ст. 4 Закона N 223-ФЗ). При этом из п. 5 ч. 10 ст. 4 Закона N 44-ФЗ следует, что документация может включать указание на цену договора в трех вариантах:

– цена по договору в целом;

– цена единицы товара, работы, услуги и максимальное значение цены договора;

– формула цены и максимальное значение цены договора.

Однако более никаких указаний относительно цены договора Закон N 223-ФЗ не содержит.

Следует заметить, что по общему правилу, установленному п. 3 ст. 424 ГК РФ, исполнение договора оплачивается по цене, установленной соглашением сторон, за исключением случаев, предусмотренных законом, когда применяются цены, устанавливаемые или регулируемые государственными органами и (или) муниципальными органами. В отношении работ по договору подряда вообще, равно как и, например, по договору строительного подряда, закон таких указаний не содержит. Соответственно, стороны сами согласовывают цену работ по договору подряда, имея в виду, что в силу п. 2 ст. 709 ГК РФ эта цена включает компенсацию издержек подрядчика и причитающееся ему вознаграждение.

Вместе с тем из положений ст. 424 ГК РФ можно сделать вывод, что под ценой договора понимается согласованная сторонами сумма, уплачиваемая за товар, работы, услуги, иное исполнение по договору, независимо от того, из каких составляющих эта сумма складывается. При этом ни Гражданский кодекс РФ, ни Закон N 223-ФЗ, ни какой-либо иной нормативный акт не обязывают поставщика, подрядчика, исполнителя представлять документы, подтверждающие произведенные им затраты, заказчику.

В целях рассмотрения интересующего нас вопроса следует также иметь в виду, что цена может быть твердой или ориентировочной. В отношении договора подряда на это прямо указывает п. 4 ст. 709 ГК РФ, согласно которому цена работы (смета) может быть приблизительной или твердой, причем при отсутствии других указаний в договоре подряда цена работы считается твердой. Закон N 223-ФЗ не требует, чтобы цена договора и количество товара, объем работ или услуг по нему определялись твердыми величинами.

При этом в силу п. 6 ст. 709 ГК РФ подрядчик не вправе требовать увеличения твердой цены, а заказчик ее уменьшения, в том числе в случае, когда в момент заключения договора подряда исключалась возможность предусмотреть полный объем подлежащих выполнению работ или необходимых для этого расходов. Более того, согласно ст. 710 ГК РФ в случаях, когда фактические расходы подрядчика оказались меньше тех, которые учитывались при определении цены работы, подрядчик сохраняет право на оплату работ по цене, предусмотренной договором подряда, если заказчик не докажет, что полученная подрядчиком экономия повлияла на качество выполненных работ, хотя в договоре подряда может быть предусмотрено распределение полученной подрядчиком экономии между сторонами.

Таким образом, если договором предусмотрена твердая цена работ по договору подряда (не оговорено, что установленная договором цена является ориентировочной), размер фактических затрат подрядчика никак не влияет на цену договора. Поэтому и требование о представлении документов, подтверждающих затраты подрядчика в части оплаты работ, выполненных субподрядчиками, не только не основано на законе, но и не имеет смысла.

Правоприменительная практика также исходит из того, что если договором подряда установлена твердая цена и в контракте не содержится условие, обязывающее подрядчика представлять заказчику документы, подтверждающие стоимость использованных подрядчиком материалов (счета-фактуры и т.п.), то заказчик не имеет права требовать от подрядчика эти документы и обязан произвести оплату выполненных работ по цене, указанной в договоре (решение АС Московской области от 09.12.2013 N А41-53019/13, оставленное в силе постановлением Десятого ААС от 29.01.2014 N 10АП-13566/13, постановление ФАС Северо-Западного округа от 06.05.2014 N Ф07-2638/14, постановление АС Западно-Сибирского округа от 09.12.2014 N Ф04-10865/14).

Безусловно, следует учесть, что Закон N 223-ФЗ не содержит указаний, что цена договора, заключаемого в соответствии с этим Законом, должна быть твердой и не может изменяться в течение срока действия договора. Соответственно, в силу принципа свободы договора, закрепленного п. 2 ст. 1, п. 4 ст. 421 ГК РФ, заказчик вправе в документации о закупке и в договоре подряда указать, что цена такого договора и (или) количество (объем) работ, выполняемых по нему, являются ориентировочными, а окончательные размеры цены и объем работ определяются по фактическому исполнению. В свою очередь, подрядчик может принять на себя добровольно, по условиям договора, такое обязательство, равно как и обязанность предоставлять соответствующие документы, подтверждающие произведенные им затраты. Но если такие условия не были включены в договор изначально, они могут быть внесены в договор только по соглашению сторон, но не заказчиком в одностороннем порядке (пп. 1, 4 ст. 450 ГК РФ).

К сведению:

Автономные учреждения не являются получателями бюджетов, в силу этого по общему правилу не являются государственными (как и муниципальными) заказчиками, и потому заключаемые ими гражданско-правовые договоры не являются государственными контрактами (пп. 5-8 ст. 3 Федерального закона от 05.04.2013 N 44-ФЗ “О контрактной системе в сфере закупок товаров, работ, услуг для обеспечения государственных и муниципальных нужд” (далее – Закон N 44-ФЗ), ст. 526, п. 2 ст. 763, п. 2 ст. 764 ГК РФ). Исключения могут составлять случаи, предусмотренные чч. 4, 6 ст. 15 Закона N 44-ФЗ, когда автономные учреждения осуществляют закупки в соответствии с этим законом (при получении бюджетных средств на осуществление капитальных вложений и при осуществлении функций государственных заказчиков по договору с последними, смотрите также п. 3 ч. 1 ст. 1 Закона N 44-ФЗ). Во всех прочих случаях автономные учреждения осуществляют закупочную деятельность в соответствии именно и только с Законом N 223-ФЗ.

Ответ подготовил: Эксперт службы Правового консалтинга ГАРАНТ Серков Аркадий

Статья 709 ГК РФ. Цена работы

Гражданский кодекс Российской Федерации:

Статья 709 ГК РФ. Цена работы

1. В договоре подряда указываются цена подлежащей выполнению работы или способы ее определения. При отсутствии в договоре таких указаний цена определяется в соответствии с пунктом 3 статьи 424 настоящего Кодекса.

2. Цена в договоре подряда включает компенсацию издержек подрядчика и причитающееся ему вознаграждение.

3. Цена работы может быть определена путем составления сметы.

В случае, когда работа выполняется в соответствии со сметой, составленной подрядчиком, смета приобретает силу и становится частью договора подряда с момента подтверждения ее заказчиком.

4. Цена работы (смета) может быть приблизительной или твердой. При отсутствии других указаний в договоре подряда цена работы считается твердой.

5. Если возникла необходимость в проведении дополнительных работ и по этой причине в существенном превышении определенной приблизительно цены работы, подрядчик обязан своевременно предупредить об этом заказчика. Заказчик, не согласившийся на превышение указанной в договоре подряда цены работы, вправе отказаться от договора. В этом случае подрядчик может требовать от заказчика уплаты ему цены за выполненную часть работы.

Подрядчик, своевременно не предупредивший заказчика о необходимости превышения указанной в договоре цены работы, обязан выполнить договор, сохраняя право на оплату работы по цене, определенной в договоре.

6. Подрядчик не вправе требовать увеличения твердой цены, а заказчик ее уменьшения, в том числе в случае, когда в момент заключения договора подряда исключалась возможность предусмотреть полный объем подлежащих выполнению работ или необходимых для этого расходов.

При существенном возрастании стоимости материалов и оборудования, предоставленных подрядчиком, а также оказываемых ему третьими лицами услуг, которые нельзя было предусмотреть при заключении договора, подрядчик имеет право требовать увеличения установленной цены, а при отказе заказчика выполнить это требование — расторжения договора в соответствии со статьей 451 настоящего Кодекса.


Вернуться к оглавлению документа: Гражданский кодекс РФ Часть 2 в действующей редакции

Комментарии к статье 709 ГК РФ, судебная практика применения

В п. 6 Информационного письма Президиума ВАС РФ от 24.01.2000 N 51 «Обзор практики разрешения споров по договору строительного подряда» содержатся следующие разъяснения:

В договоре может быть установлен способ определения цены или ее составной части.

..В соответствии со статьей 709 ГК РФ в договоре подряда указывается цена подлежащей выполнению работы или способ ее определения.

На основании статьи 746 ГК РФ расчеты должны осуществляться в порядке, предусмотренном договором.

В договоре определено, что цена работ состоит из двух частей: сметной, выраженной конкретной суммой, и переменной, выраженной текущим индексом стоимостного показателя. Способ определения цены согласован сторонами в форме, позволяющей произвести ее расчет без дополнительных согласований, что подтверждается отсутствием между подрядчиком и заказчиком в течение длительного времени разногласий по стоимости работ при проведении промежуточных платежей.

Договором не установлено, что каждое изменение рекомендуемого индекса цен требует внесения соответствующей поправки в условия договора в отношении стоимости работ, поэтому иск подлежал удовлетворению в размере, определенном подрядчиком (см. подробнее п. 6 информационного письма ВАС РФ N 51).


В п. 17 Постановления Пленума ВАС РФ от 30.05.2014 N 33 «О некоторых вопросах, возникающих у арбитражных судов при рассмотрении дел, связанных с взиманием налога на добавленную стоимость» содержатся следующие разъяснения:

НДС включается в цену работы, если иное прямо не указано в договоре

..По смыслу положений пунктов 1 и 4 статьи 168 НК РФ сумма налога, предъявляемая покупателю при реализации товаров (работ, услуг), передаче имущественных прав, должна быть учтена при определении окончательного размера указанной в договоре цены и выделена в расчетных и первичных учетных документах, счетах-фактурах отдельной строкой. При этом бремя обеспечения выполнения этих требований лежит на продавце как налогоплательщике, обязанном учесть такую операцию по реализации при формировании налоговой базы и исчислении подлежащего уплате в бюджет налога по итогам соответствующего налогового периода.

