П 3 ст 81 тк рф: ТК РФ Статья 81. Расторжение трудового договора по инициативе работодателя

Содержание

Безопасность и правопорядок

  • // МЧС информирует 03.09.2021
    Тактико-специальные учения ГлавУпДК

  • // МЧС информирует 03.09.2021
    Первого сентября в День знаний в отделениях "Технического пожарно-спасательного колледжа имени Героя Российской Федерации В.М. Максимчука" прошли торжественные линейки для студентов.

  • // МЧС информирует 03.09.2021
    В ЮАО прошли тренировочные пожарно-тактические учения по тушению условного пожара на ТЭЦ-26 филиала ОАО «Мосэнерго»

  • // МЧС информирует 19.08.2021

    Продолжаем рассказывать о пожарных частях ЮАО

  • // МЧС информирует 19.08.2021
    Нередко пожар возникает при проведении ремонтных работ.

  • // МЧС информирует 19.08.2021

    Безопасный дом!

  • // МЧС информирует 19.08.2021
    Природные пожары

  • // МЧС информирует 22.07.2021

    287 спасенных жизней: в Московском авиацентре подвели итоги за первое полугодие 2021 года За первые полгода пилотов и спасателей Московского авиацентра вызывали 470 раз для оказания помощи пострадавшим, в результате чего спасены 287 человек и потушено 9 крупных пожаров в московском регионе с участием экипажей вертолетов.

  • // МЧС информирует 22.07.2021

    В Департаменте ГОЧСиПБ прошли соревнования по боевому развертыванию В Пожарно-спасательном центре столицы завершился первый этап Открытого Чемпионата города Москвы по боевому развертыванию на Кубок председателя комиссии по ЧС и обеспечению пожарной безопасности города.

  • // МЧС информирует 22.07.2021
    Равняться на сильнейших: в столице определили лучшего спасателя С 6 по 8 июля определяли лучшего спасателя Москвы в рамках конкурса профессионального мастерства «Московские мастера».

  • // МЧС информирует 22.07.2021
    Соревнования, спасения и любовь: семьи специалистов Департамента ГОЧСиПБ рассказали о том, как их объединило общее дело В День семьи, любви и верности рассказываем о специалистах Департамента по делам гражданской обороны, чрезвычайным ситуациям и пожарной безопасности, для которых оказание помощи москвичам — дело семейное.

  • // МЧС информирует 22.07.2021

    С начала года московские пожарные спасли более 400 пострадавших Подразделения Пожарно-спасательного центра Москвы за первое полугодие 2021 года совершили 12400 выездов и спасли 440 человек.

  • // МЧС информирует 22.07.2021
    Водные спасатели проводят занятия с участниками проекта «PROГероев» В столице на поисково-спасательных станциях «Строгино» и «Царицыно» Московской городской поисково-спасательной службы на водных объектах проходят занятия в рамках проекта «PROГероев».

  • // МЧС информирует 12.07.2021
    Правила безопасности на водных объектах

  • // Прокуратура информирует 07.07.2021

    Прокуратура ЮАО г. Москвы информирует:

  • // Прокуратура информирует 05.07.2021
    Разъяснение законодательства

  • // Прокуратура информирует 05.07.2021

    О результатах надзорной деятельности.

  • // Прокуратура информирует 05.07.2021
    Прокуратура Южного административного округа г. Москвы о Международном молодежном конкурсе социальной рекламы «Вместе против коррупции!»

  • // Прокуратура информирует 01.07.2021

    О результатах надзорной деятельности.

  • // Прокуратура информирует 29.06.2021
    С какого возраста несовершеннолетние могут быть привлечены к административной ответственности

  • Увольнение медицинских работников по инициативе работодателя

    Увольнение работников против их собственного желания – это всегда заведомо конфликтная ситуация, и медицинская сфера деятельности – не исключение. Судебной практике известно немало случаев увольнений врачей и медсестер, которые впоследствии были признаны судом незаконными. Поэтому как работодателю, так и медработнику важно знать о своих правах и обязанностях при увольнении по инициативе руководства, а также тонкости процедуры увольнения по разным основаниям. В нашей статье мы подробно рассказываем о том, когда и за что можно уволить медработника, какие действия начальства недопустимы и какие права работника должны быть соблюдены.

    Правовое регулирование увольнения медработника по инициативе работодателя

    Трудовой кодекс РФ (далее – ТК РФ) и иные законодательные акты не содержат никаких специальных норм относительно оснований и процедуры увольнения медицинских работников. Поэтому в этих вопросах следует руководствоваться общими нормами об увольнении, в частности, если мы говорим об увольнении по инициативе работодателя, – статьей 81 ТК РФ. В этой статье перечислены те ситуации, когда руководство клиники, больницы, медцентра может принудительно расторгнуть с врачом или медсестрой трудовой договор, не спрашивая на то их мнения, а именно:

    1. Ликвидация организации или прекращение деятельности ИП (п. 1 ч. 1 ст. 81 ТК РФ).
    2. Сокращение численности или штата работников (п. 2 ч. 1 ст. 81 ТК РФ).
    3. Несоответствие медработника занимаемой должности или выполняемой работе из-за недостатка квалификации (п. 3 ч. 1 ст. 81 ТК РФ).
    4. Неоднократное неисполнение работником своих трудовых обязанностей без уважительных причин при наличии ранее наложенного дисциплинарного взыскания (п. 5 ч. 1 ст. 81 ТК РФ).
    5. Однократное грубое нарушение медработником трудовых обязанностей (прогул, появление на работе в состоянии опьянения, разглашение врачебной тайны и др.) (п. 6 ч. 1 ст. 81 ТК РФ).
    6. Предъявление работодателю подложных документов при трудоустройстве (п. 11 ч. 1 ст. 81 ТК РФ).
    7. Утрата доверия к работнику, обслуживающему ценности, вследствие совершения им виновных действий (п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ).

    Отдельным основанием увольнения служит неудовлетворительный результат испытания, если медработник был принят на работу с испытательным сроком (ст. 71 ТК РФ).

    Обратите внимание, что уволить любого работника, включая медика, можно строго по основаниям, предусмотренным ТК РФ (за исключением дистанционных работников). «Придумывать» иные причины для увольнения недопустимо. Расторжение трудового договора по каждому из предусмотренных ТК РФ оснований должно происходить по определенному алгоритму, с соблюдением установленных запретов и ограничений, в противном случае, оно может быть признано незаконным по иску работника.

    Далее остановимся подробно на каждом из них.

    Увольнение медработников вследствие ликвидации организации

    Прекращение деятельности медицинской организации (индивидуального предпринимателя), в которой трудоустроен медработник, является безусловным основанием для увольнения любых работников, даже относящихся к социально уязвимым категориям (беременных женщин, одиноких матерей и т.д.). Казалось бы, все просто, однако на практике возникает множество спорных ситуаций и по процедуре, и по последствиям увольнения для врачей и медсестер.

    Во-первых, следует иметь в виду, что для увольнения по этому основанию недостаточно лишь декларативного заявления руководителя о прекращении деятельности и закрытии клиники. Необходимо принятие в установленном законом порядке решения медорганизации о прекращении деятельности и действительное фактическое прекращение деятельности (п. 28 Постановления Пленума Верховного Суда РФ от 17.03.2004 №2 «О применении судами РФ Трудового кодекса РФ»). Деятельность может быть прекращена также вследствие отказа в продлении лицензии на медицинскую деятельность.

    Кроме того, в судебной практике высказывается позиция, согласно которой и этого недостаточно, а необходимо совершение всех остальных действий, связанных с ликвидацией организации (назначение ликвидационной комиссии, установление сроков и порядка ликвидации, опубликование в СМИ сообщения о ликвидации, уведомление кредиторов о ликвидации, внесение в ЕГРЮЛ записи о нахождении юрлица в стадии ликвидации (Определение Второго кассационного суда общей юрисдикции от 26.05.2020 по делу №88-8163/2020).

    Обратите внимание, что уволить по данному основанию нельзя, если права и обязанности организации переходят к другому лицу в порядке правопреемства, то есть недопустимо «маскировать» реорганизацию под ликвидацию. А вот если закрывается только филиал или обособленное подразделение в каком-либо населенном пункте, но головная организация продолжает работу, то увольнение должно осуществляться именно в связи с ликвидацией организации, а не вследствие отказа работника от перевода в другую местность (ч. 4 ст. 81 ТК РФ; определение ВС РФ от 24.06.2019 №83-КГ19-4).

    Перед тем, как издать приказ об увольнении в связи с ликвидацией медорганизации, ее руководитель обязан за 2 месяца известить об этом сотрудников (ч. 2 ст. 180 ТК РФ) и, службу занятости (п. 2 ст. 25 Закона РФ от 19.04.1991 №1032-1 «О занятости населения»). При этом отраслевым соглашением или коллективным договором может быть установлен и иной, больший, срок для уведомления. Заблаговременное извещение об увольнении необходимо для того, чтобы медработник смог решить за это время вопрос с дальнейшим трудоустройством.

    ТК РФ разрешает расторгнуть трудовой договор и досрочно при наличии на то согласия работника.

    При увольнении, кроме заработной платы и отпускных, медработнику необходимо выплатить выходное пособие в размере одного среднего заработка (ч. 1 ст. 178 ТК РФ), а если трудовой договор расторгается досрочно, то также и дополнительную компенсацию в размере среднего заработка за период, оставшийся до окончания срока (ч. 3 ст. 180 ТК РФ). В исключительных случаях, когда трудоустройство уволенного работника затягивается, работодатель должен выплатить ему средний заработок за второй и третий месяцы со дня увольнения (ч. 2, 3 ст. 178 ТК РФ).

    Сокращение численности или штата медработников

    Сокращение численности или штата работников – это основание увольнения, которое очень часто вызывает недовольство работников и как следствие судебные споры. Актуально это и для медицинской сферы деятельности, которая периодически подвергается реформам.

    Как правило, сокращение является для работодателя вынужденной мерой, например, при уменьшении количества пациентов и объема работы, закрытии отделений клиник и больниц. Иногда сокращение может быть вызвано автоматизацией какого-либо процесса.

    Сокращение численности означает уменьшение числа работников одной должности, например, в больнице уменьшается число медсестер с 15 до 10. Сокращение штата же означает полное исключение каких-либо штатных единиц из штатного расписания и как следствие, увольнение лиц, занимавших эти должности. Например, из штатного расписания исключается должность врача терапевта подросткового.

    Руководитель медорганизации не обязан обосновывать причины сокращения, однако, как и при ликвидации организации, сокращение ни в коем случае не должно быть фиктивным. В случае спора с «обиженным» работником работодатель обязан будет доказать, что сокращение численности работников или штата реально. Так, если после увольнения врача, руководство больницы тут же дает объявление о поиске нового работника на аналогичную должность, суд признает увольнение прежнего сотрудника незаконным.

    Увольнение по рассматриваемому основанию отличается довольно сложной и трудоемкой процедурой. Соблюсти ее во всех тонкостях очень важно, иначе риск признания увольнения незаконным крайне велик.

    Во-первых, увольняемого медработника требуется уведомить о предстоящем расторжении трудового договора за 2 месяца (ч. 2 ст. 180 ТК РФ), в противном случае увольнение может быть признано незаконным (см. например, апелляционное определение Нижегородского областного суда от 04.06.2019 по делу №33–5728/2019).

    Во-вторых, необходимо известить за этот же срок службу занятости и профсоюз при его наличии, а если предполагается массовое высвобождение медработников, то направить извещение нужно за 3 месяца (ч. 1 ст. 82 ТК РФ).

    В-третьих, прежде чем сократить медработника, руководство клиники обязано предложить ему другую имеющуюся работу в данной местности либо по аналогичной должности, либо и по нижестоящей или нижеоплачиваемой должности — главное, чтобы состояние здоровья работника позволяло ему выполнять такую работу (ч. 3 ст. 81 ТК РФ). Предлагать вакансии в других местностях работодатель обязан только, если это предусмотрено коллективным договором, соглашениями, трудовым договором.

    В-четвертых, как и при ликвидации организации, каждому сокращенному работнику необходимо выплатить выходное пособие в размере одного среднего месячного заработка (ч. 1 ст. 178 ТК РФ).

    Нельзя забывать и о том, что далеко не всех сотрудников можно сократить. Целый ряд работников вообще не подлежит сокращению (ст. 261 ТК РФ). Это:

    • Беременные женщины.
    • Женщины с детьми до 3 лет.
    • Одинокие матери, а также отцы, опекуны и другие лица, воспитывающие детей без матери, с детьми до 14 лет либо с ребенком-инвалидом до 18 лет.
    • Единственный кормилец ребенка-инвалида до 18 лет, либо ребенка до 3 лет, если в семье трое и более малолетних детей и второй родитель не работает.

    Кроме того, нельзя сократить медработника, если у него есть преимущественное право оставления на работе (ст. 179 ТК РФ). Таким правом обладают лица с более высокой квалификацией и производительностью труда (уровень знаний, умений, профессиональных навыков, опыта работы, наличие поощрений и дисциплинарных взысканий). Если же по этому критерию выбрать нельзя (например, работники обладают равными характеристиками), то учитываются как дающие преференции следующие факторы:

    • У работника имеется двое и более детей (иждивенцев).
    • Работник является единственным кормильцем в семье.
    • Работник имеет травмы или профзаболевания, полученные в ходе работы у данного работодателя.
    • Работник направлен на повышение квалификации без отрыва от работы.
    • Работник является инвалидом ВОв и др. боевых действий.
    • Преимущественное право оставления предусмотрено коллективным договором или законом.

    Если процедура увольнения хоть сколько-то нарушена, то вероятность, что работника придется восстановить по судебному решению, очень велика (см., например, Решение Сулейман-Стальского районного суда Республики Дагестан №2-127/2020 от 12.05.2020 по делу №2-127/2020).

    Несоответствие работника занимаемой должности

    П. 3 ч. 1 ст. 81 ТК РФ предусмотрено такое основание для увольнения работника, как непрохождение им аттестации для подтверждения соответствия занимаемой им должности. Аттестацию, о которой идет речь в этом пункте, следует отличать от добровольной аттестации для получения квалификационной категории, которая осуществляется в соответствии с Приказом Минздрава России от 23.04.2013 №240н «О Порядке и сроках прохождения медицинскими работниками и фармацевтическими работниками аттестации для получения квалификационной категории».

    Работодатель вправе по своей инициативе проводить оценку уровня знаний, умений и профессиональных навыков, опыта медицинских работников и их соответствие занимаемой должности. Для этого у медорганизации должно быть принято свое положение о порядке проведения аттестации и создана специальная аттестационная комиссия.

    Основными критериями при проведении аттестации служат объем и сложность труда работника, результаты, достигнутые при исполнении должностных обязанностей, качество и степень самостоятельности выполняемой работы, ответственности за порученное дело, профессионализм. Аттестация не должна сводиться к простому тестированию, а должна обязательно учитывать уровень образования, повышения квалификации, опыт, соответствие квалификационным требованиям и профстандарту. Если медработник полностью соответствует всем предъявляемым к его специальности требованиям к уровню образования, регулярно повышает квалификацию, проходит добровольную аттестацию по присвоению квалификационной категории, то признать его несоответствующим занимаемой должности на основании аттестации работодателя будет крайне сложно. Такую аттестацию суд может признать незаконной, а врача – восстановить на работе (см., например, решение Кировского районного суда г. Иркутска Иркутской области от 09.11.2018 по делу №2-3807/2018).

    Увольнение по этому основанию допускается так же, как и при сокращении, только если невозможно перевести работника с его письменного согласия на другую имеющуюся у работодателя работу (либо на вакантную должность или работу, соответствующую квалификации работника, либо на вакантную нижестоящую должность или нижеоплачиваемую работу), которую работник может выполнять с учетом его состояния здоровья (ч. 3 ст. 81 ТК РФ).

    Неоднократное неисполнение работником своих трудовых обязанностей без уважительных причин при наличии ранее наложенного дисциплинарного взыскания

    Еще одним основанием для увольнения по инициативе работодателя является неисполнение медицинским работником своих трудовых обязанностей. Для этого необходимо соблюдение нескольких условий одновременно:

    • Такое неисполнение не имеет уважительных причин
    • Неисполнение трудовых обязанностей является неоднократным, то есть допускалось и ранее.
    • Имеется ранее наложенное дисциплинарное взыскание.

    Следует иметь в виду, что если ранее наложенное взыскание было отменено, например, по решению суда, то его уже нельзя учитывать при увольнении по данному основанию и нарушение не будет считаться неоднократным.

    Руководству медорганизации необходимо очень четко фиксировать в приказах о привлечении медработников к дисциплинарной ответственности, какое именно нарушение было совершено, в противном случае такое взыскание не будет учитываться судом при рассмотрении дела о законности увольнения (см., например, решение Центрального районного суда г. Твери от 22.01.2020 по делу №2-196/2020). Кроме того, руководитель обязан запросить письменные объяснения у работника и лишь после этого делать выводы о его виновности.

    Интересно, что дисциплинарное взыскание вплоть до увольнения может быть наложено на медработника не только за неисполнение его обязанностей по лечению пациентов, но также и за нарушение норм врачебной этики. Пример подобного проступка рассматривается в апелляционном определении Московского городского суда от 08.06.2018 по делу №33-25162/18. Врач-хирург медицинского центра, уже имеющая два действующих дисциплинарных взыскания в виде выговора, вместо приема пациентов принимала пищу в ординаторской, в то время как пациентка ожидала ее за дверью кабинета более 20 минут. На замечание заведующего отделением о недопустимости такого поведения и просьбу объяснить причину неоказания медицинской помощи пациентке врач вышла в коридор и в присутствии персонала поликлиники и пациентов стала громко с применением оскорбительных выражений кричать, что она не будет выполнять распоряжений заведующего отделением, поскольку у него нет диплома врача. После этих событий пациентка, ожидавшая приема, фактически отказалась от лечения и покинула поликлинику, поскольку сочла поведение врача неадекватным. По данному факту в медицинской организации было проведено заседание врачебной комиссии, которая констатировала нарушение врачом требований ч. 1 ст. 73 закона от 21.11.2011 №323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в РФ», а также Кодекса профессиональной этики врача РФ. Подтвердив законность наложения ранее объявленных дисциплинарных взысканий, суд признал увольнение правомерным.

    Однократное грубое неисполнение работником своих трудовых обязанностей

    Уволить медработника руководитель медорганизации может и при совершении всего лишь одного нарушения трудовой дисциплины, если оно является грубым. К числу таковых ТК РФ относит следующие проступки:

    1. Появление на рабочем месте в состоянии алкогольного или иного опьянения. Уволить по данному основанию не так просто: руководство больницы должно позаботиться о наличии доказательств того, что врач или медсестра действительно были в нетрезвом состоянии. Документами, подтверждающими этот факт, согласно разъяснениям, содержащимся в судебной практике, могут быть: медицинское заключение, показания приборов технического измерения алкоголя в крови, свидетельские показания, внутренние акты, докладные записки и пр. (п. 42 Постановления Пленума Верховного Суда РФ №2; Апелляционное определение Московского городского суда от 28.06.2018 по делу №33-28132/2018). При этом медосвидетельствование на предмет состояния алкогольного опьянения может проводиться исключительно с согласия самого работника (ч. 3 ст. 20 Закона от 21.11.2011 №323-ФЗ).

    У виновного в таком нарушении трудовой дисциплины медработника необходимо взять объяснения. Причины появления в нетрезвом состоянии на рабочем месте могут быть самыми различными: от празднования дня рождения до приема спиртосодержащего лекарства. Даже если причины опьянения не являются уважительными, работодатель не обязан увольнять работника, но имеет право это сделать. При принятии решения об увольнении следует учесть моральный облик работника в целом, его отношение к труду, степень опьянения и обстоятельства совершения проступка.

    2. Прогул, или отсутствие на рабочем месте в течение более 4 часов без уважительной причины. Квалифицировать отсутствие на работе именно как прогул не всегда легко. Так, например, если медработник отсутствовал ровно 4 часа или меньше, то суд, скорее всего, встанет на сторону работника – уволить по данному основанию его нельзя. Кроме того, необходимо учитывать, что отсчитываются 4 часа подряд. В случае, когда работник в течение одного рабочего дня отсутствовал более 4 часов, но не подряд (например, трижды отлучался на два часа, но после каждого раза возвращался на рабочее место на 10 мин) — увольнять его за прогул нельзя. Если в договоре не указана ежедневная продолжительность рабочего дня, то прогул также засчитывать нельзя. К числу уважительных причин отсутствия на работе судебная практика относит: обращение к врачу даже при отсутствии листка нетрудоспособности, в том числе, если такое обращение было связано с оказанием медпомощи несовершеннолетнему ребенку; проведение аварийно-ремонтных работ в квартире; участие в судебном заседании в качестве истца или ответчика; отсутствие распоряжения работодателя о начале работы именно в этот день; отсутствие допуска к рабочему месту.

    3. Разглашение охраняемой законом тайны.

    Любого работника можно уволить за разглашение охраняемой законом тайны. Применительно к медицинским работникам речь идет, как правило, о врачебной тайне, которую обязаны хранить все врачи и медсестры. Врачебную тайну составляют сведения о факте обращения гражданина за оказанием медицинской помощи, состоянии его здоровья и диагнозе, иные сведения, полученные при его медицинском обследовании и лечении (п. 1 ст. 13 закона от 21.11.2011 №323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в РФ»). При осуществлении своей деятельности медработник не вправе разглашать эти сведения, в том числе после смерти гражданина за некоторыми исключениями, предусмотренными п. 3, 4 ст. 13, ч. 3 ст. 22, ч. 5 ст. 67 закона №323-ФЗ.

    За разглашение врачебной тайны, кроме дисциплинарного взыскания в виде увольнения, медицинский работник может быть привлечен к административной (ст. 13.14, ч. 1 ст. 284. КоАП РФ), уголовной (ст. 137, подп. «а» п. 1 ч. 2 ст. 151 УК РФ) и гражданско-правовой ответственности (возмещение вреда, в том числе морального).

    Увольнение за разглашение информации, составляющей врачебную тайну, возможно вне зависимости от того, зафиксирована ли в трудовом договоре с медработником его обязанность хранить ее. Так, врач одной медицинской организации, полагая, что в данной организации допускаются многочисленные нарушения, обратилась с письмом в приемную Президента РФ и приложила копии медицинских карт нескольких пациентов. В связи с данным фактом в медицинской организации была создана комиссия, которая констатировала нарушение истицей требований ст. 13, 19, 73 закона «Об основах охраны здоровья граждан в РФ» и рекомендовала главному врачу расторгнуть трудовой договор с ней. В судебном процессе выяснилось, что два пациента, чьи медицинские документы были приложены к обращению врача, своего согласия на это не давали. Не согласившись с решением суда первой инстанции, в апелляционной жалобе истица ссылалась, в частности, на то, что обязанности по неразглашению врачебной тайны должны быть отдельно зафиксированы либо в трудовом договоре, либо в должностной инструкции. Судебная коллегия по гражданским делам Орловского областного суда сочла этот довод несостоятельным и указала, что в дипломе врача, выданном истице, удостоверен факт дачи ею клятвы врача и тем самым — принятия на себя обязательства по сохранению врачебной тайны (Апелляционное определение Орловского областного суда от 28.11.2013 по делу №33-2608/2013).

    Вопросы соблюдения врачебной тайны подробнее освещены в наших статьях «Врачебная тайна и право пациента на информацию о своем здоровье», «Основания и порядок разглашения сведений, составляющих врачебную тайну», «Разглашение сведений, составляющих врачебную тайну после смерти пациента».

    4. Нарушение правил охраны труда, если это повлекло серьезные последствия.

    В число обязанностей медицинских работников входит обязательное соблюдение правил охраны труда. Пренебрежение этими правилами может повлечь серьезные последствия как для самого врача, так и для его коллег и пациентов. В первую очередь, речь идет об отказе от применения средств индивидуальной защиты или неправильном их использовании, а также нарушении техники безопасности при использовании медицинского оборудования (например, допуск в помещение третьих лиц, не имеющих отношение к работе медперсонала; использование медтехники не по ее назначению; оставление работающих приборов и аппаратов без присмотра; хранение вблизи электронагревательных приборов легковоспламеняющихся и горючих веществ (спирт, вата и т.д.)). Руководитель вправе применить к медработнику за подобные нарушения дисциплинарное взыскание, вплоть до увольнения, если они повлекли причинение вреда работникам, пациентам, имуществу. Как и в случае с остальными дисциплинарными основаниями увольнения, необходимо взять объяснения с медработника-нарушителя.

    5. Кража, растрата, повреждение имущества и утрата доверия.

    Работодатель также вправе уволить медработника за совершенное по месту работы хищение (кражу, растрату) или повреждение имущества больницы (клиники), работников или других лиц. Однако сделать это просто по самому факту пропажи имущества недопустимо: необходимо обратиться в полицию с соответствующим заявлением. Уволить по данному основанию можно только после того, как вина работника будет установлена приговором суда или постановлением судьи (органа, должностного лица, рассматривающих дела об административных правонарушениях), вступившим в законную силу (п. 44 Постановления Пленума Верховного Суда РФ от 17.03.2004 №2). Произвести увольнение можно в течение месяца с этой даты.

    Обратите внимание на то, что уволить медработника можно и за хищение, совершенное вне места работы, но только в тех случаях, когда назначенное наказание препятствует дальнейшей работе (например, лишение свободы) или если совершенное преступление привело к утрате доверия к медработнику (относится только к тем, кто непосредственно обслуживает материальные ценности, например, дорогостоящее оборудование или лекарственные препараты). В таком случае увольнение будет осуществляться по отдельному пункту п. 7 ч. 1 ст. 81 ТК РФ. Обычно к работникам, непосредственно обслуживающим товарные или иные материальные ценности, относят кассиров, завхозов, старших медсестер и др. и на практике с такими работниками заключают договоры о полной индивидуальной материальной ответственности. Напомним, что Перечень лиц, с которыми работодатель может заключать такие договоры, определен Постановлением Минтруда России №85.

    Предоставление подложных документов при трудоустройстве

    В нашей статье, посвященной заключению трудового договора с медицинским работником (Трудовой договор с медицинским работником), мы достаточно подробно останавливались на вопросе трудоустройства врачей и медсестер, в том числе на том, какие документы должны быть ими представлены работодателю при заключении трудового договора. Учитывая высокий уровень сложности выполняемой медиками работы, повышенную ответственность, строгие требования к их профессиональной подготовке, законодатель установил довольно обширный перечень документов, которые обязан предъявить медработник своему начальству. В первую очередь, речь идет о документах об образовании (дипломы, свидетельства об аккредитации, сертификаты). Кроме того, предъявляются трудовая книжка, паспорт, страховое свидетельство обязательного медицинского страхования, документы воинского учета. При прохождении медосмотра и получении допуска к работе с наркотическими и психотропными препаратами также получаются справки об отсутствии судимости и медицинские справки о состоянии здоровья.

    Если вдруг в процессе трудовой деятельности выяснится, что какие-либо из этих документов оказались подложными, работодатель вправе безоговорочно расторгнуть в одностороннем порядке трудовой договор с медицинским работником по п. 11 ч. 1 ст. 81 ТК РФ).

    Непрохождение испытательного срока

    Еще одним поводом для увольнения медработника по инициативе работодателя может стать неудовлетворительный результат испытания.

    Напомним, что трудовым договором с медицинским работником может устанавливаться испытание на срок до 3 месяцев (для руководителей медорганизаций и их заместителей, руководителей филиалов, представительств или иных обособленных структурных подразделений организаций  до 6 месяцев). Это является правом работодателя, а не обязанностью. Испытательный срок нужен для того, чтобы убедиться, что принятый работник соответствует предъявляемым к нему требованиям, оценить его профессиональные качества непосредственно в рабочем процессе и тем самым предупредить оказание некачественной медицинской помощи пациентам.

    При установлении испытания трудовой договор заключается сразу же, а не после окончания испытательного срока. Если работник по тем или иным причинам не подошел, то он увольняется в упрощенном порядке в соответствии со ст. 71 ТК РФ.

    Кого нельзя уволить по инициативе работодателя

    Следует помнить о том, что далеко не всех медработников можно уволить по инициативе работодателя.

    Нельзя уволить ни по одному из вышеописанных нами оснований медработника, находящегося в отпуске (кроме случаев увольнения из-за ликвидации организации) или на больничном (ч. 6 ст. 81 ТК РФ). Необходимо дождаться выхода его на работу.

    Не подлежат увольнению по инициативе работодателя беременные женщины, кроме случая ликвидации медорганизации.

    Не могут быть сокращены или уволены по несоответствию занимаемой должности следующие социально уязвимые категории работников:

    • женщина, имеющая ребенка в возрасте до трех лет;
    • одинокая мать, воспитывающая ребенка-инвалида в возрасте до 18 лет или малолетнего ребенка; любое лицо, воспитывающее детей до 14 лет или ребенка-инвалида до 18 лет, без матери;
    • родитель (иной законный представитель ребенка), являющийся единственным кормильцем ребенка-инвалида в возрасте до 18 лет либо ребенка в возрасте до 3 лет в семье, воспитывающей трех и более малолетних детей, если другой родитель (иной законный представитель ребенка) не состоит в трудовых отношениях.

    ***

    1. Подведем краткие итоги сказанному.
    2. Увольнение медицинского работника по инициативе работодателя может быть произведено исключительно по основаниям, предусмотренным Трудовым кодексом РФ.
    3. Для того чтобы увольнение было законным, требуется соблюсти во всех тонкостях процедуру, предусмотренную трудовым законодательством. Особенно внимательно следует подходить к увольнению в связи с ликвидацией и сокращением численности (штата).
    4. При увольнении за виновные действия медработника руководителю нужно быть готовым доказать наличие проступка (прогул, нахождение на рабочем месте в нетрезвом состоянии и др.)
    5. Нельзя увольнять работников по инициативе работодателя в период отпуска или временной нетрудоспособности.
    6. Некоторые социально уязвимые категории работников не могут быть уволены по инициативе работодателя (беременные женщины, одинокие матери и т.д.)

    Увольнение работника в случае несоответствия занимаемой должности или выполняемой работе

    В соответствии с п. 3 ч. 1 ст. 81 Трудового кодекса РФ (далее – ТК РФ), трудовой договор может быть расторгнут работодателем в случае несоответствия работника занимаемой должности или выполняемой работе вследствие недостаточной квалификации, подтвержденной результатами аттестации.

    Несоответствие в связи с недостаточной квалификацией должно быть подтверждено объективными данными, полученными в результате аттестации работника. Для этой цели создается аттестационная комиссия.

    Порядок    проведения    аттестации   (п. 3 ч. 1 ст. 81 ТК РФ) для определенной категории работников устанавливается трудовым законодательством и иными нормативными правовыми актами, содержащими нормы трудового права (так, например, порядок аттестации работников Фонда социального страхования регламентируется Приказом Фонда социального страхования РФ от 18 августа

    2009 г. N 177;  порядок аттестации профессорско-преподавательского состава и научных работников вузов, а также учреждений дополнительного профобразования (повышения квалификации), имеющих факультеты и кафедры установлен Приказом Министерства образования и науки РФ от 6 августа 2009 г. N 284 "Об утверждении Положения о порядке проведения аттестации работников, занимающих должности научно-педагогических работников" и др.).

    Порядок проведения аттестации работников в той или иной организации, может также определяться локальными нормативными актами (положениями, утверждаемыми работодателем), принимаемыми с учетом мнения представительного органа работников.

    Работодателю следует иметь ввиду, что недопустимо расторжение трудового договора по данному основанию в случае непродолжительности трудового стажа работника (отсутствия достаточного опыта), а также в виду отсутствия необходимого оборудования, которым работодатель должен обеспечить работника для выполнения соответствующей работы.

    Работодатель не вправе расторгнуть трудовой договор с работником по названному основанию, если в отношении этого работника аттестация не проводилась либо аттестационная комиссия пришла к выводу о соответствии работника занимаемой должности или выполняемой работе. Данный вывод нашел свое подтверждение в п. 31 Постановления Пленума Верховного Суда РФ (далее – ВС РФ) от 17 марта 2004 г. N 2 "О применении судами Российской Федерации Трудового кодекса Российской Федерации", которым руководствуются суды при разрешении трудовых споров о восстановлении работников на работе, уволенных по основанию, предусмотренному п. 3 ч. 1 ст. 81 ТК РФ.

    При этом, как разъяснил ВС РФ, выводы аттестационной комиссии о деловых качествах работника подлежат оценке в совокупности с другими доказательствами по делу.

    Следует иметь в виду, что работодатель может уволить работника из-за недостаточной квалификации лишь в случае, когда имели место реальные факты, свидетельствующие о профессиональной непригодности, что должно быть документально оформлено  (акт о допущенном браке, рапорт, докладная записка, контрольная проверка, экспертное заключение).

    В случае, если для выполнения определенной работы требуется специальная подготовка или образование, то увольнение по основанию, предусмотренному п. 3 ч. 1 ст. 81 ТК РФ будет законным, в случае если у работника отсутствует документ о необходимом образовании (квалификации).

    Если порядок аттестации не предусмотрен нормативно-правовыми актами, в соответствие фактически выполняемых обязанностей и квалификации работников требованиям должностных характеристик определяется аттестационной комиссией в соответствии с применяемым в организации положением о порядке проведения аттестации (См. об этом: Письмо Федеральной службы по труду и занятости от 30 апреля 2008 г. N 1028-с).

    Увольнение по основанию, предусмотренному п.  3 ч. 1 ст. 81 ТК РФ, допускается, если невозможно перевести работника с его письменного согласия на другую имеющуюся у работодателя работу (как вакантную должность или работу, соответствующую квалификации работника, так и вакантную нижестоящую должность или нижеоплачиваемую работу), которую работник может выполнять с учетом его состояния здоровья. При этом работодатель обязан предлагать работнику все отвечающие указанным требованиям вакансии, имеющиеся у него в данной местности. Предлагать вакансии в других местностях работодатель обязан, если это предусмотрено коллективным договором, соглашениями, трудовым договором.   

    Если работник был уволен по п. 3 ч. 1 ст. 81 ТК РФ, то работодатель обязан представить доказательства, свидетельствующие о том, что работник отказался от перевода на другую работу либо работодатель не имел возможности (например, в связи с отсутствием вакантных должностей или работ) перевести работника с его согласия на другую имеющуюся у этого работодателя работу (ч. 3 ст. 81 ТК РФ) (См.: п. 31 Постановления Пленума ВС РФ от 17 марта 2004 г. N 2).

    В заключении хочется добавить, что при разрешении трудовых споров по делам данной категории судебная практика исходит из того, что в любом случае доказывать профессиональную несостоятельность работника, а также соблюдение установленной ТК процедуры увольнения работника  должен работодатель.

    В качестве примера можно привести случай из судебной практики. Истец (далее – работник) обратился в районный суд г. Москвы с иском к ответчику (далее – Организации)  о признании увольнения необоснованным, восстановлении на работе, взыскании заработка за время вынужденного прогула, компенсации морального вреда.

    В обоснование своих требований истец указал, что в ноябре 2011 года он был принят на работу к ответчику на должность менеджера по продажам в отдел продаж, в декабре 2012 года был уволен в связи с несоответствием занимаемой должности по п. 3 ч. 1 ст. 81 ТК РФ. Считал увольнение незаконным, поскольку аттестация всех работников не проводилась, он не был ознакомлен за один месяц с положением о проведении аттестации, с графиком проведения аттестации, с представленными на аттестацию материалами, а также в трудовом договоре не предусмотрена его обязанность проходить аттестацию, аттестационная комиссия состояла из подчиненных работодателя и ее выводы не могли быть объективными, задаваемые на аттестации вопросы не касались непосредственной его трудовой деятельности. В связи с чем, считал, что его трудовые права нарушены.

    Судом постановлено решение об отказе в удовлетворении требований работника. Истец обратился с апелляционной жалобой об отмене указанного решения.

    Проверив материалы дела, выслушав объяснения истца, возражения представителя ответчика, заключение прокурора полагавшей, что решение суда не подлежит отмене, а апелляционная жалоба удовлетворению, обсудив доводы жалобы, судебная коллегия пришла к отсутствию оснований отмены решения суда первой инстанции.

    При этом суд апелляционной инстанции сослался на то, что согласно протоколу аттестационной комиссии и аттестационному листу от того же числа, истец был признан несоответствующим занимаемой должности, на основании действующего у ответчика Положения об аттестации работников Организации, утвержденного руководителем организации, в связи с чем истец был уволен с занимаемой должности 28 декабря 2012 года по п. 3 ч. 1 ст. 81 Трудового кодекса Российской Федерации. Таким образом, несоответствие работника занимаемой должности или выполняемой работе вследствие его недостаточной квалификации подтверждено результатами аттестации, проведенной в порядке, установленном трудовым законодательством.

    При этом, суд апелляционной инстанции подчеркнул, что действующее законодательство не содержит нормы, регулирующие порядок и условия проведения аттестации работников. Указанные правила содержаться в специальных нормативных правовых актах, принятых относительно к той или иной категории работников. В том случае, если для конкретной категории работников такой нормативный акт не принят, руководитель предприятия либо организации вправе принять соответствующее Положение о порядке и условиях проведения аттестации работников (См.: Апелляционное определение Московского городского суда от 20 июня 2013 N 11-18729/13).

    Адвокат Савостьянова ОЛЬГА

    Если у Вас возникли вопросы по данной проблеме, звоните по телефону

    8 (962) 998-00-18

    Все консультации платные

    Увольнение по инициативе работодателя — Статьи — INTELLECT

    *Данный материал старше трёх лет. Вы можете уточнить у автора степень его актуальности.

    Правила и последовательность действий работодателя при возникновении необходимости уволить сотрудника по инициативе администрации.

    В связи с тем, что современный Трудовой Кодекс РФ последовательно стоит на защите более «слабой» стороны трудовых отношений – работника, работодателю, решившему уволить сотрудника по ст.81 ТК РФ «Расторжение трудового договора по инициативе работодателя», следует быть готовым к соблюдению мельчайших формальностей. Несоблюдение процедуры может повлечь за собой не только восстановление работника на прежнем месте работы, но и выплату ему компенсации за время вынужденного прогула, компенсации понесенного морального вреда, оплату услуг его представителя в суде, возмещение расходов по оплате государственной пошлины. Кроме того, если работодатель к моменту восстановления работника на прежнем месте работы уже заключил трудовой договор с другим работником, то ему придется решать вопрос с увольнением нового сотрудника, которому должна быть выплачена компенсация в размере двухнедельного среднего заработка.

    В случае если работник совершил дисциплинарный проступок, а работодателю не принципиально, как будет оформлено расторжение трудового договора, то увольнение работника с формулировкой «по собственному желанию» является самым удобным. Обжаловать такой вид увольнения работнику будет крайне сложно. Тем более, если работодатель располагает доказательствами совершения работником виновных действий, и увольнение по собственному желанию произведено в соответствии с требованиями закона.

    Если же администрации важно именно негативное для работника основание увольнения, тогда желательно следовать сложившейся судебной практике и увольнять работников по указанным ниже основаниям.

