Гл 30 гк рф: Глава 30 ГК РФ. Купля-продажа

¹ Отделения педиатрии и микробиологии и Иммунология, Медицинский факультет Стэнфордского университета, Стэнфорд, Калифорния,-5208

Эдвард Ян

¹ Кафедры педиатрии и микробиологии и Иммунология, Медицинский факультет Стэнфордского университета, Стэнфорд, Калифорния,-5208

Энн М.Арвин

¹ Кафедры педиатрии и микробиологии и Иммунология, Медицинский факультет Стэнфордского университета, Стэнфорд, Калифорния,-5208

¹ Кафедры педиатрии и микробиологии и Иммунология, Медицинский факультет Стэнфордского университета, Стэнфорд, Калифорния,-5208

Abstract

Вирус ветряной оспы (VZV), альфа-герпесвирус, вызывающий ветряную оспу (ветряная оспа) и опоясывающий лишай (опоясывающий герпес) — важный с медицинской точки зрения патоген, который вызывает значительную заболеваемость, а иногда и смертность у пациентов с ослабленным иммунитетом. пациенты.Опоясывающий герпес может поражать пожилых людей тяжелым заболеванием, постгерпетическая невралгия, вызывающая сильную, неизлечимую боль в течение месяцев или лет. Липидная оболочка VZV, как и всех герпесвирусов, содержит множество гликопротеины, необходимые для репликации и патогенеза.

Цель обзора

Обобщить текущие знания о гликопротеинах VZV и их роли во входе в клетки, репликации и патогенезе.

Последние результаты

Функции некоторых гликопротеинов VZV известны, например, gB, gH. и gL в слиянии мембран, регуляции слияния клеток и рецепторов характеристики.Однако молекулярные механизмы, которые запускают или опосредуют VZV гликопротеины остаются плохо изученными.

Резюме

Гликопротеины VZV играют ключевую роль в успешной репликации, но их modus operandi во время репликации и патогенеза остается неуловимым, требуя дальнейшие механистические исследования.

Ключевые слова: Вирус ветряной оспы, гликопротеин, рецептор, слияние, репликация, патогенез

Введение

Вирус ветряной оспы (VZV) представляет собой патогенный альфа-герпесвирус человека, который вызывает ветряную оспу (ветряную оспу), везикулярный экзантус у детей и опоясывающий лишай (опоясывающий лишай), тяжелая экзантема, которая обычно ограничивается одним дерматомом в взрослые [1].VZV является одновременно лимфотропным и нейротропный, но инициирует первичную инфекцию эпителия слизистой оболочки через респираторные капли или везикулярная жидкость инфицированных людей [2]. Виремия, связанная с Т-клетками, распространяет VZV к коже хозяина, что приводит к образованию характерных пузырьков [3]. Нейроны в коже, которые соединяются с ганглии сенсорных нервов впоследствии инфицированы, что приводит к латентному резервуару VZV, сохраняющийся всю жизнь хозяина. Ослабление иммунитета к VZV делает хозяина чувствительны к реактивации VZV из латентно инфицированных нейронов, вызывая опоясывающий лишай [4–7].Пациенты, пораженные опоясывающим герпесом, 27–73% будут развивается постгерпетическая невралгия (ПГН), которая зависит от возраста [7]. ПГН не поддается лечению и характеризуется тяжелым боль, которая может длиться от нескольких дней до месяцев, а у 48% пациентов старше возраста из 70, он может длиться более года.

Геном двухцепочечной ДНК VZV кодирует 70 известных уникальных открытых считываний. кадры (ORF), из которых 11 кодируют гликопротеины (). Эти связанные с мембраной белки гликозилируются через N — или O -связанные сахара, и многие из них известны как включены в оболочку вирионов VZV [8].Между VZV и другими участниками есть несколько важных отличий. из Alphaherpesvirinae . В дополнение к кодируемым гликопротеинам с помощью VZV вирусы простого герпеса (HSV) кодируют три других гликопротеина, gD (закодированный уникальным коротким замыканием 6 (U _S 6)), gG, (U _S 4) и gJ (U _S 5), что могло бы объяснить разные тропизмы HSV и VZV [9]. В настоящее время признано, что гликопротеины вируса герпеса использовать канонические клеточные процессы для их синтеза и посттрансляционного модификации и синтезируются в эндоплазматическом ретикулуме (ER), перемещаются в Гольджи и попадает на поверхность клетки через везикулы.Поверхность клетки гликопротеины затем подвергаются эндоцитозу и транспортируются в транс-Гольджи, сайт Вторичная оболочка частицы VZV (). В настоящее время считается, что основная роль гликопротеинов на мембране вириона заключается в для прямого взаимодействия с белками клеточной поверхности, чтобы обеспечить прикрепление, захват и проникновение VZV в клетки для запуска цикла репликации [9]. Помимо гликозилирования, гликопротеины могут подвергаться дальнейшие посттрансляционные модификации, такие как фосфорилирование и убиквитинирование это может также функционировать в репликации VZV [10-15].

Модель локализации и транспортировки гликопротеинов VZV во время инфекционное заболевание. Предполагается, что VZV использует гликопротеины для связывания рецепторов на поверхности клетки. во время прикрепления (1). Комплекс gB / gH-gL сливает мембрану вириона с клеточной мембраны либо в эндоцитарных пузырьках, либо непосредственно с плазматической мембраной (2). Капсид попадает в цитоплазму и стыкуется с ядерной порой, где геном дцДНК вводится в ядро ​​клетки для инициации репликации (3). Гликопротеины синтезируются в эндоплазматическом ретикулуме (ER) и попадают в к Гольджи во время созревания, подвергается экзоцитозу, затем эндоцитозируется и транспортируется в сеть транс-Гольджи (TGN) (4).Некоторые гликопротеины, включая gB, являются попадает в ядерную оболочку (внутренняя ядерная мембрана, INM; внешняя ядерная мембрана, ONM) и может играть роль в выходе из ядра (5). Гликопротеины поступают из TGN для включения в зарождающийся вирус. частицы (6). По материалам [100].