В связи с этим, если в договоре нет прямого указания на то, что установленная в нем цена не включает в себя сумму налога и иное не следует из обстоятельств, предшествующих заключению договора, или прочих условий договора, судам надлежит исходить из того, что предъявляемая покупателю продавцом сумма налога выделяется последним из указанной в договоре цены, для чего определяется расчетным методом (пункт 4 статьи 164 Кодекса).

Статья 709. Цена работы — Комментарии к ГК РФ по подряду

1. Согласно пп. 1 — 3 статьи цена подряда, включающая издержки подрядчика и его вознаграждение, т.е. прибыль, может определяться по-разному. Во-первых, цена может быть обозначена в тексте договора, что практикуется при небольшом объеме подрядных работ. Во-вторых, в договоре может быть указан способ определения цены (например, котировки определенного рынка или биржи), что на практике бывает редко. В-третьих, цена определяется сметой, которая содержит постатейный перечень затрат по выполнению работ, прилагается к договору и является его частью. Смета — обязательный документ договора строительного подряда (см. п. 1 ст. 743 и коммент. к ней).

2. В статье не названы другие используемые на практике формы определения цены в подряде. В бытовом подряде цены могут регулироваться соответствующими государственными органами, и в этих случаях они указываются в обязательных для сторон прейскурантах (см. ст. 735 и коммент. к ней). При заключении договора подряда на основании конкурса цена определяется с учетом объявленных условий конкурса и результатов его проведения.

3. Согласно п. 4 смета, как и цена, определенная в других формах, может быть приблизительной и твердой, причем предполагается твердая цена. Это различие имеет большое практическое значение.

4. При приблизительной цене подрядчик согласно п. 5 может ставить вопрос о существенном повышении цены перед заказчиком, который, однако, вправе отказаться в этом случае от договора, с уплатой подрядчику цены за уже выполненную работу. Эта норма об увеличении цены может быть реализована подрядчиком при наличии двух условий:

а) необходимы дополнительные подрядные работы, требующие существенного повышения цены. Необходимость таких дополнительных работ, влекущих существенное удорожание цены, в случае спора сторон должна определяться компетентным судом с привлечением экспертов, поскольку это технический вопрос, требующий специальных знаний;

б) о необходимости повышения цены подрядчик должен своевременно предупредить заказчика. Своевременность предупреждения может также вызывать неясности. Следует полагать, что предупреждение по общему правилу не может считаться своевременным, если оно сделано после прохождения «экватора» работ, т.е. после выполнения первой их половины. Однако при наличии особых обстоятельств возможно иное решение этого вопроса, что при возникновении спора должно быть сделано судом.

5. Незначительное превышение приблизительной сметы, как это следует из ее существа и текста п. 5 ст. 709, должно быть заказчиком оплачено при условии его своевременного предупреждения об этом. Заказчик со своей стороны вправе требовать снижения приблизительной сметы, представив надлежащие обоснования.

6. При твердой цене она, согласно абз. 1 п. 6, не подлежит пересмотру, независимо от причин желательности ее пересмотра. Из этого общего правила допускаются, однако, исключения, причем возможно как повышение, так и снижение цены.

Во-первых, в силу абз. 2 п. 6 при существенном возрастании стоимости материалов, оборудования и услуг подрядчик вправе требовать увеличения цены, а при возражении заказчика вправе расторгнуть договор в соответствии со ст. 451 ГК, допускающей расторжение договора в связи с существенным изменением обстоятельств.

Во-вторых, пересмотр цены допускается при наличии у подрядчика экономии (см. п. 1 ст. 710 и коммент. к ней).

В-третьих, уменьшение цены возможно при ненадлежащем качестве выполненных работ (см. п. 1 ст. 723 и коммент. к ней).

Наконец, уменьшение цены может иметь место с учетом стоимости остающегося у подрядчика материала заказчика (см. п. 1 ст. 713 и коммент. к ней).

7. Для устранения неблагоприятных последствий удорожания выполняемых работ и возможных по этому вопросу споров сторон в договорной смете принято предусматривать резерв для покрытия непредвиденных и дополнительных работ.

8. Цены по договору подряда сторонами могут согласовываться с учетом результатов выполнения работ, скидки (при несвоевременном выполнении работ и их ненадлежащем качестве) и доплаты (за досрочное выполнение работ и их высокое качество). Такие скидки и доплаты имеют стимулирующее значение и являются полезными, хотя согласование в договоре размера таких скидок (доплат) может вызывать трудности.

9. В случае изменения во время выполнения подрядных работ цены, установленной обязательными для сторон государственными прейскурантами, новая цена к заключенным до ее введения договорам подряда применению не подлежит. Это вытекает из общего правила п. 1 ст. 422 ГК о применении к договору норм, действующих на момент его заключения.

10. Об особенностях пересмотра сметы в строительном подряде см. ст. 744 и коммент. к ней.

Посмотрите еще темы

Договор подряда или договор оказания услуг, как выбрать правильно

Как гласит пункт 1 статьи 702 ГК РФ, по договору подряда одна сторона (подрядчик) обязуется выполнить по заданию другой стороны (заказчика) определенную работу и сдать ее результат заказчику, а заказчик обязуется принять результат работы и оплатить его. Суть работ, которые могут быть предметом договора подряда, конкретизирована в пункте 1 статьи 703 ГК РФ. В нем сказано, что договор подряда заключается на изготовление или переработку (обработку) вещи либо на выполнение другой работы с передачей ее результата заказчику В свою очередь по договору возмездного оказания услуг исполнитель обязуется по заданию заказчика оказать услуги (совершить определенные действия или осуществить определенную деятельность), а заказчик обязуется оплатить эти услуги (п. 1 ст. 779 ГК РФ). Как видим, в данном случае предметом договора выступает совершение действий или осуществление деятельности. Примеры таких действий (такой деятельности) приведены в пункте 2 статьи 779 ГК РФ. Это могут быть услуги связи, медицинские, ветеринарные, аудиторские, консультационные, информационные услуги, услуги по обучению, туристическому обслуживанию и другие Итак, основное отличие предметов рассматриваемых договоров заключается в сути главной обязанности, которую принимает на себя исполнитель. Если речь идет о том, что заказчик должен получить от исполнителя некий конечный, и, как правило, овеществленный результат деятельности (документ, здание, забор, яму, исправный автомобиль и т.п.), а сама деятельность — это лишь необходимое условие для образования такого результата, то в терминах ГК РФ речь идет о работе. И, следовательно, отношения по достижению или созданию такого результата и передаче его заказчику должны регулироваться договором подряда

Если же суть обязательства исполнителя заключается непосредственно в совершении каких-либо действий, результат которых отдельно от них не существует и заказчику не передается, то возникающие отношения между сторонами должны регулироваться договором возмездного оказания услуг.

Таким образом, для правильного выбора вида договора в каждой конкретной ситуации достаточно задать только один вопрос: за что конкретно заказчик будет платить исполнителю. Если получение вознаграждения связано с передачей заказчику какого-то результата деятельности и без этого результата сама деятельность исполнителя никак не оплачивается, то речь идет о работе и договоре подряда. Если же оплачивается сам факт выполнения какой-либо деятельности (совершения конкретного действия), а не полученный результат, то речь идет о договоре возмездного оказания услуг. Например, таким договором оформляется участие в судебном заседании или проведение семинара.

Примечание: Налоговый кодекс содержит четкие определения рассматриваемых терминов. Так, согласно пункту 4 статьи 38 НК РФ, работой для целей налогообложения признается деятельность, результаты которой имеют материальное выражение и могут быть реализованы для удовлетворения потребностей организации и (или) физических лиц А услугой для целей налогообложения является деятельность, результаты которой не имеют материального выражения, реализуются и потребляются в процессе осуществления этой деятельности (п. 5 ст. 38 НК РФ)

Отличия договоров подряда и оказания услуг

Правильное определение вида договора имеет важное практическое значение. Дело в том, что договоры подряда и возмездного оказания услуг значительно различаются по объему прав и обязанностей сторон. Поэтому ошибка в квалификации договора может повлечь серьезные последствия

Исполнение договора третьими лицами

Так, по договору подряда исполнитель (подрядчик) имеет право привлекать для выполнения работ третьих лиц, если в договоре прямо не сказано, что он обязан выполнить работы лично (п. 1 ст. 706 ГК РФ)

А исполнитель по договору возмездного оказания услуг таким правом не обладает. Привлечь к оказанию услуг третьих лиц он может только в том случае, если это прямо разрешено в самом договоре (ст. 780 ГК РФ). А значит, если стороны ошибочно заключили договора подряда вместо договора оказания услуг, и при этом услуги фактически оказываются третьим лицом, это может стать основанием для лишения исполнителя права на вознаграждение

Пример: Предположим, стороны оформили договором подряда обязательства по проведению семинара для работников заказчика. При этом исполнитель выступил лишь в роли посредника, а непосредственно для проведения семинара привлек другую организацию, имеющую персонал с необходимой квалификацией. Но при этом в договоре с заказчиком данная возможность оговорена не была. В такой ситуации в случае возникновения спора суд переквалифицирует договор. В результате исполнитель может остаться без вознаграждения, так как по условиям договора и с учетом положений ГК РФ о договоре возмездного оказания услуг не имел права привлекать третье лицо.

Важно: Статья 54.1 НК РФ запрещает учитывать в расходах вознаграждение и применять по нему вычеты, если действия совершались не тем лицом, которое указано в договоре, или которому обязательства были переданы в соответствии с договором. Следовательно, ошибка при оформлении договора может привести к снятию расходов и вычетов в ситуации, когда вознаграждение было реально выплачено

Односторонний отказ от исполнения договора

Также два рассматриваемых договора различаются в части возможного одностороннего отказа от сделки. По договору подряда такое право есть только у заказчика. Он может в любое время до сдачи результатов работ отказаться от исполнения договора без объяснения причин, оплатив уже выполненную подрядчиком часть работ (ст. 717 ГК РФ). Что же касается договора возмездного оказания услуг, то он может быть прекращен отказом от его исполнения любой из сторон и в любое время. При этом заказчик, отказавшийся от договора, оплачивает исполнителю фактически понесенные им расходы (п. 1 ст. 782 ГК РФ). А если от договора отказывается исполнитель, то он возмещает заказчику связанные с этим убытки (п. 2 ст. 782 ГК РФ) Дополнительно отметим, что заказчик вправе отказаться от договора подряда, если подрядчик выполняет работу настолько медленно, что он явно не уложится в установленные договором сроки (ст. 715 ГК РФ). А вот договор оказания услуг подобной возможности для заказчика не предусматривает

Оформление «закрывающих» документов

Есть и другие отличия. К примеру, статья 720 ГК РФ требует, чтобы передача результатов работы оформлялась отдельным документом (актом или другим подобным документом). Если этот документ отсутствует, значит, нет оснований считать, что подрядчик выполнил свои обязанности, а, следовательно, у него не возникает право получить вознаграждение (постановление Арбитражного суда Центрального округа от 02.04.18 № Ф10-551/2018 по делу № А84-228/2017).

