Расторжение трудового договора по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ.
Особенности расторжения трудового договора в связи с совершением виновных действий работником, непосредственно обслуживающим денежные или товарные ценности, если эти действия дают основание для утраты доверия к нему со стороны работодателя, урегулированы п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ.
Трудовой договор может быть расторгнут в связи с совершением виновных действий работником, непосредственно обслуживающим денежные или товарные ценности, если эти действия дают основание для утраты доверия к нему со стороны работодателя.
По пункту 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ основанием увольнения может быть совершение виновных действий работником, который непосредственно обслуживает денежные или товарные ценности. При этом расторжение трудового договора с работником по данному основанию возможно, если действия работника дают основание для утраты доверия к нему со стороны работодателя. При увольнении в связи с утратой доверия трудовой договор может быть расторгнут только с работниками, непосредственно обслуживающими денежные или товарные ценности, совершившими виновные действия, которые дают работодателю основание для утраты доверия к таким работникам.
В пункте 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ указано, что по данному основанию могут быть уволены работники, непосредственно обслуживающие денежные или товарные ценности. С такими работниками обычно заключаются договоры о материальной ответственности.
Постановлением Министерства труда и социального развития РФ от 31 декабря 2002 г. N 85 “Об утверждении Перечней должностей и работ, замещаемых или выполняемых работниками, с которыми работодатель может заключать письменные договоры о полной индивидуальной или коллективной (бригадной) материальной ответственности, а также типовых форм договоров о полной материальной ответственности” определяется круг лиц, с которыми может быть заключен договор о материальной ответственности. В приложении 1 к указанному Постановлению приведен Перечень должностей и работ, замещаемых или выполняемых работниками, с которыми работодатель может заключать договоры о материальной ответственности, и расширительному толкованию он не подлежит. Данный Перечень состоит из двух разделов. В первый включены соответствующие должности, а во второй – работы.
При расторжении трудового договора по основанию, предусмотренному п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ, не имеет значения, в каких размерах на работников могла быть возложена материальная ответственность за ущерб, причиненный работодателю. Тем не менее утрата доверия должна быть обоснована конкретными фактами совершения работниками виновных действий.
Причинами для утраты доверия могут служить использование работником вверенного ему для непосредственного обслуживания имущества в личных целях, получение оплаты за услуги без получения документов, обмеривание, обвешивание, обсчет, недостача, хищение, нарушение правил торговли и другие значимые обстоятельства.
Утрата доверия должна основываться на объективных доказательствах вины работника в совершении незаконных действий или причинении организации материального ущерба.
Например, если в организации работодателя розничной торговли продавцы часто забывают выдавать чеки покупателям, то с учетом сложившейся судебной практики работодателю необходимо будет доказывать суду, почему невыдача кассового чека конкретным продавцом послужила основанием для утраты к нему доверия.
В случае, когда вина работника в совершении действий, которые дают основания для утраты доверия, не доказана, то работник не может быть уволен по данному основанию, несмотря на возникновение недостачи, порчи ценностей и др.
Основание для утраты доверия к работнику может быть поводом к увольнению как в случаях, когда это нарушение было однократным, так и в случаях, когда нарушения носили систематический характер.
Работодателем при применении данного основания расторжения трудового договора должны быть учтены некоторые юридически значимые обстоятельства. Так, работник может возместить работодателю причиненные по его вине убытки. Убытков, причиненных работодателю, может и не быть при совершении работником виновных действий по обслуживанию имущества не по месту работы. Работник может также отказаться от возмещения убытков, причиненных работодателю. Такие обстоятельства следует учитывать при применении данного основания увольнения.
Исходя из применения принципа процессуальной аналогии, непризнание увольнения по данному основанию дисциплинарным взысканием при совершении указанных действий вне места работы не освобождает от обязанности учета указанных обстоятельств.
Указанные обстоятельства, которые имеют соответствующее значение для применения увольнения по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ, должны подтверждаться относимыми, допустимыми, достоверными и достаточными доказательствами, которые должны быть получены в установленном законодательством порядке. Такие доказательства не могут быть получены без объяснений работника, совершившего виновные действия, которые дают основание для утраты к нему доверия. В связи с этим должен быть соблюден установленный для применения дисциплинарных взысканий порядок доказывания совершенного работником нарушения.
27/05/2016
О порядке увольнения работника в связи с утратой доверия за невыполнение работником требований, установленных Федеральным законом от 25.12.2008 № 273-ФЗ «О противодействии коррупции»
О порядке увольнения работника в связи с утратой доверия за невыполнение работником требований, установленных Федеральным законом от 25.12.2008 № 273-ФЗ «О противодействии коррупции»
Опубликовано: 15.05.2018
Просмотров: 2019
За невыполнение работником требований (нарушение запретов), установленных Федеральным законом от 25.12.2008 № 273-ФЗ, трудовой договор может быть расторгнут по инициативе работодателя в связи с утратой доверия по п. 7.1 ч. 1 ст. 81 Трудового кодекса РФ (далее – ТК РФ). Указанное положение применяется в случаях:
1) непринятия работником мер по предотвращению или урегулированию конфликта интересов, стороной которого он является;
2) непредставления либо представления неполных или недостоверных сведений о доходах, расходах, имуществе и обязательствах имущественного характера (своих, супруга (супруги), несовершеннолетних детей).
Категории работников, трудовой договор с которыми подлежит расторжению по п. 7.1 ч. 1 ст. 81 ТК РФ, определены Федеральным законом от 25.12.2008 № 273-ФЗ.
Кроме того, трудовой договор с работниками, занимающими определенные должности, может быть расторгнут по инициативе работодателя в соответствии с п. 7.1 ч. 1 ст. 81 ТК РФ, если они (их супруги, несовершеннолетние дети):
— имеют счета (вклады) в иностранных банках, расположенных за пределами РФ;
— хранят наличные денежные средства и ценности в иностранных банках, расположенных за пределами РФ;
— владеют и (или) пользуются иностранными финансовыми инструментами.
Согласно ст. 13.1 Федерального закона от 25.12.2008 N 273-ФЗ лицо, замещающее государственную должность субъекта Российской Федерации, муниципальную должность, в порядке, предусмотренном федеральными конституционными законами, федеральными законами, законами субъектов Российской Федерации, муниципальными нормативными правовыми актами, подлежит увольнению (освобождению от должности) в связи с утратой доверия помимо вышеперечисленных оснований еще и в случае:
— участия лица на платной основе в деятельности органа управления коммерческой организации, за исключением случаев, установленных федеральным законом;
— осуществления лицом предпринимательской деятельности;
— вхождения лица в состав органов управления, попечительских или наблюдательных советов, иных органов иностранных некоммерческих неправительственных организаций и действующих на территории Российской Федерации их структурных подразделений, если иное не предусмотрено международным договором Российской Федерации или законодательством Российской Федерации.
С 01.01.2018 сведения о лицах, уволенных в связи с утратой доверия, подлежат включению в специальный реестр (ч. 7 ст. 81 ТК РФ, ст. ст. 13.2, 15 Федерального закона от 25.12.2008 N 273-ФЗ). Он размещен в открытом доступе на портале госслужбы в соответствующем разделе (http://gossluzhba.gov.ru/reestr). Это следует из п. 22 Положения о реестре лиц, уволенных в связи с утратой доверия, утвержденного Постановлением Правительства РФ от 05.03.2018 N 228.
Заместитель прокурора города И.С. Волошина
Белогорск, Амурская область
Увольнение по статье 81 пункт 7, ст 81 п 7
Трудовой договор может быть расторгнут работодателем в случаях: совершения виновных действий работником, непосредственно обслуживающим денежные или товарные ценности, если эти действия дают основание для утраты доверия к нему со стороны работодателя — п. 7 ч.1 ст. 81 ТК РФ
Разъяснения Верховного Суда РФ
об увольнении за утрату доверия
Судам необходимо иметь в виду, что расторжение трудового договора с работником по пункту 7 части первой статьи 81 Кодекса в связи с утратой доверия возможно только в отношении работников, непосредственно обслуживающих денежные или товарные ценности (прием, хранение, транспортировка, распределение и т.п.), и при условии, что ими совершены такие виновные действия, которые давали работодателю основание для утраты довериям к ним.
При установлении в предусмотренном законом порядке факта совершения хищения, взяточничества и иных корыстных правонарушений эти работники могут быть уволены по основанию утраты к ним доверия и в том случае, когда указанные действия не связаны с их работой.
Если виновные действия, дающие основание для утраты доверия, либо аморальный проступок совершены работником по месту работы и в связи с исполнением им трудовых обязанностей, то такой работник может быть уволен с работы (соответственно по пункту 7 или 8 части первой статьи 81 ТК РФ) при условии соблюдения порядка применения дисциплинарных взысканий, установленного статьей 193 Кодекса.
Если же виновные действия, дающие основания для утраты доверия, либо соответственно аморальный проступок совершены работником вне места работы или по месту работы, но не в связи с исполнением им трудовых обязанностей, то трудовой договор также может быть расторгнут с ним по пункту 7 или пункту 8 части первой статьи 81 ТК РФ, но не позднее одного года со дня обнаружения проступка работодателем (часть пятая статьи 81 ТК РФ).
Приведенные разъяснения содержатся в п.п. 45-47 Постановление Пленума Верховного Суда РФ от 17.03.2004 N 2 «О применении судами Российской Федерации Трудового кодекса Российской Федерации»).
Судебная практика судов общей юрисдикции
по делам об увольнении за утрату доверия
1. Увольнение признано судом незаконным, так как недостача вверенных истицам материальных ценностей в магазине, послужившая поводом к их увольнению, была установлена после прекращения с ними трудовых договоров, предусмотренный законом порядок привлечения работников к дисциплинарной ответственности работодателем не соблюден
Истцы обратились в суд с иском к ОАО о признании увольнения по п. 7 ст. 81 ТК РФ незаконным.
Решением суда постановлено признать увольнение истцов по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ незаконным, обязать ОАО изменить формулировку увольнения на увольнение по собственному желанию, взыскать с ОАО заработную плату и компенсацию за неиспользованный отпуск, компенсацию морального вреда.
Суд указал, что истицы относятся к категории лиц, указанных в п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ – непосредственно обслуживающие денежные и товарные ценности при совершении виновных действий которыми, если эти действия дают основание для утраты доверия к ним со стороны работодателя, могут быть уволены.
Вместе с тем, как указал суд, недостача вверенных истицам материальных ценностей в магазине, послужившая поводом к их увольнению, была установлена после прекращения с ними трудовых договоров. Приказ был доведен до сведения после того, как трудовой договор был прекращен. Перед изданием приказов об увольнении у истиц в соответствии с требованиями ст. 193 ч.1 ТК РФ до применения дисциплинарного взыскания работодателем не были затребованы письменные объяснения (Кассационное определение Мурманского областного суда от 30 июня 2010 года).
2. Сам по себе факт недостачи и наличие договора между работодателем и работниками о бригадной материальной ответственности не является достаточным основанием для увольнения истиц по пункту 7 части 1 статьи 81 Трудового кодекса РФ. Такой договор является основанием для привлечения работников членов бригады к полной материальной ответственности в связи с выявленными недостачами, однако, он не является основанием для утверждения о наличии вины конкретного работника в образовании такой недостачи, пока не доказано обратное
Истцы работали в Обществе в качестве продавца-кассира, между работниками и работодателем заключён договор о коллективной материальной ответственности. В магазине ответчика были произведены ревизии, по итогам которых выявлена крупная денежная недостача. Истцы отстранены от работы, а позднее их ознакомили с приказом о расторжении трудового договора по пункту 7 части 1 статьи 81 Трудового кодекса РФ.
Судом изменена формулировка увольнения К. и Н. с увольнения в связи с утратой доверия по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ на увольнение по собственному желанию по пп. 3 п. 1 ст. 77 ТК РФ. Взыскана с ответчика заработная плата и компенсация морального вреда.
Указано, что договор о бригадной материальной ответственности, по сути, свидетельствует о договоренности членов бригады отвечать друг за друга, и в случае выявления недостачи отвечать перед работодателем всей бригадой, таким образом, он является основанием для привлечения работников членов бригады к полной материальной ответственности в связи с выявленными недостачами, однако, он не является основанием для утверждения о наличии вины конкретного работника в образовании такой недостачи, пока не доказано обратное (Кассационное определение Верховного Суда Республики Карелия от 20 апреля 2010 года, по делу № 33-1120/2010).
3. Увольнение по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ, то есть в связи с утратой доверия, возможно только в отношении работников, непосредственно обслуживающих денежные или товарные ценности и при условии, что ими совершены такие виновные действия, которые давали работодателю основание для утраты доверия к ним
Увольнение по указанному основанию, то есть в связи с утратой доверия, возможно только в отношении работников, непосредственно обслуживающих денежные или товарные ценности (прием, хранение, транспортировка, распределение и т.п.), и при условии, что ими совершены такие виновные действия, которые давали работодателю основание для утраты доверия к ним.
Как установлено судом, подтверждено представленными по делу доказательствами и не оспаривается ответчиком в кассационной жалобе, занимаемая истцом должность не была связана с обслуживанием денежных средств или товарных ценностей, а носила административный характер в области регулирования деятельности участка СТО, при этом договор о полной материальной ответственности между ООО «ЕС Сервис Центр» и С. не заключался. Таким образом, обстоятельства, изложенные в акте, не могли являться основанием для увольнения истца по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ (см. Кассационное определение Санкт-Петербургского городского суда от 16 марта 2011 г. N 33-3629/2011).
4. Суд правомерно указал в решении, что наложение на истиц дисциплинарных взысканий произведено с грубым нарушением порядка, предусмотренного трудовым законодательством. Письменного объяснения по факту выявленной недостачи товарно-материальных ценностей до применения дисциплинарных взысканий в виде увольнения работодателем затребовано не было. Данное обстоятельство явилось основанием к признанию увольнения незаконным
П. и К. относились к работникам, непосредственно обслуживающих денежные или товарные ценности, и согласно заключенным договорам являлись материально ответственными лицами за необеспечение сохранности товара, вверенного им для хранения и других целей, поэтому могли быть уволены по мотивам утраты к ним доверия со стороны работодателя.
Непосредственным поводом к увольнению послужили виновные действия истиц, повлекших недостачу товарно-материальных ценностей в магазине. Факт выявления недостачи товарно-материальных ценностей установлен вступившим в законную силу решением мирового судьи. При таких данных суд правильно пришел к выводу о том, что факт недостачи давал работодателю основание выразить недоверие истицам и уволить их с работы по п.7 ч.1 ст. 81 ТК РФ с соблюдением порядка такого увольнения.
Между тем, в данном случае увольнение истиц было произведено работодателем с нарушением порядка применения дисциплинарных взысканий, установленного статьей 193 ТК РФ. Дисциплинарное взыскание, в том числе в виде увольнения, может быть применено к работнику после получения от него объяснений в письменной форме либо, если работник по истечении двух рабочих дней после затребования от него письменного объяснения, такого объяснения не представил, о чем был составлен соответствующий акт. Однако письменного объяснения по факту выявленной недостачи работодателем затребовано не было (Обобщение (обзор) практики рассмотрения районными судами Новгородской области дел по трудовым спорам за 2007 год).
5. Суд пришел к выводу о том, что истица не обслуживала денежные или иные ценности, не совершала виновных действий по присвоению товарно-материальных ценностей, вследствие чего увольнение по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ не основано на законе
Из журнала истица узнала, что уволена по п. 7 ст. 81 Трудового кодекса РФ за совершение виновных действий работником, непосредственно обслуживающим денежные или товарные ценности, если эти действия дают основание для утраты доверия к нему со стороны работодателя.
Судом требования удовлетворены. Из имеющегося в материалах дела постановления об отказе в возбуждении уголовного дела следует, что в возбуждении уголовного дела по ст. 160 УК РФ в отношении Л. отказано по п. 2 ч. 1 ст. 24 УПК РФ за отсутствием состава преступления. Таким образом, суд пришел к правильному выводу о том, что Л. не обслуживала денежные или иные ценности, не совершала виновных действий по присвоению товарно-материальных ценностей, вследствие чего увольнение Л. по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ не основано на законе.
Кроме того, работодателем нарушена процедур увольнения, предусмотренная статьей 81 ТК РФ о запрете на увольнение работника по инициативе работодателя в период его временной нетрудоспособности (Кассационное определение Омского областного суда от 1 сентября 2010 г. N 33-5288/10).
6. Суд удовлетворил иск о восстановлении на работе, указав, что в приказе об увольнении истицы отсутствуют ссылки на фактические обстоятельства, послужившие основанием для прекращения трудового договора с истицей, на доказательства наличия этих обстоятельств и на документы, свидетельствующие о соблюдении работодателем порядка увольнения
Истица обратилась в суд с иском о восстановлении на работе, взыскании заработка за время вынужденного прогула и компенсации морального вреда.
Удовлетворяя требования, суд исходил из того, что в приказе об увольнении отсутствуют ссылки на фактические обстоятельства, послужившие основанием для прекращения трудового договора с истицей, на доказательства наличия этих обстоятельств и на документы, свидетельствующие о соблюдении работодателем порядка увольнения. Ответчиком не представлено бесспорных доказательств, свидетельствующих о том, что за 2 рабочих дня до увольнения истицы приказами от нее было истребовано объяснение. Содержащиеся в приказах основания увольнения дублируют основания, указанные в другом приказе, следовательно, фактически истица была дважды привлечена к дисциплинарной ответственности за одно и то же нарушение, что противоречит ТК РФ. Суд также учел, что работодатель не учел тяжесть совершенного проступка и обстоятельства, при которых он был совершен (Определение Рязанского областного суда от 30 марта 2011 г. N 33-570).
7. Суд в решении сослался на обстоятельства, установленные ответчиком уже после увольнения истца, которые не были положены в основу увольнения истца. Суду при разрешении заявленных требований следовало установить обстоятельства и наличие либо отсутствие вины истца в образовании излишков бензина, необходимо было проверить доводы истца о том, что его не знакомили с должностными обязанностями заведующего нефтебазой
Л. обратился в суд с иском о восстановлении на работе к ЗАО, указав, что была проведена инвентаризация, которая выявила излишки бензина и дизельного топлива, а также недостачу дизельного масла. Ему объявили выговоры, а позже трудовой договор с ним был расторгнут по п. 5 ст. 81 ТК РФ в связи с систематическим неисполнением трудовых обязанностей. Позднее указанный приказ был изменен, и его увольнение было произведено по п. 7 ст. 81 ТК РФ в связи с утратой к нему доверия. Просил восстановить его на работе, взыскать заработную плату за время вынужденного прогула, компенсацию морального вреда, отменить приказы о наложении на него взысканий в виде выговоров.
Отменяя решение об отказе в иске, судебная коллегия указала, что суд в решении сослался на обстоятельства, установленные ответчиком уже после увольнения Л. Судом не установлены обстоятельства, при которых Л. был допущен значительный перерасход электроэнергии, вина истца в перерасходе электроэнергии. Суду следовало установить обстоятельства и наличие либо отсутствие вины истца.. При этом следовало учитывать, что за каждый дисциплинарный проступок может быть применено только одно дисциплинарное взыскание. Надлежало проверить доводы Л. о том, что с ним не заключался договор о полной материальной ответственности. Необходимо было проверить доводы Л. о том, что его не знакомили с должностными обязанностями заведующего нефтебазой (Извлечение из Определения Омского областного суда N 33-1248 от 7 апреля 2004 г.; Бюллетень судебной практики Омского областного суда № 1 (26), 2006).
8. Совершение работником виновных действий, повлекших образование недостачи товарно-материальных ценностей, является достаточным основанием для расторжения с ним трудового договора по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ. То обстоятельство, что по делу не был определен конкретный размер недостачи товарно-материальных ценностей, в данном случае для решения вопроса утраты доверия к истицам со стороны работодателя не имеет правового значения
С. и Г. работали в ООО в качестве продавцов павильона. Приказом директора ООО от 30 июля 2004 года Г. и С. были уволены по п. 7 ст. 81 ТК РФ по мотивам утраты доверия.
Считая увольнение с работы незаконными, С., Г. и С. обратились в суд с иском о признании увольнения незаконным, об изменении формулировки основания увольнения на увольнение по собственному желанию.
Решением суда в удовлетворении иска отказано по следующим основаниям.
Истицы как продавцы относились к работникам, непосредственно обслуживающих денежные и товарные ценности, поскольку их трудовая функция непосредственно связана с осуществлением приема, хранения, учета и распоряжения этих ценностей. Поэтому независимо от того обстоятельства, что с истицами не был заключен договор о материальной ответственности, они могли быть уволены по мотивам утраты к ним доверия со стороны работодателя.
Факт выявления в павильоне недостачи товарно-материальных ценностей, подтверждается актом инвентаризации, а также заключением судебно-бухгалтерской экспертизы.
Истицы признавали, что одной из причин образования недостачи являлось то обстоятельство, что истицы без соответствующего оформления (составления акта уничтожения) и учета в течение всего периода работы в павильоне «выкидывали» («выбрасывали») товар с просроченным сроком реализации. Одно только это обстоятельство свидетельствовало о виновных действиях истиц, влекущих образование недостачи ценностей, и само по себе являлось достаточным основанием для утраты к ним доверия со стороны работодателя. Другой причиной образования недостачи, могло служить то обстоятельство, что они частично «не пробивали» деньги через кассу. Каждая из истиц сознавала, что указанные выше их действия повлекут недостачу товара (Обобщение (обзор) практики рассмотрения районными судами Новгородской области дел по трудовым спорам за 2007 год).
9. Суд правильно признал совершение истцом виновных действий, которые давали работодателю основание выразить недоверие к нему и уволить его с работы по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ
К. работал в ООО водителем автобуса с полной материальной ответственностью. Приказом К. был уволен по п. 7 ч.1 ст. 81 ТК РФ (утрата доверия).
К. обратился в суд с иском о восстановлении на работе, считая, что уволен был необоснованно.
Решением суда в иске отказано, указано, что в обязанности истца входило производить своевременную сдачу выручки в кассу автохозяйства по окончании работы, продажа билетов, вести учет, составлять и представлять в установленном порядке товарно-денежные и другие отчеты о движении и остатках вверенного ему имущества. Водитель обязан получить талоны на топливо, кассовый аппарат или билеты на соответствующий маршрут, записать номера талонов на топливо в путевой лист, а номера билетов в билетно-учетный лист, подготовить кассовый аппарат к работе.
Судом установлено, что при проверке ревизором работы водителя автобуса К. выяснилось, что нет закрепления конечных номеров билетов на автовокзале, а одному пассажиру был продан билет уже ранее использованный (Обобщение (обзор) практики рассмотрения районными судами Новгородской области дел по трудовым спорам за 2007 год).
10. Трудовой договор с работником может быть расторгнут за совершение виновных действий, которые явились основанием к утрате доверия к работнику со стороны работодателя только при доказанности виновных действий и при соблюдении порядка увольнения, предусмотренного ст.193 ТК РФ. Представленные ответчицей суду документы инвентаризационной комиссии об обнаруженной в магазине недостаче товара подтверждает только факт недостачи, а не вину истиц или одной из них (либо других работников магазина) в образовании этой недостачи
А. и В. по трудовым договорам работали продавцами непродовольственных товаров в магазине индивидуального предпринимателя Ф. Приказами предпринимателя Ф. они были уволены с работы работодателем по п. 7 ст. 81 ТК РФ — «по утрате доверия со стороны работодателя».
Считая увольнения незаконными, А. и В. обратились в суд с исками об изменении формулировки основания увольнения на увольнение по собственному желанию и взыскании заработной платы за время вынужденного прогула, указывая на то, что они были уволены без законных на то оснований.
Увольнение признано незаконным, поскольку в приказах об увольнении отсутствуют ссылки на проступок, послуживший поводом для расторжения трудового договора с истицами. Из объяснений ответчицы следует, что основанием увольнения истиц послужили факты завышения цен на товар и недостачи товара, обнаруженные в ходе инвентаризации.
Дисциплинарное взыскание, в том числе в виде увольнения, может быть применено к работнику после получения от него объяснений в письменной форме либо, если работник по истечении двух рабочих дней после затребования от него письменного объяснения, такого объяснения не представил, о чем был составлен соответствующий акт. В данном случае, работодатель предложил истицам дать объяснения по факту завышения цен на товар и не получив объяснений, в тот же день уволил их. Следовательно, работодатель, принимая решение об увольнении истиц до истечения двух рабочих дней после затребования объяснений, грубо нарушил порядок применения дисциплинарного взыскания (Обобщение (обзор) практики рассмотрения районными судами Новгородской области дел по трудовым спорам за 2007 год).
обзора: «Увольнение работника по статье 81 ТК РФ по инициативе работодателя. Судебная практика»
Статья 81. Расторжение трудового договора по инициативе работодателя
Определение Верховного Суда РФ от 22.05.2017 N 18-КГ17-34 Требование: Об отмене приказов о привлечении к дисциплинарной ответственности, признании увольнения незаконным, восстановлении на работе, взыскании среднего заработка за период вынужденного прогула, компенсации морального вреда. Обстоятельства: Истец уволен в связи с неоднократным неисполнением без уважительных причин трудовых обязанностей при наличии дисциплинарного взыскания. По мнению истца, его отсутствие на рабочем месте вызвано необходимостью исполнения должностных обязанностей, отсутствует признак неоднократности неисполнения обязанностей. Решение: Дело направлено на новое рассмотрение, так как истец уволен в связи с нарушениями трудовой дисциплины, имевшими место до вынесения ответчиком оспариваемых приказов, на момент увольнения истец таких нарушений не допускал.
Приказом от 26 апреля 2016 г. N 49-лс трудовой договор с Акимовым А.И. расторгнут и он уволен из организации ответчика по основанию, предусмотренному пунктом 5 части 1 статьи 81 Трудового кодекса Российской Федерации в связи с неоднократным неисполнением работником без уважительных причин трудовых обязанностей, если он имеет дисциплинарное взыскание.
Определение Верховного Суда РФ от 17.04.2017 N 59-КГ17-3 Требование: Об отмене приказа об увольнении, восстановлении на работе, аннулировании записи в трудовой книжке, взыскании среднего заработка за время вынужденного прогула, единовременного денежного вознаграждения, компенсации морального вреда, оспаривании дополнительного соглашения к трудовому договору. Обстоятельства: По мнению истицы, ее увольнение является незаконным. Решение: В удовлетворении требования отказано, так как решение об увольнении истицы было принято по результатам заседания, где было установлено, что причины непредставления истицей сведений о доходах, расходах, имуществе и обязательствах имущественного характера своего супруга необъективны и являются способом уклонения от представления указанных сведений.
Разрешая спор о взыскании с ответчика в пользу Мартизановой Н.В. единовременного денежного вознаграждения, суд первой инстанции со ссылкой на приказ Министра обороны Российской Федерации от 23 апреля 2014 г. N 255 «О мерах по реализации в Вооруженных Силах Российской Федерации постановления Правительства Российской Федерации от 5 августа 2008 г. N 583», устанавливающий выплату гражданскому персоналу воинских частей и организаций единовременного денежного вознаграждения, и Положение о порядке выплаты гражданскому персоналу военного комиссариата единовременного денежного вознаграждения по итогам календарного года, утвержденное военным комиссаром Амурской области 15 декабря 2010 г., предусматривающее лишение работника данной выплаты в связи с его увольнением за виновные действия, перечисленные в пунктах 5 — 11 части 1 статьи 81 Трудового кодекса Российской Федерации, установив, что Мартизанова Н.В. уволена из военного комиссариата Амурской области по пункту 7.1 части 1 статьи 81 Трудового кодекса Российской Федерации в связи с совершением виновных действий, пришел к выводу об отказе в удовлетворении иска в названной части.
Определение Верховного Суда РФ от 17.04.2017 N 16-КГ17-3 Требование: О возмещении затрат, понесенных на обучение работника. Обстоятельства: Трудовой договор с работником был прекращен, в адрес последнего было направлено уведомление о размере расходов, понесенных на организацию и проведение его обучения, и необходимости компенсировать работодателю эти расходы, однако работником денежные средства возмещены не были. Решение: Дело направлено на новое рассмотрение, так как суд неправильно применил к спорным отношениям нормы трудового законодательства, не установил действительные правоотношения сторон, сложившиеся в связи с обучением работника, вследствие чего пришел к необоснованному на нормах закона выводу о том, что понесенные работодателем на обучение расходы не относятся к расходам, которые могут быть взысканы с работника.
В обоснование заявленных требований в иске указано, что 12 января 2015 г. между ООО «Мировая техника» в лице заместителя генерального директора Самойленко И.Б. и Зелениным С.О. заключен трудовой договор N 02/15, по условиям которого Зеленин С.О. был принят на работу в ООО «Мировая Техника» на должность менеджера в отдел продаж сельскохозяйственной техники. В этот же день между сторонами было заключено дополнительное соглашение к трудовому договору от 12 января 2015 г. N 02/15, согласно пункту 6 которого при прекращении трудового договора по инициативе работника либо по инициативе работодателя по основаниям, предусмотренным статьей 71, частями 5 — 11 статьи 81 Трудового кодекса Российской Федерации, в течение одного календарного года после завершения обучения работник обязуется не позднее 30 дней после прекращения трудового договора компенсировать работодателю произведенные расходы на организацию и проведение обучения в части, пропорциональной прошедшему после завершения обучения времени из расчета полной суммы за один календарный год.
Определение Верховного Суда РФ от 15.05.2017 N 47-КГ17-4 Требование: О восстановлении на работе, взыскании заработной платы за время вынужденного прогула. Обстоятельства: Истец ссылается на незаконное расторжение с ним трудового договора в связи с грубым нарушением должностных обязанностей. Решение: В удовлетворении требования отказано, поскольку действия истца, выразившиеся в организации застолья со спиртным со своими подчиненными на территории филиала, а также в отсутствии контроля во время проведения мероприятия с распитием спиртных напитков, свидетельствуют о грубом нарушении истцом своих должностных обязанностей.
Приказом начальника Оренбургского ЦГМС — филиала ФГБУ «Приволжское УГМС» от 13 января 2016 г. N 10 л/с трудовой договор с ним был расторгнут с 15 января 2016 г. по пункту 10 части 1 статьи 81 Трудового кодекса Российской Федерации за однократное грубое нарушение должностных обязанностей.
Решение Верховного Суда РФ от 22.03.2017 N АКПИ17-99 Об отказе в удовлетворении заявления о признании недействующим подпункта «а» пункта 49 Правил перевозок пассажиров и багажа автомобильным транспортом и городским наземным электрическим транспортом, утв. Постановлением Правительства РФ от 14.02.2009 N 112.
Как указывает административный истец, он работал в ГУП Ярославской области «Переславское АТП» водителем. В соответствии с приказом от 22 марта 2016 г. N 3 с ним был расторгнут трудовой договор на основании пункта 7 части 1 статьи 81 Трудового кодекса Российской Федерации.
Определение Верховного Суда РФ от 03.04.2017 N 305-ЭС17-1833 по делу N А40-25892/2016 Требование: О пересмотре в кассационном порядке судебных актов по делу о взыскании убытков. Решение: В передаче дела в Судебную коллегию по экономическим спорам ВС РФ отказано, поскольку суд пришел к правильному выводу о недоказанности наличия совокупности обстоятельств, являющихся основанием для наступления ответственности единоличного исполнительного органа общества и для взыскания убытков.
Приказом (распоряжением) N 19 о прекращении (расторжении) трудового договора с работником (увольнении) от 19.05.2015 трудовой договор от 17.08.2012 N 1/2 с бывшим генеральным директором Пономаревым И.А. расторгнут по основаниям, предусмотренным пунктом 10 части 1 статьи 81 Трудового кодекса Российской Федерации.
Определение Конституционного Суда РФ от 28.02.2017 N 310-О-Р «Об отказе в принятии к рассмотрению ходатайства гражданина Козлова Евгения Владимировича о разъяснении Определения Конституционного Суда Российской Федерации от 16 июля 2015 года N 1626-О»
1. Конституционный Суд Российской Федерации Определением от 16 июля 2015 года N 1626-О отказал в принятии к рассмотрению жалобы гражданина Е.В. Козлова на нарушение его конституционных прав частью первой статьи 81, статьями 153, 192, частями первой и третьей статьи 193 Трудового кодекса Российской Федерации и статьей 56 ГПК Российской Федерации, поскольку она не отвечала требованиям Федерального конституционного закона «О Конституционном Суде Российской Федерации», в соответствии с которыми жалоба в Конституционный Суд Российской Федерации признается допустимой.
Определение Конституционного Суда РФ от 28.02.2017 N 280-О «Об отказе в принятии к рассмотрению жалобы гражданина Ажеганова Владимира Вадимовича на нарушение его конституционных прав пунктом 19 статьи 29 Федерального закона «Об основных гарантиях избирательных прав и права на участие в референдуме граждан Российской Федерации»
Как следует из представленных материалов, заявитель, будучи членом участковой избирательной комиссии с правом решающего голоса, был уволен работодателем с должности педагога дополнительного образования по основанию, предусмотренному пунктом 5 части первой статьи 81 Трудового кодекса Российской Федерации (неоднократное неисполнение работником без уважительных причин трудовых обязанностей, если он имеет дисциплинарное взыскание). Решением районного суда от 6 октября 2015 года, оставленным без изменения судом вышестоящей инстанции, в удовлетворении требований В.В. Ажеганова о восстановлении его на работе отказано.
Определение Конституционного Суда РФ от 26.01.2017 N 32-О «Об отказе в принятии к рассмотрению жалобы гражданина Хохлова Сергея Леонтьевича на нарушение его конституционных прав рядом норм Трудового кодекса Российской Федерации и Гражданского процессуального кодекса Российской Федерации»
пункта 5 части первой статьи 81, согласно которому трудовой договор может быть расторгнут работодателем в случае неоднократного неисполнения работником без уважительных причин трудовых обязанностей, если он имеет дисциплинарное взыскание;
частей четвертой и пятой статьи 192, в соответствии с которыми не допускается применение дисциплинарных взысканий, не предусмотренных федеральными законами, уставами и положениями о дисциплине; при наложении дисциплинарного взыскания должны учитываться тяжесть совершенного проступка и обстоятельства, при которых он был совершен;
Определение Верховного Суда РФ от 14.11.2016 N 47-КГ16-13 Требование: О признании приказа об увольнении незаконным, восстановлении на службе, взыскании денежного содержания за время вынужденного прогула, компенсации морального вреда. Обстоятельства: Истец уволен со службы из органов уголовно-исполнительной системы за неоднократное нарушение служебной дисциплины при наличии дисциплинарного взыскания, наложение которого осуществлено в письменной форме. Указал, что увольнение произведено в период временной нетрудоспособности. Решение: Дело направлено на новое рассмотрение, поскольку при разрешении вопроса о наличии или отсутствии в действиях истца злоупотребления правом судом не применены нормы закона, регулирующие порядок и условия оказания медицинской помощи сотрудникам уголовно-исполнительной системы.