Таблица 1

Гликопротеины, кодируемые геномом VZV.

VZV есть человеческий хозяин ограничил патоген, что затрудняет исследовать патогенез.Мутагенез для создания рекомбинантных вирусов полезен стратегия для определения требований ORF и белковых мотивов, необходимых для VZV репликация [16–21]. Исследования репликации в клеточной культуре были ценным подход к определению влияния мутаций на инфекцию VZV и размножение in vitro . Однако эффекты мутаций VZV могут не проявляются в культуре клеток, что создает дополнительные проблемы в расшифровке того, как VZV вызывает заболевание. Применение человеческих ксенотрансплантатов у мышей SCID для оценки рекомбинантные мутанты in vivo оказались очень информативными для понимание роли гликопротеинов в патогенезе кожи и нейронов [13, 19, 20, 22–33].Этот в обзоре будет представлен известный вклад гликопротеинов VZV в проникновение вируса, репликация и патогенез. Эти функции также делают гликопротеины VZV важные мишени гуморального и клеточного иммунитета.

Гликопротеины, которые функционируют в прикреплении вириона

Для большинства альфа-герпесвирусов, включая вирус простого герпеса (ВПГ) и вирус псевдобешенства (PRV), можно воспроизводимо генерировать очищенные вирионы с высоким титром, что позволяет производить неинфекционные вирусные частицы, не имеющие специфических гликопротеинов с использованием методик рекомбинантной ДНК [34–39].Этот подход позволяет идентифицировать гликопротеины, которые играют роль в прикреплении вирионов и вход. Из-за чрезвычайно связанной с клетками природы VZV, генерируя воспроизводимый очищенный бесклеточный вирус с высоким титром оказался неуловимым, что исключает использование этого подхода для непосредственного изучения гликопротеинов VZV на входе. Однако делеции gB, gE, gH, gK, gL и ORF39 из космид VZV или бактериальных искусственные хромосомы (БАХ) инактивируют VZV [17, 19, 20, 25, 40].Неясно, действительно ли эти отдельные гликопротеины непосредственно участвуют в прикреплении вирионов к клетке. поверхностных рецепторов, или является ли эффект их удаления результатом препятствования другим шаги вирусной репликации.

Это было выведено из экспериментальных данных с другими вирусами герпеса и клеточные анализы слияния, что гликопротеины VZV gB, gH и gL необходимы для приложение и запись [41–44]. Гликопротеин, связанный с миелином (MAG; Siglec4) было продемонстрировано связываться непосредственно с gB с использованием системы экспрессии Ig. [45].Важно отметить, что MAG имеет высокое содержание аминокислот. идентичность кислоты по сравнению с парным Ig-подобным рецептором типа 2 α (PILRα) белок, который связывается с gB вируса простого герпеса (HSV), что позволяет предположить, что gB альфа-герпесвирусов может связываться с аналогичным классом белков клеточной поверхности. Временная трансфекция MAG в фибробласты усиливает инфекцию как VZV, так и HSV подтверждая гипотезу о консервативной роли гомологов белков клеточной поверхности аналогичен MAG и PILRα. Другой фактор, участвующий в связывании VZV gB к MAG — это участие сиаловых кислот, которые представляют собой разнообразную группу моносахариды, обнаруженные на N — или O -связанных гликанах [46].Потеря связывания сиаловой кислоты сайт на MAG снижает проникновение VZV в клетки, трансфицированные MAG и опосредованные gB / gH-gL клеточное слияние [46]. Однако MAG вряд ли будет единственным рецептором для связывания и слияния gB, поскольку клетки, лишенные MAG, являются все еще восприимчив к инфекции VZV.

Помимо gB, стабильный гетеродимер gH-gL также необходим для слияние мембран, необходимое для входа вириона [19]. Важно отметить, что кристаллическая структура gH-gL связана с человеческими моноклональными антитела, которые нейтрализуют VZV, недавно были разрешены [47].Было обнаружено, что гетеродимер VZV gH-gL имеет структуру более сопоставимы с gH-gL ВПГ, чем gH-gL ВЭБ [47–49]. В то время как функция gH еще не ясна, считается, что эти моноклональные антитела ингибировать связывание gH с поверхностными белками, что в противном случае привело бы к активация gB, которая была предложена для гомологов gB / gH-gL других герпесвирусы [50, 51]. Исследование, проведенное с мышиным моноклональным антителом против gH продемонстрировал эффективность нейтрализации инфекции VZV путем нацеливания на VZV gH-gL [30, 52].Титры вирусов и патологические изменения из-за образования поражений были снижается в ксенотрансплантатах кожи человека, когда мышей-хозяев лечили анти-gH моноклональные антитела (mAb) 206. mAb 24, 94 и RC человеческого происхождения, которые связываются с gH-gL все они обладают нейтрализующими свойствами VZV, что дает дополнительные доказательства о важности gH-gL при инфекции VZV [47, 53, 54]. Интегрины экспрессируются на поверхности клетки и были сообщалось о связывании gH других герпесвирусов [55–58]. Интегрины могут также играют роль в прикреплении и проникновении VZV, потому что ингибирование αV субъединица снижает слияние клеток и ограничивает распространение вируса в культуре клеток. [59].Есть ли нейтрализующая способность mAb 24, 94, 206 и RC против VZV было связано с предотвращением связывания вириона через gH-gL с интегринами клеточной поверхности требует дальнейшего изучения.