Договор оказания услуг, напротив, не требует оформления каких-либо «закрывающих» документов (постановление Арбитражного суда Центрального округа от 09.04.18 № Ф10-1299/2018 по делу № А23-140/2017). А значит, обязанность заказчика оплатить услуги не зависит от того, оформили стороны акт (иной подобный документ) или нет. Обратное правило может быть предусмотрено в самом договоре (постановление Арбитражного суда Восточно-Сибирского округа от 18.07.2018 №Ф02-3133/2018 по делу № А58-7306/2017)

Внимание: Отсутствие «закрывающих» документов, соответствующих действительному типу договора, также может обернуться для заказчика налоговыми проблемами

Обязательные условия договоров подряда и оказания услуг

Есть отличия и в части содержания договоров подряда и возмездного оказания услуг. Так, в договоре подряда нужно обязательно установить критерии, позволяющие определить конкретный вид работы (п. 1 ст. 702 ГК РФ), а также условия о начальном и конечном сроках выполнения работы (п. 1 ст. 708 ГК РФ) Что касается договора возмездного оказания услуг, то для того, чтобы он считался заключенным, достаточно зафиксировать условия, определяющие конкретный вид услуги (п. 1 ст. 779 ГК РФ). Правда, нужно учитывать, что отраслевыми законами могут быть предусмотрены и иные правила составления договора возмездного оказания услуг. Например, в договорах на оказание туристских услуг (договор реализации туристского продукта) должны содержаться сведения, перечисленные в статье 10 Федерального закона от 24.11.1996 №132-ФЗ «Об основах туристской деятельности в Российской Федерации». В частности, к ним относятся сведения о туроператоре и о размере финансового обеспечения ответственности туроператора, данные о договоре страхования ответственности туроператора или о банковской гарантии, сведения о туристе и о цене продукта (в рублях), и иные данные

Как видим, по общему правилу перечень обязательных условий для договора подряда шире, чем для договора возмездного оказания услуг, так как включает в себя указание сроков начала и окончания выполнения работ. А значит, если стороны ошибочно заключили договор оказания услуг вместо договора подряда и при этом не прописали в договоре сроки выполнения работ, то оформленный ими договор просто не будет иметь юридической силы. Ведь по правилам ГК РФ договоры толкуются не по названию, а по сути возникающих между сторонами отношений (п. 3 ст. 421, ст. 422 и 431 ГК РФ)

Поэтому после установления того факта, что по договору выполняются работы, а не оказываются услуги, он будет переквалифицирован в договор подряда. А договор подряда, в котором нет условий о сроках выполнения работ, считается незаключенным. Следовательно, исполнитель-подрядчик не сможет требовать вознаграждения, предусмотренного таким «договором», а заказчик — передачи ему соответствующего результата. Кроме того, ни для одной из сторон такой «договор» не может служить документальным подтверждением расходов, так как юридически он не существует. Что опять же может приводить к налоговым доначислениям

Как указывать цену работ или услуг

А вот условие о цене по общему правилу не является обязательным ни для договора подряда, ни для договора возмездного оказания услуг. Если оформить договор без установления платы за работу или услугу, заказчик должен будет выплатить исполнителю сумму, в которую обычно оцениваются аналогичные работы или услуги (п. 3 ст. 424, п. 1 ст. 709 ГК РФ, п. 54 постановления Пленума Верховного суда РФ № 6, Пленума ВАС РФ № 8 от 01.07.96). Понятно, что такой подход к определению цены чреват спорами, поэтому пропускать этот пункт при составлении договора все же не следует Формулируя условие о стоимости работ или услуг, необходимо четко зафиксировать, включает ли цена сумму НДС. Дело в том, что если этот вопрос упустить, то исполнитель получит право взыскать налог сверх цены договора (п. 15 Обзора практики разрешения споров по договору строительного подряда, утв. информационным письмом Президиума ВАС РФ от 24.01.2000 №51)

А при заключении договоров на оказание юридических услуг, связанных с ведением судебных дел, нужно учесть следующее. Ни обязанность заказчика по оплате услуг, ни размер такой оплаты, ни порядок определения цены услуг не могут зависеть от принятого судом решения (постановления Конституционного суда РФ от 23.01.07 № 1-П и Президиума ВАС РФ от 02.12.2003 №11406/03). В частности, стоимость услуг по такому договору нельзя установить в виде процента от взысканной через суд суммы (постановление Арбитражного суда Западно-Сибирского округа от 30.03.18 № Ф04-334/2018 по делу № А46-6600/2017). Заметим также, что в договорах, предусматривающих оказание юридических и консультационных услуг на досудебных стадиях (к примеру, при сопровождении налоговой проверки), условие о «гонораре успеха» вполне допустимо (определение Верховного суда РФ от 02.10.20 № 304-ЭС20-15748 по делу № А70-16892/2019)

Договор подряда или договор оказания услуг, как выбрать правильно

Источник: Бухонлайн

Подробная информация о твердой и приблизительной цене сметной документации. Блог Академии сметного дела

Цена сметы может быть твердой или приблизительной. 

Твердая цена сметы – та цена, по которой не допускаются отступления ни в сторону уменьшения, ни в сторону увеличения, составляется при наличии всех исходных данных (объем и виды работ, расценки и проч.). По общему правилу цена сметы по договору подряда – твердая, если в договоре не указано иное (см.п.4 ст. 709 ГК РФ). Даже если в момент заключения договора исключалась возможность предусмотреть полный объем расходов или подлежащих выполнению работ, твердая цена сметы не подлежит изменению. 

Подрядчик обязан выполнить работу по цене, определенной договором. Однако, п.6 ст.709 ГК РФ предоставляет подрядчику право потребовать увеличение установленной цены, если стоимость предоставляемых подрядчиком материалов и оборудования существенно возросла, и этого невозможно было предусмотреть при заключении договора. Если заказчик отказывается от увеличения цены, подрядчик вправе требовать расторжения договора (ст.451 ГК РФ). 

Если при выполнении работ подрядчиком были снижены издержки, по сравнению с указанными в смете, и это не повлияло на качество выполненных работ, он вправе оставить за собой сэкономленные средства. Это называется экономией подрядчика. Право подрядчика требовать от заказчика оплатить работу согласно смете сохраняется. Согласно п.2 ст.710 ГК РФ экономия подрядчика может быть распределена между сторонами по их соглашению. 

Приблизительная цена сметы – цена, по которой допускается незначительное отступление от указанной в ней стоимости работ. Составляется, когда не определен весь перечень необходимых работ. Возможность увеличения цены допускается лишь в случае, если возникла необходимость в проведении дополнительных работ, не предусмотренных приблизительной сметой. Увеличение цены по другим основаниям не допускается. 

По мере выполнения работ расчеты производятся по фактическим затратам подрядчика, однако не допускается значительное превышение сметы. Законом не установлены параметры определения степени значительности превышения приблизительной цены сметы. Значительно превышена смета или нет, определяется в каждом конкретном случае, исходя из стоимости работ, размеров и целесообразности расходов и проч. При этом подрядчик обязан своевременно предупредить заказчика о необходимости значительно превысить приблизительную смету, в противном случае он теряет право на возмещение расходов сверх приблизительной сметы (п.5 ст.709 ГК РФ). Заказчик, в свою очередь, в случае значительного превышения приблизительной сметы вправе отказаться от договора, выплатив подрядчику цену за выполненную часть работы. 

Указанные правила не относятся к случаям виновных действий заказчика или подрядчика, когда удорожание работ относится на счет виновной стороны. 

Использование нескольких алгоритмов машинного обучения для классификации элитных и неэлитных вратарей в профессиональном мужском футболе

  • 1.

    Hughes, M. et al. Moneyball и футбол — анализ ключевых показателей эффективности элитных футболистов-мужчин по должностям. J. Hum. Спортивные упражнения. 7 , 402–412 (2012).

    Google ученый

  • 2.

    Райт, К., Карлинг, К. и Коллинз, Д. Более широкий контекст анализа эффективности и его применения в футбольном тренерском процессе. Внутр. J. Perform. Анальный. Спорт 14 , 709–733 (2014).

    Google ученый

  • 3.

    Ларкин, П. и Ривз, М. Дж. Джуниор-элитный футбол: пора переупорядочить идентификацию талантов? Soccer Soc. 19 , 1183–1192 (2018).

    Google ученый

  • 4.

    Andrzejewski, M., Chmura, J., Pluta, B., Strzelczyk, R. & Kasprzak, A.Анализ спринтерской деятельности профессиональных футболистов. J. Strength Cond. Res. 27 , 2134–2140 (2013).

    PubMed Google ученый

  • 5.

    Фернандес-Наварро, Дж., Фрадуа, Л., Зубиллага, А., Форд, П. Р. и Мак-Роберт, А. П. Атакующий и защитный стили игры в футболе: анализ испанских и английских элитных команд. J. Sports Sci. 34 , 2195–2204 (2016).

    PubMed Google ученый

  • 6.

    Лю, Х., Гомес, М. Б., Лаго-Пеньяс, К. и Сампайо, Дж. Статистика матчей, связанных с победами на групповом этапе чемпионата мира по футболу 2014 в Бразилии. J. Sports Sci. 33 , 1205–1213 (2015).

    CAS PubMed Google ученый

  • 7.