    С учетом сложившейся на сегодняшний день судебной практики не рекомендуем использовать такие основания увольнения, как разглашение охраняемой законом тайны (пп.«в» п.6 ст.81 ТК РФ), принятие руководящим работником необоснованного решения, повлекшего за собой нарушение сохранности имущества, неправомерное его использование или иной ущерб имуществу организации (п.9 ст.81 ТК РФ).

    Основание для увольнения: прогул

    Прогул - это отсутствие работника на рабочем месте без уважительных причин в течение всего рабочего дня (смены) либо более четырех часов подряд в течение рабочего дня (смены).

    Сроки реагирования для работодателя

    В связи с тем, что увольнение по данному основанию – вид дисциплинарной ответственности, срок к ее привлечению составляет 1 месяц со дня обнаружения проступка.

    Порядок действий работодателя

    1. Непосредственный руководитель должен попытаться всеми возможными способами связаться с не вышедшим на работу сотрудником и выяснить причину отсутствия. Желательно в присутствии свидетелей.

    2. Сотрудник, в чьем непосредственном подчинении находится «прогуливающий» работник, подает на имя руководителя докладную записку о невыходе на работу подчиненного.

    3. В табеле учета рабочего времени день прогула отмечается соответствующим образом:

    • При появлении работника на рабочем месте после прогула. В письменной форме затребовать у работника объяснения по факту отсутствия. Срок для дачи объяснений – 2 рабочих дня. Если работник сразу ответит отказом – увольнять можно только по истечении 2 дней. Если объяснения не получены или получен отказ в их написании по истечении 2 дней – составляется акт об отказе дать объяснения. Акт составляется комиссией (3 и более человек), каждый член комиссии расписывается в акте. Обязательно предложить расписаться в нем работнику. В случае отказа – зафиксировать это в акте.
    • Если работник не явился после прогула. Направить ему письма (с описью вложения и уведомлением) или телеграммы по известным адресам, в которых потребовать явиться для дачи объяснений. Выждать разумный срок на доставку корреспонденции либо подождать возврата уведомления и составить акт о неявке сотрудника для дачи объяснений.

    4. Оформить приказ о наложении дисциплинарного взыскания в виде увольнения. Работник (если он присутствует) должен быть с ним ознакомлен под роспись. При отказе расписаться в приказе – составляется акт, подобный указанному выше.

    5. В трудовую книжку внести запись об увольнении по пп.«а» п.6 ст.81 ТК РФ. Работнику необходимо выдать трудовую книжку (под роспись о получении в журнале учета), заработную плату; компенсацию за неиспользованный отпуск. Если работника нет, в его адрес направляется уведомление с требованием явиться за трудовой книжкой или дать согласие на отправление ее по почте. С этого момента работодатель освобождается от ответственности за ее задержку.

    Примечания

    1. Сформировалась следующая судебная практика по трудовым спорам. Если в суде устанавливается, что прогул действительно был, но при этом работодатель не выполнил требования по процедуре увольнения, то работник подлежит восстановлению на прежней должности.

    2. Особое правило распространяется на прогул, совершенный работником в период срока предупреждения об увольнении (то есть в течение 2-х недель с момента подачи работником заявления об увольнении по собственному желанию). В таком случае, если работник не является больше на работу, то работодатель должен уволить его по собственному желанию в день истечения срока предупреждения об увольнении.

    3. Если после увольнения за прогул работник явится с больничным листом или другим основанием считать причины его отсутствия уважительными, работодатель должен отменить свой приказ об увольнении.

    Основание для увольнения: неоднократное неисполнение работником без уважительных причин трудовых обязанностей

    Неоднократное неисполнение работником без уважительных причин трудовых обязанностей может выражаться:

    • в наличии у работника не менее двух «неснятых» дисциплинарных взысканий (т.е. вынесенных не более 1-го года назад), либо одного взыскания и одного нарушения, процедура привлечения к ответственности за которое еще не закончена;
    • в совершении очередного дисциплинарного проступка.

    Сроки реагирования для работодателя

    В течение года с момента наложения двух первых взысканий и в течение месяца с момента совершения последнего проступка.

    Порядок действий работодателя

    1. Для увольнения по данному основанию работник под роспись и до применения дисциплинарных взысканий должен быть ознакомлен со своими должностными обязанностями, зафиксированными в должностной инструкции.

    2. Работодатель должен 3 (или более) раза привлечь работника к дисциплинарной ответственности (порядок привлечения к ответственности см. выше, в разделе о прогуле). В первых приказах о наложении дисциплинарного взыскания может быть назначено наказание в форме замечания или выговора. И только в последнем (как минимум, в третьем) приказе о дисциплинарном взыскании может быть назначено увольнение.

    3. В трудовую книжку вносится запись об увольнении по п.5 ст.81 ТК РФ. Трудовая книжка и заработная плата выдается работнику в порядке, указанном выше, в п.5 раздела о прогуле.

    Примечания

    На случай такого увольнения должностная инструкция должна быть максимально подробной, так как неисполнением трудовых обязанностей будут считаться только случаи невыполнения обязанностей, предусмотренных в трудовом договоре или должностной инструкции.
     

    Основание для увольнения: появление работника на работе в состоянии алкогольного, наркотического или иного токсического опьянения

    Работник в состоянии опьянения появляется на рабочем месте либо на территории организации - работодателя или объекта, где по поручению работодателя он должен выполнять трудовую функцию.

    Сроки реагирования для работодателя

    В связи с тем, что увольнение по данному основанию – вид дисциплинарной ответственности, то срок к ее привлечению составляет 1 месяц со дня обнаружения проступка.

    Порядок действий работодателя

    1. Собрать комиссию в составе не менее 3 человек, которая составляет акт о наличии у работника признаков опьянения с описанием его состояния (неровная походка, запах, расширенные зрачки, нескоординированные движения, несвязная речь и проч.).

    2. Письменно предложить работнику (вручить работнику под роспись требование) поехать для проведения экспертизы на установление состояния опьянения.

    3. При отказе работника от получения требования или отказе поехать в медицинское учреждение — составить об этом акт.

    4. При согласии – организовать поездку работника в сопровождении сотрудника компании.

    5. Отстранить работника от работы до восстановления нормального состояния. После восстановления вменяемого состояния предложить дать объяснения и привлечь к дисциплинарной ответственности (порядок привлечения к ответственности см. выше, в разделе о прогуле). В трудовую книжку вносится запись об увольнении по пп.«б» п.6 ст.81 ТК РФ. Трудовая книжка и заработная плата выдается работнику в порядке, указанном выше, в п.5 раздела о прогуле.

    Примечания

    При установлении факта нахождения работника в состоянии опьянения работодатель не вправе брать у работника анализы самостоятельно, если в штате организации нет врача. Однако можно (хотя это и не предусмотрено законом) применить алкотестер, чтобы использовать его показания в суде в качестве косвенного доказательства. Для этого необходимо в соответствующем акте отразить результаты, показанные алкотестером.

    Основание для увольнения: несоответствие работника занимаемой должности или выполняемой работе вследствие недостаточной квалификации

    При проведении аттестации работника выявлено его несоответствие занимаемой должности или выполняемой работе вследствие недостаточной квалификации.

    Сроки реагирования для работодателя

    Законодательство сроки не устанавливает, однако логично инициировать увольнение после получения результатов аттестации.

    Порядок действий работодателя

    1. Разработать положение об аттестации, утвердить, ознакомить с ним каждого работника под роспись. Аттестация не проводится в отношении сотрудников, работающих в организации менее года, беременных женщин.

    2. Провести аттестацию, предупредив об этом работников, в строгом соответствии с утвержденным в Положении порядком. Изготовить аттестационный лист.

    3. При выявлении работников, не соответствующих требованиям, предъявляемым к их должностям, письменно предложить работникам всю возможную другую работу в организации, которую они могли бы выполнять в соответствии с их уровнем квалификации и наличием вакантных мест. Если таковой нет – письменно уведомить об этом работника.

    4. В срок, установленный в предложении другой работы, получить от работника отказ от перевода на другую работу, либо составить акт об отказе дать ответ на предложение.

    5. Оформить приказ об увольнении, ознакомить с ним работника под роспись или составить акт об отказе от ознакомления с приказом. В трудовую книжку внести запись об увольнении по п.3 ст.81 ТК РФ. Трудовая книжка и заработная плата выдается работнику в порядке, указанном выше, в п.5 раздела о прогуле.

    Примечания

    При рассмотрении вопроса о правомерности увольнения работника по данному основанию заключение аттестационной комиссии рассматривается лишь как одно из доказательств обоснованности увольнения сотрудника. Поэтому данное основание увольнения достаточно проблематично отстоять в суде.

    Основание для увольнения: совершение виновных действий работником, непосредственно обслуживающим денежные или товарные ценности, если эти действия дают основание для утраты доверия к нему со стороны работодателя

    Работник должен занимать должность, в силу которой он является материально ответственным лицом в соответствии с Перечнем, утвержденным Правительством РФ. Действия, совершенные работником, должны быть умышленными (а не совершенными по неосторожности).

    Сроки реагирования для работодателя

    Увольнение по данному основанию – вид дисциплинарной ответственности. Срок к ее привлечению составляет 1 месяц со дня обнаружения проступка, если он совершен по месту работы. Если вне места работы – в течение года.

    Порядок действий работодателя

    1. Основное требование – собрать максимальное количество доказательств совершения работником умышленного проступка (первичные и иные документы; объяснения от лиц, свидетельствующих о совершении работником проступка; переписку и т.д.).

    2. Далее совершаются последовательно действия, указанные выше, в разделе о прогуле. В трудовую книжку вносится запись об увольнении по п.7 ст.81 ТК РФ. Трудовая книжка и заработная плата выдается работнику в порядке, указанном выше, в п. 5 раздела о прогуле.

    Примечания

    Данное основание увольнения является «пограничным». Трудовой кодекс предусматривает также такое основание для увольнения, как хищение по месту работы, растрата, умышленное уничтожение или повреждение имущества работодателя (пп.«г» п.6 ст.81). Это основание применимо в отношении любых категорий работников (не только материально ответственных). При этом виновность работника в данном случае должна быть доказана в порядке уголовного или административного производства.

    В отношении же рассматриваемого основания для увольнения (по п.7 ст.81 ТК РФ) закон не требует обязательной процедуры уголовного либо административного разбирательства. Однако суды очень критически относятся к такого рода делам. А работодателю сложно доказывать совершение виновных действий без возбуждения уголовного или административного производства.

    В рамках трудовой практики ИНТЕЛЛЕКТ-С предлагает комплекс юридических услуг, связанных с трудовым правом и направленных на защиту интересов работодателя:

     

    Статья опубликована в журнале "ИНТЕЛЛЕКТ-ПРЕСС", №13/2009

    кадровое делопроизводство, сокращение персонала, трудовое право, трудовые споры

    Работодатель вправе не исполнять требование прокурора о привлечении работника к дисциплинарной ответственности

    Работодатель вправе не исполнять требование прокурора о привлечении работника к дисциплинарной ответственности


    Опубликовано: 08.12.2017

    Просмотров: 4062

    Постановление Верховного Суда РФ от 1 сентября 2017 г. N 56-АД17-17

    Содержание:

    • Работодатель вправе не исполнять требование прокурора о привлечении работника к дисциплинарной ответственности
    • Предоставление отпуска с последующим увольнением не является обязанностью работодателя
    • Электронный больничный должен выдаваться несмотря на отсутствие системы электронного взаимодействия
    • Увольнение в связи с несоответствием работника занимаемой должности или выполняемой работе

    Верховный Суд РФ в очередной раз признал незаконным привлечение юридического лица к административной ответственности за неисполнение представления прокурора с требованием о привлечении к дисциплинарной ответственности работников такого лица, допустивших нарушение законодательства.

    Суд напомнил, что применение к работнику мер дисциплинарной ответственности является правом, а не обязанностью работодателя. В связи с этим императивное требование прокурора о привлечении к дисциплинарной ответственности виновных должностных лиц противоречит ТК РФ и Закону о прокуратуре.

     

    Отметим, что Верховный Суд РФ уже не впервые высказывает данную точку зрения (см. постановления от 16.12.2016 N 78-АД16-38, от 03.03.2016 N 46-АД16-2, от 16.12.2015 N 81-АД15-5). Тем не менее, правоприменительные органы, включая суды общей юрисдикции, как видно, не всегда учитывают позицию высшего судебного органа.

     

    Предоставление отпуска с последующим увольнением не является обязанностью работодателя

     

    Определение Конституционного Суда РФ от 18 июля 2017 г. N 1553-О

    Работник в суде требовал признать противоречащей Конституции РФ часть первую ст. 127 ТК РФ, согласно которой при увольнении работнику выплачивается денежная компенсация за все неиспользованные отпуска.

    По мнению заявителя, данная норма лишает работника гарантированного права на отдых, поскольку законодательством не предусмотрено обязанности работодателя предоставлять по требованию работника отпуск с последующим увольнением.

    Конституционный Суд РФ пришел к заключению, что рассматриваемая норма закрепляет особый порядок реализации права на отпуск при увольнении работника. Выплачиваемая в соответствии с ней компенсация за все неиспользованные отпуска обеспечивает работнику возможность отдыха после увольнения. Соответственно, норма части первой ст. 127 ТК РФ не может расцениваться как нарушающая права работников. Что же касается возложения на работодателя обязанности по предоставлению отпуска с последующим увольнением, то разрешение данного вопроса связано с внесением изменений в действующее законодательство, что к полномочиям Конституционного Суда РФ не относится.

    Тем самым суд фактически еще раз подтвердил, что предоставление отпуска с последующим увольнением является правом, а не обязанностью работодателя. Отметим, что в определении от 17.11.2009 N 1385-О-О Конституционный Суд РФ уже указывал, что предоставление работнику неиспользованных отпусков с последующим увольнением возможно исключительно по соглашению сторон трудового договора. К аналогичным выводам приходили Верховный Суд РФ и Роструд.

     

    Электронный больничный должен выдаваться несмотря на отсутствие системы электронного взаимодействия

     

    Письмо Фонда социального страхования РФ от 19 июля 2017 г. N 02-09-11/22-03-16365

    Письмо Фонда социального страхования РФ от 30 августа 2017 г. N02-09-14/22-03-17947

    С 1 июля 2017 года ч. 5 ст. 13 Федерального закона от 29.12.2006 N 255-ФЗ предусматривает возможность назначения пособий не только на основании листка нетрудоспособности, выданного медицинской организацией в форме документа на бумажном носителе, но и на основании больничного, сформированного и размещенного в информационной системе страховщика в форме электронного документа, подписанного с использованием усиленной квалифицированной электронной подписи медицинским работником и медицинской организацией. Это возможно, во-первых, с письменного согласия застрахованного лица, во-вторых, при условии, что медицинская организация и страхователь являются участниками системы информационного взаимодействия по обмену сведениями в целях формирования листка нетрудоспособности в форме электронного документа. Порядок такого взаимодействия должно утвердить Правительство РФ, а Минтруду России надлежит определить порядок формирования листков нетрудоспособности в форме электронного документа.

    Вместе с тем вплоть до настоящего момента соответствующих нормативных актов не принято. ФСС России в своих письмах отмечает, что ведет работу по подготовке их проектов. При этом, несмотря на отсутствие указанных документов, с 01.07.2017 листок нетрудоспособности в форме электронного документа имеет равную юридическую силу с листком нетрудоспособности на бумажном носителе и подлежит формированию и размещению в информационной системе Фонда. На основании него назначается и выплачивается страховое обеспечение по обязательному социальному страхованию.

     

    Увольнение в связи с несоответствием работника занимаемой должности или выполняемой работе

    В случае несоответствия работника занимаемой должности или выполняемой работе вследствие недостаточной квалификации, подтвержденной результатами аттестации, трудовой договор с ним может быть расторгнут по инициативе работодателя (п. 3 части первой ст. 81 ТК РФ).

    Порядок проведения аттестации устанавливается трудовым законодательством и иными нормативными правовыми актами, содержащими нормы трудового права, локальными нормативными актами, принимаемыми с учетом мнения представительного органа работников (часть вторая ст. 81 ТК РФ).

    С учетом этих норм увольнение по п. 3 части первой ст. 81 ТК РФ допустимо только при условии, что несоответствие работника занимаемой должности или выполняемой работе вследствие его недостаточной квалификации подтверждено результатами аттестации, проведенной в установленном порядке. Как указано в п. 31 постановления Пленума Верховного Суда РФ от 17.03.2004 N 2, работодатель не вправе расторгнуть трудовой договор с работником по названному основанию, если в отношении этого работника аттестация не проводилась либо аттестационная комиссия пришла к выводу о соответствии работника занимаемой должности или выполняемой работе.

    Под квалификацией работника в соответствии со ст. 195.1 ТК РФ понимается уровень знаний, умений, профессиональных навыков и опыта работы. Соответственно, увольнение работника по п. 3 части первой ст. 81 ТК РФ предполагает выявление комиссией в ходе аттестации такого уровня знаний, умений, профессиональных навыков и опыта работы, которого недостаточно для надлежащего исполнения работником текущих трудовых обязанностей.

    Отсутствие у работника подтверждающих квалификацию документов само по себе основанием для увольнения по п. 3 части первой ст. 81 ТК РФ не является (определение Свердловского областного суда от 27.01.2017 N 33-1634/2017). Наличие у работника дисциплинарных взысканий, равно как и совершение работником самих дисциплинарных нарушений также необязательно свидетельствует об отсутствии необходимой квалификации и потому не может служить основой для вывода о его несоответствии занимаемой должности или выполняемой работе (определение Краснодарского краевого суда от 01.12.2016 N 33-32133/2016, определение Белгородского областного суда от 31.05.2016 N 33-2623/2016, определение Магаданского областного суда от 15.12.2015 N 33-1476/2015).

    В п. 31 постановления Пленума Верховного Суда РФ от 17.03.2004 N 2 сказано, что выводы аттестационной комиссии о деловых качествах работника подлежат оценке в совокупности с другими доказательствами по делу. Конституционный Суд РФ также отмечает, что соответствующее решение работодателя может быть проверено в судебном порядке, при этом суд не связан выводами аттестационной комиссии, которые оцениваются в совокупности с другими доказательствами по конкретному делу (определения от 25.05.2017 N 1040-О и от 17.11.2009 N 1383-О-О).

    Это означает, что работодателю для обоснования правомерности увольнения одного отрицательного заключения аттестационной комиссии недостаточно. Им должны быть представлены убедительные доказательства, свидетельствующие о том, что работник не справлялся с работой должным образом именно вследствие недостатка квалификации, и о том, что все эти обстоятельства были учтены аттестационной комиссией при принятии решения. Если суд сочтет результаты аттестации необоснованными или необъективными, увольнение будет признано незаконным (см., например, определение Ленинградского областного суда от 10.08.2016 N 33-4539/2016, определение Иркутского областного суда от 24.02.2016 N 33-1920/2016, определение Сахалинского областного суда от 10.11.2015 N 33-2623/2015, определение Московского городского суда от 04.02.2011 N 4г/3-359/11).

    Если работодателем нарушен порядок проведения аттестации, ее результаты могут быть признаны судом незаконными, а увольнение - произведенным без достаточных оснований. Такой подход в полной мере распространяется на случаи нарушения работодателем процедуры аттестации, установленной им самим в локальном нормативном акте (определение Волгоградского областного суда от 02.03.2017 N 33-3394/2017, определение Красноярского краевого суда от 24.10.2016 N 33-13755/2016, определение Верховного Суда Кабардино-Балкарской Республики от 18.03.2015 N 33-260/2015, определение Верховного Суда Республики Тыва от 22.10.2015 N 33-1218/2015, определение Приморского краевого суда от 09.09.2015 N 33-8071/2015).

    Кроме того, суды отмечают, что отсутствие локального нормативного акта, определяющего порядок и условия проведения аттестации, если в отношении той или иной категории работников такие порядок и условия специальными нормативными правовыми актами не установлены, не позволяет однозначно определить компетенцию и пределы деятельности аттестационной комиссии и ставит под сомнение законность принятого работодателем решения (определение Новосибирского областного суда от 02.02.2017 N 33-317/2017, определение Ростовского областного суда от 17.01.2013 N 33-381/2013).

    Отсутствие в трудовом договоре условия об аттестации не является основанием для признания результатов аттестации недействительными (определение Суда Еврейской автономной области от 01.07.2016 N 33-426/2016).

    Увольнение работников, являющихся членами профсоюза, по п. 3 части первой ст. 81 ТК РФ производится с учетом мотивированного мнения выборного органа первичной профсоюзной организации в соответствии со ст. 373 ТК РФ (часть вторая ст. 82 ТК РФ). Работодателю в этом случае надлежит обеспечить доказательства того, что проект приказа, а также копии документов, являющихся основанием для принятия решения об увольнении, направлялись в выборный орган соответствующей первичной профсоюзной организации; работодатель провел дополнительные консультации с выборным органом первичной профсоюзной организации в тех случаях, когда выборный орган первичной профсоюзной организации выразил несогласие с предполагаемым увольнением работника; был соблюден месячный срок для расторжения трудового договора, исчисляемый со дня получения работодателем мотивированного мнения выборного органа первичной профсоюзной организации. Такие разъяснения даны в п. 24 постановления Пленума Верховного Суда РФ от 17.03.2004 N 2.

    В этом же пункте постановления говорится о том, что работодатель, уволивший работника по п. 3 части первой ст. 81 ТК РФ, при рассмотрении спора в суде должен представить доказательства того, что в состав аттестационной комиссии при проведении аттестации, которая послужила основанием для увольнения, во исполнение части третьей ст. 82 ТК РФ входил представитель выборного органа соответствующей первичной профсоюзной организации.

    Если учет мнения профсоюза об увольнении конкретного работника со всей очевидностью необходим только при условии, что такой работник является членом этого профсоюза, то обязанность по включению представителя профсоюза в состав аттестационной комиссии закон напрямую не связывает с членством работников, подлежащих аттестации, в профсоюзе. На этом основании иногда делается вывод, что при наличии в организации профсоюза его представитель в любом случае в обязательном порядке включается в состав аттестационной комиссии (определение Свердловского областного суда от 13.03.2014 N 33-2927/2014). Другие полагают, что работник, не являющийся членом какой-либо профсоюзной организации, не может ссылаться на отсутствие в составе аттестационной комиссии представителя профсоюза как на нарушение порядка проведения аттестации (определения Московского городского суда от 14.07.2016 N 33-27560/16 и от 24.02.2016 N 33-3816/16).

    Членство в профсоюзе кого-либо из работников, включенных в состав аттестационной комиссии, как показывает практика, не свидетельствует об исполнении обязанности, установленной частью третьей ст. 82 ТК РФ, если такой работник уполномочен участвовать в проведении аттестации по какой-либо другой причине (например, как руководитель кадрового подразделения). Необходимо, чтобы член комиссии был включен в ее состав именно в качестве представителя профсоюза (определение Верховного Суда Республики Дагестан от 28.03.2017 N 33-1055/2017, определение Нижегородского областного суда от 07.06.2016 N 33-6828/2016).

    Увольнение по п. 3 части первой ст. 81 ТК РФ допускается, если невозможно перевести работника с его письменного согласия на другую имеющуюся у работодателя работу, которую работник может выполнять с учетом его состояния здоровья. Предлагаются как вакансии, соответствующие квалификации работника, так и вакантные нижестоящие должности или нижеоплачиваемая работа. Работодатель обязан предлагать работнику все отвечающие указанным требованиям вакансии, имеющиеся у него в данной местности. Предлагать вакансии в других местностях работодатель обязан, если это предусмотрено коллективным договором, соглашениями, трудовым договором (часть третья ст. 81 ТК РФ). В случае спора о правомерности увольнения на работодателя возложена обязанность представить доказательства, свидетельствующие о том, что работник отказался от перевода на другую работу либо работодатель не имел возможности (например, в связи с отсутствием вакантных должностей или работ) перевести работника с его согласия на другую имеющуюся у этого работодателя работу (п. 31 постановления Пленума Верховного Суда РФ от 17.03.2004 N 2).

    Увольнение работника в связи с несоответствием его занимаемой должности или выполняемой работе, будучи увольнением по инициативе работодателя, в отношении некоторых категорий работников запрещено законом.

     

     

    Белогорск, Амурская область

    Какова процедура увольнения работника по результатам аттестации в коммерческой структуре? Каковы документы и требования к ним?

    Одним из оснований расторжения трудового договора по инициативе работодателя является несоответствие работника занимаемой должности или выполняемой работе вследствие недостаточной квалификации, подтвержденной результатами аттестации (п. 3 ст. 81 ТК РФ). Аттестация, таким образом, призвана подтвердить недостаточность квалификации работника и в силу этого несоответствие его занимаемой должности или выполняемой работе. Достижению названной главной цели аттестации должна способствовать процедура ее подготовки и проведения.
    В соответствии с п. 31 Постановления Пленума Верховного Суда РФ от 17.03.2004 г. № 2 «О применении судами Российской Федерации Трудового кодекса Российской Федерации» аттестация работников организации должна проводиться на основании действующих федеральных законов или локальных нормативных актов организации.
    В силу п. 3 ст. 81 ТК РФ увольнение по этому основанию допустимо при условии, что несоответствие работника занимаемой должности вследствие его недостаточной квалификации подтверждено результатами аттестации, проведенной в порядке, предусмотренном федеральным законом или иным нормативным правовым актом, либо в порядке, закрепленном в локальном нормативном акте организации. Учитывая это, работодатель не вправе расторгнуть трудовой договор с работником по названному основанию, если в отношении этого работника аттестация не проводилась, либо аттестационная комиссия пришла к выводу о соответствии работника занимаемой должности. При этом выводы аттестационной комиссии о деловых качествах работника подлежат оценке в совокупности с другими доказательствами по делу.
    Если недостаточная квалификация подтверждена результатами аттестации, можно перевести работника с его согласия на другую работу в этой же организации. При отсутствии подходящих вакантных должностей или работ работник может быть уволен по п. 3 ст. 81 ТК РФ.
    Традиционным локальным нормативным актом организации по вопросам аттестации является Положение об аттестации. В этом документе должны быть определены: категории работников, подлежащих аттестации, периодичность, сроки и порядок проведения аттестации, критерии оценки работников, результаты аттестации, порядок их документирования, порядок разрешения споров, возникающих по результатам аттестации, и т.п.
    В этом же документе может содержаться информация об аттестационной комиссии: состав, порядок избрания и организация ее деятельности (возможна разработка отдельного Положения об аттестационной комиссии). Наиболее важную группу документов, необходимых для проведения аттестации, составляют оценочные документы, в которых отражаются по соответствующим параметрам оценка деятельности работника, его квалификация, соответствие занимаемой должности и т.д. Для проведения аттестации:
    — издается приказ о создании аттестационной комиссии;
    — разрабатывается график проведения аттестации и доводится до работников под расписку;
    — оформляются оценочные документы на работников, подлежащих аттестации;
    — проводится заседание аттестационной комиссии, результаты которого отражаются в протоколе;
    — оформляется итоговый аттестационный документ — аттестационный лист, в котором содержатся выводы аттестационной комиссии и рекомендации по данной кандидатуре.
    Аттестация должна проводиться только в присутствии аттестуемого. Если работник по уважительной причине (например, в случае болезни) не может присутствовать на аттестации в день, установленный графиком, то заседание аттестационной комиссии должно быть перенесено.
    С результатами аттестации работник должен быть ознакомлен под расписку (работник проставляет визу ознакомления в протоколе заседания аттестационной комиссии). В случае отрицательных результатов аттестации целесообразно вручить работнику под расписку выписку из протокола заседания аттестационной комиссии и копию аттестационного листа.
    Законодательством не установлен срок предупреждения работника о предстоящем увольнении по результатам аттестации. Работодатель при наличии установленного факта несоответствия работником занимаемой должности или выполняемой работе вследствие недостаточной квалификации, подтвержденной результатами аттестации, издает приказ о расторжении трудового договора с работником по п. 3 ст. 81 ТК РФ. Приказ доводится до работника под расписку.
    Работник может оспорить факт увольнения по результатам аттестации в суде (ст. 391 ТК РФ).
    Социально-экономический отдел
    Федерации профсоюзов РС (Я)

    Ансамитоцин P3 деполимеризует микротрубочки и индуцирует апоптоз путем связывания с тубулином в сайте винбластина

    Abstract

    Конъюгаты майтансиноидов в настоящее время проходят различные фазы клинических испытаний и показали многообещающую активность при различных типах рака. В этом исследовании мы выяснили механизм действия ансамитоцина P3, структурного аналога майтанзина, обладающего противораковой активностью. Ансамитоцин P3 сильно ингибировал пролиферацию клеток MCF-7, HeLa, EMT-6 / AR1 и MDA-MB-231 в культуре с полумаксимальной ингибирующей концентрацией 20 ± 3, 50 ± 0.5, 140 ± 17 и 150 ± 1,1 пМ соответственно. Ансамитоцин P3 сильно деполимеризует как межфазные, так и митотические микротрубочки и нарушает сегрегацию хромосом в диапазоне концентраций, ингибирующих его пролиферацию. Обработка ансамитоцином P3 активировала контрольные белки веретена, Mad2 и BubR1, и блокировала клетки в митотической фазе клеточного цикла. Впоследствии клетки подверглись апоптозу через апоптотический путь, опосредованный p53. Кроме того, было обнаружено, что ансамитоцин P3 связывается с очищенным тубулином in vitro с константой диссоциации (K d ), равной 1.3 ± 0,7 мкМ. Связывание ансамитоцина Р3 вызывает конформационные изменения тубулина. Докинг-анализ показал, что ансамитоцин P3 может частично связываться с сайтом связывания винбластина на тубулине в двух разных положениях. Анализ показал, что связывание ансамитоцина Р3 с тубулином стабилизируется водородными связями. Кроме того, слабые взаимодействия, такие как галоген-кислородные взаимодействия, также могут способствовать связыванию ансамитоцина P3 с тубулином. Исследование предоставило важную информацию для понимания антипролиферативного механизма действия ансамитоцина P3.

    Образец цитирования: Venghateri JB, Gupta TK, Verma PJ, Kunwar A, Panda D (2013) Ансамитоцин P3 деполимеризует микротрубочки и индуцирует апоптоз путем связывания с тубулином в сайте винбластина. PLoS ONE 8 (10): e75182. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0075182

    Редактор: Лукаш Курган, Университет Альберты, Канада

    Поступила: 16 апреля 2013 г .; Одобрена: 11 августа 2013 г .; Опубликован: 4 октября 2013 г.

    Авторские права: © 2013 Venghateri et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

    Финансирование: Работа частично поддержана финансированием IITB-Monash Research Academy. Д.П. поддерживается стипендией DAE-SRC, Департамент атомной энергии. А.К. поддерживается Исследовательским центром Вадхвани в области биологических наук и биоинженерии Индийского технологического института в Бомбее.P.J.V. принадлежит Институту медицинских исследований им. Монаша. J.B.V поддерживается стипендией Исследовательской академии IITB Monash. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

    Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

    Введение

    Сильные цитотоксические агенты, такие как майтанзин (рис. 1), проходят клинические испытания со значительными улучшениями, в основном за счет конъюгации с опухолеспецифическими антителами [1], [2].Недавние клинические испытания антител, конъюгированных с майтанзином, а именно трастузумаба эмтанзина (в фазе III), SAR3419 и BT062 (в фазе II) и нескольких других, таких как BAY 94–9343, BIIB015, IMGN529, лорвотузумаб мертанзин, SAR566658, IMGN529 в клинической фазе. Испытания укрепили надежду на нацеливание на опухолевые клетки высокоэффективных цитотоксических агентов, которые ранее были исключены из режима химиотерапии рака [1]. Майтанзиноиды являются мощными цитотоксическими агентами, нацеленными на микротрубочки, и показали многообещающую активность в отношении солидных опухолей мышей меланокарциномы B-16 в дополнение к противолейкемической активности против лимфоцитарного лейкоза мышей P388 [3].Известно, что майтанзиноиды проявляют в 100-1000 раз большую цитотоксичность, чем некоторые из известных противораковых агентов [2], [4]. Однако тяжелые побочные эффекты, связанные с токсичностью нейронов и желудочно-кишечного тракта, наряду с узким терапевтическим индексом, продемонстрированным майтанзиноидами в клинических испытаниях, привели к их снижению в терапии рака [3]. Текущий прогресс в противораковой терапии, опосредованной конъюгатом антител и лекарств, возродил интерес к майтанзину. Соответственно, это открыло двери для других структурных аналогов майтанзина, которые могут предоставить широкие возможности для изучения конъюгатов антител и лекарств и, таким образом, предложить многочисленные варианты химиотерапии рака.Семейство майтанзиноидов состоит из нескольких структурных аналогов, таких как майтансинол, майтанзин, майтанзинол-3-пропионат, ансамитоцин P3, ансамитоцин P4 [5]. Известно, что майтанзин проявляет свою антимитотическую активность, ингибируя сборку микротрубочек и блокируя клетки в митозе [6] - [8]. Недавние исследования показали, что конъюгаты антител с майтанзиноидом блокируют клетки в митозе, подавляя динамику микротрубочек, аналогично результатам, полученным с участием неконъюгированного майтанзина [9], [10].

    Ансамитоцин Р3 (рис. 1), структурный аналог майтанзина, был выделен из Nocardia [11], [12]. Структурно майтанзин и ансамитоцин Р3 (рис. 1) представляют собой поликетидные макролактамы, различающиеся ацильными группами в положении С3 [12] - [16]. Ансамитоцин P3, как известно, деполимеризует микротрубочки и связывается с тубулином конкурентным образом с винбластином и ризоксином, что позволяет предположить, что он частично перекрывает сайт связывания винбластина [5], [16] - [18] . Текущие многообещающие испытания конъюгатов майтанзиноидных лекарственных средств побудили нас исследовать механизм действия ансамитоцина P3.В настоящем исследовании мы выяснили антипролиферативную активность ансамитоцина P3. Обработка клеток MCF-7 ансамитоцином P3 приводила к серьезному нарушению интерфазы и митотических микротрубочек. Пораженные клетки блокировались в митозе и накапливали p53 и его нижележащий партнер p21 в ядре, что активировало апоптотическую гибель клеток в этих клетках. Кроме того, молекулярный док-анализ показал предполагаемый сайт связывания ансамитоцина P3 с тубулином и прояснил природу взаимодействия, участвующего в связывании ансамитоцина P3 с тубулином.

    Материалы и методы

    Материалы

    Были получены

    ансамитоцин P3, сульфородамин B (SRB), Hoechst 33258, 5,5'-дитиобис-2-нитробензойная кислота (DTNB), мышиный моноклональный анти-α тубулин IgG, конъюгированные с щелочной фосфатазой антимышиные и кроличьи IgG. от Sigma (Сент-Луис, Миссури, США). Фетальная бычья сыворотка была приобретена в компании Biowest (Nuaille, Франция). Бычий сывороточный альбумин (BSA), забуференный фосфатом физиологический раствор Дульбекко (DPBS) были приобретены в HiMedia, Mumbai, (India).Для обнаружения апоптоза набор для обнаружения апоптоза FITC Annexin был приобретен у BD Biosciences (Сан-Хосе, Калифорния, США). Мышиный IgG к p53, мышиный анти-p21 IgG, кроличий поликлональный анти-PARP IgG и кроличьи антитела IgG к фосфогистону-h4 (серин 10) были приобретены в Santa Cruz Biotechnology (Калифорния, США). Мышиные антитела против BubR1 были приобретены в BD Biosciences (Сан-Хосе, Калифорния, США). Кроличьи поликлональные антитела против Mad2 IgG были получены от Bethyl Laboratories (Монтгомери, США). Кроличий поликлональный IgG к альфа-тубулину был приобретен у Abcam (Кембридж, Массачусетс, США).Антимышиный IgG, конъюгированный с Alexa fluor 568, был приобретен у Molecular Probes, Invitrogen (Юджин, США). Все остальные реагенты, использованные в экспериментах, были аналитической чистоты.

    Культура клеток

    Клетки аденокарциномы молочной железы человека (MCF-7) и карциномы шейки матки (HeLa) человека выращивали в минимальной необходимой среде (HiMedia, Мумбаи, Индия) с добавлением 2,2 г / л бикарбоната натрия (HiMedia, Мумбаи, Индия) и 10% ( v / v) фетальная бычья сыворотка (FBS) [19]. Кроме того, в среду добавляли 1% раствор антибиотик-антимикотика (HiMedia, Mumbai, India), содержащий стрептомицин, амфотерицин B и пенициллин.Клетки MDA-MB-231 культивировали в среде Лейбовица L-15 (Hi Media, Индия), как описано ранее [19]. Все клеточные линии культивировали при 37 ° C в увлажненной камере (Sanyo, Tokyo, Japan) с 5% CO 2 . Клеточную линию опухоли молочной железы мыши (EMT-6 / AR1) с множественной лекарственной устойчивостью культивировали, как описано ранее [19].

    Влияние ансамитоцина P3 на пролиферацию клеток

    клеток MCF-7, EMT-6 / AR1, HeLa и MDA-MB-231 высевали в 96-луночные планшеты. Затем клетки инкубировали с носителем (0.1% ДМСО) или различные концентрации (1–1000 пМ) ансамитоцина P3 в течение 48 ч в клетках MCF-7 и 24 ч для клеток EMT-6 / AR1, HeLa и MDA-MB-231 соответственно. Половинную максимальную ингибирующую концентрацию клеточной пролиферации (IC 50 ) для ансамитоцина P3 определяли с помощью анализа сульфородамина B [20]. Четыре независимых эксперимента были проведены с клетками MCF-7 и три независимых набора экспериментов были выполнены с клетками EMT-6 / AR1, HeLa и MDA-MB-231.

    Влияние ансамитоцина P3 на развитие клеточного цикла в клетках MCF-7

    Клетки

    MCF-7 обрабатывали либо носителем, либо различными концентрациями (20–100 пМ) ансамитоцина P3 в течение 24 часов.Клетки осаждали, фиксировали в 70% этаноле в PBS, а затем фиксированные клетки инкубировали с 50 мкг / мл йодида пропидия (PI) и 8 мкг / мл РНКазы в течение 2 ч при 4 ° C [21]. Анализ клеток проточной цитометрией выполняли с помощью системы специального заказа BD FACS Aria (Becton Dickinson, San Jose, CA, USA). Затем полученные данные были подогнаны с использованием Modfit LT версии 3.2 (Verity Software House, ME, США).

    Расчет индекса митоза

    клеток MCF-7 (1 × 10 5 клеток / мл) высевали на покровные стекла на 24 часа.Затем клетки инкубировали либо с носителем (0,1% ДМСО), либо с различными концентрациями (20–100 пМ) ансамитоцина Р3 в течение 24 часов. Клетки собирали центрифугированием (1200 g при 30 ° C) с использованием цитоспина Labofuge 400R (Heraeus, Hanau, Германия) в течение 10 минут и фиксировали 3,7% формальдегидом в течение 20 минут при 37 ° C. Наконец, клетки подвергали проницаемости охлажденным метанолом и окрашивали Hoechst 33258 (1 мкг / мл) [22]. Количество клеток в митозе и интерфазе подсчитывали как для клеток, обработанных носителем, так и для клеток, обработанных ансамитоцином Р3, с использованием микроскопа Eclipse TE2000-U (Nikon, Tokyo, Japan).Эксперимент проводился трижды.