Критически важно, что комплекс gB / gH-gL является высококонсервативным на всем протяжении Herpesviridae , что подтверждает идею о том, что эти гликопротеины являются основными компонентами слияния оболочки VZV во время проникновения в клетку. Заметно отсутствует у VZV по сравнению с другими альфа-герпесвирусами, включая HSV и PRV, это gD, который, как сообщается, является гликопротеином, необходимым для связывания рецептора и прайминга комплекса слияния gB / gH-gL [44, 60, 61].Кроме того, gC также был связан с прикреплением вириона у HSV, PRV и других альфа-герпесвирусы [62, 63]. Важно отметить, что gC не требуется для связывания вирионов VZV с рецепторами клеточной поверхности, потому что рекомбинантный VZV ΔgC и ORF14stop мутанты можно размножать в культуре клеток без вредного воздействия на репликацию кинетика [20, 64]. Аналогичные данные были получены с близкородственными герпесвирус, вирус ветряной оспы обезьян [65]. Однако gC действительно играет функциональную роль в распространении VZV из-за плохой репликация мутанта ΔgC в ткани кожи человека, предполагая непрямое роль gC в тропизме тканей [20, 27].Несмотря на эту важную характеристику, функция gC остается неизвестной. В отличие от других гликопротеинов, транскрипция gC не происходит до очень поздних стадий VZV и считается действительно поздним белком, поскольку продуцируется и накопление gC во время инфекции VZV происходит в конце цикла репликации [66, 67]. GC HSV связывает сульфат гепарина и антитела, которые нацелены на этот связывающие области нейтрализуют ВПГ [68]. Тем не мение, эквивалентные исследования не проводились с VZV gC.

VZV gE образует стабильный гетеродимер с gI, но также связывает по крайней мере один клеточный белок, фермент, разрушающий инсулин (IDE) [69].Первоначально было определено, что IDE важна для заражения, с В клетках с нокдауном IDE репликация VZV существенно снижена. Однако в в последующих исследованиях было продемонстрировано, что взаимодействие gE с IDE не требуется для проникновения в тестируемые типы клеток, включая дифференцированные Т-клетки человека [24]. Другой клеточный белок замешан на входе VZV был катионнезависимый маннозо-6-фосфатный рецептор, кодируемый Ген IGF2R [70, 71]. Маннозо-6-фосфат — это сахар, содержащийся во всех гликопротеинах. и катионнезависимый маннозо-6-фосфатный рецептор участвует в инфекции VZV. как продемонстрировано нокдауном IGF2R с использованием РНКи, что значительно снижает VZV репликация [70].Любопытно, что этот эффект был преимущественно ассоциирован с бесклеточным вирусом, поскольку отсутствие IGF2R мало влияние на распространение клеточно-ассоциированного VZV. Хотя эти исследования предполагают, что IDE и IGFR2 в репликации VZV, вероятно, они будут иметь пост-запись ролей. IDE привязывается к предшественник gE, обнаруженный в эндоплазматическом ретикулуме, и IGFR2 играет роль в лизосомном биогенез [72, 73]. Это говорит о том, что роли IDE и IGFR2 являются независимо от прикрепления вириона к поверхности клетки и функции в VZV пост-запись цикла репликации.

Гетеродимер gM-gN также включен в частицы VZV, но он не уверены, нужен ли гетеродимер для прикрепления вириона [18]. Нарушение ORF50 [gM] и ORF9A [gN], который предотвращает экспрессию gM и gN, дает мутанты VZV, которые плохо реплицируются с уменьшенным размером бляшек в культуре клеток [18]. Эти мутанты контрастируют с ΔORF50 и ΔORF9A. делеции, сделанные Zhang et al 2010, которые инактивировали VZV. Различия в фенотип связаны с полными делециями ORF50 или ORF9A в мутанте вирусов, которые также нарушили две важные ORF, ORF8 и ORF51, которые перекрывали друг друга. с ORF9 и ORF50 [20].Пара замены в gM, V42P и G301M, предотвращает созревание gM и нарушает взаимодействие между gM и gN. Включение gM [V42P / G301M] в геном VZV дали вирус, который замедлил размножение в клетках меланомы и эмбриональных клетках человека. фибробласты легких [18]. Это поддерживает представление о том, что гетеродимер образует функциональную единицу, но является ли этот комплекс непосредственно участвует в прикреплении вирионов и проникновении в клетки меланомы, фибробласты или изменяет патогенез, не ясно.

Исследования функций VZV gK и ORF39 ограничены, но экстраполяция данных альфа-герпесвирусов HSV и PRV позволяет предположить, что gK и ORF39 образуют комплекс [74–76].Подтверждение выводов в других герпесвирусы, усеченные мутанты VZV gK или ΔgK вируса показали, что gK является незаменим для репликации [17, 20]. Хотя gK включен в вирион неясно, играет ли gK функциональную роль в прикреплении вирионов в ячейку или вход в ячейку через слияние. Исследование незаконного оборота VZV gK и ORF39 означает, что дополнительные белки VZV необходимы для локализации во время инфекция из-за временной трансфекции гликопротеинов по отдельности или вместе приводит к накоплению в ER, тогда как во время заражения они достигают Гольджи [77].Удаление ORF39 было летальным в исследование, которое последовательно выбивало каждую открытую рамку считывания из VZV BAC [20]. Поскольку это единственный ΔORF39 сообщается, и требуется подтверждение, поскольку делеция gM также была летальной в в отличие от предыдущих исследований. Гомологом HSV ORF39 является UL20, который также сотрудничает с gK. Более того, недавние исследования с использованием HSV Мутант gKΔ31-68 продемонстрировал, что gK участвует в нейротропизме. [78]. Имеет ли VZV gK такие же роли, как необходимо исследовать нейротропный фактор.