    Буш, М. Д., Арчер, Д. Т., Хогг, Р. и Брэдли, П. С. Факторы, влияющие на физическую и техническую изменчивость в английской премьер-лиге. Внутр. J. Sports Physiol.Выполнять. 10 , 865–872 (2015).

    PubMed Google ученый

  • 8.

    Чжоу, К., Чжан, С., Лоренцо Кальво, А. и Цуй, Ю. Суперлига Китайской футбольной ассоциации, 2012–2017 гг .: Ключевые показатели эффективности в играх на равновесие. Внутр. J. Perform. Анальный. Спорт 18 , 645–656 (2018).

    Google ученый

  • 9.

    Джамиль, М., Макэрлен-Нейлор, С.А. и Беато, М. Исследование влияния зимнего перерыва в середине сезона на уровень технических показателей в европейском футболе — влияет ли перерыв в игре на динамику команды? Внутр. J. Perform. Анальный. Спорт 20 , 406–419 (2020).

    Google ученый

  • 10.

    Джамиль, М. Откуда берутся лучшие технические футболисты мира? Анализ связи между техническим мастерством и географическим происхождением в элитном футболе. J. Hum. Спортивные упражнения. 17 , 1–17 (2020).

    Google ученый

  • 11.

    Джамил, М. Пример из практики, оценивающий особенности восстановления владения мячом в английской Премьер-лиге по футболу. Внутр. J. Perform. Анальный. Спорт 19 , 1011–1025 (2019).

    Google ученый

  • 12.

    Брефельд, У. и Циммерманн, А. Гостевая редакция: Специальный выпуск спортивной аналитики. Данные Мин. Знай. Discov. 31 , 1577–1579 (2017).

    MathSciNet Google ученый

  • 13.

    Беато М., Деверо Г. и Стифф А. Достоверность и надежность блоков глобальной системы позиционирования (STATSports Viper) для измерения дистанции и максимальной скорости в спорте. J. Strength Cond. Res. 32 , 2831–2837 (2018).

    PubMed Google ученый

  • 14.

    Беато, М. и Джамил, М. Внутрисистемная надежность SICS: система видеонаблюдения (Digital.Stadium ® ) для анализа результатов в футболе. J. Sports Med. Phys. Фитнес 58 , 831–836 (2018).

    PubMed Google ученый

  • 15.

    Редвуд-Браун, А., Крэнтон, В. и Сандерленд, К. Валидация системы видеоанализа в реальном времени для футбола. Внутр. J. Sports Med. 33 , 635–640 (2012).

    CAS PubMed Google ученый

  • 16.

    Петерс Р. и Холборн П. Обзор методов интеллектуального анализа данных для прогнозирования отказов при непрерывной разливке. Proc. 8-й Int. Конф. Модель. Simul. Металл. Процесс. Steelmak. СТАЛЬСИМ. 2 , 488–499 (2019).

    Google ученый

  • 17.

    Кармайкл, Ф., Томас, Д. и Уорд, Р. Командная деятельность: пример футбола в Премьер-лиге Англии. Manag. Decis. Экон. 21 , 31–45 (2000).

    Google ученый

  • 18.

    Рейн Р. и Меммерт Д. Большие данные и тактический анализ в элитном футболе: будущие вызовы и возможности спортивной науки. Springerplus 5 , 1410 (2016).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 19.

    Claudino, J. G. et al. Современные подходы к использованию искусственного интеллекта для оценки риска травм и прогнозирования результатов в командных видах спорта: систематический обзор. Спорт. Med. Открыть 5 , 28 (2019).

    Google ученый

  • 20.

    Herold, M. et al. Машинное обучение в мужском профессиональном футболе: текущие приложения и будущие направления для улучшения атакующей игры. Внутр. J. Sports Sci. Тренер. 14 , 798–817 (2019).

    Google ученый

  • 21.

    West, J. Обзор основных требований к футбольному вратарю. Внутр. J. Sport. Sci. Тренер. 13 , 1215–1222 (2018).

    Google ученый

  • 22.

    Фрик Б. Рынок труда футболистов: эмпирические данные ведущих европейских лиг. Скотт. J. Полит. Экон. 54 , 422–446 (2007).

    Google ученый

  • 23.

    Лю, Х., Гомес, М. А. и Лаго-Пеньяс, К. Профили результатов матчей вратарей элитных футбольных команд. Внутр. J. Sport. Sci. Тренер. 10 , 669–682 (2015).

    Google ученый

  • 24.

    Сарменто, Х., Ангуера, М. Т., Перейра, А. и Араужу, Д. Выявление и развитие талантов в мужском футболе: систематический обзор. Спорт. Med. 48 , 907–931 (2018).

    Google ученый

  • 25.

    Razavi, AR, Gill, H., Åhlfeldt, H. & Shahsavar, N. «Метод предварительной обработки данных для повышения эффективности и точности интеллектуального анализа данных» In Lecture Notes in Computer Science, ( ред. Сильвия Микш, Джим Хантер, Эльпида Керавну) 434–443. (Германия: Springer-Verlag, 2005).

  • 26.

    Пол, Д. Дж., Брэдли, П. С.И Нассис, Г. П. Факторы, влияющие на результаты матчей элитных футболистов: проливаем свет на сложность. Внутр. J. Sports Physiol. Выполнять. 10 , 516–519 (2015).

    PubMed Google ученый

  • 27.

    Oza, N.C. & Tumer, K. Ансамбли классификаторов: выбор реальных приложений. Инф. Fusion 9 , 4–20 (2008).

    Google ученый

  • 28.

    Schapire, R.E., Singer, Y. Улучшенные алгоритмы повышения с использованием прогнозов с рейтингом достоверности. Машинное обучение 37 , 297–336 (1999).

    MATH Google ученый

  • 29.

    Лю, Х., Хопкинс, В., Гомес, А. М. и Молинуево, С. Дж. Надежность между операторами статистики футбольных матчей в реальном времени из OPTA Sportsdata. Внутр. J. Perform. Анальный. Спорт 13 , 803–821 (2013).

    Google ученый

  • 30.

    Джамиль, М., Лю, Х., Фатак, А. и Меммерт, Д. Исследование, определяющее, какие ключевые показатели эффективности влияют на шансы продвижения в элитные лиги в профессиональном европейском футболе. Внутр. J. Perform. Анальный. Спорт 21 , 641–650 (2021).

    Google ученый

  • 31.

    Ситон, М. и Кампос, Дж. Компетенция в области распределения вратарей футбольных клубов. Внутр. J. Perform. Анальный. Спорт 11 , 314–324 (2011).

    Google ученый

  • 32.

    Лаго-Пеньяс, К., Лаго-Баллестерос, Дж. И Рей, Э. Различия в показателях результативности между выигравшими и проигравшими командами в Лиге чемпионов УЕФА. J. Hum. Кинет. 27 , 135–146 (2011).

    Google ученый

  • 33.

    Гарсиа-Рубио, Х., Гомес, М. Б., Лаго-Пеньас, С. и Ибаньес Годой, SJ Влияние места проведения матча, первого забитого мяча и качества противостояния на исход матча в лиге чемпионов УЕФА . Внутр. J. Perform. Анальный. Спорт 15 , 527–539 (2015).

    Google ученый

  • 34.

    Петерс, Т. Проверка мудрости толпы в поле: оценки Transfermarkt и результаты международного футбола. Внутр. J. Прогноз. 34 , 17–29 (2018).

    Google ученый

  • 35.

    Джамиль, М. и Керруиш, С. В каком возрасте игроки английской Премьер-лиги наиболее продуктивны? Тематическое исследование, посвященное годам пиковой производительности элитных профессиональных футболистов. Внутр. J. Perform. Анальный. Спорт 20 , 1120–1133 (2020).

    Google ученый

  • 36.

    Бродерсен, К. Х., Онг, С. С., Стефан, К. Э. и Бухманн, Дж. М. Сбалансированная точность и ее апостериорное распределение. в 2010 20-я Международная конференция по распознаванию образов 3121–3124 (IEEE, 2010). https://doi.org/10.1109/ICPR.2010.764.

  • 37.

    Lago-Peñas, C., Lago-Ballesteros, J., Деллал, А. и Гомес, М. Статистика, связанная с игрой, которая позволяет различать выигравшие, ничьи и проигравшие команды испанской футбольной лиги. J. Sport. Sci. Med. 9 , 288–293 (2010).

    Google ученый

  • 38.

    Gonçalves, B. et al. Изучение сетей передачи команд и динамики движений игроков в футболе молодежных ассоциаций. PLoS ONE 12 , 1–13 (2017).

    Google ученый

  • 39.

    Алмейда, К. Х., Феррейра, А. П. и Волоссович, А. Влияние местоположения матча, статуса матча и качества соперников на восстановление владения мячом в Лиге чемпионов УЕФА. J. Hum. Кинет. 41 , 203–214 (2014).

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 40.

    Collet, C. Игра во владение? Сравнительный анализ удержания мяча и успехов команды в европейском и международном футболе, 2007–2010 гг. J. Sports Sci. 31 , 123–136 (2013).

    PubMed Google ученый

  • 41.

    Рейн Р., Раабе Д. и Меммерт Д. «Какой пас лучше?» Новые подходы к оценке эффективности передач в элитном футболе. Hum. Mov. Sci. 55 , 172–181 (2017).

    PubMed Google ученый

  • 42.

    Оберстон Дж. Сравнение вратарей английской Премьер-лиги: определение действий на поле, которые отличают лучших от остальных. J. Quant. Анальный. Спорт. 6 , статья 9 (2010).

  • 43.

    Bradley, P. S. et al. Результаты матчей и физические возможности игроков входят в тройку лучших соревновательных стандартов английского профессионального футбола. Hum. Mov. Sci. 32 , 808–821 (2013).

    PubMed Google ученый

  • 44.

    Rampinini, E., Impellizzeri, F. M., Castagna, C., Coutts, A. J. & Wisloff, U.Технические показатели во время футбольных матчей итальянской лиги Серии А: Влияние усталости и соревновательного уровня. J. Sci. Med. Спорт 12 , 227–233 (2009).

    PubMed Google ученый

  • 45.