Указанное основание увольнения тождественно пункту 5 части 1 статьи 81 Трудового кодекса Российской Федерации, предусматривающему расторжение трудового договора по инициативе работодателя в случае неоднократного неисполнения работником без уважительных причин трудовых обязанностей, если он имеет дисциплинарное взыскание.
Как уволить работника по п7 ч1 ст81 ТК
Здравствуйте.
Пошаговая инструкция увольнения.
п.7.
Совершение виновных действий работником, непосредственно обслуживающим денежные
или товарные ценности, если эти действия дают основание для утраты доверия к
нему со стороны работодателя.
1.1. Если при совершении виновных действий
работник нарушил какую-то свою трудовую обязанность, то необходимо проверить
наличие документа, закрепляющего ее за работником: трудовой договор, договор о
полной материальной ответственности, должностная инструкция и др. Такой
документ должен быть составленным надлежащим образом, подписан работником.
Нарушение юридически незакрепленной обязанности суд Вам вряд ли зачтет.
1.2. Оформляются документы, подтверждающие
совершение виновных действий, дающих основания для утраты доверия (докладные
записки работников, обнаруживших такие действия, акты инвентаризаций, акты
ревизий и др.)
2. Проверяют, относится ли работник к категории
лиц, непосредственно обслуживающих денежные и товарные ценности, законно ли он
отнесен к данной категории, не является ли беременным, не находится ли на
больничном, в отпуске.
3. У работника берут письменное объяснение
(объяснительную записку) по факту совершения действий, дающих основания для
утраты доверия. Если по истечении двух рабочих дней указанное объяснение
работником не представлено, то составляется соответствующий акт (акт об отказе
дать объяснения). Желательно, чтобы акт заверили три работника.
4. Анализируют собранные документы и имеющуюся
информацию, на основании чего решают вопросы о вине работника и об утрате к
нему доверия либо сохранении такового. В случае, если устанавливается вина
работника, и его действия признаются дающими основания для утраты доверия,
процедура увольнения продолжается.
5. Далее издается приказ (распоряжение) о
прекращении трудового договора.
Приказ регистрируют в Журнале регистрации приказов.
6. С приказом (распоряжением) работодателя о
прекращении трудового договора работник должен быть ознакомлен под роспись. В
случае, когда приказ (распоряжение) о прекращении трудового договора невозможно
довести до сведения работника или работник отказывается ознакомиться с ним под
роспись, на приказе (распоряжении) производится соответствующая запись. Об этом
сказано в ст. 84.1 ТК РФ. При отказе работника ознакомиться с приказом о
прекращении трудового договора рекомендуется также акт об отказе ознакомиться с
приказом, который заверяется подписями составителя и двух работников. Этот
документ может пригодиться в суде в качестве дополнительного доказательства
правоты работодателя.
7. После этого работнику выплачивают денежную компенсацию за
неиспользованный отпуск, заработную плату и остальные причитающиеся
выплаты, оформляют запись в трудовой книжке, личной карточке. Запись об
увольнении может выглядеть следующим образом:
«Уволен за
совершение виновных действий, дающих основание для утраты доверия со стороны
работодателя, пункт 7 статьи 81 Трудового кодекса Российской Федерации».
Или:
«Трудовой договор
расторгнут по инициативе работодателя в связи с совершением работником, непосредственно
обслуживающим материальные ценности, виновных действий, дающих основание для
утраты доверия со стороны работодателя, пункт 7 части первой статьи 81
Трудового кодекса Российской Федерации».
Буду благодарна за отзыв.
Увольняем за утрату доверия торгового работника
Увольнение работника в связи с утратой доверия – один из противоречивых способов прекращения трудового договора. Закон содержит довольно узкую формулировку на этот счет. Так, по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ можно уволить за совершение виновных действий работника, непосредственно обслуживающего денежные или товарные ценности, если эти действия дают основание для утраты доверия к нему со стороны работодателя. Поэтому, когда возникает вопрос, можно ли уволить в связи с утратой доверия провинившегося работника, прежде всего необходимо определить, относится ли он к кругу лиц, к которому может быть применено такое основание увольнения, а затем уже причинно-следственную связь между действиями работника и наступившими неблагоприятными последствиями для работодателя, из-за чего к работнику было утрачено доверие.
Однако возвращаясь к кругу лиц, к которым в принципе может быть применена вышеуказанная норма закона, хотелось бы отметить, что налицо упущение со стороны законодателя в части ограничения круга лиц лишь работниками, которые непосредственно имеют дело с деньгами и товарно-материальными ценностями. Так, на практике возникает немало случаев, когда материальный ущерб работодателю – торговой организации причиняют не только эти работники, но и любые другие, которые отвечают за ведение переговоров с контрагентами и заключение с ними сделок. Существенным условием практически любой сделки является ее цена, которую обсуждает с партнером не руководитель организации, а ответственный за сделку работник. Как правило, это менеджеры по закупкам, менеджеры по продажам, маркетологи, рекламщики и прочие работники, занимающиеся развитием компании и, в итоге, отвечающие за достижение нужного финансового результата. И со стороны данной категории работников, которых еще называют «фронт-менеджерами», встречаются недобросовестные представители, которые манипулируют ценой сделки, пользуясь своим должностным положением, придумывают схемы взаимоотношений с контрагентом, которые в лучшем случае приводят к тому, что организация переплачивает за услугу, работу или продукцию, если без должного на то контроля позволяет работнику определять условия сделки. Ущерб от действий таких работников может составлять гораздо большие суммы, а соответственно, для работодателя это большие финансовые потери, нежели когда складской работник что-то унесет с собой со склада в кармане.
В коммерческих структурах коррупционных схем достаточно для того, чтобы понять, что п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ давно пора модернизировать. И что самое неприятное – весьма тяжело доказать виновность работника в участии в коррупционных схемах, если он тщательно подготовлен и действует решительно. Например, не использует корпоративные средства коммуникации, не оформляет ворох документов, не согласовывает должным образом условия сделок и пр. При этом он может предоставлять недостоверную информацию о контрагентах, вводя в заблуждение руководство компании, подтасовывать документы партнеров, без должного согласования подписывать договоры и другие документы. И, надо сказать, законодатель идет правильным путем, всерьез обсуждая проблему применения данной статьи далее, чем на госслужбе. Вопрос утраты доверия, по большому счету, касается всех работников, недобросовестно проявивших себя при исполнении должностных обязанностей. Поэтому крайне важно на законодательном уровне расширить круг лиц, которых можно уволить за утрату доверия. А то получается, что доверие по факту утрачено, работник пойман, а уволить по статье формально нельзя.
Ответы на вопросы по п.7 ч.1 ст.77 Трудового Кодекса РФ
Правомерно ли увольнение по п. 7 ч. 1 ст. 77 ТК РФ, если отказ работника продолжить работу связан с увеличением объема должностных обязанностей, произведенным в соответствии с квалификационной характеристикой должности в Квалификационном справочнике?
Ответ на данный вопрос можно найти в судебной практике, согласно которой увольнение в такой ситуации является правомерным.
Вывод основан на следующем. Трудовая функция не меняется, если должностные обязанности изменены в пределах квалификационной характеристики должности, приведенной в Квалификационном справочнике должностей руководителей, специалистов и других служащих (утв. Постановлением Минтруда России от 21.08.1998 N 37). При отказе работника от продолжения работы в новых условиях работодатель вправе уволить его по п. 7 ч. 1 ст. 77 ТК РФ.
Правомерно ли увольнение по п. 7 ч. 1 ст. 77 ТК РФ, если работник отказался продолжить работу в связи с уменьшением объема должностных обязанностей и размера оплаты труда?
Уменьшение объема должностных обязанностей по конкретной должности не влечет изменения трудовой функции. Работодатель вправе по собственной инициативе уменьшить работнику объем должностных обязанностей и, как следствие, размер оплаты труда при соблюдении требований, предусмотренных ст. 74 ТК РФ.
Правомерно ли увольнение по п. 7 ч. 1 ст. 77 ТК РФ, если в результате произведенных организационных изменений работник отказывается продолжить работу в структурном подразделении в другой местности?
Если в связи с организационными или технологическими изменениями условия трудового договора (за исключением условия о трудовой функции) не могут быть сохранены, правоотношения между работником и работодателем регулируются ст. 74 ТК РФ. Изменение места нахождения или создание нового обособленного структурного подразделения создает предпосылки для постановки вопроса об изменении условий трудовых договоров. Если работник не согласен продолжить работу в структурном подразделении, расположенном в другой местности, он подлежит увольнению по п. 7 ч. 1 ст. 77 ТК РФ.
В то же время анализ судебных постановлений апелляционной инстанции показывает, что нижестоящие суды иногда не усматривают оснований для применения положений ст. 74 ТК РФ и выносят решения в пользу работника. В обоснование выводов суды, в частности, указывают на следующее: если должность исключается из штатного расписания одного структурного подразделения и включается в штатное расписание другого подразделения, расположенного в иной местности, работник подлежит увольнению в связи с сокращением численности или штата (п. 2 ч. 1 ст. 81 ТК РФ).
Правомерно ли увольнение по п. 7 ч. 1 ст. 77 ТК РФ, если обособленное подразделение прекратило деятельность, а работник отказывается продолжить работу в подразделении, расположенном в другом городе?
Если обособленное структурное подразделение, которое расположено в другой местности, прекращает деятельность, то работник подлежит увольнению по правилам, предусмотренным для случаев ликвидации организации (п. 1 ч. 1 ст. 81, ч. 4 ст. 81 ТК РФ). Основания для увольнения по п. 7 ч. 1 ст. 77 ТК РФ отсутствуют.
Правомерно ли увольнение по п. 7 ч. 1 ст. 77 ТК РФ беременной женщины в связи с отказом от продолжения работы в измененных условиях?
Беременную работницу, которая не согласна с изменением определенных сторонами условий трудового договора, в случае отсутствия у работодателя другой работы можно уволить по п. 7 ч. 1 ст. 77 ТК РФ.
Установленный ч. 1 ст. 261 ТК РФ запрет на расторжение трудового договора с беременными работницами распространяется исключительно на случаи увольнения по инициативе работодателя, к которым увольнение по основанию, предусмотренному п. 7 ч. 1 ст. 77 ТК РФ, не относится.
Таким образом, запрет на увольнение беременной женщины установлен только для случаев увольнения по инициативе работодателя (ч. 1 ст. 261 ТК РФ) и на увольнение по п. 7 ч. 1 ст. 77 ТК РФ не распространяется.
Работник был временно переведен на должность, связанную с обслуживанием товарных ценностей. В период ее замещения соверш
Работник был временно переведен на должность, связанную с обслуживанием товарных ценностей. В период ее замещения совершил виновные действия, дающие основание для утраты доверия работодателя, которые выявились после возвращения на не материально ответственную должность. Можно ли уволить его по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ?
Вопрос: Работник был временно переведен на должность, связанную с обслуживанием товарных ценностей. В период ее замещения совершил виновные действия, дающие основание для утраты доверия к нему со стороны работодателя, однако этот факт выявился уже после того, как он был возвращен на прежнюю должность (не материально ответственную). Может ли он быть уволен по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ?
Ответ: Находим неправомерным увольнять по п. 7 ч. 1 ст. 81 Трудового кодекса РФ работника, который был временно переведен на должность, связанную с обслуживанием товарных ценностей, и в период ее замещения совершил виновные действия, дающие основание для утраты доверия к нему со стороны работодателя, если этот факт выявился уже после того, как он был возвращен на прежнюю должность (не материально ответственную).
Обоснование: Пункт 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ допускает увольнение в случае совершения виновных действий работником, непосредственно обслуживающим денежные или товарные ценности, если эти действия дают основание для утраты доверия к нему со стороны работодателя.
В рассматриваемой ситуации работник непосредственно обслуживал товарные ценности в момент совершения виновных действий, но на момент выявления данных действий он уже не имел такого статуса.
Между тем в п. 45 Постановления Пленума Верховного Суда РФ от 17.03.2004 N 2 «О применении судами Российской Федерации Трудового кодекса Российской Федерации» (ред. от 28.09.2010) указано, что расторжение трудового договора с работником по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ в связи с утратой доверия возможно только в отношении работников, непосредственно обслуживающих денежные или товарные ценности (прием, хранение, транспортировку, распределение и тому подобное), и при условии, что ими совершены такие виновные действия, которые давали работодателю основание для утраты доверия к ним. Как представляется, это положение может рассматриваться судами как указание на возможность увольнения только работников, непосредственно обслуживающих денежные или товарные ценности на момент увольнения.
Кроме того, следует иметь в виду, что само по себе увольнение по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ имеет по своей целевой направленности пресекательный характер: лицо, которому работодатель больше не может доверять, не должно непосредственно обслуживать денежные или товарные ценности. Если данное лицо уже переведено на должность, не связанную с таким обслуживанием, суд может посчитать, что основания для его увольнения по данной статье отпали.
В силу этого не рекомендуется увольнение рассматриваемого работника по п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ.
Дополнительно отметим, что дисциплинарное взыскание не может быть применено позднее шести месяцев со дня совершения проступка, а по результатам ревизии, проверки финансово-хозяйственной деятельности или аудиторской проверки — позднее двух лет со дня его совершения. В указанные сроки не включается время производства по уголовному делу.
С.Е.Чаннов
Поволжский институт управления имени П.А.Столыпина
(филиал Российской академии народного хозяйства
и государственной службы
при Президенте Российской Федерации)
30.10.2013
Дизайн площадки, парковка и зонирование торговых центров
Исторический отчет PAS, серия
PAS опубликовала свой первый информационный отчет в 1949 году. Чтобы отметить эту историю, каждый месяц мы представляем новый отчет из архивов.
Надеемся, вам понравится этот увлекательный снимок прошлогоднего выпуска о планировании.
АМЕРИКАНСКОЕ ОБЩЕСТВО ДОЛЖНОСТНЫХ ЛИЦ 1313 ВОСТОЧНАЯ УЛИЦА 60 — ЧИКАГО ИЛЛИНОИС 37 | |
| Информационный отчет No.59 | Январь 1954 г. |
Проектирование, парковка и зонирование торговых центров
Скачать исходный отчет (pdf)
Пригородные торговые центры возникли, выросли в размерах и увеличились в количестве не потому, что они предлагают новые продукты или лучшие магазины, чем в центральных деловых районах, а потому, что они удобны. В последние годы мегаполисы быстро росли, но рост происходил по большей части за пределами центрального города.Центральные деловые районы, которые были относительно адекватны для обработки количества (с учетом их доходов) людей в мегаполисах полтора десятилетия назад, теперь переполнены, переполнены и забиты уличным движением.
Торговые центры в пригородных районах ближе к населению, которое они обслуживают (во время вождения), предлагают относительно большое (если иногда неадекватное) количество удобно расположенных внеуличных парковок и соответствуют образцам загородной жизни, описанным Берджессом и другими. городские социологи еще двадцать пять лет назад.Чем дальше от центра города проживает семья, тем меньше времени мужчина в семье проводит дома. Какими бы ни были социальные последствия этой ситуации, она также приводит к большей зависимости от женщины в поддержании повседневной жизни семьи. Ей приходится вести хозяйство и делать покупки, и она не может позволить себе более длительную поездку в центр города — поездку, которую, возможно, придется совершать на медленном и переполненном общественном транспорте или на машине по перегруженным и опасным дорогам без каких-либо гарантий того, что Когда вы доберетесь до центрального делового района, появится место для парковки.Бизнес торговых центров почти полностью зависит от людей, которые живут в пределах 30 минут езды по местным дорогам, а большинство клиентов живут ближе.
Общее определение торгового центра
Торговый центр — это группа розничных магазинов, спроектированных и спроектированных для участка, на котором они построены, расположенного вдали от центрального делового района, для удовлетворения потребностей в покупках в новых пригородных и периферийных районах. В каждом известном нам торговом центре есть супермаркет (крупный продуктовый магазин), и супермаркет является либо крупнейшим генератором трафика торгового центра, либо второстепенным по сравнению с универмагом в центре.Торговые центры можно различать между теми, в которых преобладает супермаркет или розничный продуктовый магазин, и вторичным магазином которых является аптека или разнообразный магазин; и те, в которых преобладает универмаг, а второстепенным магазином является супермаркет или другой универмаг.
Торговые центры двух типов будут существенно различаться по площади, количеству и типам магазинов, а также по годовой валовой прибыли. Они различаются также обслуживаемой торговой площадью и типом выполняемых покупок.КОНСУЛЬТАЦИОННЫЕ УСЛУГИ ПО ПЛАНИРОВАНИЮ Информационные отчеты № 44 и 47 охватывают анализ рынка торговых центров, а также критерии и стандарты для магазинов торговых центров. В настоящем отчете показано, как описанный выше анализ соотносится с требованиями к общей площади, парковке и дизайну территории торгового центра.
Наконец, в отчете описываются некоторые положения о зонировании, уже принятые для торговых центров, и комментируются некоторые проблемы, с которыми градостроители сталкиваются с торговыми центрами.
Торговый центр, вид покупателя
Планировщик в первую очередь занимается покупателем и его (ее) поездкой в торговый центр только после того, как покупатель едет по дороге и до того момента, когда он войдет в один из магазинов в центре. После этого мы оставляем его в мире эластичных шлангов и нерастяжимых бюджетов. Планировщика больше всего интересуют четыре этапа поездки покупателя — дорога, по которой он идет, чтобы добраться до центра, точка, в которой он покидает эту дорогу и входит в центр, поиск незанятого места для парковки и прогулка до магазинов. .
Девелоперы торговых центров, как показано в предыдущих отчетах, должны учитывать многие факты, которые не строго относятся к юрисдикции городского планирования, такие как торговый потенциал района, прилегающего к торговому центру, и типы магазинов, которые должны быть расположены в конкретном районе. торговый центр. По мере того, как появляются окончательные планы торгового центра, показывающие размер и расположение магазинов, парковок и зон обслуживания, планировщик становится жизненно заинтересованным. Фактически, мы полагаем, что имеется достаточно информации о принципах и методах развития торговых центров, чтобы проектировщик был обеспокоен возможными зонами размещения торговых центров еще до того, как торговый центр будет предложен для его района.
Таким образом, этот отчет пытается охватить этапы продвижения покупателя, которые волнуют планировщика, и указать на трудности, с которыми он сталкивается на этом пути.
Этап первый: Поездка в ТЦ
Тридцать минут езды на автомобиле в настоящее время является допустимым пределом рыночной площади крупного регионального торгового центра, который может обслуживать до 500 000 человек. Площадь, ограниченная тридцатиминутным временем вождения, должна рассчитываться в соответствии с состоянием и загруженностью улиц и не всегда прямо пропорциональна линейному расстоянию.Пять миль скоростной дороги можно преодолеть быстрее, чем пять кварталов оживленного делового района.
Разработчики торгового центра рекомендуют подсчет трафика на основных улицах, обслуживающих центр, не столько как показатель бизнес-потенциала, сколько как проверка уже существующей загруженности и помощь в прогнозировании дорожной ситуации после открытия центра. В целях самосохранения застройщики и архитекторы рекомендуют дальнейшие исследования, в том числе будущие программы дорожного строительства в этом районе, а также будущую жилищную застройку и перемещение населения в этом районе, чтобы можно было определить другие воздействия на бизнес и движение.
После оценки валового годового объема бизнеса центра можно оценить среднее количество автомобилей, ежедневно использующих центр. Также можно оценить пиковую нагрузку, входящую и выходящую, и время суток, в которое будут возникать пики нагрузки (см. Ниже: Этап 2). К нормальным текущим и будущим нагрузкам на дороги, обслуживающие центр, необходимо добавить трафик, создаваемый центром, а итоговые значения необходимо сравнить с пропускной способностью дорог. Если дороги не обладают дополнительной пропускной способностью для обработки будущих транспортных нагрузок, строительство новой дороги должно быть в ближайшем будущем, или центр должен быть расположен в другом месте.По возможности, место, выбранное для нового торгового центра, должно быть обеспечено соответствующими дорогами общего пользования.
Этап второй: вне дороги и в центр
Многолюдные перекрестки автомагистралей долгое время считались хорошими коммерческими объектами, но проблема доступа к торговым центрам получает все большее внимание при планировании современных торговых центров. Ключом к проблеме доступа является не объем трафика, проходящего через центр, а его плотность.Как часто показывают исследования дорожного движения, общее количество автомобилей, проезжающих через заданную точку дороги (объем), в конечном итоге уменьшается по мере приближения плотности к точке насыщения. Причина этих отношений проста. Чем ближе машины собраны друг к другу, тем медленнее они должны ехать. При таком плотном движении, что, как можно было бы сказать, характеризует движение в час пик на некоторых автострадах Лос-Анджелеса или Чикаго Аутер Драйв, стыковки и задержки также происходят чаще и дороже с точки зрения эффективности шоссе.Дороги с наибольшей интенсивностью движения — это дороги, на которых автомобили разнесены дальше друг от друга и движутся с большей скоростью с относительной безопасностью.
Дороги с высокой плотностью и интенсивностью движения создают проблемы с доступом к торговому центру. На дороге с высокой плотностью движения и довольно медленным движением водителям будет сложно маневрировать и свернуть с дороги. На высокоскоростных дорогах водитель должен предупреждать о приближении к съезду, а съезды в центр должны быть спроектированы с учетом функций безопасности, учитывающих более высокие скорости.
Немногие торговые центры будут обслуживаться высокоскоростными дорогами с ограниченным доступом. Торговые центры, строящиеся в развивающихся районах, будут обслуживаться существующей дорожной сетью, которая может оказаться недостаточной для обработки трафика, который возникнет, когда торговый центр будет завершен, а территория застроена.
Точки подъезда с дорог к торговому центру должны быть достаточными для обеспечения движения транспорта в самые загруженные часы центра. Виктор Грюн, архитектор и дизайнер торговых центров (см. «Влияние движения регионального торгового центра», см. Библио), оценивает, что выход или въезд с непрерывным потоком могут обрабатывать до 750 автомобилей в час.Пиковую загрузку торгового центра можно оценить, исходя из годового валового дохода центра. Проблема состоит из трех частей: во-первых, определить самый крупный однодневный валовой бизнес; во-вторых, (на основе средней покупки на одну машину), чтобы определить, сколько машин будет в центре и вне центра в этот день; и, в-третьих, оценить количество автомобилей, которые будут въезжать и выезжать из центра в наиболее загруженные часы этого дня.
По оценкеGruen, в крупном региональном торговом центре может ожидаться пиковый объем продаж со скоростью 3 000 автомобилей в час.В таком случае может показаться, что для разгрузки 3000 автомобилей необходимо четыре выхода.
Этап третий: парковка автомобиля
Парковка — главное удобство торгового центра перед центральным деловым районом. Несмотря на повторяющееся утверждение этого факта, покупатель не всегда может найти желаемое парковочное место. Покупателю нужно место, которое он может легко найти, с минимальными трудностями при перемещении по стоянке, и такое место, которое находится рядом с магазином или группой магазинов, в которых он собирается делать покупки.Иногда виной тому застройщики, которые недооценили потребность в парковочных местах или сочли землю слишком ценной, чтобы ее можно было использовать для парковки. Иногда парковочных мест слишком мало просто потому, что их ищет слишком много людей с автомобилями.
Парковка в торговом центре воспринимается покупателем как последовательность ступенек:
- маневрирует на машине вокруг стоянки, пока не находит место;
- посадка автомобиля в космос;
- пешком от помещения до магазинов.
Выйдя из центра, он должен сделать примерно те же шаги в обратном порядке, включая поиск своей машины, что иногда кажется более трудным, чем это было изначально.
1. Поиск места. Найдет ли покупатель место вообще, зависит от первоначально предоставленного парковочного места. Количество места обсуждается ниже. В противном случае ключевыми факторами при перемещении автомобилей по стоянке являются планировка и ширина проходов между рядами припаркованных автомобилей, особенно возле наиболее привлекательных магазинов, универмагов, супермаркетов и магазинов. аптеки.Насколько широки должны быть проходы, в основном зависит от того, будут они односторонними или двусторонними. Исследование, проведенное Фондом Ино (Работа на парковках), показало, что ширина проездов восьми парковок с проходами с односторонним движением в среднем составляла 14 футов и варьировалась от 7,5 до 21 футов. Низкое значение 7,5 удивительно, если учесть, что самый большой автомобиль 1947 года имел ширину более 6 футов 10 дюймов. Для проходов с двусторонним движением ширина примерно на двадцати стоянках составляла в среднем 23,7 фута и варьировалась от 16 до 37 футов. Если клиенты припарковывают свои автомобили, как это происходит почти во всех торговых центрах, проходы не должны быть настолько узкими, чтобы затруднять задачу, или настолько узкими, чтобы одна припаркованная машина временно мешала движению в проходе.Ширина проходов с односторонним движением должна быть не менее 10 футов; для проходов с двухсторонним движением около 20 футов.
2. Размещение машины в пространстве: В принципе, мы предполагаем, что большинство парковок расположены примерно одинаково. Например, пространства и проходы можно расположить так:
Рисунок 1
Более узкие проходы (a) — это иногда предусмотренные пешеходные переходы, а более широкий проход (b) между рядами пространств — это проход для маневрирования автомобилей.Планировка может быть разной для нескольких типов угловой парковки, например:
Рисунок 2
Рисунок 3
Рисунок 4
Общая площадь парковки на одно место для машины (включая проходы) влияет на клиента с точки зрения сложности или отсутствия трудностей при въезде на парковочное место. Исследование Eno показало, что при парковке под углом 90 градусов исследуемые участки составляли в среднем 246 квадратных футов на машину, минимум 192 квадратных футов и максимум 307 квадратных футов.Сейчас 250 квадратных футов на машину считается слишком малой площадью для торговых центров, а 300 — более общепринятая цифра. Бейкер и Фунаро в торговых центрах : конструкция и работа заявляют, что 350 футов — это минимум, который можно считать удовлетворительным. Какую бы цифру ни взяли, не более 200 квадратных футов нужно отвести под само пространство. Бейкер и Фунаро рекомендуют пространство 9 на 18 футов, и одно 10 на 20 футов должно быть достаточно. Остальная часть территории (150 квадратных футов на машину по их стандартам) будет использована под проходы, выходы и входы, а также на благоустройство территории.Никакая земля не будет спасена, если сделать пространство шириной менее 9 футов. Поскольку автомобили имеют ширину около 7 футов, меньшее пространство будет способствовать пересечению разделительных линий, и в результате будет еще меньше полезного пространства, чем если бы они были шириной 9 или 10 футов.
3. Движение от места к магазинам: Как только покупатель благополучно разместил свою машину в лучшем доступном месте, ему остается только пройти к магазинам. Мы предполагали, что парковка будет расположена вокруг группы магазинов, а внутренний торговый центр будет зарезервирован для пешеходов.(См. Рисунки 5–11 ниже, где представлена схема парковок в зависимости от возможных типов группировки магазинов.) На некоторых стоянках есть бетонные тротуары между рядами припаркованных автомобилей (проходы, отмеченные буквой «a» на рисунках 1, 2 и 3. ). Если они установлены, они должны быть не менее 7 футов в ширину, чтобы иметь возможность выступать за переднюю часть автомобилей и позволять двум людям, несущим пакеты, беспрепятственно проезжать мимо друг друга.
Торговый центр Паркингтон, который обслуживается пятиэтажной структурой с самостоятельной парковкой внутри группы магазинов, может похвастаться тем, что покупателю не нужно идти более чем на 110 футов от припаркованной машины, не находясь под каким-либо укрытием.Крытые пешеходные дорожки для покупателей могут быть важной особенностью, особенно там, где парковка значительно разбросана, а погода часто ненастная.
Многоэтажные гаражи из-за относительно высокой стоимости парковочного места обычно не рекомендуются застройщиками торговых центров, за исключением случаев, когда количество земли ограничено, а стоимость квадратного фута высока. Для целей торгового центра практически необходимо, чтобы конструкция представляла собой гараж самообслуживания, и этот факт вызывает некоторые проблемы проектирования в многоуровневом гараже, особенно в отношении размеров пространств и проходов на каждом этаже, а также ширина и конструкция пандусов, ведущих к этажам.Самостоятельная парковка Parkington имеет отдельные пандусы, ведущие прямо с каждого этажа на землю.
Сколько места?
Количество парковочных мест измеряется двумя способами. Более старый метод заключается в сравнении общей площади, отведенной под парковку, с чистой торговой площадью магазинов. Таким образом, если 50 000 квадратных футов площади отведено под торговлю, а 150 000 квадратных футов — парковочное место, мы бы сказали, что соотношение составляет 3: 1. Совсем недавно использовавшаяся мера — это вычисление количества парковочных мест на 1000 квадратных футов площади магазина.Если мы предположим, что каждое место занимает в общей сложности 300 квадратных футов территории парковки (включая проходы, ландшафтный дизайн и т. Д.), То на каждые 1000 квадратных футов парковочной зоны можно припарковать 3,3 машины.
Согласно старому методу соотношение 3: 1 означало, что на каждый квадратный фут торговой площади приходилось три квадратных фута парковки. Итак, на 1000 квадратных футов торговых площадей у нас есть 3000 квадратных футов парковки. На площади 300 квадратных футов можно припарковать 10 автомобилей на этих 3000 квадратных футов. Следовательно, соотношение 3: 1 по старому методу эквивалентно 10 пространствам на 1000 футов торговой площади.Таблица 1 иллюстрирует взаимосвязь между этими двумя методами расчета парковки по отношению к торговой площади.
Принимая во внимание эти меры, мы можем говорить о парковке, которая действительно необходима для торгового центра. Груэн и Смит разработали «спрос» на парковку для предлагаемого торгового центра площадью 800 000 квадратных футов, описанного в Торговых центрах: Тип нового здания (см. Библио.)
Рисунок 5
Этот дизайн похож на Shopper’s World, Framingham, Mass., который, по-видимому, испытывает финансовые трудности, потому что в открытом конце торгового центра нет второго крупного магазина.
Рисунок 6
(аналогично Northland, Детройт, Мичиган)
Рисунок 7
Рисунок 8
(Аналогично торговому центру Boulevard, Монреаль — 207 акров, 32 магазина, 2100 парковочных мест.)
Рисунок 9
Рисунок 10
(аналогично Evergreen Plaza, Чикаго, Иллинойс)
Рисунок 11
Таблица 1
| Сравнение коэффициентов парковки | |
| Квадратных футов парковки на один квадратный фут площади | машиномест на 1000 квадратных футов жилой площади (из расчета 300 квадратных футов на одну машину) |
| 1: 1 | 3.3 |
| 1,5: 1 | 5,0 |
| 2: 1 | 8,7 |
| 2,5: 1 | 8,3 |
| 3: 1 | 10,0 |
| 3,5: 1 | 11,7 |
| 4: 1 | 13,3 |
Пример того, как читать эту таблицу: отношение трех квадратных футов парковочной площади к одному квадратному футу площади пола равняется 10.0 машиномест (из расчета 300 квадратных футов на машину) на 1000 квадратных футов площади пола.
Они рассчитали количество автомобилей на 1000 квадратных футов арендуемой площади по наблюдаемому трафику в существующем центре за шесть рабочих дней. Затем они подсчитали количество автомобилей, ежедневно проезжаемых в центре площадью 800 000 квадратных футов, где деловой активности на 20 процентов больше, чем в наблюдаемом центре. Наконец, был разработан почасовой график на пятницу (открыт до 21:30).
В то время как осторожный и научный подход к проблеме заслуживает одобрения, все еще остается под вопросом, можно ли получить какие-либо более точные результаты с помощью такого метода, после того, как все «оценки» и «резервы для необычных условий» брошены в расчет. Цифра, которая может быть получена путем общего наблюдения за существующими центрами и адекватностью их парковочных мест.Хотя исследование Груена и Смита было основано на наблюдениях, оно было чрезвычайно подробным, и остается вопрос, можно ли улучшить обычно предлагаемые простые соотношения.
Два общих утверждения, кажется, верны для парковок в торговых центрах. Во-первых, похоже, что нет никаких записей о парковках, имеющих слишком большую вместимость для центра (см. Ниже, Может ли у вас быть слишком много парковок?). Второе утверждение, касающееся парковочных мест, заключается в том, что в соседнем торговом центре будет больше пешеходов, чем в общественном или региональном торговом центре, и, следовательно, меньшему центру не потребуется пропорционально столько места для парковки вне улицы, сколько большому центру. .В Таблице 2 перечислены и описаны парковочные места в ряде торговых центров по всей территории Соединенных Штатов. Мы должны заранее разубедить читателя в надежде на большую точность статистических данных. Количество парковочных мест и арендных площадей было проверено в двух источниках для нескольких центров. Проверяемые цифры колеблются от 10 до 90 процентов.