Гликопротеины, которые управляют слиянием мембран

Основные гликопротеины, которые управляют слиянием мембран во время проникновения герпесвирусы — это gB, gH и gL [79]. в отличие HSV, который требует gD для слияния мембран и входа в клетки, gB и gH-gL являются необходимо и достаточно для слияния мембран VZV [19, 45]. Значительное количество литература предполагает, что гомологи gB герпесвируса являются фузогеном, тогда как gH-gL гетеродимер был связан с активацией gB [79]. Гомологическое моделирование VZV gB с использованием кристаллической структуры HSV gB настоятельно предполагает, что VZV gB также образует тримерный белок с пятью внеклеточными домены [28].Важно отметить, что прогнозируемый Петли слияния в домене II VZV gB, как было показано, функциональны. Два замены, gB [W180G] или gB [Y185G], устраняют слияние мембран, но не влияют на поверхностное выражение gB [13]. Важно, что эти дефектные по слиянию мутанты инактивируют VZV [28]. Слияние мембран, вызванное gB, регулируется цитоплазматический домен (gB cyt ). Мутант с усечением карбоксильных концов, VZV gB-36, делеция из 36 аминокислот в цитоплазматическом домене, реплицируется с преувеличенный синцитиальный фенотип [80].Важно отметить, что частота интактных вирионов на поверхности инфицированных клеток была сообщается, что он значительно снижается для VZV gB-36 через четыре дня после заражения. Подобно этому усеченному мутанту VZV, отдельные аминокислотные замены в цитоплазматический домен оказывает сильное влияние на опосредованное gB слияние клетки с клеткой. А фенотип гиперфузии, значительно повышенная склонность вызывать слияние в клеточный анализ, был идентифицирован, когда остаток тирозина в положении 881 (gB-Y881) был заменен большой ароматической боковой цепью [13].Также было продемонстрировано, что остаток gB-Y881 фосфорилируется, и центральный по отношению к предполагаемому мотиву ингибирования тирозинового основания иммунорецептора (ITIM), предполагая, что этот остаток важен для регуляции слияния. В отличие от gB-Y881F, замены фосфомиметическими остатками аспарагиновой кислоты (gB [Y881D]) или глутаминовая кислота (gB [Y881E]) устраняет слияние и значительно уменьшает клеточную поверхность экспрессия, предполагая, что Y881 может действовать как молекулярный переключатель для трафика gB или локализация.

Исследования мутагенеза VZV gH выявили домены, которые играют важную роль. роли в слиянии мембран.Антитела, которые связываются с N-концом VZV gH, предотвращают слияния, а также обладают свойствами нейтрализации вирусов. MAb 206 против gH обладает сильным свойства нейтрализации вирусов и очень эффективны в предотвращении слияния клеток [30, 47, 52, 59]. Эпитоп mAb 206 был картирован в области в крайний N-конец gH [19, 47]. Человеческие mAb 94 и RC обладают нейтрализующими способность аналогична mAb 206 [47]. Эти антитела связывают подобную область в gH-gL, что позволяет предположить, что gH имеет сайт уязвимости, на который нацелен адаптивный гуморальный иммунный ответ человека на VZV инфекционное заболевание.Подобно VZV gB, цитоплазматический домен gH также имеет механизм регулируют слияние клеток. Эта критическая функция связана с длиной gH цитоплазматический домен, а не какая-либо конкретная последовательность или мотивы [81]. Регулирование клеточно-клеточного слияния обоими gB и gH жизненно важны для эффективного распространения VZV.

VZV Мутагенез гликопротеинов и влияние на репликацию и Патогенез

Целевой мутагенез ORF, кодирующих гликопротеины VZV, с использованием космид или БАК либо смертельны, тем самым определяя важную роль в репликации, либо изменение совместимо с репликацией, что позволяет продолжить изучение роли гликопротеин или его субдомены в культивируемых клетках in vitro и в ксенотрансплантаты в модели мыши SCID in vivo ().Что касается gB, мутагенез расщепления фурина сайт и цитоплазматический домен gB выявили некоторые удивительные нюансы в его роль в патогенезе кожи VZV. Хотя это и не очевидно в культуре клеток, оба gB-Δ ⁴⁹¹ RSRR ⁴⁹⁴ и gB- ⁴⁹¹ GSGG ⁴⁹⁴ мутанты снижали титры VZV извлекается из ксенотрансплантатов кожи человека, подразумевая, что требуется расщепление gB для эффективной репликации в тканевом микроокружении [28]. Более удивительным открытием было влияние гиперфузии на Патогенез VZV через потерю регуляции слияния gBcyt.Это было давно считали, что образование синцитий способствует распространению VZV, особенно в кожа человека, где многоядерные клетки выступают в пределах поражений [82]. Однако мутация, вызывающая гиперфузию gB [Y881F] серьезно вредил размножению VZV в тканях кожи человека [13]. Репликация VZV обнаружена, но титры были либо низкими, либо неопределяемыми через 10 и 21 день после инокуляции. Эти данные демонстрируют, что регуляция индуцированного gB слияния мембран является важным потребность в патогенезе VZV в тканях человека.Неблагоприятные эффекты гиперфузия была подтверждена мутантами усечения gH gH-TL и gH-Δ834–841, которые являются гиперфузогенными и плохо размножаются в дифференцированная кожа человека in vivo [81].

Таблица 2

Рекомбинантные мутанты гликопротеина VZV и их влияние на репликацию в культура клеток, кожа человека и ганглии задних корешков.

Функциональные домены внутри VZV gH, необходимые для репликации, были определены мутагенез эктодомена gH, направленный на четыре альфа-спирали (α8, α9, α12, α14), три остатка цистеина (C540A, C575A, C724A), которые консервативны в HSV gH, и аминокислотный мотив, FPNG, также консервативен в HSV gH [19].Альфа-спирали все расположены в домене II VZV gH, как и C540 и C575, которые образуют дисульфидная связь, и мутации, скорее всего, нарушили структуру и функцию из gH. Замены аланина в мотиве FPNG в домене III полностью разрушили gH торговля людьми. Пять дополнительных мутантов VZV gH, один в домене I (αX) и три в домене III (C647A, C703A и C727A) дали жизнеспособные вирусы, но все они снизили репликация в ксенотрансплантатах кожи человека через 10 и 21 день после инфицирования. В Мутация αX представляла особый интерес, поскольку мутант сохранил дикие типоподобная репликация в культуре клеток с участием N-концевой области gH, который содержит эпитоп mAb 206, в тропизме кожи [19, 47].Каждый из жизнеспособных мутанты цистеина плохо реплицировались в культуре клеток и, как и ожидалось, были заметно ослаблено в коже человека, что было связано с пониженной способностью к слиянию эти мутанты как следствие дестабилизации домена III gH.