    Ди Сальво В., Грегсон В., Аткинсон Г., Тордофф П. и Драст Б. Анализ активности высокой интенсивности в футболе премьер-лиги. Внутр. J. Sports Med. 30 , 205–212 (2009).

    PubMed Google ученый

  • % PDF-1.4 % 2088 0 obj> эндобдж xref 2088 480 0000000016 00000 н. 0000016440 00000 п. 0000016674 00000 п. 0000016719 00000 п. 0000016851 00000 п. 0000017337 00000 п. 0000017402 00000 п. 0000017516 00000 п. 0000020266 00000 п. 0000023194 00000 п. 0000026366 00000 п. 0000029200 00000 н. 0000032514 00000 п. 0000035730 00000 п. 0000038938 00000 п. 0000040707 00000 п. 0000040938 00000 п. 0000041021 00000 п. 0000041077 00000 п. 0000041152 00000 п. 0000041230 00000 п. 0000041305 00000 п. 0000041455 00000 п. 0000041603 00000 п. 0000041680 00000 п. 0000042147 00000 п. 0000042784 00000 н. 0000057120 00000 п. 0000073764 00000 п. 0000095624 00000 п. 0000098599 00000 н. 0000100816 00000 н. 0000121364 00000 н. 0000143226 00000 н. 0000164294 00000 н. 0000186151 00000 н. 0000208160 00000 н. 0000216961 00000 н. 0000220202 00000 н. 0000244674 00000 н. 0000244734 00000 н. 0000244816 00000 н. 0000244897 00000 н. 0000244952 00000 н. 0000245085 00000 н. 0000245141 00000 п. 0000245262 00000 н. 0000245318 00000 п. 0000245455 00000 н. 0000245510 00000 н. 0000245677 00000 н. 0000245814 00000 н. 0000245869 00000 н. 0000246034 00000 н. 0000246211 00000 н. 0000246368 00000 н. 0000246423 00000 н. 0000246566 00000 н. 0000246745 00000 н. 0000246900 00000 н. 0000246955 00000 н. 0000247070 00000 н. 0000247249 00000 н. 0000247388 00000 н. 0000247443 00000 н. 0000247668 00000 н. 0000247837 00000 н. 0000247942 00000 н. 0000247997 00000 н. 0000248100 00000 н. 0000248279 00000 н. 0000248458 00000 н. 0000248513 00000 н. 0000248732 00000 н. 0000248947 00000 н. 0000249158 00000 н. 0000249213 00000 н. 0000249432 00000 н. 0000249617 00000 н. 0000249788 00000 н. 0000249843 00000 н. 0000250010 00000 н. 0000250205 00000 н. 0000250366 00000 н. 0000250421 00000 н. 0000250632 00000 н. 0000250841 00000 н. 0000251002 00000 н. 0000251057 00000 н. 0000251226 00000 н. 0000251397 00000 н. 0000251590 00000 н. 0000251645 00000 н. 0000251756 00000 н. 0000251945 00000 н. 0000252078 00000 н. 0000252133 00000 п. 0000252282 00000 н. 0000252443 00000 н. 0000252608 00000 н. 0000252663 00000 н. 0000252841 00000 н. 0000252946 00000 н. 0000253001 00000 п. 0000253162 00000 н. 0000253217 00000 н. 0000253402 00000 н. 0000253457 00000 н. 0000253597 00000 н. 0000253651 00000 п. 0000253810 00000 н. 0000253864 00000 н. 0000253999 00000 н. 0000254053 00000 н. 0000254166 00000 н. 0000254219 00000 н. 0000254348 00000 п. 0000254403 00000 н. 0000254528 00000 н. 0000254741 00000 н. 0000254796 00000 н. 0000254969 00000 н. 0000255172 00000 н. 0000255227 00000 н. 0000255434 00000 н. 0000255617 00000 н. 0000255786 00000 н. 0000255841 00000 н. 0000255998 00000 н. 0000256053 00000 н. 0000256108 00000 н. 0000256163 00000 н. 0000256218 00000 н. 0000256273 00000 н. 0000256432 00000 н. 0000256487 00000 н. 0000256628 00000 н. 0000256683 00000 н. 0000256842 00000 н. 0000256897 00000 н. 0000257070 00000 н. 0000257125 00000 н. 0000257262 00000 н. 0000257317 00000 н. 0000257446 00000 н. 0000257501 00000 н. 0000257670 00000 н. 0000257725 00000 н. 0000257852 00000 н. 0000257907 00000 н. 0000258052 00000 н. 0000258107 00000 н. 0000258162 00000 н. 0000258281 00000 н. 0000258336 00000 н. 0000258463 00000 н. 0000258518 00000 н. 0000258573 00000 н. 0000258628 00000 н. 0000258861 00000 н. 0000259064 00000 н. 0000259119 00000 н. 0000259298 00000 н. 0000259503 00000 н. 0000259668 00000 н. 0000259723 00000 н. 0000259884 00000 н. 0000260071 00000 н. 0000260298 00000 н. 0000260353 00000 п. 0000260534 00000 п. 0000260727 00000 н. 0000260914 00000 н. 0000260969 00000 н. 0000261118 00000 н. 0000261283 00000 н. 0000261338 00000 н. 0000261625 00000 н. 0000261858 00000 н. 0000261913 00000 н. 0000262138 00000 н. 0000262193 00000 н. 0000262484 00000 н. 0000262539 00000 н. 0000262594 00000 н. 0000262649 00000 н. 0000262814 00000 н. 0000262869 00000 н. 0000263032 00000 н. 0000263087 00000 н. 0000263240 00000 н. 0000263295 00000 н. 0000263480 00000 н. 0000263535 00000 н. 0000263740 00000 н. 0000263795 00000 н. 0000263960 00000 н. 0000264015 00000 н. 0000264070 00000 н. 0000264125 00000 н. 0000264180 00000 н. 0000264235 00000 н. 0000264290 00000 н. 0000264345 00000 н. 0000264400 00000 н. 0000264455 00000 н. 0000264510 00000 н. 0000264697 00000 н. 0000264832 00000 н. 0000264887 00000 н. 0000264998 00000 н. 0000265053 00000 н. 0000265214 00000 н. 0000265269 00000 н. 0000265414 00000 н. 0000265469 00000 н. 0000265616 00000 н. 0000265671 00000 н. 0000265890 00000 н. 0000265945 00000 н. 0000266000 00000 н. 0000266135 00000 н. 0000266190 00000 н. 0000266357 00000 н. 0000266412 00000 н. 0000266585 00000 н. 0000266640 00000 н. 0000266695 00000 н. 0000266818 00000 н. 0000266873 00000 н. 0000266990 00000 н. 0000267171 00000 н. 0000267314 00000 н. 0000267369 00000 н. 0000267514 00000 н. 0000267675 00000 н. 0000267730 00000 н. 0000267863 00000 н. 0000267918 00000 н. 0000268083 00000 н. 0000268232 00000 н. 0000268287 00000 н. 0000268416 00000 н. 0000268595 00000 н. 0000268718 00000 н. 0000268773 00000 п. 0000268924 00000 н. 0000269063 00000 н. 0000269118 00000 п. 0000269283 00000 н. 0000269338 00000 н. 0000269393 00000 н. 0000269542 00000 н. 0000269597 00000 н. 0000269736 00000 н. 0000269791 00000 н. 0000269966 00000 н. 0000270021 00000 н. 0000270076 00000 н. 0000270131 00000 п. 0000270186 00000 п. 0000270241 00000 н. 0000270296 00000 н. 0000270351 00000 п. 0000270466 00000 н. 0000270521 00000 н. 0000270576 00000 н. 0000270735 00000 н. 0000270790 00000 н. 0000270993 00000 п. 0000271048 00000 н. 0000271103 00000 н. 0000271158 00000 н. 0000271371 00000 н. 0000271426 00000 н. 0000271543 00000 н. 0000271598 00000 н. 0000271737 00000 н. 0000271792 00000 н. 0000271899 00000 н. 0000271954 00000 н. 0000272009 00000 н. 0000272130 00000 н. 0000272185 00000 н. 0000272306 00000 н. 0000272531 00000 н. 0000272660 00000 н. 0000272715 00000 н. 0000272826 00000 н. 0000273019 00000 н. 0000273144 00000 н. 0000273199 00000 н. 0000273330 00000 н. 0000273553 00000 н. 0000273678 00000 н. 0000273733 00000 н. 0000273852 00000 н. 0000274053 00000 н. 0000274202 00000 н. 0000274257 00000 н. 0000274400 00000 н. 0000274563 00000 н. 0000274678 00000 н. 0000274733 00000 н. 0000274862 00000 н. 0000274917 00000 н. 0000275070 00000 н. 0000275125 00000 н. 0000275252 00000 н. 0000275307 00000 н. 0000275362 00000 н. 0000275417 00000 н. 0000275586 00000 н. 0000275641 00000 н. 0000275832 00000 н. 0000275887 00000 н. 0000275942 00000 н. 0000275997 00000 н. 0000276136 00000 н. 0000276191 00000 н. 0000276348 00000 н. 0000276403 00000 н. 0000276458 00000 н. 0000276513 00000 н. 0000276568 00000 н. 0000276623 00000 н. 0000276742 00000 н. 0000276797 00000 н. 0000276916 00000 н. 0000276971 00000 н. 0000277092 00000 н. 0000277147 00000 н. 0000277284 00000 н. 0000277339 00000 н. 0000277394 00000 н. 0000277449 ​​00000 н. 0000277504 00000 н. 0000277639 00000 н. 0000277694 00000 н. 0000277841 00000 н. 0000277896 00000 н. 0000278081 00000 н. 0000278136 00000 н. 0000278301 00000 н. 0000278356 00000 н. 0000278557 00000 н. 0000278612 00000 н. 0000278667 00000 н. 0000278812 00000 н. 0000278867 00000 н. 0000279014 00000 н. 0000279069 00000 н. 0000279214 00000 н. 0000279269 00000 н. 0000279324 00000 н. 0000279449 00000 н. 0000279504 00000 н. 0000279635 00000 н. 0000279690 00000 н. 0000279745 00000 н. 0000279886 00000 н. 0000279941 00000 н. 0000280130 00000 н. 0000280321 00000 н. 0000280468 00000 н. 0000280523 00000 п. 0000280652 00000 н. 0000280823 00000 п. 0000280960 00000 н. 0000281015 00000 н. 0000281138 00000 п. 0000281305 00000 н. 0000281436 00000 н. 0000281491 00000 н. 0000281638 00000 н. 0000281693 00000 н. 0000281856 00000 н. 0000281911 00000 н. 0000281966 00000 н. 0000282021 00000 н. 0000282076 00000 н. 0000282131 00000 п. 0000282186 00000 п. 0000282241 00000 н. 0000282296 00000 н. 0000282403 00000 н. 0000282458 00000 н. 0000282571 00000 н. 0000282626 00000 н. 0000282681 00000 п. 0000282736 00000 н. 0000282791 00000 н. 0000282996 00000 н. 0000283051 00000 н. 0000283264 00000 н. 0000283495 00000 н. 0000283654 00000 п. 0000283709 00000 н. 0000283834 00000 н. 0000283889 00000 н. 0000283944 00000 н. 0000283999 00000 н. 0000284220 00000 н. 0000284275 00000 н. 0000284330 00000 н. 0000284385 00000 н. 0000284440 00000 н. 0000284635 00000 н. 0000284762 00000 н. 0000284817 00000 н. 0000284938 00000 н. 0000285135 00000 н. 0000285276 00000 н. 0000285331 00000 п. 0000285474 00000 н. 0000285675 00000 н. 0000285828 00000 н. 0000285883 00000 н. 0000286080 00000 н. 0000286135 00000 п. 0000286190 00000 н. 0000286245 00000 н. 0000286408 00000 п. 0000286463 00000 н. 0000286518 00000 н. 0000286573 00000 н. 0000286628 00000 н. 0000286683 00000 н. 0000286816 00000 н. 0000286871 00000 н. 0000287006 00000 н. 0000287061 00000 н. 0000287216 00000 н. 0000287271 00000 н. 0000287434 00000 н. 0000287489 00000 н. 0000287544 00000 н. 0000287677 00000 н. 0000287732 00000 н. 0000287875 00000 п. 0000287930 00000 н. 0000287985 00000 н. 0000288040 00000 н. 0000288207 00000 н. 0000288262 00000 н. 0000288451 00000 н. 0000288594 00000 н. 0000288649 00000 п. 0000288784 00000 н. 0000288989 00000 н. 0000289146 00000 п. 0000289201 00000 н. 0000289362 00000 н. 0000289563 00000 н. 0000289688 00000 н. 0000289743 00000 н. 0000289884 00000 н. 00002 00000 н. 00002