    Иммунофлуоресцентная микроскопия

    клеток MCF-7 (0,5 × 10 5 клеток / мл) высевали на покровные стекла в 24-луночный планшет для тканевых культур на 24 ч [19]. Затем клетки инкубировали без или с различными концентрациями ансамитоцина P3 в течение дополнительных 24 часов. Клетки фиксировали 3,7% формальдегидом в течение 20 мин при 37 ° C и дважды промывали PBS. Затем клетки подвергали проницаемости охлажденным метанолом при -20 ° C в течение 15 минут и дважды промывали PBS.Чтобы предотвратить неспецифическое связывание антител, покровные стекла инкубировали с 2% BSA в PBS в течение 1 ч при 37 ° C. Иммуноокрашивание на тубулин, p53, p21, фосфогистон H-3 (Ser 10), Mad2 и BubR1 проводили, как описано недавно [19]. Изображения собирали с помощью микроскопа Nikon Eclipse TE2000-U и анализировали с помощью программного обеспечения Image-Pro Plus (Media Cybernetics, MD, США).

    Вестерн-блоттинг

    Клетки

    MCF-7 инкубировали в отсутствие или в присутствии 100 и 150 пМ ансамитоцина P3 и 25 нМ винбластина, соответственно, в течение 24 часов.Готовили лизаты целых клеток и 100 мкг образцов анализировали на электрофорезе в полиакриламидном геле с SDS. Впоследствии был проведен блоттинг на PVDF-мембране и вестерн-блоттинг [22]. Вкратце, мембрану блокировали с использованием 5% обезжиренного молока в буфере TBST, а затем инкубировали с первичными антителами кроличьи поликлональные анти-PARP IgG, мышиные моноклональные антитела к β-актину (1-1000), мышиные моноклональные анти-BubR1 и распознавали с использованием щелочного раствора. конъюгированные с фосфатазой антитела против IgG мыши (1-1000) или кроличьих (1-1000).

    Анализ апоптоза с использованием окрашивания аннексином V-PI

    клеток MCF-7 обрабатывали либо носителем, либо различными концентрациями ансамитоцина P3 в течение 24 часов. Окрашивание иодидом аннексина V-пропидия проводили с использованием набора для обнаружения апоптоза иодидом пропидия аннексина V-FITC (BD Bisociences, США) [23], а также проводили анализ клеток с помощью проточной цитометрии.

    Изоляция тубулина

    Тубулин был выделен из козьего мозга повторными циклами полимеризации и деполимеризации с использованием 1 М глутамата [24], [25].Белок хранили при -80 ° C. Концентрацию тубулина оценивали по методу Брэдфорда [26], используя бычий сывороточный альбумин в качестве стандарта.

    Константа диссоциации ансамитоцина P3 до тубулина

    Тубулин (2 мкМ) инкубировали без или с различными концентрациями (0,5–15 мкМ) ансамитоцина Р3 в течение 10 мин при 25 ° C. Спектры излучения (310–370 нм) регистрировали с помощью спектрофлуориметра JASCO FP-6500, возбуждая образцы при 295 нм. Использовалась кювета с длиной оптического пути 0,3 см.Ансамитоцин P3 не имеет значительного поглощения ни на длине волны возбуждения, ни на длине волны излучения. Следовательно, коррекция эффекта внутреннего фильтра не требовалась. Соответствующие холостые значения вычитали из всех измерений. Константу диссоциации (K d ) рассчитывали путем аппроксимации данных флуоресценции в уравнении, где L - концентрация ансамитоцина P3, ΔF - изменение интенсивности флуоресценции тубулина при его связывании с ансамитоцином P3; ΔF max - максимальное изменение интенсивности флуоресценции тубулина, когда он полностью связывается с ансамитоцином P3.K d рассчитывали с использованием программного обеспечения Graph Pad Prism 5 (Graph Pad Software, Калифорния, США). Эксперимент проводился 5 раз.

    Титрование сульфгидрильных групп

    Тубулин (5 мкМ) инкубировали без или с 3 и 5 мкМ ансамитоцина P3 на льду в течение 20 мин, а затем добавляли 300 мкМ DTNB [25], [27]. Оптическую плотность контролировали в течение 45 мин на спектрофотометре при 25 ° C. Количество остатков цистеина, прореагировавших через 45 мин, определяли с использованием молярного коэффициента экстинкции 12 000 M -1 см -1 для TNB - при 412 нм [25], [27] . Линейная скорость сульфгидрильных модификаций была получена путем построения графика зависимости от времени, где A и A t - оптическая плотность TNB - в состоянии насыщения и в разное время.

    Молекулярная стыковка

    Молекулярный докинг был выполнен с использованием Autodock 4.2 [28], чтобы идентифицировать предполагаемый сайт связывания ансамитоцина P3 и майтанзина на димере тубулина, как описано недавно [29]. Сервер PRODRG [30] был использован для создания минимизированной по энергии трехмерной атомной координаты ансамитоцина P3 и майтанзина.В качестве координат белка мы использовали структуру димеров альфа-бета-тубулина (PDB ID 1Z2B), связанных со статмин-подобным доменом RB3 с двумя молекулами связанного ДАМА-колхицина и одной молекулой связанного винбластина [31]. Только минус-концевая субъединица (С-цепь) и плюс-концевая β-субъединица (В-цепь), обе из которых взаимодействуют с винбластином, были использованы в качестве матрицы для исследований стыковки. Однако субъединицы A и D вместе с другими лигандами, включая статмин-подобный домен и колхицин, были удалены из структуры белка перед выполнением моделирования стыковки.Перед началом стыковки к тубулину добавляли основные водороды с помощью интерфейса UCSF Chimera [32]. Первоначально слепая стыковка винбластина, ансамитоцина Р3 и майтанзина проводилась с тубулином. Для слепого стыковки [33], [34] весь димер тубулина был заключен в сетку из 126 × 126 × 126 точек сетки с шагом сетки 0,80 Å, сохраняя тубулин жестким, а лекарство - гибкой молекулой. Генетический алгоритм Ламарка (LGA) использовался с параметрами по умолчанию; g_eval был установлен на 2,500,000 (средний).Было проведено пять независимых стыковочных работ, каждое из 100 запусков, так что было получено 500 выходных конформаций. Для каждой стыковки лиганд помещали в случайные места. Было обнаружено, что все лиганды шли на интерфейс. Поэтому локальный анализ стыковки проводился только на интерфейсе. Для локальной стыковки сетка была сделана таким образом, что она покрывала весь интерфейс димера α-β тубулина вместе с максимально возможным пространством поиска вокруг интерфейса. Для этого используется сетка размером 126 × 126 × 126 точек сетки с шагом сетки 0.375 Å было построено на границе димера тубулина. Генетический алгоритм Ламарка (LGA) использовался с параметрами по умолчанию; g_eval был установлен на 2,500,000 (средний). Было проведено 50 независимых заданий по стыковке гибких лигандов в каждом из 100 запусков LGA для всех трех препаратов, что дало 5000 выходных конформаций. Autodock 4.2 использовался для выполнения кластеризации конформаций связывания на основе сходства способов связывания и сходства. Оптимизированные конформации представляют возможные способы связывания лекарственного средства с тубулином [28], [35].Полученные 5000 выходных конформаций были сгруппированы с использованием отсечения RMSD для всех атомов, равного 5 Å, и кластеры, имеющие более 40 конформаций (число отсечения), были проанализированы дополнительно. Кластеры сравнивали на основе размера кластера, доступной для растворителя площади поверхности и энергии связи, рассчитанных с помощью оценочной функции AutoDock 4.2. Молекулярная графика и анализ были выполнены с использованием пакета Chimera [32], который был разработан Ресурсом для биокомпьютеров, визуализации и информатики Калифорнийского университета в Сан-Франциско (при поддержке NIGMS P41-GM103311).

    Результаты

    Ансамитоцин P3 ингибировал пролиферацию нескольких типов раковых клеток в культуре

    Ансамитоцин P3 (фиг. 1) ингибировал пролиферацию клеток MCF-7, HeLa, EMT-6 / AR1 и MDA-MB-231 в культуре в зависимости от концентрации (фиг. 2A). Было установлено, что полумаксимальные ингибирующие концентрации (IC 50 ) ансамитоцина P3 в клетках MCF-7, HeLa, EMT-6 / AR1 и MDA-MB-231 составляют 20 ± 3, 50 ± 0,6, 140 ± 17. , и 150 ± 1,1 пМ соответственно (рис.2А). Проточный цитометрический анализ клеток, окрашенных PI, показал, что ансамитоцин P3 ингибирует развитие клеточного цикла клеток MCF-7 в фазе G2 / M (рис. 2B). Например, 26, 50 и 70% клеток оказались в фазе G2 / M в отсутствие и в присутствии 50 и 100 пМ ансамитоцина P3 соответственно. Митотический индекс [(количество клеток в митозе / общее количество клеток) × 100] был определен как 3 ± 0,5, 23 ± 3, 33 ± 0,8 и 44 ± 4 (p <0,001) в отсутствие и в присутствии 20, 50 и 100 пМ ансамитоцина P3, соответственно, предполагая, что обработка ансамитоцином P3 индуцировала митотический блок в клетках MCF-7.Кроме того, количество клеток, окрашенных фосфогистоном-h4 (серин 10), составило 3 ± 0,5, 14 ± 1,2, 21 ± 0,5 и 29 ± 0,6% (p <0,006) в отсутствие и в присутствии 20, 50 и 100 пМ ансамитоцина Р3, соответственно (рис. 2С). Результаты также показали, что обработка ансамитоцином P3 блокировала митоз клеток (рис. 2С).

    Рисунок 2. Влияние ансамитоцина P3 на пролиферацию клеток и развитие клеточного цикла.

    (A) Ингибирование пролиферации клеток MCF-7 (▪), HeLa (), EMT-6 / AR1 (•) и MDA-MB-231 () ансамитоцином P3.(B) Воздействие ансамитоцина P3 на клетки MCF-7 в течение 24 часов увеличивало процент клеток в фазе G2 / M клеточного цикла. (C) Обработка ансамитоцином P3 увеличивала процент клеток, окрашенных фосфогистоном [PH-h4 (S10)]. Масштабная линейка 10 мкм. Клетки MCF-7 инкубировали с носителем (контроль) и различными концентрациями (20, 50 и 100 пМ) ансамитоцина P3 в течение 24 часов.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0075182.g002

    Ансамитоцин P3 нарушил организацию микротрубочек в клетках MCF-7

    Ансамитоцин Р3 нарушал межфазную организацию микротрубочек клеток MCF-7 (рис.3А). Деполимеризирующие эффекты усиливаются с увеличением концентрации ансамитоцина Р3. Ансамитоцин Р3 (20 пМ) до некоторой степени деполимеризовал межфазные микротрубочки (рис. 3А). В присутствии 50 пМ ансамитоцина Р3 наблюдалась сильная деполимеризация межфазных микротрубочек (рис. 3А). Ансамитоцин P3 оказывает гораздо более сильное деполимеризирующее действие на митотические микротрубочки, чем на межфазные микротрубочки (рис. 3B). Например, микротрубочки в митотических клетках сильно деполимеризовались в присутствии 50 пМ ансамитоцина P3, и веретена в этих клетках были сильно искажены (рис.3Б). В митотических клетках, обработанных носителем, хромосомы были конденсированы и организованы в метафазной пластине (фиг. 3B). В присутствии 20 пМ ансамитоцина Р3 несколько хромосом не были выровнены должным образом на метафазной пластине, в то время как обработка 50 пМ ансамитоцином Р3 сильно нарушила организацию хромосом в митотических клетках (рис. 3В).

    Рисунок 3. Ансамитоцин P3 вызывал деполимеризацию микротрубочек в клетках MCF-7.

    Клетки MCF-7 инкубировали в отсутствие или в присутствии различных концентраций ансамитоцина P3 в течение 24 часов.Показаны интерфазные (A) и митотические (B) микротрубочки. Масштабная линейка 10 мкм.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0075182.g003

    Ансамитоцин P3, активированный белками контрольной точки сборки веретена Mad2 и BubR1

    Mad2 и BubR1, как известно, чувствуют прикрепление или натяжение кинетохор микротрубочек через кинетохоры [36]. В контрольных митотических клетках не было обнаружено накопления Mad2 и BubR1 на кинетохорах (фиг. 4A и 4B). Однако в клетках, обработанных ансамитоцином Р3, Mad2 локализовался на кинетохорах (рис.4А). Аналогичным образом было обнаружено, что BubR1 накапливается в ядре клеток MCF-7, обработанных ансамитоцином P3 (фиг. 4B). Кроме того, было обнаружено, что ансамитоцин P3 увеличивает уровень фосфорилирования BubR1 в клетках MCF-7, указывая на то, что он активирует BubR1 (фиг. 4C). Совместно полученные результаты показали, что ансамитоцин P3 активировал митотическую контрольную точку в клетках MCF-7.

    Рисунок 4. Обработка ансамитоцином P3 активировала белки митотических контрольных точек.

    Ансамитоцин P3 вызывал накопление Mad 2 (A) и BubR1 (B).Клетки MCF-7 инкубировали в отсутствие или в присутствии различных концентраций (20, 50 и 100 пМ) ансамитоцина P3 в течение 24 часов. Клетки также окрашивали Hec1, чтобы показать положение кинетохоры. Масштабная линейка 10 мкм. (C) Обработка ансамитоцином P3 увеличивала фосфорилирование BubR1 в клетках MCF-7. Дорожки 1, 2, 3 и 4 представляют собой контроль, 100 и 150 пМ ансамитоцина Р3 и 25 нМ винбластина соответственно. β-актин использовали в качестве контроля нагрузки.

    https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0075182.g004

    Апоптоз, индуцированный ансамитоцином P3 в клетках MCF-7

    Обработка

    ансамитоцином P3 вызвала апоптоз в клетках MCF-7, о чем свидетельствует окрашивание обработанных клеток аннексином V и пропидием йодидом (фиг. 5 и фиг. S1). Например, процент мертвых клеток увеличился с 3% в контроле до 50% в случае клеток, обработанных 50 пМ (таблица 1). Расщепление поли (АДФ-рибоза) полимеразы (PARP) является известным маркером апоптоза [23], [37]. В клетках MCF-7, обработанных носителем, была обнаружена одна полоса PARP, тогда как клетки, обработанные ансамитоцином P3, показали две полосы белка PARP, указывающие на расщепление PARP (фиг.5Б). Результат показал, что обработка ансамитоцином P3 индуцировала апоптоз в клетках MCF-7. Поскольку обработка ансамитоцином P3 индуцировала апоптоз в MCF-7, мы исследовали, активирует ли он p53 в этих клетках. Вестерн-блоттинг показал, что уровень экспрессии р53 увеличился в клетках, обработанных ансамитоцином P3, по сравнению с клетками, обработанными носителем (фиг. 6A). Поэтому мы исследовали локализацию p53 в клетках, обработанных ансамитоцином P3. Обработка клеток MCF-7 ансамитоцином P3 увеличивала накопление р53 в ядре (рис.6Б). Чтобы проверить, активируются ли нижестоящие мишени p53 при накоплении в ядре p53, была проанализирована локализация p21 в обработанных ансамитоцином P3 клетках MCF-7 (фиг. 6C). Было обнаружено, что p21 накапливается в ядре клеток MCF-7, обработанных ансамитоцином P3, тогда как он отсутствует в клетках, обработанных носителем, что указывает на активацию зависимых от p53 генов в клетках, обработанных ансамитоцином P3 (фиг. 6C).

    Фиг. 5. Ансамитоцин P3 индуцировал апоптоз клеток MCF-7.

    (A) Апоптоз в клетках MCF-7 оценивали путем окрашивания аннексином V и PI с последующим анализом проточной цитометрии.Квадранты представляют мертвые (Q1), поздние апоптотические (Q2), живые (Q3) и (Q4) ранние апоптотические клетки. (B) Обработка ансамитоцином P3 вызвала расщепление PARP. Дорожки 1, 2, 3 и 4 представляют собой контроль, обработку 100 и 150 пМ ансамитоцином Р3 и 25 нМ винбластином клеток MCF-7 соответственно. β-актин использовали в качестве контроля нагрузки.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0075182.g005

    Рисунок 6. Обработка ансамитоцином P3 активировала p53.

    (A) Обработка ансамитоцином P3 вызвала повышение уровня экспрессии p53 в клетках MCF-7.Дорожки 1, 2, 3 и 4 представляют собой контроль, 100 и 150 пМ клеток, обработанных ансамитоцином Р3 и 25 нМ винбластином, соответственно. β-актин использовали в качестве контроля нагрузки. Обработка ансамитоцином P3 увеличивала накопление в ядре p53 (B) и p21 (C). Клетки MCF-7 инкубировали без или с различными концентрациями (20, 50 и 100 пМ) ансамитоцина P3 в течение 24 часов. Масштабная линейка 10 мкм.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0075182.g006

    Константа диссоциации ансамитоцина P3 до тубулина

    Собственная триптофановая флуоресценция тубулина снижалась в зависимости от концентрации при инкубации с увеличением концентрации ансамитоцина P3 (рис.7А). Константа диссоциации (K d ) для связывания ансамитоцина P3 с тубулином была оценена как 1,3 ± 0,7 мкМ путем аппроксимации данных изменения флуоресценции в уравнении связывания (фиг. 7B).

    Рис. 7. Ансамитоцин P3 подавлял триптофановую флуоресценцию тубулина.

    (A) Показаны эффекты ансамитоцина P3 на собственную триптофановую флуоресценцию тубулина. Тубулин инкубировали в 25 мМ буфере PIPES (pH 6,8) без () и с разными концентрациями 0.5 (○), 1 (▴), 2 (∇), 3 (♦), 5 ( × ), 7 (Δ), 10 (□) и 15 (•) мкМ ансамитоцина P3 соответственно. (B) Константу диссоциации определяли по данным изменения флуоресценции с использованием программного обеспечения Graph Pad Prism 5. K d был средним из 5 наборов данных.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0075182.g007

    Ансамитоцин P3 модифицировал остатки цистеина тубулина

    Известно, что связывание колхицина и винбластина с тубулином снижает количество доступных для химической модификации остатков цистеина [38].На фиг. 8А показана кинетика реакции модификации тубулина цистеином с помощью DTNB в отсутствие и в присутствии 3 и 5 мкМ ансамитоцина Р3. Среднее количество доступных остатков цистеина на димер тубулина снижалось с 12 ± 0,02 до 11 ± 0,01 и 9 ± 0,01 после обработки 3 и 5 мкМ ансамитоцина P3 соответственно (p <0,001). Кроме того, было обнаружено, что ансамитоцин P3 снижает начальную скорость модификации цистеина с помощью DTNB, что указывает на то, что связывание лиганда вызывает конформационные изменения в тубулине (рис.8Б).

    Рисунок 8. Ансамитоцин P3 подавлял химическую модификацию цистеиновых остатков тубулина с помощью DTNB.

    (A) Показана кинетика модификации тубулина под действием DTNB в отсутствие () и в присутствии 3 мкМ (), 5 мкМ (•) ансамитоцина P3. Поглощение контролировали при 412 нм. (B) Показаны графики псевдопервого порядка сульфгидрильных модификаций в отсутствие () и в присутствии 3 мкМ () и 5 ​​мкМ (•) ансамитоцина P3. Показан один из трех экспериментов.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0075182.g008

    Ансамитоцин Р3 и майтанзин частично связываются с сайтом связывания винбластина тубулина

    Было показано, что

    ансамитоцин P3 ингибирует связывание винбластина с тубулином с константой ингибирования (K i ) 1,5 × 10 -8 M [18]. Предполагается, что сайты связывания майтанзиноидов частично перекрываются с сайтом связывания винбластина на тубулине [39], [40]. Поэтому сначала проводили стыковку с винбластином на димере тубулина в качестве контроля.Пристыкованную конформацию сравнивали со структурой винбластина, определенной рентгеноструктурным методом. Энергия связи стыкованных конформаций с минимальной энергией (рис. 9) составляет -11,34 ккал / моль (табл. 2). Среднеквадратичное отклонение (RMSD) между «предсказанным» и кристаллографически определенным режимами связывания винбластина составляло 0,8 Å. RMSD менее 2 Å указывает на приемлемый анализ стыковки [28], [41]. Стыковку ансамитоцина Р3 с тубулином проводили с использованием той же процедуры, что и для контроля (винбластин).Анализ показал, что ансамитоцин P3 может связываться с тубулином в сайте связывания винбластина в двух положениях (положение A и положение B) (рис. 9). Расчетные энергии связывания для положений A и B составляли -10,27 и -10,18 ккал / моль соответственно, что указывает на то, что ансамитоцин P3 может связываться с тубулином в обеих конформациях, поскольку расчетная разница в энергии между этими двумя конформациями не слишком велика. Поскольку обе позиции имели сравнимую энергию (-10,27 и -10,18 ккал / моль), мы также рассчитали доступную для растворителя площадь поверхности с помощью NACCESS [42], чтобы выяснить, насколько хорошо ансамитоцин P3 был погружен в карман связывания винбластина в обоих положениях.Значения доступной для растворителя площади поверхности для ансамитоцина P3 после связывания с димером тубулина составляли 212 Å и 111 Å для положения A и положения B, соответственно. Карман связывания винбластина является амфипатическим (состоит как из гидрофобных, так и из гидрофильных аминокислот) по своей природе (таблица 3). Остатки сайта связывания, расположенные в пределах расстояний 4 Å от стыкованного ансамитоцина в обоих положениях, изображены на фигурах S2 и S3 и перечислены в таблице 3. Анализ остатков сайта связывания, лежащих в пределах 4 Å, позволил предположить, что сайт связывания ансамитоцина P3 в обоих положениях А и положение В частично перекрываются сайтом связывания винбластина на тубулине.Общими аминокислотами между сайтом связывания винбластина и сайтами связывания ансамитоцина P3 были Lys176, Tyr210, Pro222, Val177, Ser178, Asp179 β-субъединицы и Lys326, Asn329, Gly354, Val353 и Asp249 α-субъединицы димера тубулина (таблица 3). . В положении A ансамитоцин P3 может образовывать пять водородных связей с Pro175 (1,7 Å), Val177 (2,3 Å), Ser178 (1,7 Å), Asp179 (1,8 Å) и Lys 336 (2,2 Å) [32], [43] ( Рисунок S2). В положении B ансамитоцин P3 может образовывать две водородные связи с Val177 (1,8 Å) и Asn329 (2.2 Å) [32], [43] (Рисунок S3). Аналогичным образом мы провели стыковку майтанзина с димером тубулина. Конформация стыковки с минимальной энергией была обнаружена на границе α-β (рис. S4A). Расчетная энергия связи для этой ориентации составляет -10,26 ккал / моль. Остатки сайта связывания, лежащие в пределах расстояний 4 Å от стыкованного майтанзина, показаны на (фиг. S4B) и перечислены в таблице 3. Было также обнаружено, что сайт связывания майтанзина перекрывается с сайтом связывания винбластина (фиг. 9). Общими аминокислотами между сайтом связывания винбластина и сайтами связывания майтанзина были Gly354, Asn249, Val353 α– субъединицы и Ser178, Val177, Tyr224, Pro222, Thr223 и Thr221 β-субъединицы димера тубулина.В этой пристыкованной конформации майтанзин образует две водородные связи с Asn249 (2,7 Å) и Thr223 (1,9 Å) (рис. S4B) [32], [43]. Было обнаружено, что другие виды взаимодействий также могут помочь ансамитоцину P3 и майтанзину в связывании с димером тубулина. Критерии для прогнозирования взаимодействия C α HO, расстояние C α HO должно быть меньше 3,9 Å, а угол между C α –H – O должен быть больше 90 ° [44], [45] . Контакты CH-π анализировались с расстоянием отсечки D max 3.05 Å и отсечки по углу (угол между H-C-C ’) <70 ° [44], [46]. Для взаимодействия галоген (хлор) с кислородом [47] расстояние между хлором и кислородом должно быть меньше 3,27 Å, а угол между C-Cl-O должен быть больше 165 ° [47], [48]. В обоих положениях ансамитоцин P3 также может быть стабилизирован другими слабыми взаимодействиями, такими как взаимодействия C α H-O и CH-π. В ориентации A Lys176, Val177 и Asn329 могут обеспечивать взаимодействие C α H-O. Анализ показал, что Ile332, Phe351 и Phe343 обеспечивали контакты CH-π.В положении B не было обнаружено взаимодействий C α H-O, в то время как Thr319 и Phe214 обеспечивают контакты CH-π. Другое важное взаимодействие, а именно взаимодействие галоген-кислород [47], наблюдалось в положении B ансамитоцина P3. В положении B ансамитоцина P3 валин177 цепи B может устанавливать хлор-кислородное взаимодействие с атомом хлора ансамитоцина P3 (рисунок S3C). Также было проанализировано присутствие контактов C α H – O и CH-π для майтанзина. Возможность взаимодействия C α H – O не обнаружена.Было обнаружено, что Tyr224 обеспечивает контакты CH-π.

    Рисунок 9. Ансамитоцин и майтанзин связываются в связывающем кармане винбластина в димере тубулина.

    (A) Показаны структуры винбластина (розовый), ансамитоцина P3 (коричневый) и майтанзина (синий). (B) Вид поверхности димера α-β тубулина, α-цепь показана на гидрофобной поверхности, а β-цепь показана голубым цветом. Вертикальная черная линия показывает ось, на которой разрезана β-цепь, чтобы показать виды в поперечном сечении на (C) и (D). (C) и (D) показывают поперечное сечение сайта связывания винбластина.Две ориентации связывания, положение A и положение B, ансамитоцина P3 (коричневые палочки) показаны на (C) и (D) соответственно. Винбластин изображен в виде розовых палочек и сетчатой ​​поверхности, а майтанзин показан синих палочек. Ансамитоцин P3 в положении A частично перекрывается с карманом связывания винбластина, в то время как ансамитоцин P3 в положении B частично перекрывается с карманом связывания винбластина и частично с карманом связывания майтанзина. Интересно, что сайт связывания майтанзина также частично перекрывается с карманом связывания винбластина.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0075182.g009

    Обсуждение

    В этом исследовании мы изучили механизм действия ансамитоцина P3 в клетках MCF-7. В соответствии с предыдущими исследованиями [5], [12], [49] было обнаружено, что ансамитоцин P3 сильно ингибирует пролиферацию клеток MCF-7 с IC 50 , равным 20 ± 2 пМ. Сообщалось, что майтанзин имеет IC 50 710 пМ в клетках MCF-7 [10], что указывает на то, что ансамитоцин P3 более эффективен, чем его родительская молекула, майтанзин.Кроме того, при пикомолярных концентрациях ансамитоцин P3 вызывал серьезную деполимеризацию интерфазных и митотических микротрубочек в клетках MCF-7 и останавливал развитие клеточного цикла при митозе. Фосфорилирование BubR1 в обработанных ансамитоцином P3 клетках MCF-7 указывало на активацию BubR1 в этих клетках. Механизмы контроля контрольных точек в клетке, как известно, рекрутируют белки, которые чувствуют отсоединение микротрубочек от области кинетохор. Накопление белков контрольной точки, таких как Mad2 и BubR1, как известно, останавливает клетку перед анафазой, пока дефекты не будут исправлены [36] . При обработке ансамитоцином P3 наблюдалось повышенное накопление белков контрольной точки Mad2 и BubR1. Обработка ансамитоцином P3 активировала p53 и увеличивала накопление p21 в ядре, что позволяет предположить, что клетки подверглись апоптозу через путь апоптоза, опосредованный p53.

    Ансамитоцин Р3 снижает собственную флуоресценцию тубулина, а также снижает скорость и степень модификации тубулина цистеином с помощью DTNB, что указывает на то, что он индуцирует конформационные изменения тубулина.Было показано, что, как и ансамитоцин P3, несколько сильнодействующих цитотоксических агентов, включая майтанзин (IC 50 , 710 пМ) и криптофицин-52 (IC 50 , 11 пМ), ингибируют пролиферацию клеток в пикомолярном диапазоне, тогда как было обнаружено, что эти агенты связывают до очищенного тубулина с константами диссоциации в субмикромолярном диапазоне [9], [50]. Например, сообщалось, что криптофицин 52 и майтанзин связываются с тубулином с константой диссоциации 0,3 и 0,86 мкМ соответственно [10], [51]. K d ансамитоцина P3, полученный в нашем исследовании, сопоставим с таковым майтанзина.Интересно, что майтанзин, как было показано, связывается с микротрубочками с почти в 20 раз более сильным сродством, чем связывание с растворимым тубулином [10]. Было обнаружено, что связывание нескольких молекул криптофицина 52 и майтанзина с микротрубочками ингибирует динамику сборки микротрубочек и ингибирует пролиферацию клеток. Следовательно, ансамитоцин P3 может также связываться с концами микротрубочек с гораздо более сильным сродством, чем с растворимым тубулином, что может объяснить его сильную цитотоксическую активность в клетках.

    Докинг-анализ показал, что сайт связывания ансамитоцина P3 с тубулином частично перекрывается с сайтом связывания винбластина.Результат согласуется с биохимическими данными о том, что ансамитоцин P3 конкурентно ингибирует связывание винбластина с тубулином [16] - [18]. Анализ сайтов связывания винбластина и ансамитоцина P3 показал, что остатки Phe351, Val353, Ser178, Val177, Asp179, Pro175 и Lys176 тубулина являются общими для обоих лигандов (таблица 3). В положении B сайт связывания ансамитоцина полностью перекрывается сайтом связывания винбластина (фиг. 9). Общими аминокислотами между сайтом связывания винбластина и сайтами связывания ансамитоцина P3 для положения B были Lys176, Tyr210, Pro222, Val177, Ser178, Asp179, Lys326, Asn329, Gly354, Val353 и Asp249 (таблица 3).Как упоминалось ранее, значение доступной для растворителя площади поверхности намного меньше для положения B, чем для положения A ансамитоцина P3, что указывает на то, что ансамитоцин P3 в положении B находится более глубоко, чем положение A. Поскольку разница энергий связывания ансамитоцина Присоединение P3 к тубулину в обоих положениях A и B было сопоставимым, мы использовали оценочную доступную для растворителя площадь поверхности и межмолекулярные взаимодействия, чтобы предположить, что положение B более предпочтительно, чем положение A, для стыковки ансамитоцина P3 с тубулином.

    В заключение, результаты показали, что сайт связывания ансамитоцина P3 частично перекрывается с сайтом связывания винбластина на тубулине, и предоставили новое понимание в понимании связывания ансамитоцина P3 с тубулином. Ансамитоцин P3 сильно ингибировал пролиферацию клеток за счет деполимеризации микротрубочек и индуцировал апоптотическую гибель клеток через путь, опосредованный p53.

    Дополнительная информация

    Рисунок S2.

    (A) Стыковка ансамитоцина P3 с димером тубулина в положении A.Цепи C и B (α и β субъединица димера тубулина соответственно) показаны красным и зеленым цветом соответственно, а ансамитоцин P3 показан коричневым цветом. Красные, синие, зеленые и белые палочки представляют собой атомы кислорода, азота, хлора и водорода соответственно. В этой ориентации ансамитоцин P3 был обнаружен на границе димера тубулина. (B) Аминокислоты присутствуют около 4 Å кармана связывания ансамитоцина P3 в положении A в димере тубулина. Цветовая гамма такая же, как у S1A. Черные линии представляют возможность образования водородных связей между ансамитоцином P3 и аминокислотами i.е. Pro175 (1,7 Å), Val177 (2,3 Å), Ser178 (1,7 Å), Asp179 (1,8 Å) и Lys 336 (2,2 Å) присутствуют вокруг ансамитоцина P3 в связывающем кармане.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0075182.s002

    (TIF)

    Рисунок S3.

    Стыковка ансамитоцина P3 на димере тубулина в позиции B. (A) Цветовая схема такая же, как в S1A. В этой ориентации было обнаружено, что ансамитоцин P3 связывается на границе раздела димера тубулина. (B) Аминокислоты присутствуют около 4 Å кармана связывания ансамитоцина P3 в положении B в димере тубулина.Цветовая гамма такая же, как у S1A. Черные линии представляют возможность образования водородных связей между ансамитоцином P3 и аминокислотами, то есть Val177.B (1,8 Å) и Asn329.C (2,2 Å), присутствующими вокруг ансамитоцина P3 в связывающем кармане. (C) Взаимодействие галоген (хлор) с кислородом для ансамитоцина P3 в положении B. Цветовая схема такая же, как в S1A. Атом хлора ансамитоцина Р3 стабилизирует галоген-кислородное взаимодействие с карбонильным кислородом Val177.B (3,24 Å). Возможные взаимодействия галогенов показаны пунктирными линиями.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0075182.s003

    (TIF)

    Рисунок S4.

    Стыковка майтанзина с димером тубулина. Цветовая схема такая же, как на рисунке S1A. Майтанзин показан синим цветом. (A) Было обнаружено, что майтанзин связывается на границе раздела димера тубулина, частично перекрываясь с карманом связывания винбластина. (B) Аминокислоты присутствуют примерно на 4 Å от кармана связывания майтанзина в димере тубулина. Черные линии представляют возможность образования водородных связей между майтанзином и аминокислотами i.е. Tyr224 (1,88 Å) и Asn249 (2,70 Å) присутствуют вокруг майтанзина в связывающем кармане. Была выявлена ​​возможность одной внутримолекулярной водородной связи между кислородом и водородом гидроксильной группы (обведены черным).

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0075182.s004

    (TIF)

    Благодарности

    Мы благодарим Центр исследований в области нанотехнологий и науки Индийского технологического института в Бомбее за установку проточной цитометрии. Мы благодарим Сударшана Кини за помощь в проведении экспериментов по проточной цитометрии.Мы также благодарим Джаянта Астхана и Анкит Рай за критическое прочтение рукописи.

    Вклад авторов

    Задумал и спроектировал эксперименты: JBV DP. Проведены эксперименты: JBV TKG. Проанализированы данные: JBV TKG AK PJV DP. Внесенные реактивы / материалы / инструменты анализа: АК ДП. Написал статью: JBV TKG AK PJV DP.