По сравнению с другими альфа-герпесвирусами, VZV gE имеет уникальный N-конец. состоит из 188 уникальных аминокислот [22]. А мутант с большой делецией на этом N-конце, gE [ΔP27 – P187], инактивирует VZV, что объясняется неспособностью этого мутанта перемещаться в плазму мембрана [22].Сайт для привязки gE к IDE находится в этом регионе, хотя его точное местонахождение не установлено. Два Мутанты с делецией gE, gE [Δ32–71], которые имеют фенотип малых бляшек, и gE [ΔP27-G90], который плохо реплицируется в коже человека, неспособен связывать IDE [24, 83, 84]. Однако два мутанта gE [ΔP27-Y51] и gE [ΔY51-P90] оба связывают IDE на уровнях, аналогичных gE дикого типа, но только gE [ΔP27-Y51] имеет сниженную репликацию в коже [24]. Это наводило на мысль, что Область gE [Δ32–71] может содержать конформацию белка, которая не является полностью нарушены мутациями gE [ΔP27-Y51] или gE [ΔY51-P90].Важно отметить, что связывание IDE с VZV gE не требуется для нейротропизма, потому что мутант gE [Δ27–90] успешно реплицировался в нейронах [32]. Важно отметить, что уникальный N-концевой регион gE не имеет домена для привязки gI, который необходим для распространения в ксенотрансплантаты кожи человека [25, 29]. Однако богатая цистеином область между остатки 208–236 необходимы для образования гетеродимера между gE и gI [23]. Мутант gE [ΔCys], который имеет удаленные остатки 208–236, плохо реплицируется в культуре клеток и коже ксенотрансплантатов, но его фенотип был не таким серьезным, как у мутанта ΔgI [23, 25, 29].Кроме того, gE [ΔCys] мутант размножается в DRG, но медленнее по сравнению с интактным VZV [31, 32]. Единственная точечная мутация gI [C95A] нарушила структуру gI и имела аналогичный фенотип малых бляшек как ΔgI VZV с ограниченной репликацией в коже ксенотрансплантаты [29]. Было предложено, чтобы gI требуется для включения gE в вирион. Однако gE был включен в частицы в клетках меланомы, инфицированных ΔgI VZV. Эти данные говорят о том, что gI имеет функции в репликации VZV, которые не зависят от gE.

Помимо gB и gH, цитоплазматический домен gE (gEcyt) и его участие в патогенезе было тщательно изучено. Было показано, что gEcyt содержат важные функциональные мотивы. Мотив YXXΦ, gE [ ⁵⁸² YAGL ⁵⁸⁵ ], опосредует эндоцитоз, gE [ ⁵⁶⁸ AYRV ⁵⁷¹ ] включает таргетинг по сети транс-Гольджи, и кислотный кластер gE [ ⁵⁹³ SXSTXT ⁵⁹⁸ ] фосфорилируется [85–88]. Замена gE [Y582G] летальна, как и gEΔcyt [26].Кроме того, gE [AYRV], который имеет сниженная вирулентность кожи и gE [SSTT], который является мутантом, предотвращающим фосфорилирование в цитоплазматическом домене gE, но не влияет на репликацию в ксенотрансплантаты кожи, оба были способны реплицироваться в DRG на уровне, аналогичном ксенотрансплантатам дикого типа. вирус, демонстрирующий, что эти мотивы не необходимы для нейровирулентности [26, 32].

VZV Гликопротеины, связанные с вакцинацией и иммунным ответом

Имеются вакцины для предотвращения как ветряной оспы, так и опоясывающего герпеса [89].Вакцины против ветряной оспы были очень удалось снизить распространенность ветряной оспы среди детей. Две дозы рекомендуется, один в возрасте 12–15 месяцев и один в возрасте 4–6 лет. ~ 98% эффективен при профилактике ветряной оспы [90]. Зоставакс® — единственная имеющаяся лицензированная вакцина. для опоясывающего герпеса и защищает 51% людей старше 60 лет от опоясывающий лишай и 67% против постгерпетической невралгии, очень болезненных последствий опоясывающий герпес [91]. Хотя успешно в значительно уменьшая тяжелые последствия, полный успех был ограничен. защита от опоясывающего герпеса, который, как считается, связан с ограничениями в повышение иммунного ответа у пожилых людей.

Иммуноферментные анализы на основе гликопротеинов (gpELISA): широко используется для оценки уровня антител к VZV в сыворотке крови. GpELISA полагается на очищенные сродством чечевицы / лектина гликопротеины из клеток MRC5, инфицированных VZV и контрольный антиген из ложно инфицированных клеток MRC5 [92]. На основании gpELISA эффективность вакцины VZV составляет > 95% у серонегативных детей, если титры IgG ≥ 5 gpELISA единиц через 6 недель после вакцинации и иммунитет к ветряной оспе> 90% через 6 лет [93–95].Однако у пожилых людей, получивших вакцина против опоясывающего герпеса ≥ 10 лет после первоначальной вакцинации, сыворотка ответы на VZV не увеличивались по сравнению с исходными титрами при использовании gpELISA после разовая доза [96]. Что немаловажно, бустер вакцинация усиливает клеточный иммунитет, который, как было показано, снижается после возраст 50, но корреляция между сывороточными антителами и защитными клетками опосредованный иммунитет не проявляется в этой демографической группе [97, 98]. Новая вакцина на основе рекомбинантного gE, приготовленного с адъювантной системой AS01B на основе липосом, был продемонстрировано, что он очень эффективен у пожилых людей [99].У реципиентов старше 70 лет эффективность вакцины была > 96%, что значительно больше, чем у нынешней вакцины от герпеса опоясывающий лишай [91]. Более того, эта субъединичная вакцина безопасен для трансплантации ВИЧ с ослабленным иммунитетом и аутологичных гемопоэтических клеток Пациенты, которым не рекомендуются живые аттенуированные вакцины, такие как Зоставакс. Эта вакцина на основе гликопротеинов кажется очень многообещающей.