    00000 н. 00002

    00000 н. 00002

    00000 н. 00002

    00000 н. 00002

    00000 н. 00002 00000 н. 00002 00000 н. 00002 00000 н. 00002 00000 н. 00002 00000 н. 00002
    00000 н. 00002 00000 н. 00002 00000 н. 00002

  • 00000 н. 00002

    00000 н. 00002 00000 н. 00002

      00000 н. 00002 00000 н. 00002 00000 н. 00002 00000 н. 0000016239 00000 п. 0000010102 00000 п. трейлер ] >> startxref 0 %% EOF 2567 0 obj> поток xZi \ S ׶ @ BS` @ & A * [k ؗ hZ: 0 -Vtj {@rkw

      Дисфункция митохондрий и окислительный стресс при метаболических нарушениях — шаг к терапевтическим стратегиям, основанным на митохондриях

      https: // doi.org / 10.1016 / j.bbadis.2016.11.010Получить права и контент

      Основные моменты

      Дисфункция митохондрий и окислительный стресс вовлечены в метаболические нарушения.

      АФК вызвали окислительное повреждение липидов, ДНК и белков.

      Митохондрии могут быть многообещающими терапевтическими мишенями для профилактики метаболических заболеваний.

      Abstract

      Митохондрии являются электростанциями клетки и участвуют в основных функциях клетки, включая выработку АТФ, регуляцию внутриклеточного Ca 2 + , производство и удаление активных форм кислорода, регуляцию апоптотической гибели и активации клеток. семейства протеаз каспаз.Дисфункция митохондрий и окислительный стресс в значительной степени участвуют в старении, раке, возрастном нейродегенеративном и метаболическом синдроме. За последнее десятилетие был достигнут огромный прогресс в понимании структуры, функции и их физиологии митохондрий при метаболических синдромах, таких как диабет, ожирение, инсульт и гипертония, а также сердечные заболевания. Кроме того, был достигнут прогресс в разработке терапевтических стратегий, включая изменения образа жизни (здоровое питание и регулярные упражнения), фармакологические стратегии и подходы, ориентированные на митохондрии.Эти стратегии были в основном направлены на снижение митохондриальной дисфункции и окислительного стресса, а также на поддержание качества митохондрий при метаболических синдромах. Цель нашей статьи — осветить недавний прогресс в изучении роли митохондрий в метаболических синдромах, а также суммировать прогресс молекул, нацеленных на митохондрии, в качестве терапевтических мишеней для лечения метаболических синдромов. Эта статья является частью специального выпуска, озаглавленного: Окислительный стресс и качество митохондрий при диабете / ожирении и критических заболеваниях, под редакцией П.Хемачандра Редди.

      Сокращения

      ATP

      Аденозинтрифосфат

      OXPHOS

      Окислительное фосфорилирование

      ROS

      Реактивные формы кислорода

      RNS

      Реактивные формы азота

      ETC

      Цепь переноса электронов

      (GPx)

      Глутатион пероксидаза

      Глутатион пероксидаза

      Глутатион пероксидаза

      Пероксидаза PG

      альфа

      TNF-α

      Фактор некроза опухоли-альфа

      T2DM

      Сахарный диабет 2 типа

      MitoQ

      Хинон, нацеленный на митохондрии

      SS31

      Пептид Сзето-Шиллера 31

      ERR

      Рецепторы, связанные с эстрогенами

      Ключевые слова

      03 Метаболический синдром 03

      Окислительный стресс

      Активные формы кислорода

      Антиоксиданты, нацеленные на митохондрии

      Сердечно-сосудистые заболевания

      Предиабет

      Диабет 2 типа

      Ожирение

      Рекомендуемые статьи Цитирующие статьи (0)

      © 2016 Elsevier B.V.

      Рекомендуемые статьи

      Ссылки на статьи

      Раки | Бесплатный полнотекстовый | Изменения протеома и фосфопротеома, связанные с прогнозом при остром миелоидном лейкозе

      1. Введение

      Острый миелоидный лейкоз (AML) является агрессивным и гетерогенным злокачественным новообразованием, двумя основными подгруппами которого являются острый промиелоцитарный лейкоз (APL) и гетерогенная группа не-APL AML [ 1,2]. Вариант APL характеризуется характерной клинической картиной, специфическими цитогенетическими аномалиями, лечением, отличным от других вариантов, отличных от APL, и благоприятным прогнозом [3].В этой статье мы будем использовать термин AML для обозначения вариантов заболевания, не относящихся к APL, и эти варианты также весьма неоднородны в отношении генетических аномалий и прогноза (то есть выживаемости без рецидивов) со средним возрастом на тот момент. первого диагноза 65–70 лет [4]. Несмотря на гетерогенность вариантов, не относящихся к APL, этих пациентов лечат в соответствии с одними и теми же руководящими принципами, как в отношении интенсивного, так и потенциально лечебного лечения (возможно, включая трансплантацию стволовых клеток) для молодых и подходящих подгрупп пациентов, а также в отношении менее интенсивной стабилизации лейкемии. лечение пожилых людей (т.например, старше 70–74 лет) или непригодных пациентов [4,5,6]. Большинство пациентов, получающих интенсивное лечение против AML, достигают первоначального контроля заболевания (т.е. полной гематологической ремиссии), но основная причина смерти связана с первичной резистентностью и химиорезистентным рецидивом лейкемии во время или после химиотерапии [4,5,7]. Таким образом, общая долгосрочная выживаемость без AML, даже для молодых и здоровых пациентов с AML, составляет только около 50% [8]. Таким образом, существует потребность в улучшении прогностической классификации и терапевтических стратегий как для более молодых пациентов, получающих интенсивную терапию, так и для подавляющего большинства пожилых или непригодных пациентов, получающих терапию, стабилизирующую лейкоз.Несмотря на то, что предыдущие исследования выявили связь между прогнозом и статусом фосфорилирования выбранных внутриклеточных медиаторов [9,10], только цитогенетические аномалии и субмикроскопические мутации определенных генов (например, в CEBPA, FLT3, NPM1 и TP53) включены в рутинный прогноз. оценка и адаптированное к риску лечение пациентов с ОМЛ процедурами [8,11,12,13,14,15]. Однако лежащие в основе детерминанты рецидива ОМЛ остаются неуловимыми, поскольку большинство случаев поздних рецидивов связаны с нормальным кариотипом или с отсутствием типичных цитогенетических аномалий, наблюдаемых при ОМЛ, связанном с терапией [16,17].Мутации в NPM1 и сигнальных генах, таких как NRAS, KIT и PTPN11, часто наблюдаются при постановке диагноза, но реже при рецидиве [18,19]. Однако FLT3-ITD и мутации в WT1, KDM6A и RUNX1 часто обнаруживаются при рецидивах [8,20]. Хотя эпигенетическая регуляция может быть необходима для развития рецидива, регуляторы метилирования ДНК и ремоделирования хроматина, а также модификаторы гистонов демонстрируют различные эволюционные паттерны от диагноза до стадии рецидива [21]. Отдельная продольная геномная характеристика показала, что у 80% пациентов лейкемический клон-основатель пережил химиотерапию и стал причиной позднего рецидива [22].Протеомика или фосфопротеомика на основе тандемной масс-спектрометрии (ЖХ-МС / МС) использовалась для подклассификации пациентов с вариантами ОМЛ, не относящимися к APL [23,24,25], и для изучения белков, выделяемых устойчивыми к апоптозу и чувствительные первичные клетки AML [26]. Замечательные достижения в технологии масс-спектрометрии за последние десятилетия предоставили оборудование с оптимизированным разрешением, что позволяет определять характеристики посттрансляционных модификаций (PTM) с высоким охватом.Так, прогнозируемые маркеры фосфорилирования для лечения ОМЛ ингибитором FLT3 кизартинибом, описание фосфотирозин-протеома, тирозин-кинома и тирозин-фосфатома при ОМЛ и идентификация детерминант чувствительности клеток ОМЛ к ингибиторам киназ были недавно описаны [ 27,28,29]. Ранее мы показали, что смесь super-SILAC (метка стабильного изотопа с аминокислотами в культуре клеток), основанная на пяти клеточных линиях AML, является надежным эталоном для количественных протеомных исследований клеток пациентов с AML [30].Вместе с оптимизированными протоколами подготовки образцов и обогащения фосфопептидов наши рабочие процессы протеомики оказались полезными для изучения биомаркеров прогноза и ответа на лечение при ОМЛ [31,32,33].