Таблица 2
| Парковочные места в некоторых существующих и предлагаемых торговых центрах | |||
| Торговая площадь магазина (кв.футы) | Общая парковка (маш. Мест) | Соотношение машиномест на 1000 кв. Футов. | |
| Old Orchard, Чикаго, Иллинойс (проп.) | 1 500 000 | 6 000 | 4,0 |
| (Дж. Л. Хадсон) Детройт, Мичиган (проп.) | 1 000 000 | 11 000 | 11,0 |
| Стоунстаун, Сан-Франциско, Калифорния | 1 000 000 ** | 2,500 | 2,5 |
| Fresh Meadows, Лонг-Айленд, Н.Y. | 800 000 * | 2,500 | 3,2 |
| Northgate, Сиэтл, Вашингтон | 650 000 | 5 000 | 7,7 |
| Вестчестер, Лос-Анджелес, Калифорния | 644 200 | 3 300 | 5,1 |
| Evergreen Plaza, Чикаго, Иллинойс | 500 000 | 2,200 | 4,4 |
| Shoppers World, Фрамингем, Массачусетс. | 497 000 | 6 000 | 12.1 |
| Highland Village, Хьюстон, Техас | 360 000 ** | нет данных | 5,0 |
| Каннс, Вирджиния и Вирджиния-Сквер, Вирджиния | 264 300 * | 1 000 | 3,8 |
| Паркингтон, Арлингтон, Вирджиния. | 250 000 * | 2,500 | 10,0 |
| Виннвуд, Даллас, Техас | 250 000 * | 2,400 | 9,9 |
| Clearview, Принстон, Нью-Джерси | 227 625 | 1 900 | 8.4 |
| Broadway-Crenshaw, Лос-Анджелес, Калифорния | 222 950 | 2,750 | 12,3 |
| Атлантик-Центр, Лос-Анджелес, Калифорния | 180 000 | 1,500 | 8,4 |
| Деревня Сан-Лоренцо, Сан-Лоренцо, Калифорния. | 174 750 | 452 | 2,6 |
| McCreless Shopping Village, Сан-Антонио | 163 000 | 1 989 | 12.2 |
| Hutzlers, Townson, Md. | 155 000 | 1,600 | 10,3 |
| Cameron Village, Raleigh, N. C. | 147,340 | 2 000 | 13,6 |
| Bellevue Square, Bellevue, Вашингтон. | 125 000 | 1 000 | 8,0 |
| Эдмонсон Виллидж, Балтимор, Мэриленд | 123 000 | 550 | 4,9 |
| Риджуэй, Стэмфорд, Коннектикут. | 108,800 | 1 000 | 9,2 |
| Wanamaker’s, Уилмингтон, Делавэр | 105 000 | 1 000 | 9,5 |
| Парк Ла Грейндж, Чикаго, Иллинойс | 102 000 | 1,050 | 10,3 |
| Линкольн-Виллидж, Чикаго. Илл. | 94 910 | 1,300 | 13,7 |
| Lakeshore Plaza, Сан-Франциско, Калифорния | 83 532 | 497 | 6.0 |
| Village Shopping Center, Сан-Анджело, Техас | 73,000 | 1 000 | 13,7 |
| Town and Country, Сакраменто, Калифорния. | 70 095 | 900 | 12,8 |
| Woodward and Lathrop, Chevy Chase, Md. | 70 000 | 1 002 | 14,3 |
| Edgemont Park, Лансинг, Мичиган | 68 000 | 680 | 10,0 |
| Prairie Village, Канзас-Сити, Миссури | 64 000 | 400 | 6,3 |
| Casey’s, Бисмарк, Северная Дакота | 60 000 ** | 400 | 6,7 |
| Manor Park, Чикаго, Иллинойс | 56 200 ** | 400 | 7,1 |
| Windsor Hills, Лос-Анджелес, Калифорния | 54,750 | 250 | 4,6 |
| Хоффманс, Аврора, Колорадо | 52,614 | 950 | 17.0 |
| Wanamakers, N. Shore Mart, L.I., N.Y. | 51 000 * | 600 | 11,7 |
| Джефферсон-Виллидж, Сан-Антонио, Техас | 48 520 | 190 | 3,9 |
| Broadmoor, Шривпорт, штат Луизиана | 48020 | 350 | 7,3 |
| Nob Hill, Альбукерке, Нью-Мексико | 42,800 | 100 | 2,4 |
| Фарватер, Канзас-Сити, Миссури | 40,250 | 450 | 10,3 |
| Линкольн-центр, Стоктон, Калифорния | 40 000 | 400 | 10,0 |
| Меррионетт, Чикаго, Иллинойс | 35,110 | 400 | 11,4 |
| Юниверсити-Хиллз, Денвер, Колорадо | 34 000 | 850 | 25,0 |
| Mayfair, Фресно, Калифорния | 33 000 | 808 | 24.0 |
| Regenstein’s, Бакхед, Джорджия | 28000 * | 300 | 10,7 |
| Родной город, Чикаго, Иллинойс | 26,310 | 372 | 14,0 |
| Naylor Road, Вашингтон, округ Колумбия | 21 840 | 74 | 3,4 |
| Krameria, Денвер, Колорадо | 21 000 | 160 | 7,6 |
| Fresh Meadows, Neighborhood Center, Нью-Йорк | 20,720 | 175 | 8.5 |
* Общая арендная площадь здания
** Общая площадь здания
Сравните данные в Таблице 2 с рекомендуемым стандартом 10,0 машиномест на 1000 квадратных футов чистой торговой площади (или соотношением парковочных мест 3: 1, т. Е. Три квадратных фута парковки на каждый квадратный фут торговой площади. ).
Возможно, окончательное точное заявление дается в следующей выдержке из письма:
14 февраля 1953 г.
.Сомнительно, чтобы два проектировщика или архитектора могли договориться о количестве квадратных футов парковочного места, необходимого для торгового центра или отдельного магазина. У меня возникает вопрос, будет ли когда-нибудь правильный ответ.
Мое практическое правило предоставления парковочных мест для магазинов и торговых центров — угадать количество киосков, и я неизменно предоставляю либо слишком много, либо недостаточно. Один из моих клиентов, который исследовал парковку, считает, что место должно быть предоставлено для всех машин, которые едут на площадь или в торговый центр в час пик накануне Рождества.Подумай, что один…
При проверке некоторых парковок на площади, которые я спроектировал в течение последних нескольких лет, я обнаружил, что на каждые 120 квадратных футов общей площади одной площади было выделено одно место для машины, а для другой площади — 160 квадратных футов. тот же размер. Тот, у кого меньше парковочных мест, делает примерно в два раза больше бизнеса, чем тот, у кого больше парковочных мест.
… Мы обнаружили, что, когда в торговом центре наблюдается постоянная нехватка парковочных мест в часы пиковой торговли, очень многие клиенты, зная о нехватке, договариваются о торговле в то время, когда есть хороший шанс найти место, и некоторые из площадей, которые я спроектировал с ограниченным количеством парковок, оказались очень успешными, потому что торговля распределена на более длительный период, чем на некоторых площадях с большим количеством парковочных мест.Многие домохозяйки установили время для покупок и не меняют его более чем на полчаса изо дня в день из-за условий парковки.
Много лет назад хорошей практикой считалось предоставление парковочной площади равной общей площади здания. Площадь была увеличена в два раза, и сейчас она растет с 3 квадратных футов парковки на каждый квадратный фут здания.
… Я … должен признаться, что у меня просто нет формулы. Спроектировали дюжину или более торговых центров или площадей размером от 10 до 30 магазинов.Если бы меня завтра спросили, сколько места я бы предложил для торгового центра из 20 магазинов, я бы угадал определенное количество и был бы достаточно уверен, что мое предположение было либо слишком высоким, либо слишком низким, и это предположение было бы примерно 1 автомобиль на каждые 130 квадратных метров. футов общей площади для минимального объема в 10 миллионов и наличия как минимум 2 крупных рынков и 2 крупных универмагов.
С уважением,
Г. Мортон Вулф
Архитектор и инженер
1377 Main Street,
Буффало 9, Нью-Йорк
Может у вас слишком много парковок?
Мы не знаем ни одного центра, в котором было бы слишком много парковок.Некоторые парковочные места, правда, используются неэкономично из-за их удаленности от магазинов. Плохо расположенные помещения использовались бы чаще, если бы они были расположены более удобно. Ограничение на парковку по большей части определяется расстоянием, которое люди должны пройти, чтобы добраться от своих автомобилей до магазинов. В торговом центре, предлагающем только неудобную прогулку по морю припаркованных автомобилей, предел, на который можно разумно рассчитывать, составляет около 350 футов.С другой стороны, если вы можете предложить покупателю что-то другое, кроме автомобилей, он, скорее всего, пойдет дальше. Аркады с витринами или приятно озелененные зоны для прогулок могут позволить расширить парковочную зону.
АЗС на плане
Более крупные центры часто включают заправочную станцию (но не коммерческий гараж, ремонтную мастерскую или автомобильную прачечную). Заправочная станция предназначена для обслуживания клиентов, а не для рисования, и поэтому должна предлагать только ограниченный объем услуг.Для регулярных проверок, ремонта и мойки автомобилей люди будут отвозить свои машины в гаражи по соседству или на более крупные станции техобслуживания, расположенные в небольших торговых центрах.
Первым условием расположения АЗС в региональном торговом центре является то, что она не должна мешать движению транспорта, использующему центр для своих основных торговых целей. Поэтому рекомендуемое место — это то, которое отделено от группы магазинов парковкой. Вероятно, он должен быть расположен рядом с основными выходами, с выходом на заправочную станцию, спроектированным таким образом, чтобы транспортный поток в торговый центр и выход из него был беспрепятственным.
Погрузочно-разгрузочные комплексы
Размеры и общие размеры причалов для погрузки грузовиков, а также необходимое количество описаны в разделе о правилах зонирования ниже (см., В частности, положения о зонировании для Бисмарка и Канзас-Сити). Более серьезные проблемы связаны с проектированием погрузочно-разгрузочных устройств для грузовиков и их расположением.
Если центр очень большой, магазины могут обслуживаться подземным туннелем, в котором у всех магазинов есть причалы для погрузки.По некоторым оценкам, такой объект может стоить около 800 000 долларов, и несколько торговых центров будут достаточно большими, чтобы позволить себе такие расходы. Более распространенной практикой является размещение причалов для погрузки и разгрузки в задней части складов, что создает новую проблему. Часто магазины в торговом центре не имеют четко очерченного «фасада» и «тыла». Две стороны обращены к другим магазинам, одна сторона обращена к торговому центру, а четвертая сторона обращена к парковке. Сторона магазина, выходящая на ТЦ, очевидно, должна быть привлекательной.Сторона, обращенная к парковке, не может быть проигнорирована в дизайне только потому, что ее можно рассматривать как «заднюю». Во-первых, люди, проезжающие по дороге, и покупатели, выходящие из припаркованной машины, сначала видят только эту сторону. Во-вторых, для удобства покупатель может войти в магазин с этой «тыльной» стороны. Если въезды выходят на парковку, то они должны быть спроектированы таким образом, чтобы они были приятными, и были отделены от грузовых площадок, а также чтобы движение пешеходов и транспортных средств было разделено.
Одно из возможных решений состоит в том, чтобы иметь пониженные грузовые пространства, то есть припарковать грузовики в небольшом углублении, чтобы пол магазина находился на уровне той части грузовика, в которой перевозятся товары. Таким образом, грузовик можно задним ходом подъехать прямо к погрузочной платформе (которая находится на уровне земли), и товары будут перемещены с грузовика без подъема или опускания. С такими пониженными грузовыми пространствами движение пешеходов может быть легче отделено от движения грузовиков и их грузов.
Какой бы тип погрузочных средств ни использовался, их размеры должны соответствовать размерам грузовиков, которые будут их использовать. Дэвид Р. Левин, в Зонирование погрузочно-разгрузочных сооружений (см. Библио) заключает:
… рекомендуется, чтобы размер причала для погрузки грузовиков вне улицы был определен как минимум 45 футов в глубину, 12 футов в ширину, с просветом над головой 14 футов. Стоянки для грузовиков для использования грузовиками меньшего размера могут быть уменьшены в размерах для размещения грузовиков, для обслуживания которых они предназначены.
Правила зонирования торговых центров
Важные положения о зонировании торговых центров были добавлены к ряду существующих или предлагаемых постановлений о зонировании. Недавно мы обратили внимание на два основных положения: одно в постановлении о зонировании Бисмарка, штат Северная Дакота, принятое в 1953 году, а другое — в постановлении о зонировании Канзас-Сити, штат Миссури, предложенном в 1953 году. Эти два положения полностью воспроизводятся здесь. Дело в том, что они являются одними из немногих попыток всестороннего рассмотрения торговых центров в постановлении о зонировании, и потому, что их чтение сейчас прояснит некоторые из проблем зонирования, поднятых торговыми центрами.
БИСМАРК, СЕВЕРНАЯ ДАКОТА (1953)
В любом коммерческом районе CC действуют следующие правила:
1. Общее описание. Коммерческий район CC создан как район, в котором основное использование земли предназначено для коммерческих и служебных целей для обслуживания окружающих жилых районов, и в котором движение транспорта и заторы на стоянках могут быть сведены к минимуму, чтобы сохранить жилые ценности и способствовать развитию. общее благосостояние окружающих жилых районов.Для коммерческого района CC в продвижении общих целей этого постановления конкретная цель этого раздела —
(a) Поощрять строительство и дальнейшее использование земли в жилых, коммерческих и служебных целях;
(b) Запретить жилое, крупное коммерческое и промышленное использование земли и запретить любое другое использование, которое могло бы существенно помешать развитию или продолжению строительства коммерческих структур в районе;
(c) Противодействовать любому использованию, которое из-за своего характера или размера могло бы помешать использованию земли в районе в качестве торгового и сервисного центра для близлежащих жилых районов.
2. Использование разрешено. Разрешены следующие виды использования:
а. Торговая группа A
б. Сервисная группа A
c. АЗС
d. Офисно-банковская группа
е. Коммерческая группа отдыха
f. Медицинская группа3. Площадь участка. No CC В коммерческом районе не должно быть менее двух акров. Участок для зонирования, на котором размещается отдельное здание, не должен иметь площадь менее 5 000 квадратных футов.Однако при условии, что здание, имеющее одну или несколько сторонних стен и общую крышу с одним или несколькими подобными зданиями, но находящимися в индивидуальной собственности, может быть на участке любого размера при соблюдении всех других положений этого постановления, включая все положения для Парковка во дворе и погрузка на этом участке полностью выполнены.
4. Ширина района. Каждый коммерческий район CC должен иметь среднюю ширину не менее 200 футов и не должен иметь граничной линии длиной менее 100 футов.
5. Коэффициент полезной площади. Соотношение площадей основного здания и всех вспомогательных зданий не должно превышать 0,25 для одноэтажных зданий и 0,35 для зданий более чем одного этажа. Площадь земельного участка, занимаемого основной и вспомогательной постройками, не должна превышать 25 процентов от общей площади участка.
6. Ярд. Ни одно здание не должно находиться на расстоянии менее 50 футов от линии участка.
7. Пределы высоты. Ни одно здание не должно превышать двух этажей или более 25 футов в высоту.
8. Разделенный район. Для целей расчета минимальной площади, ширины участка, размера участка, соотношения площадей, процента участка, занимаемого зданием, и требований дворов, установленных настоящим разделом, один коммерческий район CC не может располагаться по обе стороны от улицы общего пользования или аллея. Любая зона, обозначенная как коммерческая зона CC и лежащая по обе стороны от общественной улицы или переулка, считается двумя коммерческими районами CC, и все минимальные требования должны выполняться зданиями с каждой стороны указанной публичной улицы или переулка как отдельные районы. .
9. Несоответствующее использование. Цель этого постановления и данного раздела состоит в том, чтобы обозначить в качестве коммерческого района CC коммерческий район, в котором на дату принятия этого постановления имеется какое-либо жилое или иное несоответствующее использование. Дальнейшая цель этого постановления и этого раздела заключается в том, чтобы, насколько это возможно, все коммерческие и обслуживающие районы в новых застроенных частях города должны были располагаться в коммерческом районе CC, чтобы уменьшить загруженность движения и парковки и сохранить жилые ценности города.Комиссия по городскому планированию должна отказать в одобрении любого запроса о внесении поправки, переназначающей любую часть города в коммерческий район CC, если в этом районе есть какое-либо использование, которое было бы несоответствующим использованием после принятия Советом городских комиссаров предложенного поправка.
Парковка во дворе и требования к загрузке в коммерческих районах КЦ.
Невзирая на любые другие требования этого раздела, одно парковочное место во дворе на каждые 100 квадратных футов жилой площади, не включая кладовые в подвале, должно быть предоставлено для всех зданий, возводимых в коммерческом районе CC; и одно внешнее погрузочное место должно быть предусмотрено на каждые 25 000 квадратных футов общей общей площади пола для всех зданий в коммерческом районе CC.
КАНЗАС-СИТИ, МИССУРИ (предложено в 1953 г.)
Район C-S
Общие условия
Этот округ будет далее разделен на округа C-S1, C-S2 и C-S3 с требованиями, перечисленными ниже.
Округ CS может быть создан, примыкая и включающий части Округов C-1, C-2 или C-3, или на территории, которая находится в стадии застройки, на участке земли, находящемся в единоличной собственности, при условии, что подробные и конкретный план его развития был одобрен Комиссией городского планирования после общественных слушаний.Детальный план должен соответствовать Правилам и положениям, принятым Комиссией по городскому планированию, для представления, утверждения и развития планируемых торговых центров.
Если примыкает к району C-1 и включает в себя его части, участок земли, включенный для такого запланированного развития, должен быть размером не менее полутора (1-1 / 2) акра и, если он будет застроен совместно с районом C-2 или C-3 (или в районе, находящемся в стадии разработки), он должен быть размером не менее пяти (5) акров, чистая площадь не включает какие-либо участки выделенных улиц, шоссе или переулков.
Площадь, занимаемая зданиями в этом районе, должна составлять двадцать пять (25) или менее процентов чистой площади района.
Район C-S должен располагаться на участке, имеющем приемлемое отношение к основным транспортным артериям. Комиссия должна удостовериться в том, что проезжие части подходят для дополнительного трафика, вызванного застройкой, и может запросить отчет и рекомендацию Директора дорожного движения.
План предлагаемой застройки должен представлять собой унифицированное и организованное расположение зданий и служебных помещений, которые должны иметь функциональную связь с недвижимостью, включающей планируемую застройку, собственности и использования собственности, непосредственно примыкающей к предлагаемой застройке.
Застройщик должен удовлетворить Комиссию городского планирования относительно своих финансовых возможностей для выполнения предложенного плана и должен подготовить и представить график строительства, строительство которого должно начаться в течение одного года. Несоблюдение графика строительства влечет за собой недействительность утвержденного плана, если только продление не будет одобрено Комиссией.
Сторонники планируемого торгового центра должны подготовить и представить предварительный план и подтверждающие данные на рассмотрение и предварительное одобрение Комиссии городского планирования, после чего Комиссия городского планирования проведет общественные слушания.После утверждения предварительного плана развития, инициаторы должны подготовить и представить окончательный план развития, который должен включать любые изменения или дополнения, запрошенные Комиссией по городскому планированию.
Городской совет должен утвердить предварительный и окончательный планы до того, как включенная территория будет изменена на классификацию C-S.
Детали плана могут быть немного изменены с одобрения Комиссии городского планирования. О таком одобрении уведомляется Комиссар по делам зданий и инспекций.
План должен соответствовать следующим требованиям в отношении использования, высоты, площади двора, парковки и погрузки вне улицы, а также всех проездов или общественных подъездных путей.
Правила использования
В округе C-S разрешены следующие виды использования:
(a) Когда вместе с Округом C-1; Любое использование, разрешенное в Районе C-1, за исключением зданий муниципального и государственного назначения и теплиц.
(b) В сочетании с Районом C-2; То же, что и для Районов C-1 и C-2, за исключением парковок подержанных автомобилей, рекламных щитов и столбов, животных, выращиваемых на продажу, витрин, детских парков развлечений, коммерческих радио- и телевещательные станции и вышки, миниатюрные поля для гольфа и поезда, дорожки и кольца для пони, катки, складские помещения, а также трамвайные или автобусные сараи.
(c) В сочетании с Округом C-3; То же, что и для районов C-1, C-2 и C-3, за исключением парковок подержанных автомобилей, рекламных щитов и столбов, животных, выращенных на продажу, витрин, детских парков развлечений, коммерческих радио- и телевизионных станций и вышек, мини-гольфа. поля и поезда, дорожки и кольца для пони, катки, склады, трамваи или автобусные остановки, оружейные склады и кинотеатры.
Примечание: (В окончательном варианте все допустимые применения будут перечислены.)
Нормы высоты, двора и площади
Высота:
В Районе C-S1 высота не должна превышать трех (3) этажей и не должна превышать тридцати пяти (35) футов.
В районе C-S2 высота не должна превышать трех (3) этажей и не должна превышать сорока пяти (45) футов.
В Округе C-S3 высота не должна превышать шести (6) этажей и не должна превышать семидесяти пяти (75) футов.
Для некоторых индивидуальных зданий Комиссия по городскому планированию может разрешить дополнительную высоту, если такая высота не влияет отрицательно на развитие окружающей собственности.
Ярды:
В любом районе C-S должен быть отступ от любой улицы не менее двадцати (20) футов для любого здания или парковки.
Вдоль любой другой линии собственности в пределах установленного коммерческого района или рядом с ним должен быть отступ минимум на десять (10) футов. Это требование может быть изменено или отменено, если, по мнению Комиссии, пожарная полоса не рассматривается. быть необходимым.
Вдоль любой другой линии собственности, примыкающей к жилой зоне или примыкающей к ней, должно быть отступление не менее двадцати (20) футов, а территория между этим отступом и линией собственности должна быть задернована, засажена и засажена кустарниками таким образом, чтобы образуют постоянный экран.
Площадь:
Любое использование в жилых помещениях в пределах округа C-S должно соответствовать требованиям к площади земельного участка на семью в округе R-4. В этом районе не допускается размещение одно- и двухквартирного жилья.
Правила стоянки и погрузки
В районе C-S должно быть предоставлено место для парковки вне улицы для клиентов в соотношении одиннадцать (11) парковочных мест на каждые 1000 квадратных футов общей площади. Это место должно быть в дополнение к любому пространству, используемому под коммерческую стоянку, стоянку такси, стоянку для грузовиков и автобусов или место для погрузки.
В застройке должно быть предусмотрено достаточно места вне улицы для стоянки, погрузки и разгрузки. Каждое пространство должно состоять из площади десять (10) футов на двадцать пять (25) футов для небольших грузовиков, таких как пикапы, и пространства десять (10) футов на сорок пять (45) футов для больших грузовиков, включая тягачи с прицепом. Расстояние по высоте в обоих случаях должно быть не менее четырнадцати (14) футов.
Расположение любой подъездной дороги должно соответствовать правилам Департамента дорожного движения и подлежит проверке этим департаментом.
* * * * *
В таблице 3 сравниваются основные положения правил зонирования Бисмарка и Канзас-Сити. Преобладают правила двух типов: правила высоты, двора и площади; правила парковки и погрузки на улице.
Таблица 3
| Сравнительные стандарты для районов торговых центров | ||
| Стандарты | Bismarck (принят в 1953 г.) | Канзас-Сити (предложено на 1953 год) |
| Максимальная высота здания | 2 этажа (25 футов) | варьируется от: 3 этажей (45 футов) до: 6 этажей (75 футов) |
| Минимум ярдов | 50 футов | 20 футов (может быть 10 футов рядом с установленным коммерческим районом или может быть отменено, если пожарная линия будет сочтена ненужной. |
| Минимальная площадь всего района | 2 акра (86 500 квадратных футов) | 1-1 / 2 соток с районом С-1; 5 соток с С-2 и С-3 |
| Минимальная площадь лота | 5000 квадратных футов | Резерв по коммерческим лотам отсутствует; Жилые участки такие же, как R-4 для 3-х и 4-х семейных домов: 1 500 кв. Футов на квартиру — 1000 кв. Футов на единицу. |
| Максимальное покрытие лота | 25% лота | Общая площадь зданий 25% и менее от чистой площади района |
| Максимальная площадь этажа | 0.25 для одноэтажного; 0,35 для двухэтажных домов | Нет |
| Разрешенное использование * | Retail Group A; Сервисная группа А; Автозаправочная станция; Офисно-банковская группа; Коммерческая оздоровительная группа; Медицинская группа здоровья | В C-S1: все использует C-1, кроме двух; В C-S2: C-1 и C-2 используются с исключениями: В C-S3: C-1, C-2; и C-3 использует с исключениями. |
| Требуются парковочные места во дворе | 1 место на 100 кв. Футов жилой площади | 11 мест на каждую 1000 кв.футов жилой площади |
| Минимальный размер одного пространства | 200 квадратных футов плюс безопасное и достаточное пространство для маневрирования | 144 кв. Фута плюс доступ (8 футов на 18 футов) |
| Требуемое грузовое пространство | 1 место на каждые 25 000 кв. Футов. общей площади брутто | «Достаточно» |
| Минимальный размер грузового пространства | минимум 10 футов на 50 футов; 14 футов просвет | 10 футов на 25 футов для небольших грузовиков; 10 футов на 45 футов для больших грузовиков.Минимальное расстояние 14 футов |
* См. Таблицу 4
В таблице 4 сравнивается использование, разрешенное в коммерческом районе CC Бисмарк, с тем, которое разрешено в районах торгового центра CS (C-S1, C-S2, C-8S) предложения Канзас-Сити.
Таблица 4
| Использование, определенное как разрешенное в торговых центрах в районах Бисмарка и Канзас-Сити 1 | ||||
| CC | К-С1 | C-S2 | К-С3 | |
| (Бисмарк) | (Канзас-Сити) | |||
| Антикварный магазин | да | – | – | – |
| Магазин бытовой техники, радио и телевидения | да | – | – | – |
| Студия художников | – | да | да | да |
| Художественный магазин | да | – | – | – |
| Магазин автозапчастей | да | – | – | – |
| Авто прачечная | № | № | да | да |
| Автосервис | № | – | – | – |
| Помещения для продажи автомобилей или прицепов | – | № | да | да |
| * Хлебобулочные изделия (розница) | да | да | да | да |
| * Банк | да | да | да | да |
| Бар | да | № | да | да |
| Подставка для барбекю | – | № | да | да |
| * Парикмахерские | да | да | да | да |
| * Салоны красоты | да | да | да | да |
| Веломастерские | – | да | да | да |
| Рекламные щиты (см. Наружную рекламу) | ||||
| * Магазин книг, журналов, газет | да | да | да | да |
| Боулинг | да | – | – | – |
| Автовокзалы | – | № | да | да |
| Бизнес или коммерческие школы | № | № | да | да |
| Мясной магазин | да | – | – | – |
| Фотомагазин | да | – | – | – |
| * Магазин сладостей | да | да | да | да |
| Кошачьи и собачьи больницы | № | № | № | да |
| * Клиники | да | да | да | да |
| * Магазин одежды, аксессуаров | да | да | да | да |
| Коммерческое училище | да | № | да | да |
| Танцевальный зал | да | № | да | да |
| Танцевальные школы | – | да | да | да |
| * Деликатесы | да | да | да | да |
| Универмаг | да | – | – | – |
| Пеленки | № | № | № | да |
| Подъездные предприятия (за искл.рестораны и театры) | № | № | № | да |
| Автономные рестораны | – | № | да | да |
| * Аптека | да | да | да | да |
| Химчистка, крашение | – | да | да | да |
| Электротехнические магазины | – | да | да | да |
| Кормовые склады (без помола) | – | № | да | да |
| Праздники и уличные ярмарки | – | № | № | да |
| Кинообмен | – | № | № | да |
| Пять и десять центов | да | – | – | – |
| Ремонтные мастерские по ремонту электронных устройств, радио или телевидения | – | да | да | да |
| * Цветочный магазин | да | да | да | да |
| Ящики для замороженных продуктов (не коммерческие) | да | № | да | да |
| * Мебельный магазин | да | да | да | да |
| Гараж | № | да | да | да |
| * АЗС | да | да | да | да |
| * Общий кабинет | да | да | да | да |
| * Сувенирный магазин | да | да | да | да |
| Государственное учреждение | да | № | – | – |
| * Продуктовый магазин | да | да | да | да |
| * Строительный магазин | да | да | да | да |
| Товары для хобби | да | – | – | – |
| Мороженое | да | – | – | – |
| Станции выдачи льда | – | № | да | да |
| Страховая касса | да | – | – | – |
| * Ювелирный магазин | да | да | да | да |
| Печать заданий, публикация и т. Д. | – | № | да | да |
| * Прачечные | да | да | да | да |
| Прачечные | – | № | да | да |
| Пункты выдачи белья | – | да | да | да |
| Магазин спиртных напитков (упаковка) | да | № | да | да |
| Мясные рынки | – | да | да | да |
| Мотели | № | № | № | да |
| * Музыкальный магазин | да | да | да | да |
| * Понятие, универмаг | да | да | да | да |
| * Офис (общий) | да | да | да | да |
| * Канцелярский магазин | да | да | да | да |
| Вывеска наружная реклама | № | № | № | № |
| * Автостоянка (коммерческая) | да | да | да | да |
| Персональное кредитное агентство | да | – | – | – |
| Зоомагазины | – | № | да | да |
| * Фотостудия | да | да | да | да |
| Сантехнические мастерские (без обработки жести и хранения вне помещения | – | да | да | да |
| Бассейн или бильярдный зал | да | № | да | да |
| Профессиональный офис | да | – | – | – |
| Коммунальные станции | – | № | да | да |
| Риэлторская | да | – | – | – |
| ЖИЛОЙ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ | № | да | да | да |
| Каток роликовый | да | № | № | № |
| Салон | да | № | да | да |
| * Обувной магазин | да | да | да | да |
| Тир | – | № | № | № |
| Вывески, роспись и вывески | – | № | № | да |
| Магазин спорттоваров | да | – | – | – |
| Спортивная арена | да | № | № | № |
| * Магазин канцтоваров | да | да | да | да |
| Паровая баня | № | – | – | – |
| Таверна | да | № | да | да |
| Такси | да | – | – | – |
| Таксидермия | – | № | № | да |
| Телефонная станция | да | № | да | да |
| Театр | да | № | да | да |
| Ремонт шин и аккумуляторов | № | № | да | да |
| Туристические базы | № | № | № | да |
| Магазин игрушек | да | – | – | – |
| Профессиональные училища | да | № | № | да |
| Предприятие | № | № | да | да |
| Коммунальное отделение | да | – | – | – |
| * Разнообразный магазин | да | да | да | да |
| Складские услуги | № | № | № | да |
| Офис оптовых продаж, пробные помещения | № | № | да | да |
1.Пробелы указывают на то, что использование не разрешено или не запрещено в округе.
* Означает, что разрешено во всех четырех районах
Также разрешено в коммерческих районах CC: больница для людей, дом престарелых или выздоравливающий, дом престарелых, дом для сирот и санаторий.
«Намерение» или «идея» положения о торговом центре
О написании законов, учитывающих «все», не может быть и речи.Часто проблемы возникают в связи с законодательством, например постановлением о зонировании, которые не были предусмотрены авторами закона. Такие дела иногда попадают в суды, и суды иногда рассматривают эти дела с точки зрения «духа» закона или «намерений» тех, кто принял закон. Таким образом, Постановление Бисмарка включает ряд конкретных заявлений, детализирующих цель закона, настолько ясно, что суд, рассматривающий постановление, вряд ли может усомниться в целях закона.Обратите внимание, что в разделе «1. Общее описание» постановления указано, что цель коммерческого района CC:
(a) Поощрять строительство и дальнейшее использование земли в жилых, коммерческих и служебных целях;
(b) Запретить жилое, крупное коммерческое и промышленное использование земли и запретить любое другое использование, которое могло бы существенно помешать развитию или продолжению строительства коммерческих структур в районе;
(c) Противодействовать любому использованию, которое из-за своего характера и размера могло бы помешать использованию земли в районе в качестве торгового и сервисного центра для окружающих жилых районов.
Обратите внимание, что в разделе 9 «Несоответствующее использование» в постановлении четко указано его намерение. Ни один район не может быть обозначен как коммерческий район CC, если в нем ранее имеется жилое или иное использование, которое не соответствовало бы требованиям района CC. Постановление также дает четкую директиву Комиссии по городскому планированию не одобрять какие-либо запросы о переводе какой-либо части города в зону CC Commercial, если есть какое-либо использование, которое, таким образом, может стать несоответствующим.
Постановление о зонировании Ниагарского водопада, штат Нью-Йорк (1951 г.), содержит следующие положения в отношении торговых центров:
НИАГАРА ФОЛЛС, НЬЮ-ЙОРК (1951)
ТЦ Район
Правила для районов CD предназначены для обеспечения группировки зданий на земельном участке таким образом, чтобы они составляли гармоничный, эффективный и удобный торговый центр, а также для обеспечения средств, позволяющих создавать такие центры в качестве часть застройки частей города, которые на момент принятия настоящего постановления состояли из открытых площадей, такие районы должны создаваться время от времени путем внесения поправок в это постановление, состоящих из соответствующих изменений в границах районов, установленных настоящим постановление таким образом, чтобы наилучшим образом соответствовать общей схеме землепользования, установленной этим постановлением, в отношении жилой застройки, как это может происходить на вышеупомянутых открытых площадях, и для достижения целей, изложенных в Разделе 1 настоящего постановления.В любом районе КД расположение основных и вспомогательных зданий на участке и по отношению друг к другу, особенности движения транспорта на участке, высота и объем зданий, предоставление места для парковки во дворе и грузового пространства, обеспечение других открытых пространств на участке, обозначение определенных видов использования, как указано для районов CD в 1 (b) в разделе «Использование» в приведенном выше графике, и отображение знаков должно соответствовать плану или планам участка или последующим поправкам они утверждаются в любом случае советом по планированию в том же порядке, который установлен законом для утверждения площадей подразделения.При утверждении планов участка совет по планированию может действовать в соответствии с представленными ему планами участка или может действовать по собственной инициативе, предлагая и утверждая план участка. План участка может включать ландшафтный дизайн, заборы и стены, разработанные для достижения целей нормативных актов для районов C-D, и такие функции должны быть предусмотрены и поддерживаться в качестве условия создания и обслуживания любого использования, к которому они относятся. При рассмотрении любого плана участка для района CD, совет по планированию должен обеспечить безопасность и удобство движения транспорта, как в пределах торгового центра, охваченного планом, так и в отношении подъездных улиц, гармоничные и выгодные отношения между центром и прилегающей территорией и прилегающими территориями. окрестности.
Положение о Ниагарском водопаде — это в целом заявление о намерениях, дающее направление совету по планированию при рассмотрении любого плана участка для торгового центра. Совет по планированию, согласно положению постановления, «должен обеспечивать безопасность и удобство движения транспорта, как в пределах торгового центра, охваченного планом, так и в отношении подъездных улиц, гармоничные и выгодные отношения между центром и прилегающей территорией и прилегающими территориями. окрестности.»(Выделено)
Положение о Ниагарском водопаде поднимает важный вопрос: достаточно ли конкретны правила, чтобы совет по планированию имел четкое руководство при принятии своих решений? Если они недостаточно конкретны в глазах суда, суд может постановить, что данное положение представляет собой незаконное делегирование законодательной власти.