    Ссылки

    1. 1. Sievers EL, Senter PD (2013) Конъюгаты антитело-лекарственное средство в терапии рака. Анну Рев Мед 64: 15–29.
    2. 2.Liu C, Chari RV (1997) Разработка систем доставки антител для нацеливания на рак с помощью сильнодействующих майтанзиноидов. Мнение эксперта по исследованию наркотиков 6: 169–172.
    3. 3. Cassady JM, Chan KK, Floss HG, Leistner E (2004) Последние разработки противоопухолевых агентов майтансиноидов. Chem Pharm Bull (Токио) 52: 1–26.
    4. 4. Issell BF, Crooke ST (1978) Майтансин. Лечение рака Ред. 5: 199–207.
    5. 5. Ikeyama S, Takeuchi M (1981) Антитубулиновая активность ансамитоцинов и майтанзиноидов.Biochem Pharmacol 30: 2421–2425.
    6. 6. Sieber SM, Wolpert MK, Adamson RH, Cysyk RL, Bono VH, et al .. (1975) Экспериментальные исследования с майтанзином - новым противоопухолевым агентом. Bibl Haematol: 495–500.
    7. 7. Ремиллард С., Ребхун Л. И., Хоуи Г. А., Купчан С. М. (1975) Антимитотическая активность мощного ингибитора опухолей майтанзина. Наука 189: 1002–1005.
    8. 8. Huang AB, Lin CM, Hamel E (1985). Майтансин ингибирует связывание нуклеотидов в месте обмена тубулина.Biochem Biophys Res Commun 128: 1239–1246.
    9. 9. Лопус М., Оруджев Э., Уилсон Л., Вильгельм С., Виддисон В. и др. (2010) Майтанзин и клеточные метаболиты конъюгатов антитело-майтанзиноид сильно подавляют динамику микротрубочек, связываясь с микротрубочками. Mol Cancer Ther 9: 2689–2699.
    10. 10. Оруджев Э., Лопус М., Уилсон Л., Одетт С., Провенцано С. и др. (2010) Конъюгаты майтансиноид-антитело вызывают остановку митоза, подавляя динамическую нестабильность микротрубочек.Mol Cancer Ther 9: 2700–2713.
    11. 11. Танида С., Хасегава Т., Хатано К., Хигашид Е., Йонеда М. (1980) Ансамитоцины, майтансиноидные противоопухолевые антибиотики. Производящий организм, ферментация и антимикробная активность. Дж. Антибиотик (Токио) 33: 192–198.
    12. 12. Хигашид Э., Асаи М., Оотсу К., Танида С., Козай Ю. и др. (1977) Ансамитоцин, группа новых майтансиноидных антибиотиков с противоопухолевыми свойствами от Nocardia. Природа 270: 721–722.
    13. 13. Купчан С.М., Комода Ю., Бранфман А.Р., Снеден А.Т., Суд В.А. и др.(1977) Майтансиноиды. Выделение, структурное выяснение и химическая взаимосвязь новых макролидов анса. J Org Chem 42: 2349–2357.
    14. 14. Купчан С.М., Комода Ю., Корт В.А., Томас Г.Дж., Смит Р.М. и др. (1972) Майтанзин, новый антилейкемический анза-макролид из Maytenus ovatus. J Am Chem Soc 94: 1354–1356.
    15. 15. Купчан С.М., Снеден А.Т., Бранфман А.Р., Хауи Г.А., Ребхун Л.И. и др. (1978) Структурные требования к антилейкемической активности природных и полусинтетических майтанзиноидов.J Med Chem 21: 31–37.
    16. 16. Hamel E (1992) Натуральные продукты, которые взаимодействуют с тубулином в домене барвинка: майтанзин, ризоксин, фомопсин A, доластатины 10 и 15 и галихондрин B. Pharmacol Ther. 55: 31–51.
    17. 17. Li Y, Kobayashi H, Hashimoto Y, Iwasaki S (1992) Селективность связывания ризоксина, фомопсина A, винбластина и ансамитоцина P-3 с грибковыми тубулинами: дифференциальные взаимодействия этих антимитотических агентов с мозговыми и грибковыми тубулинами.Biochem Biophys Res Commun 187: 722–729.
    18. 18. Такахаши М., Ивасаки С., Кобаяси Х., Окуда С., Мураи Т. и др. (1987) Связывание ризоксина с тубулином в сайте связывания майтанзина. Biochim Biophys Acta 926: 215–223.
    19. 19. Rai A, Surolia A, Panda D (2012) Антитубулиновый агент BCFMT ингибирует пролиферацию раковых клеток и вызывает гибель клеток, подавляя динамику микротрубочек. PLoS One 7: e44311.
    20. 20. Skehan P, Storeng R, Scudiero D, Monks A, McMahon J и др.(1990) Новый колориметрический анализ цитотоксичности для скрининга противоопухолевых препаратов. J Natl Cancer Inst 82: 1107–1112.
    21. 21. Mohan R, Panda D (2008) Кинетическая стабилизация динамики микротрубочек эстрамустином связана с ацетилированием тубулина, аномалиями веретена и остановкой митоза. Cancer Res 68: 6181–6189.
    22. 22. Rathinasamy K, Panda D (2008) Кинетическая стабилизация динамической нестабильности микротрубочек беномилом увеличивает ядерный транспорт p53.Biochem Pharmacol 76: 1669–1680.
    23. 23. Gajula PK, Asthana J, Panda D, Chakraborty TK (2013) Синтетический аналог доластатина 10 подавляет динамику микротрубочек, ингибирует пролиферацию клеток и индуцирует апоптотическую гибель клеток. J Med Chem 56: 2235–2245.
    24. 24. Hamel E, Lin CM (1981) Глутамат-индуцированная полимеризация тубулина: характеристики реакции и применение для крупномасштабной очистки тубулина. Arch Biochem Biophys 209: 29–40.
    25. 25.Гупта К., Панда Д. (2002) Нарушение полимеризации микротрубочек кверцетином через связывание тубулина: новый механизм его антипролиферативной активности. Биохимия 41: 13029–13038.
    26. 26. Брэдфорд М.М. (1976) Быстрый и чувствительный метод количественного определения количества белка в микрограммах, использующий принцип связывания белок-краситель. Анальная биохимия 72: 248–254.
    27. 27. Эллман Г.Л. (1959) Сульфгидрильные группы тканей. Arch Biochem Biophys 82: 70–77.
    28. 28. Моррис Г.М., Хьюи Р., Линдстрем В., Саннер М.Ф., Белью Р.К. и др. (2009) AutoDock4 и AutoDockTools4: Автоматическая стыковка с гибкостью выборочного рецептора. J Comput Chem 30: 2785–2791.
    29. 29. Рай А., Гупта Т.К., Кини С., Кунвар А., Суролия А. и др. (2013) CXI-бензо-84 обратимо связывается с тубулином на участке колхицина и вызывает апоптоз в раковых клетках. Biochem Pharmacol 86: 378–391.
    30. 30. Schuttelkopf AW, van Aalten DM (2004) PRODRG: инструмент для высокопроизводительной кристаллографии комплексов белок-лиганд.Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 60: 1355–1363.
    31. 31. Gigant B, Wang C, Ravelli RB, Roussi F, Steinmetz MO, et al. (2005) Структурные основы регуляции тубулина винбластином. Природа 435: 519–522.
    32. 32. Петтерсен Э.Ф., Годдард Т.Д., Хуанг С.С., Коуч Г.С., Гринблатт Д.М. и др. (2004) UCSF Chimera - система визуализации для поисковых исследований и анализа. J Comput Chem 25: 1605–1612.
    33. 33. Hetenyi C, van der Spoel D (2006) Слепая стыковка соединений размером с лекарство с белками, содержащими до тысячи остатков.FEBS Lett 580: 1447–1450.
    34. 34. Iorga B, Herlem D, Barre E, Guillou C (2006) Ацетилхолиновые никотиновые рецепторы: поиск предполагаемого сайта связывания аллостерических модуляторов с использованием подхода «слепой стыковки». Журнал молекулярного моделирования 12: 366–372.
    35. 35. Sertel S, Fu Y, Zu Y, Rebacz B, Konkimalla B, et al. (2011) Молекулярный докинг и фармакогеномика алкалоидов барвинка и их мономерных предшественников, виндолина и катарантина. Biochem Pharmacol 81: 723–735.
    36. 36. Май К.М., Хардвик К.Г. (2006) Контрольно-пропускной пункт шпинделя. J Cell Sci 119: 4139–4142.
    37. 37. Chaitanya GV, Steven AJ, Babu PP (2010) Фрагменты расщепления PARP-1: сигнатуры протеаз гибели клеток при нейродегенерации. Сигнал сотовой связи 8:31.
    38. 38. Luduena RF, Roach MC (1991) Сульфгидрильные группы тубулина как зонды и мишени для антимитотических и антимикротрубочковых агентов. Pharmacol Ther 49: 133–152.
    39. 39. Mandelbaum-Shavit F, Wolpert-DeFilippes MK, Johns DG (1976) Связывание майтанзина с тубулином мозга крысы.Biochem Biophys Res Commun 72: 47–54.
    40. 40. Bhattacharyya B, Wolff J (1977) Связывание майтанзина с винбластиновыми участками тубулина. FEBS Lett 75: 159–162.
    41. 41. Кукол А. (2008) Молекулярное моделирование белков. Тотова, Нью-Джерси: Humana Press.
    42. 42. Hubbard SJ и Thornton JM (1996) Компьютерная программа NACCESS, версия 2.1.1, Департамент биохимии и молекулярной биологии, Университетский колледж Лондона, Лондон.
    43. 43. Миллс Дж. Э., Дин П. М. (1996) Трехмерная геометрия водородных связей и вероятностная информация из обзора кристаллов.J. Comput Aided Mol Des 10: 607–622.
    44. 44. Бабу М.М. (2003) NCI: сервер для выявления неканонических взаимодействий в белковых структурах. Nucleic Acids Res 31: 3345–3348.
    45. 45. Каур Х., Рагхава Г.П. (2006) Прогнозирование взаимодействий C альфа-H… O и C альфа-H… pi в белках с использованием рекуррентной нейронной сети. В Silico Biol 6: 111–125.
    46. 46. Суэзава Х., Исихара С., Умедзава Ю., Цубояма С., Нишио М. (2004) Ароматическая связь CH / π-водорода как важный фактор в определении относительной стабильности диастереомерных солей, имеющих отношение к энантиомерному разрешению - исследование кристаллографической базы данных.Европейский журнал органической химии 2004: 4816–4822.
    47. 47. Райли К.Е., Хобза П. (2011) Прочность и характер галогенных связей в комплексах белок-лиганд. Выращивание и дизайн кристаллов 11: 4272–4278.
    48. 48. Auffinger P, Hays FA, Westhof E, Ho PS (2004) Галогенные связи в биологических молекулах. Proc Natl Acad Sci U S A 101: 16789–16794.
    49. 49. Taft F, Harmrolfs K, Nickeleit I, Heutling A, Kiene M и др. (2012) Комбинированный мута- и полусинтез: мощный синтетический гибридный подход для доступа к специфическим противоопухолевым агентам на основе ансамитоцина P3.Химия 18: 880–886.
    50. 50. Panda D, DeLuca K, Williams D, Jordan MA, Wilson L (1998) Антипролиферативный механизм действия криптофицина-52: кинетическая стабилизация динамики микротрубочек за счет высокоаффинного связывания с концами микротрубочек. Proc Natl Acad Sci U S A 95: 9313–9318.
    51. 51. Панда Д., Анантнараян В., Ларсон Г., Ши С., Джордан М.А. и др. (2000) Взаимодействие противоопухолевого соединения криптофицина-52 с тубулином. Биохимия 39: 14121–14127.
    52. 52.Lobert S, Frankfurter A, Correia JJ (1995) Связывание винбластина с очищенным фосфоцеллюлозой и тубулином альфа-бета-класса III: роль нуклеотидов и изотипов бета-тубулина. Биохимия 34: 8050–8060.
    53. 53. Дейли Е.М., Тейлор Р.Е. (2009) Энтропия и энтальпия в активности антимитотических агентов на основе тубулина. Современная химическая биология 3: 367–379.
    54. 54. Bhattacharyya B, Wolff J (1976) Агрегация и дезагрегация тубулина: опосредование двумя различными сайтами связывания винбластина.Proc Natl Acad Sci U S A 73: 2375–2378.

    % PDF-1.4 % 925 0 объект > эндобдж xref 925 124 0000000016 00000 н. 0000005659 00000 н. 0000005867 00000 н. 0000005903 00000 н. 0000006429 00000 н. 0000006583 00000 н. 0000006740 00000 н. 0000006894 00000 н. 0000007051 00000 н. 0000007205 00000 н. 0000007362 00000 н. 0000007519 00000 п. 0000007676 00000 н. 0000007833 00000 п. 0000007988 00000 н. 0000008637 00000 н. 0000010768 00000 п. 0000011152 00000 п. 0000011704 00000 п. 0000012127 00000 п. 0000012999 00000 н. 0000013864 00000 п. 0000014787 00000 п. 0000015658 00000 п. 0000016852 00000 п. 0000018045 00000 п. 0000018527 00000 п. 0000018587 00000 п. 0000022715 00000 п. 0000023159 00000 п. 0000023440 00000 п. 0000023882 00000 п. 0000024383 00000 п. 0000024948 00000 п. 0000025884 00000 п. 0000026752 00000 п. 0000027222 00000 п. 0000027922 00000 н. 0000029106 00000 п. 0000029190 00000 п. 0000029668 00000 п. 0000030236 00000 п. 0000030890 00000 н. 0000031358 00000 п. 0000032555 00000 п. 0000033216 00000 п. 0000035935 00000 п. 0000036754 00000 п. 0000037521 00000 п. 0000038143 00000 п. 0000038965 00000 п. 0000039758 00000 п. 0000047427 00000 н. 0000055696 00000 п. 0000062314 00000 п. 0000068488 00000 п. 0000074498 00000 п. 0000081482 00000 п. 0000081554 00000 п. 0000081770 00000 п. 0000081870 00000 п. 0000081993 00000 п. 0000082161 00000 п. 0000082325 00000 п. 0000082478 00000 п. 0000082709 00000 п. 0000082842 00000 п. 0000083021 00000 п. 0000083202 00000 п. 0000083333 00000 п. 0000083515 00000 п. 0000083697 00000 п. 0000083864 00000 п. 0000084015 00000 п. 0000084220 00000 п. 0000084407 00000 п. 0000084570 00000 п. 0000084775 00000 п. 0000084963 00000 п. 0000085126 00000 п. 0000085291 00000 п. 0000085472 00000 п. 0000085663 00000 п. 0000085843 00000 п. 0000085981 00000 п. 0000086135 00000 п. 0000086304 00000 п. 0000086454 00000 п. 0000086602 00000 п. 0000086787 00000 п. 0000086947 00000 п. 0000087141 00000 п. 0000087348 00000 п. 0000087478 00000 п. 0000087634 00000 п. 0000087846 00000 п. 0000087988 00000 н. 0000088167 00000 п. 0000088307 00000 п. 0000088442 00000 п. 0000088598 00000 п. 0000088750 00000 п. 0000088902 00000 п. 0000089034 00000 п. 0000089188 00000 п. 0000089376 00000 п. 0000089544 00000 п. 0000089710 00000 п. 0000089884 00000 п. 00000 00000 п. 00000 00000 п. 00000 00000 п. 00000

    00000 н. 00000
  • 00000 п. 00000

    00000 н. 00000

    00000 п. 00000
  • 00000 п. 00000

    00000 п. 00000

    00000 п. 00000

    00000 п. 00000

    00000 п. 00000 00000 п. 00000 00000 п. 9n + iVo, ~ ej Y_ (ꄔ LP # d'DC ڴ S * Z2V0%: P & B4L-mϽk˲ ~ {{} ܳ @ - Lj? ECZh5vFLEt? Eluu8I \ ۸ dQ (IcgON4A.M 런 | ņWm4r5 + Gc / y,? | S? '];} ΟS ߼߽> 9o͙% ~ ba {Ǟxs / t / N8 ~ n_ # | r'xIoX $> c ٬ b $ кН; ex @, & - | 8.b, $ kBP Gw1VYPDdJ''µ

    Нацеливание на мутации FLT3 в AML: обзор современных знаний и доказательств

  • 1.

    Ding L, Ley TJ, Larson DE, Miller CA, Koboldt DC, Welch JS, et al. Клональная эволюция при рецидиве острого миелоидного лейкоза, выявленная с помощью полногеномного секвенирования. Природа. 2012; 481: 506–10.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 2.

    Döhner H, Weisdorf DJ, Bloomfield CD. Острый миелоидный лейкоз. N Engl J Med. 2015; 373: 1136–52.

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 3.

    Уолтер MJ, Payton JE, Ries RE, Shannon WD, Deshmukh H, Zhao Y, et al. Изменения количества приобретенных копий в геномах острого миелоидного лейкоза взрослых. Proc Natl Acad Sci USA. 2009. 106: 12950–5.

    CAS PubMed Google ученый

  • 4.

    Дёнер Х., Эстей Э., Гримуэйд Д., Амадори С., Аппельбаум Ф. Р., Бюхнер Т. и др. Диагностика и лечение ОМЛ у взрослых: рекомендации ELN, 2017 г., от международной группы экспертов. Кровь. 2017; 129: 424–47.

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 5.

    О’Доннелл М.Р., Таллман М.С., Аббуд С.Н., Альтман Дж. К., Аппельбаум Ф.Р., Арбер Д.А. и др. Острый миелоидный лейкоз, версия 3.2017, Руководство NCCN по клинической практике в онкологии.J Natl Compr Canc Netw. 2017; 15: 926–57.

    PubMed Google ученый

  • 6.

    Гримваде Д., Мрозек К. Диагностическое и прогностическое значение цитогенетики при остром миелоидном лейкозе. Hematol Oncol Clin North Am. 2011; 25: 61. vii

    Google ученый

  • 7.

    Арбер Д.А., Орази А., Хассерджян Р., Тиле Дж., Боровиц М.Дж., Ле Бо М.М. и другие. Пересмотр 2016 г. классификации миелоидных новообразований и острого лейкоза Всемирной организации здравоохранения.Кровь. 2016; 127: 2391–405.

    CAS PubMed Google ученый

  • 8.

    Schetelig J, Rollig C, Kayser S, Stoelzel F, Schaefer-Eckart K, Haenel M, et al. Валидация классификации ELN 2017 для AML с цитогенетикой промежуточного риска с мутациями NPM1 или без них и FLT3-ITD с высоким или низким соотношением. Кровь. 2017; 130: 2694.

    Google ученый

  • 9.

    Левис М.Мутации FLT3 при остром миелоидном лейкозе: какой подход лучше всего в 2013 году? Образовательная программа Hematol Am Soc Hematol. 2013; 2013: 220–6.

    Google ученый

  • 10.

    Дёнер Х., Эстей Э.Х., Амадори С., Аппельбаум Ф.Р., Бюхнер Т., Бернетт А.К. и др. Диагностика и лечение острого миелоидного лейкоза у взрослых: рекомендации международной группы экспертов от имени European LeukemiaNet. Кровь. 2010; 115: 453–74.

    PubMed Google ученый

  • 11.

    Grunwald MR, Tseng LH, Lin MT, Pratz KW, Eshleman JR, Levis MJ, et al. Улучшенный анализ ПЦР с внутренней тандемной дупликацией FLT3 позволяет прогнозировать исход острого миелоидного лейкоза после аллогенной трансплантации. Пересадка костного мозга Biol. 2014; 20: 1989–95.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 12.

    Лин Т.Л., Уильямс Т., Хе Дж., Алджитави О.С., Гангули С., Абхьянкар С. и др. Нормы полного диагностического обследования пациентов с острым миелоидным лейкозом.Cancer Med. 2015; 4: 519–22.

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 13.

    Джордж Т.И., Творек Дж. А., Томас Н. Э., Фатери Л. А., Соуэрс Р. Дж., Наклех Р. Э. и др. Оценка тестирования образцов острого лейкоза: результат опроса Коллегии американских патологов. Arch Pathol Lab Med. 2017; 141: 1101–6.

    CAS PubMed Google ученый

  • 14.

    Grafone T, Palmisano M, Nicci C, Storti S.Обзор роли рецептора FLT3-тирозинкиназы при остром миелоидном лейкозе: биология и лечение. Oncol Rev.2012; 6: e8.

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 15.

    Kottaridis PD, Gale RE, Linch DC. Мутации Flt3 и лейкемия. Br J Haematol. 2003. 122: 523–38.

    CAS PubMed Google ученый

  • 16.

    Нагель Г., Вебер Д., Фромм Э., Эрхард С., Любберт М., Фидлер В. и др.Эпидемиологическая, генетическая и клиническая характеристика по возрасту впервые диагностированного острого миелоидного лейкоза на основе академического популяционного регистрационного исследования (AMLSG BiO). Ann Hematol. 2017; 96: 1993–2003.

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 17.

    Уитмен С.П., Арчер К.Дж., Фенг Л., Балдус С., Бекнелл Б., Карлсон Б.Д. и др. Отсутствие аллеля дикого типа предсказывает плохой прогноз у взрослых de novo острого миелоидного лейкоза с нормальной цитогенетикой и внутренней тандемной дупликацией FLT3: исследование рака и лейкемии группы B.Cancer Res. 2001; 61: 7233–9.

    CAS PubMed Google ученый

  • 18.

    Thiede C, Steudel C, Mohr B., Schaich M, Schakel U, Platzbecker U, et al. Анализ мутаций, активирующих FLT3, у 979 пациентов с острым миелогенным лейкозом: ассоциация с подтипами FAB и определение подгрупп с плохим прогнозом. Кровь. 2002; 99: 4326–35.

    CAS PubMed Google ученый

  • 19.

    Khaled S, Al Malki M, Marcucci G. Острый миелоидный лейкоз: биологические, прогностические и терапевтические идеи. Онкология (Уиллистон-Парк). 2016; 30: 318–29.

    PubMed Google ученый

  • 20.

    Kottaridis PD, Gale RE, Langabeer SE, Frew ME, Bowen DT, Linch DC. Исследования мутаций FLT3 в парных представлениях и образцах рецидивов у пациентов с острым миелоидным лейкозом: значение мутации FLT3 в лейкемогенезе, выявление минимального остаточного заболевания и возможная терапия ингибиторами FLT3.Кровь. 2002; 100: 2393–8.

    CAS PubMed Google ученый

  • 21.

    Shih LY, Huang CF, Wu JH, Lin TL, Dunn P, Wang PN и др. Внутренняя тандемная дупликация FLT3 при рецидиве острого миелоидного лейкоза: сравнительный анализ образцов костного мозга от 108 взрослых пациентов при диагностике и рецидиве. Кровь. 2002; 100: 2387–92.

    CAS PubMed Google ученый

  • 22.

    Кронке Дж., Буллингер Л., Телеану В., Чурц Ф., Гайдзик В.И., Кун М.В. и др. Клональная эволюция при рецидиве острого миелоидного лейкоза с мутацией NPM1. Кровь. 2013; 122: 100–8.

    PubMed Google ученый

  • 23.

    Метзелер К.Х., Герольд Т., Ротенберг-Терли М., Амлер С., Зауэрланд М.К., Горлих Д. и др. Спектр и прогностическая значимость мутаций гена-водителя при остром миелоидном лейкозе. Кровь. 2016; 128: 686–98.

    CAS PubMed Google ученый

  • 24.

    Папаэммануил Э., Герстунг М., Буллингер Л., Гайдзик В.И., Пашка П., Робертс Н.Д. и др. Геномная классификация и прогноз при остром миелоидном лейкозе. N Engl J Med. 2016; 374: 2209–21.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 25.

    Smith CC, Wang Q, Chin CS, Salerno S, Damon LE, Levis MJ, et al. Валидация мутаций ITD в FLT3 в качестве терапевтической мишени при остром миелоидном лейкозе человека. Природа. 2012; 485: 260–3.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 26.

    Cortes JE, Kantarjian HM, Kadia TM, Borthakur G, Konopleva M, Garcia-Manero G. et al. Креноланиба безилат, ингибитор pan-FLT3 типа I, для демонстрации клинической активности при множественном рецидиве FLT3-ITD и D835 AML. J Clin Oncol. 2016; 34: 7008

    Google ученый

  • 27.

    Cortes J, Perl AE, Döhner H, Kantarjian H, Martinelli G, Kovacsovics T, et al.Квизартиниб, ингибитор FLT3, в качестве монотерапии у пациентов с рецидивирующим или рефрактерным острым миелоидным лейкозом: открытое, многоцентровое, одноэтапное исследование фазы 2. Ланцет Онкол. 2018; 19: 889–903.

    CAS PubMed Google ученый

  • 28.

    Cortes JE, Tallman MS, Schiller GJ, Trone D, Gammon G, Goldberg SL, et al. Исследование фазы 2b двух схем дозирования монотерапии хизартинибом у пациентов с мутированным, рецидивирующим или рефрактерным ОМЛ FLT3 -ITD.Кровь. 2018; 132: 598–607.

  • 29.

    Perl AE, Altman JK, Cortes J, Smith C, Litzow M, Baer MR, et al. Селективное ингибирование FLT3 гильтеритинибом при рецидивирующем или рефрактерном остром миелоидном лейкозе: многоцентровое открытое исследование, проводимое впервые на людях, фаза 1-2. Ланцет Онкол. 2017; 18: 1061–75.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 30.

    Randhawa JK, Kantarjian HM, Borthakur G, Thompson PA, Konopleva M, Daver N, et al.Результаты исследования фазы II креноланиба у пациентов с рецидивирующим / рефрактерным острым миелоидным лейкозом (Pts) с активирующими мутациями FLT3. Кровь. 2014; 124: 389.

    Google ученый

  • 31.

    Stone RM, DeAngelo DJ, Klimek V, Galinsky I., Estey E, Nimer SD, et al. Пациенты с острым миелоидным лейкозом и активирующей мутацией в FLT3 реагируют на низкомолекулярный ингибитор тирозинкиназы FLT3, PKC412. Кровь. 2005; 105: 54–60.

    CAS PubMed Google ученый

  • 32.

    Бортакур Г., Кантарджиан Х., Раванди Ф., Чжан В., Коноплева М., Райт Дж. Дж. И др. Фаза I исследования сорафениба у пациентов с рефрактерными или рецидивирующими острыми лейкозами. Haematologica. 2011; 96: 62–8.

    CAS PubMed Google ученый

  • 33.

    Stone RM, Fischer T., Paquette R, Schiller G, Schiffer CA, Ehninger G, et al. Исследование фазы IB ингибитора киназы FLT3 мидостаурина в сочетании с химиотерапией у молодых недавно диагностированных взрослых пациентов с острым миелоидным лейкозом.Лейкемия. 2012; 26: 2061–8.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 34.

    Ravandi F, Arana YiC, Cortes JE, Levis M, Faderl S, Garcia-Manero G, et al. Заключительный отчет фазы II исследования сорафениба, цитарабина и идарубицина для начальной терапии у более молодых пациентов с острым миелоидным лейкозом. Лейкемия. 2014; 28: 1543–5.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 35.

    Кийой Х., Наое Т., Накано Й., Йокота С., Минами С., Мияваки С. и др. Прогностическое значение мутаций генов FLT3 и N-RAS при остром миелоидном лейкозе. Кровь. 1999; 93: 3074–80.

    CAS PubMed Google ученый

  • 36.

    Kottaridis PD, Gale RE, Frew ME, Harrison G, Langabeer SE, Belton AA, et al. Наличие внутренней тандемной дупликации FLT3 у пациентов с острым миелоидным лейкозом (AML) добавляет важную прогностическую информацию в группу цитогенетического риска и ответ на первый цикл химиотерапии: анализ 854 пациентов из исследований AML 10 и 12 Совета медицинских исследований Соединенного Королевства .Кровь. 2001; 98: 1752–9.

    CAS PubMed Google ученый

  • 37.

    Port M, Bottcher M, Thol F, Ganser A, Schlenk R, Wasem J, et al. Прогностическое значение внутренней тандемной дупликации FLT3, мутаций нуклеофозмина 1 и CEBPA для пациентов с острым миелоидным лейкозом с нормальным кариотипом и моложе 60 лет: систематический обзор и метаанализ. Ann Hematol. 2014; 93: 1279–86.

    CAS PubMed Google ученый

  • 38.

    Bacher U, Haferlach C, Kern W, Haferlach T, Schnittger S. Прогностическая значимость мутаций FLT3-TKD при ОМЛ: комбинация имеет значение - анализ 3082 пациентов. Кровь. 2008; 111: 2527–37.

    CAS PubMed Google ученый

  • 39.

    Шленк Р.Ф., Кайзер С., Буллингер Л., Коббе Г., Каспер Дж., Рингхоффер М. и др. Дифференциальное влияние аллельного отношения и сайта инсерции в FLT3-ITD-положительном AML по отношению к аллогенной трансплантации.Кровь. 2014; 124: 3441–9.

    CAS PubMed Google ученый

  • 40.

    Linch DC, Hills RK, Burnett AK, Khwaja A, Gale RE. Влияние уровня мутантного аллеля FLT3 (ITD) на риск рецидива при остром миелоидном лейкозе промежуточного риска. Кровь. 2014; 124: 273–6.

    CAS PubMed Google ученый

  • 41.

    Stone RM, Mandrekar SJ, Sanford BL, Laumann K, Geyer S, Bloomfield CD, et al.Мидостаурин плюс химиотерапия острого миелоидного лейкоза с мутацией FLT3. N Engl J Med. 2017; 377: 454–64.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 42.

    Стируолт Д.Л., Копецки К.Дж., Мешинчи С., Энгель Дж.Х., Погосова-Агаджанян Е.Л., Линсли Дж. И др. Размер внутренней тандемной дупликации FLT3 имеет прогностическое значение у пациентов с острым миелоидным лейкозом. Кровь. 2006; 107: 3724–6.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 43.

    Kayser S, Schlenk RF, Londono MC, Breitenbuecher F, Wittke K, Du J, et al. Вставка внутренней тандемной дупликации FLT3 в домен тирозинкиназы-1 связана с устойчивостью к химиотерапии и плохим исходом. Кровь. 2009; 114: 2386–92.

    CAS PubMed Google ученый

  • 44.

    Лю С.Б., Донг Х.Дж., Бао ХБ, Цю КК, Ли ХЗ, Шэнь Х.Дж. и др. Влияние длины FLT3-ITD на прогноз острого миелоидного лейкоза. Haematologica.2019; 104: e9 – e12.

    PubMed Google ученый

  • 45.

    Cloos J, Goemans BF, Hess CJ, van Oostveen JW, Waisfisz Q, Corthals S, et al. Стабильность и прогностическое влияние мутаций FLT3 в парных исходных и рецидивирующих образцах ОМЛ. Лейкемия. 2006; 20: 1217–20.

    CAS PubMed Google ученый

  • 46.

    McCormick SR, McCormick MJ, Grutkoski PS, Ducker GS, Banerji N, Higgins RR, et al.Мутации FLT3 при диагностике и рецидиве острого миелоидного лейкоза: цитогенетические и патологические корреляции, включая морфологию чашеобразного взрыва. Arch Pathol Lab Med. 2010; 134: 1143–51.

    PubMed Google ученый

  • 47.

    Нажа А., Кортес Дж., Фадерл С., Пирс С., Дэвер Н., Кадиа Т. и др. Активация внутренних тандемных дупликационных мутаций fms-подобной тирозинкиназы-3 (FLT3-ITD) при полном ответе и рецидиве у пациентов с острым миелоидным лейкозом.Haematologica. 2012; 97: 1242–5.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 48.

    Pratz KW, Sato T, Murphy KM, Stine A, Rajkhowa T., Levis M. Аллельная нагрузка мутантного FLT3 и клинический статус являются прогностическими факторами ответа на ингибиторы FLT3 при AML. Кровь. 2010; 115: 1425–32.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 49.

    Уоррен М., Лутра Р., Инь С.К., Раванди Ф., Кортес Дж. Э., Кантарджиан Х. М. и др.Клинические последствия изменения статуса мутации FLT3 у пациентов с острым миелолейкозом. Мод Pathol. 2012; 25: 1405–12.

    CAS PubMed Google ученый

  • 50.

    Wattad M, Weber D, Döhner K, Krauter J, Gaidzik VI, Paschka P, et al. Влияние схем спасения на ответ и общую выживаемость при остром миелоидном лейкозе с отказом индукции. Лейкемия. 2017; 31: 1306–13.

    CAS PubMed Google ученый

  • 51.

    Schlenk RF, Frech P, Weber D, Brossart P, Horst HA, Kraemer D, et al. Влияние характеристик до лечения и стратегии спасения на исходы у пациентов с рецидивом острого миелоидного лейкоза. Лейкемия. 2017; 31: 1217–20.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 52.

    Оран Б., Кортес Дж., Бейтинджане А., Чен Х.С., де Лима М., Патель К. и др. Аллогенная трансплантация в первой ремиссии улучшает исходы независимо от соотношения аллелей FLT3-ITD при FLT3-ITD-положительном остром миелогенном лейкозе.Пересадка костного мозга Biol. 2016; 22: 1218–26.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 53.

    Ho AD, Schetelig J, Bochtler T., Schaich M, Schafer-Eckart K, Hanel M, et al. Трансплантация аллогенных стволовых клеток улучшает выживаемость пациентов с острым миелоидным лейкозом, характеризующимся высоким аллельным соотношением мутантного FLT3-ITD. Пересадка костного мозга Biol. 2016; 22: 462–9.

    CAS PubMed Google ученый

  • 54.

    Гайдзик В.И., Телеану В., Папаэммануил Э., Вебер Д., Пашка П., Хан Дж. И др. Мутации RUNX1 при остром миелоидном лейкозе связаны с различными клинико-патологическими и генетическими особенностями. Лейкемия. 2016; 30: 2160–8.

    CAS PubMed Google ученый

  • 55.

    Бадар Т., Кантарджиан Х.М., Ногерас-Гонсалес Г.М., Бортакур Дж., Гарсия Манеро Г., Андрефф М. и др. Улучшение клинических исходов у пациентов с острым миелоидным лейкозом с мутацией FLT3 ITD за последние полтора десятилетия.Am J Hematol. 2015; 90: 1065–70.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 56.

    Зарринкар П.П., Гунавардане Р.Н., Крамер М.Д., Гарднер М.Ф., Бригам Д., Белли Б. и др. AC220 является уникальным мощным и селективным ингибитором FLT3 для лечения острого миелоидного лейкоза (AML). Кровь. 2009; 114: 2984–92.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 57.

    Hills RK, Gammon G, Trone D, Burnett AK. Квизартиниб значительно улучшает общую выживаемость у FLT3-ITD-положительных пациентов с ОМЛ, у которых возник рецидив после трансплантации стволовых клеток или после неудачной химиотерапии спасения: сравнение с исторической базой данных ОМЛ (данные UK NCRI). Кровь. 2015; 126: 2557.

    Google ученый

  • 58.

    Wander SA, Levis MJ, Fathi AT. Возрастающая роль ингибиторов FLT3 при остром миелоидном лейкозе: хизартиниб и другие.Ther Adv Hematol. 2014; 5: 65–77.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 59.

    Smith BD, Levis M, Beran M, Giles F, Kantarjian H, Berg K, et al. Одноместный агент CEP-701, новый ингибитор FLT3, проявляет биологическую и клиническую активность у пациентов с рецидивирующим или рефрактерным острым миелоидным лейкозом. Кровь. 2004. 103: 3669–76.

    CAS PubMed Google ученый

  • 60.

    Pratz KW, Cortes J, Roboz GJ, Rao N, Arowojolu O, Stine A, et al. Фармакодинамическое исследование ингибитора FLT3 KW-2449 дает представление об основе клинического ответа. Кровь. 2009. 113: 3938–46.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 61.

    Фидлер В., Кайзер С., Кебенко М., Яннинг М., Краутер Дж., Шиттенхельм М. и др. Исследование фазы I / II сунитиниба и интенсивной химиотерапии у пациентов старше 60 лет с острым миелоидным лейкозом и активирующими мутациями FLT3.Br J Haematol. 2015; 169: 694–700.

    CAS PubMed Google ученый

  • 62.

    Rollig C, Serve H, Huttmann A, Noppeney R, Muller-Tidow C, Krug U, et al. Добавление сорафениба по сравнению с плацебо к стандартной терапии у пациентов в возрасте 60 лет и младше с впервые диагностированным острым миелоидным лейкозом (SORAML): многоцентровое рандомизированное контролируемое исследование фазы 2. Ланцет Онкол. 2015; 16: 1691–9.

    PubMed Google ученый

  • 63.

    Левис М., Раванди Ф., Ван Э.С., Баер М.Р., Перл А, Кутре С. и др. Результаты рандомизированного исследования спасительной химиотерапии с последующим лечением лестуртинибом у пациентов с мутантным ОМЛ FLT3 при первом рецидиве. Кровь. 2011; 117: 3294–301.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 64.

    Knapper S, Russell N, Gilkes A, Hills RK, Gale RE, Cavenagh JD, et al. Рандомизированная оценка добавления ингибитора киназы лестуртиниба к химиотерапии первой линии при ОМЛ с мутацией FLT3.Кровь. 2017; 129: 1143–54.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 65.

    Fiedler W., Serve H, Döhner H, Schwittay M, Ottmann OG, O’Farrell AM, et al. Исследование фазы 1 SU11248 для лечения пациентов с рефрактерным или резистентным острым миелоидным лейкозом (AML) или пациентов, не поддающихся традиционной терапии этого заболевания. Кровь. 2005; 105: 986–93.

    CAS PubMed Google ученый

  • 66.

    Serve H, Krug U, Wagner R, Sauerland MC, Heinecke A, Brunnberg U, et al. Сорафениб в сочетании с интенсивной химиотерапией у пожилых пациентов с острым миелоидным лейкозом: результаты рандомизированного плацебо-контролируемого исследования. J Clin Oncol. 2013; 31: 3110–8.

    CAS PubMed Google ученый

  • 67.

    Ravandi F, Alattar ML, Grunwald MR, Rudek MA, Rajkhowa T, Richie MA, et al. Фаза 2 исследования комбинации азацитидин плюс сорафениб у пациентов с острым миелоидным лейкозом и внутренней тандемной дупликационной мутацией FLT-3.Кровь. 2013; 121: 4655–62.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 68.

    Чен Й.Б., Ли С., Лейн А.А., Коннолли С., Дель Рио С., Валлес Б. и др. Испытание фазы I поддерживающего сорафениба после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток для внутренней тандемной дупликации fms-подобной тирозинкиназы 3 при остром миелоидном лейкозе. Пересадка костного мозга Biol. 2014; 20: 2042–8.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 69.

    Фишер Т., Стоун Р.М., Деанджело Д.Д., Галински И., Эстей Э, Ланза С. и др. Испытание фазы IIB перорального мидостаурина (PKC412), FMS-подобного рецептора тирозинкиназы 3 (FLT3) и многоцелевого ингибитора киназы у пациентов с острым миелоидным лейкозом и миелодиспластическим синдромом высокого риска с FLT3 дикого типа или с мутированным FLT3. J Clin Oncol. 2010. 28: 4339–45.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 70.

    Stone RM, Mandrekar SJ, Sanford BL, Laumann K, Geyer SM, Bloomfield CD, et al.Добавление мидостаурина к стандартной химиотерапии снижает кумулятивную частоту рецидивов (CIR) в международном проспективном рандомизированном плацебо-контролируемом двойном слепом исследовании (CALGB 10603 / RATIFY [Alliance]) у пациентов с впервые диагностированным острым миелоидным лейкозом (AML) с FLT3. мутации. Кровь. 2017; 130: 2580.

    Google ученый

  • 71.

    Rydapt PI. 2018. https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2017/207997s000lbl.pdf; По состоянию на 2018 г.

  • 72.

    Novartis Pharmaceuticals Corporation. Novartis получает одобрение FDA на применение Rydapt® при недавно диагностированном остром миелоидном лейкозе (AML) с мутацией FLT3 и трех типах системного мастоцитоза (SM). 2018. https://www.novartis.com/news/media-releases/novartis-receives-fda-approval-rydaptr-newly-diagnposed-flt3-mutated-acute. По состоянию на 2018 г.

  • 73.

    Rydapt SMC. 2017. http://www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/EPAR_-_Product_Information/human/004095/WC500237581.pdf. По состоянию на 2018 г.

  • 74.

    Rydapt SMC. 2018. https://www.ema.europa.eu/documents/product-information/rydapt-epar-product-information_en.pdf; По состоянию на 2018 г.

  • 75.

    Дёнер К., Тиде С., Ларсон Р.А., Прайор Т.В., Маркучи Дж., Джонс Д. и др. Прогностическое влияние генотипов NPM1 / FLT3-ITD от рандомизированных пациентов с острым миелоидным лейкозом (ОМЛ), получавших лечение в рамках международного исследования RATIFY. Кровь. 2017; 130: 467.

    Google ученый

  • 76.

    Schlenk R, Döhner K, Salih H, Kündgen A, Fiedler W., Salwender H, et al. Мидостаурин в сочетании с интенсивной индукцией и в качестве поддерживающей терапии с одним агентом после консолидационной терапии с трансплантацией аллогенных гемопоэтических стволовых клеток или цитарабином в высоких дозах (NCT01477606). Кровь. 2015; 126: 322.

    Google ученый

  • 77.

    Schlenk RF, Fiedler W., Salih HR, Wulf G, Thol F, Kündgen A, et al. Влияние возраста и дозы мидостаурина на ответ и исход при остром миелоидном лейкозе с FLT3-ITD: промежуточные анализы исследования AMLSG 16-10.Кровь. 2016; 128: 449.

    Google ученый

  • 78.

    Ларсон Р.А., Мандрекар С.Дж., Сэнфорд Б.Л., Лауманн К., Гейер С.М., Блумфилд С.Д. и др. Анализ поддерживающей терапии и исходов пост-мидостаурина в международном проспективном рандомизированном плацебо-контролируемом двойном слепом исследовании (CALGB 10603 / RATIFY [Alliance]) для пациентов с впервые диагностированным острым миелоидным лейкозом (AML) с мутациями FLT3 . Кровь. 2017; 130: 145.

    Google ученый

  • 79.

    Национальных институтов здоровья. ClinicalTrials.gov. https://clinicaltrials.gov/. Доступ 2018.

  • 80.

    Maziarz RT, Patnaik MM, Scott BL, Mohan SR, Deol A, Rowley SD, et al. RADIUS: фаза 2, рандомизированное исследование стандартного лечения (SOC) с мидостаурином или без него для предотвращения рецидива после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (alloHSCT) у пациентов (pts) с FLT3 -Itd-мутировавшим острым миелоидным лейкозом (AML) . Кровь. 2016; 128: 2248.

    Google ученый

  • 81.

    Дэвер Н., Кортес Дж., Раванди Ф., Патель К.П., Бургер Дж. А., Коноплева М. и др. Вторичные мутации как медиаторы устойчивости к таргетной терапии при лейкозах. Кровь. 2015; 125: 3236–45.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 82.

    Chao Q, Sprankle KG, Grotzfeld RM, Lai AG, Carter TA, Velasco AM, et al. Идентификация N- (5-трет-бутил-изоксазол-3-ил) -N '- {4- [7- (2-морфолин-4-илэтокси) имидазо [2,1-b] [1, 3 ] бензотиазол-2-ил] фенил} дигидрохлорид мочевины (AC220), уникальный мощный, селективный и эффективный ингибитор FMS-подобной тирозинкиназы-3 (FLT3).J Med Chem. 2009. 52: 7808–16.

    CAS PubMed Google ученый

  • 83.

    Gunawardane RN, Nepomuceno RR, Rooks AM, Hunt JP, Ricono JM, Belli B, et al. Кратковременное воздействие хизартиниба опосредует стойкое ингибирование передачи сигналов FLT3, в то же время специфически индуцируя апоптоз в лейкозных клетках, активированных FLT3. Mol Cancer Ther. 2013; 12: 438–47.

    CAS PubMed Google ученый

  • 84.

    Альтман Дж. К., Форан Дж. М., Пратц К. В., Трон Д., Кортес Дж. Э., Таллман М. С.. Фаза 1 исследования хизартиниба в сочетании с индукционной и консолидационной химиотерапией у пациентов с впервые диагностированным острым миелоидным лейкозом. Am J Hematol. 2018; 93: 213–21.

    CAS PubMed Google ученый

  • 85.