      В настоящем популяционном исследовании, чтобы идентифицировать промоторы рецидива при постановке диагноза, мы сравнили профили протеома и фосфопротеома клеток AML до лечения, собранные во время постановки диагноза у пациентов, которые впоследствии стали выжившими в течение длительного периода времени без лейкемии (по крайней мере, 5 лет жизни без AML), или у него было первично-резистентное заболевание, или у него был химиорезистентный рецидив после завершения запланированной интенсивной терапии.Основываясь на протеомном и фосфопротеомическом анализе этих двух групп, мы обнаружили общие знаменатели в образцах до лечения, такие как процессинг РНК и белки V-АТФазы, которые должны быть дополнительно исследованы как потенциальные прогностические биомаркеры или возможные терапевтические мишени.

      3. Обсуждение

      Химиорезистентная болезнь (т.е. первичная резистентность или химиорезистентный рецидив) является основной причиной смерти при ОМЛ [8]. В этом исследовании мы сравнили протеомные профили во время первого диагноза для пациентов с более поздним рецидивом и пациентов без рецидива лейкемии, после периода наблюдения не менее пяти лет после начальной интенсивной и потенциально лечебной индукционной и консолидирующей терапии.

      Многие из статистически значимых протеомных различий между пациентами с и без рецидива лейкемии были относительно небольшими, и по этой причине мы сосредоточили внимание не только на статистически значимых различиях отдельных белков, но также на протеомных / фосфопротеомных профилях и сходстве биологических функций для группы различных белков. Однако мы хотим подчеркнуть, что биологическое значение наблюдаемых протеомных различий может быть доказано только дополнительным эмпирическим тестированием.Более того, наше настоящее исследование следует рассматривать как популяционное; Связанная с лечением смертность или заболеваемость не влияют на наши результаты, потому что мы исключили тех пациентов, которые умерли или не смогли завершить запланированное интенсивное лечение из-за тяжелой связанной с лечением токсичности.