Постановление о зонировании Кливленда, Огайо (1951 г.) также содержит относительно общие, хотя и всеобъемлющие положения о торговых центрах. В Кливленде комиссия по планированию имеет право решать, есть ли в предлагаемом центре адекватная парковка, загрузка, ландшафтный дизайн и так далее.Резерв в полном объеме:
КЛИВЛЕНД, Огайо (1951)
ТЦ Районы
Определения. Для целей данной главы район торгового центра определяется как район розничной торговли в жилом районе или рядом с ним, характеризующийся концентрированной группировкой магазинов, магазинов и других разрешенных здесь видов использования, обычно планируемых как единое целое и построенных в соответствии с такой план. Обозначение «районы торговых центров» должно применяться ко всем районам, обозначенным таким образом на карте зоны застройки соответствующим символом, и ко всем местным коммерческим районам розничной торговли с глубиной участков более 200 футов и площадью более одного акра, а также, если такие местные предприятия розничной торговли Деловая зона отделена от линии улиц примыкающей к ней Зоной Общей розничной торговли, Район торгового центра должен включать такую Зону Общей розничной торговли.
Район торговых центров настоящим создается с целью обеспечения в таких группах магазинов, расположенных таким образом, безопасности движения за счет обеспечения надлежащей маршрутизации движения и парковки автомобилей, свободы от пробок на улицах общего пользования за счет обеспечения соответствующей парковки во дворе и вне улицы. уличная нагрузка и защита жилых районов за счет предоставления подходящих и подходящих обработанных открытых пространств для деловых зон на границах, прилегающих к жилой зоне.
Раздел 981-10.2 района ТЦ, согласование планов. Разрешение на строительство или заселение района торгового центра или его части не выдается, если планы не были одобрены Комиссией по городскому планированию в отношении условий парковки во дворе, положения погрузочных площадок, ширины и расположение проездов к автомобильным стоянкам и погрузочным площадкам, адекватность открытых пространств и пригодность их предполагаемого озеленения или иной обработки на границах, примыкающих или прилегающих к жилым кварталам.
Раздел 981-10.3 Районы ТЦ, разрешенная застройка и использование. В районе торгового центра разрешены следующие постройки и использование:
- Все виды использования разрешены и регулируются местным торговым районом.
- Торговля товарами общего назначения, в том числе в универмагах.
- Банки.
Единство собственности или управления: предлагаемое положение (1951 г.) для постановления о зонировании Аннаполиса, штат Мэриленд, гласит:
«…Для того, чтобы цель этих районов была реализована, здания и прилегающие объекты должны находиться в единой собственности или под управлением или надзором центрального органа, либо они должны подлежать другому надзорному договору аренды или контролю собственности, который может быть необходимым для выполнения положения этого постановления, касающегося районов общественных торговых центров … «
В положениях о Бисмарке или Канзас-Сити нет положений о единстве собственности. Считается, что авторы этих положений сознательно избегали требования единой собственности, чтобы избежать любых монополистических тенденций.
В Соединенных Штатах сегодня насчитывается более 4 миллионов предприятий, примерно по одному на каждые 38 человек в стране. Малый бизнес был и останется профессией для многих людей. В планируемом городе с планируемым торговым центром в единоличной собственности возможность открытия малого бизнеса в городе для жителей закрыта.
Какими бы ни были достоинства дела, требование единственного владения или управления ограничивает возможности роста новых предприятий.
Единство земли, не нарушенной общественными улицами и аллеями: , как мы уже отмечали, такое положение содержится в правилах торговых центров в Постановлении Бисмарка, Северная Дакота (см. Стр. 17, № 8).
Единый архитектурный подход: ряд положений требует единого дизайна.
Постановление о зонировании Вальпараисо, штат Индиана (1951 г.), гласит, что план торгового центра может быть одобрен, если отчет комиссии по городскому планированию показывает, среди прочего, что «весь комплекс спроектирован как единая архитектурная единица с соответствующими ландшафтно-архитектурная обработка всей территории объекта… «
Постановление в Аннаполисе, штат Мэриленд, предложенное в 1951 году, требует, чтобы «… Здания торговых центров должны проектироваться и строиться как единое целое, единый проект с хорошей архитектурой…»
К сожалению, единое архитектурное решение не является гарантией хорошего дизайна. Определение хорошего вкуса не входит в сферу действия постановления о зонировании.
Заключение
Наше заключение во многом похоже на наше введение. Торговые центры здесь, потому что они удобны, и они будут иметь все большее значение в автомобильную эпоху и, возможно, в эпоху вертолетов, если это произойдет.Кроме того, независимо от того, предназначены ли они для обслуживания региона, в котором проживает 100 000 или более человек, или для небольшого района из нескольких сотен семей, торговые центры представляют собой модернизацию многих существующих коммерческих кварталов. Они значительно облегчили проблему парковки возле магазинов и, в некоторых случаях, положили конец сочетанию жилых, легких и тяжелых коммерческих и даже промышленных целей, которые часто создавали нездоровую ситуацию. В современных торговых центрах квартир над магазинами не будет.
Предыдущее обсуждение не выявило четкого различия между соседними и региональными торговыми центрами. Фактически, существует лишь ограниченная разница в задачах планирования между ними. Вот несколько основных отличий:
- Региональный торговый центр по площади намного больше, чем районный торговый центр. Минимальные требования к площади в исследуемом торговом центре составляют примерно от одного акра до пяти акров. Региональному торговому центру может потребоваться до 100 акров или даже больше.Зона покрытия любого конкретного центра ограничена соотношением площадей, условиями покрытия здания и требуемой парковкой во дворе.
- Торговому центру по соседству может потребоваться меньше места для парковки, если он привлекает много посетителей. Предлагаемое требование к парковке для таких районных центров составляет 2: 1 (два квадратных фута парковочной площади на один квадратный фут чистой торговой площади), что равносильно заявлению 6,7 машиномест на 1000 квадратных футов площади пола (если каждая машина рассчитана на предполагается, что потребуется 300 квадратных футов парковки).
- Количество использований, которые обычно появляются в региональных торговых центрах, более ограничено. Очевидно, что существуют определенные виды использования, которые принадлежат соседям и которые на самом деле могут помешать нормальному функционированию более крупного торгового центра, как в случае с гаражами.
В принципе, все торговые центры имеют много общего. Что наиболее важно, они представляют собой явный разрыв со многими существующими и уже устаревшими коммерческими разработками для производства стрипов.
Приложение A
Сравнение между центральным деловым районом и предлагаемым торговым центром Southdale, St.Пол, Миннесота
Соперничество между центральными деловыми районами и отдаленными торговыми центрами является предметом серьезных споров и спекуляций. В следующей таблице представлена некоторая необычная информация, которая может прояснить факты взаимосвязи между двумя типами торговых зон. Таблица взята из Planning for St. Paul , публикации Совета городского планирования, 274 City-County Building, Сент-Пол, Миннесота, том 7, № 3, 20 апреля 1953 г. В таблице сравнивается центральный деловой район г.Пол (район, ограниченный Келлоггом, Маркетом, Восьмой улицей и Джексоном) с «Саутдейлом» (новый региональный торговый центр, запланированный компанией Dayton в Эдине).
Таблица 5
| Сравнение центрального делового района и предлагаемого торгового центра Southdale | |||
| Арт. | Центральный деловой район | Саутдейл | Центральный автобус сравнения. Расст. с «Саутдейл» |
| Размер участка (без улиц) | 57 соток | 84 соток | .68 большой |
| Арендная площадь (кв. Фут.) | 5 394 000 | 500,000 прогнозируется 850,000 потенциал | в 10,78 раза больше 6.34 «» « |
| Количество предприятий | 880 | 84 | в 10,5 раз больше |
| Парковочные места | 3,779 | 4,753 | 0,79 столько же |
| Соотношение: парковочное место на 1000 кв. Футов арендуемой площади | 1.4 | 8,26 | .16 больше |
| Население торговой площади (15 мин. По времени район) | 353 302 | 206 000 | в 1,71 раза больше |
| «Предполагаемый» годовой оборот | 110 000 000 долл. США | 32 000 000 долл. США | в 3,4 раза больше |
Интерпретация этой информации, которая может рассматриваться как типичная для сравнения торгового центра и делового района, является процессом, который вызовет дальнейшие споры.Доказывает ли эта таблица, что в центре города должно быть значительно больше парковочных мест? Или это доказывает, что центральный деловой район по своей природе не может обслуживать людей, передвигающихся на автомобилях, но что требуется улучшение условий общественного транспорта? Или все еще ясно, что проблемы городских заторов имеют множество причин и поэтому не имеют единого решения?
Библиография
Следующие ниже ссылки подчеркивают или содержат материалы, относящиеся к аспектам дизайна торговых центров.В библиографии двух предыдущих отчетов о торговых центрах перечислен ряд работ, посвященных анализу рыночного потенциала и работы магазинов.
АРХИТЕКТУРНЫЙ ЗАПИСЬ. Октябрь 1953 г. Торговые центры, исследование типов зданий, номер 203 , стр. 179–205.
БЕЙКЕР, Джеффри, и ФУНАРО, Бруно. Торговые центры: проектирование и работа. Reinhold Publishing Corporation, Нью-Йорк, 1951. 288 стр., Индекс. (12,00 долларов США). (Наиболее полное руководство по торговым центрам на сегодняшний день опубликовано.Семь глав по анализу, проектированию и эксплуатации. Описание и анализ, некоторые более подробные, чем другие, 63 торговых центров.)
СЕТЬ МАГАЗИНОВ ВОЗРАСТ. Май 1953 г. Административное издание. Сеть магазинов в Планируемом ТЦ. с. 23–59. Цикл статей о торговом центре. ( Сеть магазинов Age — ежемесячное издание Lebhar-Friedman Publications, Inc., 185 Мэдисон Авеню, Нью-Йорк, 16, Нью-Йорк. Выпущено в девяти различных изданиях, предназначенных для руководителей различных типов сетевых магазинов.3 доллара в год в США, 4 доллара в Канаде.)
ГРУЭН, Виктор. «Транспортное воздействие регионального торгового центра». Traffic Engineering , март 1953 г., стр. 191–4, 202.
ГРУЭН, Виктор и СМИТ, Лоуренс П. «Торговый центр: новый тип здания. 11 Progressive Architecture , июнь 1952 г., стр. 67–109. (Содержит историю, определения, схему этапов планирования, дизайн и т. Д. сокращенное руководство. Груэн — архитектор, а Смит — экономист по недвижимости.)
ОПРОС ТОРГОВ: Интервью с покупателем из Спокана.Комиссия по планированию города Спокана, комната 451, мэрия, Спокан, Вашингтон, июль 1952 г. Таблицы на 76 стр. (Предоставляет данные о продолжительности покупок, сумме потраченных денег, способе передвижения и необходимости парковки по типу магазина.)
TATLOW III, Р. Х. «Паркингтон: Дизайн торгового центра». In Traffic Quarterly , октябрь 1952 г., стр. 440–456.
ГОРОДСКОЙ ЗЕМЕЛЬНЫЙ ИНСТИТУТ. Торговые центры: анализ . Технический бюллетень № 11, Институт городских земель, Вашингтон, округ Колумбия.C. 1949, 48 с. $ 5,00. (Общее обсуждение торговых центров и индивидуальный анализ 17 центров.)
Специальные исследования по стоянке и загрузке грузовиков, использованные в этом отчете:
АМЕРИКАНСКАЯ АВТОМОБИЛЬНАЯ АССОЦИАЦИЯ. Департамент дорожного движения и безопасности, Вашингтон 6, округ Колумбия Руководство по парковке . 181 с. схемы, схемы, илл. 1946.
ЛЕКРАУ, младший, Чарльз С. и СМИТ, Уилбур С. Эксплуатация стоянки. Опубликовано Фондом управления дорожным движением Ино, Саугатук, Коннектикут, 1948 г., 114 стр.графики, таблицы, диаграммы, иллюстрации.
ЛЕВИН, Дэвид Р. Зонирование грузовых объектов. Бюллетень № 59, Совет по исследованиям автомобильных дорог, Национальная академия наук, Национальный исследовательский совет, 2101 Конституция-авеню, Вашингтон, 25, округ Колумбия, 1952 г. 101 стр. Иллюстрации, таблицы, диаграммы, диаграммы. 1,50 доллара США. (Превосходное исследование требований к оборудованию для погрузки и разгрузки внедорожных грузовиков в зонировании и других местных постановлениях, включая рекомендации г-на Левина.)
Авторское право, Американское общество должностных лиц по планированию, 1954 г.
Торговый центр PruneYard против Робинса
Фотография и пример вывески «Пожалуйста, не помогайте солиситорам» (через два месяца больше не будет на том же сайте) в магазине Wal-Mart в Маунтин-Вью, Калифорния, расположенном в торговом центре Сан-Антонио. В результате рассмотрения дела Верховного суда США о свободе слова iPruneYard Shopping Center v. Robins, 447 U.S. 74 (1980), аналогичные знаки часто можно увидеть в крупных торговых центрах США.С. штат Калифорния. (Изображение с Wikimedia Commons, добросовестное использование)
В деле PruneYard Shopping Center v. Robins , 447 US 74 (1980) Верховный суд постановил, что Калифорния может толковать конституцию штата для защиты политических протестующих от выселения из частной собственности, открытой для публики, не вступая в конфликт с Пятая поправка. В этом деле суд Калифорнии вышел за рамки федерального правила и постановил, что в соответствии с конституцией Калифорнии владелец торгового центра не может исключать группу старшеклассников, которые занимались политической защитой.Решение государственного суда было принято в той или иной форме значительным меньшинством штатов.
Студенческие активисты подали в суд на ТРЦ за то, что их выгнали
Некоторые старшеклассники, заручившись поддержкой своей оппозиции резолюции Организации Объединенных Наций против сионизма, установили стол в торговом центре PruneYard, чтобы распространять литературу и собирать подписи под петицией. Охранник велел им уйти, поскольку они нарушали правила торгового центра, запрещающие «публично выражать свое мнение».Студенты подали иск в суд штата Калифорния, утверждая, что их право на свободу слова было нарушено.
Верховный суд удовлетворил иск студентов о свободе слова в соответствии с конституцией штата
Верховный суд Калифорнии отклонил требования студентов о свободе слова как в соответствии с федеральной конституцией, так и конституцией штата. Однако Верховный суд Калифорнии отменил это решение, установив, что студенты имеют право на свободное выражение своего мнения в соответствии с конституцией штата. Затем торговый центр обратился в U.С. Верховный суд. Верховный суд отклонил довод торгового центра о том, что право государства на свободу слова равносильно «изъятию» торгового центра в соответствии с федеральным законом.
Решение подтвердило, что государства могут предоставить своим гражданам большие свободы
Решение имеет важное значение для конституционного права штата, подтверждая представление о том, что верховный суд штата вправе толковать конституцию своего штата для обеспечения большей защиты личных свобод, чем Верховный суд США в соответствии с Биллем о правах.Решение Верховного суда по делу PruneYard также имеет большое значение, поскольку оно разрешает штату Калифорния подрывать право исключать, традиционно одно из наиболее важных прав частной собственности, в интересах общества в целом и без какой-либо компенсации в соответствии с «сборами». » пункт. Таким образом, он представляет собой важный прецедент вне контекста Первой поправки и сохраняет актуальность для горячо оспариваемого закона о «регулирующих сборах».
Дело добавлено в судебную практику, касающееся свободы слова в частной собственности
Основное дело Верховного суда Калифорнии продолжило разработку свода законов, касающихся свободы слова в отношении частной собственности, который был начат Верховным судом США в деле Marsh v.Алабама (1946), Lloyd Corporation Ltd. против Таннера (1972) и Объединенный профсоюз работников пищевой промышленности 590 против Logan Valley Plaza (1968). В деле Marsh Суд постановил, что протестующим в городе, принадлежащем компании, не может быть предъявлено уголовное обвинение в нарушении права владения, тогда как в Lloyd и Logan Суд соответственно расширил, а затем отозвал защиту Первой поправкой к политическим выступлениям, проводимым в частной собственности. торговые центры.
Эта статья была первоначально опубликована в 2009 году.Пол Гаудер — профессор права в Притцкеровской школе права Северо-Западного университета и в прошлом юрист по гражданским правам и юридической помощи. Он также является автором книги «Верховенство закона в реальном мире» (Cambridge University Press, 2016).
Отправить отзыв об этой статьеПоследние достижения и противоречия в области сердечно-легочной реанимации у взрослых
Postgrad Med J. 2007 Oct; 83 (984): 649–654.
Для корреспонденции: доктору Ванису Х. Ибрагиму
Отделение легочной медицины, Общая больница Хамад, Доха, а / я 3050, Катар; wanisian @ yahoo.com
Поступила в редакцию 08.01.2007; Принято 18 июля 2007 г.
Copyright © 2007 The Fellowship of Postgraduate Medicine Эта статья цитируется в других статьях PMC.Abstract
С момента своего появления более четырех с половиной десятилетий назад наука о сердечно-легочной реанимации обогатилась значительным количеством научных данных. Это, в свою очередь, привело к рождению новых основанных на фактических данных рекомендаций по реанимации, опубликованных Европейским советом по реанимации и Американской кардиологической ассоциацией в конце 2005 года.Эта статья направлена на обзор последних достижений и противоречий в области реанимации.
Ключевые слова: сердечно-легочная реанимация, СЛР, дефибрилляция
Сердечно-легочная реанимация (СЛР) является одним из ключевых аспектов клинической практики. Отсрочка СЛР после остановки сердца часто приводит к плохому исходу. Каждую минуту без СЛР выживаемость после остановки сердца при фибрилляции желудочков (ФЖ) снижается на 7–10%. 1 Ишемическая болезнь сердца — основная причина смерти в мире. 2 , 3 , 4 , 5 , 6 Внезапная остановка сердца (ВСС) является причиной более 60% смертей взрослых от ишемической болезни сердца. 7 По оценкам Центров по контролю и профилактике заболеваний США, около 330 000 человек ежегодно умирают от ишемической болезни сердца. Около 250 000 из этих смертей происходят вне больниц. 7 , 8 , 9 В исследовании OPALS в Канаде (Онтарио Prehospital Advanced Life Support Study) сообщается, что частота остановки сердца вне больницы составляет 0.6 на 1000 населения в год. 10 Данные из Шотландии и пяти других европейских городов показали, что ежегодная частота реанимационных мероприятий по поводу внебольничной остановки сердца с сердечной этиологией составляет 50–66 на 100 000 населения. 11 , 12 VF — преобладающий ритм, встречающийся в первые 3-5 минут после внезапной остановки сердца вне больницы. 13 В этом ритме, несовместимом с жизнью, левый желудочек развивает очень быстрый ритм, который препятствует откачке крови к телу.Немедленная терапия с дефибрилляцией — единственное эффективное лечение, и реанимация наиболее успешна, если дефибрилляция выполняется примерно в первые 5 минут после коллапса. 14 , 15 , 16 Немедленная СЛР с компрессией грудной клетки и вентиляцией обеспечивает небольшое, но критическое количество крови к сердцу и мозгу в ожидании прибытия дефибриллятора. СЛР увеличивает вероятность того, что шок прекратит ФЖ. СЛР особенно важна, если разряд не проводится в течение 5 или более минут после коллапса. 17 , 18 , 19 Таким образом, многие жертвы SCA могут выжить, если посторонние начнут действовать немедленно, пока ФЖ еще присутствует, но успешная реанимация маловероятна, если ФЖ переросла в асистолию. 1 С момента своего появления более четырех с половиной десятилетий назад, 20 наука о СЛР обогатилась значительным количеством научных данных. Это, в свою очередь, привело к рождению новых основанных на фактических данных рекомендаций по реанимации, опубликованных Европейским советом по реанимации (ERC) и Американской кардиологической ассоциацией (AHA) в конце 2005 года. 19 , 20 , 21 , 22 Цель этой статьи — обзор последних достижений в области реанимации.
Bystander CPR
Чтобы улучшить добольничную помощь жертвам остановки сердца, AHA и ERC используют четыре звена в действии, называемых цепочкой выживания, в которой последовательность вмешательств приводит к повышению выживаемости после остановки сердца. Эти ссылки: 5 , 6 , 19 :
Раннее распознавание неотложной помощи и активация службы неотложной медицинской помощи (EMS)
Ранняя СЛР сторонним наблюдателем — немедленная СЛР может удвоить или утроить работу пострадавшего. шанс на выживание после остановки сердца
Раннее применение дефибриллятора — СЛР плюс дефибрилляция в течение 3–5 минут после коллапса может обеспечить выживаемость до 49–75%
Ранняя продвинутая поддержка жизни с последующей последующей -Реанимационная помощь, предоставляемая поставщиками медицинских услуг.
Прохожие могут выполнять три из четырех звеньев в цепи выживания. Когда прохожие распознают аварийную ситуацию и активируют систему неотложной помощи, они гарантируют, что поставщики базовых и дополнительных услуг жизнеобеспечения будут отправлены на место аварии. Во многих сообществах временной интервал от вызова EMS до прибытия EMS составляет 7–8 минут. Это означает, что в первые минуты после обрушения основную роль в СЛР будет играть посторонний человек. Следовательно, успешные действия спасателя на месте остановки сердца крайне важны и критичны по времени.Каждую минуту без СЛР выживаемость после очевидной остановки сердца при ФЖ снижается на 7–10%. 1 При проведении СЛР сторонним наблюдателем выживаемость уменьшается постепенно и составляет в среднем 3–4% в минуту от коллапса до дефибрилляции. Было показано, что СЛР сторонним наблюдателем удваивает или утроивает шансы на выживание от очевидной остановки сердца с множеством разных интервалов до дефибрилляции. 1 , 23 , 24 , 25 Litwin et al 26 смотрели на выживаемость в зависимости от места обрушения.Пациенты, у которых была остановка сердца на публике, с большей вероятностью были свидетелями их ареста и с большей вероятностью получили реанимацию от посторонних, чем пациенты, у которых была остановка сердца дома (69% против 49%). Выживаемость среди пациентов, перенесших остановку сердца в общественных местах, была намного выше, чем среди пациентов, перенесших остановку сердца дома (27% против 13%). Принимая во внимание время до дефибрилляции и то, был ли арест засвидетельствован, большая часть этой разницы может быть объяснена более высокой частотой реанимации, которую проводят прохожие на публике.
Слишком часто пациенты с остановкой сердца дома не получают СЛР от членов семьи. 27 В отчете Сиэтлской программы по наблюдению за сердечно-сосудистыми заболеваниями сравнивались результаты пациентов, реанимированных на месте происшествием, прохожим, обученным искусству сердечно-легочной реанимации, с пациентами, которые первоначально получали сердечно-легочную реанимацию у персонала скорой помощи. 28 Хотя не было существенной разницы в процентном отношении пациентов, реанимированных на месте происшествия и поступивших в больницу живыми (67% против 61%), процент выписанных живыми был значительно выше среди тех, у кого СЛР инициировали сторонний наблюдатель (43% против 22 %).В исследовании OPALS, 10 было показано, что выживаемость при остановке сердца вне больницы значительно улучшилась за счет трех изменяемых факторов: СЛР граждан (стороннего наблюдателя); пожарная и полицейская СЛР; и ответ с помощью автоматического дефибриллятора через 8 минут или меньше. 10 , 29 Кроме того, это исследование показало, что единственным изменяемым фактором, связанным с очень хорошим качеством жизни, была СЛР, инициированная гражданами. Исследование четко определило, что инициированная гражданами случайная СЛР является сильным и независимым предиктором очень хороших функциональных результатов для выживших после остановки сердца вне больницы. 30
Таким образом, мы должны полагаться на обученную и готовую публику, чтобы начать СЛР и обратиться за профессиональной помощью и ранней дефибрилляцией. Основываясь на этих фактах, многие страны недавно начали государственные учебные программы, которые включают обучение использованию СЛР и использования автоматического внешнего дефибриллятора (АВД) для оказания первой помощи. Однако, несмотря на недавний акцент на важности СЛР по инициативе свидетелей и расширение государственных программ обучения, СЛР проводится только при трети или меньше арестов со свидетелями в западных обществах. 30 , 31 , 32 Почему прохожие не хотят проводить СЛР, до сих пор не ясно. Причиной этому могут быть неадекватные методы обучения, сложные инструкции или страх перед передаваемыми заболеваниями. 19 Частые, более короткие и более доступные курсы СЛР для общественности могут быть подходящим решением. 33
Распознавание остановки сердца и дыхания
В последних рекомендациях AHA и ERC по реанимации от 2005 г., 19 , 21 , для непрофессиональных спасателей не проводилась первоначальная проверка пульса как признак остановки сердца и дыхания, так как это занимает слишком много времени и имеет низкую точность.Время, затрачиваемое на попытки подтвердить наличие или отсутствие пульса на сонной артерии непрофессиональными спасателями, может значительно задержать начало сердечных сокращений. Поэтому непрофессиональные спасатели должны начинать СЛР, если пострадавший не реагирует и не дышит нормально. Только обученные спасатели или медицинские работники должны проверять пульс сонной артерии и, если он отсутствует, должны быть готовы немедленно выполнить компрессию грудной клетки. В исследовании Eberle et al. , 34 было обнаружено, что диагностическая точность проверки пульса сонной артерии непрофессионалами составляет всего 65%.Bahr et al. 35 также обнаружили, что навыки непрофессионалов в проверке пульса сонной артерии не соответствуют действительности для подтверждения наличия или отсутствия кровообращения. Агональные вздохи обычно возникают в первые несколько минут SCA. Прохожие, когда диспетчеры скорой помощи спрашивают по телефону, присутствует ли дыхание, часто ошибочно принимают агональные вздохи за нормальное дыхание. Поэтому непрофессионалов следует научить начинать СЛР, если пострадавший находится без сознания и не дышит нормально. Во время тренировки следует подчеркнуть, что агональные вздохи обычно возникают в первые несколько минут после ВКА, и они являются показанием для немедленного начала СЛР, и их не следует путать с нормальным дыханием. 21
Степень сжатия и вентиляции
Прерывание компрессий грудной клетки во время СЛР отрицательно сказывается на выживаемости после остановки сердца. 36 При прекращении компрессий грудной клетки коронарный и церебральный кровоток существенно уменьшается. При возобновлении компрессий грудной клетки необходимо выполнить несколько компрессий, прежде чем коронарный кровоток восстановится до прежнего уровня. 37 В первые минуты VF SCA содержание кислорода в крови остается высоким, а снабжение миокарда и мозга кислородом ограничивается в большей степени сниженным сердечным выбросом, чем недостатком кислорода в легких.Следовательно, вентиляция, по-видимому, не так важна, как компрессии грудной клетки, но, по-видимому, способствует выживанию после длительной остановки асфиксии. 38 Очевидно, что скорость вентиляции, необходимая для поддержания нормального соотношения вентиляция-перфузия во время СЛР, намного меньше нормальной из-за низкого кровотока в легких. Последние данные показывают, что ненужные перерывы в компрессионных сжатиях грудной клетки часто происходят во время внутрибольничной и внебольничной СЛР. 39 , 40 , 41 , 42
На сегодняшний день нет данных о людях, которые определили бы оптимальную степень сжатия и вентиляции для СЛР.Математические модели и модели на животных показали, что согласование легочного кровотока и вентиляции может быть более подходящим при соотношении компрессия-вентиляция выше 15: 2. 43 , 44 Недавняя модель на свинье, сравнивающая клинические и гемодинамические параметры при остановке сердца при ФЖ, показала, что увеличение соотношения компрессия-вентиляция с 15: 2 до 30: 2 привело к увеличению сердечного выброса на 30% и удвоению крови в общей сонной артерии. поток. 45 Для достижения оптимальной степени сжатия и уменьшения частоты перерывов в сжатии единогласно было рекомендовано универсальное соотношение компрессия – вентиляция 30: 2. 46
Время дефибрилляции и СЛР перед дефибрилляцией
Ранняя дефибрилляция имеет решающее значение для выживания после SCA по нескольким причинам. Во-первых, наиболее частым исходным ритмом при наблюдаемой ВКА является ФЖ. Во-вторых, лечением ФЖ является электрическая дефибрилляция. В-третьих, вероятность успешной дефибрилляции со временем быстро уменьшается. Наконец, ФЖ имеет тенденцию к ухудшению до асистолии в течение нескольких минут. 1 , 19 Таким образом, дефибрилляция как можно скорее является стандартным лечением при ФЖ.В исследовании с участием более 12 000 пациентов, пролеченных EMS, 4546 были свидетелями VF. Для этих пациентов более короткий интервал ответа на дефибрилляцию значительно коррелировал с повышенным шансом выживания до выписки из больницы. 47 В лабораторных исследованиях успешность дефибрилляции при ФЖ составляет практически 100% сразу после индукции этого ритма. Успех снижается примерно до 80–90% после 60 с устойчивой ФЖ, а после 20 мин устойчивой ФЖ восстановление ритма перфузии происходит редко. 48 , 49 В исследовании 148 пациентов с внебольничной остановкой сердца в казино США у 105 была ФЖ.Выживаемость составила 74% для пострадавших, которым была проведена первая дефибрилляция в течение первых 3 минут после коллапса. Для тех, кто получил первую дефибрилляцию после первых 3 минут, выживаемость составила всего 49%. 13
В исследовании, посвященном изучению отдаленных результатов остановки сердца при ФЖ вне больницы у пациентов, которым была проведена успешная ранняя дефибрилляция (среднее (стандартное отклонение) время 5,7 (1,6) мин), не было обнаружено различий в отдаленных исходах выживаемости между эти пациенты и пациенты, у которых не было остановки сердца. 50 Таким образом, ранняя дефибрилляция полезна и эффективна, если ее применять в течение 4–5 минут после начала остановки сердца вне больницы. На Международной конференции 2005 года по вопросам сердечно-легочной реанимации и неотложной сердечно-сосудистой помощи, 51 , был поднят важный вопрос, основанный на некоторых недавних доказательствах: следует ли сначала выполнить дефибрилляцию или сначала выполнить СЛР с последующей дефибрилляцией, особенно если более 4–5 мин. прошел от обморока до вмешательства спасателя у пострадавших с остановкой сердца при ФЖ.В исследованиях на животных длительная ФЖ более 7 минут лечилась более эффективно, если перед дефибрилляцией выполнялась 5-минутная СЛР. 52 , 53 В двух исследованиях на людях остановки ФЖ вне больницы, когда интервал между вызовом скорую помощь и доставкой первоначального разряда составлял 4–5 минут или более, период СЛР перед попыткой дефибрилляции улучшенная выживаемость. 11 , 12
Одно рандомизированное исследование, однако, показало эквивалентную выживаемость, когда сначала выполнялась либо СЛР, либо дефибрилляция для любого интервала между вызовом и разрядом неотложной помощи. 54 По общему мнению, данных для рекомендации СЛР перед дефибрилляцией всем пострадавшим от ФЖ SCA недостаточно. Непрофессиональные спасатели должны использовать AED, как только он станет доступен. Спасатели скорой помощи могут провести пять циклов (около 2 минут) СЛР перед попыткой дефибрилляции для лечения внебольничной остановки сердца или желудочковой тахикардии (ЖТ) без пульса, особенно когда интервал ответа скорой помощи (вызов к прибытию) превышает 4– Через 5 минут или респонденты скорой помощи не наблюдали остановки сердца.Директора скорой медицинской помощи могут создавать системные протоколы на основе среднего интервала отклика их системы. Когда присутствует несколько спасателей, один из них может выполнять СЛР, в то время как другой готовит дефибриллятор, тем самым обеспечивая как немедленную СЛР, так и раннюю дефибрилляцию. Данных было недостаточно, чтобы определить, следует ли применять эту рекомендацию при остановке сердца в больнице, какова идеальная продолжительность СЛР перед попыткой дефибрилляции и продолжительность ФЖ, при которой спасатели должны сначала переключиться с дефибрилляции на СЛР. 46
Сценарий с одним разрядом вместо трех
До сих пор не проводилось исследований на людях, чтобы сравнить протокол с одним разрядом с протоколом с тремя разрядами для лечения остановки сердца при ФЖ. 19 Тем не менее, есть несколько веских причин для предпочтения протокола с одним разрядом по сравнению с протоколом с тремя разрядками. 19 Во-первых, исследования на животных показали, что частые или длительные перерывы в сжатии грудной клетки для анализа ритма были связаны с постреанимационной дисфункцией миокарда и снижением выживаемости. 55 Было также показано, что прерывание сжатия грудной клетки снижает вероятность преобразования ФЖ в другой ритм. 56 , 57 Во-вторых, анализ ритма для последовательности из трех разрядов, выполняемый коммерчески доступными АВД, приводит к задержкам до 37 с между нанесением первого разряда и применением первых компрессионных сжатий после разряда. 55 В-третьих, эффективность использования современных двухфазных дефибрилляторов при первом разряде оказалась более 90%. 58 , 59 , 60 , 61 , 62 , 63 , 63 Если первый разряд не устраняет VF, дополнительная польза от другого разряда незначительна, и немедленное возобновление СЛР может вызвать большее значение, чем другой шок. 19 Опасения по поводу того, что компрессия грудной клетки может спровоцировать рецидив ФЖ при наличии организованного ритма после шока, кажутся необоснованными. 63 По этим причинам протокол с одним разрядом в сочетании с немедленной СЛР после электрошока (без проверки ритма или пульса) кажется разумным и был включен в недавние рекомендации по реанимации в качестве замены старого сценария с тремя электрошоками. 19
Использование автоматических внешних дефибрилляторов в общественных местах
AED — это легкие компьютеризированные устройства, содержащие аккумулятор, конденсаторы и электронные схемы для анализа сердечного ритма и информирования оператора о необходимости дефибрилляции (рис. 1). AED были описаны как «единственное величайшее достижение в лечении остановки сердца при ФЖ после развития СЛР». 64 Эти устройства оказались чрезвычайно безопасными и высокоточными при обнаружении опасного для жизни сердечного ритма.Чувствительность и специфичность для обнаружения VF или быстрой VT составляют 98% и 100% соответственно. 65 , 66 , 67 , 68 , 69 , 70 Эффективность ПЭП в улучшении выживаемости после остановки сердца вне больницы была показана во многих исследованиях. В исследовании, проведенном Валенсуэлой и др. , 13 AED были развернуты в казино, и сотрудники казино были обучены их использованию. Благодаря этому вмешательству время от коллапса до применения первого разряда было сокращено до среднего значения 4.4 мин и выживаемость увеличилась до 53%. В недавнем рандомизированном исследовании, проведенном Hallstrom и др. , 71 , более 19 000 добровольцев из торговых центров, развлекательных заведений, жилых домов и других общественных единиц были обучены выполнять только СЛР или СЛР плюс использование АВД. Пациенты, получавшие лечение у добровольцев, обученных методам СЛР и АЭД, имели значительно более высокую вероятность получить шок, не связанный с ЭМС, и значительно более вероятно, что они дожили до выписки.