Выводы

Гликопротеины имеют решающее значение для входа и репликации VZV, что делает их потенциальные мишени для кандидатов в противовирусные препараты.В настоящее время создание эффективных фармацевтические препараты, нацеленные на гликопротеины VZV, являются сложной задачей из-за вакуума в знаниях об их молекулярных механизмах во время инфекции VZV. Больше информации о структурах и функциях гликопротеинов VZV также имеет отношение к совершенствование вакцин VZV для предотвращения первичных и рецидивирующих инфекций. Гуморальный и клеточный иммунитет, индуцированный живыми аттенуированными вакцинами против ветряной оспы и опоясывающего лишая включает ответы, направленные против основных гликопротеинов VZV, но как эти ответы способствуют защите от болезней, неизвестно.Эти вопросы относятся к особый интерес с учетом недавнего сообщения о том, что вакцина на основе рекомбинантного gE состав с адъювантной системой AS01B на основе липосом оказался высокоэффективным против опоясывающего лишая у пожилых [99]. Получение лучшее структурное понимание топологии гликопротеинов имеет большие перспективы так как это поможет в отображении критических функциональных областей, которые затем сделают разработка лекарств и вакцин, направленных на специфические молекулярные функции VZV гликопротеины более осуществимы.

Благодарности

Эта работа была поддержана грантами NIH AI102456 и AI20459.

Стефан Оливер сообщает о грантах от NIH во время проведения исследования.

Сноски

Соблюдение этических норм

Права человека и животных и информированное согласие

Эта статья не содержит исследований с участием людей или животных в исполнении любого из авторов.

Конфликт интересов

Эдвард Ян и Энн Арвин заявляют, что у них нет конфликта интересов. интерес.

Список литературы

Выделены недавно опубликованные статьи, представляющие особый интерес. as:

• Важное значение

•• Важное значение

страница не найдена | MIT

• Образование
• Исследовать
• Инновации
• Прием + помощь
• Студенческая жизнь
• Новости
• Выпускников
• О Массачусетском технологическом институте
• Подробнее ↓
  • Прием + помощь
  • Студенческая жизнь
  • Новости
  • Выпускников
  • О Массачусетском технологическом институте

Предложения или отзывы?

Календари заработной платы — Шлюз административных служб

Загрузите текущие и будущие платежные календари для преподавателей, сотрудников и студентов UB.

Государственные календари заработной платы

10-месячный (21-зарплатный период) Календарь заработной платы факультетов

2020-2029 Даты расчета зарплаты

Примечания:

1. Эти сотрудники с базой оплаты 21P получают зарплату в течение учебного года из периода оплаты OSC 11 за следующий 21 период оплаты.
2. Сотрудники, назначенные только на осенний семестр, получат чек на начало периода оплаты 11 в течение 10,5 периодов оплаты. В последний чек будет получена оплата только за одну неделю.
3. Сотрудники, назначенные только на весенний семестр, получат чек, начиная с 21-го периода оплаты (одна неделя), на срок 10,5 расчетных периодов.

Графики оплаты сверхурочных и праздничных дней

2021-22 Сроки выплаты заработной платы

• Сотрудники, которые работают сверхурочно, но звонят по болезни та же рабочая неделя должна оплачиваться по единой временной ставке.Сделайте пометку на ваучере.
  
• Не отправляйте ваучер на сверхурочную работу в расчетную кассу, если была выбрана опция Over 40 Comp Time II. Отдел должен хранить ваучер в файле для целей сверки для полугодового отчета о посещаемости сотрудника.
  
• Не отправляйте отпускной ваучер на отпускные, если сотрудник выбрал время для компенсации с опцией отказа от отпускных.
• Табели учета рабочего времени должны храниться в отделе в течение трех лет.
• Для обеспечения своевременной оплаты оригиналы табелей учета рабочего времени с оригиналами подписей должны быть получены в установленный срок.

2020-21 Сроки выплаты заработной платы

• Сотрудникам, которые добровольно работают сверхурочно, но вызывают по болезни в ту же самую оплачиваемую неделю, должна выплачиваться прямая повременная оплата.Сделайте пометку на ваучере.
  
• Не отправляйте ваучер на сверхурочную работу в расчетную кассу, если была выбрана опция Over 40 Comp Time II. Отдел должен хранить ваучер в файле для целей сверки для полугодового отчета о посещаемости сотрудника.
  
• Не отправляйте отпускной ваучер на отпускные, если сотрудник выбрал время для компенсации с опцией отказа от отпускных.
• Табели учета рабочего времени должны храниться в отделе в течение трех лет.
• Для обеспечения своевременной оплаты оригиналы табелей учета рабочего времени с оригиналами подписей должны быть получены в установленный срок.

Государственные почасовые платежные ведомости профессорско-преподавательского состава и персонала

2020-21 Сроки выплаты заработной платы

Примечания:

• Формы операций с персоналом (ePTF) и табели учета рабочего времени должны быть получены в установленный срок для своевременной оплаты.
• Для обеспечения своевременной оплаты оригиналы табелей учета рабочего времени с оригиналами подписей должны быть получены в установленный срок. Мы не принимаем факсы и отсканированные табели учета рабочего времени.
• По возможности, изменения ставок и номера счетов должны иметь дату вступления в силу, совпадающую с датой начала периода почасовой оплаты труда штата (для лиц, не являющихся студентами). Если почасовые ставки или номера счетов изменяются в середине платежного периода, необходимо предоставить отдельные табели учета рабочего времени, отражающие старую и новую информацию (ставку и номер счета).

2021-22 Сроки выплаты заработной платы

Примечания

• Персонал Бланки транзакций (ePTF) и табели учета рабочего времени должны быть получены до установленного срока для своевременной оплаты.
• Для обеспечения своевременной оплаты оригиналы табелей учета рабочего времени с оригиналами подписей должны быть получены в установленный срок. Мы не принимаем факсы или отсканированные табели учета рабочего времени.
• По возможности, изменения ставок и номера счетов должны иметь дату вступления в силу, совпадающую с датой начала периода почасовой оплаты труда штата (для лиц, не являющихся студентами). Если почасовые ставки или номера счетов изменяются в середине платежного периода, необходимо предоставить отдельные табели учета рабочего времени, отражающие старую и новую информацию (ставку и номер счета).