    Боуэн Д., Рассел Н., Кнаппер С., Миллиган Д., Хантер А. Э., Хваджа А. и др. AC220 (хизартиниб) можно безопасно комбинировать с традиционной химиотерапией у пожилых пациентов с впервые диагностированным острым миелоидным лейкозом: опыт пилотного исследования AML18.Кровь. 2013; 122: 622.

    Google ученый

  • 86.

    Swaminathan M, Kantarjian HM, Daver N, Borthakur G, Ohanian M, Kadia T., et al. Комбинация хизартиниба с азацитидином или цитарабином в низких дозах очень активна у пациентов (пациентов) с миелоидными лейкозами с мутацией FLT3-ITD: промежуточный отчет исследования фазы I / II. Кровь. 2017; 130: 723.

    Google ученый

  • 87.

    Sandmaier BM, Khaled S, Oran B, Gammon G, Trone D, Frankfurt O.Результаты исследования фазы 1 хизартиниба в качестве поддерживающей терапии у пациентов с острым миелоидным лейкозом в стадии ремиссии после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток. Am J Hematol. 2018; 93: 222–31.

    CAS PubMed Google ученый

  • 88.

    Шах Н.П., Талпаз М., Дейнингер М.В., Мауро М.Дж., Флинн И.В., Биксби Д. и др. Понатиниб у пациентов с рефрактерным острым миелоидным лейкозом: результаты исследования фазы 1. Br J Haematol.2013; 162: 548–52.

    CAS PubMed Google ученый

  • 89.

    Дэвер Н., Поллиа Д.А., Рицциери Д.А., Палмер Дж., Рампал Р.К., Диннер С. и др. Исследование фазы I FLX925, двойного ингибитора FLT3 и CDK4 / 6 у пациентов с рецидивирующим или рефрактерным острым миелоидным лейкозом (AML). Кровь. 2017; 130: 1343.

    Google ученый

  • 90.

    Сато Т., Ян Х, Кнаппер С., Уайт П., Смит Б.Д., Галкин С. и др.Лиганд FLT3 снижает эффективность ингибиторов FLT3 in vitro и in vivo. Кровь. 2011; 117: 3286–93.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 91.

    Yang X, Sexauer A, Levis M. Опосредованная стромой костного мозга устойчивость к ингибиторам FLT3 в FLT3-ITD AML опосредуется постоянной активацией внеклеточной регулируемой киназы. Br J Haematol. 2014; 164: 61–72.

    CAS PubMed Google ученый

  • 92.

    Пилото О., Райт М., Браун П., Ким К.Т., Левис М., Смолл Д. Длительное воздействие ингибиторов FLT3 приводит к устойчивости через активацию параллельных сигнальных путей. Кровь. 2007; 109: 1643–52.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 93.

    Traer E, Martinez J, Javidi-Sharifi N, Agarwal A, Dunlap J, English I, et al. FGF2 из микросреды костного мозга способствует устойчивости к ингибиторам FLT3 при остром миелоидном лейкозе.Cancer Res. 2016; 76: 6471–82.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 94.

    Dutreix C, Munarini F, Lorenzo S, Roesel J, Wang Y. Исследование опосредованных CYP3A4 межлекарственных взаимодействий с мидостаурином у здоровых добровольцев. Cancer Chemother Pharmacol. 2013; 72: 1223–34.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 95.

    Чанг Й., Эрнандес Д., Гиаур Дж., Левис М.Дж., Джонс Р.Дж.Строма костного мозга защищает от острого миелоидного лейкоза (AML) FLT3 посредством лекарственного метаболизма ингибиторов тирозинкиназы (TKI) FLT3, опосредованного CYP3A4. Кровь. 2017; 130: 2519.

    Google ученый

  • 96.

    Heidel F, Solem FK, Breitenbuecher F, Lipka DB, Kasper S, Thiede MH, et al. Клиническая резистентность к ингибитору киназ PKC412 при остром миелоидном лейкозе за счет мутации Asn-676 в тирозинкиназном домене FLT3. Кровь. 2006; 107: 293–300.

    CAS PubMed Google ученый

  • 97.

    von Bubnoff N, Engh RA, Aberg E, Sanger J, Peschel C., Duyster J. FMS-подобные тирозинкиназы 3-внутренняя тандемная дупликация ингибиторов тирозинкиназы демонстрируют неперекрывающийся профиль мутаций устойчивости in vitro. Cancer Res. 2009; 69: 3032–41.

    Google ученый

  • 98.

    Patnaik MM. Важность мутационного анализа FLT3 при остром миелоидном лейкозе.Лимфома лейка. 2018; 59: 2273–86.

    Google ученый

  • 99.

    Kampa-Schittenhelm KM, Heinrich MC, Akmut F, Döhner H, Döhner K, Schittenhelm MM. Хизартиниб (AC220) представляет собой мощный ингибитор тирозинкиназы класса III второго поколения, который демонстрирует отчетливый профиль ингибирования в отношении мутантных изоформ- FLT3, -PDGFRA и -KIT . Молочный рак. 2013; 12:19.

    Google ученый

  • 100.

    Ли Л. Я., Эрнандес Д., Раджкова Т., Смит С. К., Раман Дж. Р., Нгуен Б. и др. Доклинические исследования гильтеритиниба, ингибитора FLT3 нового поколения. Кровь. 2017; 129: 257–60.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • (PDF) Экспериментальное и теоретическое исследование высокочастотной плазмы на низких и высоких частотах

    > TPS1035 <

    1

    Аннотация - Емкостно-связанная высокочастотная плазма при давлении аргона

    , равном 100 мТорр, 13.Частота 56 и 81 МГц и высокие удельные входные мощности

    были исследованы как экспериментально

    , так и теоретически. Различные численные модели

    были разработаны и использованы для моделирования. Было показано, что основной источник ионизации

    в низкочастотном (НЧ) разряде при всех исследованных мощностях

    обусловлен вторичными электронами, эмитируемыми с электрода

    при ионном ударе. Высокочастотный (ВЧ) разряд при тех же

    мощностях работает в α-режиме.Применимость жидкостных и кинетических моделей

    для моделирования НЧ и ВЧ разрядов изучается на базе наших экспериментальных данных

    .

    Ключевые слова: емкостная связанная радиочастотная плазма, высокая

    удельная мощность, низкочастотная (LF) и высокочастотная (HF) плазма,

    Моделирование частиц в ячейках (PIC)

    I. ВВЕДЕНИЕ

    Последнее время были разработаны как жидкостные [1], так и PIC [2-4] модели двойных разрядов

    частот (DF).Важно отметить, что плазменная обработка в реакторах DF

    осуществляется при удельной входной мощности более P> 0,5

    Вт / см

    2

    . При этих режимах мощности необходимо исследовать влияние вторичной эмиссии

    электронов (γ-электронов) и нагрева газа на самоорганизацию разряда

    . Для этого необходимо комплексное экспериментальное и теоретическое исследование одиночного разряда

    частоты

    при большой мощности.

    В [3-4] было проведено моделирование как одинарных (SF), так и сдвоенных частотных разрядов

    . К сожалению, отсутствие сравнения результатов моделирования

    с экспериментальными данными

    не позволяет детально изучить структуру разряда при высокой удельной мощности

    .

    Одночастотные и двухчастотные разряды

    были исследованы экспериментально и теоретически в широком диапазоне удельных входных мощностей

    .Обширный объем информации, полученной

    из измерений зондовой и эмиссионной спектроскопии, не входит в область рассмотрения данной статьи и будет описан

    в

    Рукопись получена 3 августа 2005 г. Работа поддержана

    Samsung-MSU Договор, РФФИ-05-02-17649 и РФФИ-

    Технологическая программа 02.445.11.7201.

    Т.В. Рахимова, О.В. Брагинский, В.В. Иванов, А.С. Ковалев, Д.В. Лопаев,

    Yu.А.Манкелевич, О.В.Прошина, А.Н.Васильева находятся в Институте ядерной физики им. Скобельцына

    , МГУ им. М.В. Ломоносова, Россия, 119992, Москва, Воробьевы горы,

    (Телефон: + 7-495-9394957, E-mail:

    [email protected]

    )

    TKKim и JTKong работают в CAE, Центр исследований и разработок полупроводников,

    Samsung Electronics, Республика Корея, электронная почта:

    [email protected]

    подробно в будущих публикациях.В данной статье акцент делается на

    особенностях разрядов на низких (НЧ) и высоких (ВЧ) частотах

    для высоких удельных энергозатрат.

    Одной из важных проблем при изучении таких разрядов

    является возможность использования более простой и быстрой модели

    для сокращения огромного времени вычислений. Даже для быстрых PIC MC моделей реактора

    требуется огромное время вычислений в сложных многокомпонентных газовых смесях.Следует отметить

    , что использование аналитических или полуаналитических подходов

    кажется очень привлекательным, но решает дополнительные проблемы

    : разделение электронов на разные группы («быстрые»,

    «средние», «медленные» ), задавая потоки заряда на границах

    оболочек электродов и т. д. Это делает такие подходы

    более методичными, чем практичными, и позволяет качественно исследовать проблемы

    .

    Таким образом, цель данной статьи - изучить возможность использования модификаций

    моделей жидкости и сравнить результаты расчетов

    с расчетами модели PIC MC и экспериментальными результатами

    , а также выявить неадекватные особенности таких быстрых моделей.

    модели в моделировании высокочастотных разрядов.Для упрощения моделирования разряда RF

    эксперименты проводились в специально сконструированном симметричном реакторе

    .

    Были разработаны и использованы следующие одномерные модели:

    1. Гибридная модель PIC MC (PIC MC для движения электронов, жидкость

    для концентраций ионов с уравнением передачи импульса для потоков ионов

    ).

    2. Модель жидкости для электронов и ионов.

    Все результаты в этой статье представлены для аргона с давлением 100

    мТорр.Низкая частота составляет 13,56, а высокая частота -

    81 МГц.

    II. E

    XPЕРИМЕНТАЛЬНАЯ УСТАНОВКА.

    Принципиальная схема разрядной камеры показана на

    Рис. 1. Внутренний диаметр кварцевой разрядной трубки

    100 мм. Расстояние между двумя электродами составляет 24 мм и

    диаметр электродов составляет 80 мм. Верхний электрод

    может иметь водяное охлаждение. Впуск газа установлен в верхнем электроде, а выхлоп

    выводился через нижний электрод.Нижний электрод

    был заземлен, и мощность ВЧ от одного генератора

    (одночастотный, SF) или двух (двухчастотный, DF)

    генераторов передавалась на верхний электрод. В плазме DF

    Экспериментальное и теоретическое исследование плазмы RF

    на низкой и высокой частоте.

    Т.В. Рахимова, О.В. Брагинский, В. Иванов, Т. Ким, J.T. Конг, А. Ковалев, Д. Лопаев,

    Ю.А. Манкелевич, О.В. Прошина, А.Н. Васильева.

    Арт.81 ТК РФ. Расторжение трудового договора по инициативе работодателя

    Законодательством предусмотрены основания для расторжения трудового договора работодателем. Они установлены арт. 81 ТК РФ. Рассмотрим норму подробнее.

    Основания

    Увольнение по ст. 81 ТК РФ допускается:

    1. Ликвидация предприятия или прекращение деятельности индивидуального предпринимателя.
    2. Сокращение штата / количества сотрудников ИП, организации.
    3. Несоответствие гражданина выполняемой работе или занимаемой должности в связи с недостаточной квалификацией, подтвержденное в результате аттестации.
    4. Изменение формы собственности на имущество предприятия. Это основание относится к гл. бухгалтер, менеджер и его заместители.
    5. Неоднократное неисполнение работником служебных обязанностей без уважительных причин при наличии дисциплинарных взысканий.
    6. Единственное грубое нарушение, совершенное работником.
    7. Совершение виновных действий сотрудником, осуществляющим прямое обслуживание денежных средств или товарных ценностей.Расторжение договора в этом случае осуществляется при наличии оснований для утраты доверия к работнику со стороны работодателя.
    8. Непринятие сотрудником мер по разрешению или предотвращению конфликта интересов, стороной которого он является, непредставление или предоставление неполной информации о доходах / расходах, имущественных обязательствах, имуществе, принадлежащем ему и его несовершеннолетним детям и супруг (а), а также наличие / открытие вкладов / счетов, денежных средств и ценностей в иностранных банковских структурах, расположенных за границей, владение / использование финансовых инструментов иностранного происхождения сотрудником, его родственниками в случаях, установленных НК, регулирующими ктами правительства и президент.Это основание применяется, если указанные действия являются причиной потери доверия к работнику со стороны руководителя предприятия.
    9. Обязательство перед сотрудниками, выполняющими образовательные функции, акт аморального характера, несовместимый с продолжением работы.
    10. Принятие необоснованного решения директором фирмы (подразделения), его заместителем, гл. бухгалтером, если это вызвало нарушение безопасности материальных ценностей, их незаконное использование или нанесло другой ущерб организации.
    11. Единственное грубое нарушение директором предприятия (представительства / филиала) или его заместителем обязанностей.
    12. Представление работником работника поддельных документов при приеме на работу и заключении договора.
    13. Иные случаи, предусмотренные соглашением с руководителем организации, коллегиальным органом исполнительной власти, федеральным законодательством и иными нормативными актами.

    Грубые нарушения работника

    Они определены п. 6 ст.81 ТК РФ. К грубым нарушениям должностных обязанностей работника относятся:

    1. Прогулы. Под ним понимается отсутствие субъекта на рабочем месте в течение дня / смены или в течение четырех часов подряд, независимо от их продолжительности, без уважительных причин.
    2. Внешний вид работника в нетрезвом состоянии. Он может быть не только алкогольным, но и ядовитым и наркотическим. В этом случае появление в таком состоянии не только непосредственно на рабочем месте, но и на территории предприятия или объекта, где гражданин должен выполнять свои обязанности от имени работодателя, будет считаться нарушением.
    3. Раскрытие конфиденциальной информации охраняется законом. Это включает, в частности, государственную, служебную, коммерческую и иную тайну, а также информацию, касающуюся личности других сотрудников.
    4. Совершение хищения (в том числе мелкого), хищения, умышленного повреждения или уничтожения имущества по месту выполнения производственных функций, установленных вступившим в силу судебным решением, актом должностного лица / органа, уполномоченного рассматривать дела об административных правонарушениях .
    5. Несоблюдение работником требований РТ, установленных комиссией или должностным лицом, если оно повлекло тяжкие последствия или угрозу их наступления.

    Примечания

    Расторжение договора при ликвидации и уменьшение по ч. 1 ст. 81 ТК РФ допускается при отсутствии возможности перевода работника на другую работу, доступную работодателю, с письменного согласия работника. Это может быть вакантная должность, соответствующая квалификационной, подчиненной или нижеоплачиваемой должности.При этом следует учитывать состояние здоровья сотрудника. Арендатор, согласно ч. 2 ст. 81 ТК РФ, обязан предложить работнику все вакансии, соответствующие вышеуказанным требованиям, имеющиеся в данной сфере. Руководитель должен дополнительно предложить работу на другой территории, если это прямо прописано в договоре, коллективном договоре. При прекращении деятельности подразделения предприятия, расположенного в другом месте, договор прекращается в порядке, предусмотренном для ликвидации организации.

    Нюансы

    Расторжение договора по основаниям, установленным в пунктах 7 и 8 части 1 ст. 81 ТК РФ, когда из-за виновных действий руководство предприятия утратило доверие к работнику, допущен аморальный поступок вне работы или по месту ее совершения, но не связанный с исполнением обязанностей. не позднее 1 года со дня обнаружения нарушения. Запрещается расторгать договор во время отпуска или пребывания на больничном работнике.Исключение составляют случаи расторжения договора по основаниям, установленным п. 1 арт. 81 ТК РФ.

    Ликвидация компании или прекращение бизнеса

    Это основание для расторжения договора, предусмотренное п. 1 ст. 81 ТК РФ. В законодательстве отсутствует разъяснение понятия «ликвидация предприятия». Соответственно, при применении комментируемой нормы необходимо руководствоваться положениями Гражданского кодекса. Статья 61, в частности, определяет порядок ликвидации предприятия.Он предполагает прекращение деятельности фирмы без передачи обязанностей и прав в порядке правопреемства другим лицам. Исключения составляют случаи, определенные законом. Расторжение договоров с сотрудниками осуществляется на основании решения, принятого на собрании участников компании. Для немедленного увольнения важен факт ликвидации предприятия. В случае возникновения споров по восстановлению сотрудников на работе доказательство фактического прекращения существования организации несет ответчик.Что касается индивидуального предпринимателя, то соответствующее решение может принять он, суд (в связи с признанием его несостоятельности). Прекращение действия ИП также может быть вызвано отказом в продлении разрешения на осуществление определенных видов деятельности, истечением срока действия свидетельства о государственной регистрации.

    Сокращение

    Прекращение отношений с работниками по основаниям, установленным п. 81 ТК РФ, допускается при соблюдении определенных условий. В частности:

    1. Сокращение действительно осуществлено.Этот факт должен быть подтвержден заказом и новым расписанием. Последняя утверждается до начала соответствующих редукционных мероприятий.
    2. Сотрудник не имеет преимущественного права на пребывание в штате.
    3. Сотрудник предупрежден о предстоящем сокращении не менее чем на 2 месяца. Уведомление должно быть оформлено в письменной форме и предоставлено работнику для ознакомления под подписью.
    4. В рассмотрении вопроса об увольнении участвовал выборный состав первичного профсоюза.
    5. Нет возможности перевода сотрудника на другое место с его согласия.

    При расторжении договоров по основаниям, установленным п. 2 ст. 81 ТК РФ, при определении наличия преимущественного права работника оставить его на предприятии учитываются квалификация и показатели эффективности труда.

    Несоответствие сотрудников

    Арт. 81, стр. 3 ТК РФ определяет причину невозможности продолжения пребывания гражданина в государстве предприятия.Несоответствие сотрудника предполагает его недостаточную квалификацию, что подтверждается результатами аттестации. Оценка деловых качеств работника проводится совместно с анализом других свидетельств с участием представительного органа работников предприятия. Порядок проведения оценочной деятельности определяется федеральным законодательством, а также иными нормативными актами в сфере труда. Расторжение договора в соответствии с п. 3 ст.81 ТК РФ допускается при невозможности перевода работника на другую должность с его согласия.

    Смена собственника

    Расторжение договора по п. 4 ст. 81 ТК РФ допускается с определенной категорией работников. В их числе, в частности, руководитель предприятия, его заместители и Ч. бухгалтер. Остальные сотрудники не могут быть уволены из-за смены собственника. Следует учитывать один нюанс. Прекращение отношений по п.4 ст.81 ТК РФ допускается, если смена собственника произошла в отношении имущества всего предприятия в целом. С указанными выше должностными лицами нельзя расторгнуть договор, если подчиненность / подчиненность предприятия изменилась без выполнения основного условия.

    Множественное неисполнение обязанностей

    При множественных нарушениях дисциплины расторжение договора с работником допускается при наличии у него взыскания за ранее допущенные проступки.Для работника предусмотрены санкции за неисполнение обязанностей, установленных правилами графика или договора. В случае возникновения споров об увольнении за нарушения руководитель предприятия должен доказать, что правонарушение действительно было совершено и могло стать основанием для прекращения отношений. При этом работодатель обязан соблюдать сроки, указанные в ст. 193 ТК.

    Единичное нарушение

    П. 6 комментируемой нормы устанавливает случаи, когда работник может расторгнуть договор при однократном совершении грубого проступка.Список нарушений считается исчерпывающим. На некоторых предприятиях деятельность персонала связана с конфиденциальной информацией. Увольнение за разглашение допускается при определенных условиях. В частности, в договоре должна быть установлена ​​соответствующая обязанность, конкретная информация не разглашается, информация была доверена сотруднику в связи с исполнением им своих обязанностей.

    Заключение

    Увольнение сотрудников должно производиться исключительно по основаниям, установленным законодательством.В этом случае работодатель обязан соблюдать правила и сроки. В частности, руководитель предприятия должен письменно уведомить персонал о предстоящих событиях своей подписью, оформить приказ / приказ. Не менее важно соблюдение требований закона в отношении выплат сотрудникам, увольняющимся.

    p>

    границ | Перенос гена Forkhead-Box-P3 в обычных клетках CD4 + T человека для создания стабильных и эффективных регуляторных Т-клеток, подходящих для иммуномодулирующей терапии

    Введение

    Регуляторные Т-клетки (Treg) - это подмножество Т-лимфоцитов, предназначенное для модуляции иммунных ответов и поддержания иммунологической толерантности.Они контролируют аберрантные иммунные ответы на широкий спектр антигенов (Ag), включая собственные, пищевые Ag, аллергены и опухоли (1). Выявлено несколько подмножеств Treg. Среди них Tregs, экспрессирующие фактор транскрипции forkhead-box-P3 (FOXP3) (FOXP3 + -Tregs) (2, 3) и IL-10-зависимые T-регуляторные клетки типа 1 (4), являются лучшими. охарактеризован. Последнее будет предметом обзора Грегори и др. в данной теме исследования, тогда как первая часть и ее применение в клинической практике будут обсуждаться здесь.

    FOXP3 + -Tregs могут происходить либо в тимусе [Tregs, производные тимуса (tTregs)], либо дифференцироваться на периферии от наивных T-клеток (pTregs) (5, 6). Независимо от своего происхождения, оба подмножества характеризуются конститутивной экспрессией FOXP3, фактора транскрипции, критического для их функции, о чем свидетельствует разрушительный аутоиммунитет, возникающий в результате мутации FOXP3 (7, 8). Нарушение функции Treg является ключевым патогенетическим событием, приводящим к нарушению самотолерантности у пациентов с нарушением регуляции иммунитета, полиэндокринопатией, энтеропатией, X-сцепленным (IPEX) синдромом (9, 10).

    В настоящее время хорошо известно, что хотя экспрессия FOXP3 является незаменимой для развития tTregs в тимусе, в основном продиктованная эпигенетическим ремоделированием, происходящим независимо от FOXP3, ее экспрессия становится фундаментальной на более поздних стадиях для периферической функции и поддержания Tregs (11). В самом деле, высокая и стабильная экспрессия FOXP3 позволяет приобретать полную супрессивную функцию и стабильность линии Treg за счет управления экспрессией или репрессией множества генов, необходимых для супрессорной функции Treg (12-14).

    Помимо FOXP3, экспрессия нескольких молекул, включая высокий уровень CD25 (цепь IL2Rα) в отсутствие CD127 (цепь IL7Rα) (15), CTLA-4 (16), GITR (17), CD39 (18), галектин 10 (19), ассоциированный с латентностью пептид (20), Helios (21), Т-клеточный иммунный рецептор TIGIT (22) и преобладающие повторы гликопротеина-A (23) были связаны с человеческими FOXP3 + -Tregs, хотя ни одна из этих молекул не является исключительной для этого подмножества, но разделяется с активированными обычными Т-клетками.На сегодняшний день наиболее надежным признаком, однозначно идентифицирующим FOXP3 + -Tregs, является эпигенетическое ремоделирование определенных геномных регионов в локусе FOXP3 (CNS2-TSDR) (24) или в генах, связанных с Treg (11).

    FOXP3 + -Tregs модулируют клетки как врожденного, так и адаптивного иммунитета с помощью различных механизмов. Ингибирующая активность Treg в первую очередь зависит от контакта с клетками-мишенями, что позволяет модулировать стимулирующую способность антигенпрезентирующих клеток через CTLA-4 (25) или убивать эффекторные Т-клетки (Teff) через ось гранзим / перфорин ( 26, 27).Дополнительные механизмы подавления включают высвобождение ингибирующих цитокинов, например, IL-10 (28), TGF-β (29, 30) и IL-35, по крайней мере, в мышиных Treg (31), депривацию цитокинов (32) и образование иммуносупрессивных метаболитов, например внеклеточного аденозина (33) и внутриклеточного цАМФ (34). FOXP3 + -Tregs не являются однородной популяцией, а скорее состоят из гетерогенного пула, включающего специализированные подтипы (28, 35–39).

    Их огромный потенциал в качестве модуляторов иммунных ответов, полученный как на доклинических моделях, так и на клинических данных, убедил исследователей в том, что Treg можно использовать в качестве инструментов для контроля нежелательных иммунных ответов в контексте трансплантации или для лечения аутоиммунных / воспалительных заболеваний (40, 41) .Были предприняты большие усилия для разработки протоколов надлежащей производственной практики для выделения / расширения человеческих Tregs in vitro , позволяющих переводить основанную на Treg клеточную терапию в клиническую практику (42–45).

    В этом обзоре мы дадим обзор клинических испытаний, в которых использовались FOXP3 + -Tregs в качестве терапевтических средств для борьбы с болезнью трансплантат против хозяина (GvHD) в контексте трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (HSCT) и для модуляция аутоиммунных реакций и проблемы, выявленные в этих исследованиях.Мы обсудим инновационный терапевтический подход, основанный на адаптивном переносе сконструированных Treg-подобных клеток, который мы разрабатываем для лечения синдрома IPEX, применение которого потенциально может быть расширено для восстановления толерантности к аутоиммунным заболеваниям различного происхождения и при трансплантации.

    Клеточная терапия на основе Treg в клинических испытаниях

    Было проведено несколько клинических испытаний фазы I для оценки влияния клеточной терапии на основе Treg на GvHD после аллогенной HSCT, трансплантации органов у пациентов с диабетом 1 типа (T1D) и хроническими воспалительными заболеваниями.В целом результаты, полученные с различными подгруппами Treg, продемонстрировали благоприятные профили безопасности (46, 47).

    Регуляторные Т-клеточные клинические испытания ТГСК предшествовали другим показаниям, поскольку время начала РТПХ известно и может контролироваться, время, необходимое для профилактики, относительно короткое, первоначальная эффективность, вероятно, обеспечит пожизненную защиту и осложнения РТПХ. может быть смертельным.

    Несколько групп использовали поликлональные Treg-клетки CD4 + CD25 + , содержащие высокую долю FOXP3 + Т-клеток, либо свежевыделенных, либо размноженных ex vivo , с целью предотвращения РТПХ после аллогенной ТГСК для онкогематологических заболеваний. болезни.Результаты показали, что в целом процедура выполнима и безопасна (48–52). В одном испытании сообщалось о снижении частоты РТПХ II – IV степени по сравнению с исторической контрольной группой у пациентов, получавших Tregs из пуповинной крови, без увеличения инфекций (49). Данные были подтверждены в более недавнем исследовании той же группы, в котором клинический результат пациентов, получавших терапию клетками на основе Treg, сравнивался с таковыми у пациентов из контрольной группы, которые получали тот же режим кондиционирования и иммуносупрессивное лечение, но без Treg.Частота острой РТПХ II – IV степени через 100 дней составила 9 против 45% в контрольной группе, тогда как хроническая РТПХ через 1 год была равна 0 у пролеченных пациентов (52).

    В третьем испытании пациенты, которым вводили свежевыделенные периферические Treg, показали РТПХ низкой степени и отсутствие развития хронической РТПХ (50). Совсем недавно та же группа показала снижение частоты рецидивов у пациентов, получавших Treg (53).

    Эти первые обнадеживающие результаты стимулировали более широкое применение Treg в качестве терапии после трансплантации твердых органов.Несколько испытаний в настоящее время продолжаются, хотя окончательных результатов пока нет (47). Среди них, в исследовании The-ONE-Study (http://www.onestudy.org/), фазе I / II исследования повышения дозы, несколько подтипов Tregs, в том числе ex vivo расширенных FOXP3 + -Tregs, вводили пациентам, перенесшим трансплантацию почки, с целью избежать пожизненной иммуносупрессии за счет индукции активной толерантности (NCT02129881) (47, 54). Точно так же было начато исследование Treg-иммунотерапии в условиях трансплантации печени, ThRIL (NCT02166177), хотя данные о безопасности еще не доступны (44).

    FOXP3 + -Treg-терапия была безопасно протестирована также в контексте аутоиммунных заболеваний. В испытании, ограниченном несколькими пациентами, ex vivo увеличили CD4 + CD25 hi CD127 - Tregs вводили детям с недавно начавшимся СД1 (55), а совсем недавно - взрослым пациентам с СД1 впервые ( 43). В обоих случаях процедура оказалась безопасной, хотя опубликованные данные не позволяют делать выводы об эффективности. Важно отметить, что в последнем испытании была продемонстрирована безопасность передачи большого количества Treg (до 2.6 × 10 9 ячеек) (43).

    В целом имеющиеся данные подтверждают осуществимость и безопасность этого подхода. Эти результаты убедили исследователей проводить адаптивную терапию Treg-клетками, и в настоящее время прилагаются большие усилия для решения открытых проблем в этой области, таких как устойчивость и стабильность in vivo вводимого продукта и необходимость специфичности Ag для повышения эффективности.

    Синдром IPEX: модель болезни с дисфункцией Treg

    Иммунодисрегуляция, полиэндокринопатия, энтеропатия, Х-сцепленный синдром - прототип полиаутоиммунного заболевания, вызываемого мутациями в гене, кодирующем фактор транскрипции FOXP3 (8).У пациентов с ранним началом развивается полиорганный аутоиммунитет, который включает тяжелую энтеропатию, СД1 и экзему (9, 56). Помимо пациентов с тяжелым поражением, у многих субъектов проявляется более легкая форма заболевания, которая часто неправильно диагностируется или диагностируется позже из-за атипичного проявления (57). FOXP3 Мутации приводят к потере функциональных Treg, что считается основной причиной заболевания. FOXP3 -мутировавшие Tregs демонстрируют дефектную подавляющую функцию in vitro (58–60) и нестабильное поведение при воспалительных состояниях с преобразованием из регуляторного в эффекторный (т.е., продуцирующий ИЛ-17) фенотип (61). Также были описаны дефекты в периферических клетках, отличных от Treg, например, в обычных Т-клетках (58, 61–63) и В-клетках (64). Эти дополнительные дефекты, вероятно, являются косвенным следствием дисфункции Treg, а не прямым эффектом мутаций, что позволяет предположить, что методы лечения, направленные на улучшение / восстановление функционального компартмента Treg, должны быть полезными для пациентов с IPEX.

    В настоящее время лечение синдрома IPEX основано на поддерживающей терапии, иммуносупрессии и ТГСК.Аллогенная ТГСК доказала свою эффективность (9), но для пациентов, которые не проходят ТГСК, лечение ограничивается нутритивной поддержкой, заместительной терапией при недостаточности эндокринных органов и приемом нескольких иммуносупрессивных препаратов с неполным контролем аутоиммунитета и обременительными побочными эффектами у молодых пациентов. . Следовательно, терапия, направленная на восстановление функций Treg, представляет собой неудовлетворенную медицинскую потребность. Кроме того, экспериментальные данные на мышах с накипью, мышиной модели дефицита FOXP3, показывают, что адоптивный перенос Treg увеличивает продолжительность жизни (65).В том же направлении, опыт трансплантированных пациентов с частичным донорским химеризмом (66–68) и наличие полностью Treg-компартмента дикого типа у здоровых носителей мутации FOXP3 и (69) подтверждает идею о том, что нескольких функциональных Treg достаточно для контролировать прогрессирование болезни и вызывать ремиссию.

    Последние доказательства убедили нас в том, что восстановление функционального компартмента Treg у пациентов с IPEX является терапевтическим вариантом. Поэтому мы разработали подход к генетической модификации аутологичных Т-клеток для адоптивного переноса у этих пациентов.

    Создание Treg-подобных клеток с помощью лентивирус-опосредованного переноса гена FOXP3

    Генетическое перепрограммирование клеток млекопитающих для клинических целей недавно стало доступным вариантом после завершения клинических испытаний для лечения генетических заболеваний (70–73) и рака (74, 75) и их применения в одобренных на рынке методах лечения ( 76). Технология переноса генов применялась также в области клеточной терапии на основе Treg с целью создания большого количества функциональных Treg.Эктопическая сверхэкспрессия FOXP3 в обычных CD4 + Т-клетках от здоровых доноров (3, 77–79), эктопическая экспрессия Т-клеточных рецепторов (TCR) с известной специфичностью в поликлональных Treg (80–82) и использование химерного антигена. рецепторы (CAR) (83–86) - это подходы, испытанные до сих пор в доклинических условиях (Таблица 1). В то время как первый подход будет поддерживать Ag-специфичность исходной популяции, второй перенаправит специфичность Treg. В доклинических исследованиях экспрессия TCR, специфичных для опухолевых Ag / аллергенов, придает человеческим Treg способность подавлять Ag-специфические ответы (80, 81).Совсем недавно CAR, экспрессирующие Tregs, специфические для HLA-Ag, доказали свою эффективность в ингибировании ксеногенной GvHD и отторжения аллотрансплантата на доклинических моделях (84–86).

    Таблица 1 . In vitro поколение генно-инженерных регуляторных Т-клеток человека (Treg).

    С конечной целью контролировать разрушительный аутоиммунитет, возникающий в результате мутации FOXP3 при синдроме IPEX, мы предусмотрели возможность адоптивного переноса функциональных аутологичных Tregs, сгенерированных in vitro .С этой целью кодирующая последовательность FOXP3 человека была клонирована под контролем конститутивного промотора в конструкции двунаправленного лентивирусного вектора (LV) (88), позволяющей одновременно экспрессировать полноразмерный FOXP3 и маркер клеточной поверхности (ΔNGFR). для идентификации / отбора трансдуцированных Т-клеток (79) (LV-FOXP3) (рис. 1А). Трансдукция периферических Т-лимфоцитов CD4 + с помощью LV-FOXP3 и in vitro экспансия трансдуцированных клеток приводит к генерации гомогенного пула Т-клеток, конститутивно сверхэкспрессирующих FOXP3 (рис. 1В).Полученные CD4 FOXP3 Т-клетки ведут себя как функциональные и стабильные FOXP3 + -Treg-подобные клетки, с мощной подавляющей активностью in vitro , сниженной пролиферативной способностью и ограниченной продукцией цитокинов (79, 87). CD4 FOXP3 Т-клетки стабильно экспрессируют FOXP3 в стационарных и воспалительных условиях, особенно когда они генерируются из наивных Т-клеток, и поддерживают ингибирующие функции in vivo в модели ксеногенной РТПХ (87). Кроме того, мы продемонстрировали, что полностью функциональные Т-клетки CD4 FOXP3 могут быть получены из Т-клеток пациентов с IPEX (87), независимо от лежащей в основе мутации FOXP3 и коэкспрессии мутированного белка, тем самым демонстрируя осуществимость нашего подхода и открывая путь для разработки альтернативных методов лечения, основанных на адаптивном переносе аутологичных генетически модифицированных Treg-подобных клеток для контроля аутоиммунитета при синдроме IPEX.

    Рисунок 1 . (A) Схематическое изображение контрольных и экспрессирующих FOXP3 лентивирусных векторных конструкций. (B) Протокол для создания CD4 FOXP3 Treg-подобных клеток и контрольных трансдуцированных Т-клеток (CD4 NGFR ) из обычных CD4 + Т-клеток (либо наивных, либо общих CD4 + Т-клеток). MOI - множественность инфекции; FOXP3, вилка-коробка-P3; Treg, регуляторные Т-клетки.

    Тот факт, что Т-клетки CD4 FOXP3 можно получить из Т-клеток CD4 + , делает процесс производства простым и экономичным.CD4 FOXP3 Т-клетки не требуют экстенсивной экспансии in vitro с высокой концентрацией цитокинов. Текущий доклинический мелкомасштабный метод генерации Т-клеток CD4 FOXP3 приводит к 10-кратному увеличению в 3/4-недельной культуре. Это гарантирует возможность производства для инфузии пациентам, учитывая, что исходные обычные Т-клетки CD4 + могут быть доступны в большом количестве. Кроме того, клиническое использование платформ LV не является ограничением, поскольку доказано, что они безопасны для онкологических и педиатрических пациентов, получавших генную терапию HSC (72, 73, 89, 90).

    Хотя в принципе использование CAR-Treg или TCR-трансгенных Tregs позволило бы генерировать Ag-специфические Treg, подходящие для лечения аутоиммунных заболеваний, мишень Ag для аутоиммунного повреждения все еще неизвестна при многих заболеваниях. Тот факт, что CD4 FOXP3 происходят из поликлональных CD4 + Т-клеток, может представлять собой преимущество при таких заболеваниях. Действительно, CD4 + Т-клетки, полученные от пациента, страдающего аутоиммунитетом, скорее всего, будут включать патогенные Т-клетки с TCR, специфичными для целевых АГ.Следовательно, в контексте конкретного заболевания клетки CD4 FOXP3 могут найти более широкое и более эффективное применение по сравнению с TCR-трансгенными / CAR-Treg.

    Проблемы иммунотерапии на основе Treg синдрома IPEX

    Несмотря на обнадеживающие результаты, первые испытания клеточной терапии на основе Treg вызвали некоторую озабоченность по поводу вопросов, связанных с биологией FOXP3 + -Treg. Из-за присущего им анергического и терминально дифференцированного фенотипа одной открытой проблемой является продолжительность жизни in vivo инфузированного продукта.Первоначальные данные о ин виво Tregs показали 2-недельную выживаемость после инъекции (49). Мы получили аналогичные результаты, когда Т-клетки CD4 FOXP3 вводили иммунодефицитным мышам (87). Удивительно, но данные испытания терапии Treg-клетками у пациентов с T1D продемонстрировали, что, хотя большинство из ex vivo увеличенных аутологичных Treg сохраняется в течение 2 недель после инфузии, часть инъецированных клеток обнаруживается через 1 год, что позволяет предположить, что Tregs может способствовать поддержанию толерантности в долгосрочной перспективе (43).

    Несколько свидетельств продемонстрировали, что FOXP3 + -Tregs по своей природе пластичны и что при воспалительных условиях Tregs могут подавлять модуляцию FOXP3 и секретировать провоспалительные цитокины (91–93). Следовательно, может вызывать беспокойство риск потери регуляторных функций введенными Treg. Для решения этой проблемы была разработана культура с рапамицином, способствующая образованию стабильных продуктов Treg (94–96). В этом контексте Т-клетки CD4 FOXP3 представляют собой идеальный продукт Treg: постоянная экспрессия FOXP3 гарантируется транскрипцией, управляемой конститутивным промотором, и стабильность была продемонстрирована в стационарных и воспалительных условиях, как in vitro, , так и в vivo (87).Стабильность особенно сохраняется, когда Т-клетки CD4 FOXP3 генерируются из наивных Т-клеток. В случае Т-клеток CD4 FOXP3 , полученных из памяти, экспрессия FOXP3, по-видимому, несколько снижена с воспалительными цитокинами, что приводит к более слабой супрессивной функции и повышенной пролиферации по сравнению с наивными продуктами, полученными из Т-клеток (87), скорее всего, из-за посттранскрипционного воздействия. регуляторные механизмы.