Рисунок 1 Автоматический внешний дефибриллятор, используемый населением.
Другие аналогичные исследования также показали значительное улучшение выживаемости при внебольничной остановке сердца, когда ПЭП использовались населением. 72 Кроме того, в недавних клинических испытаниях 39 , 40 модифицированных прототипов АВД записывали информацию о частоте и глубине компрессий грудной клетки во время СЛР. Если такие устройства станут коммерчески доступными, AED однажды могут побудить спасателей улучшить показатели СЛР. 19 AHA рекомендовала разработать специальные учебные программы, называемые программами дефибрилляции в открытом доступе (PAD), которые включают обучение использованию AED прохожими в общественных местах. 73 , 74 , 75 Цель этих программ — сократить время от начала ФЖ до сердечно-легочной реанимации и электрошока, обеспечив наличие автоматических дефибрилляторов и обученных непрофессиональных спасателей в общественных местах, где может возникнуть SCA. Сотрудники службы общественной безопасности (например, полиция, пожарные, сотрудники службы безопасности, лыжные патрули и бортпроводники) и члены семей пациентов, перенесших инфаркт миокарда, должны быть обучены и оснащены для проведения ранней дефибрилляции с помощью AED. 76
Сравнение монофазных и двухфазных сигналов и доза разряда
Существует два типа дефибрилляторов, в зависимости от формы волны, которую они производят: однофазные и двухфазные дефибрилляторы. Монофазные дефибрилляторы, которые больше не производятся, подают однополярный ток (одно направление тока). Двухфазные дефибрилляторы, напротив, подают ток, который течет как в положительном, так и в отрицательном направлении. Существует два типа двухфазных сигналов: двухфазный усеченный экспоненциальный (BTE) и прямолинейный двухфазный (RLB).Оба типа показали свою эффективность при прекращении VF. Было показано, что эффективность первого разряда при длительной ФЖ и ЖТ выше для двухфазных, чем для монофазных волн, поэтому по возможности рекомендуется использование двухфазных дефибрилляторов. 57 , 77 Испытание ORBIT (внебольничное прямолинейное двухфазное исследовательское исследование) 77 показало, что прямолинейные двухфазные волны дефибрилляции при 120 Дж и 200 Дж превосходили монофазные формы волн при 200 Дж и 360 Дж соответственно. в преобразовании VF в организованный ритм.Однако, хотя была отмечена более высокая вероятность успешного восстановления электрической активности, показатели выживаемости до госпитализации и выписки из больницы были сопоставимы с монофазными формами волн. Оптимальные уровни энергии (ударные дозы) как для монофазных, так и для двухфазных дефибрилляторов неизвестны.
Рекомендация использовать стратегию одного разряда создала новую задачу определения оптимальной энергии для начального разряда. В исследовании остановки сердца вне больницы эффективность первого разряда с использованием 360 Дж не превосходила эффективности 200 Дж, а повторные разряды в более высокой дозе были связаны с большей атриовентрикулярной блокадой без доказательств долгосрочного вреда. 78 , 79 Таким образом, уровни энергии основаны на консенсусе после тщательного изучения текущей литературы. 21 Целесообразно использовать выбранные значения энергии 150–200 Дж для двухфазного усеченного экспоненциального сигнала или 120 Дж для прямолинейного двухфазного сигнала и 360 Дж для однофазных дефибрилляторов.
Вставка 1: Краткое изложение последних достижений в области сердечно-легочной реанимации
СЛР сторонним наблюдателем может значительно повысить шансы на выживание при очевидной остановке сердца
Непрофессиональным спасателям не рекомендуется проверять кровообращение путем пальпации пульса сонной артерии
Прерывания компрессионных сжатий грудной клетки во время СЛР пагубно влияют на выживаемость, поэтому их следует минимизировать
Ранняя дефибрилляция очень важна для определения выживаемости после остановки сердца при ФЖ / ЖТ. дефибрилляторный шок с последующими 2 минутами непрерывной СЛР кажется разумным и более полезным, чем протокол с тремя электрошоками
Двухфазные дефибрилляторы превосходят монофазные дефибрилляторы в преобразовании ФЖ в организованный ритм, и их использование рекомендуется, когда это возможно
Использование AED общественностью было показано повысить выживаемость после остановки сердца вне больницы
Пациенты, которые остаются без сознания со спонтанным кровообращением после остановки сердца при ФЖ вне больницы, должны получать терапию гипотермией
Вызвание постреанимационной гипотермии
Роль Лечебная гипотермия в постреанимационной помощи широко изучалась в течение последнего десятилетия.В двух проспективных рандомизированных исследованиях сообщалось об улучшении результатов, когда у пациентов в коматозном состоянии, госпитализированных в больницу после остановки сердца при ФЖ, вызванной преднамеренной гипотермией при температуре 32–34 ° C, были выявлены улучшения. 80 , 81 В одном из этих двух испытаний 273 пациента были рандомизированы для лечения либо терапевтической гипотермией (32–34 ° C в течение 24 часов), либо нормотермией; 75 из 136 пациентов (55%) в группе гипотермии были выписаны живыми с хорошим неврологическим исходом через 6 месяцев после выписки, по сравнению с 54 из 137 (39%) пациентов в группе нормотермии. 80 Второе испытание также показало лучшую выживаемость в группе гипотермии (49%) по сравнению с группой нормотермии (26%). 81 Пациентам, остающимся в коме после восстановления спонтанного кровообращения после очевидной остановки сердца при ФЖ, настоятельно рекомендуется лечение гипотермией. 82 Роль лечения гипотермии после остановки сердца в больнице или остановки других ритмов остается неубедительной, и для решения этих проблем необходимы дальнейшие исследования.
Вставка 2: Спорные вопросы при СЛР
Исследования на людях для определения оптимального соотношения компрессия – вентиляция во время СЛР отсутствуют; консенсусом было рекомендовано соотношение 30: 2
Нет достаточных данных, чтобы рекомендовать СЛР перед дефибрилляцией для всех жертв остановки сердца при ФЖ
Оптимальные уровни энергии (ударные дозы) как для монофазных, так и для двухфазных дефибрилляторов: неизвестно
Роль терапевтической гипотермии после остановки сердца в больнице неизвестна
В настоящее время недостаточно доказательств, подтверждающих или опровергающих использование вазопрессина в качестве альтернативы или в комбинации с адреналином при любом ритме остановки сердца
Адреналин в высоких дозах и использование вазопрессина
Несмотря на то, что он используется при остановке сердечно-сосудистой системы более четырех десятилетий, оптимальная доза адреналина (адреналина) в этой ситуации все еще неизвестна.Доказательства, подтверждающие использование дозы 1 мг каждые 3-5 минут, получены в исследованиях на животных. Недавно некоторые исследования на животных показали, что использование гораздо более высоких доз адреналина (0,2 мг / кг) улучшает выживаемость после остановки сердца. 83 , 84 Однако три крупных рандомизированных испытания на людях показали, что, несмотря на улучшение показателей восстановления спонтанного кровообращения, не было статистически значимой разницы в выживаемости до госпитализации или выписки из больницы между стандартным и высокими дозами адреналина. 85 , 86 , 87 Следовательно, высокие дозы адреналина не могут быть рекомендованы при остановке сердца.
Использование вазопрессина при остановке сердца и легких в качестве альтернативы адреналину является предметом многочисленных дискуссий в последние годы. Небольшие исследования на людях показали, что использование вазопрессина во время остановки сердца и легких является многообещающим в отношении восстановления спонтанного кровообращения и скорости выписки из больницы. 88 , 89 По результатам этих небольших исследований AHA рекомендовала использовать вазопрессин в качестве альтернативы адреналину для лечения рефрактерной ФЖ у взрослых. 90 Однако два недавних рандомизированных исследования, сравнивающих вазопрессин с адреналином при остановке сердца в стационаре и вне больницы, не смогли продемонстрировать общего увеличения скорости восстановления спонтанного кровообращения или выживаемости для вазопрессина по сравнению с адреналином. 91 , 92
Недавний метаанализ пяти рандомизированных исследований не показал статистически значимых различий между вазопрессином и адреналином в отношении восстановления спонтанного кровообращения, смерти в течение 24 часов или смерти до выписки из больницы. 93 На Международной конференции по СЛР в 2005 г. было достигнуто согласие о том, что в настоящее время недостаточно доказательств, подтверждающих или опровергающих использование вазопрессина в качестве альтернативы или в комбинации с адреналином при любом ритме остановки сердца. 51 Адреналин по-прежнему считается основным вазопрессором при остановке сердца. Отдельные реанимационные советы должны будут определить роль вазопрессина в своих рекомендациях по реанимации.
Заключение
СЛР сторонним наблюдателем является наиболее важным фактором выживания после внебольничной остановки сердца.Самая большая проблема для успешной реанимации вне больницы — это улучшение обучения непрофессиональных спасателей по СЛР. Повышение эффективности обучения, улучшение удержания навыков за счет частых и коротких курсов СЛР и уменьшение препятствий для действий для базовых и продвинутых поставщиков жизнеобеспечения имеют решающее значение для достижения этой цели. Непрофессиональные спасатели должны начать СЛР, если пострадавший не отвечает и не дышит нормально. Непрофессиональные спасатели не рекомендуют проверять кровообращение путем пальпации пульса на сонной артерии.Следует обращать внимание на минимизацию перерывов в компрессионных сжатиях грудной клетки во время СЛР, и следует попытаться вызвать постреанимационную гипотермию после восстановления спонтанного кровообращения после очевидной остановки сердца при ФЖ. Недостаточно данных, чтобы рекомендовать использование вазопрессина в качестве альтернативы или в комбинации с адреналином при СЛР (вставки 1 и 2).
Аббревиатуры
AED — автоматический внешний дефибриллятор
AHA — Американская кардиологическая ассоциация
BTE — двухфазная усеченная экспоненциальная
CPR — сердечно-легочная реанимация
EMS — служба экстренной медицинской помощи
OPC — European Resuscation Advanced Life Support Study
ORBIT — внебольничное прямолинейное двухфазное исследование
PAD — дефибрилляция в открытом доступе
RLB — прямолинейная двухфазная
SCA — внезапная остановка сердца
VT — фибрилляция желудочков
— фибрилляция желудочковСноски
Заявление о конфликте интересов: у автора нет финансового или иного конфликта интересов
Ссылки
1.Ларсен М. П., Айзенберг М. С., Камминз Р. О. и др. Прогнозирование выживаемости после остановки сердца вне больницы: графическая модель. Ann Emerg Med 19652–1658. [PubMed] [Google Scholar] 2. Мюррей К. Дж., Лопес А. Д. Причинная смертность в восьми регионах мира: исследование глобального бремени болезней. Lancet 199734–1276. [PubMed] [Google Scholar] 3. Sans S, Kesteloot H, Kromhout D. Бремя смертности от сердечно-сосудистых заболеваний в Европе. Рабочая группа Европейского общества кардиологов по статистике сердечно-сосудистой смертности и заболеваемости в Европе.Eur Heart J 1997181231–1248. [PubMed] [Google Scholar] 4. Кестелут Х., Санс С., Кромхаут Д. Эволюция всех причин и смертности от сердечно-сосудистых заболеваний в возрастной группе 75–85 лет в Европе в период 1970–1996 годов: сравнение с мировыми изменениями. Eur Heart J 200223384–398. [PubMed] [Google Scholar] 5. Фокс Р. Тенденции смертности от сердечно-сосудистых заболеваний в Европе. Тираж 1997963817 [PubMed] [Google Scholar] 6. Леви Ф., Луккини Ф., Негри Э. и др. Тенденции смертности от сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний в Европе и других регионах мира.Сердце 200288119–124. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 7. Чжэн З. Дж., Грофт Дж. Б., Джайлз В. Х. и др. Внезапная сердечная смерть в США, 1989–1998 гг. Обращение 20011042158–2163. [PubMed] [Google Scholar] 8. Chugh S. S., Jui J, Gunson K. et al. Текущее бремя внезапной сердечной смерти: наблюдение из нескольких источников по сравнению с ретроспективным обзором на основе свидетельств о смерти в большом сообществе США. Дж. Ам Колл Кардиол 2004441268–1275. [PubMed] [Google Scholar]9. Центры по контролю и профилактике заболеваний Система запросов и отчетов по статистике травм (Wis QARS) (онлайн).Центры по контролю и профилактике заболеваний. www.cdc.gov/ncipc/wisqars
10. Stiell I G, Wells G A, Field B J. и др. Повышение выживаемости после остановки сердца за счет недорогой оптимизации существующей программы дефибрилляции: фаза III исследования OPALS. Улучшенная система добольничного жизнеобеспечения Онтарио. JAMA 199175–1181. [PubMed] [Google Scholar] 11. Пелл Дж. П., Сирел Дж. М., Марсден А. К. и др. Представление, лечение и исход внебольничной остановки сердца: сравнение по основной этиологии.Сердце 200389839–842. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 12. Херлитц Дж., Бахр Дж., Фишер М. и др. Реанимация в Европе: рассказ о пяти европейских регионах. Реанимация 1991–131. [PubMed] [Google Scholar] 13. Валенсуэла Т. Д., Роу Д. Дж., Никол Г. и др. Результат быстрой дефибрилляции сотрудниками службы безопасности после остановки сердца в казино. N Engl J Med 20003431206–1209. [PubMed] [Google Scholar] 14. Vaillancourt C, Stiell I. G. Помощь при остановке сердца и неотложная медицинская помощь в Канаде.Может Дж. Кардиол 2004201081–1090. [PubMed] [Google Scholar] 15. Реа Т.Д., Айзенберг М.С., Синибальди Г. и др. Частота внебольничной остановки сердца, вызванной неотложной медицинской помощью, в США. Реанимация 20046317–24. [PubMed] [Google Scholar] 16. Кобб Л.А., Фаренбрух С.Е., Олсуфка М. и др. Изменение частоты внебольничной фибрилляции желудочков, 1980-2000. JAMA 20022883008–3013. [PubMed] [Google Scholar] 17. Кобб Л. А., Фаренбрух С. Е., Уолш Т. Р. и др. Влияние сердечно-легочной реанимации перед дефибрилляцией у пациентов с внебольничной фибрилляцией желудочков.JAMA 199182–1188. [PubMed] [Google Scholar] 18. Вик Л., Хансен Т. Б., Филлинг Ф. и др. Отсроченная дефибрилляция, чтобы дать базовую сердечно-легочную реанимацию пациентам с внебольничной фибрилляцией желудочков: рандомизированное исследование. JAMA 200328–1395. [PubMed] [Google Scholar] 19. Американская кардиологическая ассоциация. Рекомендации Американской кардиологической ассоциации по сердечно-легочной реанимации и неотложной сердечно-сосудистой помощи. Circulation 2005112 (Suppl) [Google Scholar] 20. Кувенховен В. Б., Джуд Дж. Р., Никербокер Г. Г.Сообщение о закрытой грудной клетке. JAMA 19601371064–1067. [PubMed] [Google Scholar] 21. Европейский совет по реанимации Рекомендации Европейского совета по реанимации по реанимации 2005 г. Реанимация 2005 г. –50. [PubMed] [Google Scholar] 30. Steill I, Nichol G, Wells G. et al. Качество жизни, связанное со здоровьем, лучше для переживших остановку сердца, получивших гражданскую сердечно-легочную реанимацию. Тираж 20031081939–1944. [PubMed] [Google Scholar] 31. Камминс Р. О., Орнато Дж. П., Тис В. и др. Повышение выживаемости после внезапной остановки сердца: концепция «цепочки выживания»: заявление для медицинских работников подкомитета ACLS и комитета ECC.АГА. Тираж 19 51. Международная консенсусная конференция Anon по сердечно-легочной реанимации и неотложной сердечно-сосудистой помощи с рекомендациями по лечению. 23–30 января 2005 г., Даллас [PubMed] [Google Scholar] 85. Steill I.G, Hebert M.D., Weitzman B.N. и др. Адреналин в высоких дозах при остановке сердца у взрослых. N Engl J Med 19 Абидин, И.Х.З., Пиа, З.Х.М., и Усман, С.Б. (2016). Изучение предшественников перекрестного покупательского поведения среди потребителей в Селангоре. Экономика процедур и финансы, 37 (16), 397–404. DOI: 10.1016 / S2212-5671 (16) 30143-5. Abrudan, I.N., & Dabija, D.-C. (2014). Измерение удовлетворенности клиентов торговыми центрами — эмпирические данные из Румынии.Экономика процедур и финансы, 15 (14), 1243–1252. DOI: 10.1016 / S2212-5671 (14) 00584-X. Albayrak, T., & ömen, N. (2017). Межнациональное исследование предшественников удовлетворенности покупками. Журнал отпускного маркетинга, 23 (4), 355–364. DOI: 10.1177 / 1356766716671164. Альхути, С., Гиллеспи, Э.А., Чанг, В., и Дэвис, Л. (2015). Тонкая грань между любовью и ненавистью к вниманию: опыт покупок. Журнал теории и практики маркетинга, 23 (4), 415–433.DOI: 10.1080 / 10696679.2015.1049687. Аттри, Р., и Джайн, В. (2018). Исследование факторов, влияющих на покупательское поведение. IUP Journal of Marketing Management, 17 (1), 38–52. Получено с http://web.b.ebscohost.com.bzc4lmu4085c.han.sub.uni-goettingen.de/ehost/detail/detail?vid=0&sid=adef6679-b1dc-4f94-9112-5a2a0e4c61fd%40pdc-v- sessmgr01 & bdata = JnNpdGU9ZWhvc3QtbGl2ZQ% 3D% 3D # db = bth & AN = 128113666. Багдаре, С., и Рой, С. (2017). Visual scape: шкала для измерения визуального опыта в розничной торговле.Ежеквартальный маркетинг услуг, 37 (4), 272–287. DOI: 10.1080 / 15332969.2016.1217684. Барон Р.М. и Кенни Д.А. (1986). Различие переменной модератор-посредник в социальных исследованиях Различие переменной модератор-посредник в социально-психологическом исследовании: концептуальные, стратегические и статистические соображения. Журнал личности и социальной психологии, 51 (6), 1173–1182. DOI: 10.1037 / 0022-3514.51.6.1173. Бхалерао, Х. (2017). Влияние эмоционального интеллекта на удовлетворенность клиентов и повторяющееся покупательское поведение среди молодых потребителей: оценка умеренной роли сознания здоровья зубов.Южноазиатский журнал менеджмента, 24 (4), 88–109. Choi, H., & Kandampully, J. (2018). Влияние атмосферы на привлечение клиентов в высококлассных отелях: применение парадигмы S-O-R. Международный журнал гостиничного менеджмента, 77, стр. 40-50. DOI: 10.1016 / j.ijhm.2018.06.012. Дедеоглу, Б. Б., Билгихан, А., Е, Б. Х., Буонинконтри, П., и Окумус, Ф. (2018). Влияние servicescape на гедонистические ценности и поведенческие намерения: важность предыдущего опыта.Международный журнал гостиничного менеджмента, 72 (апрель), 10–20. DOI: 10.1016 / j.ijhm.2017.12.007. Гильбоа, С., Вилнай-Явец, И., и Чебат, Дж. К. (2016). Улавливание разнообразных аспектов работы торгового центра: разработка и проверка шкалы. Журнал потребительского поведения, 15 (1), 45–49. DOI: 10.1002 / cb. Хасан А. (2015). Ключевые факторы, влияющие на покупательское поведение в розничных магазинах. Журнал Inspiration Economy ISSN J. Ins. Экон. J. Ins. Экон, 2 (1), 2384–4752.Получено с http://journals.uob.edu.bh. Инман, Дж. Дж., И Николова, Х. (2017). Технология розничной торговли, ориентированная на покупателя: структура принятия решений розничным продавцом, учитывающая отношение покупателей и соображения конфиденциальности. Журнал розничной торговли, 93 (1), 7–28. DOI: 10.1016 / j.jretai.2016.12.006. Джайн, С., Хан, М.Н., и Мишра, С. (2015). Факторы, влияющие на намерение приобрести предметы роскоши: концептуальная основа, основанная на расширении теории запланированного поведения. Южноазиатский журнал менеджмента, 22 (4), 136–163.Получено с http://eds.a.ebscohost.com.liverpool.idm.oclc.org/eds/pdfviewer/[email protected] 5 & vid = 16 & hid = 4111. Джайн, С., Хан, М.Н., и Мишра, С. (2017). Понимание поведения потребителей в отношении модных предметов роскоши в Индии на основе теории запланированного поведения. Журнал азиатских бизнес-исследований, 11 (1), 4–21. DOI: 10.1108 / JABS-08-2015-0118. Джаясанкарапрасад, К. (2014). Кросс-форматное поведение потребителей при покупках на развивающемся розничном рынке: множественный дискриминантный анализ.Журнал международного потребительского маркетинга, 26 (1), 29–57. DOI: 10.1080 / 08961530.2014.848081. Цзян Ю., Сяо, Л., Джалис, Т., Накви, М. Х., и Заман, С. И. (2018). Моральные и этические предпосылки отношения к контрафактным предметам роскоши: данные Пакистана. Финансы и торговля развивающихся рынков, 54 (15), 3519–3538. DOI: 10.1080 / 1540496X.2018.1480365. Kim, J. W., Lee, F., & Suh, Y.G. (2015). Удовлетворение и лояльность от опыта торгового центра и личности бренда.Ежеквартальный маркетинг услуг, 36 (1), 62–76. DOI: 10.1080 / 15332969.2015.976523 Кушваха, Т., Убежа, С., и Чаттерджи, А.С. (2017). Факторы, влияющие на выбор торговых центров: исследовательское исследование восприятия потребителей. Видение: Журнал деловой перспективы, 21 (3), 274–283. DOI: 10.1177 / 0972262 Kusumowidagdo, A., Sachari, A., & Widodo, P. (2016). Восприятие посетителями важных факторов дизайна атриумов в торговых центрах: исследование Gandaria City Mall и Ciputra World в Индонезии.Границы архитектурных исследований, 5 (1), 52–62. DOI: 10.1016 / j.foar.2015.11.003. Лай, К., и Нгуен, М. К. (2017). Факторы, влияющие на качество обслуживания, удовлетворенность клиентов и лояльность поставщиков услуг мобильной связи во Вьетнаме. Международный журнал организационных инноваций, 10 (2), 75–86. Ллойд, А.Е., Чан, Р.Й.К., Ип, Л.С.С., и Чан, А. (2014). Покупка времени и экономия времени: влияет на удобство обслуживания и качество покупок в торговом центре.Журнал маркетинга услуг, 28 (1), 36–49. DOI: 10.1108 / JSM-03-2012-0065. Люсия-Паласиос, Л., Перес-Лопес, Р., и Поло-Редондо, Ю. (2015). Когнитивные, аффективные и поведенческие реакции в торговом центре. Международный журнал управления розничной торговлей и распределением, 44 (1), 4–21. DOI: 10.1108 / MRR-09-2015-0216. Luk, S.T.K., Sharma, P., & Chen, I.S.N. (2013). Мотивация покупателя как модератор в оценке розничных услуг. Журнал маркетинга услуг, 27 (1), 40–48.DOI: 10.1108 / 08876041311296365. Мехта, Р., Шарма, Н.К., и Свами, С. (2013). Влияние воспринимаемого скопления людей на намерения потребителей покровительствовать магазинам: роль оптимального уровня стимуляции и мотивации к покупкам. Журнал управления маркетингом, 29 (7–8), 812–835. DOI: 10.1080 / 0267257X.2012.729075. Мухаммад, Н.С., Муса, Р., и Али, Н.С. (2014). Раскрытие влияния атмосферы магазина на гедонический опыт и лояльность к магазину. Процедуры — Социальные и поведенческие науки, 130, 469–478.DOI: 10.1016 / j.sbspro.2014.04.055. Насиб С., Шах У. и Ян С. (2018). Роль качества обслуживания и удовлетворенности клиентов в работе фирмы: данные из Пакистана. Пакистанский журнал торговли и социальных наук (PJCSS), 12 (1), 167–182. Ортегон-Кортасар, Л., и Ройо-Вела, М. (2018). Природа в торговых центрах: влияние окружающей среды на познавательный образ, эмоциональную реакцию и поведение посетителей. Европейские исследования в области управления и экономики предприятия, (2017), 1–10.DOI: 10.1016 / j.iedeen.2018.08.001 Овьедо-Гарсия, М.Б., Вега-Васкес, М., Кастелланос-Вердуго, М., и Рейес-Гизар, Л.А. (2016). Удовлетворение туристов и покупка сувениров отечественными туристами: расширенные выходные в Испании. Актуальные проблемы туризма, 19 (8), 845–860. DOI: 10.1080 / 13683500.2013.877423 Panda, R., & Swar, B.N. (2013). Интернет-магазины: исследовательское исследование для определения детерминант покупательского поведения. Международный журнал Business Insights & Transformation, 7 (1), 52–59.Взято с http://content.ebscohost.com/pdf29_30/pdf/2013/89ZU/01Oct13/96263935.pdf?T=P&P=AN&K=96263935&S=R&D=buh&EbscoContent=dGJyMMvl7ESeprU4yOvqOLCmr0news_dgJyMMvl7ESeprU4yOvqOLCmr0yep_vqOLCmr0y0y_dg_dg_dg_dg_dg_d_d_0_0_0_0_0_0_0_0_04 Парботия, Д.В., Тейлор, округ Колумбия, и Барбер, Н.А. (2016). Изучение импульсной покупки вина в онлайн-среде. Журнал винных исследований, 27 (4), 322–339. DOI: 10.1080 / 09571264.2016.1204597. Петруцеллис, Л., Chebat, J.-C., & Palumbo, A. (2015). «Эй, Ди-Джей, давай сыграем эту песню и заставим меня делать покупки весь день». Влияние известной фоновой музыки на покупательское поведение потребителей. Идеи в маркетинге: поиск нового и полировка старого, 8 (2), 756–765. DOI: 10.1007 / 978-3-319-10951-0_278. Прашар С., Гупта С., Сингх Х., Виджай Т.С. и Парсад К. (2016). Кластеризация покупателей по опыту торговых центров для развивающегося индийского города. Журнал Азиатской академии менеджмента, 21 (2), 53–73.DOI: 10.21315 / aamj2016.21.2.3. Прашар, С., Сай Виджай, Т., и Парсад, К. (2017). Влияние ценностей онлайн-покупок и подсказок веб-сайтов на покупательское поведение: исследование с использованием концепции S – O – R. Журнал для лиц, принимающих решения, 42 (1), 1–18. DOI: 10.1177 / 02560686681. Родригес М., Паредес Ф. и Йи Г. (2016). На пути к будущему клиентскому опыту: тенденции и инновации в розничной торговле. Форсайт и управление в сфере НТИ, 10 (3), 18–28. DOI: 10.17323 / 1995-459X.2016.3.18.28. Rousseau, G.G., & Venter, D.J.L. (2014). Торговые предпочтения торговых центров и покровительство зрелых покупателей. С.А. Журнал промышленной психологии, 40 (1), 1–13. DOI: 10.4102 / sajip.v40i1.1175. Сео, Дж. И Намвамба, Г.В. (2014). Исследование участия продукта в покупательском поведении среди студентов мужского пола. Исследование участия продукта в покупательском поведении среди студентов мужского колледжа, 3 (3), 81–102. Стин, Дж. К.(2011). Как мотивация покупателей к покупкам влияет на воспринимаемый дизайн розничной среды. Атлантический журнал маркетинга, 5 (1), 1–14. Получено с http://digitalcommons.kennesaw.edu/amj/vol5/iss2/8/%5Cnpapers3://publication/uuid/29B4A57D-5A7B-48C7-BD4E-613F943CD820. Teik, D.O.L., Hao, G.Y., Juniaty, I., Lirn, J.W., Jhet, Rick, L.A., & Gullantheivello, S. a / p. (2015). Исследование атмосферы торгового центра в экспериментальных покупках в праздничный сезон: на примере торговых центров Малайзии.Международный обзор бизнес-исследований, 11 (1), 133–146. Вега-Васкес, М., Кастелланос-Вердуго, М., и Овьедо-Гарсия, М.А. (2017). Ценность шоппинга, удовлетворенность туристов и положительная молва: посредническая роль удовлетворенности покупкой сувениров. Актуальные проблемы туризма, 20 (13), 1413–1430. DOI: 10.1080 / 13683500.2014.996122. Wei Khong, K., & Sim Ong, F. (2014). Восприятие и лояльность покупателей: стохастический подход к моделированию поведения в торговом центре.Международный журнал управления розничной торговлей и распределением, 42 (7), 626–642. DOI: 10.1108 / IJRDM-11-2012-0100. Венди Гао, Б. и Лай, I.K.W. (2015). Влияние удовлетворенности транзакцией и комплексного удовлетворения на лояльность клиентов. Международный журнал гостиничного менеджмента, 44, 38–47. DOI: 10.1016 / j.ijhm.2014.10.004. Wong, I.K.A., & Lam, I.K.V. (2016). Многоуровневое исследование роли розничных магазинов в трансграничных покупках.Журнал путешествий и туристического маркетинга, 33 (6), 837–853. DOI: 10.1080 / 10548408.2015.1068265. Wong, I.K.A., & Wan, Y.K.P. (2013). Систематический подход к масштабному развитию удовлетворенности туристов покупками: увязка атрибутов места назначения и опыта покупок. Журнал путешествий, 52 (1), 29–41. DOI: 10.1177 / 0047287512457263. Yim, M.Y.C., Yoo, S.C., Sauer, P.L., & Seo, J.H. (2014). Гедоническая мотивация к покупкам и влияние со-покупателя на утилитарные покупки продуктов в супермаркетах.Журнал Академии маркетинговых наук, 42 (5), 528–544. DOI: 10.1007 / s11747-013-0357-2. Юн, С.Дж. (2013). Антецеденты и последствия опыта в магазине, основанные на экспериментальной типологии. Европейский журнал маркетинга, 47 (5), 693–714. DOI: 10.1108 / 030 Desulfovibrio desulfuricans штамм G11 (DSM 7057) был извлечен из нашей собственной коллекции культур в Лаборатории микробиологии (Университет и исследовательская лаборатория Вагенингена).Если не указано иное, его выращивали в стеклянных флаконах объемом 250 мл, содержащих 100 мл аноксической среды. Среда состояла из основной забуференной бикарбонатом среды, содержащей следующие компоненты (в граммах на литр) Na 2 HPO 4 · 2H 2 0, 0,53; КН 2 ПО 4 , 0,41; NH 4 Cl, 0,3; CaCl 2 · 2H 2 0, 0,11; MgCl 2 · 6H 2 0, 0,10; NaCl 0,3; NaHCO 3 , 4,0 и Na 2 S · 9H 2 0, 0.48. Кроме того, были добавлены кислотные и щелочные растворы микроэлементов (оба по 1 мл на литр) и раствор витаминов (0,2 мл на литр). Раствор кислотных микроэлементов содержал (в мМ): FeCl 2 , 7,5; H 3 BO 4 , 1; ZnCl 2 0,5; CuCl 2 , 0,1; MnCl 2 0,5; CoCl 2 0,5; NiCl 2 , 0,1 и HCl, 50. Раствор щелочного микроэлемента содержал (в мМ): Na 2 SeO 3 , 0,1; Na 2 WO 4 , 0.1; Na 2 МоО 4 , 0,1; и NaOH, 10. Раствор витаминов содержал (грамм на литр): биотин 0,02; ниацин 0,2; пиридоксин 0,5; рибофлавин 0,1; тиамин 0,2; цианокобаламин 0,1; п-аминобензойная кислота 0,1 и пантотеновая кислота 0,1 12 . В базальную среду добавляли 20 мМ сульфата, а свободное пространство бутылок заполняли H 2 / CO 2 (1,5 атм, 80:20 об / об), чтобы получить H 2 в качестве донора электронов и CO 2. в качестве источника углерода для автотрофного роста.Для гетеротрофных (ацетат / H 2 / CO 2 / сульфат) условий в культуры дополнительно вводили 2 мМ ацетата. В гетеротрофные культуры на лактате добавляли 20 мМ лактата в качестве единственного источника энергии с N 2 / CO 2 (1,5 атм, 80:20, об. / Об.) В качестве газовой фазы. К форматотрофным культурам добавляли 20 мМ формиата в качестве углерода и источника энергии с N 2 / CO 2 (1,5 атм, 80:20, об. / Об.) В качестве газовой фазы. Культуры инкубировали при 30 ° C в темноте. За ростом в автотрофных и гетеротрофных условиях наблюдали в культурах, выращенных, как указано выше, при встряхивании при 175 об / мин для оптимального газообмена. Использовали 10% инокулят (при 70% экспоненциальной фазы) из культур, выращенных в соответствующих автотрофных и гетеротрофных условиях. Были взяты пробы газа и жидкости для определения оптической плотности при 600 нм (OD 600 ) и концентраций сульфидов, сульфатов, органических кислот и H 2 .Для определения сульфатов и органических кислот аликвоты жидкой пробы объемом 1 мл центрифугировали 5 мин при 10000 g. Концентрации сульфатов определяли с использованием ионного хроматографа Dionex ICS 2100 (Thermo Scientific, Саннивейл, Калифорния), оборудованного колонкой Dionex ™ IonPac ™ AS16 при 30 ° C и детектором проводимости. Тридцать микролитров культуральной жидкости объединяли с 970 мкл внутреннего стандарта (0,25 мМ йодида натрия), из которых вводили 10 мкл. Гидроксид калия (22%) использовали в качестве элюента в многоступенчатом градиенте от 1 до 45 мМ при скорости потока 0.4 мл в мин. Стандартная кривая была построена так же, как и для пробоподготовки; самая низкая из включенных концентраций была 0,5 мМ сульфата, который все еще можно было обнаружить. Количество органических кислот определяли с помощью жидкостной хроматографии высокого давления с использованием Shimadzu LC-2030C, оборудованного колонкой Metacarb 67H (Agilent Technologies, Санта-Клара, Калифорния), работающей при 45 ° C, с 0,01 NH 2 SO 4 в качестве элюента при скорость потока 0,9 мл / мин. Четыреста микролитров культуральной жидкости объединяли с 600 мкл внутреннего стандарта (30 мМ арабиноза, 0,01 мкл).1 M H 2 SO 4 ) и 30 мкл вводили. Определение органических кислот проводили с помощью детектора RI. Стандартная кривая была построена так же, как и для пробоподготовки; самая низкая включенная концентрация составляла 0,05 мМ как для формиата, так и для ацетата, которые все еще можно было обнаружить. Для измерения содержания сульфидов 10–50 мкл жидких образцов добавляли к 5 мл воды с 4 мМ ZnCl 2 и сразу же измеряли с помощью колориметрического анализа метиленового синего 43 .Водород контролировали с помощью газовой хроматографии с использованием Compact GC 4.0 (Global Analyzer Solutions, Бреда, Нидерланды), оборудованного предварительной колонкой Carboxen 1010 и колонкой Molsieve 5A, работающей при 90 ° C. Детектор ионизации импульсного разряда работал при 110 ° C. В качестве газа-носителя использовался гелий, а в качестве внутреннего стандарта — 5% криптона. Рост контролировали по оптической плотности при 600 нм (OD 600 ) с использованием спектрофотометра Shimadzu UV-1800. Культуры регулярно проверяли на чистоту.