      Следовательно, необходимо подробное методологическое обсуждение, чтобы гарантировать правильную и тщательную интерпретацию наших результатов. В наше исследование были включены пациенты с относительно высоким процентом бластов ОМЛ среди циркулирующих лейкоцитов.Этот отбор был необходим для получения высокообогащенных популяций клеток AML путем простого и стандартизированного градиентного разделения. Эта стратегия была выбрана потому, что более обширные процедуры разделения клеток могут изменить молекулярные профили клеток AML. Возможные последствия этих изменений подробно обсуждались ранее [54,55]. Во-первых, мы ранее сравнивали характеристики пациентов, отобранных в соответствии с этими критериями (соответствующих примерно половине последовательных пациентов), с другими пациентами без высоких показателей бластов периферической крови в течение определенного периода времени, и мы не смогли обнаружить каких-либо значительных различий с относительно кариотипа или мутаций FLT3 [56].Во-вторых, в предыдущем исследовании с участием 71 пациента, отобранного в соответствии с этими критериями, мы наблюдали ожидаемую частоту различных субмикроскопических мутаций в 54 генах, часто мутирующих в AML [12,13,14,34], что также признано в нашей нынешней когорте пациентов. (Таблица S1). Наконец, две наши подгруппы пациентов с рецидивом и без рецидива после завершения интенсивной терапии определяются очень простыми критериями, а время наблюдения, используемое для определения пациентов без рецидива, велико. Таким образом, наша популяционная когорта пациентов не отличается от других более крупных когорт пациентов с ОМЛ в отношении кариотипов и частот субмикроскопических мутаций, а две подгруппы пациентов определяются с помощью простых критериев, основанных на химиочувствительности in vivo.Более того, недавно было показано, что связь между протеомными паттернами и клиническими показателями, такими как генетические мутации и цитогенетика, при ОМЛ ограничена, что позволяет предположить, что протеомные сигнатуры являются независимыми прогностическими факторами [57]. Следовательно, дальнейший стратификационный анализ образцов AML на основе их классификации FAB или генетических мутаций может не предоставить дополнительной прогностической информации. Уровень бластов периферической крови может иметь неблагоприятное прогностическое влияние на пациентов с AML, получающих интенсивную химиотерапию, хотя это влияние очень слабое по сравнению с кариотип и генетические аномалии [58].В предыдущем клиническом исследовании HOVON / Sakk лейкоцитоз, превышающий 2 × 10 9 / л, рассматривался как фактор риска для пациентов с t (8; 21) [59], но это не могло быть подтверждено в недавнем отдельном исследовании [ 60]. Более того, самые последние руководящие принципы ELN также не рекомендуют использовать подсчет бластов периферической крови для прогностической оценки пациентов с AML [8]. Несмотря на сходство генетических аномалий, можно поэтому утверждать, что мы изучали группу пациентов с повышенной химиорезистентностью по сравнению с ОМЛ в целом, а не только пациентов с высоким числом бластов крови.Недавние исследования также предполагают, что количество лейкоцитов может иметь прогностическое влияние, но только в небольшой группе пациентов с количеством лейкоцитов, превышающим 50 или даже 100 × 10 9 / л [59,61,62]. Только у шести из 41 нашего пациента количество лейкоцитов превышало 100 × 10 9 / л, а у большинства пациентов количество лейкоцитов было ниже 50 × 10 9 / л. Таким образом, мы не можем исключить, что наблюдения в нашем настоящем исследовании химиотерапии in vivo репрезентативны только для пациентов с циркулирующими бластами AML, но наш выбор пациентов с высоким процентом циркулирующих бластов, вероятно, представляет лишь незначительное отличие от AML в целом в отношении химиочувствительность in vivo.Наше протеомное и фосфопротеомное исследование было основано на периферической крови, а не на клетках костного мозга, хотя ОМЛ по определению является заболеванием костного мозга [2], но по нескольким причинам мы считаем актуальными клетки периферической крови. Во-первых, проточно-цитометрические исследования молекулярных профилей выявили лишь ограниченные количественные, но не качественные различия между периферической кровью и клетками костного мозга одних и тех же пациентов [63]. Недавно было обнаружено, что протеомное профилирование на основе обращенно-фазового набора белков (RPPA) образцов крови AML сходно с таковым для образцов костного мозга [57].Во-вторых, фундаментальные генетические аномалии, связанные с ОМЛ, также обнаруживаются в клетках периферической крови. В-третьих, клетки периферической крови также имеют иерархическую организацию и включают клетки, способные к длительной пролиферации in vitro (например, лейкемические стволовые клетки) [64], и функциональное сравнение клеток AML крови и костного мозга от одного и того же пациента также предполагает, что они демонстрируют относительно небольшие различия [65]. Наконец, определение, используемое для большинства пациентов для диагностики ОМЛ, — это обнаружение не менее 20% бластов в костном мозге [2].Следовательно, для получения высокообогащенных популяций клеток костного мозга AML могут потребоваться более обширные процедуры разделения клеток, и такие процедуры разделения могут затем изменить характеристики клеток [55]. Последний методологический вопрос — использование криоконсервированных тотальных популяций клеток AML для наших исследований. Хотя ожидается, что криоконсервация и оттаивание повлияют на протеомные и фосфопротеомные профили в клетках ОМЛ, наши предыдущие методологические исследования со сравнением парных (т.е., оба образца получены от одного и того же пациента) криоконсервированные и свежие образцы клеток AML предполагают, что это влияние ограничено [31]. Все образцы в нашем исследовании были криоконсервированы с использованием той же стандартизированной методики и без какой-либо разницы во времени хранения между нашими двумя подгруппами пациентов. Кроме того, как наше настоящее исследование химиотерапии in vivo, так и несколько предыдущих исследований пациентов продемонстрировали, что биологические характеристики всей иерархической популяции клеток AML отражают риск рецидива (т.е., химиочувствительность), как в отношении генетических аномалий, так и в отношении конститутивного высвобождения цитокинов in vitro, профилей глобальной экспрессии генов и генов стволовых клеток, эпигенетических характеристик и активации внутриклеточного пути [12,13,14,66,67,68,69 , 70,71,72]. Таким образом, хотя лейкозные стволовые клетки считаются ответственными за рецидив ОМЛ [73], биологические характеристики, связанные с риском рецидива, также отражаются в общей популяции клеток ОМЛ. Несмотря на неоднородность пациентов, наблюдались значительные общие различия на уровне протеома и фосфопротеома для нескольких биологических процессов между клетками AML от пациентов RELAPSE и REL_FREE, собранными во время постановки диагноза.В частности, белки, участвующие в биогенезе рибосом и процессинге / регуляции рРНК, были более многочисленными и более сильно фосфорилировались в клетках пациентов с RELAPSE. Этот вывод о повышении регуляции процессинга рРНК был подтвержден анализом данных ChIP-seq из клеточной линии K562, где мы обнаружили несколько факторов транскрипции, способствующих транскрипции генов РНК-полимеразы (CEBPZ) и рибосомного / рибосомного биогенеза (PML, AFF1, ETV6 и TRIM28). Дерегулированные белки, связывающие РНК, и биогенез рибосом могут быть драйверами патогенеза рака [74,75].Кроме того, анализ GSEA выявил обогащение мишеней MYC у пациентов с RELAPSE. MYC часто сверхэкспрессируется при AML, а также при других лейкозных злокачественных новообразованиях и, по-видимому, является решающим фактором транскрипции во время гематопоэза [76,77]. MYC также является регулятором биогенеза рибосом [78], активирует РНК pol I для транскрипции рДНК [79] и индуцирует экспрессию мяРНК [80]. Поскольку мишени MYC обогащаются во время рецидива, наши результаты показывают, что MYC вместе с белками, участвующими в процессинге рРНК и биогенезе рибосом, являются прогностическими биомаркерами рецидива и потенциальными терапевтическими мишенями при AML.Несколько лекарств, нацеленных на синтез, транскрипцию или процессинг рРНК при гематологическом раке, уже были описаны [81,82]. Мы наблюдали повышенное содержание субъединиц V-АТФазы у пациентов с REL_FREE. Комплекс V-ATPase может модулировать несколько внутриклеточных сигнальных путей, имеющих важное значение для AML (таких как PI3K-mTOR [83,84], NOTCh2 [85] и WNT [86]), контролируя подкисление внутриклеточных компартментов. V-АТФаза также важна для аутофагии [87]. Два предыдущих исследования описали связь между низкой экспрессией на уровне мРНК отдельных регуляторов аутофагии и неблагоприятным прогнозом.Во-первых, BECN1 важен для инициации и развития аутофагии, а снижение уровней мРНК BECN1 было связано с неблагоприятным прогнозом, FLT3-ITD, моносомным кариотипом и пожилым возрастом [88]. Во-вторых, снижение экспрессии мРНК BECN1 также связано с неблагоприятным прогнозом [89]. Таким образом, наши настоящие исследования показывают, что профиль экспрессии медиаторов, участвующих в аутофагии, связан с прогнозом при ОМЛ человека, и, насколько нам известно, наше настоящее исследование является первым, которое описывает это для нескольких медиаторов и на уровне белка.При тестировании действия ингибитора V-АТФазы на клетки AML мы наблюдали, что клетки, полученные из RELAPSE, с изначально низким содержанием субъединиц V-АТФазы лучше реагировали на ингибитор BafA1 V-АТФазы, таким образом, потенциальная взаимосвязь между низкой начальной субъединицей V-АТФазы Изобилие и химиорезистентность нуждаются в дальнейшей оценке. V-АТФаза рассматривается как потенциальная терапевтическая мишень при AML [90]. Роль аутофагии при ОМЛ сложна. Аутофагия часто снижается в человеческих клетках AML, а потеря ключевых генов аутофагии приводит к инициации и прогрессированию лейкемии на моделях мышей [91].С другой стороны, аутофагия, по-видимому, важна для защиты выживания клеток AML, и воздействие на лейкемические клетки противолейкемических препаратов (например, цитарабина, антрациклинов и сорафениба), по-видимому, активирует и увеличивает аутофагический поток, тем самым позволяя им сопротивляться химиотерапии. [92,93,94,95]. Эти разные роли предполагают, что эффект терапевтического воздействия на аутофагию у человека с ОМЛ будет различаться у разных пациентов, и это также согласуется с нашими настоящими данными. У пациентов с REL_FREE был повышен уровень регулируемого транспорта железа и белков везикул.В независимом исследовании у пациентов с ОМЛ с высоким конститутивным высвобождением цитокинов была выявлена ​​повышенная экспрессия мРНК белков, участвующих во внутриклеточном гомеостазе железа и молекулярном транспорте [66]. Интересно, что общая выживаемость после интенсивной химиотерапии была значительно выше для пациентов с высоким высвобождением по сравнению с пациентами с ОМЛ с низким высвобождением. Эти результаты обеспечили уверенность и внутреннюю валидацию нашего подхода. Выравнивание последовательностей, окружающих сайты фосфорилирования, и анализ KSEA нашего полного набора данных фосфопротеомики показали обогащение фосфорилированных субстратных групп киназ MAPK, CSK2, CDK, PAK, PRKC и AKT.Мы дополнительно наблюдали, что клетки RELAPSE имели более высокую активность CDK2 и более высокую экспрессию на основе анализов иммуноблоттинга по сравнению с клетками REL_FREE. Как аналогично продемонстрировано ранее, KSEA данных фосфопротеома клеток, полученных из AML от 20 пациентов, имел аналогичное обогащение киназ CSK2, CDK, PAK, AKT, ABL, SRC, MAPK, PRKA и PRKC по сравнению с нормальным стволом периферической крови CD34 + клетки от пяти здоровых доноров [45]. Таким образом, два независимых исследования фосфопротеомики на разных когортах пациентов с ОМЛ выявили аналогичные наборы повышающих регуляцию киназ при ОМЛ.Ингибитор CSK2 CX-4945 оказывал более сильное антипролиферативное действие на клетки REL_FREE, чем на клетки RELAPSE, когда действовал отдельно или в комбинации с ингибиторами CDK. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы определить, обязаны ли клетки RELAPSE своей более высокой устойчивостью к ингибитору CSK2 в целом повышенной устойчивостью или более низким оборотом CSK2-опосредованного фосфорилирования. Комплексный анализ KSEA, логотипов последовательностей и блоттинга антител показывает, что CSK2 и CDK могут быть предложены в качестве сильных промоторов RELAPSE.CSK2, в частности, является ключевым регулятором нескольких сигнальных сетей и сверхэкспрессируется при многих гематологических раках [96]. Активность CDK2 (и, возможно, также CDK4, CDK6, CDK7 и CDK9) у пациентов с RELAPSE может дополнительно увеличивать пролиферацию клеток AML, запуская G1-S-фазовые переходы [97]. Некоторые фосфопротеины были мультифосфорилированы, как BCL11A, с активацией нескольких фосфозитов в группе RELAPSE (S205, T208, S608, S625, S630 и S718). BCL11A, фактор транскрипции, связанный с комплексом ремоделирования хроматина BAF SWI / SNF, может играть роль в лейкемогенезе [98], а его экспрессия связана с неблагоприятным исходом при AML [99].В предыдущем исследовании фосфопротеомики с участием пациентов с ОМЛ, получавших ингибитор FLT3 кизартиниб, повышенное фосфорилирование BCL11A S630 было связано с отсутствием реакции [27]. Взятые вместе, эти результаты предполагают, что фосфорилирование BCL11A способствует химиорезистентности при ОМЛ. TP53BP1, другой мультифосфорилированный белок у пациентов с RELAPSE, представляет собой белок репарации двухцепочечных разрывов ДНК, который фосфорилируется в нескольких местах в ответ на повреждение ДНК. Более того, фосфорилирование S1219 киназой ATM, по-видимому, является ответом на ионизирующее излучение [100].Мотив S523Q может также служить субстратом для киназы ATM и быть частью RIF1, негомологичного белка репарации, опосредованного соединением концов, процесса рекрутирования в сайты разрывов ДНК [101]. Стимулирующие фосфозиты T190 и T191 в петле активации NEK7 показали повышенное фосфорилирование у пациентов с REL_FREE. NEK7, по-видимому, участвует в рекрутировании центросомных перицентриолярных белков, которые необходимы для дупликации центриолей и образования полюсов веретена во время митозов [102]. Хромосомное отставание, образование микроядер, нарушение цитокинеза и тетраплоидия / анеуплоидия наблюдались в эмбриональных фибробластах мышей с дефицитом NEK7 [103].Следовательно, нарушение регуляции активности NEK7 в процессах клеточного деления может вносить вклад в аберрантный митоз и индукцию статуса рецидива [104]. Кроме того, мы обнаружили два фосфозита, S372 и S389, в изоформе 2 рибосомной S6-киназы RPS6KA1 (идентификатор Uniprot: Q15418-2), активированная у пациентов с REL_FREE. Сообщалось, что фосфорилирование S372 и S389, возможно, с помощью активаторов PRKC, включает N-концевой домен киназы RPS6KA1, необходимый для фосфорилирования его субстратов [105].Роль рибосомных киназ S6 в развитии рака недостаточно изучена и, по-видимому, зависит от типа рака. В то время как некоторые изоформы рибосомных киназ S6 могут способствовать клеточной подвижности и процессам инвазии путем изменения транскрипции и активности интегрина, другие подавляют их, взаимодействуя с актиновым цитоскелетом [106]. Тот факт, что фосфозиты RPS6KA1 могут фосфорилироваться с помощью NEK7 [104], а не с помощью MTOR, может объяснять преимущества более высокого фосфорилирования мембран, актиновых филаментов и белков соединения клеточных адгезий в группе REL_FREE.Наши результаты стимулируют функциональные исследования для понимания роли киназ NEK7, PRKC и RPS6KA1 в цитоскелете клеток AML. Наконец, хотя временные интервалы для определения раннего или позднего рецидива являются спорными [41, 42], мы подклассифицировали 26 РЕЛАПСОВ на 14 пациентов с ранним и 12 поздним рецидивом после того, как установили 12 месяцев от постановки диагноза до рецидива в качестве отметки времени для дифференциации. две группы. Наши результаты показали, что процессинг рРНК и кластеры V-АТФазы (идентифицированные, когда были включены все 26 пациентов с РЕЛАПСОМ) в основном описывали протеомный ландшафт при диагностике как для раннего возобновления, так и для группы RELAPSE.Подмножества REL_FREE и LATE RELAPSE vs. REL_FREE. Таким образом, протеом AML при постановке диагноза для пациентов с ранним или поздним рецидивом, по-видимому, не претерпевает значительных изменений. Напротив, различные ландшафты фосфопротеома AML на момент постановки диагноза, описанные в подгруппах RELAPSE и REL_FREE, RELAPSE и REL_FREE, по-видимому, зависят от времени без рецидивов у пациентов с RELAPSE. Наши результаты с учетом всех 26 пациентов RELAPSE важны для принятия решения о терапии при постановке диагноза. Тем не менее, дальнейшие исследования с диагностическими и рецидивирующими образцами при ранних и поздних рецидивирующих эпизодах могут лучше описать роль различных детерминант рецидива ОМЛ.

      офисов | Компания | Semtech Corporation

      Бангалор, Индия
      Semtech Advanced Systems India Private Limited
      No. 99 & No. 100,
      Prestige Towers, 9th Floor,
      Residency Road, Shanthala Nagar,
      Bengaluru, Karnataka 560025,
      India