    Наконец, возможность генерализованного эффекта иммуносупрессии, который может вызвать инъекция супрессорных клеток, а также опасения по поводу дозы, необходимой для инъекции поликлональных Treg, побудили исследователей разработать более целенаправленные методы лечения.Были разработаны методы расширения человеческих Ag-специфичных Treg (42, 97, 98). Эти протоколы хорошо применимы к алло-Ag-специфическим Treg. Следует отметить, что обнадеживающие результаты по безопасности и эффективности получены из недавно опубликованного исследования клеточной терапии на основе Treg, в котором Treg, индуцированные в присутствии облученных донорами PBMC, вводились после трансплантации печени. Несмотря на низкие дозы Treg, у 7 из 10 пациентов иммуносупрессия была остановлена, и была индуцирована операционная толерантность к трансплантату (99). В настоящее время продолжающиеся испытания по трансплантации твердых органов, которые предусматривают введение специфичных для доноров Treg, приведут к дальнейшему прогрессу (47).

    Мы полагаем, что в случае синдрома IPEX и заболеваний с множественными аутоиммунными проявлениями потребность в специфичности Ag вряд ли будет необходимой. Использование Teff-клеток пациентов в качестве источника клеток CD4 FOXP3 потенциально позволит генерировать Treg-подобные клетки, обогащенные аутореактивной специфичностью. Тем не менее, инфузия поликлональных мощных клеток-супрессоров может привести к общему эффекту иммуносупрессии, что потенциально может помешать защитным ответам на общие патогены.Хотя результаты клинических испытаний с использованием поликлональных Treg обнадеживают, в настоящее время мы разрабатываем протокол для генерации Т-клеток CD4 FOXP3 из Т-клеток, испытавших Ag, с известной специфичностью, которая должна ограничивать их подавляющий эффект целевым Ag. Вкратце, протокол предусматривает предварительную активацию Т-клеток целевым Ag; Предпочтительно трансдуцируются Ag-специфические Т-клетки, активирующиеся в ответ на их родственный Ag. Последующая экспансия in vitro позволяет получить популяцию Т-клеток, обогащенную клетками, сверхэкспрессирующими FOXP3, с известной специфичностью к Ag (Passerini и Bacchetta, неопубликованные результаты).Этот метод может быть использован для расширения сферы применения Т-клеточного продукта CD4 FOXP3 за пределами IPEX-синдрома, для лечения аутоиммунных / воспалительных заболеваний известными агентами-мишенями или в контексте трансплантационной толерантности.

    Наконец, актуальной открытой проблемой на пути к клиническому применению Т-клеток CD4 FOXP3 , безусловно, является их продолжительность жизни in vivo , которую трудно оценить на доклинических моделях. Короткоживущие клетки, вероятно, будут более безопасными, хотя они могут подразумевать клинические протоколы с многократными инфузиями терапевтического продукта.Долгоживущие Т-клетки CD4 FOXP3 допускают однократную инфузию, но, вероятно, потребуют дополнительного уровня безопасности, такого как добавление суицидного гена в конструкцию, используемую для их создания. Использование суицидного гена также можно рассматривать как меру безопасности, чтобы противопоставить последствия возможного инсерционного мутагенеза, хотя было продемонстрировано, что использование LV-опосредованного переноса генов не связано с избирательной интеграцией рядом с онкогенами (100). Однако для любого типа генетически модифицированного клеточного продукта анализ сайтов интеграции рекомендуется во время доклинических оценок.

    Заключительные замечания

    Благодаря успешно завершенным испытаниям стало возможным использование адоптивной терапии Treg-клетками для контроля нежелательных иммунных реакций. Следующей задачей исследователей является адаптация терапии на основе Treg для конкретных заболеваний. Мы предусмотрели подход, основанный на использовании FOX3 + -Treg-подобных клеток, выборочно предназначенных для восстановления иммунной регуляции при синдроме IPEX. Как только безопасность и доказательство концепции будут завершены у пациентов с IPEX, использование этих аутологичных Treg-подобных клеток может стать будущим стандартом лечения определенных аутоиммунных заболеваний, подобно тому, как CAR-T-клетки станут стандартом лечения в гематологические злокачественные новообразования.

    Авторские взносы

    Авторы (LP и RB) в равной степени участвовали в обсуждении темы и написании рукописи.

    Заявление о конфликте интересов

    Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

    Благодарности

    Авторы благодарят д-ра Сильвию Грегори и Франческу Романа Сантони де Сио (Механизмы периферической толерантности, SR-TIGET, Научный институт Сан-Раффаэле, Милан, Италия) за критическое прочтение этой рукописи и постоянное полезное научное обсуждение.Эта работа была поддержана грантами для RB от Итальянского фонда телемарафонов (TGT11A04) и LP от Министерства здравоохранения Италии (GR-11-103).

    Список литературы

    2. Сакагучи С., Сакагучи Н., Асано М., Ито М., Тода М. Иммунологическая самотолерантность, поддерживаемая активированными Т-клетками, экспрессирующими альфа-цепи рецептора IL-2 (CD25). Нарушение единого механизма самотолерантности вызывает различные аутоиммунные заболевания. J Immunol (1995) 155 (3): 1151–64.

    Google Scholar

    3.Яги Х., Номура Т., Накамура К., Ямадзаки С., Китаваки Т., Хори С. и др. Решающая роль FOXP3 в развитии и функционировании CD25 + CD4 + регуляторных Т-клеток человека. Int Immunol (2004) 16 (11): 1643–56. DOI: 10.1093 / intimm / dxh265

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    4. Groux H, O’Garra A, Bigler M, Rouleau M, Antonenko S, de Vries JE, et al. Подмножество CD4 + Т-клеток подавляет антиген-специфические Т-клеточные ответы и предотвращает колит. Nature (1997) 389 (6652): 737–42.DOI: 10.1038 / 39614

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    6. Аббас А. К., Бенуа С., Блюстоун Дж. А., Кэмпбелл Д. Д., Гош С., Хори С. и др. Регуляторные Т-клетки: рекомендации по упрощению номенклатуры. Nat Immunol (2013) 14 (4): 307–8. DOI: 10.1038 / ni.2554

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    7. Беннетт CL, Ochs HD. IPEX - это уникальный Х-сцепленный синдром, характеризующийся иммунной дисфункцией, полиэндокринопатией, энтеропатией и множеством аутоиммунных явлений. Curr Opin Pediatr (2001) 13 (6): 533–8. DOI: 10.1097 / 00008480-200112000-00007

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    8. Вильдин Р.С., Рамсделл Ф., Пик Дж., Фаравелли Ф., Казанова Дж. Л., Буист Н. и др. Х-сцепленный неонатальный сахарный диабет, энтеропатия и эндокринопатический синдром являются человеческим эквивалентом мышиного налета. Нат Генет (2001) 27 (1): 18–20. DOI: 10.1038 / 83707

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    9.Барзаги Ф., Пассерини Л., Баккетта Р. Нарушение регуляции иммунитета, полиэндокринопатия, энтеропатия, х-связанный синдром: парадигма иммунодефицита с аутоиммунитетом. Front Immunol (2012) 3: 211. DOI: 10.3389 / fimmu.2012.00211

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    11. Окура Н., Хамагути М., Морикава Х., Сугимура К., Танака А., Ито Y и др. Эпигенетические изменения, вызванные стимуляцией Т-клеточного рецептора, и экспрессия Foxp3 являются независимыми и дополнительными событиями, необходимыми для развития Treg-клеток. Иммунитет (2012) 37 (5): 785–99. DOI: 10.1016 / j.immuni.2012.09.010

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    12. Хилл Дж. А., Фуерер М., Таш К., Хаксинасто С., Перес Дж., Меламед Р. и др. Foxp3-зависимая от транскрипционного фактора и -независимая регуляция регуляторной транскрипционной сигнатуры Т-клеток. Иммунитет (2007) 27 (5): 786–800. DOI: 10.1016 / j.immuni.2007.09.010

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    13.Fu W, Ergun A, Lu T., Hill JA, Haxhinasto S, Fassett MS, et al. Многократно повторяющийся генетический переключатель «блокирует» транскрипционную сигнатуру регуляторных Т-клеток. Nat Immunol (2012) 13 (10): 972–80. DOI: 10.1038 / ni.2420

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    14. Пассерини Л., Сантони де Сио FR, Ронкароло М.Г., Баккетта Р. Коробка с вилкой P3: миротворец иммунной системы. Int Rev Immunol (2014) 33 (2): 129–45. DOI: 10.3109 / 08830185.2013.863303

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    15. Лю В., Путнам А.Л., Сюй-Ю З., Сзот Г.Л., Ли М.Р., Чжу С. и др. Экспрессия CD127 обратно коррелирует с FoxP3 и подавляющей функцией CD4 + T reg-клеток человека. J Exp Med (2006) 203 (7): 1701–11. DOI: 10.1084 / jem.20060772

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    16. Такахаши Т., Тагами Т., Ямадзаки С., Уэде Т., Симидзу Дж., Сакагучи Н. и др. Иммунологическая самотолерантность поддерживается CD25 (+) CD4 (+) регуляторными Т-клетками, конститутивно экспрессирующими цитотоксический Т-лимфоцит-ассоциированный антиген 4. J Exp Med (2000) 192 (2): 303–10. DOI: 10.1084 / jem.192.2.303

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    17. McHugh RS, Whitters MJ, Piccirillo CA, Young DA, Shevach EM, Collins M, et al. CD4 (+) CD25 (+) иммунорегуляторные Т-клетки: анализ экспрессии генов показывает функциональную роль глюкокортикоид-индуцированного рецептора TNF. Иммунитет (2002) 16 (2): 311–23. DOI: 10.1016 / S1074-7613 (02) 00280-7

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    18.Борселлино Г., Кляйневитфельд М., Ди Митри Д., Стерняк А., Диамантини А., Джометто Р. и др. Экспрессия эктонуклеотидазы CD39 клетками Foxp3 + Treg: гидролиз внеклеточного АТФ и подавление иммунитета. Кровь (2007) 110 (4): 1225–32. DOI: 10.1182 / кровь-2006-12-064527

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    19. Кубач Дж., Люттер П., Бопп Т., Столл С., Беккер С., Хутер Е. и др. Человеческие CD4 + CD25 + регуляторные Т-клетки: протеомный анализ идентифицирует галектин-10 как новый маркер, необходимый для их анергии и подавляющей функции. Кровь (2007) 110 (5): 1550–8. DOI: 10.1182 / кровь-2007-01-069229

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    20. Тран Д. К., Андерссон Дж., Хардвик Д., Бебрис Л., Иллей Г. Г., Шевач Е. М.. Селективная экспрессия латентно-ассоциированного пептида (LAP) и рецептора IL-1 типа I / II (CD121a / CD121b) на активированных человеческих FOXP3 + регуляторных Т-клетках позволяет их очистить из культур размножения. Кровь (2009) 113 (21): 5125–33. DOI: 10.1182 / кровь-2009-01-199950

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    21.Thornton AM, Korty PE, Tran DQ, Wohlfert EA, Murray PE, Belkaid Y и др. Экспрессия Helios, члена семейства транскрипционных факторов Ikaros, дифференцирует производные тимуса от периферически индуцированных регуляторных клеток Foxp3 + T. J Immunol (2010) 184 (7): 3433–41. DOI: 10.4049 / jimmunol.08

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    22. Джоллер Н., Лозано Э., Беркетт П.Р., Патель Б., Сяо С., Чжу С. и др. Treg-клетки, экспрессирующие коингибиторную молекулу TIGIT, избирательно ингибируют провоспалительные реакции клеток Th2 и Th27. Иммунитет (2014) 40 (4): 569–81. DOI: 10.1016 / j.immuni.2014.02.012

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    23. Тран Д. К., Андерссон Дж., Ван Р., Рэмси Х., Унутмаз Д., Шевач Е. М.. GARP (LRRC32) необходим для поверхностной экспрессии латентного TGF-бета на тромбоцитах и ​​активированных FOXP3 + регуляторных Т-клетках. Proc Natl Acad Sci U S. A (2009) 106 (32): 13445–50. DOI: 10.1073 / pnas.0

    4106

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    24.Wieczorek G, Asemissen A, Model F, Turbachova I, Floess S, Liebenberg V, et al. Количественный анализ метилирования ДНК FOXP3 как новый метод подсчета регуляторных Т-клеток в периферической крови и твердых тканях. Cancer Res (2009) 69 (2): 599–608. DOI: 10.1158 / 0008-5472.CAN-08-2361

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    25. Крыло К, Ониши Ю., Прието-Мартин П., Ямагути Т., Мияра М., Фехервари З. и др. CTLA-4 контролирует функцию Foxp3 + регуляторных Т-клеток. Наука (2008) 322 (5899): 271–5. DOI: 10.1126 / science.1160062

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    26. Гроссман В. Дж., Вербски Дж. В., Барчет В., Колонна М., Аткинсон Дж. П., Лей Т. Дж.. Регуляторные Т-клетки человека могут использовать перфориновый путь, чтобы вызвать гибель аутологичных клеток-мишеней. Иммунитет (2004) 21 (4): 589–601. DOI: 10.1016 / j.immuni.2004.09.002

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    27. Ямагути Т., Крыло JB, Сакагути С.Два режима иммунного подавления с помощью Foxp3 (+) регуляторных Т-клеток при воспалительных или невоспалительных условиях. Semin Immunol (2011) 23 (6): 424–30. DOI: 10.1016 / j.smim.2011.10.002

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    28. Ито Т., Ханабучи С., Ван Ю. Х., Парк В. Р., Арима К., Бовер Л. и др. Два функциональных подмножества регуляторных Т-клеток FOXP3 + в тимусе и периферии человека. Иммунитет (2008) 28 (6): 870–80. DOI: 10.1016 / j.immuni.2008.03.018

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    29. Накамура К., Китани А., Фусс И., Педерсен А., Харада Н., Навата Н. и др. TGF-бета 1 играет важную роль в механизме CD4 + CD25 + регуляторной активности Т-клеток как у людей, так и у мышей. J Immunol (2004) 172 (2): 834–42. DOI: 10.4049 / jimmunol.172.2.834

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    30. Stockis J, Colau D, Coulie PG, Lucas S. Мембранный белок GARP является рецептором для латентного TGF-бета на поверхности активированного Treg человека. Eur J Immunol (2009) 39 (12): 3315–22. DOI: 10.1002 / eji.200939684

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    31. Коллисон Л.В., Воркман С.Дж., Куо Т.Т., Бойд К., Ван И, Виньяли К.М. и др. Ингибирующий цитокин IL-35 способствует регуляторной функции Т-клеток. Nature (2007) 450 (7169): 566–9. DOI: 10.1038 / nature06306

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    32. Пандиян П., Чжэн Л., Исихара С., Рид Дж., Ленардо М.Дж.CD4 + CD25 + Foxp3 + регуляторные Т-клетки индуцируют апоптоз эффекторных CD4 + Т-клеток, опосредованный депривацией цитокинов. Nat Immunol (2007) 8 (12): 1353–62. DOI: 10.1038 / ni1536

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    33. Деальо С., Дуайер К.М., Гао В., Фридман Д., Ушева А., Эрат А. и др. Генерация аденозина, катализируемая CD39 и CD73, экспрессируемыми на регуляторных Т-клетках, опосредует подавление иммунитета. J Exp Med (2007) 204 (6): 1257–65. DOI: 10.1084 / jem.20062512

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    34.Бопп Т., Беккер С., Кляйн М., Кляйн-Хесслинг С., Пальметсхофер А., Серфлинг Е. и др. Циклический аденозинмонофосфат является ключевым компонентом подавления, опосредованного регуляторными Т-клетками. J Exp Med (2007) 204 (6): 1303–10. DOI: 10.1084 / jem.20062129

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    35. Бехер-Аллан Ч., Вольф Э., Хафлер Д.А. Экспрессия MHC класса II идентифицирует функционально различные регуляторные Т-клетки человека. J Immunol (2006) 176 (8): 4622–31. DOI: 10.4049 / джиммунол.176.8.4622

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    36. Бериу Г., Костантино С.М., Эшли К.В., Ян Л., Кучру В.К., Бехер-Аллан С. и др. Периферические регуляторные Т-клетки человека, продуцирующие ИЛ-17, сохраняют подавляющую функцию. Кровь (2009) 113 (18): 4240–9. DOI: 10.1182 / кровь-2008-10-183251

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    37. Мияра М., Йошиока Ю., Кито А., Шима Т., Винг К, Нива А. и др. Функциональное разграничение и динамика дифференцировки CD4 + Т-клеток человека, экспрессирующих фактор транскрипции FoxP3. Иммунитет (2009) 30 (6): 899–911. DOI: 10.1016 / j.immuni.2009.03.019

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    38. Zheng Y, Chaudhry A., Kas A., deRoos P, Kim JM, Chu TT, et al. Регуляторная программа супрессора Т-клеток кооптирует фактор транскрипции IRF4, чтобы контролировать ответы T (H) 2. Nature (2009) 458 (7236): 351–6. DOI: 10.1038 / nature07674

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    39. Кордасти С., Костантини Б., Зайдл Т., Перес Абеллан П., Мартинес Ллорделла М., МакЛорнан Д. и др.Глубокое фенотипирование Tregs определяет иммунную сигнатуру идиопатической апластической анемии и прогнозирует ответ на лечение. Кровь (2016) 128 (9): 1193–205. DOI: 10.1182 / кровь-2016-03-703702

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    42. Путнам А.Л., Сафиния Н., Медвец А., Лашковска М., Рэй М., Минц М.А. и др. Производство клинического уровня человеческих аллоантиген-реактивных регуляторных Т-клеток для использования в трансплантации. Am J Transplant (2013) 13 (11): 3010–20.DOI: 10.1111 / ajt.12433

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    43. Блустоун Дж. А., Бакнер Дж. Х., Фитч М., Гительман С. Е., Гупта С., Хеллерстайн М. К. и др. Иммунотерапия диабета 1 типа с использованием поликлональных регуляторных Т-клеток. Sci Transl Med (2015) 7 (315): 315ra189. DOI: 10.1126 / scitranslmed.aad4134

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    44. Safinia N, Vaikunthanathan T, Fraser H, Thirkell S, Lowe K, Blackmore L, et al. Успешное распространение функциональных и стабильных регуляторных Т-клеток для иммунотерапии при трансплантации печени. Oncotarget (2016) 7 (7): 7563–77. DOI: 10.18632 / oncotarget.6927

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    45. Маккенна Д.Х. младший, Сумстад Д., Кадидло Д.М., Батдорф Б., лорд С.Дж., Меркель С.К. и др. Оптимизация очистки цГМФ и размножения Т-регуляторных клеток пуповинной крови в поддержку первых клинических испытаний на людях. Цитотерапия (2017) 19 (2): 250–62. DOI: 10.1016 / j.jcyt.2016.10.011

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    47.Vaikunthanathan T, Safinia N, Boardman D, Lechler RI, Lombardi G. Регулирующие Т-клетки: индукция толерантности при трансплантации твердых органов. Clin Exp Immunol (2017) 189 (2): 197–210. DOI: 10.1111 / cei.12978

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    48. Trzonkowski P, Bieniaszewska M, Juscinska J, Dobyszuk A, Krzystyniak A, Marek N, et al. Первые клинические результаты лечения пациентов с реакцией «трансплантат против хозяина» с помощью ex vivo увеличенных CD4 + CD25 + CD127-T регуляторных клеток человека. Clin Immunol (2009) 133 (1): 22–6. DOI: 10.1016 / j.clim.2009.06.001

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    49. Брунштейн CG, Миллер JS, Cao Q, McKenna DH, Hippen KL, Curtsinger J, et al. Инфузия ex vivo увеличенных Т-регуляторных клеток взрослым, трансплантированным с пуповинной кровью: профиль безопасности и кинетика обнаружения. Кровь (2011) 117 (3): 1061–70. DOI: 10.1182 / кровь-2010-07-293795

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    50.Ди Янни М., Фальцетти Ф., Каротти А., Теренци А., Кастеллино Ф., Бонифачо Е. и др. Treg предотвращают GVHD и способствуют восстановлению иммунитета при HLA-гаплоидентичной трансплантации. Кровь (2011) 117 (14): 3921–8. DOI: 10.1182 / кровь-2010-10-311894

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    51. Эдингер М., Хоффманн П. Регуляторные Т-клетки при трансплантации стволовых клеток: стратегии и первые клинические опыты. Curr Opin Immunol (2011) 23 (5): 679–84.DOI: 10.1016 / j.coi.2011.06.006

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    52. Брунштейн К.Г., Миллер Дж.С., Маккенна Д.Х., Хиппен К.Л., ДеФор Т.Е., Сумстад Д. и др. Регуляторные Т-клетки пуповинной крови для предотвращения РТПХ: кинетика, профиль токсичности и клинический эффект. Кровь (2016) 127 (8): 1044–51. DOI: 10.1182 / кровь-2015-06-653667

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    53. Мартелли М.Ф., Ди Янни М., Руджери Л., Фальцетти Ф., Каротти А., Теренци А. и др.HLA-гаплоидентичная трансплантация с регуляторной и традиционной адоптивной иммунотерапией Т-лимфоцитами предотвращает рецидив острого лейкоза. Кровь (2014) 124: 638–44. DOI: 10.1182 / кровь-2014-03-564401

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    54. Лесли М. Иммунология. Регуляторные Т-клетки получают шанс проявить себя. Наука (2011) 332 (6033): 1020–1. DOI: 10.1126 / science.332.6033.1020

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    55. Marek-Trzonkowska N, Mysliwiec M, Dobyszuk A, Grabowska M, Techmanska I, Juscinska J, et al.Введение CD4 + CD25highCD127- регуляторных Т-клеток сохраняет функцию бета-клеток при диабете 1 типа у детей. Уход за диабетом (2012) 35 (9): 1817–20. DOI: 10.2337 / dc12-0038

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    57. Бен Дхубан К., Пиччирилло, Калифорния. Иммунологические и генетические основы иммунной дисрегуляции, полиэндокринопатии, энтеропатии, Х-сцепленного синдрома. Curr Opin Allergy Clin Immunol (2015) 15 (6): 525–32. DOI: 10.1097 / ACI.0000000000000214

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    58.Баккетта Р., Пассерини Л., Гамбинери Э., Дай М., Аллан С.Е., Перрони Л. и др. Нарушение функций регуляторных и эффекторных Т-клеток у пациентов с мутациями FOXP3. J Clin Invest (2006) 116 (6): 1713–22. DOI: 10.1172 / JCI25112

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    59. d’Hennezel E, Ben-Shoshan M, Ochs HD, Torgerson TR, Russell LJ, Lejtenyi C, et al. Мутация в домене вилки FOXP3 и регуляторные Т-клетки при синдроме IPEX. N Engl J Med (2009) 361 (17): 1710–3.DOI: 10.1056 / NEJMc03

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    60. Моес Н., Рье-Локат Ф, Бег Б., Вердье Дж., Невен Б., Пати Н. и др. Снижение экспрессии FOXP3 и регуляторной функции Т-клеток при тяжелых формах аутоиммунной энтеропатии с ранним началом. Гастроэнтерология (2010) 139 (3): 770–8. DOI: 10.1053 / j.gastro.2010.06.006

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    61. Пассерини Л., Олек С., Ди Нунцио С., Барзаги Ф., Хэмблтон С., Абинун М. и др.Мутации Forkhead box protein 3 (FOXP3) приводят к увеличению числа клеток Th27 и нестабильности регуляторных Т-клеток. J Allergy Clin Immunol (2011) 128 (6): 1376–9.e1. DOI: 10.1016 / j.jaci.2011.09.010

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    62. Chatila TA, Blaeser F, Ho N, Lederman HM, Voulgaropoulos C., Helms C, et al. JM2, кодирующий белок, связанный с головой вилки, мутирует при Х-сцепленном синдроме аутоиммунно-аллергической дисрегуляции. J Clin Invest (2000) 106 (12): R75–81.DOI: 10.1172 / JCI11679

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    63. Ньевес Д.С., Фиппс Р.П., Поллок С.Дж., Охс HD, Чжу К., Скотт Г.А. и др. Дерматологические и иммунологические исследования иммунной дисрегуляции, полиэндокринопатии, энтеропатии, Х-сцепленного синдрома. Arch Dermatol (2004) 140 (4): 466–72. DOI: 10.1001 / archderm.140.4.466

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    64. Киннунен Т., Чемберлен Н., Морбах Х., Чой Дж., Ким С., Крафт Дж. И др.Накопление периферических аутореактивных В-клеток в отсутствие функциональных регуляторных Т-клеток человека. Кровь (2013) 121 (9): 1595–603. DOI: 10.1182 / кровь-2012-09-457465

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    65. Смык-Пирсон С.К., Бакке А.С., Хелд П.К., Вильдин Р.С. Спасение мышей с аутоиммунным налетом путем частичной трансплантации костного мозга или путем инъекции Т-обогащенных спленоцитов. Clin Exp Immunol (2003) 133 (2): 193–9. DOI: 10,1046 / j.1365-2249.2003.02217.x

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    66. Зайдель М.Г., Фрич Дж., Лион Т., Юргенс Б., Хайтгер А., Баккетта Р. и др. Селективное приживление донорских CD4 + 25high FOXP3-позитивных Т-клеток при синдроме IPEX после трансплантации немиелоаблативных гемопоэтических стволовых клеток. Кровь (2009) 113 (22): 5689–91. DOI: 10.1182 / кровь-2009-02-206359

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    67. Касоу К.А., Моралес-Тирадо В.М., Вичлан Д., Шуртлефф С.А., Абрахам А., Лица Д.А. и др.Терапевтический отбор in vivo природных Т-регуляторных клеток тимуса после трансплантации немиелоаблативных гемопоэтических стволовых клеток для IPEX. Clin Immunol (2011) 141 (2): 169–76. DOI: 10.1016 / j.clim.2011.07.005

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    68. Хорино С., Сасахара Ю., Сато М., Нидзума Х., Кумаки С., Абукава Д. и др. Избирательная экспансия регуляторных Т-клеток донорского происхождения после аллогенной трансплантации костного мозга у пациента с синдромом IPEX. Pediatr Transplant (2014) 18 (1): E25–30. DOI: 10.1111 / petr.12184

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    69. Ди Нунцио С., Чеккони М., Пассерини Л., МакМурчи А.Н., Барон Ю., Турбачова И. и др. FOXP3 дикого типа избирательно активен в CD4 + CD25 (hi) регуляторных Т-клетках здоровых женщин-носителей различных мутаций FOXP3. Кровь (2009) 114 (19): 4138–41. DOI: 10.1182 / кровь-2009-04-214593

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    70.Айути А., Каттанео Ф., Галимберти С., Беннингхофф Ю., Кассани Б., Каллегаро Л. и др. Генная терапия иммунодефицита вследствие дефицита аденозиндезаминазы. N Engl J Med (2009) 360 (5): 447–58. DOI: 10.1056 / NEJMoa0805817

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    72. Айути А., Биаско Л., Скарамуцца С., Ферруа Ф., Чикалезе М.П., ​​Барикорди С. и др. Лентивирусная генная терапия гемопоэтическими стволовыми клетками у пациентов с синдромом Вискотта-Олдрича. Наука (2013) 341 (6148): 1233151.DOI: 10.1126 / science.1233151

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    73. Биффи А., Монтини Е., Лориоли Л., Чезани М., Фумагалли Ф., Плати Т. и др. Генная терапия лентивирусными гемопоэтическими стволовыми клетками приносит пользу при метахроматической лейкодистрофии. Наука (2013) 341 (6148): 1233158. DOI: 10.1126 / science.1233158

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    74. Ciceri F, Bonini C, Marktel S, Zappone E, Servida P, Bernardi M, et al.Противоопухолевые эффекты донорских лимфоцитов, созданных с помощью HSV-TK, после трансплантации аллогенных стволовых клеток. Кровь (2007) 109 (11): 4698–707. DOI: 10.1182 / кровь-2006-05-023416

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    76. Монако Л., Фаччио Л. Поиск методов лечения редких заболеваний, ориентированный на пациентов: история успеха Fondazione Telethon и стратегия, ведущая к Стримвелису. EMBO Mol Med (2017) 9 (3): 289–92. DOI: 10.15252 / emmm.201607293

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    77.Освальд-Рихтер К., Гриль С.М., Шариат Н., Лилавонг М., Сундруд М.С., Хаас Д.В. и др. ВИЧ-инфекция естественных и генетически перепрограммированных регуляторных Т-клеток человека. PLoS Biol (2004) 2 (7): E198. DOI: 10.1371 / journal.pbio.0020198

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    78. Aarts-Riemens T, Emmelot ME, Verdonck LF, Mutis T. Принудительная сверхэкспрессия любой из двух распространенных изоформ Foxp3 человека может индуцировать регуляторные Т-клетки из клеток CD4 (+) CD25 (-). Eur J Immunol (2008) 38 (5): 1381–90. DOI: 10.1002 / eji.200737590

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    79. Аллан С.Е., Альстад А.Н., Мериндол Н., Креллин Н.К., Амендола М., Баккетта Р. и др. Создание сильнодействующих и стабильных CD4 + Т-регуляторных клеток человека путем независимой от активации экспрессии FOXP3. Mol Ther (2008) 16 (1): 194–202. DOI: 10.1038 / sj.mt.6300341

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    80.Бруско Т.М., Коя Р.К., Чжу С., Ли М.Р., Патнэм А.Л., МакКлимонт С.А. и др. Человеческие антиген-специфические регуляторные Т-клетки, генерируемые переносом гена Т-клеточного рецептора. PLoS One (2010) 5 (7): e11726. DOI: 10.1371 / journal.pone.0011726

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    81. Schmetterer KG, Haiderer D, Leb-Reichl VM, Neunkirchner A, Jahn-Schmid B, Kung HJ, et al. Трансгенные Т-клетки, специфичные для Bet v 1 Т-клеточного рецептора / белка 3 вилки, подавляют специфическую для Bet v 1 эффекторную функцию Т-клеток зависимым от активации образом. J Allergy Clin Immunol (2011) 127 (1): 238–45, 245.e231–3. DOI: 10.1016 / j.jaci.2010.10.023

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    82. Халл С.М., Николай Л.Е., Эсторниньо М., Ричардсон М.В., Райли Дж. Л., Пикман М. и др. Создание регуляторных Т-клеток человека, специфичных для островков, путем переноса гена TCR. J Autoimmun (2017) 79: 63–73. DOI: 10.1016 / j.jaut.2017.01.001

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    83.Хомбах А.А., Кофлер Д., Раппл Г., Абкен Х. Перенаправление человеческих CD4 + CD25 + регуляторных Т-клеток из периферической крови с заранее определенной целевой специфичностью. Gene Ther (2009) 16 (9): 1088–96. DOI: 10.1038 / gt.2009.75

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    84. MacDonald KG, Hoeppli RE, Huang Q, Gillies J, Luciani DS, Orban PC, et al. Аллоантиген-специфические регуляторные Т-клетки, генерируемые рецептором химерного антигена. J Clin Invest (2016) 126 (4): 1413–24.DOI: 10.1172 / JCI82771

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    85. Бордман Д.А., Филиппеос С., Фрувирт Г.О., Ибрагим М.А., Ханнен Р.Ф., Купер Д. и др. Экспрессия рецептора химерного антигена, специфичного для донорского HLA класса I, усиливает способность регуляторных Т-клеток человека предотвращать отторжение трансплантата кожи человека. Am J Transplant (2017) 17 (4): 931–43. DOI: 10.1111 / ajt.14185

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    86.Ноян Ф., Циммерманн К., Хардтке-Воленски М., Кнофель А., Шульде Э., Гефферс Р. и др. Предотвращение отторжения аллотрансплантата с помощью регуляторных Т-клеток с рецептором химерного антигена, специфичным для МНС. Am J Transplant (2017) 17 (4): 917–30. DOI: 10.1111 / ajt.14175

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    87. Пассерини Л., Росси Мел Э, Сартирана С., Фустери Дж., Бонданза А., Налдини Л. и др. CD4 (+) Т-клетки от пациентов с IPEX превращаются в функциональные и стабильные регуляторные Т-клетки посредством переноса гена FOXP3. Sci Transl Med (2013) 5 (215): 215ra174. DOI: 10.1126 / scitranslmed.3007320

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    88. Амендола М., Веннери М.А., Биффи А., Винья Е., Налдини Л. Координировать трансгенез двойного гена с помощью лентивирусных векторов, несущих синтетические двунаправленные промоторы. Nat Biotechnol (2005) 23 (1): 108–16. DOI: 10.1038 / nbt1049

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    89. Bonini C, Ciceri F, Marktel S, Bordignon C.Трансдуцированные суицидным геном Т-клетки для регуляции эффекта трансплантат против лейкемии. Vox Sang (1998) 74 (Приложение 2): 341–3. DOI: 10.1111 / j.1423-0410.1998.tb05440.x

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    90. Сесса М., Лориоли Л., Фумагалли Ф., Аквати С., Редаелли Д., Балдоли С. и др. Лентивирусная генная терапия гемопоэтическими стволовыми клетками при ранней метахроматической лейкодистрофии: специальный анализ нерандомизированного открытого исследования фазы 1/2. Ланцет (2016) 388 (10043): 476–87.DOI: 10.1016 / S0140-6736 (16) 30374-9

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    93. MacDonald KG, Orban PC, Levings MK. Терапия регуляторными Т-клетками при трансплантации: стабильность, локализация и функциональная специализация. Curr Opin Organ Transplant (2012) 17 (4): 343–8. DOI: 10.1097 / MOT.0b013e328355aaaf

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    95. Батталья М., Стабилини А, Мильявакка Б., Хорейс-Хёк Дж., Кауппер Т., Ронкароло М.Г.Рапамицин способствует увеличению функциональных регуляторных Т-клеток CD4 + CD25 + FOXP3 + как у здоровых субъектов, так и у пациентов с диабетом 1 типа. J Immunol (2006) 177 (12): 8338–47. DOI: 10.4049 / jimmunol.177.12.8338

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    96. Hoffmann P, Eder R, Boeld TJ, Doser K, Piseshka B, Andreesen R и др. Только субпопуляция CD45RA + CD4 + CD25high T-клеток дает начало гомогенным регуляторным T-клеточным линиям при экспансии in vitro. Кровь (2006) 108 (13): 4260–7. DOI: 10.1182 / кровь-2006-06-027409

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    97. Сагу П., Али Н., Гарг Г., Нестле Ф.О., Лехлер Р.И., Ломбарди Г. Человеческие регуляторные Т-клетки со специфичностью аллоантигена являются более мощными ингибиторами аллоиммунного повреждения трансплантата кожи, чем поликлональные регуляторные Т-клетки. Sci Transl Med (2011) 3 (83): 83ra42. DOI: 10.1126 / scitranslmed.3002076

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    98.Ноян Ф., Ли Ю.С., Циммерманн К., Хардтке-Воленски М., Тауберт Р., Варнеке Г. и др. Выделение человеческих антиген-специфических регуляторных Т-клеток с высокой подавляющей функцией. Eur J Immunol (2014) 44 (9): 2592–602. DOI: 10.1002 / eji.201344381

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    99. Тодо С., Ямасита К., Гото Р., Зайцу М., Нагатсу А., Оура Т. и др. Пилотное исследование операционной толерантности с помощью клеточной терапии на основе регуляторных Т-клеток при трансплантации печени от живого донора. Гепатология (2016) 64 (2): 632–43. DOI: 10.1002 / hep.28459

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    100. Biffi A, Bartolomae CC, Cesana D, Cartier N, Aubourg P, Ranzani M, et al. Общие сайты интеграции лентивирусных векторов в доклинических моделях и клинических испытаниях отражают доброкачественную ошибку интеграции, а не онкогенный отбор. Кровь (2011) 117 (20): 5332–9. DOI: 10.1182 / кровь-2010-09-306761