Для этого 1 мл свежей культуры центрифугировали, осадок дважды промывали стерильным ТЕ-буфером. Затем осадок ресуспендировали в 100 мкл ТЕ и 1 мкл использовали в качестве матрицы для ПЦР. ПЦР проводили в реакциях, содержащих 50 мкл реакционного буфера Green GoTaq, 0,2 мМ dNTP, 0,02 ед. Мкл ДНК-полимеразы -1 GoTaq (Promega, Мэдисон, США) и 0,2 мкМ прямого праймера 27 f (5′-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3 ′) И 1492r (5′-TACGGYTACCTTGTTACGACTT-3 ′), нацеленные на ген 16S рРНК (M = A или C, Y = C или T).Была включена ПЦР отрицательного контроля без ДНК-матрицы. Программа амплификации состояла из начальной стадии денатурации при 95 ° C в течение 15 минут, 30 циклов денатурации при 95 ° C в течение 1 минуты, 40 секунд при 52 ° C для отжига и элонгации при 72 ° C в течение 1 минуты, а затем заключительный этап удлинения при 72 ° C в течение 7 мин. Продукты ПЦР очищали с помощью набора Zymo DNA Clean & Concentrator (Zymo Research, Ирвин, Калифорния) и секвенировали секвенированием по Сэнгеру в GATC Biotech (Констанц, Германия). Полученные последовательности проверяли по базе данных NCBI через BLAST 44 . Влияние различных концентраций аммония на рост было испытано в автотрофных и гетеротрофных условиях (ацетат / H 2 / CO 2 / сульфат), как упомянуто выше, при встряхивании со скоростью 175 об / мин. Были протестированы пять различных концентраций аммония: 0 ×, 0,5 ×, 1 ×, 1,5 × и 2 × выше исходной концентрации (5,6 мМ). Жидкие образцы отбирали ежедневно для определения роста по OD 600 и концентрации свободного аммония с использованием теста Spectroquant Ammonium Test (Merck KGaA, Дармштадт, Германия) в соответствии с инструкциями производителя.Чтобы избежать вмешательства сульфидов в определение аммония, добавляли эквимолярную концентрацию ZnCl 2 с последующим центрифугированием в течение 5 минут при 10000 g , затем супернатант использовали для количественного определения аммония. Для расчетов использовали стандартную кривую от 0 до 3 мг / л -1 аммония, и образцы разбавляли от 10 до 100 раз, чтобы соответствовать пределам обнаружения набора. Для экстракции ДНК 50 мл клеточной культуры, выращенной в вышеупомянутой среде в гетеротрофных условиях (ацетат / H 2 / CO 2 / сульфат), собирали центрифугированием в течение 5 минут при 15000 g. .Осадок клеток промывали фосфатно-солевым буфером (PBS). Полную геномную ДНК экстрагировали с помощью набора для очистки грамположительной ДНК MasterPure ™ (Epicenter, Madison, WI) в соответствии с инструкциями производителя. Качество и количество ДНК проверяли на агарозных гелях и с помощью набора Qubit® RNA Assay Kit во флуорометре Qubit® 2.0 (Life Technologies, Карлсбад, Калифорния). ДНК секвенировали в GATC Biotech (Констанц, Германия) с помощью PacBio RS2. В результате было выполнено 150292 необработанных чтения. Геном был собран с помощью конвейера smartanalysis версии 2.1.1 / SmrtPipe версия рабочего процесса v1.85.133289, с параметрами по умолчанию (см. Дополнительные данные 8 (Params2.xml)). Перекрывающиеся концы полученной сборки были обнаружены с помощью Blastn версии 2.2.31 (стандартные параметры, кроме e , значение 0,0001) 44 и вручную удалены (8870 п.н.). Чтения Illumina использовались для исправления сборки. Всего в GATC Biotech (Констанц, Германия) на Illumina MiSeq секвенировали 842 997 считываний парных концов с длиной считывания 250 п.н. Адаптеры Illumina Trueseq были вырезаны из этих данных с помощью Cutadapt v1.2.1 45 с настройками по умолчанию. После этого было выполнено качественное обрезание с помощью PRINSEQ Lite v0.20.0 46 с минимальной длиной последовательности 50 п.н. и минимальным качеством 30 на обоих концах считывания и в качестве среднего качества. Полученные в результате чтения были сопоставлены со сборкой PacBio с помощью bowtie2, версия 2.2.9 47 , с параметрами по умолчанию, за исключением максимального размера вставки 1500 бит / с. Кроме того, чтения, не связанные с отображением, были разделены. Полученный файл SAM был дополнительно преобразован с помощью Samtools версии 1.3.1 48 , а сборка была исправлена с помощью Pilon версии 1.22 49 , с опциями — –изменения — –фиксировать базы. Чтения без отображения были собраны с IDBA_UD 50 и стандартными параметрами. Все контиги, содержание двух оснований которых превышало 80% вместе (например,> 80% А и Т), были исключены из этой сборки. Все другие контиги сравнивали с blastn (настройки по умолчанию, кроме значения e , равного 0,0001) со сборкой и отбрасывали, если они имели хотя бы одну совпадающую последовательность, составляющую минимум 50% длины контигов.Все остальные контиги были вручную проверены на предмет их интеграции в сборку. Аннотации генома выполнялись с помощью внутреннего конвейера 51 . Prodigal v2.6.3 использовался для предсказания последовательностей ДНК, кодирующих белок 52 , InterProScan 5.25–64 для аннотации белков 53 , Aragorn 1.2.38 для предсказания тРНК и тмРНК 54 и RNAmmer v1.2 для предсказания рРНК 55 . CRISPR были аннотированы с помощью CRISPR Recognition Tool v1.2 56 . Номера EC были предсказаны с помощью версии PRIAM, март, 2015 г. 57 , а дополнительные номера EC были получены с помощью условий GO результата InterproScan. Углеводно-активные ферменты 58 были предсказаны с помощью dbCAN версии 5.0 59 . Геном был проверен с помощью CheckM 60 на предмет возможных отсутствующих однокопийных маркерных генов (определяемых как присутствующие только один раз в 97% первоначально исследованных геномов). Из 284 однокопийных маркерных генов 282 были обнаружены в одном случае.CheckM не смог идентифицировать лейцил-тРНК синтетазу через домен PFAM PF13603, несмотря на то, что он аннотирован в гене DSVG11_2270. CheckM идентифицировал два экземпляра глутамин-тРНК_лигазы (DSVG11_0970 и DSVG11_3047). Оба белка имеют 76% идентичности, и RNAseq указывает на экспрессию во время роста в автотрофных и гетеротрофных условиях, что делает маловероятным, что один из генов является артефактом. Дупликации тРНК-лигаз / синтетаз были описаны до 61 . Для дальнейшего определения отсутствующих генов в геноме геном был вручную настроен и исследован с помощью Pathway Tools 62 .Были изучены все пути биосинтеза аминокислот, витаминов и нуклеиновых кислот, и были отмечены отсутствующие гены (см. Дополнительную таблицу 1 и дополнительные данные 2). Можно было идентифицировать большинство генов или возможных кандидатов почти на все биосинтетические функции, и только у десяти генов-кандидатов вообще не было. Необработанные чтения были загружены в Европейский нуклеотидный архив (ENA) под номером доступа ERR2111683 для данных Illumina, ERR2111684 для данных PacBio [https://www.ebi.ac.uk/ena/browser/view/PRJEB22313] и SAMEA104278631 для сборки генома. Для генотипирования однонуклеотидного полиморфизма (SNP) мы повторно секвенировали с помощью Illumina NovaSeq600 геном как одиночной автотрофной, так и гетеротрофной культуры (ацетат / H 2 / CO 2 / сульфат) через 3 года перемещений. Необработанные чтения были загружены в ENA под номерами доступа от ERR42 Идентификация соответствующих генов пути rGly у других организмов была проведена с помощью tblastx по базе данных NCBI NT 65 (загружена 29.04.2020), с помощью e , значение 0,0001 и параметр —max_target_seqs 1000000. Для оперонов GR, GCS и FDH весь оперон использовался для поиска tblastx, а наличие оперона оценивалось с помощью специального скрипта путем проверки совместного появления гены на расстоянии 20 000 п.н. друг от друга.Для всех остальных генов кодирующая последовательность гена использовалась для поиска tblastx. Предполагалось, что ген присутствует, если была идентифицирована 25% гомология между продуктами трансляции нуклеотидных последовательностей. Чтобы проверить наличие этого пути в комбинации с другими генами FDH, кластеры генов FDH были идентифицированы следующим образом. Для всех других FDH (номера EC 1.17.1.9, 1.17.1.10, 1.17.1.11, 1.17.5.3) записи KEGG 66 использовались в качестве отправной точки для идентификации организмов, которые содержат первый исследованный экземпляр этих генов.Если гены были перечислены в записи KEGG, то они также использовались для идентификации. Для EC 1.17.1.9 использовали геном Methylosinus trichosporium OB3b (NZ_ADVE02000001). Аннотация Refseq содержала ген METTRDRAFT_RS0208115 с номером EC 1.17.1.9, и окружающие гены указывали на правильную идентификацию. Гены METTRDRAFT_RS0208105 – METTRDRAFT_RS0208125, включая межгенные области (геномное местоположение 1678535-1684753), были использованы для поиска tblastx. Для EC 1.17.1.10 использовали геном Moorella thermoacetica ATCC 39073 (CP000232). Гены moth_2312-moth 2314 67 , включая межгенные области (геномное местоположение 2432486-2437304), были использованы для поиска tblastx. Для EC 1.17.1.11 использовали геном Gottschalkia acidurici штамм 9a (CP003326). Гены Curi_c29380-Curi_c29410 были упомянуты в KEGG с соответствующей публикацией 68 , но это было расширено до Curi_c29330-Curi_c29410 (геномное местоположение 3074247-3085751).Для EC 1.17.5.3 геном Escherichia coli str. К-12 подл. Использовали MG1655 (NC_000913) с генами b1474-b1476 (геномное расположение 1547401-1551991). Обнаружение всего пути было основано на наличии минимального количества генов. Путь считался присутствующим, если присутствовал любой из четырех FDH вместе с GCS, лигазой DsvG11_3068 формиат-THF, циклогидролазой DsvG11_1518 метенил-THF и любым из двух необязательных путей: (A) GR и по крайней мере одна из фосфат-ацетилтрансферазы (DsvG11_0941) или ацетаткиназы (DsvG11_0942), или (B) глицингидроксиметилтрансферазы (DsvG11_2276) и SDA (DsvG11_1577).Предполагалось, что GCS присутствует, если три из четырех генов могут быть обнаружены, для GR пять из семи генов (при условии, что два гена тиоредоксина или любые другие два гена могут присутствовать в другом месте генома), и для FDH EC 1.17.2.3 должны были быть обнаружены четыре из шести генов (при предположении, что два гена кофактора молибдена или любые другие два гена могут присутствовать в другом месте генома). Предполагалось, что FDH EC 1.17.1.9 присутствует, если четыре из пяти генов могут быть обнаружены (поскольку либо вспомогательный ген, либо дельта-субъединица, по-видимому, регулярно отсутствовали).FDH EC 1.17.1.10 не оценивался, так как только два гена были идентифицированы в D. desulfuricans , которые, по-видимому, имели гомологию с другими FDH. Предполагалось, что FDH EC 1.17.1.11 присутствует, если пять из восьми генов могут быть обнаружены (при предположении, что дополнительный белок и два белка для продукции кофактора молибдена или любые другие три гена могут присутствовать в другое геномное расположение). Предполагалось, что FDH EC 1.17.5.3 присутствует, если все три гена могут быть обнаружены.Соответствующие данные можно найти по адресу https://doi.org/10.6084/m9.figshare.8970689. Для секвенирования транскриптома клетки выращивали в автотрофных и двух гетеротрофных условиях (ацетат / H 2 / CO 2 / сульфат и лактат / CO 2 / сульфат) с вышеупомянутой средой. Каждое условие было выполнено в четырех биологических повторностях. Для экстракции тотальной РНК 50 мл культуры собирали примерно в середине экспоненциальной фазы роста: 62, 58 и 66% от максимальной OD 600 для автотрофных, гетеротрофных (ацетат / H 2 / CO 2 / сульфат) и гетеротрофные (лактат / CO 2 / сульфат) условия соответственно.Культуры клеток центрифугировали в течение 10 мин при 10 000 g при 4 ° C и осадок клеток один раз промывали 500 мкл буфера ТЕ, pH 7,4. После второго центрифугирования осадок мгновенно замораживали жидким азотом. Лизис бактериальных клеток и осаждение белков выполняли сразу после этого с использованием модифицированного протокола из набора для очистки грамположительной ДНК MasterPure ™ (Epicenter) следующим образом: инкубацию лизоцима проводили при 37 ° C в течение 20 минут с последующим добавлением 4 мкл β-меркаптоэтанол (48.7%), лизисный буфер и инкубация протеиназы К при 60 ° C в течение 15 мин. Осаждение белков проводили в соответствии с инструкциями производителя. Затем безбелковый супернатант очищали с использованием прибора Maxwell® 16 MDx и набора для очистки LEV simplyRNA (Promega, Мэдисон, Висконсин) в соответствии со спецификациями производителя. Подготовка библиотеки транскриптомов и секвенирование были выполнены компанией Novogen (HK) Company Limited. Разложение и загрязнение РНК контролировали на 1% агарозных гелях, чистоту РНК проверяли с помощью спектрофотометра NanoPhotometer® (IMPLEN GmbH, Мюнхен, Германия), а концентрацию РНК определяли с помощью набора Qubit® RNA Assay Kit в Qubit® 2.0 Флуорометр (Life Technologies, Карлсбад, Калифорния). Целостность РНК оценивали с помощью набора RNA Nano 6000 Assay Kit системы Agilent Bioanalyzer 2100 (Agilent Technologies, Калифорния, США). Общее количество 3 мкг РНК на образец использовали в качестве исходного материала для препаратов образцов РНК. Подготовка библиотеки для секвенирования специфичного для цепи транскриптома была произведена с использованием набора NEBNext® Ultra ™ Directional RNA Library Prep Kit для Illumina® (NEB, США) в соответствии с рекомендациями производителя. Вкратце, рРНК удаляли с помощью специального набора, который оставлял мРНК, с последующей фрагментацией РНК.КДНК первой цепи синтезировали с использованием случайного гексамерного праймера и обратной транскриптазы M-MuLV, а затем синтез кДНК второй цепи выполняли с использованием ДНК-полимеразы I и РНКазы H. Для отбора фрагментов кДНК предпочтительно длиной 150-200 п.н. фрагменты библиотеки были очищен системой AMPure XP (Beckman Coulter, Беверли, Массачусетс). Качество библиотеки оценивалось с помощью системы Agilent Bioanalyzer 2100. Кластеризация образцов с индексным кодом была выполнена в системе генерации кластеров cBot с использованием набора HiSeq PE Cluster Kit cBot-HS (Illumina) в соответствии с инструкциями производителя.После создания кластера препараты библиотеки были секвенированы на Hiseq 400 (Illumina) и были произведены считывания парных концов. Необработанные чтения были сопоставлены с геномом с помощью Bowtie2 2.3.4.1 47 . Далее файлы были преобразованы с помощью samtools 1.6 48 , а счетчик чтения был получен с помощью htseq-count 0.6.1p1 69 . Анализ дифференциальной экспрессии был выполнен с использованием R версии 3.5.3 70 и DESeq2 1.22.2 71 . Гены со значением p <0.05 и log2-кратное изменение> 1 считались релевантными. Номера EC этих генов были сопоставлены с matplotlib 72 на картах базы данных KEGG 66 для дальнейшего анализа. Необработанные данные были загружены в ENA под номерами доступа от ERR3262781 до ERR3262792 (BioProject PRJEB22313). Для протеомного анализа клетки культивировали в автотрофных и гетеротрофных (ацетат / H 2 / CO 2 / сульфат) условиях, как описано выше.Каждое условие было выполнено в четырех биологических повторностях. Пятьдесят миллилитров культуры собирали на поздней фазе экспоненциального роста (79% и 76% от максимальной OD 600 для автотрофных и гетеротрофных (ацетат / H 2 / CO 2 / сульфат), соответственно), центрифугировали для 10 мин при 10000 г при 4 ° C, осадок промывали 1 мл PBS и переносили в пробирку Эппендорфа с низким связыванием белка. Затем образцы центрифугировали (10 мин, 4 ° C, 10000 г ) и осадок клеток хранили при -80 ° C.Затем осадки клеток ресуспендировали в 0,5 мл 100 мМ трис / HCl pH 7,5 и суспензию обрабатывали ультразвуком десять раз с использованием ультразвукового устройства SFX150 Брэнсона, снабженного 3-миллиметровым наконечником (Branson, Carouge, CH), 20% амплитуда за 30 циклов. с пульс и 30 с отдых на льду. Неразрушенные клетки и клеточный дебрис удаляли центрифугированием при 10 000 g в течение 10 мин при 4 ° C и концентрацию белка в супернатанте измеряли с помощью набора Pierce BCA Protein Assay Kit (Thermo Scientific, Waltham, MA). Десять микрограммов белка загружали в наконечник столика C18 Empore, после чего следовали этап промывки 100 мкл бикарбонатного буфера аммония (ABC) и 100 мкл 5% ацетонитрила в буфере ABC.Дисульфидные связи белков диссоциировали путем инкубации с 10 мМ дитиотреитола в 50 мМ ABC при 60 ° C в течение 1 часа. Карбоксамидометилирование восстановленных цистеинов проводили 20 мМ йодацетамида в 100 мМ Трис (pH 8) при комнатной температуре в темноте в течение 1 часа. После очистки с помощью 100 мкл буфера ABC наконечники предметных столов перемещали в чистые 0,5 мл низкосвязывающие микроцентрифужные пробирки и проводили ферментативное расщепление, добавляя сверху 500 нг трипсина в 20 мкл ABC (50 мМ). Триптическое расщепление инкубировали при комнатной температуре при встряхивании при 50 об / мин в течение 18 часов.Чтобы остановить расщепление, к образцам добавляли 10% трифторуксусную кислоту в H 2 O до тех пор, пока pH не упал до 3. Оставшуюся жидкость элюировали в микроцентрифужную пробирку с низким связыванием с последующим элюированием 75 мкл 0,1% муравьиной кислоты. в воде и 5 мкл 50% AcNi / 50% 0,1% муравьиной кислоты. Образцы пептидов анализировали после инъекции (размер образца 18 мкл) на колонке предварительного концентрирования с шариками Magic C18AQ 200A размером 5 мкм 0,10 × 32 мм (Bruker Nederland) при постоянном давлении 270 бар (что приводит к потоку ~ 7 мкл на мин).Затем пептиды переносили на аналитическую колонку Magic C18AQ 200A размером 0,10 × 250 мм (размер гранул 3 мкм) с градиентом ацетонитрила (скорость потока 0,5 мкл в минуту) с помощью Proxeon EASY nanoLC. Применяли градиент 8-33% ацетонитрила в воде с 23,6 мМ муравьиной кислоты в течение 50 минут с последующим быстрым увеличением в течение 3 минут с процентным содержанием ацетонитрила до 80% (с 20% воды и 23,6 мМ муравьиной кислоты в обоих растворах). ацетонитрил и вода) в качестве стадии очистки колонки. Между колонкой предварительного концентрирования и аналитической была включена колонка A P-777 Upchurch Microcross.В сливной линии Microcross электрораспыление (3,5 кВ) подавали непосредственно на элюент через иглу из нержавеющей стали. Спектры FTMS были измерены в положительном режиме полного сканирования между m / z 380 и 1400 на LTQ-Orbitrap XL (Thermo electronic, Сан-Хосе, Калифорния) с высоким разрешением (60 000). CID-фрагментированные MSMS-сканирования четырех наиболее распространенных 2+ и 3+ заряженных пиков в FTMS-сканировании были записаны в зависимом от данных режиме в линейной ловушке (порог MS / MS = 5000, продолжительность исключения 45 с для выбранных м / кв. z 25 частей на миллион).База данных последовательностей белка D. desulfuricans (номер доступа NCBI 631220) использовалась вместе с базой данных загрязняющих веществ, которая, например, содержит последовательности распространенных загрязняющих веществ: BSA (P02769, предшественник бычьего сывороточного альбумина), трипсин (P00760, бычий), трипсин (P00761, свинья), кератин K22E (P35908, человек), кератин K1C9 (P35527, человек), кератин K2C1 (P04264, человек) и кератин K1CI (P35527, человек). Были включены параметры количественного определения без меток (LFQ), а также соответствия между прогонами.Деамидированные пептиды можно было использовать для количественного определения белка. Остальные параметры количественного анализа оставлены по умолчанию. Фильтрация и дальнейший анализ выходных данных рабочего процесса MaxQuant / Andromeda и анализ содержания идентифицированных белков выполнялись с помощью модуля Perseus 1.5.5.3 (доступного в пакете MaxQuant). Пептиды и белки были допущены к дальнейшему анализу, когда у них была вероятность ложного обнаружения (FDR) <1%, и белки, содержащие по крайней мере два идентифицированных пептида, из которых по крайней мере один был уникальным и один немодифицированным.Обратные совпадения были удалены из вывода MaxQuant. Нормальный логарифм был взят из интенсивностей белка LFQ MS1, полученных из MaxQuant. Значения Zero Log LFQ были заменены значением 4,70 (значение немного ниже, чем самое низкое измеренное значение), чтобы сделать возможными разумные вычисления отношения. Относительное количественное определение белка автотрофных и гетеротрофных (ацетат / H 2 / CO 2 / сульфат) условий было выполнено с помощью Perseus путем применения теста T для двух образцов с использованием колонок интенсивности LFQ, полученных с помощью набора T -test FDR. до 0.05 и S0 установлены на 1 73 . Качество системы nLC-MSMS проверялось с помощью PTXQC 74 с использованием файлов результатов MaxQuant. Данные масс-спектрометрической протеомики были депонированы в Консорциум ProteomeXchange через партнерский репозиторий PRIDE 75,76 с идентификатором набора данных PXD013114. Для исследований мечения протеиногенных аминокислот клетки выращивали в трех биологических повторностях в 30 мл бутылях, содержащих 10 мл аноксической среды, приготовленной, как описано выше, с 30 мМ сульфата, H 2 / CO 2 в газовой фазе с добавлением 75 мМ формиата натрия- 13 C (99% 13 C, Sigma-Aldrich).После достижения стационарной фазы (OD 600 ~ 0,18) клетки собирали центрифугированием 9 мл культуры в течение 5 минут при 10000 g . Клетки промывали один раз дистиллированной водой, а затем ресуспендировали в 6 M HCl для гидролиза при 95 ° C в течение 24 часов. Затем образцы полностью сушили в потоке воздуха при 95 ° C. Гидролизованные образцы ресуспендировали в 1 мл дистиллированной воды и центрифугировали в течение 5 мин при 10 000 г для удаления твердых частиц. Супернатанты с гидролизованными аминокислотами анализировали с помощью UPLC – ионизации электрораспылением (ESI) –MS 77 .Хроматографию выполняли с помощью системы Waters Acquity UPLC (Waters, Etten-Leur, Нидерланды) с использованием обращенно-фазовой колонки HSS T3 C18 (100 × 2,1 мм, 1,8 мкм; Waters, Etten-Leur, Нидерланды). Подвижные фазы представляли собой 0,1% муравьиной кислоты в H 2 O (A) и 0,1% муравьиной кислоты в ацетонитриле (B). Скорость потока составляла 0,4 мл мин. -1 , и использовался следующий градиент: 0-1 мин 99% A; 1–5 мин линейный градиент от 99% A до 82% A; 5–6 мин линейный градиент от 82% A до 1% A; 6–8 мин 1% A; 8–8.5-минутный линейный градиент от 1% A до 99% A; 8,5–11 мин повторного уравновешивания с 99% A. Масс-спектры получали с использованием масс-спектрометра Exactive (Thermo Scientific, Саннивейл, Калифорния) в режиме положительной ионизации с диапазоном сканирования 50,0–300,0 m / z . Спектры регистрировали в течение первых 5 мин градиентов ЖК. Анализ данных выполняли с использованием Xcalibur (Thermo Scientific, Саннивейл, Калифорния). Идентификация аминокислот была основана на времени удерживания и m / z , которые были определены путем анализа стандартов аминокислот (Sigma-Aldrich, St.Луи, штат Мичиган) при тех же условиях. Для экспериментов по метаболомике временных рядов 13 C изотопных индикаторов клетки выращивали в трех биологических повторностях в стеклянных флаконах объемом 1 л, содержащих 500 мл аноксической среды, приготовленной, как описано выше, с 30 мМ сульфата и встряхивание при 175 об / мин. Свободное пространство над продуктом ежедневно промывали H 2 / CO 2, (80/20% об. / Об.), Чтобы избежать ограничения H 2 и CO 2 .Когда клетки находились в поздней экспоненциальной фазе (73% от максимальной OD 600 ), 20 мл образца брали как момент времени 0 и добавляли 15 мМ 13 C-формиата. После этого отбирали образцы объемом 20 мл через 30 с, а также через 1, 2,5, 4, 5,5, 7, 9 и 24 часа. Образцы немедленно фильтровали через нейлоновые фильтры 0,22 мкм 47 нм (Millipore, HNWPO4700), вставленные в стерильные фильтрующие держатели шприцев (Swinnex, Millipore, SX0004700). Затем фильтры помещали вверх дном в стеклянные чашки Петри, помещенные на сухой лед, содержащий 2 мл экстракционного растворителя (40:40:20 ацетонитрил / метанол / дистиллированная вода).Через 5 минут экстракционный растворитель переносили в 2 мл пробирки Эппендорфа и центрифугировали в течение 5 минут при 14000 g при 4 ° C. Затем супернатант переносили в чистую пробирку Эппендорфа на 2 мл и хранили при -80 ° C. Контроли для измерения фона 13 CO 2 в среде брали через 0,5, 1,5, 3, 4,5, 7,5, 9,2 и 24,5 часа. Для этого отбирали 3 мл жидких образцов и сразу фильтровали через шприцевой фильтр с полиэфирсульфоновой мембраной (MDI, Индия) в анаэробную бутыль на 50 мл, содержащую 1 мл 6 н. HCl.Затем измеряли состав газа в свободном пространстве над газовым хроматографом-масс-спектрометром (GC-MS, DSQ MS Thermo Fisher Scientific), состоящим из Trace GC Ultra (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA). Гелий использовался в качестве газа-носителя с расходом 120 мл мин -1 и делением 50. Температура на входе составляла 80 ° C, температура колонки была установлена на уровне 40 ° C, а температура источника ионов составляла 200 ° C. ° C. Доли 13 CO 2 и 12 CO 2 были получены с помощью масс-спектрометра.Проверка метода была проведена с использованием стандартов с известными смесями 13 CO 2 и 12 CO 2 . Образцы анализировали с помощью высокоэффективной системы ЖХ (ВЭЖХ) –МС / МС, состоящей из системы УВЭЖХ VanquishTM (Thermo Scientific, США), соединенной методом ионизации электрораспылением (отрицательная полярность) с гибридным квадрупольным масс-спектрометром высокого разрешения (Q Exactive orbitrap). , Thermo Scientific, США) работали в режиме полного сканирования для обнаружения целевых соединений на основе их точных масс.Характеристики полной MS – SIM включали разрешение 140 000, цель AGC 1E6, максимальное IT 40 мс и диапазон сканирования от 70 до 1000 m / z . Разделение ЖХ было достигнуто с использованием ACQUITY UPLC BEH C18 (колонка 2,1 × 100 мм, размер частиц 1,7 мкм; номер детали 186002352; серийный номер 02623521115711, Waters). Растворителем A был 97: 3 вода: метанол с 10 мМ трибутиламином, доведенный до pH 8,1-8,2 с помощью 9 мМ уксусной кислоты. Растворитель B представлял собой 100% метанол. Общее время пробега составляло 25 мин со следующим градиентом: 0 мин, 5% B; 2.5 мин, 5% B; 5 мин, 20% B; 7,5 мин, 20% B; 13 мин, 55% B; 15,5 мин, 95% B; 18,5 мин, 95% B; 19 мин, 5% B; 25 мин, 5% B. Скорость потока составляла 200 мкл мин -1 . Температура автосэмплера и колонки составляла 4 и 25 ° C соответственно. Данные метаболизма обрабатывались с помощью Maven для получения хроматограмм извлеченных ионов, а данные корректировались с учетом содержания природных изотопов углерода с помощью AccuCor 78 . Для улучшения разделения и чувствительности измерения конкретных метаболитов центрального углерода и внутриклеточных аминокислот образцы сначала были дериватизированы либо анилином 79,80 , либо бензилхлорформиатом 81 соответственно.Для дериватизации анилина образцы ресуспендировали в 50 мкл воды, пригодной для ВЭЖХ, 5 мкл анилина (6 M, pH 4,5) и 5 мкл гидрохлорида N- (3-диметиламинопропил) -N’-этилкарбодиимида (200 мг на мл). После 2 ч инкубации при комнатной температуре добавляли 1 мкл триэтиламина, чтобы остановить реакцию. Для дериватизации бензилхлорформиата образцы ресуспендировали в 10 мкл воды для ВЭЖХ, 40 мкл метанола, 5 мкл триэтиламина и 1 мкл бензилхлорформиата и инкубировали при комнатной температуре в течение 30 мин. Дополнительная информация о дизайне исследований доступна в Сводке отчетов по исследованиям природы, связанной с этой статьей. Mitragyna speciosa Korth. (из семейства Rubiaceae) — тропическое дерево высотой от 4 до 16 метров, произрастающее в Юго-Восточной Азии, на Филиппинах и в Новой Гвинее, но теперь культивируемое в других местах. В Таиланде дерево и препараты из листьев называют кратомом.Традиционно свежие или сушеные листья кратома пережевывают или заваривают; их редко курят. В малых дозах кратом оказывает стимулирующее действие и используется для борьбы с усталостью в течение долгого рабочего дня. Однако в высоких дозах он может оказывать седативно-наркотическое действие. Он также используется в традиционной медицине и как заменитель опия. Фитохимические вещества, выделенные из различных частей дерева, включают более 40 структурно родственных алкалоидов, а также несколько флавоноидов, терпеноидных сапонинов, полифенолов и различных гликозидов.Основными психоактивными компонентами листьев являются митрагинин и 7-гидроксимитрагинин, оба они обнаружены только в Mitragyna speciosa . Молекулярная формула: C 23 H 30 N 2 O 4 Митрагинин — самый распространенный алкалоид в листьях.Впервые он был выделен в 1921 году, а его химическая структура была полностью выяснена в 1964 году. Систематическое (химическое резюме) название (αE, 2S, 3S, 12bS) -3-этил-1,2,3,4,6,7, Метиловый эфир 12,12b-октагидро-8-метокси-α- (метоксиметилен) индоло [2,3-a] хинолизин-2-уксусной кислоты (регистрационный номер CAS: 4098-40-2). Другие названия: метиловый эфир (E) -16,17-дидегидро-9,17-диметокси-17,18-секо-20α-йохимбан-16-карбоновой кислоты, 9-метоксикоринантеидин и SK&F 12711. Митрагинин не растворяется в вода, но растворим в обычных органических растворителях, включая ацетон, уксусную кислоту, спирты, хлороформ и диэтиловый эфир, образуя флуоресцентные растворы.Митрагинин перегоняется при 230–240 ° C и давлении 5 мм рт. Он образует белые аморфные кристаллы, плавящиеся при 102–106 ° C. Температура плавления соли митрагинина соляной кислоты составляет 243 ° C; пикрат плавится при 223–224 ° C, а ацетат — при 142 ° C. Молекулярная формула: C 23 H 30 N 2 O 5 7-Гидроксимитрагинин присутствует только в очень небольших количествах в листьях кратома и был идентифицирован в 1993 году.Его систематическое (химическое резюме) название (αE, 2S, 3S, 7aS, 12bS) -3-этил-1,2,3,4,6,7,7a, 12b-октагидро-7a-гидрокси-8-метокси- Метиловый эфир α- (метоксиметилен) индоло [2,3-a] хинолизин-2-уксусной кислоты (регистрационный номер CAS: 174418-82-7). Общий химический синтез нескольких алкалоидов кратома слишком сложен, чтобы его можно было использовать для экономичного производства любых этих соединений. Однако митрагинин может служить химическим предшественником более мощного 7-гидроксимитрагинина. вверх страницы Листья дерева Mitragyna speciosa овальные или яйцевидно-ланцетные, темно-зеленого цвета, могут достигать 180 мм в длину и 100 мм в ширину.Жилки на листьях либо зеленовато-белые, либо красные — первые считаются более сильными. Средний вес свежего и сушеного листа составляет около 1,7 и 0,43 г соответственно. Желто-шаровидные цветки дерева несут до 120 цветков. Плод представляет собой капсулу, содержащую множество мелких плоских семян. Продукты Кратом обычно поставляются в виде измельченных или измельченных в порошок сушеных листьев от светло-зеленого до темно-зеленого цвета. Также доступны порошкообразные, зеленоватые или бежево-коричневые препараты кратома, обогащенные экстрактами других листьев.Стабильные пастообразные экстракты и темно-коричневую смолу кратома можно получить путем частичного или полного кипячения воды из водных суспензий листьев кратома. Также доступны настойки и капсулы, наполненные порошкообразным кратомом. вверх страницы Препараты Кратома содержат несколько фитохимических веществ в различных соотношениях, что затрудняет их надлежащую фармакологическую оценку. Клинические исследования на людях немногочисленны. В целом действие кратома на человека зависит от дозы: малые дозы вызывают «кокаиноподобную» стимуляцию, в то время как большие дозы вызывают «морфиноподобные» седативно-наркотические эффекты. После приема нескольких граммов сушеных листьев бодрящий эффект и эйфория ощущаются в течение 10 минут и продолжаются от одного до полутора часов. Пользователи Кратома сообщают о повышенной работоспособности, настороженности, общительности и иногда повышенном сексуальном влечении. Зрачки обычно нормальные или очень незначительно сужены; можно отметить покраснение.