Государственный регулярный (оплачиваемый, двухнедельный, неполный рабочий день, TA / GA) График расчета заработной платы

2021-22 Сроки выплаты заработной платы

• Обратные платежи могут обрабатываться до пяти расчетных периодов, НЕ включая текущую заработную плату.
• В случае задержки более чем 5 платежных периодов потребуется письмо с обоснованием. Это директива состояния (OSC), поэтому исключения не допускаются.
  

2020 -21 Сроки выплаты заработной платы

Обратные платежи могут обрабатываться до пяти расчетных периодов, не включая текущую заработную плату.Если просрочка выплаты более 5 периодов, потребуется письмо с обоснованием. Это директива состояния (OSC), поэтому исключения не допускаются.

Государственный помощник студента и календарь заработной платы для работы и учебы в колледже

2020-21 Сроки выплаты заработной платы

Мобильные пользователи: проведите пальцем, чтобы прокрутить таблицу

Горизонтальная прокрутка внизу таблицы

Примечания:

• Все помощники студентов и студенты федеральных колледжей должны использовать онлайн-систему учета рабочего времени и посещаемости для отправки табелей учета рабочего времени.
• Электронные формы транзакций с персоналом (ePTF) должны быть получены в срок, указанный выше.
• Необходимо обрабатывать изменения ставок и номеров счетов через ePTF.
• Стандартные максимальные часы работы: Помощник студента: 20 часов в неделю; Учеба в колледже: 20 часов в неделю
  
• По возможности, изменения ставок и номера счетов должны иметь дату вступления в силу, совпадающую с датой начала периода заработной платы. Если почасовые ставки или номера счетов изменяются в середине платежного периода, необходимо предоставить отдельные табели учета рабочего времени, отражающие старую и новую информацию (ставку и номер счета).
• Смену руководителя следует запрашивать через форму запроса на смену руководителя для государственных служащих.
• College Work Учащиеся, обучающиеся в колледже: день начала осеннего семестра — 31.08.20 (первый день занятий), а дата окончания награждения — 30.06.21. Последний рабочий день выпускников (осенний семестр) — 21.02.21. Последний рабочий день выпускников (весенний семестр) — 15.06.21.

2021-22 Сроки выплаты заработной платы

Мобильные пользователи: проведите пальцем по экрану для прокрутки таблицы

Горизонтальная прокрутка внизу таблицы

Примечания:

• Электронная почта Формы транзакций rsonnel (ePTF) должны быть получены в срок, указанный выше.
• Необходимо обрабатывать изменения ставок и номеров счетов через ePTF.
• Стандартные максимальные часы работы:
  • Ассистент студента: 20 часов в неделю
  • Обучение в колледже: 12 часов в неделю
• По возможности, изменения ставок и номера счетов должны иметь дату вступления в силу, совпадающую с датой начала расчетный период. Если почасовые ставки или номера счетов изменяются в середине платежного периода, необходимо предоставить отдельные табели учета рабочего времени, отражающие старую и новую информацию (ставку и номер счета).
• Смену руководителя следует запросить по следующей ссылке: http://www.buffalo.edu/administrative-services/forms-catalog/hr/supervisor-change-request-for-state-employees.html
• College Work Study Студенты:
  • Начальный день осеннего семестра — 30.08.2021 (первый день занятий), а дата окончания награждения — 30.06.22.
  • * Последний рабочий день для выпускников (осенний семестр) — 01.02.22.
  • * Последний рабочий день для выпускников (весенний семестр) — 15.06.22.

Распределение оплаты государственных дополнительных услуг 2021-22 гг.

Даты дополнительных услуг с четырьмя платежами 2021-22 гг.

Даты дополнительных услуг с двумя платежами 2021-22 гг.

Распределение государственных дополнительных услуг 2020-21

Четыре даты оплаты дополнительных услуг 2020- 21

Осень

Пружина

Две даты дополнительных услуг по оплате 2020-21

Осень

Пружина

Будущий государственный Регулярный график

Регулярный государственный график расчета заработной платы

Research Foundation (РФ) Календари расчета заработной платы

9186 0 2021-22 двухнедельные сроки выплаты заработной платы

** Назначения или повышения заработной платы, вступившие в силу до этой даты, требуют объяснения причин позднее представление.Эти пояснения должны сопровождать форму назначения, смены сотрудника, распределения рабочей силы или стипендии, чтобы можно было получить соответствующее разрешение.

2021-22 Сроки почасовой выплаты заработной платы

** Назначения или повышение заработной платы, вступившее в силу до этой даты, требует пояснительного письма относительно причины позднего представления.Эти пояснения должны сопровождать форму назначения, смены сотрудника, распределения рабочей силы или стипендии, чтобы можно было получить соответствующее разрешение.

Фонд исследований за предыдущие годы (РФ) Календари начисления заработной платы

Даты начисления заработной платы на 2014-2020 гг.

2017-20 гг.

** Назначения или повышения заработной платы, которые вступившие в силу до этой даты, требуется письмо с объяснением причин позднего представления.Эти пояснения должны сопровождать форму назначения, смены сотрудника, распределения рабочей силы или стипендии, чтобы можно было получить соответствующее разрешение.

** Назначения или повышения заработной платы, которые вступают в силу до этой даты, требуют письма с объяснением причин за позднюю подачу.Эти пояснения должны сопровождать форму назначения, смены сотрудника, распределения рабочей силы или стипендии, чтобы можно было получить соответствующее разрешение.