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Публикации

    - Четырехугольник Скагуэя | Отдел геолого-геофизических исследований Аляски

    RDF 2021-4
    Даанен, Р.П., Хербст, А.М., Викстром Джонс, Катрин и Уолкен, Г.Дж., 2021 г., лидарные данные высокого разрешения для Хейнса, Южно-Центральная Аляска, 8-12 декабря 2020 г .: Файл сырых данных Отдела геологических и геофизических исследований Аляски 2021-4 , 8 стр. https://doi.org/10.14509/30595
    RDF 2019-7
    Даанен, Р.П., Викстром Джонс, Катрин, 2020, Лидарные данные высокого разрешения для района Чилкатского хребта, Аляска: Файл сырых данных Отдела геологических и геофизических исследований Аляски 2019-7, 11 стр.https://doi.org/10.14509/30224
    RI 2018-2
    Никольский, Д.Дж., Сулеймани, Е.Н., и Солсбери, Дж. Б., 2018, Карты затопления цунами для Скагуэя и Хейнса, Аляска: Отдел геолого-геофизических исследований Аляски Отчет об исследованиях 2018-2, 69 стр., 3 листа. https://doi.org/10.14509/30029
    Мпикс. 164
    Малликен К.М., Шефер Дж. Р. и Кэмерон, CE, 2018, Геопространственное распределение выпадений тефры на Аляске: компиляция базы геоданных опубликованных случаев выпадения тефры с плейстоцена до наших дней: Отдел геологических и геофизических исследований Аляски Разное издание 164, 46 с.https://doi.org/10.14509/29847
    RDF 2017-6
    Wolken, GJ, Wikstrom Jones, Katreen, Whorton, EN, Gould, AI, and Hendricks, MD, 2017, Фотограмметрические данные коридора Haines Highway: 26 мая 2014 г .: Файл сырых данных Отдела геолого-геофизических исследований Аляски 2017- 6, 20 с. https://doi.org/10.14509/29736
    RDF 2015-5
    Вердон, М.Б., Гранитто, Мэтью, и Азаин, Дж. С., 2015, Геохимический реанализ исторического U.S. Образцы отложений геологической службы из района Хейнс, четырехугольников Джуно и Скагуэй, юго-восток Аляски: Файл сырых данных Отдела геологических и геофизических исследований Аляски, 2015-5, 5 стр. https://doi.org/10.14509/29449
    МП 155
    Макферсон А.Е., Николски Д.Дж. и Сулеймани Е.Н., 2014, Цифровые модели рельефа Скагуэя и Хейнса, Аляска: процедуры, источники данных и оценка качества: Отдел геолого-геофизических исследований Аляски Разное издание 155, 15 стр.https://doi.org/10.14509/29143
    SR 66K
    Декер, П.Л., Гиллис, Р.Дж., Хельмольд, К.П. и Петерсон, Шон, 2012 г., Сводка по ископаемому топливу и потенциалу геотермальных ресурсов в Юго-восточном энергетическом регионе, Свенсон, РФ, Уортес, Массачусетс, Лепейн, Д.Л. и Клаф, JG, Ископаемое топливо и источники геотермальной энергии для местного использования на Аляске: Краткое изложение имеющейся информации: Специальный отчет Отдела геологических и геофизических исследований Аляски 66K, стр. 113-122.https://doi.org/10.14509/24434
    Джонсон, А.Дж., 2012
    Джонсон, А.Дж., 2012, Оценка баланса массы ледников в районе Глейшер-Бэй на Аляске, США, и Британской Колумбии, Канада: Университет Аляски в Фэрбенксе, M.S. диссертация, 107 с., ил., карты.
    МП 145
    Понд, Франклин, 2012, Уиллард Б. Джуэлл (1899-1969): фотографии юго-востока Аляски, 1924-1925: Отдел геолого-геофизических исследований Аляски Разные публикации 145, 98 стр.https://doi.org/10.14509/23984
    Эллиотт, Дж. Л., 2011 г.
    Эллиотт, Дж. Л., 2011, Активная тектоника на юге Аляски и роль блока Якутат, ограниченная измерениями GPS: Университет Аляски в Фэрбенксе, доктор философии. диссертация, xiv, 174 с., карты.
    Кочелек, Э.Дж., 2011
    Кочелек, Э.J., 2011, Геохронология детритового циркона и анализ источников происхождения осадков в верхнемеловом и палеогеновом периоде группы Вальдес на юге Аляски: последствия для мезозойской и кайнозойской аккреционной тектоники: Лас-Крусес, Нью-Мексико, Государственный университет Нью-Мексико, M.S. тезис, xiv, 123 с., ил., (немного цвета), карты.
    П 1776-Б
    Карл С.М., Лайер П.У., Харрис А.Г., Хаусслер П.Дж., Мурчи Б.Л., 2011, Консервная формация - от девона до ранней перми дуговых краевых отложений в террейне Александер, юго-восток Аляски, в Дюмулене, Дж.А., и Галлоуэй, Дж. П., Исследования Геологической службы США на Аляске, 2008-2009 гг .: Профессиональный документ геологической службы США 1776-B, 45 стр.
    Эскудеро Аяла, C.R., 2010
    Эскудеро Аяла, C.R., 2010, Исследования падения напряжения при землетрясениях, сейсмического рассеяния и динамического запуска в Северной Америке: Техасский университет, Эль-Пасо, доктор философии. диссертация, 149 с.
    Чепмен, Дж. Б., 2008 г.
    Чепмен, Дж. Б., 2008, Структурные взаимосвязи и деформация земной коры в Сент-Элиас Ороген, Аляска: Техасский университет, Эль-Пасо, M.S. кандидатская, 96 с.
    ИЗ 2007-1043
    Wesson, RL, Boyd, OS, Mueller, CS, Bufe, CG, Frankel, AD, and Petersen, MD, 2007, Пересмотр не зависящих от времени карт вероятностной сейсмической опасности для Аляски: Отчет Геологической службы США в открытом доступе 2007-1043 , 33 с.
    SIR 2007-5047
    Харни, Джоди, Кокрейн, Гай, Этерингтон, Лиза, Дартнелл, Пит и Чезар, Хэнк, 2007, Геологические характеристики бентосных местообитаний в Глейшер-Бей, Аляска, полученные на основе геофизических данных, видеосъемки и отбора проб отложений, в Пиатте, Дж. Ф. , и Генд, С.М., ред., Труды Четвертого научного симпозиума Ледникового залива: Отчет о научных исследованиях Геологической службы США 2007-5047, стр. 37-42.
    SIR 2007-5047
    Финнеган, Д.К., Лоусон, Д.Е., и Копчински, С.Е., 2007, Оценка современной ледниковой и ледниково-морской среды в голоцене, в Пиатт, Дж. Ф., и Генд, С. М., ред., Труды Четвертого научного симпозиума Ледникового залива: Геологическая служба США. Отчет о научных исследованиях 2007-5047, стр. 42-45.
    SIR 2007-5047
    Лоусон Д.Э., Финнеган Д.К., Копчински С.Е., Бигл С.Р., 2007, Колебания ледников в период от раннего до среднего голоцена в Ледниковой бухте, Аляска, in Piatt, J.Ф. и Генде С.М., ред., Труды Четвертого научного симпозиума в Ледниковой бухте: Отчет о научных исследованиях Геологической службы США 2007-5047, стр. 54-56.
    SIR 2007-5047
    Коклет, Э.Д., Дженкинс, А.Дж., и Этерингтон, Л.Л., 2007, Трансект океанских течений в Глейшер-Бей, измеренный с помощью акустического доплеровского профилографа течения (ADCP), в Пиатте, Дж. Ф., и Дженде, С. М., ред., Труды четвертого Симпозиум по науке в заливе Глейшер: Отчет о научных исследованиях Геологической службы США 2007-5047, стр.80-83.
    SIR 2007-5047
    Пиатт, Дж. Ф. и Генд, С. М., ред., 2007 г., Труды Четвертого научного симпозиума в Глейшер-Бэй: Отчет о научных исследованиях Геологической службы США 2007-5047, 246 стр.
    OF 1997-492 v. 1.40
    Смит, С.М., 2006, Национальная геохимическая база данных - Переформатированные данные Национальной программы оценки ресурсов урана (NURE) по гидрогеохимии и разведке водотоковых отложений (HSSR): U.S. Отчет геологической службы в открытом доступе 1997-492 v. 1.40.
    ИЗ 2006-1290
    Шу, Нора, Петерсон, К.С., Грабман, Натаниэль, Мохаджер, Солмаз, Грюнвальд, Дэниел, Уилсон, Ф.Х. и Халтс, К.К., 2006, Базы данных предварительных интегрированных геологических карт для Соединенных Штатов: цифровые данные для геологии юго-востока Аляски : Отчет Геологической службы США в открытом доступе за 2006-1290 гг.
    Ларсен, К.Ф., 2003
    Ларсен, К.F., 2003, Быстрое поднятие южной части Аляски, вызванное недавней потерей льда: Университет Аляски Фэрбенкс, доктор философии. диссертация, 110 с., ил., карты.
    PR 120
    Клаутис К.Х. и Дэвис П.К., ред., 2003 г., Краткие заметки по геологии Аляски 2003 г .: Профессиональный отчет отдела геологических и геофизических исследований Аляски 120, 118 стр. https://doi.org/10.14509/2907
    PR 120C
    Грин, Д., Маквей, Дж. Г., Палмер, Меррилл, Уоткинсон, Д.Х. и Орчард, М.Дж., 2003 г., Стратиграфия и геохимия зоны RW, новое открытие на проспекте VMS Glacier Creek, поместье Палмер, горнодобывающий район Поркьюпайн, юго-восточная Аляска, в Клаутисе, KH, и Дэвисе, П.К., ред. , Краткие заметки по геологии Аляски 2003: Профессиональный отчет отдела геологических и геофизических исследований Аляски 120C, стр. 35-51. https://doi.org/10.14509/2910
    Грин, Дарвин, 2001 г.
    Грин, Дарвин, 2001, Геология вулканогенных массивных сульфидных перспектив владений Палмер, область Хейнс, юго-восточная Аляска: Оттава, Онтарио, Канада, Карлтонский университет, M.С. дипломная, 254 с., Кр.
    Рэймидж, Дж. М., 2001
    Рэймидж, Дж. М., 2001, Спутниковое дистанционное зондирование суточных, сезонных и годовых изменений ледников на юго-востоке Аляски, 1986–1998 гг .: Итака, Нью-Йорк, Корнельский университет, доктор философии. диссертация, 283 с., ил.
    DDS 39
    Нил С.А., МакГимси Р.Г. и Дигглз М.Ф., 2001, Вулканы гор Врангель и регион залива Кука, Аляска: избранные фотографии: У.S. Серия цифровых данных геологической службы 39.
    ИЗ 2001-193 гг.
    Crafford, T.C., 2001, файл данных о ресурсах Аляски, Skagway Quadrangle: Отчет геологической службы США в открытом файле 2001-193, 186 стр.
    ИЗ 2000-256
    Форд, А.Б., и Брю, Д.А., 2000, Сводная информация об элементах платиновой группы и других редких металлах в зеленых камнях террейна Врангелия и пояса Гравина, Юго-Восточная Аляска: U.С. Отчет открытого архива геологической службы 2000-256, 44 стр.
    МП 34
    Хансен, Р.А., Комбеллик, Р.А., 1998, Планирование сценариев землетрясений для юго-востока Аляски: Отдел геолого-геофизических исследований Аляски Прочие публикации 34, 5 стр. https://doi.org/10.14509/743
    -P 1595
    Брю, Д.А., Форд, А.Б., 1998, Структурные зоны прибрежных гор на юго-востоке Аляски; описания, отношения и литотектоническое значение террейнов, в Gray, J.E., and Riehle, J.R., eds., Геологические исследования на Аляске, проведенные Геологической службой США, 1996: U.S. Geological Survey Professional Paper 1595, p. 183–192.
    Чен, Цзинжу, 1998 г.
    Chen, Jingru, 1998, Сейсмическая широкоугольная миграция через Ороген Прибрежных гор на юго-востоке Аляски и Британской Колумбии: Университет Вайоминга, Ларами, M.S. диссертация, 132 с., ил., карт.
    ИЗ 97-159
    Брю, Д.A., 1997, Геологическая библиография четырехугольников Атлина, горы Сент-Элиас, Скагуэя и Якутата и прилегающих территорий Юкона и Британской Колумбии: Отчет геологической службы США 97-159, 23 стр.
    ИЗ 97-539
    Ньюберри, Р.Дж., и Брю, Д.А., 1997, месторождение ВМС Гринз-Крик верхнего триаса (вулканогенный массивный сульфид) и перспективы ВМС острова Веводски, юго-восток Аляски; химические и изотопные данные для горных пород и руд демонстрируют сходство этих месторождений с вмещающими их породами: U.С. Отчет открытого архива геологической службы 97-539, 49 с.
    Сапиано, Дж. Дж., 1997
    Сапиано, Дж. Дж., 1997, Изменения высоты, объема и конечной точки девяти ледников в Северной Америке: Университет Аляски в Фэрбенксе, M.S. диссертация, 48 с., ил., карты.
    В 2152
    Форд, А.Б., Палмер, К.А., и Брю, Д.А., 1996, Геохимия андезитовых вулканитов острова Адмиралтейства; связанная с рифтом олигоценовая свита базальтов и риолитов на юго-востоке Аляски, в Мур, Т.Э. и Дюмулин Дж. А., редакторы, Геологические исследования на Аляске, проведенные Геологической службой США, 1994: Бюллетень геологической службы США 2152, стр. 177-204.
    ИЗ 96-716
    Брю Д.А., Грибек Д.Дж., Тейлор К.Д., Джейченс Р.С., Кокс Д.П., Барнс Д.Ф., Кох Р.Д., Морин Р.Л. и Дринкуотер Д.Л., 1996, Неизвестные минеральные ресурсы юго-восточной Аляски; пересмотренные описания трактов оценки минеральных ресурсов: Отчет геологической службы США 96-716, 131 стр., 1 лист, масштаб 1: 1 000 000.
    П 1497-Д
    Dusel-Bacon, Cynthia, Brew, D.A., and Douglass, S.L., 1996, Карта метаморфических фаций юго-востока Аляски; распределение, фации и возраст регионально метаморфизованных пород: U.S. Geological Survey Professional Paper 1497-D, p. 1-42, 2 л., М 1: 1 000 000.
    Веймелек, Л.Ю., 1996 г.
    Веймелек, Л.Y., 1996, Исследование гранитных батолитов на основе сейсмических и гравиметрических данных: Валунный батолит в Монтане и прибрежный плутонический комплекс: Университет Вайоминга, Ларами, доктор философии. диссертация, ix, 193 с., ил.
    В 2135
    Брю, Д.А., 1995, Комплекс прибрежных гор на юго-востоке Аляски и прилегающих регионов, Геологическая служба США, Стратиграфические заметки, 1994: Бюллетень геологической службы США 2135, стр. 21-28.
    В 2139
    Нил, К.А., МакГимси, Р.Г., Гарднер, К.А., Харбин, М.Л., и Най, К.Дж., 1995, Отложения тефры, образовавшиеся в результате извержений вулкана Кратер Пик, вулкана Маунт Сперр, Аляска в 1992 году; предварительный отчет о распределении, стратиграфии и составе в Keith, T.E.C., Извержения вулкана Кратер Пик в 1992 году, вулкан Маунт Сперр, Аляска: Бюллетень геологической службы США 2139, стр. 65-79.
    ОФР 10-95
    Фоли, Дж. Ю., Лаберж, Р. Д., Гросс, А. Э., Оливер, Ф. С., и Хирт, В., 1995, Наземные исследования титана и связанных с ним тяжелых минералов в восточной части региона залива Аляска, южная Аляска: Отчет открытого файла Горного бюро США 10-95, 125 стр.
    PDF 95-20
    Ньюберри, Р.Дж., 1995, Обновленная информация о скарновых месторождениях Аляски: Файл общедоступных данных Отдела геологических и геофизических исследований Аляски 95-20, 72 стр., 1 DVD. https://doi.org/10.14509/1699
    PDF 95-34
    Ингрэм, М.Г., и Маурер, М.А., 1995, Сводка сообщенных данных о водопользовании на Аляске, 1994: Подразделение общедоступных данных отдела геологических и геофизических исследований Аляски 95-34, 46 стр. https://doi.org/10.14509/1717
    -P 1564
    Химмельберг, Г.
    Плафкер, Джордж и другие, 1994, стр.389-448
    Плафкер, Джордж, Мур, Дж. К., и Винклер, Г. Р., 1994, Геология южной окраины Аляски, под ред. Плафкера, Джорджа и Берга, Х.С., Геология Аляски: Геологическое общество Америки, стр. 389-448.
    Герельс, Г. и Берг, Х.С., 1994, стр. 451-467
    Герельс, Г.Э., и Берг, Х.С., 1994, Геология юго-востока Аляски, под ред. Плафкера, Джорджа и Берга, Х.С., Геология Аляски: Геологическое общество Америки, стр.451-467.
    Moll-Stalcup, E.J., 1994, стр. 589-618
    Moll-Stalcup, E.J., 1994, Последний меловой и кайнозойский магматизм на материковой Аляске, под ред. Плафкера, Джорджа и Берга, Х.С., Геология Аляски: Геологическое общество Америки, стр. 589-618.
    В 2107
    Брю Д.А., Форд А.Б., Кох, Р.Д., Дигглз, М.Ф., Дринкуотер, Дж. Л., Лони, Р.А., и Смит, Дж. Г., 1994, GPS в сравнении с шаблоном; простые полевые и офисные эксперименты, касающиеся местоположений, определенных с помощью GPS, и местоположений на карте в масштабе шаблона, в Till, A.Б., и Мур Т.Э., редакторы, Геологические исследования на Аляске, проведенные Геологической службой США, 1993: Бюллетень геологической службы США 2107, стр. 199-205.
    MF 2271
    Альфа Т.
    ИЗ 94-268
    Брю Д.А., Форд А.Б., 1994, Плутонико-метаморфический комплекс Береговых гор и связанные с ним породы между Хейнсом, Аляска, и Фрейзером, Британская Колумбия; тектонические и геологические зарисовки и дорожный журнал Клондайкского шоссе: Отчет геологической службы США 94-268, 25 стр.
    -P 1544
    Брауэрс, E.M., 1994, Систематическая палеонтология четвертичных комплексов остракод в заливе Аляска; Часть 3, Семейство Cytheruridae: Профессиональный доклад Геологической службы США 1544, 45 стр., 1 лист.
    Беласки Павел, 1994
    Беласки, Пол, 1994, Пермская палеогеография тропической части Тихого океана: биогеографический подход к определению долготы: Калифорнийский университет, Лос-Анджелес, доктор философии. диссертация, 381 с., ил.
    Цай, Цзинькуй, 1994
    Cai, Jinkui, 1994, Выходы отложений, литофациальная архитектура и характеристики грязевых пород в ледниковой среде: ДеКалб, Иллинойс, Университет Северного Иллинойса, доктор философии.Докторская диссертация, 466 с., Ил.
    Хантер, L.E., 1994
    Хантер, Л.Е., 1994, Системы линий заземления и баланс массы ледников современных ледников умеренного пояса и их влияние на стабильность ледников: ДеКалб, Иллинойс, Университет Северного Иллинойса, доктор философии. диссертация, 499 с., ил.
    В 2034-А
    Bruns, T.R., 1993, провинция Юго-Восточная Аляска (071), Пауэрс, Р.Б., ред., Разведочные месторождения нефти и оценка ресурсов, 1989 г., на суше США; Регион 1, Аляска; Регион 2, Тихоокеанское побережье: Бюллетень Геологической службы США 2034-A, стр. A66-A66.
    В 2068
    Форд, А.Б., и Брю, Д.А., 1993, Геохимический характер зеленокаменных пород верхнего палеозоя и триаса и связанных с ними метавулканических пород террейна Врангелия на севере юго-востока Аляски, в Дюзель-Бэкон, Синтия и Тилль, А.Б., ред., Геологические исследования на Аляске, США.S. Geological Survey, 1992: Бюллетень Геологической службы США 2068, стр. 197-217.
    В 2068
    Герельс, Дж. Э., и Баркер, Фред, 1993, Разведывательная геохимия пермских и триасовых базальтов террейнов Таку и Врангелия, юго-восточная Аляска, в Дюзель-Бэкон, Синтия, и Тилль, AB, ред., Геологические исследования на Аляске. Геологическая служба США, 1992: Бюллетень Геологической службы США 2068, стр. 218-227.
    ИЗ 93-309
    Фоглеман, К.A., Lahr, J.C., Stephens, C.D., and Page, R.A., 1993, Места землетрясения, определенные сетью сейсмографов южной Аляски с октября 1971 по май 1989 г .: Отчет геологической службы США 93-309, 54 стр.
    -П 1531
    Брауэрс, E.M., 1993, Систематическая палеонтология четвертичных комплексов остракод в заливе Аляска; Часть 2, Семейства Trachyleberididae, Hemicytheridae, Loxoconchidae, Paracytherideidae: U.S. Geological Survey Professional Paper 1531, 47 p.
    Филлипс, А.С., 1993
    Филлипс, A.C., 1993, Осадочные процессы в ледниковых морских дельтах, Глейшер-Бэй, Аляска: Иллинойский университет, Чикаго, доктор философии. диссертация, 214 с., ил.
    ОФР 101-93
    Колдуэлл, Дж. Р., и Генслер, Э. К., 1993, Возможность захоронения хвостов подводных лодок повлиять на доступность полезных ископаемых из прибрежных районов США: U.Отчет открытого архива горного бюро С. 101-93, 49 с.
    PDF 93-36
    Бернс, Л. Е., и Гилберт, WG, 1993, Группа выбора земли 36 (четырехугольники Хейнса и Скагуэя): Геологическая сводка, ссылки, местоположения образцов DGGS, геохимические данные и данные по основным оксидам: Файл общедоступных данных отдела геологических и геофизических исследований Аляски 93- 36, 31 п., 2 л., Масштаб 1: 63 360. https://doi.org/10.14509/1571
    B 1999
    Роеске, С.М., Павлис, Т.Л., Сни, Л.В., и Сиссон, В.Б., 1992, изотопный возраст 40Ar / 39 Ar из объединенного террейна Врангеллия-Александр вдоль системы разломов Пограничных хребтов в восточной части Чугачских гор и Глейшер-Бей, Аляска, в Брэдли. , DC, и Ford, AB, ред., Геологические исследования на Аляске, проведенные Геологической службой США, 1990: Бюллетень Геологической службы США 1999, стр. 180-195.
    В 2041
    Тейлор, С.Д., Сьютат, Б.А., и Миллер, Л.Д., 1992, Последующая геохимическая съемка аномалий цветных металлов в районах Уорд-Крик / Уиндфолл-Харбор и Гамбьер-Бей на острове Адмиралтейство, юго-восточная Аляска, в Брэдли, Д.К. и Дюзель-Бэкон, Синтия, ред., Геологические исследования на Аляске, проведенные Геологической службой США, 1991 г .: Бюллетень геологической службы США 2041, стр. 70-85.
    I 1867 г.
    Герельс, Г.Е., и Берг, Х.С., 1992, Геологическая карта юго-востока Аляски: Геологическая служба США, серия «Разные исследования», карта 1867 г., 24 стр., 1 лист, масштаб 1: 600 000.
    Коэн, Х.А., 1992
    Коэн, Х.A., 1992, Стратиграфические, седиментологические ограничения и ограничения происхождения в эволюции пояса Гравина на севере юго-востока Аляски: Принстон, Нью-Джерси, Принстонский университет, доктор философии. диссертация, 275 с., ил., карты.
    Готтлер, П.Ф., 1992
    Готтлер, П.Ф., 1992, Сплав по льду на леднике приливной воды с умеренным климатом: ледник Макбрайд, залив Глейшер, Аляска: ДеКалб, Иллинойс, Университет Северного Иллинойса, M.С. тезис, 296 с., Ил.
    Смарт, К.Дж., 1992
    Смарт, К.Дж., 1992, История деформаций системы разломов Пограничных хребтов, Национальный парк Глейшер-Бэй, Аляска: Университет Нового Орлеана, Луизиана, М.С. диссертация, 75 с.
    Сайверсон, К.М., 1992
    Syverson, K.M., 1992, Ледниковая геология юго-восточной части ледника Берроуз, Национальный парк и заповедник Глейшер-Бей, Аляска: Университет Висконсина, Мэдисон, доктор философии.Докторская диссертация, 212 с.
    ОФР 87-92
    The McDowell Group, 1992, Экономическое влияние горнодобывающей промышленности на юго-востоке Аляски: Отчет 87-92 Горнодобывающего управления США, 40 стр.
    С 1062
    Брю, Д. А., Дрю, Л. Дж., Шмидт, Дж. М., Рут, Д. Ф., и Хубер, Д. Ф., 1991, Оценка неоткрытых полезных ископаемых, Национальный лес Тонгасс, юго-восточная Аляска, в Гуде, Восточная Европа, Слэк, Дж. Ф. и Котра, Р. .К., ред., Геологическая служба США по исследованию минеральных ресурсов, 1991 г .; программа и тезисы: Циркуляр Геологической службы США 1062, стр. 6-6.
    ИЗ 91-10
    Брю, Д. А., Дрю, Л. Дж., Шмидт, Дж. М., Рут, Д. Ф., и Хубер, Д. Ф., 1991, Неизвестные обнаруживаемые полезные ископаемые национального леса Тонгасс и прилегающих земель, юго-восточная Аляска: Отчет геологической службы США в открытом доступе 91-10 , 370 с., 12 л.
    ИЗ 91-29
    Dusel-Bacon, Cynthia, Brew, D.А., Дуглас С.Л., 1991, Карта метаморфических фаций юго-востока Аляски; распределение, фации и возраст регионально метаморфизованных пород: Отчет геологической службы США 91-29, 46 стр., 2 листа, масштаб 1: 1000000.
    ИЗ 91-343
    Брю, Д.А., и Дринкуотер, Дж. Л., 1991, Дополнение по заповедным зонам Закона о реформе лесоматериалов Тонгасс к отчету 91-10 Геологической службы США (Неоткрытые обнаруживаемые минеральные ресурсы национального леса Тонгасс и прилегающих земель, юго-восток Аляски): U.С. Отчет открытого архива геологической службы 91-343, 35 стр.
    РИ 91-4
    Still, JC, Hoekzema, RB, Bundtzen, TK, Gilbert, WG, Wier, KR, Burns, LE, and Fechner, SA, 1991, Экономическая геология области Haines-Klukwan-Porcupine, юго-восточная Аляска: Отдел геологических исследований Аляски. Отчет по геофизическим изысканиям 91-4, 156 стр., 5 листов. https://doi.org/10.14509/2478
    Гаффилд, С.Дж., 1991
    Гаффилд, С.J., 1991, Гляциология и отложения тиллов на леднике Берроуз, юго-восточная Аляска: Университет Висконсина, Мэдисон, M.S. диссертация, 109 с.
    Хаусслер, П.Дж., 1991
    Haeussler, P.J., 1991, Палеомагнитные и структурные ограничения в истории аккреции террейна Александер, юго-восток Аляски: Калифорнийский университет, Санта-Крус, доктор философии. диссертация, 213 с., ил., карты.
    Хаммонд, W.Р., 1991 г.
    Hammond, W.R., 1991, Радиолокационное обнаружение подледниковых сульфидов: Университет Айдахо, Москва, M.S. диссертация, 69 с.
    РИ 91-2
    March, G.D., 1991, Поверхностная геология четырехугольника Скагуэй C-2, Аляска: Отдел геологических и геофизических исследований Аляски Отчет об исследовании 91-2, 1 лист, масштаб 1: 63 360. https://doi.org/10.14509/2476
    РИ 91-5
    Гилберт, В.Дж., Стилл, Дж. К., Бернс, Л. Е., Виер, К. Р., и Редман, И. К., 1991, Геохимия области Хейнс-Клюкван-Поркьюпайн, юго-восточная Аляска: Отчет об исследовании Отдела геологических и геофизических исследований Аляски 91-5, 75 стр. ., 2 л., Масштаб 1: 63 360. https://doi.org/10.14509/2479
    SP ТОМ. 2А
    Still, JC, 1991, Раздел A: Подрайон Haines - Klukwan - Porcupine, Горное управление США, Исследования полезных ископаемых в горнодобывающем районе Джуно, Аляска, 1984-1988: Том 2 - Подробные описания рудников, перспективных месторождений и залежей полезных ископаемых: U.S. Специальное издание горного бюро VOL. 2А, 214 с., 9 л.
    SP ТОМ. 2B
    Still, JC, 1991, Раздел B: Подрайон Ледниковой бухты, Горное управление США, Исследования полезных ископаемых в горнодобывающем районе Джуно, Аляска, 1984-1988: Том 2 - Подробные описания рудников, перспективных месторождений и залежей полезных ископаемых: Бюро США Специальное издание шахт VOL. 2Б, 69 с., 3 л.
    SP ТОМ. 2C
    Клаф, А.Х. и Редман, EC, 1991, Раздел C: Подрайон Западного Линнского канала, Горное управление США, Исследования полезных ископаемых в горнодобывающем районе Джуно, Аляска, 1984-1988: Том 2 - Подробные описания рудников, перспективных месторождений и залежей полезных ископаемых. : Специальная публикация Горного управления США VOL. 2С, 44 с.
    SP ТОМ. 2E
    Clough, A.H., 1991, Раздел E: Подрайон прибрежного хребта, в Горнодобывающем управлении США, Исследования полезных ископаемых в горнодобывающем районе Джуно, Аляска, 1984-1988: Том 2 - Подробные описания рудников, перспективных месторождений и залежей полезных ископаемых: U.S. Специальное издание горного бюро VOL. 2E, 44 с.
    SP ТОМ. 3
    Маас, К.М., 1991, Исследования минералов в горнодобывающем районе Джуно, Аляска, 1984-1988: Том 3 - Промышленные полезные ископаемые: Специальная публикация Горного бюро США, том. 3, 115 с.
    B 1918 г.
    Дринкуотер, Дж. Л., Брю Д. А., Форд А. Б., 1990, Петрографические и химические данные для крупных мезозойских и кайнозойских плутонических силлов к востоку от Джуно, юго-восток Аляски: U.С. Вестник Геологической службы 1918, 47 с.
    B 1946 г.
    Лулл, Дж. С., и Плафкер, Джордж, 1990, Геохимия и палеотектонические последствия метабазальтовых пород в группе Вальдез, южная Аляска, в Дувре, Дж. Х., и Галлоуэе, Дж. Дж., Ред., Геологические исследования на Аляске, проведенные Геологической службой США, 1989: Бюллетень Геологической службы США за 1946 г., стр. 29-38.
    ИЗ 90-348
    Гриском, Эндрю, и Зауэр, П.E., 1990, Интерпретация магнитных карт северной части залива Аляска с акцентом на источник аномалии склона: Отчет геологической службы США 90-348, 18 стр.
    -П 1510
    Брауэрс, E.M., 1990, Систематическая палеонтология четвертичных комплексов остракод в заливе Аляска; Часть 1, Семейства Cytherellidae, Bairdiidae, Cytheridae, Leptocytheridae, Limnocytheridae, Eucytheridae, Krithidae, Cushmanideidae: U.S. Geological Survey Professional Paper 1510, 43 p.
    РИ 90-5
    Gilbert, WG, Clough, AH, Burns, LE, Kline, JT, Redman, EC, and Fogels, EJ, 1990, Разведывательная геология и геохимия северо-восточного четырехугольника Скагуэй, Аляска: Отчет об исследованиях Отдела геолого-геофизических исследований Аляски 90-5, 2 л., М 1: 125 000. https://doi.org/10.14509/2473
    PDF 90-14
    Каррик, С.Дж., и Ингрэм, М.Г., 1990, Сводка данных по рекам для рек Литтл-Салмон и Уолкер-Лейк-Крик, четырехугольников Скагуэй B-3 и B-4, Аляска: проект отчета: Отдел геологических и геофизических исследований Аляски Открытые данные Дело 90-14, 9 л.https://doi.org/10.14509/1448
    Hermance, G.W., 1989 г.
    Hermance, G.W., 1989, Выветривание горных пород и образование глинистых минералов на юго-востоке Аляски: Буффало, Нью-Йорк, Государственный университет Нью-Йорка, M.S. диссертация, 85 с., ил.
    Серамур, К.С., 1989
    Серамур, К.С., 1989, Распределение осадочных фаций в заливе Мьюир, залив Глейшер, юго-восток Аляски: ДеКалб, Иллинойс, Университет Северного Иллинойса, M.С. тезис, 218 с., Ил.
    PDF 89-14
    Forbes, RB, Gilbert, WG, and Redman, EC, 1989, Геологическая обстановка и петрология метавулканических пород в северо-западной части четырехугольника Скагуэй B-4, юго-восток Аляски: Подразделение геолого-геофизических исследований Аляски, файл общедоступных данных 89 -14, 46 с. https://doi.org/10.14509/1417
    PDF 88-14
    Регер Р.Д., 1988, Расчетные затраты на геологоразведочные работы для долларовой оценки совокупных ресурсов на землях (трастах) для психического здоровья и законодательно обозначенных замещающих землях на Аляске: Подразделение геолого-геофизических исследований Аляски, файл общедоступных данных 88-14, 32 стр., 89 листов, масштаб 1: 63 360. https://doi.org/10.14509/1363
    РИ 88-4
    Гилберт, WG, Форбс, Р.Б., Редман, Е.К., и Бернс, Л.Е., 1988, Предварительная геология коренных пород и геохимия района реки Келсолл, юго-восток Аляски: Отчет об исследовании Отдела геолого-геофизических исследований Аляски 88-4, 2 листа , масштаб 1:36 200. https://doi.org/10.14509/2452
    ИЗ 88-31
    Фоглеман, К.А., Стивенс, К.Д., и Лар, Дж. К., 1988, Каталог землетрясений на юге Аляски за 1985 год: Отчет Геологической службы США в открытых файлах 88-31, 112 стр.
    ИЗ 88-405
    Брю Д.А., 1988, Последние мезозойские и кайнозойские магматические породы юго-востока Аляски; синопсис: Отчет геологической службы США в открытом доступе 88-405, 29 стр.
    ИЗ 88-424
    Нильсен, округ Колумбия, Дуглас, С.Л., и Брю, Д.А., 1988, Пересмотренная геологическая библиография района проекта Джуно, Аляска: U.S. Отчет геологической службы в открытом доступе 88-424, 51 с.
    ИЗ 88-450-И
    Bruns, T.R., 1988, Нефтяной потенциал юго-востока Аляски; отчет для Национальной программы оценки углеводородов: Отчет геологической службы США 88-450-I, 4 стр.
    ИЗ 88-450-Д
    Bruns, T.R., 1988, Геология нефти и углеводородные месторождения прибрежной провинции залива Аляска; отчет для Национальной программы оценки углеводородов: U.S. Отчет геологической службы в открытом доступе 88-450-J, 30 стр.
    ИЗ 88-652
    Брю Д.А., Карл С.М., 1988, Пересмотр контактов и других особенностей пояса Гравина на юго-востоке Аляски; дополнительные данные: Отчет геологической службы США в открытом доступе 88-652, 7 стр.
    ИЗ 88-659
    Герельс, Г.Е., и Берг, Х.С., 1988, Обзор региональной геологии и тектоники юго-востока Аляски: США.Отчет геологической службы 88-659, 40 стр.
    Пелто, М.С., 1988
    Пелто, М.С., 1988, Баланс массы и климатическая чувствительность северного Каскада, Вашингтон, и Берегового хребта, юго-восток ледников Аляски: Университет штата Мэн, Ороно, M.S. диссертация, 115 с.
    Филлипс, А.С., 1988
    Филлипс, А.C., 1988, Продельтовское осаждение дельты контакта с льдом, ледник Риггс, залив Глейшер, Аляска: Университет Иллинойса, Чикаго, M.S. диссертация, 80 с.
    Ватт, Л.Дж., 1988
    Watts, L.J., 1988, Котлован и разработка сандура на краю ледника Кейсмент, Национальный парк Глейшер-Бэй, Аляска: Университет Небраски, Линкольн, M.S. диссертация, 121 с.
    Уилбур, Стивен, 1988
    Уилбур, Стивен, 1988, Пульсирующий ледник по сравнению с неизменным: сравнение с использованием морфометрии и баланса: Университет Аляски в Фэрбенксе, М.С. дипломная, 113 с., Ил., Карт.
    ОФР 49-88
    Стилл, Дж. К., 1988, Золото-медное оруденение Чилкатского полуострова и островов: отчет открытого файла горного управления США 49-88, 39 стр., 11 листов, масштаб 1: 63,360.
    PDF 88-4
    Wiltse, M.A., Clautice, K.H., Burns, L.E., Gilbert, W.G., Accolade Mines Inc., Tam, Jean, Pessel, G.H., Smith, T.E., Bundtzen, T.K., Robinson, M.S., Bakke, A.A., Duce, P., Фогель, Эдвард, Колтер, Гэри и Моддроу, C., 1988, Минеральный потенциал земель фонда охраны психического здоровья на Аляске: Файл общедоступных данных Отдела геологических и геофизических исследований Аляски 88-4, 40 стр., 49 листов, масштаб 1: 250 000. https://doi.org/10.14509/1350
    PDF 88-20
    Регер Р.Д., 1988, Состояние геологических данных для участков с активным материалом на землях, предоставленных (трастовых) службах охраны психического здоровья на Аляске: Подразделение геологических и геофизических исследований Аляски, файл общедоступных данных 88-20, 54 стр., 23 листа, масштаб 1: 63 360. https://doi.org/10.14509/1368
    РИ 88-8
    Гилберт У.Г., 1988, Предварительная геология северной части хребта Чилкат, юго-восточная Аляска: Отчет отдела геолого-геофизических исследований Аляски об исследовании 88-8, 2 листа, масштаб 1: 36 200. https://doi.org/10.14509/2456
    РИ 87-6
    March, G.D., 1987, Карты поверхностной геологии и ресурсов материалов четырехугольника Скагуэй А-2, Аляска: Отчет отдела геологических и геофизических исследований Аляски об исследованиях 87-6, 2 листа, масштаб 1: 63 360.https://doi.org/10.14509/2429
    MF 1874-B
    Monger, J.W.H., и Berg, H.C., 1987, Литотектоническая карта террейна западной Канады и юго-восточной Аляски: Геологическая служба США, Карта различных полевых исследований 1874-B, 12 стр., 1 лист, масштаб 1: 2,500,000.
    РИ 87-2
    Gilbert, WG, Burns, LE, Redman, EC, and Forbes, RB, 1987, Предварительная геология коренных пород и геохимия четырехугольника Скагуэй B-3, Аляска: Отчет об исследовании Отдела геолого-геофизических исследований Аляски 87-2, 2 листов, масштаб 1:36 200.https://doi.org/10.14509/2426
    B 1786
    Berg, HC, Brew, DA, and Nokleberg, WJ, 1987, Значительные металлоносные залежи, юго-восток Аляски, в Ноклеберге, WJ, Bundtzen, TK, Berg, HC, Brew, DA, Grybeck, Donald, Robinson, MS, Smith , Т.Э., и Йенд, В.Е., Значительные рудные месторождения руды и россыпные районы Аляски: Бюллетень Геологической службы США 1786, стр. 59-72.
    B 1786
    Yeend, W.Э., Бундцен, Т.К., и Ноклеберг, В.Дж., 1987 г., Значительные россыпные районы Аляски, в Ноклеберге, штат Висконсин, Бундцен, Т.К., Берг, ХК, Брю, Д.А., Грибек, Дональд, Робинсон, М.С., Смит, Т.Э. и Йенд, В.Е., Значительные месторождения железистых руд и россыпные районы Аляски: Бюллетень Геологической службы США 1786, стр. 73-82, масштаб 1: 5 000 000.
    Бауэрс, F.H., 1987
    Бауэрс, Ф.Х., 1987, Влияние ветровалов на свойства почвы и пространственную изменчивость на юго-востоке Аляски: Вашингтонский университет, Сиэтл, доктор философии.Докторская диссертация, 185 с., Ил.
    ОФР 15-87
    Бэггс Д.У. и Шерман Дж.Э., 1987 г., Возможность экономической добычи цинка, меди, серебра и золота в районе добычи Поркьюпайн в горнодобывающем районе Джуно, Аляска: Отчет горнодобывающего управления США в открытом доступе 15-87, 28 п.
    ОФР 27-87
    Куртак, Дж. М., 1987, Результаты исследований Бюро горных работ 1985 г. в заливе Джонса Хопкинса - в районе ледника Маржери, Глейшер-Бей, Аляска: U.Отчет открытого архива горного управления С. 27-87, 31 стр., 2 листа, масштаб 1: 63 360.
    МП 9
    Albanese, M.D., и Campbell, B.W., comps., 1987, Работы по добыче россыпи на Аляске: Материалы девятой ежегодной конференции по добыче россыпи на Аляске-1987: Отдел геолого-геофизических исследований Аляски Разное издание 9, 321 с. https://doi.org/10.14509/672
    PDF 87-28