В одном из немногих клинических экспериментов на людях пероральная доза митрагинина 50 мг вызвала двигательное возбуждение, за которым следовало головокружение, потеря координации движений (положительный результат теста Ромберга) и тремор конечностей и лица. Для регулярных пользователей кратома заметными побочными эффектами могут быть потеря веса, усталость, запор и гиперпигментация щеки. Фармакологический механизм, ответственный за активность стимуляторов, неясен. Кратом, принятый в больших, успокаивающих дозах, соответствующих 10–25 г сушеных листьев, может первоначально вызвать потоотделение, головокружение, тошноту и дисфорию, но эти эффекты вскоре сменяются спокойствием, эйфорией и сонным состоянием, которое длится до шести часов.Отмечаются суженные зрачки (миоз). Митрагинин и 7-гидроксимитрагинин, два алкалоида, в основном ответственные за эффекты кратома, являются селективными и полными агонистами опиоидных рецепторов μ-подтипа (MOR). Эффект агониста рецепторов алкалоидов кратома подавляется антагонистом опиоидных рецепторов налоксоном. Кроме того, 5-HT 2a и постсинаптические α 2 -адренергические рецепторы, а также нейрональные каналы Ca 2+ также участвуют в уникальной фармакологической и поведенческой активности митрагинина. В исследованиях на животных антиноцицептивные и подавляющие кашель эффекты митрагинина были сопоставимы с эффектами кодеина. У мышей 7-гидроксимитрагинин был в несколько раз более сильным обезболивающим, чем морфин, даже при пероральном приеме. Кратом слабо токсичен для животных. У мышей, хронически получавших 7-гидроксимитрагинин, развилась толерантность, перекрестная толерантность к морфину и появились симптомы отмены, которые могли быть спровоцированы введением налоксона. Регулярное употребление кратома может вызвать зависимость. Симптомы отмены у людей относительно легкие и обычно проходят в течение недели. Могут возникнуть тяга, слабость и летаргия, беспокойство, беспокойство, ринорея, миалгия, тошнота, потливость, мышечные боли, судорожные движения конечностей, тремор, а также нарушения сна и галлюцинации. При необходимости лечение может включать комбинацию дигидрокодеина и лофексидина, нестероидные противовоспалительные средства, антидепрессанты и / или анксиолитики. Метаболизм митрагинина у людей происходит посредством гидролиза сложного эфира боковой цепи, O -деметилирования метоксигрупп, окислительных и / или восстановительных превращений и образования глюкуронидных и сульфатных конъюгатов. У человека, который смертельно передозировал пропилгекседрин и кратом, посмертные концентрации митрагинина колебались от 0,01 мг / кг до 1,20 мг / л. Прием кратома одновременно с другими лекарствами может вызвать серьезные побочные эффекты.Фактически, сообщалось о неблагоприятных лекарственных взаимодействиях, связанных с приемом чая кратом с каризопродолом, модафинилом, пропилгекседрином или Datura stramonium . В США произошел смертельный случай, связанный со смесью кратома, фентанила, дифенгидрамина, кофеина и морфина, продаваемой как лекарственное средство на травах. вверх страницы сушеных листьев кратома, продаваемых в магазинах «головных / умных / травяных» и через Интернет, происходит от Mitragyna speciosa , выращиваемого в Юго-Восточной Азии, скорее всего, в Индонезии («Бали кратом»), где это растение не контролируется. вверх страницы Традиционно свежие или сушеные листья кратома пережевывают или заваривают в чай. При заваривании чая часто добавляют сок лимона, чтобы облегчить извлечение алкалоидов растений; перед употреблением можно добавить сахар или мед, чтобы замаскировать горький вкус напитка. Сушеные листья иногда коптят. Чтобы испытать бодрость и эйфорию, традиционные «едоки кратома» жуют от одного до трех свежих листьев за раз.Обычно перед едой на листьях удаляют прожилки, а иногда добавляют соль «для предотвращения запоров». Проглатывается только пережеванный материал. После употребления следует запивать теплой водой или кофе, чаем или сиропом из пальмового сахара. Постоянные и зависимые пользователи жевают от 3 до 10 раз в день. Когда кратом недоступен, вместо него используются листья Mitragyna javanica (другое название Mitragyna parvifolia ). На юге Таиланда в последние годы стали популярны домашние ледяные коктейли под названием «4×100» из-за их предполагаемого эффекта имитации алкоголя среди молодых мусульман.Коктейли сделаны из листьев кратома, безалкогольного напитка, содержащего кофеин, и сиропа от кашля, содержащего кодеин или дифенгидрамин, в качестве трех основных ингредиентов, к которым добавляются кубики льда, анксиолитик, антидепрессант или обезболивающее. вверх страницы Роду Mitragyna дал название голландский ботаник Корталс, потому что листья и рыльца цветов растения напоминают форму митры епископа.Другие названия растения — кратом, какуам, итанг или том (Таиланд), биак-биак или кетум (Малайзия) и мамбог (Филиппины). вверх страницы Алкалоидный состав ботанических и судебно-медицинских образцов может быть проанализирован обычными хроматографическими и спектроскопическими методами. Филогенетическая характеристика образцов кратома с помощью конкретных нуклеотидных последовательностей ДНК может дополнять фитохимические анализы. Алкалоиды Кратома могут быть разделены тонкослойной хроматографией на пластинах силикагеля с обнаружением УФ (254 нм). При распылении либо модифицированным реагентом Эрлиха, либо реагентом хлорид железа и хлорная кислота митрагинин дает пурпурные или серо-коричневые пятна соответственно. УФ-спектр метанольного раствора митрагинина показывает максимум при 225 нм с плечами при 247, 285 и 293 нм. Характерные полосы поглощения в ИК-спектре митрагинина находятся при 3 365, 1 690 и 1 640 см –1 .Значимые фрагменты в масс-спектре ионизации электронным ударом (m / z): 398 (M +), 383, 366, 269, 214, 200 и 186. УФ-спектр этанольного раствора 7-гидроксимитрагинина показывает максимум при 220 нм с плечами при 245 и 305 нм. Характерные полосы поглощения в ИК-спектре 7-гидроксимитрагинина в CHCl 3 находятся при 3 590, 2 850, 2 820, 2 750, 1 700, 1 645, 1 630, 1 600, 1 490, 1 465 и 1 440 см -1 . Значимые фрагменты в масс-спектре ионизации электронным ударом (m / z): 414 (M +), 397, 383 и 367. Исходные алкалоиды и их метаболиты могут быть количественно определены в моче при> 100 нг / мл с помощью ГХ-МС,> 25 нг / мл с помощью ВЭЖХ-УФ и> 0,02 нг / мл для ВЭЖХ-МС. Например, концентрация митрагинина в образце мочи обычного пользователя кратома составила 167 нг / мл (ВЭЖХ-МС). В случае отравления концентрация митрагинина в сыворотке крови через две недели после прекращения регулярного перорального приема больших доз (14–21 грамм в день) сушеных листьев кратома составляла 0.020 нг / мл (ВЭЖХ-МС). Неизвестно ни одного общепринятого иммунологического скринингового теста на наркотики, который позволил бы обнаружить алкалоиды кратома. вверх страницы Химический состав кратома в коммерческих продуктах не определен и зависит от нескольких факторов, таких как особый вид и возраст растения, окружающая среда и время сбора урожая. Общая концентрация алкалоидов в сушеных листьях колеблется от 0.5–1,5%. В тайских сортах митрагинин является наиболее распространенным компонентом (до 66% от общего количества алкалоидов), в то время как 7-гидроксимитрагинин является второстепенным компонентом (до 2% от общего содержания алкалоидов). В разновидностях малазийского кратома митрагинин присутствует в более низкой концентрации (12% от общего количества алкалоидов). Типичные концентрации митрагинина и 7-гидроксимитрагинина в сушеных листьях или порошкообразных продуктах из кратома, доступных в Японии, составляли 12–21 мг / г и 0,11–0,39 мг / г, соответственно; смолы кратома содержали 35,6–62.6 мг / г митрагинина и 0,12–0,37 мг / г 7-гидроксимитрагинина. Согласно ГХ-МС анализу свежеприготовленных малазийских напитков «кетум», приготовленных путем длительного кипячения свежих листьев в воде, один 250 мл стакан «кетума» содержал 22,5–25 мг митрагинина. Считается, что примерно трех таких напитков в день достаточно, чтобы уменьшить симптомы отмены опиатов. В начале 2000-х некоторые малоизвестные продукты, обозначенные как «ацетат кратома» или «ацетат митрагинина», фактически не содержали митрагинина.В последние годы продукты, продаваемые в Германии и Швеции под названием «Криптон» в качестве усиленных препаратов кратома, как оказалось, содержат кофеин и синтетический O-десметилтрамадол (ODT) в качестве примесей. ODT является биоактивным метаболитом синтетического опиоидного анальгетика трамадола и, по-видимому, добавлялся к растительным препаратам для имитации седативно-наркотического действия кратома. вверх страницы Ни Mitragyna speciosa , ни митрагинин или другие алкалоиды растения не перечислены ни в одном из Списков Конвенций ООН по наркотикам. Mitragyna speciosa и / или митрагинин и / или 7-гидроксимитрагинин в настоящее время (сентябрь 2011 г.) контролируются в ряде государств-членов ЕС, таких как Дания, Латвия, Литва, Польша, Румыния и Швеция. Другими странами, контролирующими кратом в соответствии с законодательством о наркотиках, являются Австралия, Малайзия, Мьянма и Таиланд. Новая Зеландия контролирует Mitragyna speciosa и mitragynine в соответствии с Положениями о внесении поправок в лекарственные средства. В США кратом не контролируется, хотя считается «вызывающим беспокойство наркотиком». вверх страницы Шесть азиатских и четыре африканских вида Mitragyna , как известно, используются в традиционной медицине, но стимулирующие / седативно-наркотические / психоактивные эффекты характерны только для Mitragyna speciosa . В Юго-Восточной Азии кратом используется как противодиарейное средство, средство от кашля, противодиабетическое средство, средство от кишечной дегельминтизации и припарка ран, а также для отучения наркоманов от героина.За пределами Азии сообщалось об эпизодическом использовании препаратов кратома для самолечения хронической боли и симптомов отмены опиоидов, а также в качестве замены опиоидных анальгетиков. Однако в современной медицине нет разрешенного использования кратома или его алкалоидов. Было высказано предположение, что следует изучить терапевтический потенциал кратома или его очищенных ингредиентов для лечения боли, депрессии и симптомов отмены лекарств. вверх страницы Адкинс, Дж.E., Boyer, E. W., and McCurdy, C. R. (2011), « Mitragyna speciosa , психоактивное дерево из Юго-Восточной Азии с опиоидной активностью», Current Topics in Medicinal Chemistry , Volume 11, pp. 1165–1175. Arndt, T., Claussen, U., Güssregen, B. et al. (2011), «Алкалоиды кратома и O-десметилтрамадол в моче потребителя травяной смеси« криптон »», Forensic Science International , Volume 208, pp. 47–52. Ассанангкорнчай, С., Muekthong, A., Sam-angsri, N., and Pattanasattayawong, U. (2007), «Использование Mitragynine [sic] speciosa (« Krathom »), вызывающего привыкание растения, в Таиланде», Использование и злоупотребление психоактивными веществами , том 42, стр. 2145–2157. Assanangkornchai, S., Pattanasattayawong, U., Samangsri, N., and Mukthong, A. (2007), «Употребление психоактивных веществ среди старшеклассников в южном Таиланде: тенденции за 3 года (2002–2004)», Drug и алкогольная зависимость , том 86, стр.167–174. Assanangkornchai, S., Aramrattana, A., Perngparn, U. et al. (2008), «Текущая ситуация с проблемами, связанными с психоактивными веществами в Таиланде», Журнал Психиатрической ассоциации Таиланда , Том 53 (Приложение 1), стр. 24–36. Азизи Дж., Исмаил С., Морди М. Н. и др. (2010), « In vitro и in vivo эффекты трех различных экстрактов листьев Mitragyna speciosa Korth на ферменты фазы II, метаболизирующие лекарственные препараты — глутатионтрансферазы (GST)», Molecules , Volume 15, pp.432–441. Бэкстрём, Б., Классон, Г., Лёвенхилм, П., и Теландер, Г. (2010), ‘Krypton-ny, dödlig Internetdrog. Sedan oktober 2009 har nio unga personer dött i Sverige [Криптон, смертельный Интернет-наркотик. Девять мертвых в Швеции] », Läkartidningen , Volume 107, pp. 3196–3197. Беккет, А. Х., Шеллард, Э. Дж., Филлипсон, Дж. Д., и Ли, К. М. (1966), «Виды Mitragyna в Азии. Часть. VII. Индольные алкалоиды из листьев Mitragyna speciosa Korth ’, Planta Medica, Volume 14, pp.277–288. Беккет, А. Х., Двума-Баду, Д., и Хэддок, Р. Э. (1969), «Некоторые новые индолы и оксиндолы митрагинского типа; Влияние стереохимии на масс-спектры ’, Tetrahedron , Volume 25, pp. 5961–5969. Botpiboon, O., Prutipanlai, S., Janchawee, B., and Thainchaiwattana, S. (2009), «Влияние кофеина и кодеина на антиноцицептивную активность алкалоидного экстракта из листьев кратома ( Mitragyna speciosa Korth.) ’, Доклад, представленный на 35-м Конгрессе по науке и технологиям Таиланда, 15–17 октября 2009 г. Курорт Tide (пляж Бангсаен), Чонбури, Таиланд. Boyer, EW, Babu, KM, Adkins, JE, McCurdy, CR, and Halpern, JH (2008), «Самостоятельное лечение опиоидной абстиненции с помощью кратома ( Mitragyna speciosa korth )», Addiction , Volume 103, С. 1048–1050. Boyer, E. W., McCurdy, C. R., и Adkins, J. E. (2010), «Методы лечения абстиненции от соединений, вызывающих привыкание», Патент США №2010/0209452 (19 августа 2010 г.). Чан, К.Б., Пакиам, К., и Рахим, Р.А. (2005), «Злоупотребление психоактивными растениями: идентификация митрагинина в кетуме и в препаратах кетума», Бюллетень наркотиков , Том 57 (1-2), стр. 249–256. Chittrakarn, S., Penchumruth, P., and Krewpradub, N. (2009), «Анализ активных веществ в коктейле кратом (Mitragyna speciosa Korth.)». Chittrakarn, S., Sawangjaroen, K., Prasettho, S., Janchawee, B., and Keawpradub, N. (2008), «Ингибирующие эффекты экстракта листьев кратома ( Mitragyna speciosa Korth.) На желудочно-кишечный тракт крыс», Journal of Ethnopharmacology , Volume 116 С. 173–178. DEA (Управление по борьбе с наркотиками США) (2005), «Обновление лекарственных растений: Кратом», Microgram Bulletin , Volume 38 (7), pp. 114–115. де Мораес, Н. В., Корреа Моретти, Р. А., Ферр, Э.B., III, McCurdy, CR, и Lanchote, VL (2009), «Определение митрагинина в плазме крыс с помощью ЖХ-МС / МС: применение в фармакокинетике», Journal of Chromatography B , Volume 877, pp. 2593– 2597. Дрезен, С., Феррейрос, Н., Пютц, М., Вестфаль, Ф., Циммерманн, Р. и Аувертер, В. (2010), «Мониторинг травяных смесей, потенциально содержащих синтетические каннабиноиды в качестве психоактивных соединений», Журнал масс-спектрометрии , том 45, стр.1186–1194. Фарах Идаю, Н., Тауфик Хидаят, М., Моклас, М. А. М., Шарида, Ф., Нурул Раудза, А. Р. и др. (2011), «Антидепрессантоподобный эффект митрагинина, выделенного из Mitragyna speciosa Korth, на модели депрессии на мышах», Phytomedicine , Volume 18, pp. 402-407. Филд, Э. (1921), «Митрагинин и митраверсин, два новых алкалоида из разновидностей митрагины», Journal of the Chemical Society. Транзакции , том 119, стр.887–891. Гревал, К. С. (1932), «Влияние митрагинина на человека», Британский журнал медицинской психологии , том 12, стр. 41–58. Ханапи, Н.А., Азизи, Дж., Исмаил, С., и Мансор, С.М. (2010), «Оценка выбранных малазийских лекарственных растений на ферменты фазы I, метаболизирующие лекарственные средства, активность CYP2C9, CYP2D6 и CYP3A4 in vitro», International Journal фармакологии , том 6, стр. 490–495. Ханна, Дж.(2003), «Поддельный рынок Кратом открыт», The Entheogen Review , том 12 (1), стр. 26–28. Харизал, С. Н., Мансор, С. М., Хаснан, Дж., Таракан, Дж. К. Дж., И Абдулла, Дж. (2010), «Исследование острой токсичности стандартизированного метанольного экстракта Mitragyna speciosa Korth у грызунов», Journal of Ethnopharmacology , том 131, стр. 404–409. Havemann-Reinecke, U. (2011), «Кратом и алкогольная зависимость: клинические симптомы, лечение абстиненции и фармакологические механизмы — отчет о болезни», European Psychiatry , Volume 26 (Дополнение 1), стр.50. Хиллебранд, Дж., Ольшевский, Д., и Седефов, Р. (2010), «Законные максимумы в Интернете», Использование и злоупотребление психоактивными веществами , том 45, стр. 330–340. Холлер, Дж. М., Форс, С. П., Макдонаф-Бендер, П. С. и др. (2011), «Смерть от токсичности лекарств, включающая пропилгекседрин и митрагинин», Journal of Analytical Toxicology , Volume 35, pp. 54-59. Houghton, P. и Shellard, E. (2006), «Kratom Chemistry», New Scientist , Volume 192 (4 ноября 2006 г.), стр.25. Ing, H.R., и Raison, C.G. (1939), «Алкалоиды Mitragyne speciosa . Часть I. Mitragynine ’, Journal of the Chemical Society , pp. 986–990. Ingsathit, A., Woratanarat, P., Anukarahanonta, T. et al. (2009), «Распространенность употребления психоактивных наркотиков среди водителей в Таиланде: придорожное исследование», Анализ и предотвращение несчастных случаев , Том 41, стр. 474–478. Исикава, Х., Такаяма, Х., и Айми, Н. (2002), «Димеризация производных индола гипервалентными йодами (III): новая статья для краткого полного синтеза рац- и мезохимонантинов», Tetrahedron Letters , Volume 43. С. 5637–5639. Янсен, К. Л. Р. и Праст, К. Дж. (1988), «Этнофармакология кратома и алкалоидов митрагина », Journal of Ethnopharmacology , Volume 23, pp. 115–119. Джоши, Б., Раймонд-Хамет и Тейлор, В.I. (1963), «Структура митрагинина (9-метоксикоринантеидина)», Chemistry and Industry , (выпуск 14), стр. 573. Kaewklum, S., Kaewklum, M., Pootrakronchai, R. et al. (2005), «Обнаружение митрагинина и его метаболита в моче после приема внутрь листьев Mitragyna speciosa Korth», в Schänzer, W., Geyer, H., Gotzmann, A. и Mareck, U. (ред.), Последние достижения в области допингового анализа (13) . Sport und Buch Strauß, Кельн. С. 403–406. Капп, Ф.Г., Маурер, Х.Х., Аувертер, В., Винкельман, М., и Херманс-Клаузен, М. (2011), «Внутрипеченочный холестаз после злоупотребления порошкообразным кратомом ( Mitragyna speciosa )», Journal of Medical Токсикология , (в печати) DOI 10.1007 / s13181-011-0155-5. Кикура-Ханаджири Р., Кавамура М., Маруяма Т. и др. (2009), «Одновременный анализ митрагинина, 7-гидроксимитрагинина и других алкалоидов в психотропном растении« кратом »( Mitragyna speciosa ) с помощью LC-ESI-MS», Forensic Toxicology , Volume 27, pp.67–74. Кронстранд, Р., Роман, М., Теландер, Г., и Эрикссон, А. (2011), «Непреднамеренные смертельные отравления митрагинином и O-десметилтрамадолом из травяной смеси Криптон», Journal of Analytical Toxicology , Volume 35. С. 242–247. Кумарнзит, Э., Кеавпрадуб, Н. и Нуанкаев, В. (2007), «Влияние водного экстракта Mitragyna speciosa на симптомы отмены этанола у мышей. Фитотерапия , Том 78, стр.182–185. Kumarnsit, E., Vongvatcharanon, U., Keawpradub, N. и Intasaro, P. (2007), «Fos-подобная иммунореактивность в ядрах спинного шва крысы, индуцированная алкалоидным экстрактом Mitragyna speciosa », Neuroscience Letters, Volume 416 С. 128–132. Леон Ф., Хабиб Э., Адкинс Дж. Э. и др. (2009), «Фитохимическая характеристика листьев Mitragyna speciosa , выращиваемых в США», Natural Products Communications , том 4, стр.907–910. Лу, С., Тран, Б.Н., Нельсен, Дж. Л., и Олдос, К.М. (2009), «Количественный анализ митрагинина в моче человека с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии», Журнал хроматографии B, том 877, стр. 2499–2505. Ма, Дж., Инь, В., Чжоу, Х., Ляо, X. и Кук, JM (2009), «Общий подход к полному синтезу 9-метоксизамещенных индольных алкалоидов: синтез митрагинина, как а также 9-метоксигейссошизол и 9-метокси-Nb-метилгейссошизол, Journal of Organic Chemistry , Volume 74, pp.264–273. Macko, E., Weisbach, J. A., and Douglas, B. (1972), «Некоторые наблюдения по фармакологии митрагинина», Archives Internationales de Pharmacodynamie et de Thérapie , Volume 198, pp. 145–161. Маруяма Т., Кавамура М., Кикура-Ханаджири Р. и др. (2009), «Ботаническое происхождение кратома ( Mitragyna speciosa ; Rubiaceae), доступного как наркотик, которым злоупотребляют на рынках Японииаз», Journal of Natural Medicine , Volume 63, p.340–344. Мацумото К., Мизоваки М., Сучитра Т. и др. (1996), «Центральные антиноцицептивные эффекты митрагинина у мышей: вклад нисходящей норадренергической и серотонинергической систем», European Journal of Pharmacology , Volume 317, pp. 75–81. Мацумото К., Мизоваки М., Такаяма Х. и др. (1997), «Подавляющее действие митрагинина на вызванную 5-метокси-N, N-диметилтриптамином реакцию подергивания головы у мышей», Pharmacology, Biochemistry and Behavior , Volume 57, pp.319–323. Мацумото, К., Хори, С., Исикава, Х. и др. (2004), «Антиноцицептивный эффект 7-гидроксимитрагинина у мышей: открытие орально активного опиоидного анальгетика из тайской лечебной травы Mitragyna speciosa », Life Sciences , том 74, стр. 2143–2155. Мацумото, К., Хори, С., Такаяма, Х. и др. (2005), «Антиноцицепция, толерантность и симптомы отмены, вызванные 7-гидроксимитрагинином, алкалоидом из тайского лекарственного растения Mitragyna speciosa », Life Sciences , том 78, стр.2–7. Мацумото К., Ямамото Л. Т., Ватанабе К. и др. (2005), «Ингибирующее действие митрагинина, анальгетического алкалоида из тайской фитотерапии, на нейрогенное сокращение семявыносящего протока», Life Sciences , том 78, стр. 187–194. Мацумото К., Хатори Ю., Мураяма Т. и др. (2006), «Участие μ-опиоидных рецепторов в антиноцицепции и ингибировании желудочно-кишечного транзита, индуцированного 7-гидроксимитрагинином, выделенным из тайского фитотерапии Mitragyna speciosa », Европейский журнал фармакологии , том 549, стр.63–70. Мацумото К., Такаяма Х., Исикава Х. и др. (2006), «Частичный агонистический эффект 9-гидроксикоринантеидина на μ-опиоидный рецептор в подвздошной кишке морской свинки», Life Sciences , том 78, стр. 2265–2271. Мацумото, К., Такаяма, Х., Нарита, М. и др. (2008), ‘MGM-9 [(E) -метил 2- (3-этил-7a, 12a (эпоксиэтанокси) -9-фтор-1,2,3,4,6,7,12,12b-октагидро) -8-метоксииндоло [2,3-a] хинолизин-2-ил) -3-метоксиакрилат], производное индольного алкалоида митрагинина: новый μ- и κ-опиоидный агонист двойного действия с мощным антиноцицептивным и слабым положительным эффектом в мышей ‘, Neuropharmacology , Volume 55, pp.154–165. McWhirter, L., and Morris, S. (2010), «Отчет о случае стационарной детоксикации после зависимости от кратома ( Mitragyna speciosa )», European Addiction Research , Volume 16, pp. 229–231. Нельсен, Дж. Л., Лапоинт, Дж., Ходжман, М. Дж., И Олдос, К. М. (2010), «Судорожные припадки и кома после воздействия кратома ( Mitragyna speciosa )», Журнал медицинской токсикологии , том 6, стр. 424 –426. Партасарати, С., Раманатан С., Исмаил С. и др. (2010), «Определение митрагинина в плазме с помощью твердофазной экстракции и быстрого ВЭЖХ – УФ-анализа и его применение в фармакокинетическом исследовании на крысах», Analytical and Bioanalytical Chemistry , Volume 397, pp. 2023–2030. Philipp, A. A., Wissenbach, D. K., Zoerntlein, S. W. et al. (2009), «Исследования метаболизма митрагинина, основного алкалоида растительного препарата Кратом, в моче крысы и человека с использованием жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии с линейной ионной ловушкой», Journal of Mass Spectrometry , Volume 44, pp.1249–1261. Филипп А. А., Мейер М. Р., Виссенбах Д. К. и др. (2011), «Мониторинг поступления кратома или криптона с мочой с помощью ГХ-МС в клинической и судебной токсикологии», Analytical and Bioanalytical Chemistry , Volume 400, pp. 127–135. Филипп, А.А., Виссенбах, Д.К., Вебер, А.А., Запп, Дж., И Маурер, HH (2011), «Исследования метаболизма митрацилиатина и изопайнантеина кратома, диастереомеров основных алкалоидов митрагинина и пейнантеина у крыс и людей». моча с использованием жидкостной хроматографии – масс-спектрометрии с линейной ионной ловушкой », Journal of Chromatography B , Volume 879, pp.1049–1055. Филлипсон, Дж. Д. и Хемингуэй, С. Р. (1975), «Хроматографические и спектроскопические методы идентификации алкалоидов из гербарных образцов рода Uncaria », Journal of Chromatography , Volume 105, pp. 163–178. Ponglux, M., Wongseripipatana, S., Takayama, H. et al. (1994), «Новый индольный алкалоид, 7α-гидрокси-7H-митрагинин, из Mitragyna speciosa в Таиланде», Planta Medica , том 60, стр.580–581. Posch, T., Pütz, M., and Huhn, C. (2011), «Судебно-медицинский анализ биогенных рекреационных наркотиков с помощью неводного капиллярного электрофореза — масс-спектрометрия», Toxichem Krimtech , Volume 78 (2), p. . 120. Reanmongkol, W., Keawpradub, N., and Sawangjaroen, K. (2007), «Эффекты экстрактов из Mitragyna speciosa Korth. листья об обезболивающих и поведенческих действиях у экспериментальных животных », Songklanakarin Journal of Science & Technology , Volume 29 (Supplement 1), pp.39–48. Roche, KM, Hart, K., Sangalli, B., Lefberg, J., and Bayer, M. (2008), ‘Kratom: A case of a legal high’, Clinical Toxicology , Volume 46 (7) , п. 598. Sabetghadam, A., Ramanathan, S., and Mansor, SM (2010), «Оценка антиноцицептивной активности алкалоидных, метанольных и водных экстрактов Mitragyna speciosa Korth у крыс», Pharmacognosy Research , Volume 2 (3), стр. 181–185. Шмидт, М.М., Шарма, А., Скифано, Ф., и Фейнманн, К. (2011), «Юридические максимумы» в сети — оценка британских веб-сайтов, продуктов и информации о продуктах », Forensic Science International , том 206, стр. 92–97. Shellard, E.J. (1974), «Алкалоиды Mitragyna со специальной ссылкой на таковые из Mitragyna speciosa , Korth», Bulletin on Narcotics , Volume 26 (2), pp. 41–55. Шелллард, Э.Дж. И Лис М. Д. (1965), «Азиатские виды Mitragyna. Часть V. Анатомия листьев Mitragyna speciosa Korth ’, Planta Medica , Volume 13, pp. 280–290. Сольберг, У. (2011 г.), «Интернет-мониторинг ЕЦМНН», презентация на 11-м ежегодном собрании сети систем раннего предупреждения Reitox, 11 мая 2011 г. Лиссабон, Португалия. Сукронг, С., Чжу, С., Руангрунгси, Н. и др. (2007), «Молекулярный анализ рода Mitragyna , существующего в Таиланде, на основе ITS-последовательностей рДНК и его применение для идентификации наркотических видов: Mitragyna speciosa», Биологический и фармацевтический бюллетень , том 30, стр.1284–1288. Suwanlert, S. (1975), «Исследование поедателей кратома в Таиланде», Bulletin of Narcotics , Volume 27 (3), pp. 21–27. Такаяма, Х. (2004), «Химия и фармакология анальгетических индоловых алкалоидов из рубинового растения, Mitragyna speciosa », Chemical and Pharmaceutical Bulletin , Volume 52, pp. 916–928. Такаяма, Х., Маеда, М., Обаяси, С. и др. (1995), «Первый полный синтез (-) — митрагинина, анальгетического индольного алкалоида в Mitragyna speciosa », Tetrahedron Letters , Том 36, стр.9337–9340. Такаяма, Х., Исикава, Х., Курихара, М. и др. (2002), «Исследования синтеза и опиоидной агонистической активности митрагинин-родственных индольных алкалоидов: открытие опиоидных агонистов, структурно отличающихся от других опиоидных лигандов», Journal of Medicinal Chemistry , Volume 45, pp. 1949–1956. Tanguay, P. (2011), « Kratom in Thailand », (Серия по законодательной реформе политики в отношении наркотиков № 13): Транснациональный институт — Международный консорциум по политике в отношении наркотиков.Амстердам и Лондон. Тауфик Хидаят, М., Априани, Э., Набишах, Б. М. и др. (2010), «Определение опиоидных рецепторов, связанных с митрагинином», «Достижения в области медицины и стоматологии», том 3 (3), стр. 65–70. The Irish Times (2011 г.), «Коронер предостерегает от употребления травяного чая с другими веществами» (9 июня 2011 г.). Прокуратура США, округ Аляска (2011 г.), «Житель Флориды признает себя виновным в производстве и отправке синтетических наркотиков на Аляску», пресс-релиз.27 июля 2011 г. Thongpradichote, S., Matsumoto, K., Tohda, M. et al. (1998), «Идентификация подтипов опиоидных рецепторов в антиноцицептивных действиях митрагинина, вводимого супраспинально, у мышей», Life Sciences , том 62, стр. 1371–1378. Tungtananuwat, W., and Lawanprasert, S. (2010), «Fatal 4×100: Домашний коктейль из сока кратома», Journal of Health Research , Volume 24, pp. 43–47. Управление Организации Объединенных Наций по наркотикам и преступности (2010 г.), Модели и тенденции в отношении стимуляторов амфетаминового ряда и других наркотиков: Азиатско-Тихоокеанский регион .Управление ООН по наркотикам и преступности, Вена. Verachai, V., and Nilbun, S. (2005), «[Клинические симптомы зависимости от кратома]», Бюллетень Департамента медицинских услуг , том 30 (6), стр. 310–313 (на тайском языке с Резюме на английском языке). Vicknasingam, B., Narayanan, S., Beng, GT, and Mansor, SM (2010), «Неформальное использование кетума ( Mitragyna speciosa ) для отмены опиоидов в северных штатах полуострова Малайзия и последствия для заместительной терапии. терапия », International Journal of Drug Policy , Volume 21, pp.283–288. Ямамото, Л. Т., Хори, С., Такаяма, Х. и др. (1999), «Агонистические характеристики митрагинина псевдоиндоксила в отношении опиоидных рецепторов в сравнении с митрагинином, полученным из тайского лекарственного растения Mitragyna speciosa », General Pharmacology , Volume 33, pp. 73–81. Захариас Д. Э., Розенштейн Р. Д. и Джеффри Г. А. (1965), «Структура митрагинина гидроиодида», Acta Crystallographica , Volume 18, pp.1039–1043. Зарембо, Дж. Э., Дуглас, Б., Валента, Дж. И Вайсбах, Дж. А. (1974), «Метаболиты митрагинина», Journal of Pharmaceutical Sciences , том 63, стр. 1407–1415. http://www.murple.net/yachay/index.php/kratom Рэтч, К. (2005), Энциклопедия психоактивных растений. Этнофармакология и ее приложения , Park Street Press, Рочестер, Вермонт.ISBN: 0-89281-978-2. Siebert, D. (2008), ‘ The Kratom User’s Guide ’ вверх страницы Несмотря на культивирование в качестве источника продуктов питания, клетчатки и лекарств, а также его глобальный статус как наиболее часто употребляемого запрещенного наркотика, род Cannabis имеет неубедительную таксономическую организацию и историю эволюции. Типы наркотиков Cannabis (марихуана), которые содержат большое количество психоактивного каннабиноида Δ 9 -тетрагидроканнабинол (THC), используются в медицинских целях и в качестве рекреационного наркотика.Сорта конопли выращиваются для производства семян и волокна и содержат небольшое количество ТГК. Два вида или генофонда ( C . sativa и C . indica ) широко используются для описания родословной или внешнего вида культурных растений Cannabis . Используя 14031 однонуклеотидный полиморфизм (SNP), генотипированных в 81 образцах марихуаны и 43 образцах конопли, мы показываем, что марихуана и конопля значительно дифференцируются на уровне всего генома, демонстрируя, что различие между этими популяциями не ограничивается генами, лежащими в основе производства ТГК.Мы обнаружили умеренную корреляцию между генетической структурой штаммов марихуаны и их сообщенным C . sativa и C . indica и показывают, что названия штаммов марихуаны часто не отражают значимую генетическую идентичность. Мы также предоставляем доказательства того, что конопля генетически больше похожа на C . Indica типа марихуаны, чем C . sativa штаммов. Образец цитирования: Соулер Дж., Стаут Дж. М., Гарднер К. М., Хадсон Д., Видмар Дж., Батлер Л. и др.(2015) Генетическая структура марихуаны и конопли. PLoS ONE 10 (8):
e0133292.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0133292 Редактор: Николас А. Тинкер, Agriculture and Agri-Food Canada, CANADA Поступила: 20 февраля 2015 г .; Одобрена: 25 июня 2015 г .; Опубликован: 26 августа 2015 г. Авторские права: © 2015 Sawler et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника Доступность данных: Необработанная последовательность депонирована в NIH SRA в рамках BioProject PRJNA285813. Финансирование: SM получила финансирование от канадских кафедр исследований (http://www.chairs-chaires.gc.ca/chairholder-titulaires/profile-eng.aspx?profileId=2853) в форме Уровня 2. Стул Премия. Anandia Labs предоставила поддержку в виде заработной платы авторам JS и JEP, а The DOC Solutions предоставила финансовую поддержку автору DH, но не играла никакой дополнительной роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, решении о публикации или подготовке рукопись. Конкретные роли этих авторов сформулированы в разделе «Авторский вклад».SM получил финансирование от Совета по естественным наукам и инженерным исследованиям Канады (http://www.nserc-crsng.gc.ca) в форме Discovery Grant. Anandia Labs предоставила средства на секвенирование ДНК образцов каннабиса по контракту с лабораторией SM в Университете Далхаузи. Конкурирующие интересы: JS является сотрудником Anandia Labs. DH является владельцем и единственным сотрудником The Doc Solutions. JEP является акционером и сотрудником Anandia Labs. SM получила финансирование от Anandia Labs в виде контракта на секвенирование ДНК образцов каннабиса.Это не меняет приверженности авторов политике PLOS ONE в отношении обмена данными и материалами. Каннабис — одна из старейших сельскохозяйственных культур человечества, сведения об использовании которой датируются 6000 лет назад. Возможно, из-за его раннего происхождения и из-за ограничений на научные исследования, вызванных политикой в отношении наркотиков, история эволюции и одомашнивания каннабиса Cannabis остается малоизученной. Хиллиг (2005) на основе аллозимных вариаций предположил, что род состоит из трех видов ( C . sativa , С . индика и C . ruderalis ) [1], тогда как альтернативная точка зрения состоит в том, что Cannabis является монотипическим и что наблюдаемые субпопуляции представляют подвиды C . sativa [2]. Предполагаемый вид C . ruderalis может представлять дикие популяции других типов или адаптированные к северным регионам. Классификация популяций конопли затруднена из-за многих культурных факторов, и проследить историю растения, которое подвергалось широкому географическому распространению и искусственному отбору людьми на протяжении тысяч лет, оказалось трудным.Многие виды конопли имеют названия разновидностей, в то время как разновидности марихуаны не имеют организованной системы регистрации садоводства и называются штаммами. Проект генома и транскриптома C . sativa были опубликованы в 2011 году [3], однако до сих пор не было опубликовано исследований структуры популяции Cannabis с использованием высокопроизводительных методов генотипирования. По мере того как общественное мнение и законодательство во многих странах смещаются в сторону признания Cannabis как растения, имеющего медицинскую и сельскохозяйственную ценность [4], генетическая характеристика марихуаны и конопли становится все более важной как для клинических исследований, так и для усилий по улучшению сельскохозяйственных культур. Важным первым шагом к более глубокому эволюционному и функциональному анализу Cannabis , включая картирование признаков и идентификацию функциональных генетических вариаций, является характеристика генетической структуры рода. Здесь мы сообщаем о генотипировании разнообразной коллекции зародышевой плазмы Cannabis и показываем, что генетические различия между коноплей и марихуаной не ограничиваются генами, участвующими в производстве THC, в то время как сообщается C . sativa и C . indica предков штаммов марихуаны лишь частично отражают основные оси генетической структуры марихуаны. Чтобы оценить генетическую структуру обычно культивируемого каннабиса , мы генотипировали 81 образец марихуаны и 43 образца конопли, используя метод генотипирования путем секвенирования (GBS) [5]. Образцы марихуаны представляют собой широкий срез современных коммерческих сортов и местных сортов, в то время как образцы конопли включают различные европейские и азиатские образцы и современные сорта.Хотя в нашем исследовании мы отобрали образцы разнообразной коллекции типов каннабиса, доступ к образцам затруднен тем фактом, что марихуана является незаконным наркотиком, а хранилища зародышевой плазмы конопли ограничены в международных банках семян. Всего после применения фильтров качества и недостачи было идентифицировано 14 031 SNP. Анализ основных компонентов (PCA) марихуаны и конопли (рис. 1a) выявил четкую генетическую структуру, разделяющую марихуану и коноплю по первому основному компоненту (PC1). Это различие было дополнительно подтверждено с помощью алгоритма fastSTRUCTURE [6], предполагающего, что K = 2 предковых популяций (рис. 1c).PCA и fastSTRUCTURE дали очень похожие результаты: положение образца вдоль PC1 сильно коррелировало с его членством в группе согласно fastSTRUCTURE при K = 2 (r 2 = 0,98; p-значение <1 x 10 −15 ). Рис. 1. Генетическая структура марихуаны и конопли. (a) PCA 43 образцов конопли и 81 образца марихуаны с использованием 14 031 SNP. Образцы конопли окрашены в зеленый цвет, а образцы марихуаны — в соответствии с заявленным ими C . sativa родословная.Доля дисперсии, объясняемая каждым ПК, показана в скобках вдоль каждой оси. Два образца, помеченные своими идентификаторами, обсуждаются в тексте. (b) Коробчатые диаграммы, показывающие значительно более низкую гетерозиготность у марихуаны, чем у конопли. (c) Структура популяции конопли и марихуаны, оцененная с использованием модели примеси fastSTRUCTURE при K = 2. Каждая выборка представлена тонкой вертикальной линией, которая разделена на два цветных сегмента, которые представляют предполагаемую принадлежность выборки к каждому из двух предполагаемых кластеров. .Образцы конопли и марихуаны помечены под графиком. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0133292.g001 Мы наблюдаем предполагаемый C . indica штамм марихуаны из Пакистана, который генетически более похож на коноплю, чем на другие штаммы марихуаны (рис. 1a). Точно так же образец конопли CAN 37/97 более тесно связан со штаммами марихуаны (рис. 1а). Эти выбросы могут быть вызваны смешиванием образцов или их классификация как конопля или марихуана может быть неправильной.Образец CAN 37/97, который мы генотипировали, был из коллекции зародышевой плазмы канадской конопли, которая была получена из Генбанка IPK (Гатерслебен, Германия). Первоначальной страной-источником является Франция, но имеется ограниченная информация, указывающая на культивирование CAN 37/97 как конопли. В качестве альтернативы, эти образцы могут быть истинными выбросами и представлять исключительные штаммы, генетически непохожие на другие в своей группе. Используя текущий набор данных, однозначная идентификация образца как конопли или марихуаны будет возможна в первом случае, но не во втором.В любом случае, мы обнаруживаем, что основная ось генетической изменчивости конопли Cannabis отличает коноплю от марихуаны. Эти результаты значительно расширяют наше понимание эволюции линий конопли и марихуаны в Cannabis . Предыдущие анализы показали, что марихуана и конопля различаются по своей способности к биосинтезу каннабиноидов, при этом марихуана обладает аллелем B T , кодирующим синтазу тетрагидроканнабиноловой кислоты, а конопля обычно обладает аллелем B D для синтазы каннабидиоловой кислоты [7]. ].Кроме того, анализ транскриптома женских цветков показал, что гены каннабиноидного пути значительно активированы в марихуане по сравнению с коноплей, как и ожидалось из-за очень высоких уровней ТГК в первом по сравнению с последним [3]. Наши результаты показывают, что генетические различия между ними распределены по геному и не ограничиваются локусами, участвующими в производстве каннабиноидов. Кроме того, мы обнаружили, что уровни гетерозиготности у конопли выше, чем у марихуаны (рис. 1b; U-критерий Манна-Уитни, значение p = 8.64 x 10 −14 ), что предполагает, что сорта конопли происходят из более широкой генетической базы, чем у штаммов марихуаны, и / или что разведение среди близких родственников более распространено для марихуаны, чем для конопли. Различие между марихуаной и коноплей имеет серьезные юридические последствия во многих странах, и на сегодняшний день судебно-медицинские экспертизы в основном сосредоточены на определении того, следует ли классифицировать растение как наркотическое или немедикаментозное [8]. Правила ЕС и Канады разрешают только сорта конопли, содержащие менее 0.3% THC для выращивания. Хотя конопля и марихуана кажутся относительно хорошо разделенными вдоль PC1 (рис. 1a), мы не обнаружили SNP с фиксированными различиями между этими двумя группами: самое высокое значение F ST между коноплей и марихуаной среди всех 14031 SNP составляло 0,87 для SNP с аллелем. частота 0,82 у конопли и 0 у марихуаны (таблица S1). Среднее значение F ST между коноплей и марихуаной составляет 0,156 (S1 Рис.), Что аналогично степени генетической дифференциации у людей между европейцами и выходцами из Восточной Азии [9].Таким образом, хотя селекция каннабиса привела к четкой генетической дифференциации в зависимости от использования, конопля и марихуана по-прежнему имеют общий пул генетических вариаций. Хотя таксономическое разделение предполагаемых таксонов C . sativa и C . indica остается спорным, так как обычная таксономия, которая различает сорта Sativa и Indica, широко распространена в сообществе марихуаны. Считается, что растения типа Sativa, высокие с узкими листьями, производят марихуану со стимулирующим, церебральным психоактивным действием, в то время как растения типа Indica, короткие с широкими листьями, как сообщается, производят марихуану, которая обладает успокаивающим и расслабляющим действием.Мы обнаружили, что генетическая структура марихуаны частично согласуется с оценками происхождения конкретного штамма, полученными из различных онлайн-источников (рис. 2, таблица S2). Мы наблюдаем умеренную корреляцию между положением штаммов марихуаны вдоль первого главного компонента (PC1) на рис. 2a и сообщенными оценками C . sativa предков (рис. 2c) (r 2 = 0,36; значение p = 2,62 x 10 −9 ). Это соотношение также наблюдается для второго главного компонента (PC2) на рис. 1a (r 2 = 0.34; p-значение = 1,21 x 10 −8 ). Это наблюдение предполагает, что C . sativa и C . индика может представлять различимые пулы генетического разнообразия [1], но это селекция привела к значительному смешению между ними. Хотя, по-видимому, существует генетическая основа для заявленного происхождения многих штаммов марихуаны, в некоторых случаях определение происхождения сильно не согласуется с нашими данными о генотипе. Например, мы обнаружили, что ямайский хлеб из ягнят (100% сообщили, что C . sativa ) был почти идентичен (IBS = 0,98) 100% C . indica штамм из Афганистана. Смешивание образцов не может быть исключено как потенциальная причина этих расхождений, но аналогичный уровень ошибочной классификации был обнаружен у штаммов, полученных из голландских кафе, на основе химического состава [10]. Неточность сообщаемого происхождения марихуаны, вероятно, связана с преимущественно подпольным характером выращивания и разведения конопли за последнее столетие.Признавая это, штаммы марихуаны, продаваемые для медицинского использования, часто называют «доминирующими» сативой или индикой, чтобы описать их морфологические характеристики и терапевтические эффекты [10]. Наши результаты предполагают, что заявленное происхождение некоторых из наиболее распространенных штаммов марихуаны лишь частично отражает их истинное происхождение. Рис. 2. Генетическая структура марихуаны. (a) PCA 81 образца марихуаны с использованием 9 776 SNP. Образцы окрашены в соответствии с заявленным кодом C . sativa родословная. Доля дисперсии, объясняемая каждым ПК, показана в скобках вдоль каждой оси. (b) Структура популяции марихуаны, рассчитанная с использованием модели примеси fastSTRUCTURE при K = 2. Каждая выборка представлена горизонтальной полосой, которая разделена на два цветных сегмента, которые представляют предполагаемую принадлежность выборки к каждому из двух предполагаемых кластеров. Рядом с каждой полосой указано название образца и указано% C . sativa родословная.(c) Корреляция между главной осью генетической структуры (PC1) марихуаны и сообщенным C . sativa родословная. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0133292.g002 Как ветроопыляемое двудомное растение (хотя существуют однодомные формы), каннабис очень гетерозиготен, и многие штаммы марихуаны размножаются клонально, чтобы сохранить их генетическая принадлежность. Однако, в отличие от других клонально размножаемых культур, таких как яблоки и виноград, названия штаммов присваиваются растениям марихуаны, даже если они выращены из семян.Таким образом, название сорта марихуаны не обязательно представляет собой генетически уникальный сорт. Чтобы исследовать генетическую идентичность названных штаммов марихуаны на генетическом уровне, мы сравнили образцы с идентичными названиями друг с другом и со всеми другими генотипированными образцами. Мы обнаружили, что в 6 из 17 сравнений (35%) образцы были более генетически похожи на образцы с разными названиями, чем на образцы с одинаковыми названиями. Мы пришли к выводу, что генетическая идентичность штамма марихуаны не может быть достоверно выведена по его названию или по его зарегистрированному происхождению. Конопля всегда классифицируется как C . sativa в ранее опубликованной литературе [11, 12], и преобладающим предположением было то, что сорта, используемые для производства волокна и семян, происходят от C . sativa [1]. Наши результаты несовместимы с этим предположением: генетическое расстояние штамма марихуаны до конопли отрицательно коррелирует с сообщенным C . sativa происхождение (r 2 = 0,17; значение p = 0.0002) и отрицательно коррелирует с его положением вдоль ПК1 на рис. 2а (r 2 = 0,43; значение p = 4,63 x 10 −11 ). Более того, мы обнаружили, что F ST выше между штаммами конопли и марихуаны со 100% зарегистрированным C . sativa (F ST = 0,161), чем между коноплей и штаммами со 100% зарегистрированными C . индика происхождение (F ST = 0,136). Хиллиг (2005) бросил вызов C . sativa , происхождение конопли, и отметил, что штаммы волокна / семян из Азии группируются с C . индика [1]. Аналогичным образом, недавнее исследование с использованием маркеров случайной амплифицированной полиморфной ДНК (RAPD) обнаружило, что C . indica более тесно сгруппированы с коноплей, чем с C . sativa или гибридные штаммы марихуаны [8]. В соответствии с этими исследованиями, наши результаты показывают, что конопля имеет большую долю аллелей, общих с C . indica , чем с C . sativa . Существует нехватка общедоступных репозиториев зародышевой плазмы конопли и лишь несколько фрагментов частных коллекций штаммов марихуаны по всему миру.Эти факторы, а также низкая жизнеспособность семян конопли после длительного хранения вызывают опасения, что описанные здесь геномные вариации могут быть потеряны. После десятилетий ограничительных правил и замены волокна конопли синтетическими продуктами выращивание каннабиса в настоящее время возрождается во многих частях мира. Например, в 2013 году посевные площади канадской конопли достигли 27 000 га [13], а поддержка исследований конопли была включена в недавний закон о фермерских хозяйствах США [14].Настоящее исследование дает ясность в отношении генетической структуры марихуаны и конопли и подчеркивает серьезные проблемы, связанные с лечением зародышевой плазмы марихуаны из-за ее тайного прошлого. Создание практичной, точной и надежной системы классификации для Cannabis , включая систему регистрации сортов растений типа марихуаны, потребует значительных научных инвестиций и правовой базы, которая допускает как законные, так и незаконные формы этого растения. Такая система необходима для реализации огромного потенциала каннабиса как многоцелевой культуры (конопля) и лекарственного растения (марихуана). Штаммы марихуаны, генотипированные в этом исследовании, были предоставлены автором DH (выращены уполномоченными производителями Министерства здравоохранения Канады) и представляют собой зародышевую плазму, выращенную и используемую для разведения в медицинской и рекреационной индустрии марихуаны (таблица S2). Штаммы конопли были предоставлены автором JV (лицензиатом по выращиванию конопли Министерства здравоохранения Канады) и представляют современные сорта семян и волокон, выращенные в Канаде, а также разнообразную зародышевую плазму Европы и Азии (таблица S3).ДНК экстрагировали из ткани листьев конопли с использованием мини-набора для растений Qiagen DNeasy и из листьев марихуаны с использованием набора Macherey-Nagel NucleoSpin 96 Plant II с обработкой в вакуумном коллекторе. Подготовка библиотеки и секвенирование были выполнены с использованием протокола GBS, опубликованного Sonah et al [15]. Необработанная последовательность была депонирована в Архиве считывания последовательностей NIH (SRA) в BioProject PRJNA285813. SNP с глубиной чтения 10 или более были вызваны с использованием конвейера GBS, разработанного Gardner et al. [16], выравнивание по canSat3 C . sativa референсная сборка генома [3]. Качественная фильтрация генетических маркеров была выполнена в PLINK 1.07 [17] путем удаления SNP с (i) отсутствием по локусу более 20%, (ii) частотой минорного аллеля менее 1% и (iii) избыточной гетерозиготностью (равновесие Харди-Вайнберга). p-значение меньше 0,0001). После фильтрации 14 031 SNP оставалось для анализа. Зарегистрированные пропорции предков (% C . sativa и% C . indica ) были вручную получены из онлайн-баз данных штаммов, у розничных продавцов семян Cannabis и у лицензированных производителей медицинской марихуаны (таблица S2). Автор DH представил оценки происхождения 26 штаммов, по которым не было доступной информации в Интернете. Анализ главных компонентов (PCA) был выполнен с использованием PLINK 1.9 (www.cog-genomics.org/plink2)[18]. fastSTRUCTURE [6] был запущен при K = 2 и K = 3 с использованием параметров по умолчанию для комбинированных образцов конопли и марихуаны (14 031 SNP) (рис. 1a и 1c) и только образцов марихуаны (9 776 SNP) (рис. 2a и 2b).Анализ при K = 2 был проведен для проверки того, в какой степени образцы отражают две отдельные группы. Были протестированы другие значения K (не показаны), но они не предоставили дополнительной оптимизации или описательной ценности. Гетерозиготность индивидуума вычисляли в R путем деления количества гетерозиготных сайтов на количество не пропущенных генотипов для каждого образца. В результате метода генотипирования, использованного в этом исследовании, мы ожидаем систематического ошибочного называния генотипов гетерозиготных как гомозиготных из-за нашего порога глубины секвенирования ≥10 считываний (см. Рис. 2 в [19]). Попарное соотношение IBS между всеми парами образцов рассчитывалось с использованием PLINK 1.07. Один выброс был исключен из этого анализа, C . indica (Пакистан) из-за того, что СРК у конопли значительно выше, чем у всех других штаммов марихуаны (меченый образец марихуаны на рис. 1а). Чтобы определить, имеет ли популяция конопли большее аллельное сходство с C . sativa или C . indica марихуаны, мы рассчитали среднее попарное СРК между каждым штаммом марихуаны и всеми штаммами конопли. Мы провели этот анализ при различных порогах частоты минорных аллелей, и результат не изменился. (a) F Распределение ST для всех генотипированных SNP. (б) Распределение SNP с F ST больше 0.5. Среднее значение F ST взвешено по частоте аллелей и рассчитано в соответствии с уравнением 10 в Weir and Cockerham (1984) [20]. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0133292.s001 (PDF) Мы хотели бы поблагодарить Greenhouse Seeds, Kannabia Seeds, Paradise Seeds, Марко Ренду и Кеннета Лэнгфорда за предоставленные семена; Рори Хадсон и The Peace Naturals Project, которые выращивали растения марихуаны по лицензии Министерства здравоохранения Канады; Джули Бернье, Сьюзан Козил и Ян Сласки (Alberta Innovates — Technology Futures) за предоставленные образцы конопли; и Патрик Дж.Брауну и Адаму Р. Бойко за полезные комментарии к рукописи. Эта статья была написана частично благодаря финансированию программы Canada Research Chairs и Национального совета по научным и инженерным исследованиям Канады. Задумал и спроектировал эксперименты: JEP SM. Проведены эксперименты: JS JMS KMG DH JV LB JEP SM. Проанализированы данные: JS JEP SM. Внесенные реагенты / материалы / инструменты анализа: КМГ. Написал статью: JS JEP SM. [PubMed] [Google Scholar] 29. Steill И. Г., Уэллс Г. А., Де Майо В. Дж. и др. Изменяемые факторы, связанные с улучшенной остановкой сердца в многоцентровой базовой системе жизнеобеспечения / дефибрилляции.Результаты фазы I исследования OPLAS. Ann Emerg Med 199 832–1847. [PubMed] [Google Scholar] 32. Херлитц Дж., Эксторм Л., Веннерблом Б. и др. Влияние инициированной свидетелем СЛР на фибрилляцию желудочков и выживаемость после остановки сердца вне больницы. Br Heart J 19 08–412. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 33. Идрис А., Ропполол Л. Препятствия для диспетчерской телефонной сердечно-легочной реанимации. Энн Эмег Мед 200342738–740. [PubMed] [Google Scholar] 34. Эберле Б., Дик В. Ф., Шнайдер Т.
и др. Проверка пульса сонной артерии: диагностическая точность первых респондентов у пациентов с пульсом и без него. Реанимация 199633107–116. [PubMed] [Google Scholar] 35. Бахр Дж., Кинглер Х., Панцер В. и др. Навыки непрофессионалов в проверке пульса сонной артерии. Реанимация 19973523–26. [PubMed] [Google Scholar] 36. Керн К. Б., Хилвиг Р. В., Берг Р. А. и др. Важность компрессионных сжатий грудной клетки во время сердечно-легочной реанимации: улучшение результатов при моделировании сценария с одним спасателем.Тираж 2002105745–749. [PubMed] [Google Scholar] 37. Керн К. Б., Хилвиг Р. В., Берг Р. А. и др. Эффективность СЛР BLS только с компрессией грудной клетки при наличии закупоренных дыхательных путей. Реанимация 199839179–188. [PubMed] [Google Scholar] 38. Берг Р. А. Роль искусственного дыхания изо рта в рот в СЛР сторонним наблюдателем при остановке сердца при асфиксии. Crit Care Med 200028 (дополнение) N193 – N195. [PubMed] [Google Scholar] 39. Wik L, Kramer-Johansen J, Myklebust H. et al Качество сердечно-легочной реанимации при внебольничной остановке сердца.JAMA 20052–304. [PubMed] [Google Scholar] 40. Абелла Б. С., Альварадо Дж. П., Миклебуст Х. и др. Качество сердечно-легочной реанимации во время остановки сердца в больнице. JAMA 20052–310. [PubMed] [Google Scholar] 41. Abella B S, Sandbo N, Vassilatos P. et al Частота компрессии грудной клетки во время СЛР субоптимальна: проспективное исследование во время остановки сердца в больнице. Тираж 2005111428–434. [PubMed] [Google Scholar] 42. Валенсуэла Т. Д., Керн К. Б., Кларк Л. Л. и др. Прерывания сжатия грудной клетки во время реанимации систем экстренной медицинской помощи.Тираж 20051121259–1265. [PubMed] [Google Scholar] 43. Баббс К. Ф., Керн К. Б. Оптимальные соотношения компрессии и вентиляции во время СЛР в реальных практических условиях: физиологический и математический анализ. Реанимация 200254147–157. [PubMed] [Google Scholar] 44. Сандерс А. Б., Керн К. Б., Берг Р. А. и др. Выживаемость и неврологический исход после сердечно-легочной реанимации с четырьмя различными соотношениями компрессия-вентиляция грудной клетки. Ann Emerg Med 200240553–562. [PubMed] [Google Scholar] 45.Yannopoulos D, Aufderheide T, Gabrielle A. et al Клиническое и гемодинамическое сравнение соотношения компрессии и вентиляции 15: 2 и 30: 2 для сердечно-легочной реанимации. Crit Care Med 2006341444–1449. [PubMed] [Google Scholar] 46. Хазиниски М. Ф., Надкарни В. М., Хики Р. В. и др. Основные изменения в рекомендациях AHA 2005 г. по СЛР и неотложной помощи при сердечно-сосудистых заболеваниях. Достигнув переломного момента для перемен. Тираж 2005112206–211. [PubMed] [Google Scholar] 47. Реа Т. Д., Айзенберг М. С., Беккер Дж. и др. Временные тенденции внезапной остановки сердца: 25-летняя перспектива оказания неотложной медицинской помощи.Тираж 20031072780–2785. [PubMed] [Google Scholar] 48. Holmberg M, Holmberg S, Herlitz J. Частота, продолжительность и выживаемость фибрилляции желудочков у пациентов с остановкой сердца вне больниц в Швеции. Реанимация 2000447–17. [PubMed] [Google Scholar] 49. Хонг М. Ф., Дориан П. Последние сведения о передовых методах жизнеобеспечения и реанимации. Curr Opin Cardiol 2004201–6. [PubMed] [Google Scholar] 50. Банч Т. Дж., Уайт Р. Д., Греш Б. Дж. и др. Долгосрочные исходы остановки сердца вне больницы после успешной ранней дефибрилляции.N Engl J Med 20033482626–2633. [PubMed] [Google Scholar]08–615. [PubMed] [Google Scholar] 66. Weaver W. D., Hill D., Fahrenbrunch C. E. et al. Использование автоматического внешнего дефибриллятора для лечения остановки сердца вне больницы. N Engl J Med 1988319661–666. [PubMed] [Google Scholar] 67. Чеккин Ф., Йоргенсен Д. Б., Берул С. И. и др. Является ли определение аритмии автоматическим внешним дефибриллятором точным для детей? Чувствительность и специфичность автоматического внешнего дефибриллятора при 696 случаях аритмии у детей. Тираж 20011032483 [PubMed] [Google Scholar] 68. Маттиони Т.А., Надермани К., Бродский М. и др. Первоначальный клинический опыт использования полностью автоматического стационарного внешнего кардиовертера-дефибриллятора. Pacing Clin Electrophysiol 19948 [PubMed] [Google Scholar] 69. Мартинес ‐ Рубио А., Канаан Н., Борггрефе М. et al. Достижения в лечении остановки сердца в стационаре: безопасность и эффективность нового автоматического внешнего кардиовертера-дефибриллятора. Дж. Ам Колл Кардиол 200341627 [PubMed] [Google Scholar] 70. Аткинсон Э., Микиса Б., Конвей Дж. А. и др. Специфика и чувствительность автоматизированного анализа ритма внешнего дефибриллятора у младенцев и детей. Энн Эмерг Мед 200342185 [PubMed] [Google Scholar] 71. Холлстром А. П., Орнато Дж. П., Вайсфельдт М. и др. Исследователи испытаний дефибриллятора общего доступа.Дефибрилляция в открытом доступе и выживаемость после остановки сердца вне больницы. N Engl J Med 2004351637–646. [PubMed] [Google Scholar] 72. Каффери С. Л., Уиллоуби П. Дж., Пепе П. и др. Использование автоматических внешних дефибрилляторов в общественных местах. N Engl J Med 20023471242–1247. [PubMed] [Google Scholar] 73. Вайсфельдт М.Л., Кербер Р.Э., МакГолдрик Р.П. и др. Отчет Американской кардиологической ассоциации о конференции по дефибрилляции в открытом доступе. 8–10 декабря 1994 г. Рабочая группа по автоматическому внешнему дефибриллятору.Тираж 19950–2747. [PubMed] [Google Scholar] 74. Вайсфельдт М.Л., Кербер Р.Е., МакГолдрик Р.П. и др. Дефибрилляция в открытом доступе: заявление для специалистов здравоохранения от Рабочей группы Американской кардиологической ассоциации по автоматической внешней дефибрилляции. Тираж 19953 [PubMed] [Google Scholar] 75. Никол Дж., Холлстром А. П., Орнато Дж. П. и др. Потенциальная экономическая эффективность дефибрилляции в открытом доступе в США. Тираж 1998971315–1320. [PubMed] [Google Scholar] 76.Антман Э. М., Анбе Д. Т., Армстронг П. Э. и др. Рекомендации ACC / AHA по ведению пациентов с инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST. Тираж 2004110588 [PubMed] [Google Scholar] 77. Моррисон Л. Дж., Дориан П., Лонг Дж. и др. При остановке сердца вне больницы, прямолинейные двухфазные или монофазные демпфированные синусоидальные сигналы дефибрилляции с расширенным испытанием средств жизнеобеспечения (ORBIT). Реанимация 200566149–157. [PubMed] [Google Scholar] 78. Уивер В. Д., Кобб Л. А., Копасс М. К. и др. Дефибрилляция желудочков: сравнительное испытание с использованием носков 175-J и 320-J.N Engl J Med 19823071101–1106. [PubMed] [Google Scholar] 79. Хазиниски М. Ф., Нолан П., Беккер Л. Б. и др. Спорные темы Международной консенсусной конференции 2005 года по сердечно-легочной реанимации и неотложной сердечно-сосудистой помощи с рекомендациями по лечению. Тираж 2005112133–136. [PubMed] [Google Scholar] 80. Группа исследования гипотермии после остановки сердца Мягкая терапевтическая гипотермия для улучшения неврологического исхода после остановки сердца. N Engl J Med 2002346549–556.[PubMed] [Google Scholar] 81. Бернард С.А., Грей Т.В., Буист М.Д. и др. Лечение выживших в коме после внебольничной остановки сердца с индуцированной гипотермией. N Engl J Med 2002346557–563. [PubMed] [Google Scholar] 82. Херлитц Дж., Кастрен М., Фриберг Х. и др. Постреанимационная помощь: каковы терапевтические альтернативы и что мы знаем? Реанимация 20066915–22. [PubMed] [Google Scholar] 83. Отто К. В., Якайтис Р. В., Эви Г. А. Влияние адреналина на дефибрилляцию при ишемической фибрилляции желудочков.Am Emerg Med 19853285 [PubMed] [Google Scholar] 84. Брюнетт Д. Д., Джеймсон С. Дж. Сравнение стандартных и высоких доз адреналина при реанимации остановки сердца у собак. Энн Эмег Мед 19 1045 [PubMed] [Google Scholar] 86. Brown C G, Martin D. R, Pepe P E. et al Сравнение стандартных доз адреналина и высоких доз адреналина при остановке сердца вне больницы.Многоцентровая группа исследования высоких доз адреналина. N Engl J Med 191051 [PubMed] [Google Scholar] 87. Callaham M, Madsen CD, Barton C. W. et al Рандомизированное клиническое испытание высоких доз адреналина и нор-адреналина по сравнению со стандартной дозой адреналина при догоспитальной остановке сердца. JAMA 192667 [PubMed] [Google Scholar] 88. Линднер К. Х., Пренгель А. В., Бринкманн А. и др. Введение вазопрессина при рефрактерной остановке сердца. Ann Intern Med 19661241061–1064. [PubMed] [Google Scholar] 89.Линднер К. Х., Диркс Б., Строменгер Х. У. и др. Рандомизированное сравнение адреналина и вазопрессина у пациентов с внебольничной фибрилляцией желудочков. Ланцет 1997349535–537. [PubMed] [Google Scholar] 90. Американская кардиологическая ассоциация в сотрудничестве с Международным комитетом по связи по реанимации. Руководство 2000 г. по сердечно-легочной реанимации и неотложной сердечно-сосудистой помощи. Часть 6: перспективная поддержка сердечно-сосудистой системы: раздел 6: фармакология II: средства для оптимизации сердечного выброса и артериального давления.Тираж 2000102 (доп. 8) I129 – I135. [PubMed] [Google Scholar] 91. Steill И. Г., Герберт П. К., Уэллс Г. А. и др. Вазопрессин против адреналина при остановке сердца в больнице: рандомизированное контролируемое исследование. Ланцет 2001358105–109. [PubMed] [Google Scholar] 92. Венцель В., Крисмер А.С., Арнтц Х. Р. и др. Сравнение вазопрессина и адреналина для внебольничной сердечно-легочной реанимации. N Engl J Med 2004350105–113. [PubMed] [Google Scholar] 93. Аунг К., Хати Т. Вазопрессин для остановки сердца: систематический обзор и метаанализ.Arch Intern Med 200516517–24. [PubMed] [Google Scholar] атрибутов торговых центров: удовлетворенность и лояльность туристов | МАНСОРИ
6761. 311306660. Восстановительный глициновый путь обеспечивает автотрофный рост Desulfovibrio desulfuricans
Используемый штамм и условия культивирования
Физиологические исследования и аналитические методы
Анализ эталонного генома
Анализ мутаций перенесенных культур
до ERR42 (BioProject PRJEB22313). Повторно секвенированные геномы были сопоставлены с исходным геномом с помощью bowtie2 v.2.3.4.1 47 , а затем преобразовать в отсортированные файлы BAM с помощью samtools v1.6 48 . Дубликаты были отмечены с помощью инструментов Picard v.1.124 (http://broadinstitute.github.io/picard/), а SNP были вызваны с помощью HaploTypeCaller из пакета GATK, v4.1.2.0 63 , с набором — — sample-ploidy to 1. Все файлы vcf были объединены с bcftools v1.4 64 . Комбинированный файл vcf был отфильтрован, чтобы сохранить только те SNP, которые имели счетчик чтения> 15 (среднее покрытие чтения в геноме составляло ~ 150–180). Изучение присутствия пути rGly в других геномах
Транскриптомный анализ
Протеомный анализ
Мечение стабильных изотопов с помощью
13 C-формиата Динамическое изотопное мечение с помощью
13 C-формиата Сводка отчетов
Кратом (Mitragyna speciosa) профиль препарата
Молекулярная структура: митрагинин
Молекулярный вес: 398,50 г / моль Молекулярная структура: 7-гидроксимитрагинин
Молекулярный вес: 414,50 г / моль Анализ
Дополнительная литература
Генетическая структура марихуаны и конопли
Abstract
Введение
Результаты и обсуждение
Материалы и методы
Генетический материал и генотипирование
Сборник зарегистрированных предков марихуаны
Анализ популяционной структуры и гетерозиготности
Анализ идентичности по штатам (IBS)
Вспомогательная информация
S1 Рис. Распределение F
ST между образцами марихуаны и конопли по 14 031 SNP. Благодарности
Вклад авторов
Ссылки
.