Выплачивается через фонд UB (UBF)

Сроки выплаты заработной платы UBF

Связаться Эксперт по заработной плате

Государственные эксперты по заработной плате

Преподаватели, сотрудники, TA / GA, почасовая оплата для лиц, не являющихся студентами, и помощников студентов

Если фамилия Начинает A — CH

Кэти Картрайт

State Payroll Services

Если начинается фамилия D- Gi

Кэти Полман

State Payroll Services

Если начинается фамилия GL — K

State Payroll Services

Если фамилия начинается L — NORD

Suzie Frank

State Payroll Services

Если фамилия начинается NORE — SHEO

Cheryl Delano

State Payroll Services

Joanne Intorre

State Payroll Services

Если начинается фамилия Ci-Cz; Yi — Z

Мелисса Бароне

Государственная служба расчета заработной платы

Обработка государственных назначений

Анджела Кук

Обработка государственных назначений

Lisa Battle

Обработка государственных назначений

Lynn Phalen 9000 Wolf

Обработка государственных назначений

RF Эксперты по заработной плате

Трудоустройство и расчет заработной платы — RF

Если начинается фамилия AF

Дениз Катус

RF Payroll Services

Если начинается фамилия LM

Сара Липчински

RF Payroll Services

Если начинается фамилия NS

Sonia Cravatta

RF Payroll Services

If Last Name Starts Ale Star 9000

13

UBF Payroll Experts

UBF Payroll Administration

Почасовая (без освобождения) сотрудники

Vanessa Phengsomphane

Сотрудники по расчету заработной платы 000

UBF Exception Associate

Сотрудник по расчету заработной платы

UB Foundation

Общие вопросы (прямой депозит, портал счетов, удержание налогов, гарнитуры и т. Д.)

Отправьте расписание или вопросы о расписании

Вопросы ePTF

Ребекка Бродерик

Менеджер по заработной плате

UB Foundation

Обзор литературы и клинических рекомендаций 9000 Стресс 2 состояние у женщин со значительным негативным влиянием на качество жизни. Вмешательство включает модификацию поведения, интравагинальные устройства, упражнения для мышц тазового дна, биологическую обратную связь, функциональную электростимуляцию и хирургические процедуры.Мы рассмотрим новую внутреннюю процедуру лечения СНМ, которая может служить жизнеспособным нехирургическим вариантом.

1. Введение

Стрессовое недержание мочи (СНМ), по оценкам, затрагивает до 35% взрослых женщин во всем мире [1] и 15,7% женщин, проживающих в общинах, внутри страны [2]. Согласно Национальному обследованию выписки из больниц, ежегодно в США проводится около 100 000 стационарных процедур по поводу SUI, причем амбулаторные процедуры оцениваются более чем в 105 000 в соответствии с Национальным обследованием амбулаторной хирургии 2006 года [3].

Международное общество по борьбе с недержанием мочи определяет SUI как «жалобу на непроизвольное вытекание мочи при усилии или нагрузке, при чихании или кашле» [4]. В европейской выборке из 1573 женщин с недержанием мочи> 80% считали свои симптомы беспокоящими, что отрицательно влияло на качество жизни согласно опроснику качества жизни при недержании мочи (I-QOL) [5]. Факторы риска SUI включают, помимо прочего, возраст, количество детей в возрасте, гистерэктомию в анамнезе, родоразрешение щипцами и ожирение.

Варианты безоперационного лечения включают изменение поведения, интравагинальные устройства, упражнения для мышц тазового дна, биологическую обратную связь и функциональную электростимуляцию. При оценке 13 систематических обзоров консервативного лечения СНМ, Latthe et al. пришли к выводу, что тренировка мышц тазового дна (PFMT) лучше, чем отсутствие лечения [6]. Показатели успеха в течение 9–12 месяцев после ПФМТ с или без биологической обратной связи и / или программ санитарного просвещения колеблются от 52,6% до 74,8% [7–9].Долговременная устойчивость у этих пациентов, вероятно, является функцией упражнений на протяжении всей жизни.

Поскольку не существует одобренного Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) лечения СНМ, возникает несостоятельность с точки зрения инвазивности между консервативной терапией и хирургическим вмешательством. Агенты, увеличивающие уретру, показали свою эффективность, однако показаны для лечения СНМ из-за внутреннего дефицита сфинктера (ISD) и не всегда применяются в офисных условиях [10]. Renessa предлагает лечение СНМ в условиях отсутствия ИСД с помощью радиочастотной энергии (РЧ), передаваемой трансуретрально под местной анестезией.

2. Патогенез SUI

Считается, что патогенез SUI является результатом гипермобильности уретры, вызванной ослаблением или нарушением мускулатуры тазового дна и / или пубоуретральной связки с последующей потерей передачи давления от мочевого пузыря к мочеиспускательный канал при провокации [11, 12]. Поскольку большинство женщин, независимо от статуса удержания мочи, демонстрируют определенную степень гипермобильности, Blaivas et al. утверждают, что SUI зависит от сопутствующего наличия воронки шейки пузыря [13].Ультразвуковое подтверждение воронки у 111 пациентов, как сообщают Хуанг и Ян, было связано с более низким максимальным давлением закрытия уретры (MUCP), меньшей площадью под кривой профиля уретрального давления, более низким давлением точки утечки Вальсальвы (VLPP) и больший объем утечки при испытании на подушку [14].

3. Трансуретральный радиочастотный механизм действия

Считается, что трансуретральное радиочастотное лечение шейки мочевого пузыря и проксимального отдела уретры уменьшает воронку за счет денатурации подслизистого коллагена, что приводит к снижению эластичности тканей.Подобная технология доказала свою эффективность при лечении пациентов с гастроэзофагеальной рефлюксной болезнью и недержанием кала [15, 16]. В доклиническом исследовании на свиньях с использованием трансуретральной радиочастоты давление в точке утечки Вальсальвы было выше в группе лечения, получавшей 24 очага радиочастотной энергии при 65 ° C, по сравнению с контрольной группой через 8 недель () [17].

4. Безопасность трансуретральной радиочастоты

Трансуретральная радиочастотная денатурация коллагена отличается от радиочастотной абляции тем, что используются субнекротические температуры, приводящие к ремоделированию коллагена в отличие от некроза [17].Кроме того, обрабатываемые очаги микроскопические, что позволяет избежать грубого разрушения тканей. В вышеупомянутом исследовании на животных, проведенном Эдельштейном, ни у одного из 30 обработанных животных не было обнаружено обструкции или стриктуры проксимального отдела уретры или шейки мочевого пузыря. Гистопатология после умерщвления выявила, как правило, очаговое хроническое воспаление в подслизистой оболочке на 1-2 мм ниже эпителия с признаками фиброплазии и сосудистой пролиферации [17] (рис. 1). Создают локализованные области денатурированного коллагена в каждом фокусе, приблизительно 200 мкм в диаметре [23].