    Регер, Р.Д., 1987, Исследование песчано-гравийного потенциала земель, предоставленных в качестве гранта для психического здоровья, на Аляске: Подразделение геологических и геофизических исследований Аляски, файл общедоступных данных 87-28, 156 стр., 84 листа, масштаб 1: 63 360. https://doi.org/10.14509/1336
    PDF 88-2
    Регер, Р. Д., 1987, Исследование песчано-гравийного потенциала законодательно обозначенных земель замещающих бассейнов на Аляске: Файл публичных данных Отдела геологических и геофизических исследований Аляски 88-2, 18 стр., 227 листов, масштаб 1: 63 360 . https://doi.org/10.14509/1348
    PR 93
    Мотика Р.Дж. и Мурман М.А., 1987, Геотермальные ресурсы юго-востока Аляски: Профессиональный отчет отдела геологических и геофизических исследований Аляски 93, 1 лист, масштаб 1: 1 000 000.https://doi.org/10.14509/2274
    ОФР 36-87
    Still, JC, Gilbert, WG, and Forbes, RB, 1987, Заключительный отчет по отбору проб отложений, поплавков и коренных пород в районе добычи Поркьюпайн, юго-восток Аляски, 1983-1985 гг .: Отчет горного бюро США в открытом доступе 36- 87, 35 с., 8 л., Масштаб 1: 63 360.
    В 1662
    Химмельберг Г. Р., Лони Р. А., Крейг Дж. Т., 1986, Петрогенезис ультраосновного комплекса на островах Блашке, юго-восток Аляски: U.С. Вестник Геологической службы 1662, 14 стр.
    ИЗ 86-393
    Fukuhara, CR, 1986, Описание плутонов в западной части Джуно и части прилегающего Скагуэя. 1: 250 000 четырехугольников, юго-восточная Аляска: Отчет Геологической службы США в открытом доступе 86-393, 56 стр., 1 лист, масштаб 1: 250 000.
    Донелик, Р.А., 1986
    Донелик, Р.А., 1986, Мезозойско-кайнозойская термическая эволюция террейна Атлин, желоба Уайтхорс и прибрежного плутонического комплекса от Атлина, Британская Колумбия, до Хейнса, Аляска, по данным методов геотермометрии треков деления: Трой, Нью-Йорк, Ренсселер Политехнический институт, М.С. дипломная, 167 с., Ил., Карт.
    ОФР 89-86
    Хукзема, Р.Б., Фехнер, С.А., и Бундцен, Т.К., 1986, Распределение, анализ и извлечение россыпного золота в районе добычи Поркьюпайн, юго-восток Аляски: Отчет горнодобывающего управления США в открытом доступе 89-86, 49 стр., 4 листа.
    PDF 86-27
    Bundtzen, T.K., 1986, Геология россыпей горнодобывающего района Поркьюпайн, четырехугольник Скагуэй B-4, Аляска: Подразделение геологических и геофизических исследований Аляски, файл общедоступных данных 86-27, 26 стр., 1 лист, масштаб 1:40 000. https://doi.org/10.14509/1201
    PDF 86-18
    Bundtzen, T.K., и Clautice, K.H., 1986, Исследование проспекта золотого месторождения Золотого Орла около Поркьюпайна, четырехугольник Скагуэй B-4, Аляска: Подразделение геолого-геофизических исследований Аляски, файл общедоступных данных 86-18, 9 стр. https://doi.org/10.14509/1193
    ИЗ 85-395
    Брю Д.А., Форд А.Б., 1985, Предварительная разведывательная геологическая карта Джуно, реки Таку, Атлина и части четырехугольника Скагуэй 1: 250 000, юго-восточная Аляска: U.С. Отчет геологической службы 85-395, 23 стр., 1 лист, масштаб 1: 2 500 000.
    ИЗ 85-437
    Бейли, Э.А., Арбогаст, Б.Ф., Смаглик, С.М., и Лайт, Т.Д., 1985 г., Аналитические результаты и карта местонахождения проб для проб отложений и концентратов тяжелых минералов, собранных в 1983 и 1984 гг. Из реки Джуно, река Таку, Атлин и четырехугольники Скагуэя, Аляска: Отчет геологической службы США в открытом доступе 85-437, 89 стр., 1 лист, масштаб 1: 250 000.
    ИЗ 85-717
    Уэллс, Д.Э., Питтман, Т.Л., Брю, Д.А., и Дуглас, С.Л., 1985, Карта и описание месторождений полезных ископаемых в Джуно, реке Таку, Атлине и части четырехугольников Скагуэя, Аляска: Отчет геологической службы США в открытом доступе 85-717, 332 с., 1 л., Масштаб 1: 250 000.
    PDF 85-16
    Mishler, C.W., and Holmes, C.E., 1985, Отчет об исследовании культурных ресурсов двух участков на реке Чилкут, округ Хейнс: Файл общедоступных данных отдела геологических и геофизических исследований Аляски 85-16, 7 стр.https://doi.org/10.14509/1109
    РИ 85-6
    Редман, Е.К., Гилберт, В.Г., Джонс, Б.К., Розенкранс, Д.С., и Хикок, Б.Д., 1985, Предварительная геологическая карта коренных пород четырехугольника Скагуэй B-4, Аляска: Отчет об исследованиях Отдела геолого-геофизических исследований Аляски 85 -6, 1 л., Масштаб 1:40 000. https://doi.org/10.14509/2396
    ИЗ 84-572
    Берг, Х.С., 1984, Региональная геологическая сводка, металлогенез и минеральные ресурсы юго-востока Аляски: U.С. Отчет геологической службы 84-572, 298 стр., 1 лист, масштаб 1: 600 000.
    ИЗ 84-618
    Bugliosi, E.F., 1984, Гидрологическая разведка бассейна реки Чилкат, юго-восток Аляски (с особым акцентом на критическую среду обитания белоголового орлана у конуса выноса реки Цирку): Отчет геологической службы США 84-618, 46 стр.
    ИЗ 84-886
    Герельс, Г.Э., Берг, Х.С., 1984, Геологическая карта юго-востока Аляски: U.С. Отчет геологической службы 84-886, 28 стр., 1 лист, масштаб 1: 2 000 000.
    Брунс, Т.Р., 1984
    Bruns, T.R., 1984, Тектоника аллохтонного террейна, блок Якутат, северная часть залива Аляски: Калифорнийский университет, Санта-Крус, доктор философии. диссертация, 240 с., ил., карты.
    Купер, Дж. П., 1984
    Купер, Дж.П., 1984, Осадочные процессы, фации и скорость накопления в ледниках умеренного пояса Аляски: ДеКалб, Иллинойс, Университет Северного Иллинойса, M.S. диссертация, 280 с., ил., карт.
    ОФР 21-84
    Стилл, Дж. К., 1984, Результаты проб меди, золота, платины и палладия из основного / ультраосновного комплекса Клюквана, юго-восток Аляски: Отчет об открытых файлах Горного бюро США 21-84, 53 стр.
    ОФР 118-84
    Стилл, Дж.C., 1984, Стратиформные массивные сульфидные месторождения в районе горы Генри Клей, юго-восток Аляски: Отчет о открытых файлах Горного бюро США 118-84, 65 стр.
    РИ 84-31
    Редман, Е.К., Ретерфорд, Р.М., и Хикок, Б.Д., 1984, Геология и геохимия четырехугольника Скагуэй B-2, юго-восточная Аляска: Отдел геолого-геофизических исследований Аляски Отчет об исследовании 84-31, 34 стр., 4 листа , масштаб 1:40 000. https://doi.org/10.14509/2390
    ОФР 173-84
    Стилл, Дж.К., Вейр, К. Р., Гилберт, У. Г., и Редман, Эрл, 1984, Отбор проб отложений, поплавков и коренных пород в районе добычи Поркьюпайн, юго-восток Аляски: Отчет горнодобывающего управления США в открытых файлах 173-84, 6 стр. , 1 лист, масштаб 1: 250 000.
    РИ 83-17
    Комбеллик Р.А. и Лонг У.Э., 1983, Геологические опасности на юго-востоке Аляски: обзор: Отчет об исследованиях Отдела геолого-геофизических исследований Аляски 83-17, 17 стр. https://doi.org/10.14509/2356
    MF 1456
    Карлсон, П.Р., Молния, Б.Ф., Пост, Остин, Уиллер, М.К., и Пауэлл, Р.Д., 1983 г., Карты, показывающие толщину и батиметрию постнеогляциальных отложений в заливе Тарр, залив Глейшер, Аляска: Геологическая служба США, Карта различных полевых исследований 1456, 1 лист, масштаб 1: 31,680.
    Хайни, Дж. С., 1983
    Heiny, J.S., 1983, Характеристики отложений быстро отступающих долинных ледников: ДеКалб, Иллинойс, Университет Северного Иллинойса, M.С. дипломная, 243 с., Ил., Карт.
    Мацкевич Н.Э., 1983 г.
    Mackiewicz, N.E., 1983, Генезис слоистых ледяных отложений ледникового происхождения в заливе Мьюир, Аляска: ДеКалб, Иллинойс, Университет Северного Иллинойса, M.S. диссертация, 168 с., ил., карт.
    Сануси, А.С., 1983
    Sanusi, A.C., 1983, Спрос на сельскохозяйственный известняк и производство предложения на Аляске: Университет Аляски в Фэрбенксе, M.S. диссертация, 108 с., ил., карт.
    РИ 83-14
    March, G.D., 1983, Фотоинтерпретирующая карта поверхностной геологии четырехугольника Скагуэй А-1, Аляска: Отчет отдела геологических и геофизических исследований Аляски об исследованиях 83-14, 1 лист, масштаб 1: 63 360. https://doi.org/10.14509/2353
    ИЗ 82-929
    Брунс, Т.Р., 1982, Структура и нефтегазовый потенциал континентальной окраины между Кросс-Саунд и Айси-Бей, северная часть залива Аляска: Отчет геологической службы США 82-929, 64 стр.
    П 1258-С
    Браун К.С., Мейер М.Ф. и Пост, Остин, 1982, Скорость отела ледников приливной воды Аляски, применительно к леднику Колумбия: Профессиональный документ геологической службы США 1258-C, стр. С1-С13, 4 л.
    Гудвин, Р.Г., 1982
    Гудвин, Р.G., 1982, Неогляциальное озерное осаждение и продвижение льда, Глейшер-Бэй, Аляска: Колумбус, Огайо, Университет штата Огайо, доктор философии. диссертация, 254 с., ил., карты.
    Карл С.М., 1982
    Карл С.М., 1982, Геохимические и осадочные среды верхних мезозойских радиоляционных кремней северо-восточной части Тихого океана и кернов Тихоокеанского DSDP: Пало-Альто, Калифорния, Стэнфордский университет, доктор философии.Докторская диссертация, 245 с., Ил. (немного цвета), карты.
    AOF 159
    March, G.D., 1982, Фотоинтерпретирующая карта поверхностной геологии четырехугольника Скагуэй B-1, Аляска: Отдел геолого-геофизических исследований Аляски Отчет открытого файла Аляски 159, 1 лист, масштаб 1: 63 360. https://doi.org/10.14509/93
    AOF 161
    March, G.D., 1982, Фотоинтерпретирующая карта поверхностной геологии четырехугольника Скагуэй B-2, Аляска: Отдел геолого-геофизических исследований Аляски Отчет открытого файла Аляски 161, 1 лист, масштаб 1: 63 360.https://doi.org/10.14509/96
    ИЗ 81-82-А
    Кобб E.H., 1981, Обобщение данных и списки ссылок на металлические и отдельные неметаллические минеральные месторождения в Четырехугольнике Скагуэй, Аляска, дополнение к отчету открытого файла 78-316; Часть A, Сводка данных до 1 января 1980 г .: Отчет геологической службы США 81-82-A, 10 стр.
    ИЗ 81-82-Б
    Кобб, E.H., 1981, Обобщение данных и списки ссылок на металлические и отдельные неметаллические минеральные месторождения в Четырехугольнике Скагуэя, Аляска, дополнение к отчету открытого файла 78-316; Часть B, Списки ссылок на 1 января 1980 г .: U.С. Отчет геологической службы 81-82-Б, 9 стр.
    ИЗ 81-122
    Берг, Х.С., Декер, Дж. Э. и Абрамсон, Б.С., 1981, Металлические месторождения полезных ископаемых юго-востока Аляски: Отчет геологической службы США в открытом файле 81-122, 136 стр., 1 лист, масштаб 1: 1 000 000.
    ИЗ 81-505
    Decker, John, Mullen, M.W., and Schwab, C.E., comps., 1981, Карта аэромагнитного профиля юго-восточной Аляски: Отчет геологической службы США 81-505, 1 лист, масштаб 1: 1000000.
    MF 1048
    Брю Д.А., Моррелл Р.П., 1980, Предварительная карта интрузивных горных пород на юго-востоке Аляски: Геологическая служба США, карта различных полевых исследований 1048, 1 лист, масштаб 1: 1 000 000.
    ИЗ 80-78
    Брю Д.А., Моррелл Р.П., 1980, Интрузивные породы и плутонические пояса юго-востока Аляски, США: Отчет геологической службы США в открытом доступе 80-78, 34 стр.
    ИЗ 80-698
    Стилл П.J., 1980, Индекс рекордов стока и качества воды до 30 сентября 1978 г., юго-восток Аляски: Отчет геологической службы США 80-698, 26 стр.
    С 804-В
    Плафкер, Джордж, Хадсон, Трэвис и Силберлинг, штат Нью-Джерси, 1979, окаменелости позднего триаса из последовательности вулканических и осадочных пород на полуострове Чилкат, на юго-востоке Аляски, в Джонсоне, К. М., и Уильямсе, Дж. Р., ред., США. Государственная геологическая служба на Аляске; Достижения за 1978 год: У.S. Циркуляр геологической службы 804-B, стр. B107-B109.
    С 804-В
    Брю, Д.А., Грибек, Дональд и Джонсон, Б.Р., 1979, Сводная информация о минеральных ресурсах, Область изучения дикой природы национального памятника Глейшер-Бей, юго-восточная Аляска, в Джонсоне, штат Коннектикут, и Уильямс, младший, ред., Геологическая служба США на Аляске; Достижения за 1978 год: Циркуляр Геологической службы США 804-B, стр. B112-B113.
    С 804-В
    Карлсон, П.Р., Уиллер, М.С., Молния, Б.Ф., и Этвуд, Т.Дж., 1979, Неогляциальные отложения в Глейшер-Бэй, Аляска, Джонсон, К.М., и Уильямс, Дж. Р., ред., Геологическая служба США на Аляске; Достижения за 1978 год: Циркуляр Геологической службы США 804-B, стр. B114-B115.
    ИЗ 79-594
    Уилсон, Ф.Х., Дадисман, С.В., и Херзон, П.Л., 1979, Карта, показывающая радиометрический возраст горных пород на юго-востоке Аляски: Отчет геологической службы США 79-594, 33 стр., 1 лист.
    ИЗ 79-953
    Хадсон, Трэвис, 1979, Кальциево-щелочной плутонизм вдоль тихоокеанского побережья южной Аляски: Отчет геологической службы США 79-953, 31 стр.
    ИЗ 79-1694
    Декер, Джон, 1979, Предварительная аэромагнитная карта юго-востока Аляски: Отчет геологической службы США 79-1694, 1 лист, масштаб 1: 1,000,000.
    Миллер Р.К., 1979 г.
    Миллер Р.K., 1979, Количественный анализ линеаментов побережья Британской Колумбии и юга Аляски между 48-й и 60-й параллелями с использованием фотомозаичных изображений Landsat: Ванкувер, Британская Колумбия, Канада, Университет Британской Колумбии, B.S. диссертация, 29 с.
    МП 12
    Робинсон, М.С., Бундцен, Т.К., 1979, Историческое производство золота на Аляске - краткое изложение: Отдел геологических и геофизических исследований Аляски Разное Публикация 12, 10 стр.https://doi.org/10.14509/697
    ИЗ 78-316
    Кобб E.H., 1978, Сводка ссылок на месторождения полезных ископаемых (кроме минерального топлива и строительных материалов) в четырехугольниках горы Фэйрвезер и Скагуэй, Аляска: Отчет геологической службы США 78-316, 127 стр.
    ИЗ 78-495
    Johnson, B.R., 1978, Статистический анализ геохимических данных национального памятника Глейшер-Бэй, Аляска: U.С. Отчет геологической службы № 78-495, 16 стр., 26 листов, масштаб 1: 250 000.
    МП 17
    Бундцен, Т.К., и Хеннинг, М.В., 1978, Барит на Аляске: Отдел геолого-геофизических исследований Аляски Разное издание 17, 4 стр. https://doi.org/10.14509/702
    ИЗ 78-1085
    Берг, Х.С., Джонс, Д.Л., Кони, П.Дж., 1978, Карта, показывающая докайнозойские тектоностратиграфические террейны юго-востока Аляски и прилегающих территорий: U.S. Отчет геологической службы в открытом доступе 78-1085, 2 листа, масштаб 1: 1 000 000.
    Честейн, C.E., 1976
    Честейн, C.E., 1976, Гидродинамические процессы и эрозия морских скал / платформ, Фаворитный канал, Аляска: Калифорнийский университет, Санта-Круз, доктор философии. диссертация, 75 с., ил., 1 карта.
    SR 12
    Икинс, Г.Р., и Форбс, Р.Б., 1976, Исследование уранового потенциала Аляски: Специальный отчет Отдела геолого-геофизических исследований Аляски 12, 372 стр., 5 листов, масштаб 1: 1 000 000. https://doi.org/10.14509/2611
    MF 673
    Beikman, H.M., comp., 1975, Предварительная геологическая карта юго-востока Аляски: Геологическая служба США. Карта разных полевых исследований 673, 2 листа, масштаб 1: 1 000 000.
    ИЗ 75-6
    Barnes, D.F., 1975, карты гравиметрических данных USGS Аляски в Порт-Александер, Ситка, Джуно, Маунт-Фэйрвезер и Скагуэй 1: 250 000 четырехугольников, Аляска: U.С. Отчет геологоразведки 75-6, 58 стр., 5 листов, масштаб 1: 250 000.
    AOF 82
    Уилсон, Ф.Х., и Тернер, Д.Л., 1975, Радиометрическая возрастная карта юго-востока Аляски: Отдел геолого-геофизических исследований Аляски Отчет открытого файла Аляски 82, 12 стр., 1 лист, масштаб 1: 1 000 000. https://doi.org/10.14509/178
    ГР 44
    Икинс, Г.Р., 1975, Исследования урана на юго-востоке Аляски: Отдел геолого-геофизических исследований Аляски Геологический отчет 44, 62 стр.https://doi.org/10.14509/372
    SR 10
    Тернер Д.Л., Грибек, Дональд и Уилсон, Ф.Х., 1975, Радиометрические даты с Аляски: сборник 1975 года: Специальный отчет Отделения геолого-геофизических исследований Аляски 10, 66 с. https://doi.org/10.14509/2609
    P 832
    MacKevett, E.M., младший, Робертсон, E.C., и Winkler, G.R., 1974, Геология четырехугольников Skagway B-3 и B-4, юго-восток Аляски: U.S. Geological Survey Professional Paper 832, 33 стр., 1 лист, масштаб 1: 63 360.
    AOF 47
    МакГи, Д.Л., 1974, Оценка месторождений полезных ископаемых в Национальном памятнике Глейшер-Бей: Отдел геолого-геофизических исследований Аляски Отчет открытого файла Аляски 47, 17 стр., 1 лист, масштаб 1: 250 000. https://doi.org/10.14509/147
    Конли, С.М., 1973
    Конли, С.М., 1973, Распространение диатомовых водорослей во внутреннем проходе Аляски: Орегонский университет, Юджин, М.С. диссертация, 186 с.
    MF 424
    Кобб, E.H., comp., 1972, Карта минеральных ресурсов металлов четырехугольника Скагуэй, Аляска: Геологическая служба США, карта 424 различных полевых исследований, 1 лист, масштаб 1: 250,000.
    ИЗ 72-17
    Barnes, D.F., 1972, Sixteen 1: 250 000 простых карт гравитационных аномалий Буге на юго-востоке Аляски, показывающих расположение станций, значения аномалий и обобщенные 10-миллигалонные контуры: U.S. Отчет геологической службы 72-17 открытого типа, 16 листов, масштаб 1: 250 000.
    ИЗ 72-18
    Барнс, Д.Ф., 1972, сеть гравитационных станций на юго-востоке Аляски: Отчет геологической службы США 72-18, 40 стр.
    ИЗ 72-19
    Барнс, Д.Ф., 1972, Сводный оперативный отчет предварительной гравиметрической съемки юго-восточной Аляски: Отчет Геологической службы США в открытом файле 72-19, 12 стр.
    ИЗ 72-20
    Барнс, Д.Ф., Олсон, Р.С., Холден, К.Д., Морин, Р.Л., и Эрвин, М.Дж., 1972, Табулированные гравиметрические данные на юго-востоке Аляски, полученные в течение полевого сезона 1968 года: Отчет Геологической службы США в открытом доступе 72-20, 76 стр.
    ИЗ 72-21
    Барнс, Д.Ф., Попено, Питер, Олсон, Р.К., Маккензи, М.В., и Морин, Р.Л., 1972, Табличные данные силы тяжести на юго-востоке Аляски, полученные в течение полевого сезона 1969 г .: Отчет Геологической службы США в открытом доступе 72-21, 75 стр. .
    ИЗ 72-230
    Лемке Р.W., and Yehle, L.A., 1972, Региональные и другие общие факторы, влияющие на оценку землетрясений и других геологических опасностей для прибрежных сообществ юго-востока Аляски: Отчет геологической службы США 72-230, 99 стр.
    П 800-Б
    Джонс, Д.Л., Ирвин, В.П., и Овеншайн, А.Т., 1972, Юго-Восточная Аляска; смещенный континентальный фрагмент ?, в Геологической службе США, Геологическое исследование 1972 г., Глава B: Документ профессионала геологической службы США 800-B, стр.B211-B217.
    П 800-Д
    Берг, Х.С., Джонс, Д.Л., Рихтер, Д.Х., 1972, Пояс Гравина-Нутзотин; тектоническое значение осадочной и вулканической толщи верхнего мезозоя на юге и юго-востоке Аляски, Геологическая служба США, Геологические исследования 1972 г., Глава D: Документ профессионала геологической службы США 800-D, стр. D1-D24.
    Джонсон, С.Х., 1972 г.
    Джонсон, С.Х., 1972 г., Структуры земной коры и тектонизм на юго-востоке Аляски и западной Британской Колумбии по измерениям сейсмической рефракции, сейсмического отражения, силы тяжести, магнитного поля и микроземлетрясений: Корваллис, Орегон, Государственный университет Орегона, доктор философии. диссертация, 129 с., ил., карты.
    Роджерс, Г.К., 1972 г.
    Rogers, G.C., 1972, Исследование роя микроземлетрясений: Гавайский университет, Гонолулу, M.С. дипломная, 104 с., Ил., Карт.
    ИЗ 72-454
    Йехле, Л.А., и Лемке, Р.В., 1972, Инженерно-разведывательная геология района Скагуэй, Аляска, с акцентом на оценку землетрясений и других геологических опасностей: Отчет Геологической службы США в открытом доступе 72-454, 108 стр., 4 листа , масштаб 1: 96 000.
    ИЗ 72-229
    Лемке Р.В. и Йехле Л.А., 1972, Инженерная разведка геологии района Хейнс, Аляска, с упором на оценку землетрясений и других геологических опасностей: У.С. Отчет Геологической службы 72-229, 109 стр., 2 л., Масштаб 1:24 000.
    P 632
    MacKevett, EM, Jr., Brew, DA, Hawley, CC, Huff, LC, and Smith, JG, 1971, Минеральные ресурсы национального памятника Glacier Bay, Аляска: US Geological Survey Professional Paper 632, 90 стр., 12 листов , масштаб 1: 250 000.
    ИЗ 71-195
    MacKevett, E.M., Jr., 1971, Анализы проб и предварительное геологическое резюме месторождений барит-серебро-неблагородных металлов возле Глейшер-Крик, четырехугольник Скагуэй B-4, юго-восток Аляски: U.С. Отчет геологической службы 71-195, 8 стр.
    Иган, К.П., 1971
    Иган, К.П., 1971, Вклад в позднюю неогляциальную историю канала Линн и сектора долины Таку пограничного хребта Аляски: Ист-Лансинг, Мичиган, Университет штата Мичиган, доктор философии. диссертация, 200 стр., ил., карты, 16 складных карт.
    Микельсон, Д.М., 1971
    Микельсон, Д.М., 1971, Ледниковая геология области ледника Берроуза, юго-восточная Аляска: Колумбус, Огайо, Университет штата Огайо, доктор философии. диссертации, 238 с., схемы (3 в кармане), ил.
    HA 455
    Пост, Остин и Мэйо, Л.Р., 1971, Озера, перекрытые ледниками, и прорывные наводнения на Аляске: Атлас гидрологических исследований Геологической службы США 455, 10 стр., 3 листа, масштаб 1: 1 000 000.
    SR 19
    Maher, J.C., и Trollman, W.М., 1971, Геологическая литература по заливу и юго-восточным прибрежным районам Аляски: Специальный отчет Отдела геологической службы Аляски 19, 136 с. https://doi.org/10.14509/2618
    С 626
    МакКонаги, Дж. А., 1970, Разведка водных ресурсов в районе Хейнс-Порт-Чилкут, Аляска: Циркуляр Геологической службы США 626, 16 стр.
    ИЗ 70-369
    Винклер, Г.С. Отчет геологической службы 70-369, 91 стр., 1 лист, масштаб 1: 250 000.
    Слатт, Р.М., 1970
    Слатт Р.М., 1970, Седиментологические и геохимические аспекты отложений и воды десяти ледников долины Аляски: Университет Аляски Фэрбенкс, доктор философии. диссертация, 127 с.
    Бэнкс, E.R., 1969
    Бэнкс, Э.Р., 1969, Изостатические и гравитационные аномалии Буге вдоль Внутреннего прохода Аляски и Британской Колумбии: Корваллис, Орегон, Государственный университет Орегона, M.S. диссертация, 56 с.
    Буше, Г. В., 1969
    Баучер, Г.В., 1969, Три исследования микроземлетрясений: I, Сейсмичность микроземлетрясений разлома Денали; II, Исследования микроземлетрясений в Неваде; III, Землетрясения, связанные с подземными ядерными взрывами: Техасский университет, Остин, доктор философии.Докторская диссертация, 125 с.
    Петерсон, Д.Н., 1969
    Петерсон, Д.Н., 1969, Гляциологические исследования ледника Кейсмент, юго-восточная Аляска: Колумбус, Огайо, Университет штата Огайо, доктор философии. диссертация, 183 с., ил., карты.
    Рид, Дж. К., 1969
    Рид, Дж. К., 1969, Оценка месторождения молибдена в Глейшер-Бэй, Аляска: Тускон, Аризона, Университет Аризоны, М.С. дипломная, 56 с., Ил. (немного цвета), карта.
    ГР 38
    Икинс Г. https://doi.org/10.14509/367
    ИЗ 68-58
    Кобб, E.H., 1968, Карта металлических минеральных ресурсов четырехугольника Скагуэй, Аляска: Отчет геологической службы США 68-58, 4 стр., 1 лист, масштаб 1: 250 000.
    I 484
    Плафкер, Джордж, 1967, Геологическая карта третичной провинции залива Аляска, Аляска: U.С. Геологическая служба Разное Геологические исследования Карта 484, 1 лист, масштаб 1: 500 000.
    Фрирс, Ф.Т., 1966 г.
    Freers, F.T., 1966, Структурное и морфогенетическое исследование ледника Воан-Льюис и прилегающих секторов ледового поля Джуно, Аляска: Ист-Лансинг, Мичиган, Университет штата Мичиган, M.S. диссертация, 132 с.
    Смит, Р.К., 1966 г.
    Смит, Р.K., 1966, Glacio-marine Foraminifera Британской Колумбии и юго-востока Аляски: Ванкувер, Британская Колумбия, Канада, Университет Британской Колумбии, доктор философии. диссертация, [vi], 229 с., 22 с. плит.
    Б 1211-А
    Каллахан, Дж. Э., и Вэйланд, Р. Г., 1965, Геологическая разведка плотины Вест-Крик около Скагуэя, Аляска: Бюллетень геологической службы США 1211-A, стр. А1-А13, 1 л.
    CH 6
    Герберт, К.Ф., и Рэйс, У.Х., 1965, Геохимические исследования выбранных территорий на юго-востоке Аляски, 1964 и 1965: Геохимический отчет Аляскинского отдела горнодобывающей промышленности и полезных ископаемых 6, 67 стр., 5 листов. https://doi.org/10.14509/241
    Уэлч, Р.А., 1964
    Уэлч, Р.А., 1964, Форма и происхождение форм рельефа, образовавшихся во время разрушения ледника Кейсмент, Аляска: Университет Оклахомы, Норман, магистерская диссертация, 95 с.
    RI 6497
    Холмс, В.Т., и Баннинг, Л.Х., 1964, Электроплавка титаносодержащих железных руд из Аляски, Монтаны и Вайоминга: Отчет о исследованиях Бюро горнодобывающей промышленности США 6497, 23 стр.
    CH 1
    Герберт К.Ф. и Рэйс У.Х., 1964, Геохимические исследования выбранных территорий на юго-востоке Аляски, 1964: Геохимический отчет Аляскинского отдела шахт и полезных ископаемых 1, 75 стр. https://doi.org/10.14509/236
    В 1155
    Фриман В.Л., 1963, Исследование перспективных месторождений урана, 1956, в Геологической службе США, Вклад в экономическую геологию Аляски: Бюллетень Геологической службы США 1155, стр. 29-33.
    ПЭ 109-5
    Race, W.H., 1963, H. Stelting iron prospect, Haines Alaska, Skagway quadrangle: Alaska Division of Mines and Minerals Prospect Evaluation 109-5, 7 стр. https://doi.org/10.14509/2119
    П 450-С
    Остенсо, Н.А. и Холмс, GW, 1962, Гравиметрические определения толщины льда ледника Джарвис, Аляска, в US Geological Survey, Geological Survey Research 1962, Краткие статьи по геологии, гидрологии и топографии, Статьи 60-119: US Geological Survey Professional Документ 450-С, стр. C93-C96.
    Тейлор, Л. Д., 1962
    Тейлор, Л.Д., 1962, Ледяные структуры, ледник Берроуз, юго-восточная Аляска: Колумбус, Огайо, Университет штата Огайо, доктор философии.Докторская диссертация, 203 с. (некоторые в сложенном виде), ил., карты (некоторые в сложенном виде).
    MR 195-36
    Аноним, 1962, Сводный отчет группы исследования горных работ на Аляске: Разное отделение горнодобывающей промышленности и полезных ископаемых Аляски, 195-36, 10 стр., 21 лист. https://doi.org/10.14509/1027
    ИЗ 61-100
    Миллер, Д.Дж., 1961, Геология района Литуйя, Третичная провинция залива Аляска, Аляска: Отчет геологической службы США в открытом файле 61-100, 1 лист, масштаб 1: 96,000.
    Брюн, Дж. Н., 1961
    Брюн, Дж. Н., 1961, Диаграмма излучения волн Рэлея от землетрясения на юго-востоке Аляски 10 июля 1958 г .: Нью-Йорк, Нью-Йорк, Колумбийский университет, педагогический колледж, доктор философии. диссертация, 11 стр., ил.
    ПЭ 109-4
    Herreid, G.H., 1961, Отчет о предварительном исследовании известняковой собственности Мори-Куинлан-Тенгс около Мили 39, Хайнс-Хайвей, четырехугольник Скагуэй: Подразделение горнодобывающей промышленности и полезных ископаемых Аляски Оценка перспективы 109-4, 4 стр.https://doi.org/10.14509/2118
    П 400-Б
    Берг, Х.К., 1960, Три области возможного потенциала минеральных ресурсов на юго-востоке Аляски, Геологическая служба США, Геологические исследования 1960, Краткие статьи по геологическим наукам: Документ профессионала геологической службы США 400-B, стр. B38-B39.
    В 1082-С
    Карр, М.С., и Даттон, С.Э., 1959, Ресурсы железной руды США, включая Аляску и Пуэрто-Рико, 1955: U.С. Бюллетень геологической службы 1082-С, стр. 61-134.
    IC 7844
    Кауфман А., 1958, Минеральная промышленность Юго-Восточной Аляски: Информационный циркуляр 7844 Горного управления США, 37 стр.
    ИЗ 56-101
    Робертсон, E.C., 1956, Месторождения магнетита около Клюквана и Хейнса, Аляска: Отчет геологической службы США 56-101, 37 стр., 10 листов.
    ИК 195-50
    Уильямс, Дж.A., 1956, Маршрутный отчет - Скагуэй и Хейнс, 18–20 апреля: Маршрутный отчет Территориального управления шахт Аляски 195-50, 2 стр. https://doi.org/10.14509/592
    ПЭ 109-3
    Williams, J.A., 1956, претензия Albill No. 2, Skagway Quadrangle, радиоактивные вещества: Территориальный департамент горнодобывающей промышленности Аляски, оценка перспективы 109-3, 8 стр. https://doi.org/10.14509/2117
    MR 109-2
    Смит, Александр, 1954, Клюкванские месторождения железа (Хейнс): Территориальный департамент шахт Аляски Разное сообщение 109-2.https://doi.org/10.14509/883
    РИ 4984
    Уэллс Р.Р. и Торн Р.Л., 1953, Концентрация Клюквана, Аляска, магнетитовая руда: Отчет о исследованиях Горного бюро США, 4984, 15 стр.
    ПЭ 109-2
    Уильямс, Дж. А., 1953, Посещение месторождения магнетита Аляски Айрон Компани в Клюкване, Аляска, 14 сентября 1953 г .: Оценка перспективных месторождений Аляски территориальным департаментом 109-2, 3 стр. https: // doi.org / 10.14509 / 2116
    Баркер, Фред, 1952 г.
    Баркер, Фред, 1952, Батолит Берегового хребта между Хейнсом, Аляска, и озером Беннетт, Британская Колумбия: Пасадена, Калифорния, Калифорнийский технологический институт, M.S. диссертация, 45 с.
    MR 109-3
    Баркер, Фред, 1952, Батолит прибрежного хребта между Хейнсом, Аляска и озером Беннетт, Британская Колумбия: Территориальный департамент шахт Аляски Разное сообщение 109-3, 48 стр., 2 листа, масштаб 1 дюйм = 2 мили. https://doi.org/10.14509/884
    ПЭ 109-1
    Уильямс, Дж. А., 1952, Предварительное исследование месторождения магнетита Аляски Айрон Компани возле Клюквана в районе записи Хейнс: Территориальный департамент горнодобывающей промышленности Аляски Оценка перспектив 109-1, 3 стр. https://doi.org/10.14509/2115
    ИК 195-6
    Фаулер, Х.М., 1950, Отчет об исследованиях в районах Хайдер, Кетчикан, Врангель, Петербург, Джуно, Ситка и Скагуэй: Отчет о маршруте территориального управления шахт Аляски 195-6, 29 стр.https://doi.org/10.14509/548
    MR 195-1
    Гловер A.E., 1950, Проба россыпного золота: Разное отчет 195-1, 90 стр. https://doi.org/10.14509/990
    Б 963-А
    Твенхофель, У.С., Рид, Дж. К., Гейтс, Г.О., 1949, Некоторые исследования минералов на юго-востоке Аляски: Бюллетень геологической службы США 963-A, стр. 1-44, 1 л.
    ИК 195-4
    Фаулер, Х.М., 1949, Отчет об исследованиях в горных районах Врангеля, Петербурга и Скагуэя: Маршрутный отчет территориального управления горнодобывающей промышленности Аляски 195-4, 4 стр. https://doi.org/10.14509/546
    MR 191-8
    Hodge, E.T., 1944, Известняковая местность на юго-восточном побережье Аляски: Разное отчет территориального управления горнодобывающей промышленности Аляски 191-8, 17 стр., 2 листа, масштаб 1 дюйм = 40 миль. https://doi.org/10.14509/957
    MR 191-5
    Рём, Дж.К., 1943 г., Стратегические и критические месторождения полезных ископаемых на юго-востоке Аляски: Разное отчет о горнодобывающем управлении территории Аляски, 191-5, 98 стр., 11 листов. https://doi.org/10.14509/954
    MR 195-2
    Территориальный департамент горнодобывающей промышленности Аляски, 1938, Меморандум о месторождениях молибденита на Аляске: Территориальный департамент горнорудной промышленности Аляски Разное отчет 195-2, 10 стр. https://doi.org/10.14509/991
    Битти, У. Б., 1937 г.
    Битти, В.Б., 1937 г., Геология россыпных месторождений Поркьюпайн, Аляска: диссертация на соискание степени бакалавра наук в области горного дела, инженерии и геологии: Вашингтонский университет, Сиэтл, B.S. диссертация, 97 с.
    В 836
    Хеншоу, Ф.Ф., 1933, Поверхностное водоснабжение юго-востока Аляски, в Геологической службе США, Минеральные ресурсы Аляски, отчет о ходе исследований в 1930 году: Бюллетень геологической службы США 836, стр. 137-218.
    B 800
    Баддингтон, А.Ф., и Чапин, Теодор, 1929, Геология и месторождения полезных ископаемых юго-востока Аляски: Бюллетень Геологической службы США 800, 398 стр., 2 листа, масштаб 1: 500 000.
    MR 109-1
    Стюарт, Б.Д., 1926, Заметки по россыпным работам в районе Поркьюпайн, округ Скагуэй: Территориальный департамент шахт Аляски Разное сообщение 109-1, 5 стр. https://doi.org/10.14509/882
    В 722
    Кэнфилд, Г.Х., 1922, Исследования гидроэнергетики на юго-востоке Аляски, в U.S. Geological Survey, Минеральные ресурсы Аляски, отчет о ходе исследований в 1920 г .: Бюллетень Геологической службы США 722, стр. 75-116.
    В 682
    Burchard, E.F., и Chapin, Theodore, 1920, Мраморные ресурсы юго-востока Аляски: Бюллетень геологической службы США 682, 118 стр.
    В 692
    Кэнфилд, Г.Х., 1919, Исследования гидроэнергетики на юго-востоке Аляски, в Геологической службе США, Минеральные ресурсы Аляски, отчет о ходе исследований в 1917 году: U.С. Бюллетень геологической службы 692, с. 43-84.
    Б 699
    Икин, Х.М., 1919, Район россыпи золота Поркьюпайн, Аляска: Бюллетень геологической службы США 699, 29 стр.
    В 662
    Кэнфилд, Г.Х., 1918, Исследования гидроэнергетики на юго-востоке Аляски, в Бруксе, А.Х., и др., Минеральные ресурсы Аляски, отчет о ходе исследований в 1916 году: Бюллетень геологической службы США 662, стр. 101-154.
    В 662
    Икин, Х.М., 1918, Добыча россыпей золота в районе Поркьюпайн, в Бруксе, А.Х. и др., Минеральные ресурсы Аляски, отчет о ходе исследований в 1916 году: Бюллетень геологической службы США 662, стр. 93-100, 1 л.
    В 642
    Canfield, G.H., 1916, Исследования гидроэнергетики на юго-востоке Аляски, в Геологической службе США, Минеральные ресурсы Аляски, отчет о ходе исследований в 1915 году: U.С. Бюллетень геологической службы 642, с. 105-128.
    B 592
    Burchard, E.F., 1914, Мраморные ресурсы районов Джуно, Скагуэй и Ситка, Геологическая служба США, Минеральные ресурсы Аляски, отчет о ходе исследований в 1913 году: Бюллетень геологической службы США 592, стр. 95-107.
    Уильямс, Ф.Э., 1912 г.
    Уильямс, F.E., 1912, Фьорды на юго-востоке Аляски: Университет Висконсина, Мэдисон, М.С. тезис, 42 с., Ил.
    В 442
    Кнопф, Адольф, 1910, Прохождение железной руды возле Хейнса, в Геологической службе США, Минеральные ресурсы Аляски, отчет о ходе исследований в 1909 году: Бюллетень Геологической службы США 442, стр. 144-146.
    В 442
    Hoyt, J.C., 1910, Отчет о гидроэнергетической разведке на юго-востоке Аляски, в Геологической службе США, Минеральные ресурсы Аляски, отчет о ходе исследований в 1909 году: U.С. Вестник Геологической службы 442, с. 147-157.
    В 314
    Wright, C.W., 1907, Lode mining на юго-востоке Аляски, в Геологической службе США, Отчет о ходе исследований минеральных ресурсов Аляски в 1906 году: Бюллетень Геологической службы США 314, стр. 47-72.
    В 287
    Спенсер, А.С., 1906, Золотой пояс Джуно, Аляска: Бюллетень Геологической службы США 287, 161 стр., 3 листа.
    В 225
    Райт, К.W., 1904, Район разработки россыпи Поркьюпайн, Аляска, в Геологической службе США, Вклад в экономическую геологию, 1903: Бюллетень Геологической службы США 225, стр. 60-63.
    В 236
    Wright, C.W., 1904, Россыпь Дикьюпайн, Аляска: Бюллетень Геологической службы США 236, 35 стр.
    AR 21-II
    Brooks, A.

    Оставить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *