Гк рф статья 327: Статья 327. Исполнение обязательства внесением долга в депозит

Содержание

Статья 327 ГК РФ с комментариями — Исполнение обязательства внесением долга в депозит

1) отсутствия кредитора или лица, уполномоченного им принять исполнение, в месте, где обязательство должно быть исполнено;
2) недееспособности кредитора и отсутствия у него представителя;
3) очевидного отсутствия определенности по поводу того, кто является кредитором по обязательству, в частности в связи со спором по этому поводу между кредитором и другими лицами;
4) уклонения кредитора от принятия исполнения или иной просрочки с его стороны.

1.1. Утратил силу с 1 июня 2018 г. — Федеральный закон от 23 мая 2018 г. N 120-ФЗ

2. Внесение денежной суммы или ценных бумаг в депозит нотариуса или суда считается исполнением обязательства.

Нотариус или суд, в депозит которого внесены деньги или ценные бумаги, извещает об этом кредитора.

3. Во всякое время до получения кредитором денег или ценных бумаг из депозита нотариуса либо суда должник вправе потребовать возврата ему таких денег или ценных бумаг, а также дохода по ним. В случае возврата должнику исполненного по обязательству должник не считается исполнившим обязательство.

4. В случае передачи нотариусу на депонирование движимых вещей (включая наличные деньги, документарные ценные бумаги и документы), безналичных денежных средств или бездокументарных ценных бумаг на основании совместного заявления кредитора и должника к таким отношениям подлежат применению правила о договоре условного депонирования (эскроу), поскольку иное не предусмотрено законодательством о нотариате и нотариальной деятельности.

Комментарий к статье 327 Гражданского Кодекса РФ

1. Комментируемая статья распространяется на ситуации, когда по причинам, не связанным с должником, исполнение им обязательства лично кредитору становится невозможным. В подобных случаях должник вправе освободиться от лежащей на нем обязанности внесением долга в депозит нотариуса, а в установленных законом случаях — в депозит суда.

2. Круг обстоятельств, дающих должнику право воспользоваться механизмом комментируемой статьи, перечислен в п. 1 исчерпывающим образом и не подлежит расширительному толкованию.

3. В отличие от законодательства ряда стран, исключающих из числа возможных предметов депонирования лишь вещи, хранение которых невозможно в силу их свойств, в частности скоропортящиеся вещи (ст. 534 ГК Азербайджана, ст. 436 ГК Грузии, ст. 446 ГК Туркмении), комментируемая статья ограничивает применение рассматриваемого способа только обязательствами, предметом которых является передача в собственность денег или документарных ценных бумаг.

Исходя из смысла комментируемой статьи, а также положений гл. XV Основ законодательства о нотариате следует признать, что отечественная правовая система исключает и такой вариант депонирования, как внесение под условием встречного исполнения, известный многим развитым правопорядкам.

4. Внесение долга в депозит нотариуса (суда) в силу п. 2 комментируемой статьи приравнивается к надлежащему исполнению и, соответственно, прекращает обязательство должника (см. ст. 408 ГК и коммент. к ней). Однако подобные последствия наступают только при условии, что совершенные должником действия соответствуют требованиям, предъявляемым к надлежащему исполнению обязательства. В частности, в соответствии со ст. 87 Основ законодательства о нотариате принятие в депозит денежных сумм и ценных бумаг должно производиться нотариусом по месту исполнения обязательства (специальное правило о месте депонирования предусмотрено п. 7 ст. 84.8 Закона об акционерных обществах).

Если должник, используя право, предусмотренное комментируемой статьей, внес в срок, предусмотренный обязательством, причитающиеся с него денежные средства в депозит нотариуса (суда), денежное обязательство считается исполненным своевременно и проценты, в том числе предусмотренные ст. 395 ГК, на сумму долга не начисляются (п. 8 Постановления ВС и ВАС N 13/14).

5. О поступлении денежных сумм или ценных бумаг нотариус (суд) извещает кредитора и по его требованию выдает причитающиеся денежные суммы и ценные бумаги.

6. Возврат денежных сумм или ценных бумаг лицу, внесшему их в депозит, допускается лишь с письменного согласия лица, в пользу которого сделан взнос, или по решению суда (ст. 88 Основ законодательства о нотариате).

Такое судебное постановление, очевидно, может состояться при доказательстве ошибочности депонирования. Вопрос об иных основаниях возврата депонирования зависит от решения проблем срока депонирования, принадлежности депонированного и возможности забрать депонированное. Действующее законодательство не содержит прямого ответа на эти вопросы. (Анализ доктринальных позиций см. в кн.: Сарбаш С.В. Исполнение договорного обязательства. С. 589 — 609.)

7. В случае, когда основанием внесения долга в депозит явилась просрочка кредитора (подп. 4 п. 1 комментируемой статьи), использование рассматриваемого способа защиты нарушенного права не исключает право должника требовать возмещения причиненных такой просрочкой убытков (см. ст. 406 ГК и коммент. к ней).

Ст. 327 ГК РФ.

Исполнение обязательства внесением долга в депозит

1) отсутствия кредитора или лица, уполномоченного им принять исполнение, в месте, где обязательство должно быть исполнено;

2) недееспособности кредитора и отсутствия у него представителя;

3) очевидного отсутствия определенности по поводу того, кто является кредитором по обязательству, в частности в связи со спором по этому поводу между кредитором и другими лицами;

4) уклонения кредитора от принятия исполнения или иной просрочки с его стороны.

1.1. Утратил силу с 1 июня 2018 года. — Федеральный закон от 23.05.2018 N 120-ФЗ.

Нотариус или суд, в депозит которого внесены деньги или ценные бумаги, извещает об этом кредитора.

См. все связанные документы >>>

1. Возможны ситуации, когда должник и хотел бы исполнить свои обязательства по уплате причитающихся с него денег или передаче ценных бумаг, однако в силу объективных причин, указанных в законе, он этого сделать не может. Кроме того, иногда кредитор намеренно отказывается получить причитающееся ему, желая обанкротить своего должника.

В таких случаях обязательство может быть исполнено либо внесением долга в депозит нотариуса, либо в случаях, установленных законом, в депозит суда.

В п. 1 комментируемой статьи содержится перечень случаев, когда обязательство может исполняться внесением долга в депозит.

В качестве дополнительного основания можно назвать введенный Федеральным законом от 08.03.2015 N 42-ФЗ п. 1.1 комментируемой статьи, согласно которому соглашением между кредитором и должником может быть предусмотрена обязанность должника исполнить обязательство по передаче денег или ценных бумаг путем внесения долга в депозит нотариуса.

Принятие нотариусом в депозит денежных сумм и ценных бумаг регулируется ст. ст. 87, 88 Основ законодательства РФ о нотариате от 11 февраля 1993 г. N 4462-1.

Так, согласно статье 87 указанных Основ нотариус в случаях, предусмотренных гражданским законодательством Российской Федерации, а также соглашением между должником и кредитором принимает от должника в депозит денежные суммы и ценные бумаги для передачи их кредитору.

О поступлении денежных сумм и ценных бумаг нотариус извещает кредитора и по его требованию выдает ему причитающиеся денежные суммы и ценные бумаги, если иное не установлено соглашением между должником и кредитором.

С учетом того обстоятельства, что законодатель в комментируемой статье и ст. 87 Основ законодательства о нотариате использует понятие «депозит», а не «депозитный счет», можно сделать вывод, что форма депозита может быть различной: как в виде специального расчетного счета нотариуса, так и в виде банковской ячейки, открытой нотариусом, или в виде сейфа самого нотариуса.

Что касается депозита суда, то речь может идти только о депозитном счете, поскольку процедура хранения наличных денежных средств или документарных ценных бумаг в здании суда законодательно не установлена.

2. Внесение денежной суммы или ценных бумаг в депозит нотариуса согласно п. 2 комментируемой статьи считается исполнением обязательства. При этом нотариус, в депозит которого внесены деньги или ценные бумаги, извещает об этом кредитора.

В п. 55 Постановления Пленума Верховного Суда РФ от 22.11.2016 N 54 «О некоторых вопросах применения общих положений Гражданского кодекса Российской Федерации об обязательствах и их исполнении» отмечено следующее.

«Согласно пункту 2 статьи 327 ГК РФ внесение денежной суммы или ценных бумаг в депозит нотариуса или суда считается исполнением обязательства, о чем нотариус или суд, в депозит которого внесены деньги или ценные бумаги, извещает кредитора.

Переданные в депозит нотариуса денежные средства и ценные бумаги считаются принадлежащими кредитору с момента получения им указанного имущества из депозита. При этом нотариус не вправе возвращать названные денежные средства и ценные бумаги должнику, если от кредитора поступило заявление об их получении».

3. Согласно п. 3 ст. 327 ГК РФ во всякое время до получения кредитором денег или ценных бумаг из депозита нотариуса либо суда должник вправе потребовать возврата ему таких денег или ценных бумаг, а также дохода по ним. В случае возврата должнику исполненного по обязательству должник не считается исполнившим обязательство.

Требование о возврате денежных сумм и ценных бумаг и согласие на их возврат должны быть выражены в письменной форме.

Следует помнить, что денежные средства и ценные бумаги, хранящиеся в депозите нотариуса, не являются собственностью нотариуса.

Согласно п. 44 Постановления Пленума Верховного Суда РФ от 24.03.2016 N 7 «О применении судами некоторых положений Гражданского кодекса Российской Федерации об ответственности за нарушение обязательств» (ред. от 07.02.2017) «при возвращении должнику денежных средств, внесенных в депозит, обязательство не считается исполненным (пункт 3 статьи 327 ГК РФ), и проценты, предусмотренные статьей 395 ГК РФ, подлежат начислению на сумму долга со дня возникновения просрочки, включая период нахождения денежных средств на депозите».

Статья 327 ГК РФ. Исполнение обязательства внесением долга в депозит

Ч.1 статьи 327 ГК РФ

П.1 статьи 327 ГК РФ

П.2 статьи 327 ГК РФ

2) недееспособности кредитора и отсутствия у него представителя;

П.3 статьи 327 ГК РФ

П.4 статьи 327 ГК РФ

4) уклонения кредитора от принятия исполнения или иной просрочки с его стороны.

Ч.1.1 статьи 327 ГК РФ

1. Утратил силу с 1 июня 2018 года. — Федеральный закон от 23.05.2018 N 120-ФЗ.

Ч.2 статьи 327 ГК РФ

Нотариус или суд, в депозит которого внесены деньги или ценные бумаги, извещает об этом кредитора.

Ч.3 статьи 327 ГК РФ

Ч.4 статьи 327 ГК РФ

Статья 327 ГК РФ Исполнение обязательства внесением долга в депозит

2) недееспособности кредитора и отсутствия у него представителя;

4) уклонения кредитора от принятия исполнения или иной просрочки с его стороны.

1.1. Утратил силу с 1 июня 2018 года. — Федеральный закон от 23.05.2018 N 120-ФЗ.

Нотариус или суд, в депозит которого внесены деньги или ценные бумаги, извещает об этом кредитора.

Положения статьи 327 ГК РФ используются в следующих статьях:

Статья 60 ГК РФ Гарантии прав кредиторов реорганизуемого юридического лица
Предъявленные в указанный срок требования должны быть исполнены до завершения процедуры реорганизации, в том числе внесением долга в депозит в случаях, предусмотренных статьей 327 ГК РФ. Открыть статью
Статья 352 ГК РФ Прекращение залога
7) в случае изъятия заложенного имущества (статьи 167, 327), за исключением случаев, предусмотренных пунктом 1 статьи 353 ГК РФ; Открыть статью
Статья 720 ГК РФ Приемка заказчиком работы, выполненной подрядчиком
6. Если иное не предусмотрено договором подряда, при уклонении заказчика от принятия выполненной работы подрядчик вправе по истечении месяца со дня, когда согласно договору результат работы должен был быть передан заказчику, и при условии последующего двукратного предупреждения заказчика продать результат работы, а вырученную сумму, за вычетом всех причитающихся подрядчику платежей, внести на имя заказчика в депозит в порядке, предусмотренном статьей 327 ГК РФ. Открыть статью
Статья 738 ГК РФ Последствия неявки заказчика за получением результата работы
В случае неявки заказчика за получением результата выполненной работы или иного уклонения заказчика от его приемки подрядчик вправе, письменно предупредив заказчика, по истечении двух месяцев со дня такого предупреждения продать результат работы за разумную цену, а вырученную сумму, за вычетом всех причитающихся подрядчику платежей, внести в депозит в порядке, предусмотренном статьей 327 ГК РФ. Открыть статью

Статья 327 ГК РФ и комментарии к ней

1. Должник вправе внести причитающиеся с него деньги или ценные бумаги в депозит нотариуса, а в случаях, установленных законом, в депозит суда — если обязательство не может быть исполнено должником вследствие:
1) отсутствия кредитора или лица, уполномоченного им принять исполнение, в месте, где обязательство должно быть исполнено;
2) недееспособности кредитора и отсутствия у него представителя;
3) очевидного отсутствия определенности по поводу того, кто является кредитором по обязательству, в частности в связи со спором по этому поводу между кредитором и другими лицами;
4) уклонения кредитора от принятия исполнения или иной просрочки с его стороны.

1.1. Соглашением между кредитором и должником может быть предусмотрена обязанность должника исполнить обязательство по передаче денег или ценных бумаг путем внесения долга в депозит нотариуса.

Нотариус или суд, в депозит которого внесены деньги или ценные бумаги, извещает об этом кредитора.

Комментарий к статье 327 ГК РФ

1. Круг оснований для внесения денежных сумм или ценных бумаг в депозит нотариуса или суда (депозит подразделения судебных приставов-исполнителей) является исчерпывающим.

Предмет исполнения — деньги или ценные бумаги, внесение которых в депозит приравнивается к исполнению обязательства.

Передав своевременно это имущество в депозит нотариуса или суда, должник не будет считаться просрочившим.

Соответственно, проценты, в том числе предусмотренные ст. 395 ГК, на сумму долга не начисляются (п. 8 Постановления Пленумов ВС РФ и ВАС РФ N 13/14).

Напротив, кредитор, не принявший исполнения, что вынудило должника внести средства в депозит, считается просрочившим (о просрочке кредитора см. ст. 406 ГК).

Так, должник из-за уклонения кредитора принять исполнение внес сумму долга в депозит нотариуса. Кредитор обратился в арбитражный суд о расторжении договора купли-продажи помещения, так как, по его утверждению, должник в установленный договором срок не перечислил на его расчетный счет деньги за помещение. Как было установлено, продавец, письменно уведомленный нотариусом о наличии в депозите суммы выкупа, не сообщил ему данные, по которым необходимо перечислять на его расчетный счет внесенную в депозит сумму. Арбитражный суд оценил действия истца как уклонение от принятия исполнения по денежному обязательству, отказал в удовлетворении его требования о расторжении договора (п. 9 приложения к информационному письму Президиума ВАС РФ от 05.05.1997 N 14 «Обзор практики разрешения споров, связанных с заключением, изменением и расторжением договоров» <1>).

———————————
<1> ВВАС РФ. 1997. N 7.

2. Нотариус или суд извещают кредитора о поступлении в депозит для него денег или ценных бумаг. Не востребованные в установленные сроки кредитором с депозита средства или ценные бумаги могут быть обращены с соблюдением соответствующих норм в собственность государства как бесхозяйное имущество.

Другой комментарий к статье 327 Гражданского Кодекса РФ

1. При наличии обстоятельств, перечисленных в п. 1 комментируемой статьи (отсутствие кредитора, его недееспособность и др.), существует правовая неопределенность. Так, если кредитор уклоняется от принятия исполнения, то при отсутствии правил рассматриваемой статьи должник был бы лишен возможности исполнить свое обязательство (свою обязанность).

2. О месте исполнения см. ст. 316 ГК РФ, о недееспособности граждан — ст. 29 ГК РФ, об исполнении обязательства надлежащему лицу — ст. 312 ГК РФ, об уклонении кредитора и иной просрочке с его стороны — ст. ст. 404, 406 ГК РФ и соответствующий комментарий.

3. Исполнение обязательства внесением долга в депозит возможно, только если оно (обязательство) является денежным либо его предметом являются ценные бумаги.

4. Исполнение обязательства внесением долга в депозит нотариуса возможно во всех случаях, указанных в п. 1 комментируемой статьи. Внесение исполнения в депозит суда допустимо только в случаях, предусмотренных законом.

5. Обязательство считается исполненным с момента внесения в депозит денег или ценных бумаг (хотя получит их кредитор позже).

6. Принятие в депозит денежных сумм и ценных бумаг производится нотариусом по месту исполнения обязательства. Соответствующее нотариальное действие осуществляется на основании заявления должника. В заявлении обычно указываются наименование (имя) должника и кредитора, их место нахождения (место жительства), характеризуется обязательство и пр. В обязанности нотариуса не входит проверка достоверности сообщаемых ему должником сведений.

Должнику, внесшему в депозит деньги или ценные бумаги, выдается квитанция.

Нотариус направляет кредитору извещение о том, что должником внесены в депозит деньги или ценные бумаги. Если место жительства (место нахождения) кредитора неизвестно, то осуществлять его розыск нотариус не обязан.

Выдача денег или ценных бумаг кредитору осуществляется по заявлению кредитора.

Статья 327. Исполнение обязательства внесением долга в депозит

Нотариус или суд, в депозит которого внесены деньги или ценные бумаги, извещает об этом кредитора.

Комментарий к статье 327 Гражданского Кодекса РФ

1. Комментируемая статья соответствует ст. 87 и 88 Основ законодательства о нотариате. В указанном акте, в частности, предусмотрено, что принятие в депозит денежных сумм и ценных бумаг для передачи их кредитору осуществляется нотариусом в месте исполнения обязательства, что по требованию кредитора ему должен быть произведен возврат полученного, притом непременно с письменного согласия лица, в пользу которого сделан взнос, или по решению суда.

2. Все указанные в п. 1 комментируемой статьи четыре основания для передачи исполненного в депозит объединяет юридическая или фактическая невозможность исполнения для должника обязательства непосредственно кредитору. Поскольку само по себе внесение долга в депозит не является санкцией, вопрос о причинах наступления соответствующей ситуации и, в частности, ее зависимости от действий кредитора значения не имеет.

3. Последствие, подразумеваемое в п. 2 комментируемой статьи, — прекращение обязательства наступает только при условии, если само исполнение было надлежащим. В частности, это относится к предмету, а также времени исполнения.

4. В случаях, предусмотренных в подп. 2, 3 п. 1 комментируемой статьи, должник может прибегнуть и к другим средствам, например предъявить требование, которое возникает у него в связи с просрочкой кредитора (см. ст. 406 и коммент. к ней).

Специальные последствия установлены, в частности, для договора подряда. Так, в силу п. 6 ст. 720 ГК при уклонении заказчика от принятия выполненных работ на протяжении месяца со дня, когда в соответствии с договором необходимо было произвести сдачу результата работ, после двукратного последующего предупреждения заказчика у подрядчика возникает право продать результат работ, а вырученную сумму, за вычетом всех причитающихся ему платежей, внести на имя заказчика в депозит по правилам ст. 327 ГК. Аналогичное право предусмотрено при договоре бытового подряда (ст. 738 ГК).

Другой комментарий к статье 327 ГК РФ

Передав своевременно это имущество в депозит нотариуса или суда, должник не будет считаться просрочившим.

———————————
<1> ВВАС РФ. 1997. N 7.

Исполнение обязательства внесением долга в депозит

Юридическая энциклопедия МИП онлайн — задать вопрос юристу » Гражданское право — разделы » Обязательства » Исполнение обязательства внесением долга в депозит

Внесение средств через депозиты необходимо для реализации должником процедуры должного исполнения обязательства.

В отдельных случаях законодательство допускает выполнение обязательства через внесение дебитором денежных средств в депозитный счет. Порядок и условия осуществления данной процедуры регламентируются ст. 327 Кодекса.

Рассмотрим, что такое депозит, в каких случаях реализуется процесс по внесению денежных средств в рамках расчетов через депозит нотариуса или суда, и прочие важные аспекты.

Понятие депозита, внесение в него средств в качестве погашения долга

Общее определение: депозит – это финансовые средства или ценные бумаги, которые вкладываются лицом через соответствующее учреждение на ответственное хранение для осуществления какой-либо специальной цели.

Рассматриваемый случай регламентирует два вида депозита:

депозит нотариуса;
депозит судебного органа.

Депозит нотариуса – это процедура, реализуемая через соответствующее уполномоченное лицо (нотариуса), по взятию денежных средств или ценных бумаг от лица, имеющего долг по обязательству, с целью последующей передачи соответствующих материальных ценностей кредитору.

Должник обладает правом на вложение средств в депозит нотариуса во всех случаях, прямо не запрещенных гражданским законодательством, в депозит суда же – только в случаях, прямо определенных законодательно.

Внесение материальных средств через соответствующие разновидности депозитов (депозит суда или депозит нотариуса) необходимо для реализации должником процедуры должного исполнения обязательства перед кредитором.

Данная правовая возможность будет полезна при определенных обстоятельствах, в силу которых исполнение дебитором обязательств по сделке в общем порядке невозможно и/или затруднительно.

Основной задачей применения депозита при взаимных расчетах между должником и кредитором является устранение правовой неопределенности. Физическое лицо должно располагать возможностью погасить долг вне зависимости от внешних обстоятельств, что и обеспечивается нормами ст. 327 ГК РФ.

Условия исполнения обязательства внесением долга в депозит

Существуют следующие условия, при которых обязательство при внесении денежных средств в депозит судебного органа или нотариуса будет рассматриваться как выполненное:

разновидность обязательства удовлетворяет нормативным требованиям – внесение средств через депозит нотариуса или суда возможно только по денежным обязательствам или по тем, по которым предметом являются ценные бумаги;
соблюдены условия, указанные в ч. 1 ст. 327 Кодекса, которые определяют, что должник не может должным образом погасить долг по сделке в силу указанных в данной статье факторов.

Основные правовые нюансы реализации процедуры:

само по себе внесение денежных средств на депозит нотариуса или суда обладает одинаковым гражданско-правовым положением, что и исполнение обязательства в общем порядке, и считается исполненным;
обязательство считается выполненным сразу после момента осуществления передачи денежных средств на соответствующий депозит нотариуса или суда;
нотариус или судебный орган, после проведения соответствующего действия по принятию денежных средств от должника, осуществляют процедуру по извещению кредитора в установленном законом порядке;
при наличии договора по сделке между дебитором и кредитором о способе исполнения обеспечения через внесение первым денежных средств на соответствующий депозит нотариуса или суда, у дебитора возникает уже не право исполнения обязательства рассматриваемым способом, а обязанность.

Помимо вышеуказанных нюансов, у должника существует возможность осуществить возврат внесенных материальных средств или ценных бумаг через депозит нотариуса или судебного органа, если кредитор еще не получил причитающиеся ему деньги из депозита.

Помимо основной суммы, дебитор может получить и доходность с соответствующих ценных бумаг, которые были переданы на хранение.

Однако при реализации процесса возврата дебитор будет считаться как не погасивший долг перед кредитором.

Случаи, при которых имеется возможность по исполнению обязательства посредством вложения материальных средств в депозит

Ч. 1 ст. 327 ГК РФ устанавливает обстоятельства, при которых дебитор вправе осуществить процесс внесения денег в соответствующий депозит:

невозможно установить местонахождение кредитора или лица, управомоченного на принятие исполнения, по месту исполнения обязательства, предусмотренного договором сторон;
кредитор является недееспособным лицом, при этом законный представитель такого лица отсутствует в принципе;
существует правовая неопределенность касательно точного определения лица, являющегося кредитором по долгу, в том числе и при разногласиях и спорах по данному поводу между предполагаемым кредитором и иными лицами, претендующими на его правовой статус;
выявлен факт уклонения кредитора от акцептирования предоставляемого дебитором исполнения.

Процедура выполнения обязательства посредством вложения суммы задолженности в депозит

Существует определенный порядок осуществления процедуры по внесению денег или ценных бумаг в порядке расчетов через депозит:

заявитель наносит визит к управомоченному на осуществление нотариальных действий лицу по месту выполнения обязательства;
происходит запуск процедуры принятия денег в порядке расчетов через депозит на основании письменного заявления дебитора;
дебитор, после проведения соответствующего нотариального действия, получает квитанцию;
по месту последнего известного местонахождения кредитора нотариус отправляет извещение, если же местонахождение такового определить не представляется возможным, принятие нотариусом мер, направленных на непосредственный розыск кредитора, не реализуется;
кредитор, получивший извещение, может получить деньги в порядке расчетов через депозит после соответствующего заявления с его стороны.

Следует отметить, что нотариус, при принятии заявления, подаваемого дебитором, не проверяет при этом достоверность предоставляемых им сведений.

Автор статьи

Кузнецов Федор Николаевич

Опыт работы в юридической сфере более 15 лет; Специализация — разрешение семейных споров, наследство, сделки с имуществом, споры о правах потребителей, уголовные дела, арбитражные процессы.

Вопросы и ответы юристов

Обновленная информация о влиянии на здоровье томатного ликопина

Annu Rev Food Sci Technol. Авторская рукопись; доступно в PMC 2013 4 декабря.

Опубликован в окончательной редакции как:

PMCID: PMC3850026

NIHMSID: NIHMS525956

, ^1, ^*, ^2, ^*, ² и ¹

Erica N. Story

¹ Департамент пищевых продуктов, биотехнологий и диетологии Университета штата Северная Каролина, Роли, Северная Каролина 27695

Рэйчел Э.Копек

² Департамент пищевых наук и технологий, Междисциплинарная программа PhD в области питания человека, Государственный университет Огайо, Колумбус, Огайо 43210

Стивен Дж. Шварц

² Департамент пищевых наук и технологий, междисциплинарная программа PhD in Human Nutrition, Государственный университет Огайо, Колумбус, Огайо 43210

G. Keith Harris

¹ Департамент наук о продуктах питания, биотехнологии и питании в Университете штата Северная Каролина, Роли, Северная Каролина 27695

Корреспондент.

^* Эти авторы внесли равный вклад в эту работу.

См. Другие статьи в PMC, в которых цитируется опубликованная статья.

Abstract

Ликопин — это непровитаминный каротиноид А, который отвечает за окраску от красного до розового в помидорах, розовом грейпфруте и других продуктах питания. Обработанные томатные продукты являются основным диетическим источником ликопина в Соединенных Штатах. В отличие от многих других природных соединений, ликопин обычно устойчив к переработке, если он присутствует в матрице растительной ткани.Недавно ликопин также был изучен на предмет его потенциального воздействия на здоровье. Хотя многообещающие данные эпидемиологических исследований, а также исследований на культурах клеток и на животных показывают, что ликопин и потребление продуктов, содержащих ликопин, могут влиять на риск рака или сердечно-сосудистых заболеваний, для подтверждения этой гипотезы необходимы дополнительные данные клинических испытаний. Кроме того, необходимы будущие исследования, чтобы понять механизм (ы), посредством которых ликопин или его метаболиты обладают биологической активностью у людей.

Ключевые слова: ликопин, каротиноиды, ликопеноиды, биодоступность, рак, сердечно-сосудистые заболевания

ВВЕДЕНИЕ

Эпидемиологические исследования показывают, что диеты, богатые фруктами и овощами, связаны со снижением риска хронических заболеваний, таких как сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) ( Игнарро и др., 2007) и рак (Блок и др., 1992). По оценкам, примерно 50% случаев рака и 35% смертей от рака в Соединенных Штатах могут быть связаны с неправильным питанием (Williams et al.1999). Эпидемиологические исследования связывают потребление томатов со снижением риска рака простаты (Jain et al. 1999, Giovannucci et al. 2002) и сердечно-сосудистых заболеваний (Arab & Steck 2000). Несмотря на эти данные, неясно, какие отдельные соединения, присутствующие в томате, такие как ликопин, придают эти потенциальные преимущества и оказывают ли другие компоненты томатов и томатных продуктов положительный эффект.

Ликопин, красный каротиноидный пигмент природного происхождения, содержащийся в помидорах, розовом грейпфруте, арбузе, папайе, гуаве и других фруктах, активно изучается более 70 лет, более 2000 статей опубликовано в рецензируемых журналах и 4000 статей. другие публикации (научные и прочие), написанные по данной теме.Большинство этих статей посвящено ликопину, полученному из помидоров. Учитывая огромный объем уже опубликованной информации о ликопине, мы сосредоточимся на недавней литературе (1999–2009 гг.), Касающейся воздействия ликопина томатов на здоровье человека. Хотя исследования in vitro и на животных жизненно важны для понимания механизмов, лежащих в основе потенциальных последствий для здоровья, исследования на людях, в частности клинические испытания, в конечном итоге используются для определения влияния пищевых компонентов на здоровье, а также для разработки политики в отношении питания и маркировки пищевых продуктов.Для получения дополнительной информации об исследованиях in vitro и на животных, касающихся потенциального воздействия ликопина на здоровье, см. Обзоры Rao et al. (2006) и Коэн (2002). Сообщалось, что за последнее десятилетие продукты, содержащие ликопин (в основном томатные продукты) и добавки с ликопином, влияют на различные заболевания, от рака до сердечных заболеваний и астмы (Dahan et al., 2008, Riccioni et al., 2008, Wood et al., 2008). . Совсем недавно исследователи начали изучать ликопеноиды, окислительные метаболиты ликопина, основываясь на возможности того, что эти ликопеноиды могут вызывать биологические эффекты (Erdman et al.2009 г.).

Учитывая объем опубликованной литературы о потенциальной пользе для здоровья этого каротиноида в рационе, в данном документе мы рассматриваем публикации, касающиеся химии ликопина, источников, потребления и биодоступности. Кроме того, мы обобщаем литературу о присутствии и образовании ликопеноидов и обсуждаем наиболее многообещающие направления будущих исследований ликопена.

ЛИКОПЕН ХИМИЯ

Ликопин — один из пигментов в большом семействе растительных пигментов, известных как каротиноиды.Каротиноиды дают цвет от желтого цвета тыквы до оранжевого цвета тыквы и красного цвета помидоров. Каротиноиды также вносят вклад в аромат некоторых растительных пищевых продуктов (Rodriguez-Bustamante & Sanchez 2007). Некоторые каротиноиды также обладают активностью провитамина А и обладают мощной антиоксидантной активностью. На сегодняшний день идентифицировано более 700 каротиноидов (Britton et al. 2004). Есть два основных типа каротиноидов: углеводородные каротиноиды и ксантофиллы. Углеводородные каротиноиды, такие как ликопин, полностью состоят из водорода и углерода.Напротив, ксантофиллы, такие как лютеин, помимо углерода и водорода содержат кислород (Furr & Clark 1997). Некоторые углеводородные каротиноиды, такие как β-каротин и α-каротин, могут ферментативно расщепляться с образованием витамина A. Ликопин не обладает активностью провитамина A из-за отсутствия концевого бета-иононового кольца (Rao & Rao 2007). Каротиноиды обычно содержат 40 атомов углерода. Апо-каротиноиды содержат менее 40 атомов углерода. Префикс апо используется для идентификации каротиноидов, длина которых была укорочена одним или несколькими атомами углерода (Britton et al.2004 г.). Независимо от количества атомов углерода, все каротиноиды обладают изопреноидной основой (Бриттон и др. 2004).

Химическая формула ликопина: C ₄₀ H ₅₆. 11 конъюгированных и 2 неконъюгированных двойных связей, присутствующих в ликопене, позволяют проводить обширную изомеризацию, приводя к 1056 теоретическим цис-транс конфигурациям (Zechmeister 1944). Однако на самом деле в природе обнаружено лишь несколько изомеров (), причем конфигурация ликопина полностью — транс является наиболее распространенным изомером, содержащимся в пищевых продуктах (Nguyen & Schwartz 2000).Термодинамическая стабильность обычных изомеров ликопина была определена относительно всего изомера -транс . Изомер 5- цис оказался наиболее стабильным, за ним следуют все -транс , 9- цис , 13- цис , 15- цис , 7- цис и 11-. цис (Chasse et al. 2001). Изомеры ликопина, обнаруженные в плазме крови человека, грудном молоке и тканях человека, в основном относятся к изомерному типу цис- (Hadley et al.2003 г., Аллен и др. 2002, Ферруцци и др. 2001 г., Boileau et al. 2002). Цвет ликопина напрямую зависит от его изомерной формы. Все изомеры -транс и большинство других изомеров ликопина имеют красный цвет, тогда как ликопин тетра- цис- имеет оранжевый оттенок (Nguyen & Schwartz 2000, Zechmeister 1944).

Структура ликопина и нескольких изомеров.

Активные формы кислорода (АФК) представляют собой кислородсодержащие молекулы, которые либо являются, либо могут генерировать свободные радикалы.Избыточное производство АФК приводит к состоянию, известному как окислительный стресс, которое связывают как с раком, так и с сердечно-сосудистыми заболеваниями (Halliwell 1994). Каротиноиды, включая ликопин, могут быть мощными антиоксидантными молекулами и особенно эффективны при поглощении синглетного кислорода ROS. Из каротиноидов ликопин является наиболее эффективным поглотителем синглетного кислорода in vitro (Sies & Stahl 1995). Эта антиоксидантная активность была предложена в качестве механизма потенциальной пользы каротиноидов для здоровья (Sies & Stahl 1995, Agarwal & Rao 2000).Недавно этот антиоксидантный механизм был поставлен под сомнение, учитывая низкую концентрацию ликопина в организме по сравнению с другими молекулами антиоксиданта, такими как витамин E (Erdman et al. 2009). Это привело к предположению, что наблюдаемая польза для здоровья может быть связана с влиянием ликопина или окислительных метаболитов на экспрессию генов (Erdman et al. 2009).

ИСТОЧНИКИ ЛИКОПЕНА, ПОТРЕБЛЕНИЕ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ ДОСТУПНОСТЬ

Более 80% диетического ликопина в США приходится на переработанные томатные продукты, такие как кетчуп, томатный сок, соус для спагетти и соус для пиццы (Clinton 1998).Количество ликопина, содержащегося в обработанных пищевых продуктах, часто намного выше, чем в свежих пищевых продуктах, учитывая, что обработка часто включает концентрацию за счет потери воды. Например, кетчуп содержит 9,9–13,44 мг ликопина / 100 г, тогда как свежие помидоры содержат примерно 0,88–7,74 мг ликопина / 100 г сырого веса (Rao et al. 1998, Nguyen & Schwartz 1998).

Потребление ликопина с пищей сильно варьируется в зависимости от исследуемой популяции. Средний итальянец потребляет 14,3 мг каротиноидов в день (Lucarini et al.2006 г.). Ликопин составляет самую большую долю каротиноидов в итальянской диете, его среднее потребление составляет 7,4 мг / день (Lucarini et al. 2006). Среднее дневное потребление ликопина в США колеблется от 6,6 до 10,5 мг / день для мужчин и от 5,7 до 10,4 мг / день для женщин (Porrini & Riso 2005). Среднее зарегистрированное суточное потребление ликопина составляет 1,1 мг / день в Соединенном Королевстве, 1,6 мг / день в Испании, 3,8 мг / день в Австралии, 4,8 мг / день во Франции и 4,9 мг / день в Нидерландах (Porrini & Riso 2005 ).

Биодоступность ликопина может зависеть от ряда факторов, включая обработку пищевых продуктов и состав рациона. Ликопин может присутствовать в нескольких формах в свежих растительных продуктах, включая каротиноидно-белковые комплексы в хлоропластах или в кристаллической форме внутри хромопластов (Parada & Aguilera 2007). Влияние обработки и хранения на структуру и стабильность ликопина представляет интерес по ряду причин. Неправильная обработка и хранение (то есть воздействие света и кислорода) может изменить соотношение изомеров ликопина или полностью разрушить ликопин, делая эти пищевые продукты менее желательными для потребителя (Xianquan et al.2005). Традиционные коммерческие методы обработки не оказывают значительного влияния на уровни ликопина или на изомеризацию цис / транс (Nguyen & Schwartz 1998). Фактически, термическая обработка обычно улучшает биодоступность ликопина за счет разрушения клеточных мембран, что позволяет ликопину высвобождаться из тканевого матрикса (Nguyen et al. 2001). Многочисленные исследования показали, что ликопин из термически обработанных томатов более биодоступен, чем ликопин из свежих томатов (Gärnter et al.1997, Stahl & Sies 1992, Allen et al. 2002).

Абсолютное количество абсорбированного ликопина не сильно зависит от дозы. В исследовании, проведенном на мужчинах, наблюдалось всасывание ликопина после употребления одной порции томатного сока (Diwadkar-Navsariwala et al. 2003). Разные объемы томатного сока с постоянным процентом жира вводили для доставки от 10 до 120 мг ликопина. Диапазон абсорбции ликопина, независимо от дозы, составлял от 1,8 мг до 14,3 мг, в среднем 4.7 мг. Количество ликопина, поглощенное мужчинами, потребляющими сок, содержащий 120 мг ликопина, существенно не отличалось от количества, поглощенного мужчинами, потребляющими сок, содержащий 10 мг ликопина. Эти авторы предположили, что индивидуальные различия, а не дозы, имеют наибольшее влияние на количество абсорбированного ликопина (Diwadkar-Navsariwala et al. 2003).

Биодоступность ликопина сильно зависит от состава рациона. Учитывая, что ликопин является жирорастворимым соединением, употребление его с жиром увеличивает его биодоступность.Например, употребление салатов с жирной заправкой приводит к более высокому уровню каротиноидов в крови, чем употребление салатов с заправкой с пониженным содержанием жира. Когда в том же исследовании салаты потреблялись без жира, измеримого поглощения ликопина не наблюдалось (Brown et al. 2004). Исследование Unlu et al. (2005) показали аналогичный результат, согласно которому потребление томатной сальсы с авокадо (в качестве источника липидов) привело к увеличению абсорбции ликопина в 4,4 раза по сравнению с сальсой без авокадо.

Схема переваривания и абсорбции ликопина показана на рис.При попадании внутрь ликопин должен сначала высвободиться из пищевой матрицы, прежде чем он будет включен в смешанные мицеллы. Мицеллы содержат соли желчных кислот, холестерин и жирные кислоты из пищи, а амфифильная природа структуры мицелл помогает сохранять липофильные питательные вещества растворимыми в водном пищеварении (Во время и Харрисон, 2004). Мицеллы приближаются к неперемешивающемуся водному слою апикальной стороны кишечных клеток (энтероцитов), и ликопин пассивно диффундирует через апикальную мембрану (Во время и Харрисон 2004).Исторически исследователи полагали, что ликопин всасывается тем же путем, что и пищевые липиды, то есть пассивной диффузией (Furr & Clark 1997), и это до сих пор считается, по крайней мере, частично правдой. Однако за последние пять лет исследователи обнаружили, что абсорбции ликопина может способствовать мембранный переносчик холестерина, известный как рецептор-скавенджер класса B типа I (SR-BI) (В течение и др., 2005 г., Мусса и др., 2008 г.). Исследования также показали, что абсорбция ликопина может облегчаться другими переносчиками, но это еще не подтверждено (Во время и др.2005 г., Moussa et al. 2008 г.). Попадая в энтероцит, ликопин вместе с другими пищевыми липидами упаковывается в хиломикроны (Во время и Харрисон 2004). Затем хиломикроны переносятся через базолатеральную мембрану и попадают в лимфатическую систему, которая в конечном итоге высвобождает хиломикроны в кровь.

Конкуренция других каротиноидов или холестерина также может влиять на абсорбцию ликопина. Одно исследование на людях после приема пищи продемонстрировало, что совместное потребление томатного пюре (30 мг ликопина) + лютеина шпината (30 мг) или инкапсулированного лютеина (30 мг) снижает уровни ликопина хиломикрона на 70% и 61% соответственно по сравнению с уровнями ликопина. наблюдается после употребления только томатного пюре (Tyssandier et al.2002). Однако, когда субъекты потребляли эти продукты ежедневно в течение трех недель в половине предыдущей дозы (15 мг ликопина + 15 мг лютеина), не наблюдалось разницы в стабильных уровнях ликопина в плазме (Tyssandier et al. 2002). Исследование на людях, проведенное Johnson et al. (1997) наблюдали, что совместное введение кристаллов β-каротина в масле (60 мг) с кристаллами ликопина в масле (60 мг) увеличивало 24-часовую площадь сыворотки после приема пищи под кривой (AUC) ликопина в четыре раза по сравнению с с введением только ликопина.Неясно, увеличится ли абсорбция ликопина как части пищевого продукта при совместном употреблении с пищевым продуктом, содержащим β-каротин. Учитывая недавние исследования, демонстрирующие перенос ликопина переносчиком холестерина SR-BI, вполне вероятно, что генетические различия в экспрессии SR-BI также могут влиять на абсорбцию ликопина. Однако исследований по этой теме еще не опубликовано.

Кроме того, на абсорбцию ликопина могут влиять другие факторы, такие как пробиотики и однонуклеотидные полиморфизмы (SNP).Употребление йогурта, содержащего пробиотики, по сравнению с обычным йогуртом снизило уровень ликопина в крови в группе из 17 женщин, которые употребляли пробиотики в общей сложности 4 недели (Fabian & Emaldfa 2007). Это исследование предполагает, что пробиотики могут влиять на биодоступность или метаболизм ликопина (Fabian & Emaldfa 2007). Borel et al. (2007) сообщили, что на уровни каротиноидов в крови человека влияют SNP в аполипопротеинах A-IV и B, которые связаны с транспортом липидов.

Более 90% ликопина, содержащегося в переработанных томатных продуктах, имеет конформацию -trans (Nguyen & Schwartz 1998, Nguyen et al.2001 г., Boileau et al. 2002). Исследования in vivo демонстрируют, что цис- -изомеры ликопина, по-видимому, более биодоступны, чем все -транс-изомеры (Stahl & Sies 1992, Unlu et al. 2007). Эксперименты in vitro подтверждают вывод о том, что повышенная биодоступность ликопина -цис- -изомеров, по крайней мере частично, обусловлена повышенной мицелларизацией и повышенным поглощением энтероцитами по сравнению с ликопином all- trans (Failla et al. 2008).

Человеческие органы хранят ликопин в различной степени.Ликопин содержится в самых высоких концентрациях в печени, семенниках, надпочечниках и жировой ткани (Kun et al. 2006). В более низких концентрациях он обнаруживается в почках, яичниках, легких и простате (Kun et al. 2006).

ПОТЕНЦИАЛЬНАЯ ПОЛЬЗА ЛИКОПЕНА ДЛЯ ЗДОРОВЬЯ

За последнее десятилетие эффекты ликопина были изучены в отношении широкого спектра заболеваний (различных видов рака, ССЗ) (Dahan et al. 2008, Riccioni et al. 2008). Здесь мы обобщаем данные недавних исследований на людях, изучающих биологическое воздействие ликопина на эти болезненные процессы.

Рак

Рак является второй по значимости причиной смерти в Соединенных Штатах: в 2008 году было диагностировано около 1,5 миллиона новых случаев рака (American Cancer Society 2008). Употребление помидоров и томатных продуктов было связано со снижением заболеваемости рядом различных типов рака, в первую очередь рака простаты, легких и желудка (Giovannucci, 1999).

Из болезней, связанных с ликопином, рак простаты является одним из наиболее хорошо изученных.Помимо рака простаты, на мужское здоровье негативно влияет доброкачественная гиперплазия предстательной железы (ДГПЖ) — возрастное незлокачественное разрастание предстательной железы. Некоторые из самых убедительных эпидемиологических данных, подтверждающих связь между потреблением томатных продуктов и снижением заболеваемости раком простаты, были получены из Последующего исследования медицинских работников (HFPS). Совсем недавно проспективное обсервационное исследование Giovannucci et al. (2002) собрали данные опросника по частоте приема пищи (FFQ) в группе HPFS из 47 365 мужчин в 1986, 1990 и 1994 годах.Потребление ≥2 порций томатного соуса в неделю было связано со снижением риска рака простаты [относительный риск (ОР) = 0,77 по сравнению с < 1 порция томатного соуса в месяц, тренд P < 0,001]. Прием ликопина также был связан со снижением риска рака простаты, но эта связь была более слабой (Giovannucci et al. 2002). Исследование Lu et al. (2001) количественно определили ликопин в плазме крови 65 пациентов с раком простаты и 132 контрольных группы без рака.Значительная обратная связь между раком простаты и концентрацией ликопина в плазме [отношение шансов (OR) = 0,17, тренд P = 0,005] наблюдалась между самым высоким и самым низким квинтилями потребления (Lu et al. 2001). Другая группа исследователей наблюдала мужчин (n = 4770) из группы плацебо в исследовании по профилактике рака простаты в 1994–2003 гг., У которых изначально не было ДГПЖ (Kristal et al. 2008). В ходе исследования 876 мужчин заболели аденомой простаты (Kristal et al. 2008). Данные FFQ показали, что было снижение риска ДГПЖ на 18% у мужчин, которые потребляли наибольшее количество ликопина в качестве пищи или добавки (тренд P = 0.056). Недавний метаанализ продемонстрировал умеренную обратную зависимость между потреблением сырых помидоров (RR = 0,89 для максимального и самого низкого квартилей потребления) и томатных продуктов (RR = 0,81 для максимального и самого низкого квартилей потребления) и раком простаты (Etminan et al. 2004 г.). В совокупности эти исследования показывают, что потребление ликопина или продуктов, содержащих ликопин, снижает риск развития рака простаты.

Напротив, другие наблюдательные исследования показали слабость (Chang et al.2005) или неубедительных (Peters et al. 2007) доказательств, подтверждающих связь между раком простаты или ДГПЖ и потреблением ликопина.

С 1999 года по крайней мере 12 клинических испытаний изучали взаимосвязь между томатными продуктами или добавками, содержащими ликопин, и раком простаты. В большинстве этих исследований измерялся простатоспецифический антиген (ПСА). Уровни ПСА обычно измеряются для определения риска рака простаты и мониторинга лечения рака простаты (Chen et al. 2001). В одном исследовании Chen et al.(2001) 32 пациента с раком простаты употребляли томатный соус ежедневно в течение трех недель (30 мг ликопина в день) перед радикальной простатэктомией. Уровни сывороточного ПСА снизились после диетического вмешательства на 20% (p < 0,001). Кроме того, анализ ткани простаты выявил снижение отношения 8-гидрокси-2′-дезоксигуанозина (8-OHdG), аддукта ДНК, указывающего на окислительный стресс и связанного с раком, к 2′-дезоксигуанозину (маркер окислительное повреждение ДНК) у пролеченных пациентов по сравнению со случайным контролем (соотношение = 0.76 против 1,06 соответственно; р = 0,03) (Чен и др., 2001). В отдельном клиническом исследовании изучалось влияние потребления томатов и томатных продуктов с изолятом соевого белка и без него у мужчин (n = 41) с рецидивирующим бессимптомным раком простаты (Grainger et al. 2008). Ежедневное потребление помидоров и томатных продуктов (целевой уровень потребления ликопина 25 мг / день) в течение восьми недель снижало уровень ПСА в сыворотке у 34% субъектов (Grainger et al. 2008). Клиническое испытание фазы II было проведено с участием мужчин (n = 71) с диагнозом рака простаты, изучающих влияние на уровни ПСА капсулы томатного экстракта (Lyc-o-Mato®, ликопин 15 мг / день), потребляемых два раза в день на срок до 6 месяцев. с изофлавонами сои или без них (Vaishampayan et al.2007). Lyc-o-Mato® представляет собой олеорезин экстракта томатов, содержащий 15 мг ликопина вместе с другими фитохимическими веществами томатов, включая фитоен (1,5 мг), фитофлуен (1,4 мг), β-каротин (0,4 мг) и токоферолы (5 мг) (Voskuil et al. др. 2008 г.). Эти исследователи отметили, что у субъектов в обеих группах лечения наблюдалось снижение скорости повышения уровня ПСА (Vaishampayan et al. 2007). В плацебо-контролируемом клиническом исследовании с участием 37 мужчин с подтвержденной ДГПЖ мужчины принимали либо синтетическую добавку ликопина LycoVit® (15 мг / день), либо таблетку плацебо ежедневно в течение шести месяцев (Schwarz et al.2008 г.). Прием таблетки LycoVit® снизил уровень ПСА в сыворотке на 10% (p < 0,05) в течение шести месяцев, в то время как в группе плацебо не было изменений в уровне ПСА в сыворотке (Schwarz et al. 2008). В отличие от клинических испытаний, показывающих снижение уровня ПСА в качестве суррогатного маркера статуса рака простаты, в некоторых исследованиях наблюдали слабый эффект (Barber et al. 2006) или отсутствие эффекта (Clark et al. 2006, Bunker et al. 2007, Jatoi et al. 2007) потребления томатов или добавок ликопина для снижения риска рака простаты.

Эпидемиологические данные свидетельствуют о том, что потребление продуктов, содержащих ликопин, может снизить риск рака груди. Проспективное когортное исследование Cui et al. (2008) обнаружили, что потребление ликопина, согласно оценке FFQ, было обратно пропорционально связано с риском рака груди, положительного по рецепторам эстрогена и прогестерона у женщин в постменопаузе (n = 84805), за которыми наблюдали в среднем 7,6 лет (RR = 0,85 для самого высокого квартиля потребления. по сравнению с самым низким квартилем потребления, тренд P = 0.064). В двух исследованиях случай-контроль, сравнивающих пищевые привычки женщин с раком груди и без него, также наблюдалось значительное снижение отношения шансов тех, кто потреблял наибольшее количество ликопина по сравнению с наименьшим количеством диетического ликопина (Ronco et al.1999, Levi et al. 2001).

Также было исследовано влияние на биомаркеры риска рака груди. Поперечное исследование 207 выживших после рака груди, проведенное Thomson et al. (2007) продемонстрировали, что повышенные концентрации ликопина в плазме умеренно коррелировали со сниженными уровнями 8-OHdG.Недавнее рандомизированное плацебо-контролируемое двойное слепое перекрестное исследование, проведенное Voskuil et al. (2008) определили, что добавление томатного экстракта (Lyc-o-Mato®, 30 мг / день ликопина) в течение двух месяцев у женщин в пременопаузе с высоким риском рака груди (n = 36) снижает уровень свободного инсулиноподобного фактора роста-I ( IGF-I) на 7,0% (p < 0,05). IGF-I является биомаркером, связанным с повышенным риском рака груди у женщин в пременопаузе (Hankinson et al. 1998).

Рак легких — основная причина смерти от рака в США.С. как для мужчин, так и для женщин. Большинство случаев рака легких связано с употреблением табака. Рак легких представляет особый интерес с точки зрения исследований каротиноидов, учитывая повышенный риск развития рака легких, наблюдаемый у курильщиков, принимающих добавки с β-каротином (Omenn et al. 1996, Albanes et al. 1996). Совсем недавно когортное исследование «Витамины и образ жизни» (VITAL) показало, как предыдущее использование добавок β-каротина коррелировало с частотой развития рака легких у 77 126 свободноживущих жителей штата Вашингтон.Это исследование показало, что добавление β-каротина было связано с трехкратным увеличением заболеваемости раком легких (Satia et al. 2009). Эпидемиологические исследования показывают, что более высокое потребление ликопина связано либо со снижением риска рака легких (Yuan et al. 2001, Holick et al. 2002, Michaud et al. 2000, Ito et al. 2005b), либо с отсутствием изменений в раке легких. риск по сравнению с более низкими уровнями потребления (Yuan et al. 2003, Rohan et al. 2002, Voorrips et al. 2000, Knekt et al. 1999, Steinmetz et al.1993 г., Satia et al. 2009 г.). Недавний метаанализ Gallicchio et al. (2008) обобщает имеющиеся данные по ликопину и раку легких.

Также были неоднозначные результаты эпидемиологических исследований, изучающих связь между ликопином и риском колоректального рака. В проспективном когортном исследовании 3182 свободноживущих субъектов в сельских районах Японии было выявлено, что более высокие уровни ликопина в сыворотке значительно снижают риск смертности от колоректального рака (Ito et al. 2005a). Однако исследование случай-контроль, проведенное Kune & Watson (2006), метаанализ 11 когортных исследований Männisto et al.(2007) и исследование Leung et al. (2008) обнаружили, что потребление ликопина и уровни ликопина в плазме не были связаны с риском колоректального рака или выживаемостью у пациентов, у которых уже был диагностирован рак.

В нескольких клинических испытаниях сообщалось о положительном влиянии добавок, содержащих ликопин, на биомаркеры колоректального рака. Рандомизированное плацебо-контролируемое двойное слепое перекрестное исследование, проведенное Vrieling et al. (2007) продемонстрировали, что добавление ликопина, полученного из томатов (Lyc-o-Mato®, 30 мг / день ликопина) в течение восьми недель у 40 мужчин и 31 женщины в постменопаузе с высоким риском колоректального рака, увеличивало сывороточный белок-1, связывающий инсулиноподобный фактор роста. (IGFBP-1) у женщин на 22%.Концентрация IGFPB-2 в сыворотке крови у мужчин и женщин также увеличилась на 8,2% и 7,8% соответственно (Vrieling et al. 2007). Было показано, что IGFBP связывают и инактивируют IGF (более высокие концентрации IGF связаны с более высоким риском развития рака) (Vrieling et al. 2007). В другом двойном слепом рандомизированном плацебо-контролируемом исследовании Walfisch et al. (2007) наблюдали влияние добавок ликопина на уровни IGF у пациентов с раком толстой кишки. Это исследование показало, что добавление экстракта томатов (Lyc-o-Mato®, 30 мг / день ликопина) у 30 пациентов, ожидающих операции колэктомии, привело к снижению концентрации IGF-I в плазме на 25% (p = 0.02). Также наблюдалось 24% снижение соотношения IGF-I / IGFBP-3 (p = 0,03) (Walfisch et al. 2007). Это было сочтено положительным результатом исследования Ma et al. (1999) сообщили, что мужчины из самого высокого квинтиля концентраций IGF-I в плазме имели повышенный риск колоректального рака по сравнению с мужчинами из самого низкого квинтиля (p = 0,02). В другом исследовании 20 здоровых субъектов участвовали в двойном слепом перекрестном диетическом вмешательстве и употребляли напиток из томатного сока (250 мл напитка Lyc-o-Mato®, 5.7 мг ликопина, 3,7 мг фитоена, 2,7 мг фитофлуена, 1 мг β-каротина и 1,8 мг α-токоферола) и напиток плацебо в течение 26 дней каждый с 26-дневным вымыванием между ними (Riso et al. 2006) . Уровни IGF-I в плазме крови обратно коррелировали с потреблением ликопина (Riso et al. 2006). Напротив, исследование Graydon et al. (2007) не нашли доказательств того, что синтетический ликопин снижает IGF-I и IGFBP-3 у здоровых мужчин.

Рак желудка не распространен в Соединенных Штатах, но является обычным заболеванием в Корее, Японии и других странах Азии.Большинство исследований на людях, изучающих влияние ликопина на рак желудка, были скорее наблюдательными, чем клиническими. В 12-летнем исследовании типа случай-контроль с участием 191 случая и 570 контрольных групп в группе из 18 244 мужчин среднего возраста в Шанхае, Китай, наблюдались более высокие уровни ликопина в сыворотке крови у лиц, у которых развился рак желудка, по сравнению с контрольной группой (Yuan et al. 2004) . Аналогичным образом, двухлетнее исследование случай-контроль в Уругвае выявило сильную обратную зависимость между потреблением ликопина с пищей (как определено FFQ) и раком желудка при сравнении 120 случаев рака желудка с 360 контрольными (De Stefani et al.2000). В проспективном когортном исследовании наблюдалась подгруппа из 243 субъектов из исследования по профилактике рака α-токоферола, β-каротина (ATBC), у которых была диагностирована аденокарцинома желудка, и сравнивались их с ~ 29 000 курильщиков-мужчин в первоначальном исследовании (Nouraie et al. 2005). ). Данные этого исследования продемонстрировали, что более высокое потребление ликопина, как определено FFQ, коррелировало со снижением риска некардиального рака желудка (отношение рисков = 0,67). ВНИМАНИЕ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! Некардиальный рак желудка — это тип рака желудка, прочно связанный с Helicobacter pylori (Nouraie et al.2005). Напротив, ряд наблюдательных исследований, проведенных в Нидерландах, Испании, Швеции и Японии, не выявил связи между потреблением ликопина или уровнями ликопина в плазме и риском рака желудка (Botterweck et al. 2000, Garcia-Closas et al. 1999, Larsson et al. 2007 г., Перссон и др. 2008 г.).

В нескольких исследованиях изучалось влияние ликопина на рак поджелудочной железы. Ранние данные свидетельствуют о том, что повышенные уровни ликопина в сыворотке крови связаны со снижением риска рака поджелудочной железы (Burney et al.1989, Комсток и др. 1991). Совсем недавно исследование «случай-контроль» кувейтцев (11 случаев с подобранной контрольной группой), проведенное Abiaka et al. (2001) обнаружили, что низкие уровни ликопина в плазме (0,12 мкМ для случаев по сравнению с 0,72 мкМ для контроля) были связаны с раком поджелудочной железы (p < 0,0001). Другое исследование случай-контроль (462 случая и 4721 популяционный контроль) в Канаде, проведенное Nkondjock et al. (2005) сообщили, что повышенное потребление ликопина с пищей (по оценке FFQ) было связано со снижением риска рака поджелудочной железы у мужчин при сравнении самого высокого и самого низкого квинтилей потребления (OR = 0.69, P _тренд = 0,026).

Было проведено ограниченное количество эпидемиологических исследований ликопина и рака яичников. В исследовании «случай-контроль» (549 случаев, 516 контролей) Cramer et al. (2001) у женщин в пре- и постменопаузе обнаружили, что потребление ликопина с пищей (определяемое FFQ) было значительно и обратно пропорционально связано с риском рака яичников (OR = 0,53 для самого высокого квинтиля по сравнению с самым низким квинтилем потребления, P _тренд = 0,003).Недавнее исследование методом случай-контроль (45 случаев, 135 контролей) Jeong et al. (2009) корейских женщин также обнаружили, что повышенный уровень ликопина в плазме был связан со снижением риска рака яичников (OR = 0,09 между максимальным и самым низким уровнем потребления, тренд P = < 0,0001). В отличие от этих исследований, другие не обнаружили взаимосвязи между ликопином в сыворотке и риском рака яичников (Helzlsouer et al. 1996, Zhang et al. 2007).

Сердечно-сосудистые заболевания

Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) являются основной причиной смерти в Соединенных Штатах, и в 2005 году на их долю пришлось более 652000 смертей (U.S. Данные о смертности за 2008 г.). Повышенные уровни ликопина в плазме были связаны со снижением риска сердечно-сосудистых заболеваний, а также сообщалось об улучшении биомаркеров, связанных с сердечно-сосудистыми заболеваниями. Например, исследование Sesso et al. (2003) из 38 445 женщин обнаружили, что более высокие уровни потребления продуктов на основе томатов были связаны со снижением риска сердечно-сосудистых заболеваний (RR = 0,71, тренд P = 0,029) и инфаркта миокарда (RR = 0,43, тренд P = 0,033) между самым высоким и самым низким квинтилями потребления.Отдельное исследование с участием финских мужчин (n = 1028) обнаружило обратную связь между концентрацией ликопина в сыворотке и толщиной интима-медиа общей сонной артерии, показателем раннего атеросклероза (Rissanen et al. 2003). Кроме того, в исследовании с использованием подмножества данных (n = 4557) из третьего Национального исследования здоровья и питания (NHANES III) наблюдалось снижение уровня каротиноидов (включая ликопин) в сыворотке крови у лиц с более высокими уровнями С-реактивного белка, маркера. воспаления (Кричевский и др.2000).

Некоторые клинические испытания также подтвердили связь между сердечно-сосудистыми заболеваниями и потреблением ликопина. Некоторые исследования показали, что ликопин может снижать синтез холестерина и усиливать деградацию липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) (Arab & Steck 2000). В рандомизированном перекрестном исследовании, проведенном Агарвалом и Рао (1998), использовались четыре различных метода лечения: плацебо (0 мг ликопина), томатный сок (50,4 мг ликопина), соус для спагетти (39,2 мг ликопина) и томатный олеорезин (75 мг ликопина).Девятнадцать здоровых субъектов принимали каждое лечение ежедневно в течение одной недели и проходили недельный период вымывания между каждой неделей лечения. Концентрация ликопина в сыворотке крови удваивалась у субъектов, получавших ликопин-содержащую терапию. Кроме того, значительное снижение перекисного окисления липидов в сыворотке и окисления ЛПНП наблюдалось после того, как субъекты принимали любой из трех препаратов, содержащих ликопин (Agarwal & Rao 1998). В исследовании Hadley et al. (2003) здоровые люди получали одну из трех томатных процедур в течение 15 дней (сгущенный томатный суп, готовый к употреблению томатный суп или овощной сок V8®).Образцы крови были взяты в начале и после лечения, и фракция ЛПНП + ЛПОНП (липопротеины очень низкой плотности) подвергалась ex vivo окислительному стрессу (Hadley et al. 2003). Период задержки окисления липопротеинов, показатель защиты от окислительного стресса, был значительно увеличен во всех трех группах лечения (Hadley et al. 2003). Отдельное клиническое испытание Shen et al. (2007) лечили 24 пациента свежими помидорами, томатным соком или ликопиновым напитком (все они давали 40 мг ликопина в день) в течение шести недель.Это исследование показало, что уровни триглицеридов и холестерина ЛПНП были снижены, а уровень холестерина липопротеинов высокой плотности (ЛПВП) увеличился у субъектов, которые потребляли свежие томаты и томатный сок. В более недавнем исследовании 18 здоровых мужчин и женщин ежедневно употребляли соево-томатный напиток (21 мг ликопина в день) в течение восьми недель (Bohn et al. 2009). Опять же, потребление напитка значительно снизило восприимчивость фракции плазмы крови ЛПНП + ЛПОНП к окислительному повреждению. Кроме того, уровни холестерина ЛПВП значительно увеличились, а соотношение общий холестерин / холестерин ЛПВП значительно снизилось в ходе исследования (Bohn et al.2009 г.).

Напротив, четырехнедельное исследование диетических вмешательств, проведенное Paterson et al. (2006) наблюдали, что потребление диеты, богатой каротиноидами, не влияло на антиоксидантный статус плазмы или маркеры окислительного стресса.

Другие болезни

Хотя исследования способности ликопина изменять рак и риск сердечно-сосудистых заболеваний наиболее распространены, было много других заболеваний, которые также были исследованы в отношении потребления ликопина. Эти состояния включают вызванные ультрафиолетом (УФ) солнечные ожоги, гингивит, остеопороз, психические расстройства и астму.

Способность ликопина воздействовать на солнечные ожоги, вызванные УФ-излучением, была исследована на девяти здоровых людях, потребляющих 40 г томатной пасты (~ 16 мг ликопина) с оливковым маслом ежедневно в течение 10 недель. Контрольная группа (n = 10) употребляла только оливковое масло. На неделе = 0 и неделе = 10 субъектов облучали имитатором солнечного излучения, а значение а (т. Е. Покраснение) оттенка кожи измеряли с помощью хроматометрии. У лиц в группе лечения наблюдалось 32% -ное снижение значений a между неделей = 0 и неделей = 10, и на 40% ниже значений a по сравнению с контрольной группой.Это исследование показывает, что обработка томатной пастой защищает от солнечных ожогов, вызванных УФ-излучением (Stahl et al. 2001). Отдельное клиническое исследование было проведено с участием 36 здоровых взрослых, в ходе которого субъекты потребляли только синтетический ликопин, экстракт томатов в мягком геле или томатный напиток в течение 12 недель. Кожу спины облучали на 0, 4 и 12 неделях искусственным ультрафиолетовым светом на достаточно высоких уровнях, чтобы вызвать легкий солнечный ожог. У субъектов, потреблявших томатный экстракт и томатный напиток, количество солнечных ожогов, вызванных симулятором солнечного излучения, на 12 неделе снизилось на 38% и 48% соответственно, по сравнению с только 25% снижением в группе, получавшей синтетический ликопин (Aust et al.2005).

Рандомизированное плацебо-контролируемое исследование гингивита с разделением рта было выполнено Chandra et al. (2007) у 20 здоровых людей с клиническими признаками гингивита. Группа лечения (n = 10) получала ликопин в дозе 8 мг / день (LycoRed®), тогда как контрольная группа (n = 10) получала плацебо ежедневно в течение двух недель. В этом исследовании пациенты, получавшие лечение ликопином, показали статистически значимое снижение гингивита и индекса кровотечения (Chandra et al. 2007).

Низкие уровни ликопина в сыворотке крови также были связаны с повышенным риском психических расстройств (Li & Zhang 2007).Поперечное исследование с использованием данных NHANES III (n = 6680) выявило обратную связь между уровнями определенных витаминов и каротиноидов в сыворотке крови и попытками самоубийства у субъектов (Li & Zhang 2007). У людей, пытающихся покончить жизнь самоубийством, уровень антиоксидантных витаминов и каротиноидов в сыворотке был ниже, чем у тех, кто не пытался покончить с собой. Разница между средними уровнями ликопина в сыворотке крови у лиц, пытающихся покончить жизнь самоубийством, и у тех, кто не пытается совершить самоубийство, = 0,142 мкмоль / л (Li & Zhang 2007).

Исследования также показали, что ликопин может оказывать терапевтическое действие на астму.Рандомизированное перекрестное исследование 17 взрослых астматиков, получавших плацебо, томатный экстракт (Lyc-o-Mato®, 45 мг / день ликопина) и томатный сок (45 мг / день ликопина) в течение семи дней, показало снижение притока нейтрофилов в дыхательные пути. и снижение активности эластазы нейтрофилов мокроты после обработки томатным экстрактом и томатным соком (Wood et al. 2008). Во время лечения плацебо концентрация ликопина в плазме снижалась, процент нейтрофилов увеличивался, а уровни нейтрофильной эластазы увеличивались (Wood et al. 2008).Это исследование предполагает, что потребление ликопина может улучшить функцию легких у астматиков.

Наконец, недавний отчет также показал, что потребление ликопина с пищей, измеренное с помощью FFQ, было обратно пропорционально риску перелома в 17-летнем последующем исследовании пожилых людей (Sahni et al. 2009). Хотя все эти исследования являются предварительными, они представили положительные результаты и указывают потенциальные направления будущих исследований ликопина и диетических вмешательств с томатными продуктами.

ЛИКОПЕНОИДЫ: ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ ОКСИДАТИВНЫЕ МЕТАБОЛИТЫ ЛИКОПЕНА

Исследователи недавно использовали термин ликопеноиды для обозначения продуктов окисления ликопина, которые содержат по крайней мере один атом кислорода (Lindshield et al.2007). Исторически о ликопеноидах сообщалось в томатах и томатных продуктах, но только недавно они привлекли внимание людей, заинтересованных в потенциальной пользе ликопина или его метаболитов для здоровья. Этот вновь обретенный интерес в значительной степени стимулирован недавним открытием второго фермента расщепления каротиноидов у млекопитающих (β-каротиноксигеназа 2 или BCO2) и возможностью того, что он может расщеплять ликопин с образованием метаболитов (Kiefer et al. 2001). До этого отчета было известно, что у млекопитающих существует только один фермент расщепления каротиноидов — фермент, ответственный за превращение каротиноидов провитамина А в витамин А.

Несколько ликопеноидов были обнаружены в пищевых продуктах. Сообщалось об апо-6′-ликопенале и апо-8′-ликопенале в томатной пасте (Winterstein et al. 1960). Позже в 1973 году Бен-Азиз и др. подтвердили присутствие апо-6′-ликопенала и апо-8′-ликопенала в сырых томатах, что указывает на то, что эти продукты также присутствуют в необработанных фруктах. Недавно мы наблюдали апо-10′-, -12′- и -14′-ликопенал (в дополнение к ранее описанным апо-6′- и апо-8′-ликопеналам) в сырых томатах, арбузе, грейпфруте и томатные продукты (Kopec et al.2008, 2009). Сообщалось также о производных эпоксида в томатах. Ликопин-1,2-эпоксид и ликопин-5,6-эпоксид были идентифицированы в томатах и томатных продуктах несколькими группами (Britton & Goodwin 1969, 1975; Ben-Aziz et al.1973; Kamber & Pfander 1984; Khachik et al. 1992). Позже исследование ядерного магнитного резонанса (ЯМР) показало, что ликопин-5,6-эпоксид был ошибочно идентифицирован и на самом деле был 2,6-циклоликопен-1,5-эпоксидом (Khachik et al. 1998b). Производное спирта, 2,6-циклоликопен-1,5-диол, также было обнаружено в томатных продуктах, а позднее обнаружено, что оно присутствует в плазме крови и грудном молоке человека (Khachik et al.1992, 1997, 1998а). Эти исследователи предположили, что 2,6-циклоликопен-1,5-эпоксид превращается в 2,6-циклоликопен-1,5-диол у людей, предположительно во время пищеварения, учитывая, что ни один из эпоксидов не был идентифицирован в образцах человека, и алкоголь присутствует в пище в небольших количествах (Хачик и др., 1998b).

Присутствие аполикопеноидов в тканях томатов неудивительно. Анализ генома Arabidopsis выявил девять потенциальных ферментов расщепления каротиноидов (Schwartz et al.2001). Было показано, что расщепляющая каротиноиды диоксигеназа 1 (CCD1) в растении аннато расщепляет ликопин с образованием биксинового альдегида, предшественника каротиноидов биксина и норбиксина (Bouvier et al. 2003). CCD1 из томатов также, как было показано, расщепляет ликопин по двойным связям 5′-6 ‘и 9′-10’ при трансфекции в модель Escherichia coli , которая накапливает ликопин (Vogel et al. 2008). Нелетучими фрагментами этих реакций могут быть апо-6′-ликопенал и апо-10′-ликопенал, соответственно (см.), Хотя они не исследовались в этом исследовании (Vogel et al.2008 г.). Расщепление каротиноидов диоксигеназа 7 (CCD7), как было показано, расщепляет 9′-10 ‘связь ликопена (Schwartz et al. 2004). Однако неизвестно, расщепляют ли ликопин другие идентифицированные ПЗС. В качестве альтернативы ликопин можно неспецифически расщеплять в результате реакции с активными формами кислорода или совместного окисления с другими липидами в растительной ткани.

Состав различных ликопеноидов.

Совсем недавно ликопеноиды были идентифицированы в тканях животных, потребляющих ликопин.В одном исследовании хорьки потребляли добавку ликопина (порошок LycoVit®, 10% ликопина) ежедневно в течение девяти недель (Hu et al. 2006). После умерщвления апо-10′-ликопенол был обнаружен в легочной ткани этих животных (Hu et al. 2006). В отдельном исследовании Gajic et al. (2006) крысам давали ликопен как часть их ежедневного рациона в течение 50 дней, а затем вводили радиоактивную дозу ликопена на 51 день. Затем из печени крыс извлекали апо-8′-ликопенал и предполагаемый апо-12′-ликопенал. идентифицированы (Gajic et al.2006 г.). Кроме того, мы идентифицировали апо-6 ‘, -8′-, -10′-, -12′- и -14’-ликопенал в плазме крови людей, которые потребляли 300 мл напитка на основе томатного сока ежедневно в течение восемь недель (Kopec et al. 2008, 2009).

Предполагается, что присутствие ликопеноидов у животных является результатом ферментативного расщепления. Фактически было показано, что ликопин ферментативно расщепляется BCO2 in vitro (Keifer et al. 2001, Hu et al. 2006). Другие исследователи инкубировали ликопин с различными гомогенатами тканей ex vivo и продуцировали продукты окисления, но неясно, являются ли они продуктами реакции BCO или могут ли они продуцироваться in vivo (dos Anjos Ferreira et al.2004 г.).

Данных о биологических эффектах ликопеноидов очень мало. Было показано, что апо-10′-ликопеновая кислота ингибирует рост эпителиальных клеток бронхов человека BEAS-2B in vitro (Lian & Wang 2008). Также было показано, что кормление апо-10′-ликопеновой кислотой снижает множественность опухолей легких на модели мышей A / J, эффект, который был дозозависимым (Lian et al. 2007).

ВЫВОДЫ

В этой статье мы суммировали химический состав ликопина, источники, потребление, биодоступность и последние данные о потенциальном воздействии ликопина на здоровье.Однако остается много вопросов. Во-первых, что наиболее важно, оказывает ли ликопин воздействие на здоровье человека? Обзор эпидемиологической литературы, проведенный Джованнуччи (2005), показывает, что еще слишком рано определять, полезны ли помидоры или ликопин для здоровья.

Кроме того, неясно, является ли явное снижение риска заболевания, наблюдаемое в эпидемиологических и краткосрочных проспективных исследованиях, результатом всего томата или одного ликопина (Giovannucci 2005, Clinton 2005).Исследования ликопина проводились с томатными продуктами, добавками на основе томатов и синтетическим ликопином. Эти методы лечения не являются взаимозаменяемыми и не должны считаться эквивалентными. Фактически, различие между ликопином и томатами было проведено Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) в своем обзоре литературы в 2005 г., чтобы оценить предлагаемые полезные свойства томатов, ликопина и рака (Kavanaugh et al. 2007). FDA пришло к выводу, что «нет достоверных доказательств связи между потреблением ликопина и снижением риска рака простаты, легких, колоректального рака, желудка, груди, яичников, эндометрия или поджелудочной железы», но FDA обнаружило «очень ограниченные доказательства в поддержку. связь между употреблением томатов и снижением риска рака простаты, яичников, желудка и поджелудочной железы »(Kavanaugh et al.2007). Этот вывод был основан на ограниченных данных высококачественных клинических испытаний на людях, необходимых для соответствия стандартам FDA, и может измениться, если будут опубликованы более строго спланированные исследования с положительными результатами.

Как и другие натуральные продукты с потенциальной пользой для здоровья, ликопин продолжает исследоваться благодаря многообещающим эпидемиологическим данным, а также обнадеживающим результатам в исследованиях на культурах клеток и на животных. Расхождения между данными о животных, которые в целом положительны, и данными о людях, которые менее ясны, могут быть связаны с различиями в абсорбции и метаболизме каротиноидов у людей по сравнению с другими видами, а также с межличностными различиями у людей.Исследования на животных обычно проводятся с использованием инбредных животных, что снижает генетическую изменчивость и дает более четкие результаты. Эффекты ликопина могут варьироваться от человека к человеку в зависимости от диетического потребления ликопина и жиров, пробиотиков, генетических различий в метаболизме и других факторов. Еще одним ограничением исследований на людях является отсутствие легкодоступных биомаркеров конкретных заболеваний для оценки воздействия лечения на процесс заболевания. Хотя ПСА часто используется для мониторинга риска рака простаты, а ЛПНП широко признан в качестве маркера сердечно-сосудистых заболеваний, многие другие заболевания не имеют специфических биомаркеров.По этой причине более общие маркеры, такие как IGF-I или 8-OHdG, часто используются для оценки воздействия ликопина или томатных продуктов на биохимические процессы заболевания.

При рассмотрении воздействия диетического компонента на здоровье трудно отделить эффект одного соединения от воздействия нескольких соединений, содержащихся в цельных продуктах питания и цельных диетах. Если ликопин в томатах действительно влияет на здоровье, является ли он основным активным компонентом или действует синергетически с другими биологически активными соединениями томатов (провитамином А, флавоноидами, витамином С, клетчаткой и т. Д.)? Фактически, как сообщалось, флавоноиды томатов, включая рутин, кверцетин, нарингенин, потенциально могут повлиять на здоровье. Было показано, что кверцетин и рутин снижают индуцированную IGF-1 пролиферацию клеток простаты in vitro (Wang et al. 2003). Было показано, что кверцетин снижает индуцированное нейтрофилами окисление ЛПНП (Loke et al. 2008). Также было показано, что халкон нарингенина из кожицы помидоров оказывает противовоспалительное действие у мышей (Yamamoto et al. 2004). Эти исследования предоставляют доказательства того, что флавоноиды могут влиять на здоровье помидоров и томатных продуктов.Другие исследования показали, что гликоалкалоиды, присутствующие в томате, также вызывают множество биологических эффектов (см. Обзор Friedman 2002). Кроме того, недавние исследования показали, что водорастворимые компоненты томатов могут снижать агрегацию тромбоцитов, фактор риска сердечно-сосудистых заболеваний (O’Kennedy et al. 2006), хотя компоненты, присутствующие в этой фракции, не были четко идентифицированы. Аналогичным образом, некоторые авторы предположили, что уровни ликопина и других каротиноидов в крови просто указывают на диету, включающую фрукты и овощи.Все больше данных указывает на то, что цельные продукты могут быть более эффективными, чем отдельные соединения для снижения риска заболеваний (Clinton 2005, Gómez-Romero et al. 2007).

Если ликопин действительно оказывает положительное воздействие на здоровье, то какие механизмы задействованы? Действует ли ликопин сам по себе или у человека он метаболизируется в биологически активное соединение? Всасываются ли окислительные продукты ликопина, содержащиеся в пищевых продуктах (ликопеноиды)? Ликопин может быть мощным антиоксидантом в соответствующих химических условиях, но он присутствует в человеческом организме в таких низких количествах, что некоторые исследователи предположили, что любые наблюдаемые эффекты для здоровья могут быть связаны с влиянием ликопина или его метаболитов на регуляцию генов (Erdman et al. al.2009 г.). Однако накопление ликопина в некоторых органах может допускать несколько механизмов действия, включая антиоксидантную активность. Данные исследований на животных предполагают, что ликопин может метаболизироваться в организме человека (Hu et al. 2006, Gajic et al. 2006), тогда как данные исследований на людях предполагают, что окислительные продукты ликопина могут абсорбироваться и далее метаболизироваться в организме человека (Khachik et al. др. 1992, 1997, 1998a, 1998b). Возможно, существуют другие биологически активные метаболиты ликопина, которые еще предстоит идентифицировать.Необходима дальнейшая работа, чтобы понять, как ликопин метаболизируется в фруктах и овощах, а также всасываются ли эти продукты в кровоток, распределяются и хранятся ли они в тканях. Кроме того, необходимы дополнительные исследования, чтобы понять, как ликопин метаболизируется в организме человека и имеют ли эти метаболиты биологические эффекты.

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить Рут Уоткинс за ее помощь с техническим редактированием этой рукописи.

Глоссарий

могут генерировать свободные радикалы

сердечно-сосудистые заболевания	сердечно-сосудистое заболевание
Изопреноид	относится к ненасыщенной разветвленной 5-углеродной структуре
молекулы реактивного кислорода (ROS)
Окислительный стресс	дисбаланс между окислительными и восстановительными реакциями в живых системах, благоприятствующий окислению до такой степени, что повреждение может привести к повреждению
Однонуклеотидные полиморфизмы (SNP)	вариации в одна пара оснований ДНК в гене, которая может влиять на функцию белков, продуцируемых этим геном
ДГПЖ	доброкачественная гиперплазия предстательной железы
FFQ	опросник частоты приема пищи
RR	относительный риск	OR	отношение шансов
Простатоспецифический антиген (ПСА)	биомаркер, обычно используемый для мониторинга риска или прогрессирования рака простаты
8-гидрокси-2′-дезоксигуанозин (8-OHdG)	аддукт ДНК, указывающий на окислительный стресс, который может привести к раку или другим заболеваниям
Рандомизированное плацебо-контролируемое двойное слепое перекрестное исследование	клиническое испытание, в котором лечение назначается случайным образом, ни исследователи, ни участники не знают группы лечения, и каждый участник получает каждый участник получал каждое лечение в ходе исследования
Инсулиноподобный фактор роста-1 (IGF-I)	биомаркер роста, который иногда используется для мониторинга развития и прогрессирования нескольких видов рака, включая рак простаты, легкое и толстая кишка

ЦИТИРОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА

Abiaka CD, Al-Awadi FM, Al-Sayer H, Gulshan S, Behbehani A, Фергалы М.Антиоксидант микронутриентов плазмы у онкологических больных. Обнаружение рака Пред. 2001. 25 (3): 245–53. [PubMed] [Google Scholar]
Agarwal S, Rao AV. Томатный ликопин и окисление липопротеинов низкой плотности: исследование с вмешательством в рацион человека. Липиды. 1998. 33 (10): 981–84. [PubMed] [Google Scholar]
Agarwal S, Rao AV. Ликопин из помидоров и его роль в здоровье человека и хронических заболеваниях. CMAJ. 2000. 163 (6): 739–44. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Албейнс Д., Хейнонен О.П., Тейлор П.Р., Виртамо Дж., Эдвардс Б.К.Добавки с альфа-токоферолом и бета-каротином и заболеваемость раком легких в исследовании профилактики рака с альфа-токоферолом и бета-каротином: влияние исходных характеристик и соответствие исследования. J Natl Can Inst. 1996. 88 (21): 1560–70. [PubMed] [Google Scholar]
Аллен С.М., Смит А.М., Клинтон С.К., Шварц С.Дж. Употребление помидоров увеличивает концентрацию изомеров ликопина в грудном молоке и плазме кормящих женщин. J Am Diet Assoc. 2002. 102 (9): 1257–62. [PubMed] [Google Scholar]
Американское онкологическое общество.Факты и цифры о раке, 2008 г. Атланта: Американское онкологическое общество; 2008. [Google Scholar]
Араб Л., Штек С. Ликопин и сердечно-сосудистые заболевания. Am J Clin Nutr. 2000; 71 (6): 1691С – 95С. [PubMed] [Google Scholar]
Aust O, Stahl W, Sies H, Tronnier H, Heinrich U. Добавление продуктов на основе томатов увеличивает уровни ликопена, фитофлуена и фитоенов в сыворотке крови человека и защищает от эритемы, вызванной УФ-светом. . Int J Vitam Nutr Res. 2005. 75 (1): 54–60. [PubMed] [Google Scholar]
Barber NJ, Zhang X, Zhu G, Pramanik R, Barber JA, et al.Ликопин подавляет синтез ДНК в первичных эпителиальных клетках простаты in vitro, и его введение связано со снижением скорости распространения специфического антигена простаты в клинических исследованиях фазы II. Prostate Cancer Prostatic Dis. 2006. 9 (4): 407–13. [PubMed] [Google Scholar]
Бен-Азиз А., Бриттон Дж., Гудвин Т.В. Эпоксиды каротина томатов. Фитохимия. 1973; 12 (11): 2759–64. [Google Scholar]
Блок G, Паттерсон Б., Субар А. Фрукты, овощи и профилактика рака: обзор эпидемиологических данных.Nutr Cancer. 1992. 18 (1): 1-29. [PubMed] [Google Scholar]
Бон Т., Блэквуд М., Фрэнсис Д., Тиан К., Шварц С.Дж., Клинтон С.К. Биодоступность фитохимических компонентов из нового томатного сока, обогащенного ликопином, обогащенного соей, разработанного для целевых испытаний по профилактике рака. 2009. Отправлено. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Boileau TWM, Boileau AC, Erdman JW., Jr. Биодоступность полностью транс- и цис-изомеров ликопина. Exp Biol Med. 2002. 227 (10): 914–19. [PubMed] [Google Scholar]
Borel P, Moussa M, Reboul E, Lyan B, Defoort C, et al.Уровни витамина Е и каротиноидов в плазме крови человека связаны с генетическим полиморфизмом генов, участвующих в метаболизме липидов. J Nutr. 2007. 137 (12): 2653–59. [PubMed] [Google Scholar]
Botterweck AAM, Van Den Brandt PA, Goldbohm RA. Витамины, каротиноиды, пищевые волокна и риск рака желудка. Рак. 2000. 88 (4): 737–48. [PubMed] [Google Scholar]
Бувье Ф., Догбо О., Камара Б. Биосинтез пищевого и косметического растительного пигмента биксина (аннатто) Наука. 2003. 300 (5628): 2089–91.[PubMed] [Google Scholar]
Бриттон Дж., Гудвин Т.В. Встречаемость 1,2-оксида фитоена и родственных каротиноидов в томатах. Фитохимия. 1969. 8 (11): 2257–58. [Google Scholar]
Бриттон Дж., Гудвин Т.В.. Эпоксиды каротина из мутанта дельта-томата. Фитохимия. 1975. 14 (11): 2530–32. [Google Scholar]
Бриттон Дж., Лиаен-Йенсен С., Пфандер Х. Справочник по каротиноидам. Базель / Бостон / Берлин: Birkhäuser Verlag; 2004. [Google Scholar]
Brown MJ, Ferruzzi MG, Nguyen ML, Cooper DA, Eldridge AL, et al.Биодоступность каротиноидов выше в салатах, употребляемых с полным содержанием жира, чем с заправкой для салатов с пониженным содержанием жира, как измерено с помощью электрохимического обнаружения. Am J Clin Nutr. 2004. 80 (2): 396–403. [PubMed] [Google Scholar]
Bunker CH, McDonald AC, Evans RW, de la Rosa N, Boumosleh JM, Patrick AL. Рандомизированное испытание добавок ликопина у мужчин Тобаго с высоким риском рака простаты. Nutr Cancer. 2007. 57 (2): 130–37. [PubMed] [Google Scholar]
Burney PGJ, Comstock GW, Morris JS.Серологические предшественники рака: микроэлементы сыворотки и последующий риск рака поджелудочной железы. Am J Clin Nutr. 1989. 49 (5): 895–900. [PubMed] [Google Scholar]
Чандра Р.В., Прабхуджи М.Л., Рупа Д.А., Равираджан С., Кишор Х.С. Эффективность ликопина при лечении гингивита: рандомизированное плацебо-контролируемое клиническое исследование. Здоровье полости рта Prev Dent. 2007. 5 (4): 327–36. [PubMed] [Google Scholar]
Чанг С., Эрдман Дж. У., мл., Клинтон С. К., Вадивело М., Стром С. С. и др. Связь между каротиноидами плазмы и раком простаты.Nutr Cancer. 2005. 53 (2): 127–34. [PubMed] [Google Scholar]
Chasse GA, Mak ML, Deretey E, Farkas I., Torday LL, et al. Неэмпирическое компьютерное исследование выбранных изомеров ликопина. J Mol Struc. 2001; 571: 27–37. [Google Scholar]
Chen L, Stacewicz-Sapuntzakis M, Duncan C, Sharifi R, Ghosh L, et al. Окислительное повреждение ДНК у пациентов с раком простаты, потребляющих первые блюда на основе томатного соуса в качестве цельного питания. J Natl Cancer Inst. 2001; 93 (24): 1872–79. [PubMed] [Google Scholar]
Clark PE, Hall MC, Borden LS, Jr, Miller AA, Hu JJ, et al.Фаза I-II проспективного исследования дозы ликопина у пациентов с биохимическим рецидивом рака простаты после окончательной местной терапии. Урология. 2006. 67 (6): 1257–61. [PubMed] [Google Scholar]
Клинтон СК. Ликопин: химия, биология и значение для здоровья и болезней человека. Nutr Rev.1998; 56 (2): 35–51. [PubMed] [Google Scholar]
Клинтон СК. Помидоры или ликопин: роль в канцерогенезе простаты? J Nutr. 2005; 135 (8): 2057С – 59С. [PubMed] [Google Scholar]
Коэн Л.Обзор исследований каротиноидов, ликопина и химиопрофилактики рака на животных моделях. Exp Biol Med. 2002. 227 (10): 864–68. [PubMed] [Google Scholar]
Комсток GW, Helzlsouer KJ, Bush TL. Преддиагностические уровни каротиноидов и витамина Е в сыворотке крови в связи с последующим раком в Вашингтоне, штат Мэриленд. Am J Clin Nutr. 1991; 53 (1): 260С – 64С. [PubMed] [Google Scholar]
Крамер Д.В., Купер Х., Харлоу Б.Л., Титус-Эрнстофф Л. Каротиноиды, антиоксиданты и риск рака яичников у женщин в пре- и постменопаузе.Int J Cancer. 2001. 94 (1): 128–34. [PubMed] [Google Scholar]
Цуй Й., Шикани Дж. М., Лю С., Шагуфта Й., Рохан Т. Э. Избранные антиоксиданты и риск инвазивного рака груди, определяемого рецепторами гормонов, среди женщин в постменопаузе в обсервационном исследовании здоровья женщин. Am J Clin Nutr. 2008. 87 (4): 1009–18. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Дахан К., Феннал М., Кумар Н.Б. Ликопин в профилактике рака простаты. J Soc Integr Oncol. 2008. 6 (1): 29–36. [PubMed] [Google Scholar]
Де Стефани Э., Боффетта П., Бреннан П., Денео-Пеллегрини Х., Карцоглио Дж. К. и др.Диетические каротиноиды и риск рака желудка: исследование случай-контроль в Уругвае. Eur J Cancer Пред. 2000. 9 (5): 329–34. [PubMed] [Google Scholar]
Diwadkar-Navsariwala V, Novotny J, Gustin DM, Sosman JA, Rodvold KA, et al. Физиологическая фармакокинетическая модель, описывающая распределение ликопина у здоровых мужчин. J Lipid Res. 2003. 44 (10): 1927–39. [PubMed] [Google Scholar]
душ Аньос Феррейра А.Л., Йеум К.Дж., Рассел Р.М., Крински Н.И., Тан Г. Ферментативные и окислительные метаболиты ликопина.J Nutr Biochem. 2004. 15 (8): 493–502. [PubMed] [Google Scholar]
Во время A, Dawson HD, Harrison EH. Транспорт каротиноидов снижается, а экспрессия транспортеров липидов SR-BI, NPC1L1 и ABCA1 подавляется в клетках како-2, обработанных эзетимибом. J Nutr. 2005. 135 (10): 2305–12. [PubMed] [Google Scholar]
Во время A, Harrison EH. Кишечная абсорбция и метаболизм каротиноидов: выводы из клеточной культуры. Arch Biochem Biophys. 2004. 430 (1): 77–88. [PubMed] [Google Scholar]
Эрдман Дж. У., младший, Форд Н. А., Линдшилд Б.Л.Связаны ли свойства ликопина с его антиоксидантной функцией? Arch Biochem Biophys. 2009. 483 (2): 229–35. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Etminan M, Takkouche B., Caamano-Isorna F. Роль томатных продуктов и ликопина в профилактике рака простаты: метаанализ наблюдательных исследований. Биомаркеры эпидемиологии рака Пред. 2004. 13 (3): 340–45. [PubMed] [Google Scholar]
Фабиан Э., Эльмадфа И. Влияние ежедневного потребления пробиотиков и обычного йогурта на оксидантные и антиоксидантные параметры в плазме молодых здоровых женщин.Int J Vitam Nutr Res. 2007. 77 (2): 79–88. [PubMed] [Google Scholar]
Failla ML, Chitchumroonchokchai C, Ishida BK. Мицелляризация in vitro и поглощение цис-изомерами ликопина кишечными клетками превышают таковые для полностью транс-ликопина. J Nutr. 2008. 138 (3): 482–86. [PubMed] [Google Scholar]
Ферруцци М., Нгуен М.Л., Сандер Л.С., Рок К.Л., Шварц С.Дж. Анализ геометрических изомеров ликопина в биологических микропробах методом жидкостной хроматографии с кулонометрической решеткой. J Хроматограф B.2001; 760 (2): 289–99. [PubMed] [Google Scholar]
Фридман М. Гликоалкалоиды томатов: роль в растениях и в питании. J. Agric Food Chem. 2002. 50 (21): 5751–80. [PubMed] [Google Scholar]
Ферр Х.С., Кларк Р.М. Кишечная абсорбция и тканевое распределение каротиноидов. J Nutr Biochem. 1997. 8 (7): 364–77. [Google Scholar]
Gajic M, Zaripheh S, Sun FR, Erdman JW., Jr. Апо-8′-ликопенал и апо-12′-ликопенал являются продуктами метаболизма ликопена в печени крысы. J Nutr. 2006. 136 (6): 1552–57.[PubMed] [Google Scholar]
Галликкио Л., Бойд К., Матаноши Г., Тао XG, Чен Л. и др. Каротиноиды и риск развития рака легких: систематический обзор. Am J Clin Nutr. 2008. 88 (2): 372–83. [PubMed] [Google Scholar]
Гарсия-Клосас Р., Гонсалес К.А., Агудо А., Риболи Э. Потребление определенных каротиноидов и флавоноидов и риск рака желудка в Испании. Контроль причин рака. 1999. 10 (1): 71–75. [PubMed] [Google Scholar]
Gärtner C, Stahl W, Sies H. Ликопин более биодоступен из томатной пасты, чем из свежих помидоров.Am J Clin Nutr. 1997. 66 (1): 116–22. [PubMed] [Google Scholar]
Джованнуччи Э. Помидоры, продукты на основе томатов, ликопин и рак: обзор эпидемиологической литературы. J Natl Cancer Inst. 1999. 91 (4): 317–31. [PubMed] [Google Scholar]
Джованнуччи Э., Римм Э.Б., Лю Й., Штампфер MJ, Виллетт WC. Перспективное исследование томатных продуктов, ликопина и риска рака простаты. J Natl Cancer Inst. 2002. 94 (5): 391–98. [PubMed] [Google Scholar]
Джованнуччи Э. Томатные продукты, ликопин и рак простаты: обзор эпидемиологической литературы.J Nutr. 2005; 135 (8): 2030–31с. [PubMed] [Google Scholar]
Гомес-Ромеро М., Арраэс-Роман Д., Сегура-Карретеро А., Фернандес-Гутьеррес А. Аналитическое определение антиоксидантов в помидорах: типичные компоненты средиземноморской диеты. J Sep Sci. 2007. 30 (4): 452–61. [PubMed] [Google Scholar]
Грейнджер Е.М., Шварц С.Дж., Ван С., Унлу Н.З., Буало TWM и др. Комбинация томатов и соевых продуктов для мужчин с рецидивирующим раком простаты и повышенным уровнем специфического антигена простаты. Nutr Cancer.2008. 60 (2): 145–54. [PubMed] [Google Scholar]
Graydon R, Gilchrist SECM, Young IS, Obermüller-Jevic U, Hasselwander O, Woodside JV. Влияние добавок ликопина на инсулиноподобный фактор роста-1 и белок-3, связывающий инсулиноподобный фактор роста: двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. Eur J Clin Nutr. 2007. 61 (10): 1196–200. [PubMed] [Google Scholar]
Hadley CW, Clinton SK, Schwartz SJ. Употребление переработанных томатных продуктов увеличивает концентрацию ликопина в плазме в сочетании со сниженной чувствительностью липопротеинов к окислительному повреждению.J Nutr. 2003. 133 (3): 727–32. [PubMed] [Google Scholar]
Холливелл Б. Свободные радикалы, антиоксиданты и болезни человека: любопытство, причина или следствие? Ланцет. 1994. 334 (8924): 1–4. [PubMed] [Google Scholar]
Hankinson SE, Willett WC, Colditz GA, Hunter DJ, Michaud DS и др. Циркулирующие концентрации инсулиноподобного фактора роста I и риск рака груди. Ланцет. 1998. 351 (9113): 1393–96. [PubMed] [Google Scholar]
Helzlsouer KJ, Alberg AJ, Norkus EP, Morris JS, Hoffman SC, Comstock GW.Проспективное исследование сывороточных микроэлементов и рака яичников. J Natl Cancer Inst. 1996. 88 (1): 32–37. [PubMed] [Google Scholar]
Холик К.Н., Мишо Д.С., Штольценберг-Соломон Р., Майн С.Т., Пиетинен П. и др. Диетические каротиноиды, бета-каротин и ретинол в сыворотке крови и риск рака легких в когортном исследовании альфа-токоферола и бета-каротина. Am J Epidemiol. 2002. 156 (6): 536–47. [PubMed] [Google Scholar]
Ху К., Лю С., Эрнст Х, Крински Н., Рассел Р., Ван X. Биохимическая характеристика каротин-9,10-монооксигеназы хорька, катализирующей расщепление каротиноидов in vitro и in vivo.J Biol Chem. 2006. 281 (28): 19327–38. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Игнарро Л.Дж., Балестриери М.Л., Наполи К. Питание, физическая активность и сердечно-сосудистые заболевания: обновленная информация. Cardiovasc Res. 2007. 73 (2): 326–40. [PubMed] [Google Scholar]
Ито Й, Курата М., Хиоки Р., Сузуки К., Очиай Дж., Аоки К. Смертность от рака и уровни каротиноидов, ретинола и токоферола в сыворотке крови: последующее популяционное исследование жителей сельской местности Японии. Азиатский Pac J Cancer Prev.2005a; 6 (1): 10–15. [PubMed] [Google Scholar]
Ито Й, Вакай К., Сузуки К., Озаса К., Ватанабе И и др. Смертность от рака легких и уровни каротиноидов, ретинола, токоферолов и фолиевой кислоты в сыворотке крови у мужчин и женщин: исследование случай-контроль, включенное в исследование JACC. J Epidemiol Suppl. 2005b; 2: S140–49. [PubMed] [Google Scholar]
Jain MG, Hislop GT, Howe GR, Ghadirian P. Растительные продукты, антиоксиданты и риск рака простаты: результаты исследований методом случай-контроль в Канаде. Nutr Cancer. 1999. 34 (2): 173–84.[PubMed] [Google Scholar]
Jatoi A, Burch P, Hillman D, Vanyo JM, Dakhil S, et al. Вмешательство на основе томатов, содержащее ликопин, для лечения андроген-независимого рака простаты: результаты исследования фазы II, проведенного в группе лечения рака северной центральной части. Урол. 2007. 69 (2): 289–94. [PubMed] [Google Scholar]
Джеонг Н.Х., Сон Э.С., Ли Дж.М., Ли КБ, Ким М.К. и др. Уровни каротиноидов, ретинола и токоферола в плазме и риск рака яичников. Acta Obstet Gynecol Scand. 2009. 88 (4): 457–62.[PubMed] [Google Scholar]
Джонсон Э. Дж., Цинь Дж., Крински Н. И., Рассел Р. М.. Употребление мужчинами комбинированной дозы бета-каротина и ликопина не влияет на абсорбцию бета-каротина, но улучшает абсорбцию ликопина. J Nutr. 1997. 127 (9): 1833–37. [PubMed] [Google Scholar]
Камбер М., Пфандер Х. Разделение каротиноидов с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии III 1,2-эпоксикаротиноиды. J Chromatogr. 1984. 295 (1): 295–98. [Google Scholar]
Кавано CJ, Trumbo PR, Ellwood KC.Проведенный Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США обзор обоснованных заявлений о пользе для здоровья: помидоры, ликопин и рак. J Natl Cancer Inst. 2007. 99 (14): 1074–85. [PubMed] [Google Scholar]
Khachik F, Goli MB, Beecher GR, Holden J, Lusby WR, et al. Влияние приготовления пищи на качественное и количественное распределение основных каротиноидных составляющих томатов и некоторых зеленых овощей. J. Agric Food Chem. 1992. 40 (3): 390–98. [Google Scholar]
Хачик Ф., Пфандер Х., Трабер Б.Предложены механизмы образования синтетических и встречающихся в природе метаболитов ликопина в томатных продуктах и сыворотке крови человека. J. Agric Food Chem. 1998a; 46 (12): 4885–90. [Google Scholar]
Хачик Ф., Спанглер С.Дж., Смит Дж.С., Кэнфилд Л.М., Пфандер Х., Стек А. Идентификация, количественная оценка и относительные концентрации каротиноидов и их метаболитов в материнском молоке и сыворотке. Anal Chem. 1997. 69 (10): 1873–81. [PubMed] [Google Scholar]
Khachik F, Steck A, Niggli UA, Pfander H.Частичный синтез и выяснение структуры окислительных метаболитов ликопина, обнаруженных в томатной пасте, томатном соке и сыворотке крови человека. J. Agric Food Chem. 1998b; 46 (12): 4874–84. [Google Scholar]
Кифер С., Хессель С., Ламперт Дж. М., Фогт К., Леферер МО и др. Идентификация и характеристика фермента млекопитающих, катализирующего асимметричное окислительное расщепление провитамина А. J Biol Chem. 2001. 276 (17): 14110–16. [PubMed] [Google Scholar]
Кнект П., Ярвинен Р., Теппо Л., Аромаа А., Сеппянен Р.Роль различных каротиноидов в профилактике рака легких. J Natl Cancer Inst. 1999. 91 (2): 182–84. [PubMed] [Google Scholar]
Копек Р. Э., Ридл К. М., Керли Р. У., мл., Харрисон Э. Х., Шварц С. Дж. Наличие аполикопеналов в пищевых продуктах и плазме крови человека. FASEB J. 2008; 22: 1105.8. (Abstr.) [Google Scholar]
Kopec RE, Riedl KM, Harrison EH, Curley RW Jr, Hruszkewycz DP, et al. Наличие аполикопеналов в пищевых продуктах и плазме крови человека. 2009. Отправлено. [Google Scholar]
Kristal AR, Arnold KB, Schenk JM, Neuhouser ML, Goodman P, et al.Режимы питания, дополнительное употребление и риск симптоматической доброкачественной гиперплазии простаты: результаты исследования по профилактике рака простаты. Am J Epidemiol. 2008. 167 (8): 925–34. [PubMed] [Google Scholar]
Кричевский С.Б., Буш А.Дж., Пахор М., Гросс М.Д. Каротиноиды в сыворотке крови и маркеры воспаления у некурящих. Am J Epidemiol. 2000. 152 (11): 1065–71. [PubMed] [Google Scholar]
Kune G, Watson L. Защитные эффекты от рака прямой кишки и диетические питательные микроэлементы фолиевая кислота, метионин, витамины B6, B12, C, E, селен и ликопин.Nutr Cancer. 2006. 56 (1): 11–21. [PubMed] [Google Scholar]
Кун Й, Луле США, Сяо-Линь Д. Ликопин: его свойства и отношение к здоровью человека. Food Rev Intr. 2006. 22 (4): 309–33. [Google Scholar]
Larsson SC, Bergkvist L, Näslund I, Rutegård J, Wolk A. Витамин A, ретинол и каротиноиды и риск рака желудка: проспективное когортное исследование. Am J Clin Nutr. 2007. 85 (2): 497–503. [PubMed] [Google Scholar]
Леунг Ю.Л., Крозье Джем, Талвар Д., О’Рейли Д.С.Дж., Макки Р.Ф. и др.Витаминные антиоксиданты, перекисное окисление липидов, состояние опухоли, системный воспалительный ответ и выживаемость у пациентов с колоректальным раком. Int J Cancer. 2008. 123 (10): 2460–64. [PubMed] [Google Scholar]
Леви Ф., Паше С., Луккини Ф., Ла Веккья С. Диетическое потребление выбранных микронутриентов и риск рака груди. Int J Cancer. 2001. 91 (2): 260–63. [PubMed] [Google Scholar]
Li Y, Zhang J. Концентрация антиоксидантных витаминов и каротиноидов в сыворотке крови у людей с попытками самоубийства в анамнезе низкая.Nutr Neurosci. 2007. 10 (1–2): 51–58. [PubMed] [Google Scholar]
Lian F, Smith DE, Ernst H, Russell RM, Wang XD. Апо-10′-ликопеновая кислота ингибирует рост клеток рака легкого in vitro и подавляет онкогенез легких в модели мыши A / J in vivo. Канцерогенез. 2007. 28 (7): 1567–74. [PubMed] [Google Scholar]
Лиан Ф, Ван XD. Ферментные метаболиты ликопина индуцируют Nrf2-опосредованную экспрессию детоксицирующих / антиоксидантных ферментов фазы II в эпителиальных клетках бронхов человека. Int J Cancer.2008. 123 (6): 1262–68. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Линдшилд Б.Л., Канене-Адамс К., Эрдман Дж. У., мл. Ликопеноиды: являются ли метаболиты ликопена биоактивными? Arch Biochem Biophys. 2007. 458 (2): 136–40. [PubMed] [Google Scholar]
Локи В.М., Праудфут Дж. М., МакКинли А. Дж., Нидс П. В., Крун П. А. и др. Кверцетин и его метаболиты in vivo ингибируют опосредованное нейтрофилами окисление липопротеинов низкой плотности. J. Agric Food Chem. 2008. 56 (10): 3609–15. [PubMed] [Google Scholar]
Лу QY, Hung JC, Heber D, Go VLW, Reuter VE и др.Обратная связь между ликопином в плазме и другими каротиноидами и раком простаты. Биомаркеры эпидемиологии рака Пред. 2001. 10 (7): 749–56. [PubMed] [Google Scholar]
Лукарини М., Ланци С., Д’Эволи Л., Агуицци А., Ломбарди-Бочча Г. Потребление витамина А и каротиноидов итальянским населением — результаты итальянского исследования общего рациона питания. Int J Vitam Nutr Res. 2006. 76 (3): 103–9. [PubMed] [Google Scholar]
Ма Дж., Поллак М.Н., Джованнуччи Э., Чан Дж. М., Тао Ю. и др. Проспективное исследование риска колоректального рака у мужчин и уровней в плазме инсулиноподобного фактора роста (IGF) -1 и IGF-связывающего белка-3.J Natl Cancer Inst. 1999. 91 (7): 620–25. [PubMed] [Google Scholar]
Мяннисто С., Яун С., Хантер Д., Шпигельман Д., Адами Х. и др. Диетические каротиноиды и риск колоректального рака в объединенном анализе 11 когортных исследований. Am J Epidemiol. 2007. 165 (3): 246–55. [PubMed] [Google Scholar]
Мишо Д.С., Фесканич Д., Римм Э.Б., Голдитц Г.А., Шпайзер Ф.Е. и др. Потребление определенных каротиноидов и риск рака легких в 2 проспективных когортах США. Am J Clin Nutr. 2000. 72 (4): 990–97. [PubMed] [Google Scholar]
Moussa M, Landrier J, Reboul E, Ghiringhelli O, Comera C, et al.Абсорбция ликопина в клетках кишечника человека и у мышей включает рецептор-поглотитель класса B типа I, но не рецептор Ниманна-Пика C1-подобный 1. J Nutr. 2008. 138 (8): 1432–36. [PubMed] [Google Scholar]
Нгуен М.Л., Фрэнсис Д., Шварц С.Дж. Восприимчивость каротиноидов к термической изомеризации различных сортов томатов. J Sci Food Agric. 2001. 81 (9): 910–17. [Google Scholar]
Nguyen ML, Schwartz SJ. Стабильность ликопина при переработке пищевых продуктов. Proc Soc Exp Biol Med. 1998. 218 (2): 101–5. [PubMed] [Google Scholar]
Nguyen ML, Schwartz SJ.Ликопин. В: Лауро Г.Л., Фрэнсис Ф.Дж., редакторы. Натуральные пищевые красители: наука и технологии. Нью-Йорк: Марсель Деккер, Инк; 2000. С. 153–92. [Google Scholar]
Нконджок А., Гадириан П., Джонсон К.С., Кревски Д. Группа эпидемиологических исследований канадских регистров рака. Потребление ликопина с пищей связано со снижением риска рака поджелудочной железы. J Nutr. 2005. 135 (3): 592–97. [PubMed] [Google Scholar]
Nouraie M, Pietinen P, Kamangar F, Dawsey SM, Abnet CC, et al. Фрукты, овощи и антиоксиданты и риск рака желудка среди курящих мужчин.Биомаркеры эпидемиологии рака Пред. 2005. 14 (9): 2087–92. [PubMed] [Google Scholar]
О’Кеннеди Н., Кросби Л., Уилан С., Лютер В., Хорган Г. и др. Влияние экстракта томатов на функцию тромбоцитов: двойное слепое перекрестное исследование у здоровых людей. Am J Clin Nutr. 2006. 84 (3): 561–69. [PubMed] [Google Scholar]
Omenn GS, Goodman GE, Thornquist MD, Balmes J, Cullen MR, et al. Факторы риска рака легких и воздействия вмешательства в CARET, испытании эффективности бета-каротина и ретинола.J Nat Can Inst. 1996. 88 (21): 1550–59. [PubMed] [Google Scholar]
Парада Дж., Агилера Дж. М.. Микроструктура пищи влияет на биодоступность нескольких питательных веществ. J Food Sci. 2007. 72 (2): R21–32. [PubMed] [Google Scholar]
Патерсон Э., Гордон М. Х., Ниват С., Джордж Т. В., Парр Л. и др. Добавки с фруктовыми и овощными супами и напитками увеличивают концентрацию каротиноидов в плазме, но не изменяют маркеры окислительного стресса или факторы риска сердечно-сосудистых заболеваний. J Nutr. 2006. 136 (11): 2849–55.[PubMed] [Google Scholar]
Перссон С., Сасадзуки С., Иноуэ М., Курахаши Н., Ивасаки М. и др. Уровни каротиноидов, ретинола и токоферола в плазме и риск рака желудка в Японии: вложенное исследование случай-контроль. Канцерогенез. 2008. 29 (5): 1042–48. [PubMed] [Google Scholar]
Питерс У., Лейтцманн М.Ф., Чаттерджи Н., Ван Й., Албейнс Д. и др. Ликопин в сыворотке, другие каротиноиды и риск рака простаты: вложенное исследование случай-контроль в скрининговом исследовании рака простаты, легких, толстой кишки и яичников.Биомаркеры эпидемиологии рака Пред. 2007. 16 (5): 962–68. [PubMed] [Google Scholar]
Поррини М., Ризо П. Каковы типичные дозы ликопина? J Nutr. 2005; 135 (8): 2042С – 45С. [PubMed] [Google Scholar]
Рао А.В., Рао Л.Г. Каротиноиды и здоровье человека. Pharmacol Res. 2007. 55 (3): 207–16. [PubMed] [Google Scholar]
Рао А.В., Рэй М.Р., Рао Л.Г. Ликопин. Adv Food Nutr Res. 2006. 51: 99–164. [PubMed] [Google Scholar]
Рао А.В., Васим З., Агарвал С. Содержание ликопина в томатах и томатных продуктах и их вклад в пищевой ликопин.Food Res Intern. 1998. 31 (10): 737–41. [Google Scholar]
Риччони Дж., Манчини Б., ди Илио Э., Буччарелли Т., Д’Орацио Н. Защитный эффект ликопина при сердечно-сосудистых заболеваниях. Eur Rev Med Pharacol Sci. 2008. 12 (3): 183–90. [PubMed] [Google Scholar]
Рисо П., Брусамолино А., Мартинетти А., Поррини М. Влияние томатного напитка на уровни инсулиноподобного фактора роста (IGF) -1 в сыворотке крови у здоровых субъектов. Nutr Cancer. 2006. 55 (2): 157–62. [PubMed] [Google Scholar]
Rissanen TH, Voutilainen S, Nyyssonen K, Salonen R, Kaplan GA, Salonen JT.Концентрации ликопина в сыворотке и атеросклероз сонных артерий: исследование факторов риска ишемической болезни сердца Куопио. Am J Clin Nutr. 2003. 77 (1): 133–38. [PubMed] [Google Scholar]
Родригес-Бустаманте Э., Санчес С. Микробное производство норизопреноидов C-13 и других ароматических соединений посредством расщепления каротиноидов. Crit Rev Micro. 2007. 33 (3): 211–30. [PubMed] [Google Scholar]
Рохан Т.Э., Джайн М., Хоу Г.Р., Миллер А.Б. Когортное исследование диетических каротиноидов и риска рака легких у женщин (Канада). Контроль причин рака.2002. 13 (3): 231–37. [PubMed] [Google Scholar]
Ronco A, De Stefani E, Boffetta P, Deneo-Pellegrini H, Mendilaharsu M, Leborgne F. Овощи, фрукты и связанные с ними питательные вещества и риск рака груди: исследование методом случай-контроль в Уругвае . Nutr Cancer. 1999. 35 (2): 111–19. [PubMed] [Google Scholar]
Сахни С., Ханнан М.Т., Блумберг Дж., Купплс, Лос-Анджелес, Киль Д.П., Такер К.Л. Защитный эффект общего потребления каротиноидов и ликопина на риск перелома бедра: 17-летнее наблюдение по результатам исследования остеопороза во Фрамингеме.J Bone Miner Res. 2009. 24 (6): 1086–94. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Satia JA, Littman A, Slatore CG, Galanko JA, White E. Долгосрочное употребление добавок с бета-каротином, ретинолом, ликопином и лютеином и риск рака легких: результаты исследования «Витамины и образ жизни» (VITAL). Am J Epidemiol. 2009. 69 (7): 815–28. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Schwartz SH, Qin X, Loewen MC. Биохимическая характеристика двух ферментов расщепления каротиноидов из Arabidopsis указывает на то, что производное каротиноидов соединение ингибирует латеральное ветвление.J Biol Chem. 2004. 279 (45): 46940–45. [PubMed] [Google Scholar]
Schwartz SH, Qin X, Zeevaart JAD. Характеристика новой диоксигеназы, расщепляющей каротиноиды, из растений. J Biol Chem. 2001. 276 (27): 25208–11. [PubMed] [Google Scholar]
Schwarz S, Obermüller-Jevic UC, Hellmis E, Koch W., Jacobi G, Biesalski HK. Ликопин подавляет прогрессирование заболевания у пациентов с доброкачественной гиперплазией простаты. J Nutr. 2008. 138 (1): 49–53. [PubMed] [Google Scholar]
Сессо Х., Лю С., Газиано Дж. М., Бьюринг Дж. Э.Диетический ликопин, продукты на основе томатов и сердечно-сосудистые заболевания у женщин. J Nutr. 2003. 133 (7): 2336–41. [PubMed] [Google Scholar]
Шен Ю.С., Чен С.Л., Ван С.К. Вклад фенольных соединений томатов в антиоксидантную и понижающую регуляцию липидов крови. J. Agric Food Chem. 2007. 55 (16): 6475–81. [PubMed] [Google Scholar]
Sies H, Stahl W. Витамин E и витамин C, бета-каротин и другие каротиноиды в качестве антиоксидантов. Am J Clin Nutr. 1995; 62 (6): 1315С – 21С. [PubMed] [Google Scholar]
Шталь В., Генрих Ю., Вайзман С., Эйхлер О., Сейс Х., Тронье Х.Пищевая томатная паста защищает людей от эритемы, вызванной ультрафиолетовым светом. J Nutr. 2001. 131 (5): 1449–51. [PubMed] [Google Scholar]
Шталь В., Сис Х. Поглощение ликопина и его геометрических изомеров у людей больше из-за термической обработки, чем из необработанного томатного сока. J Nutr. 1992. 122 (11): 2161–66. [PubMed] [Google Scholar]
Стейнмец К.А., Поттер Дж. Д., Фолсом А.Р. Овощи, фрукты и рак легких в исследовании здоровья женщин Айовы. Cancer Res. 1993. 53 (3): 536–43. [PubMed] [Google Scholar]
Thomson CA, Stendell-Hollis NR, Rock CL, Cussler EC, Flatt SW, Pierce JP.Плазма и пищевые каротиноиды связаны со снижением окислительного стресса у женщин, ранее лечившихся от рака груди. Биомаркеры эпидемиологии рака Пред. 2007. 16 (10): 2008–15. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
Tyssandier V, Cardinault N, Caris-Veyrat C, Amiot MJ, Grolier P, et al. Растительный лютеин, ликопин и бета-каротин конкурируют за включение в хиломикроны, не оказывая неблагоприятного воздействия на среднесрочный (3-недельный) статус каротиноидов в плазме крови человека. Am J Clin Nutr.2002. 75 (3): 526–34. [PubMed] [Google Scholar]
Unlu NZ, Bohn T, Clinton SK, Schwartz SJ. Усвоение каротиноидов из салатов и сальсы человеком усиливается за счет добавления масла авокадо или авокадо. J Nutr. 2005. 135 (3): 431–36. [PubMed] [Google Scholar]
Unlu NZ, Bohn T, Francis D, Clinton SK, Schwartz SJ. Поглощение каротиноидов у людей, употребляющих томатные соусы, полученные из мандарина или сортов томатов с высоким содержанием β-каротина. J. Agric Food Chem. 2007. 55 (4): 1597–1603. [PubMed] [Google Scholar]
Данные о смертности в США, 2005 г.Национальный центр статистики здравоохранения, Центры по контролю и профилактике заболеваний; 2008. [Google Scholar]
Vaishampayan U, Hussain M, Banerjee M, Seren S, Sarkar FH, et al. Ликопин и изофлавоны сои в лечении рака простаты. Nutr Cancer. 2007. 59 (1): 1–7. [PubMed] [Google Scholar]
Фогель Дж. Т., Тан Б., Маккарти Д. Р., Клее Х. Дж. Фермент диоксигеназа 1, расщепляющий каротиноиды, обладает широкой субстратной специфичностью, расщепляя несколько каротиноидов в двух разных положениях связи. J Biol Chem.2008. 283 (17): 11364–73. [PubMed] [Google Scholar]
Voorrips LE, Goldbohm RA, Brants HA, van Poppel GA, Strumans F, et al. Проспективное когортное исследование потребления антиоксидантов и фолиевой кислоты и риска рака легких у мужчин. Биомаркеры эпидемиологии рака Пред. 2000. 9 (4): 357–65. [PubMed] [Google Scholar]
Voskuil DW, Vrieling A, Korse CM, Beijnen JH, Bonfrer JMC, et al. Влияние ликопина на систему инсулиноподобного фактора роста (IGF) у переживших пременопаузальный рак груди и женщин с высоким риском семейного рака груди.Nutr Cancer. 2008. 60 (3): 342–53. [PubMed] [Google Scholar]
Vrieling A, Voskuil DW, Bonfrer JM, Korse CM, van Doorn J, et al. Добавка ликопина повышает концентрацию циркулирующих белков-1 и -2, связывающих инсулиноподобный фактор роста, у людей с повышенным риском колоректального рака. Am J Clin Nutr. 2007. 86 (5): 1456–62. [PubMed] [Google Scholar]
Walfisch S, Walfisch Y, Kirilov E, Linde N, Mnitentag H, et al. Добавка экстракта ликопина томата снижает уровень инсулина-фактора роста I у пациентов с раком толстой кишки.Eur J Cancer Пред. 2007. 16 (4): 298–303. [PubMed] [Google Scholar]
Ван С., ДеГрофф В.Л., Клинтон СК. Полифенолы томата и сои снижают стимулированную инсулиноподобным фактором роста-I пролиферацию клеток рака простаты крысы и устойчивость к апоптозу in vitro посредством ингибирования внутриклеточных сигнальных путей с участием тирозинкиназы. J Nutr. 2003. 133 (7): 2367–76. [PubMed] [Google Scholar]
Уильямс GM, Williams CL, Weisburger JH. Диета и профилактика рака: диета прежде всего с клетчаткой. Toxicol Sci.1999; 52 (2 приложение): 72–86. [PubMed] [Google Scholar]
Winterstein A, Studer A, Ruegg R. Neuere Ergebnisse der Carotinoidforschung. Chemische Berichte- Recueil. 1960. 93 (12): 2951–65. [Google Scholar]
Вуд Л.Г., Гарг М.Л., Пауэлл Х., Гибсон П.Г. Лечение, богатое ликопином, снижает неозинофильное воспаление дыхательных путей при астме: доказательство концепции. Free Radic Res. 2008. 42 (1): 94–102. [PubMed] [Google Scholar]
Xianquan S, Shi J, Kakuda Y, Yueming J. Стабильность ликопина во время обработки и хранения пищевых продуктов.J Med Food. 2005. 8 (4): 413–22. [PubMed] [Google Scholar]
Ямамото Т., Йошимура М., Ямагути Ф., Коучи Т., Цудзи Р. и др. Противоаллергическая активность халкона нарингенина из экстракта кожуры томата. Biosci Biotechnol Biochem. 2004. 68 (8): 1706–11. [PubMed] [Google Scholar]
Юань Дж.М., Росс Р.К., Чу XD, Гао Ю.Т., Ю М.К. Предварительные диагностические уровни бета-криптоксантина и ретинола в сыворотке позволяют прогнозировать риск рака легких, связанный с курением, в Шанхае, Китай. Биомаркеры эпидемиологии рака Пред. 2001. 10 (7): 767–73.[PubMed] [Google Scholar]
Юань Дж.М., Росс Р.К., Гао Ю.Т., Цюй Ю.Х., Чу XD, Ю М.К. Предиагностические уровни сывороточных микроэлементов в отношении риска рака желудка в Шанхае, Китай. Биомаркеры эпидемиологии рака Пред. 2004. 13 (11): 1772–80. [PubMed] [Google Scholar]
Юань Дж.М., Страм Д.О., Аракава К., Ли Х., Ю М.К. Диетический криптоксантин и снижение риска рака легких: Сингапурское исследование здоровья в Китае. Биомаркеры эпидемиологии рака Пред. 2003. 12 (9): 890–98. [PubMed] [Google Scholar]
Zechmeister L.Цис-транс-изомеризация и стереохимия каротиноидов и дифенилполиенов. Chem Rev.1944; 34 (2): 267–344. [Google Scholar]
Zhang M, D’Arcy C, Holman J, Binns CW. Потребление определенных каротиноидов и риск эпителиального рака яичников. Br J Nutr. 2007. 98 (1): 187–93. [PubMed] [Google Scholar]

Обзор испытаний по замещению сурфактанта

Из всех методов лечения в неонатальном периоде ни один, вероятно, не был протестирован так тщательно, как заместительная терапия сурфактантом.Более 400 клинических испытаний оценили общую эффективность терапии сурфактантом, а также такие аспекты, как относительная эффективность различных препаратов сурфактанта, оптимальное время введения и оптимальная дозировка. Этот краткий обзор посвящен конкретным практикам использования заместительной сурфактантной терапии и рассматривает подтверждающие их доказательства.

Каковы доказанные клинические преимущества ПАВ?

Терапия сурфактантами приводит к значительному клиническому улучшению у младенцев из группы риска или страдающих респираторным дистресс-синдромом (RDS).Множественные клинические испытания, проведенные в конце 1980-х и начале 1990-х годов, в которых сравнивали эффекты синтетических препаратов или препаратов сурфактанта животного происхождения с плацебо или отсутствием терапии, дали четкие оценки клинических эффектов терапии сурфактантами. Терапия сурфактантами приводит к быстрому улучшению оксигенации и снижению поддержки искусственной вентиляции легких. ^{1, 2, 3} Систематические обзоры этих исследований ^{4, 5, 6, 7} показывают, что по сравнению с плацебо или отсутствием терапии лечение или профилактика сурфактантом (с использованием сурфактанта животного происхождения или синтетического сурфактанта) приводит к относительному снижение риска смертности до 40% и риска пневмоторакса на 30–65%.Однако не отмечено никаких устойчивых эффектов на другие клинические исходы, такие как хроническое заболевание легких, открытый артериальный проток и внутрижелудочковое кровоизлияние. Наблюдательные исследования, показывающие снижение смертности и заболеваемости младенцев с очень низкой массой тела при рождении после широкого внедрения терапии сурфактантами ^{8, 9, 10, 11, 12, 13}, дополнительно подтверждают положительные результаты терапии сурфактантами.

Отдаленные исходы после терапии сурфактантом не изучались так полно, как краткосрочная заболеваемость и смертность.Результаты обычно сообщаются в первые 3 года жизни, с редкими сообщениями об исходах в школьном возрасте или старше. Несмотря на ограниченность данных, данные свидетельствуют о том, что не только больше младенцев выживает после терапии сурфактантом, но и эти младенцы не находятся в избирательном неблагоприятном положении в отношении осложнений, связанных с развитием нервной системы, из-за терапии сурфактантом. ^{10, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20}

Какое поверхностно-активное вещество наиболее эффективно?

В настоящее время для клинического использования доступны два типа поверхностно-активных веществ: (1) поверхностно-активные вещества, полученные из легких крупного рогатого скота или свиньи — «натуральные» поверхностно-активные вещества и (2) синтетические поверхностно-активные вещества.Процедура очистки природных поверхностно-активных веществ, включая экстракцию органическими растворителями, удаляет гидрофильные белки SP-A и SP-D, оставляя материал, содержащий только липиды и небольшое количество гидрофобных белков. ²¹ Современные синтетические поверхностно-активные вещества состоят в основном из дипальмитоилфосфатидилхолина (DPPC) и не содержат других фосфолипидов или апопротеинов. Новое поколение синтетических поверхностно-активных веществ, содержащих белки или пептиды, находится в стадии разработки и тестирования.

Хотя в клинических испытаниях эффективны как синтетические поверхностно-активные вещества, так и поверхностно-активные вещества животного происхождения, поверхностно-активные вещества животного происхождения содержат специфичные для поверхностно-активного вещества белки, которые могут способствовать адсорбции поверхностно-активного вещества и сопротивляться инактивации поверхностно-активного вещества, и, следовательно, имеют более быстрое начало действия, чем синтетическое поверхностно-активное вещество, что позволяет настройки вентилятора и концентрации вдыхаемого кислорода должны быть снижены быстрее. ^{22, 23, 24, 25} Систематический обзор ²⁶ 10 рандомизированных испытаний, в которых изучалось влияние синтетических сурфактантов животного происхождения на лечение RDS ^{23, 24, 27, 28, 29, 30, 31 , 32, 33, 34} поддерживает использование поверхностно-активных веществ животного происхождения.По сравнению с синтетическим сурфактантом, лечение экстрактами сурфактанта животного происхождения снижало риск пневмоторакса (типичный относительный риск (ОР) 0,63, 95% ДИ 0,52, 0,76) и смертности (типичный ОР 0,87, 95% ДИ 0,75, 0,99). Не было значительных различий в рисках хронического заболевания легких, внутрижелудочкового кровотечения, сепсиса или открытого артериального протока.

В меньшем количестве рандомизированных исследований сравнивалась эффективность и побочные эффекты различных продуктов сурфактанта животного происхождения. Испытания, сравнивающие берактант (Survanta ^®, Ross Laboratories, Колумбус, Огайо (липидный экстракт фарша из легкого крупного рогатого скота)] и экстракт сурфактанта из легких теленка (Infasurf ^®, Forest Labs, Нью-Йорк, штат Нью-Йорк (липидный экстракт, полученный из говяжьего легкого). промывки легких)) не продемонстрировали различий в клинических исходах или осложнениях дозирования.³⁵ Однако среди младенцев, получавших лечение по поводу установленного RDS, подгруппа тех, кто получала экстракт сурфактанта из легких теленка, имела значительно более длительный интервал между дозами, более низкую концентрацию кислорода во вдыхаемом воздухе и более низкое среднее давление в дыхательных путях в первые 48 часов жизни, чем младенцы, получавшие берактант. Среди младенцев, получавших профилактическое лечение, смертность младенцев с массой тела при рождении <600 г была значительно выше с экстрактом сурфактанта из легких теленка, чем с берактантом.

В двух исследованиях сравнивали порактант альфа (Curosurf ^®, DEY LP, Napa, CA, Chiesi Farmaceutica, Parma, IT), липидный экстракт, полученный из рубленого легкого свиньи, и берактант.^{36, 37} В обоих исследованиях младенцы, получавшие порактант альфа, имели более быстрое начальное улучшение оксигенации, снижение потребности в искусственной вентиляции легких по сравнению с младенцами и меньшее количество дополнительных доз (с группой 200 мг / кг) по сравнению с детьми, получавшими берактант. . Испытания не обладали достаточной мощностью для выявления истинных различий в важных клинических исходах (т. Е. Общей долгосрочной смертности, частоте осложнений) между двумя группами, поскольку они были разработаны для оценки ответа FI0 ₂ в качестве первичной конечной точки.В исследовании Раманатана два уровня дозы порактанта альфа (200 и 100 мг / кг) сравнивали с берактантом (100 мг / кг). В подгруппе младенцев с гестационным возрастом менее 32 недель группа, которая получала дозу порактанта альфа 200 мг / кг, имела более высокий коэффициент выживаемости, чем две другие группы (доза 100 мг / кг) в 36-недельном скорректированном возрасте. Хотя эти наблюдения интересны, неясно, отражает ли это улучшение разницу в начальной дозировке или другие различия в продуктах. Основываясь на начальных данных этих клинических испытаний, было бы трудно заявить, что один продукт сурфактанта животного происхождения явно превосходит другие.

Имеет ли значение метод дозирования и введения поверхностно-активного вещества?

Методика введения

Основываясь на методике введения, использованной в первоначальных клинических испытаниях, для каждого продукта сурфактанта есть рекомендации по применению, которые могут или не могут быть подтверждены достоверными доказательствами. В исследованиях на животных легочное распределение сурфактанта, введенного интратрахеально, в значительной степени определялось силой тяжести и не зависело от изменения положения грудной клетки после инстилляции. ³⁸ Следовательно, для новорожденных, получающих сурфактант, удерживание грудной клетки в горизонтальном положении может привести к наиболее равномерному распределению сурфактанта в двух легких при минимальном обращении.

Хотя медленная инфузия сурфактанта может показаться желательной, в исследованиях на животных медленная инфузия сурфактанта в эндотрахеальную трубку приводит к негомогенному распределению сурфактанта в легких. ^{39, 40} Сообщалось также о других способах введения, таких как распыление или аэрозолизация. ⁴¹ и внутриутробное введение плоду человека, ⁴² также сообщалось. Эти методы в настоящее время не рекомендуются.

Повторная обработка / несколько доз

Поверхностно-активное вещество может быстро метаболизироваться, а функциональная инактивация поверхностно-активного вещества может быть результатом действия растворимых белков и других факторов в небольших дыхательных путях и альвеолах.Считается, что несколько доз поверхностно-активного вещества могут быть полезны, потому что они могут преодолеть такую инактивацию. Два рандомизированных контролируемых исследования ^{43, 44}, в которых сравнивали несколько режимов дозирования с режимами однократного приема экстракта сурфактанта животного происхождения для лечения установленного респираторного дистресс-синдрома, были оценены в систематическом обзоре. ⁴⁵ Приблизительно 70% младенцев, рандомизированных в режимы множественных доз, получали множественные дозы. Метаанализ подтверждает снижение риска пневмоторакса, связанного с терапией несколькими дозами сурфактанта (типичный RR 0.51, 95% ДИ 0,30, 0,88). Также наблюдалась тенденция к снижению смертности (типичный ОР 0,63, 95% ДИ 0,39, 1,02). По другим клиническим исходам различий обнаружено не было. Однако неясно, сколько повторных доз следует вводить. В исследовании OSIRIS, в котором использовалось синтетическое сурфактант, было обнаружено, что схема лечения двумя дозами эквивалентна схеме лечения, допускающей до четырех доз сурфактанта. ⁴⁶

В двух исследованиях рассматривались критерии введения повторных доз сурфактанта животного происхождения.^{47, 48} В целом, либеральные критерии повторного лечения не привели к значительному клиническому улучшению во всех изученных группах, но в одном исследовании подгруппа более больных младенцев выиграла от более низкого порога введения. ⁴⁸

Важна ли продолжительность введения ПАВ?

Первоначальные испытания сурфактанта доказали, что профилактическое или селективное лечение младенцев с RDS было успешным. Профилактический подход к сурфактанту поддерживается более равномерным и гомогенным распределением сурфактанта при его введении в наполненное жидкостью легкое животного, ^{49, 50} и верой в то, что введение сурфактанта в ранее невентилируемое или минимально вентилируемое легкое уменьшает острую травма легких.^{51, 52} Восемь рандомизированных контролируемых испытаний, в каждом из которых использовались препараты сурфактанта животного происхождения (либо порактант альфа, либо берактант), сравнивали эффекты профилактического введения сурфактанта с лечением сурфактантом установленного РДС. ^{53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60}

В целях профилактики сурфактант вводили до достижения 15-минутного возраста. При выборочном лечении его вводили в среднем от 1,5 до 7,4 часа. Нет исследований, сравнивающих профилактическое введение сурфактанта с очень ранним селективным введением, например, на 30-60 минутах жизни.В обзоре этих исследований, по сравнению с лечением сурфактантом установленного RDS, профилактическое сурфактант снижало риск пневмоторакса (типичный RR 0,62, 95% CI 0,42, 0,89), интерстициальной эмфиземы легких (типичный RR 0,54, 95% CI 0,36, 0,82). и неонатальной смертности (типичный ОР 0,61, 95% ДИ 0,48, 0,77) с отмеченной тенденцией к снижению риска внутрижелудочкового кровотечения (типичный ОР 0,92, 95% ДИ 0,82, 1,03).

Учреждениям необходимо будет индивидуально оценить, в какой момент эти преимущества профилактического сурфактанта превышают потенциальные риски эндотрахеальной интубации и затраты на дозирование сурфактанта младенцам, которые не нуждались бы в этом.Хотя в большинстве исследований для определения права на профилактику сурфактантом использовался верхний предел гестации 30 недель, в других предполагалось, что срок беременности составляет 29 ⁶¹ или 28 недель. ⁶² Профилактика поверхностно-активным веществом, вводимая после начальной реанимации, имеет эквивалентную или большую эффективность, чем введение болюса после интубации сразу после родов ⁶³, и поэтому введение «до первого вдоха» не требуется.

Недоношенных детей, не получающих профилактику, но страдающих РДС, следует лечить как можно раньше, основываясь на тех же физиологических механизмах, поддерживающих профилактику сурфактанта, и на четырех рандомизированных контролируемых испытаниях, в которых оценивали раннее и отсроченное селективное введение сурфактанта.^{46, 64, 65, 66} Они обобщены в систематическом обзоре. ⁶⁷ В двух из этих исследований использовались поверхностно-активные вещества животного происхождения, а в двух — синтетические поверхностно-активные вещества. Раннее введение сурфактанта, определяемое в различных исследованиях как введение первой дозы сурфактанта в течение первых 30 минут, первого часа или первых 2 часов жизни, привело к снижению риска пневмоторакса (типичный RR 0,70, 95% ДИ 0,59, 0,82), снижение риска интерстициальной эмфиземы легких (типичный RR 0.63, 95% ДИ 0,43,0,93), снижение риска хронических заболеваний легких (потребность в дополнительном кислороде на 36 неделе беременности, типичный ОР 0,70, 95% ДИ 0,55, 0,88) и снижение риска неонатальной смертности (типичный RR 0,87, 95% ДИ 0,77, 0,99).

Следовательно, недоношенным детям, не получающим сурфактант в профилактических целях, первую дозу сурфактанта следует вводить как можно раньше. Новорожденные дети подвергаются наибольшему риску отсроченного приема. Больницы третичного уровня, принимающие новорожденных для отделения интенсивной терапии, должны разработать системы, обеспечивающие раннее введение сурфактанта этим младенцам.Например, чтобы избежать задержек, сурфактант может вводить транспортная бригада или больница, куда направляется. У врожденных детей раннее введение следует обеспечить, отдавая предпочтение введению сурфактанта по сравнению с другими процедурами госпитализации, которые могут вызвать задержку, такими как установка пупочного катетера, рентгенограммы и процедуры кормления грудью.

Ранний диабет и аномальное постнатальное развитие островков поджелудочной железы у мышей, лишенных Glut-2

Thorens, B. Молекулярная и клеточная физиология GLUT2, транспортера глюкозы, способствующего диффузии с высоким Km. Внутр. Rev. Cytol. 137A , 209–238 (1992).

CAS Статья Google Scholar

Унгер Р.Х. Диабетическая гипергликемия: связь с нарушением транспорта глюкозы в β-клетках поджелудочной железы. Science 251 , 1200–1205 (1991).

CAS Статья Google Scholar

Торенс, Б., Ву, Й.-Дж., Лихи, Дж. Л. и Вейр, Г.C. Потеря экспрессии GLUT2 нечувствительными к глюкозе p-клетками мышей db / db является обратимой и индуцируется диабетической средой. J. Clin. Вкладывать деньги. 90 , 77–85 (1992).

CAS Статья Google Scholar

Thorens, B., Weir, GC, Leahy, JL, Lodish, HF & Bonner-Weir, S. Снижение экспрессии изоформы переносчика глюкозы в печень / бета-клетки в нечувствительных к глюкозе бета-клетках поджелудочной железы диабетических крыс . Proc. Natl Acad. Sci. США 87 , 6492–6406 (1990).

CAS Статья Google Scholar

Валера А. и др. . Экспрессия антисмысловой РНК GLUT-2 в β-клетках трансгенных мышей приводит к диабету. J. Biol. Chem. 269 , 28543–28546 (1994).

CAS PubMed Google Scholar

Хьюз, С.Д., Квадде, С., Джонсон, Дж. Х., Фербер, С. и Ньюгард, К. Б. Трансфекция клеток AtT-20ins с помощью GLUT-2, но не GLUT-1, вызывает стимулированную глюкозой секрецию инсулина: связь с метаболизмом глюкозы. J. Biol. Chem. 268 , 15205–15212 (1993).

CAS PubMed Google Scholar

Tal, M. и др. . [Val12] Hras подавляет GLUT2 в p-клетках трансгенных мышей, не влияя на гомеостаз глюкозы. Proc. Natl Acad. Sci. США 89 , 5744–5748 (1992).

CAS Статья Google Scholar

Де Вос, А. и др. . Бета-клетки человека и крысы различаются переносчиком глюкозы, но не экспрессией гена глюкокиназы. J. Clin. Инвестируйте , 96 , 2489–2495 (1995).

CAS Статья Google Scholar

млн лет назад-H., Wang, J., Rodd, G.G., Bolaffi, J.L., T.Nlrodsky, G.M. Различия в секреции инсулина у крыс и мышей: роль цАМФ. Eur. J. Endocrinol. 132 , 370–376 (1995).

CAS Статья Google Scholar

Philippe, J., Pacheco, I. & Meda, P. Транскрипция гена инсулина быстро снижается за счет снижения концентрации глюкозы в островковых клетках крысы. Диабет 43 , 523–528 (1994).

CAS Статья Google Scholar

Немецкий, M.S. И Ван, Дж. Ген инсулина содержит несколько транскрипционных элементов, которые реагируют на глюкозу. Мол. Клетка. Биол. 14 , 4067–4075 (1994).

CAS Статья Google Scholar

Docherty, K. & Clark, A.R. Регулирование экспрессии генов инсулина питательными веществами. FASEBJ. 8 , 20–27 (1994).

CAS Статья Google Scholar

Вейбель Э.Р. Практические методы биологической морфометрии. в стереологических методах , Vol. I (изд. Weibel, E.R.) 101–161 (Academic, Лондон, 1979).

Google Scholar

Мачинский, П.М. Урок метаболической регуляции, вдохновленный парадигмой сенсора глюкокиназы. Диабет 45 , 223–241 (1996).

CAS Статья Google Scholar

Leahy, J.L., Bonner-Weir, S. & Weir, G.C. Дисфункция бета-клеток, вызванная хронической гипергликемией. Уход за диабетом 15 , 442–455 (1992).

CAS Статья Google Scholar

Zhou, Y.-P., Ostenson, C.-G., Ling, Z.-C. И Гриль, В.Дефицит активности пируватдегидрогеназы в островках поджелудочной железы крыс GK с диабетом. Эндокринология 136 , 3546–1551 (1995).

CAS Статья Google Scholar

Giroix, M.-H. и др. . Нарушение глицеринфосфатного челнока в островках крыс с диабетом, вызванным неонатальным стрептозоцином. Диабет 40 , 227–232 (1991).

CAS Статья Google Scholar

Панг, К., Mukonoweshuro, C. & Wong, G.C. Бета-клетки возникают из эпителиальных клеток развивающейся поджелудочной железы крысы, экспрессирующих транспортер глюкозы типа 2 (Glut2). Proc. Natl. Акад. Sci. США 91 , 9559–9563 (1994).

CAS Статья Google Scholar

Offield, M.F. . и др. . PDX-1 необходим для разрастания поджелудочной железы и дифференцировки ростральной двенадцатиперстной кишки. Разработка 122 , 983–995 (1996).

CAS Google Scholar

Hole, R.L., Pian-Smith, M.C.M. И Шарп, G.W.G. Развитие двухфазного ответа на глюкозу в поджелудочной железе плода и новорожденных крыс. Am. J. Physiol. 254 , E167 – E174 (1988).

CAS PubMed Google Scholar

Rhoten, W.B. Динамика секреции инсулина при развитии поджелудочной железы крыс. Am. J. Physiol. 239 , E57 – E63 (1980).

CAS PubMed Google Scholar

Кервран А. и Рэндон Дж. Развитие высвобождения инсулина поджелудочной железой плода крысы in vitro: эффекты глюкозы, аминокислот и теофиллина. Диабет 29 , 673–678 (1980).

CAS Статья Google Scholar

Свенн, И.Стимулированная глюкозой репликация ДНК островков поджелудочной железы во время развития плода крысы: влияние питательных веществ, гормона роста и трийодтиронина. Диабет 34 , 803–807 (1985).

CAS Статья Google Scholar

Райер, Дж., Геббельс, Р.М. & Henquin, J.C. Клеточный состав диабетической поджелудочной железы человека. Diabetologia 24 , 366–371 (1983).

CAS Статья Google Scholar

Лян, Х.И Габер, Р.Ф. Новый путь передачи сигнала в Saccharomyces cerevisiae, определяемый snf3-регулируемой экспрессией HXT6. Мол. Биол. Ячейка 7 , 1953–1966 (1996).

CAS Статья Google Scholar

Ozcan, S., Dover, J., Rosenwald, A.G., Wolfl, S. & Johnston, M. Два транспортера глюкозы в Saccharomyces cerevisiae представляют собой сенсоры глюкозы, которые генерируют сигнал для индукции экспрессии гена. Proc. Natl. Акад. Sci. США 93 , 12428–12432 (1996).

CAS Статья Google Scholar

Selfridge, J., Pow, A.M., McWhir, J., Magin, T.M. И Мелтон, Д. Нацеливание на ген с использованием мышиного минигена HPRT / HPRT-дефицитной системы эмбриональных стволовых клеток: инактивация мышиного гена ERCC-1. Somatic Cell Mol. Genet. 18 , 325–336 (1992).

CAS Статья Google Scholar

Хомчинский, П.И Сакки, Н. Одностадийный метод выделения РНК кислотной экстракцией тиоцианат-фенол-хлороформ гуанидиния. Анал. Biochem. 162 , 156–159 (1987).

CAS Статья Google Scholar

Suzue, K., Lodish, H.F. & Thorens, B. Последовательность переносчика глюкозы в печени мыши. Nucleic Acids Res. 17 , 10099 (1989).

CAS Статья Google Scholar

Хопкрофт Д.У., Мейсон Д. И Скотт, Р. Стандартизация секреции инсулина островками поджелудочной железы: проверка анализа ДНК. Horm. Метаб. Res. 17 , 559–561 (1985).

CAS Статья Google Scholar

Определение дислексии | SpringerLink

Бенсон Д. (1977). Третья алексия. Архив неврологии, 34 , 327–331.

Google Scholar

Коричневый, W.Э., Элиез, С., Менон, В., Рамси, Дж. М., Уайт, К. Д., и Рейсс, А. Л. (2001). Предварительные данные о широко распространенных морфологических вариациях мозга при дислексии. Неврология, 56 ( 6 ), 781–783.

Google Scholar

Брук, М. (1992). Сохранение дефицита фонологической осведомленности дислектиков. Психология развития, 28 , 874–886.

Артикул Google Scholar

Брансуик, Н., МакКрори, Э., Прайс, К. Дж., Фрит, К. Д., и Фрит, У. (1999). Явная и неявная обработка слов и псевдослов взрослыми дислексиками в области развития: поиск Wortschatz Вернике? Brain, 122, , 1901–1917.

Артикул Google Scholar

Коэн, Л., Дехен, С., Наккаш, Л., Лехериси, С., Дехен-Ламберт, Г., Хенафф, М.-А., и Мишель, Ф. (2000). Зона визуальной словоформы: пространственная и временная характеристика начальной стадии чтения у нормальных субъектов и пациентов с задним расщепленным мозгом. Brain, 123, , 291–307.

Артикул Google Scholar

Коэн, Л., Лехериси, С., Чочон, Ф., Лемер, К., Риво, С., и Дехаен, С. (2002). Языковая настройка зрительной коры? Функциональные свойства области визуальной словоформы. Brain, 125 , 1054–1069.

Артикул Google Scholar

Корина, Д., Ричардс, Т., Серафини, С., Ричардс А., Стери К., Эбботт Р. и др. (2001). Различия в слуховом языке с помощью фМРТ у детей с дислексией и способных читать. NeuoReport, 12 , 1195–1201.

Артикул Google Scholar

Damasio, A. R., & Damasio, H. (1983). Анатомическая основа чистой алексии. Неврология, 33, , 1573–1583.

Google Scholar

Dehaene, S., Le Clec’H, G., Poline, J., Le Bihan, D., & Cohen, L. (2002). Область визуальной словоформы: предлексическое представление визуальных слов в веретенообразной извилине. NeuroReport, 13 , 1–5.

Артикул Google Scholar

Dehaene, S., Naccache, L., Cohen, L., Le Bihan, D., Mangin, J., Poline, J., et al. (2001). Церебральные механизмы маскировки слов и неосознанного прайминга повторения. Nature Neuroscience, 4 , 752–758.

Артикул Google Scholar

Дежерин Дж. (1891). Sur un cas de cécité verbale avec agraphie, suivi d’autopsie. C. R. Société du Biologie, 43 , 197–201.

Google Scholar

Дежерин, Дж. (1892). Вклад в изучение анатомо-патологической и клинической различных разновидностей вербальной культуры. Memoires de la Societe de Biologie, 4 , 61–90.

Google Scholar

Демб, Дж., Бойнтон, Г., и Хигер, Д. (1998). Функциональная магнитно-резонансная томография ранних зрительных путей при дислексии. Journal of Neuroscience, 18 , 6939–6951.

Google Scholar

Иден, Г. Ф., ВанМетер, Дж. У., Рамси, Дж. М., Майсог, Дж. М., Вудс, Р. П. и Зеффиро, Т. А. (1996). Аномальная обработка зрительного движения при дислексии, выявленная с помощью функциональной томографии головного мозга. Nature, 382 , 66–69.

Артикул Google Scholar

Элиез, С., Рамси, Дж. М., Гедд, Дж. Н., Шмитт, Дж. Э., Патвардхан, А. Дж., И Рейсс, А. Л. (2000). Морфологические изменения серого вещества височной доли при дислексии: исследование МРТ. Журнал детской психолологии и психиатрии, 41 (5), 637–644.

Артикул Google Scholar

Филипек, П.(1996). Структурные вариации в показателях нарушений развития. В Р. Тэтчер, Г. Лайон, Дж. Рамси и Н. Краснегор (ред.). Нейровизуализация развития: картирование развития мозга и поведения (стр. 169–186). Сан-Диего, Калифорния: Academic Press.

Google Scholar

Флетчер, Дж. М., и Лавленд, К. (1986). Нейропсихология арифметических нарушений у детей. В центре внимания проблемы изучения математики, 8 , 23–40.

Google Scholar

Флетчер, Дж. М., Лайон, Г. Р., Барнс, М., Стойбинг, К. К., Фрэнсис, Д. Дж., Олсон, Р. К. и др. (2002). Классификация нарушений обучаемости: оценка, основанная на фактах. В Р. Р. Брэдли, Л. Дэниэлсон и Д. Халлахан (ред.). Выявление нарушений обучаемости: исследование на практике (стр. 185–250). Махва, Нью-Джерси: Лоуренс Эрлбаум Ассошиэйтс.

Google Scholar

Флетчер, Дж.М., Шайвиц, С. Е., Шанквейлер, Д. П., Кац, Л., Либерман, И. Ю., Стюбинг, К. К., Фрэнсис, Д. Дж., Фаулер, А. Е., и Шайвиц, Б. А. (1994). Когнитивные профили неспособности читать: Сравнение определений несоответствия и низких достижений. Журнал педагогической психологии, 86 , 6–23.

Артикул Google Scholar

Фридман, Р. Ф., Вин, Дж. Э., и Альберт, М. Л. (1993). Алексия. В К. М. Хейлман и Э.Валенштейн (ред.). Клиническая нейропсихология (3-е изд., Стр. 37–62). Нью-Йорк: Издательство Оксфордского университета.

Google Scholar

Галабурда, А. М., Шерман, Г. Ф., Розен, Г. Д., Абоитиз, Ф., и Гешвинд, Н. (1985). Дислексия развития: четыре последовательных пациента с корковыми аномалиями. Анналы неврологии, 18 (2), 222–233.

Артикул Google Scholar

Георгева, П., Rzanny, R., Hopf, J., Knab, R., Glauche, V., Kaiser, W., et al. (1999). ФМРТ во время обработки текста у детей с дислексией и нормального чтения. NeuroReport, 10 , 3459–3465.

Артикул Google Scholar

Гешвинд, Н. (1965). Синдромы разъединения у животных и человека. Brain, 88 , 237–294.

Артикул Google Scholar

Гросс-Гленн, К., Duara, R., Barker, W. W., Loewenstein, D., Chang, J.-Y., Yoshii, F., et al. (1991). Позитронно-эмиссионные томографические исследования при последовательном чтении слов здоровыми взрослыми и взрослыми с дислексией. Журнал клинической и экспериментальной нейропсихологии, 13 (4), 531–544.

Google Scholar

Хелениус, П., Таркиайнен, А., Корнелиссен, П., Хансен, П. К., и Салмелин, Р. (1999). Диссоциация нормального анализа признаков и недостаточная обработка буквенных строк у взрослых с дислексией. Кора головного мозга, 4 , 476–483.

Артикул Google Scholar

Хорвиц, Б., Рамси, Дж. М., и Донохью, Б. С. (1998). Функциональная связность угловой извилины при нормальном чтении и дислексии. Proceedings of the National Academy of Sciences, USA, 95 , 8939–8944.

Артикул Google Scholar

Клингберг, Т., Хедехус, М., Temple, E., Salz, T., Gabrieli, J., Moseley, M., et al. (2000). Микроструктура височно-теменного белого вещества как основа для чтения: данные диффузионной тензорной магнитно-резонансной томографии. Neuron, 25, , 493–500.

Артикул Google Scholar

Лефли, Д. Л., и Пеннингтон, Б. Ф. (1991). Орфографические ошибки и беглость чтения у компенсированных взрослых с дислексией. Annals of Dyslexia, 41, , 143–162.

Google Scholar

Лернер, Дж. (1989). Образовательные вмешательства при неспособности к обучению. Журнал Американской академии детской и подростковой психиатрии, 28 , 326–331.

Артикул Google Scholar

Либерман, И. Ю., и Шанквейлер, Д. (1991). Фонология и начинающий читатель: Учебное пособие. В Л. Рибен и К. А. Перфетти (ред.). Учимся читать: фундаментальные исследования и их значение (стр. 24–42). Хиллсдейл, Нью-Джерси: Лоуренс Эрлбаум Ассошиэйтс.

Google Scholar

Линдамуд, П. (1994). Проблемы исследования связи между фонологической осведомленностью, неспособностью к обучению и орфографией. В Г. Р. Лайоне (Ред.). Справочные материалы для оценки умственной отсталости: новые взгляды на проблемы измерения (стр. 351–373). Балтимор: Пол Х.Издательство «Брукс».

Google Scholar

Логан Г. (1988). К инстанционной теории автоматизации. Психологический обзор, 95 , 492–527.

Артикул Google Scholar

Логан Г. (1997). Автоматичность и чтение: перспективы из инстанционной теории автоматизации. Ежеквартально по чтению и письму: преодоление трудностей в обучении, 13 , 123–146.

Google Scholar

Лион, Г. Р. (1995). К определению дислексии. Annals of Dyslexia, 45 , 3–27.

Google Scholar

Лион, Г. Р., Флетчер, Дж. М., и Барнс, М. К. (2003). Нарушения обучаемости. В Э. Дж. Маш и Р. А. Баркли (ред.). Детская психопатология (2-е изд., Стр. 520–586). Нью-Йорк: Guilford Press.

Google Scholar

Лион, Г.Р., Флетчер, Дж. М., Шайвиц, С. Е., Шайвиц, Б. А., Торгесен, Дж. К., Вуд, Ф. Б., Шульте, А., и Олсон, Р. К. (2001). Переосмысление неспособности к обучению. В C. E. Finn, Jr., R.A.J. Rotherham & C.R. Hokanson, Jr. (Eds.). Переосмысление специального образования в новом веке (стр. 259–287). Вашингтон, округ Колумбия: Фонд Томаса Б. Фордхэма и Институт прогрессивной политики.

Google Scholar

МакКэндлисс, Б., Коэн, Л., И Дехаен, С. (2003). Зона визуальной словоформы: Умение читать по веретенообразной извилине. Тенденции в когнитивных науках, 7 (7), 293–299.

Артикул Google Scholar

Моутс, Л. (1994). Проблемы исследования связи между фонологической осведомленностью, неспособностью к обучению и орфографией. В Г. Р. Лайоне (Ред.). Справочные материалы для оценки умственной отсталости: новые взгляды на проблемы измерения (стр.333–349). Балтимор: Издательство Пола Х. Брукса.

Google Scholar

Мур, К. Дж., И Прайс, К. Дж. (1999). Три отчетливые вентральные затылочно-височные области для чтения и наименования объектов. NeuroImage, 10 , 181–192.

Артикул Google Scholar

Моррис, Р. Д., Стюбинг, К. К., Флетчер, Дж. М., Шайвиц, С. Е., Лайон, Г. Р., Шанквейлер, Д.П., Кац, Л., Фрэнсис, Д. Дж., И Шайвиц, Б. А. (1998). Подтипы нарушения чтения: вариабельность по фонологическому ядру. Журнал педагогической психологии, 90 , 347–373.

Артикул Google Scholar

Ортон, С. (1937). Проблемы чтения, письма и речи у детей: описание некоторых типов нарушений в развитии языковых способностей . Нью-Йорк: W.W. Нортон.

Google Scholar

Паулесу, Э., Démonet, J.-F., Fazio, F., McCrory, E., Chanoine, V., Brunswick, N., Cappa, SF, Cossu, G., Habib, M., Frith, CD, & Frith, У. (2001). Дислексия: культурное разнообразие и биологическое единство. Science, 291 , 2165–2167.

Артикул Google Scholar

Паулесу, Э., Фрит, У., Сноулинг, М., Галлахер, А., Мортон, Дж., Фраковяк, Р. С. Дж., И Фрит, К. Д. (1996). Дислексия развития — это синдром отключения? Данные сканирования ПЭТ. Brain, 119, , 143–157.

Артикул Google Scholar

Price, C., Moore, C., & Frackowiak, R. S. J. (1996). Влияние различной скорости и продолжительности стимула на активность мозга во время чтения. NeuroImage, 3 (1), 40–52.

Артикул Google Scholar

Рамус, Ф., Розен, С., Дакин, С., Дэй, Б., Кастеллот, Дж., Уайт, С., и Фрит, У.(2003). Теории дислексии развития: выводы из нескольких тематических исследований взрослых с дислексией. Мозг, 126, 841–865.

Артикул Google Scholar

Отчет Национальной комиссии по чтению (2000). Обучение детей чтению: основанная на фактах оценка научно-исследовательской литературы по чтению и его значению для обучения чтению. (Vol. NIH Pub. No. 00-4754): Вашингтон, округ Колумбия: Министерство здравоохранения и социальных служб США, Общественное Служба здравоохранения, Национальные институты здравоохранения, Национальный институт здоровья детей и развития человека.

Google Scholar

Рамси, Дж. М., Андреасон, П., Заметкин, А. Дж., Акино, Т., Кинг, К., Гамбурбер, С. Д., et al. (1992). Неспособность активировать левую височно-теменную кору при дислексии. Архив неврологии, 49 , 527–534.

Google Scholar

Рамси, Дж. М., Нейс, К., Донохью, Б., Уайз, Д., Майсог, Дж. М., и Андреасон, П. (1997). Позитронно-эмиссионное томографическое исследование нарушения распознавания слов и фонологической обработки у мужчин с дислексией. Архив неврологии, 54 , 562–573.

Google Scholar

Салмелин, Р., Сервис, Э., Киесила, П., Уутела, К., и Салонен, О. (1996). Нарушение обработки текста при дислексии, выявленное с помощью магнитоэнцефалографии. Анналы неврологии, 40 , 157–162.

Артикул Google Scholar

Секи, А., Коеда, Т., Сугихара, С., Камба, М., Хирата, Ю., Огава, Т., и Такешита, К. (2001). Исследование функциональной магнитно-резонансной томографии во время чтения предложений у японских детей с дислексией. Мозг и развитие, 23 , 312–316.

Артикул Google Scholar

Шанквейлер, Д., Крейн, С., Кац, Л., Фаулер, А. Э., Либерман, А. М., Брэди, С. А., Торнтон, Р., Лундквист, Э., Драйер, Л., Флетчер, Дж. М., Штюбинг, К.К., Шайвиц, С.Е., и Шайвиц, Б.А. (1995). Когнитивные профили детей с ограниченными возможностями чтения: сравнение языковых навыков в фонологии, морфологии и синтаксисе. Психологическая наука, 6 , 149–156.

Артикул Google Scholar

Шайвиц, Б. А., Флетчер, Дж. М., и Шайвиц, С. Е. (1994). Концептуальная основа для нарушений обучаемости и синдрома дефицита внимания с гиперактивностью. Canadian Journal of Special Education, 9 (3), 1–32.

Google Scholar

Shaywitz, BA, Shaywitz, SE, Пью, KR, Mencl, WE, Fulbright, RK, Skudlarski, P., Constable, RT, Marchione, KE, Fletcher, JM, Lyon, GR, & Gore, JC ( 2002). Нарушение работы задней мозговой системы при чтении у детей с дислексией развития. Биологическая психиатрия, 52 , 101–110.

Артикул Google Scholar

Шайвиц, С.(2003). Преодоление дислексии: новая комплексная научно-обоснованная программа для решения проблем с чтением любого уровня . Нью-Йорк: Альфред А. Кнопф.

Google Scholar

Шайвиц, С. Э., Флетчер, Дж. М., Холахан, Дж. М., Шнейдер, А. Э., Маркионе, К. Э., Стюбинг, К. К., Фрэнсис, Д. Дж., Пью, К. Р., и Шайвиц, Б. А. (1999). Устойчивость дислексии: продольное исследование в Коннектикуте в подростковом возрасте. Педиатрия, 104 , 1351–1359.

Артикул Google Scholar

Shaywitz, SE, Shaywitz, BA, Fulbright, RK, Skudlarski, P., Mencl, WE, Constable, RT, Pugh, KR, Holahan, JM, Marchione, KE, Fletcher, JM, Lyon, GR, & Гор, JC (2003). Нейронные системы для компенсации и настойчивости: молодой взрослый результат детской неспособности читать. Биологическая психиатрия, 54 , 25–33.

Артикул Google Scholar

Шайвиц, С.Э., Шайвиц, Б.А., Пью, К.Р., Фулбрайт, Р.К., Констебль, Р.Т., Менкл, В.Е., Шанквейлер, Д.П., Либерман, А.М., Скудларски, П., Флетчер, Дж. , К., Гейтенби, К., и Гор, Дж. К. (1998). Функциональное нарушение организации мозга для чтения при дислексии. Proceedings of the National Academy of Sciences, USA, 95 , 2636–2641.

Артикул Google Scholar

Симос, П., Брейер, Дж., Флетчер, Дж., Бергман, Э. и Папаниколау, А. (2000). Церебральные механизмы, участвующие в чтении слов у детей с дислексией: подход к визуализации магнитного источника. Кора головного мозга, 10 , 809–816.

Артикул Google Scholar

Станович К. Э. и Сигель Л. С. (1994). Профиль фенотипических достижений детей с нарушениями чтения: основанный на регрессии тест модели разностных переменных фонологического ядра. Журнал педагогической психологии, 86 (1), 24–53.

Артикул Google Scholar

Stein, J., & Walsh, V. (1997). Видеть, но не читать: магноклеточная теория дислексии. Тенденции в неврологии, 20 (4), 147–152.

Артикул Google Scholar

Талкотт, Дж. Б., Виттон, К., Маклин, М. Ф., Хансен, П. К., Рис, А., Грин, Г.Г. Р. и Штейн, Дж. Ф. (2000). Динамическая сенсорная чувствительность и детские навыки декодирования слов. Известия Национальной академии им. Наук, США, 97, 2952–2957.

Артикул Google Scholar

Таллал, П. (2000). Наука грамотности: от лаборатории к классу. Труды Национальной академии наук. США, 97 , 2402–2404.

Артикул Google Scholar

Темпл, Э., Полдрак, Р.А., Салидас, Дж., Дойч, Г. К., Таллал, П., Мерзених, М. М., и Габриэли, Дж. Д. (2001). Нарушенные нейронные реакции на фонологическую и орфографическую обработку у детей с дислексией: исследование фМРТ. NeuroReport, 12 , 299–307.

Артикул Google Scholar

Торгесен, Дж. К. (2000). Индивидуальные различия в реакции на раннее вмешательство в чтение: сохраняющаяся проблема сопротивления лечению. Исследования и практика нарушения обучаемости, 1 , 55–64.

Артикул Google Scholar

Управление образования США (USOE) (1977). Определение и критерии определения учащихся как лиц с ограниченными возможностями в обучении . Вашингтон, округ Колумбия: Типография правительства США.

Google Scholar

Вольф, М., Бауэрс, П. Г., и Биддл, К. (2001). Именование процессов скорости, времени и чтения: концептуальный обзор. Журнал нарушений обучаемости, 33 , 387–407.

Google Scholar

Автоматизированное изучение субклеточных вариаций паттернов точечных белков и генеративная модель их связи с микротрубочками

Abstract

Характеристика пространственного распределения белков непосредственно из микроскопических изображений — сложная задача с многочисленными приложениями в клеточной биологии (например, идентификация белков, связанных с двигателем) и клинических исследованиях (например.грамм. идентификация биомаркеров рака). Здесь мы описываем дизайн системы, которая обеспечивает автоматический анализ паттернов точечных белков на микроскопических изображениях, включая количественную оценку их взаимоотношений с микротрубочками. Мы сконструировали систему, используя изображения конфокальной иммунофлуоресцентной микроскопии из проекта Human Protein Atlas для 11 точечных белков в трех культивируемых клеточных линиях. Эти белки ранее были охарактеризованы как находящиеся в основном в точечных структурах, но все их изображения при визуальном осмотре были аннотированы как просто «везикулярные».Нам удалось показать, что эти паттерны можно отличить друг от друга с высокой точностью, и мы смогли отнести к одному из этих подклассов сотни белков, субклеточная локализация которых ранее не была четко определена. В дополнение к предоставлению этих новых аннотаций мы разработали генеративный подход к моделированию точечных распределений, который фиксирует основные характеристики отдельных паттернов. Ожидается, что такие модели будут полезны для представления и обобщения каждого паттерна, а также для построения системно-биологических симуляций клеточного поведения.

Сведения об авторе

Определение субклеточного местоположения всех белков — важная, но устрашающая задача для системных биологов, особенно когда учитываются различия между разными типами клеток. Флуоресцентная микроскопия является основным источником информации о субклеточном расположении, но большие коллекции флуоресцентных изображений для многих белков часто аннотируются визуально и приводят к отнесению только к широким категориям. В этой статье мы описываем автоматизированные методы анализа изображений из Атласа белков человека, чтобы идентифицировать девять специфических паттернов точек и назначать эти более специфические аннотации 550 белкам, многие из которых ранее имели мало информации о субклеточном расположении.Мы также описываем построение моделей этих паттернов, которые будут полезны для проведения системной биологии моделирования клеточных реакций с использованием точных пространственных распределений.

Образец цитирования: Джонсон Г.Р., Ли Дж., Шарифф А., Роде Г.К., Мерфи Р.Ф. (2015) Автоматизированное изучение субклеточных вариаций паттернов точечных белков и генеративная модель их связи с микротрубочками. PLoS Comput Biol 11 (12): e1004614. https://doi.org/10.1371/journal.pcbi.1004614

Редактор: Ахим Треш, Институт исследований селекции растений им. Макса Планка, ГЕРМАНИЯ

Поступила: 6 мая 2015 г .; Одобрена: 19 октября 2015 г .; Опубликован: 1 декабря 2015 г.

Авторские права: © 2015 Johnson et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника

Доступность данных: Все программное обеспечение и данные для эта работа доступна в виде воспроизводимого исследовательского архива (http: // murphylab.web.cmu.edu/software). Программное обеспечение также доступно как часть системы CellOrganizer с открытым исходным кодом (http://CellOrganizer.org).

Финансирование: Эта работа была частично поддержана грантами Национальных институтов здравоохранения GM075205, GM0, GM103712 и EB009403. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Introduction

Изображения с флуоресцентного микроскопа могут предоставить важную информацию о субклеточном расположении белков, а автоматизированные системы могут использоваться для отнесения этих белков к основным субклеточным классам расположения с точностью, равной или превышающей точность аннотаторов человека [1, 2]. Однако назначить белкам аннотации с более высоким разрешением сложнее, особенно для точечных или везикулярных паттернов. Точечные паттерны субклеточной локализации могут возникать либо из мембраносвязанных органелл (например,g., транспортные везикулы) или из макромолекулярных комплексов достаточного размера (например, рибонуклеопротеидные (РНП) тельца), и они могут быть очень похожими визуально. Мы называем отдельные компоненты этих паттернов puncta, чтобы охватить оба типа структур. Они важны для различных клеточных задач, таких как эндоцитоз, экзоцитоз и привлечение, хранение или деградация РНК. Решающим фактором для выполнения многих из этих задач является ассоциация везикул или тел с компонентами цитоскелета, такими как микротрубочки для внутриклеточного транспорта.Хотя микротрубочки не нужны для транспорта на короткие расстояния, они необходимы для быстрого транспорта везикул [3]. Степень, в которой распределения конкретных точек связаны с распределением микротрубочек, остается неясной, как и степень, в которой распределения варьируются в разных клеточных линиях.

Нашему пониманию клеточного поведения и источников клеточной изменчивости можно значительно помочь и проверить с помощью клеточного моделирования и симуляций [4–6]. Для этого нам нужен механизм, позволяющий фиксировать пространственно-временное поведение клеточных субструктур, как в качестве отправной точки для моделирования, так и для сравнения с результатами.С этой целью мы ранее описали системы для построения генерирующих моделей на основе изображений, 2D или 3D распределения либо точечных органелл [7, 8], либо микротрубочек [9] внутри клеток. Эти модели условны (зависят) от моделей клеточных и ядерных мембран, но они независимы друг от друга; то есть они не принимают во внимание отношения между пунктами и микротрубочками.

Здесь мы описываем новый вычислительный метод, который позволяет нам моделировать эту взаимосвязь.Наш метод требует изображений, на которых визуализируются как точечные белки, так и микротрубочки. Атлас белков человека (HPA, http://proteinatlas.org) — богатый источник таких изображений, содержащий изображения с высоким разрешением паттернов внутриклеточного расположения тысяч белков в нескольких линиях клеток [10]. Чтобы проанализировать паттерны точечных белков в HPA, мы разработали генеративную модель, состоящую из компактных и интерпретируемых функций, чтобы охарактеризовать популяцию точечных точек внутри клетки, включая измерения ассоциации микротрубочек, взаимосвязи с геометрией клетки, плотностью, интенсивностью и внешним видом.Мы использовали особенности этих моделей, чтобы обнаружить основные способы вариации среди точечных паттернов и отнести подклассы точечных паттернов к неаннотированным белкам.

Результаты

Зависимость расположения белкового паттерна на микротрубочках

Мы начали с создания конвейера обработки изображений, который идентифицировал отдельные точки и микротрубочки на 2D-изображениях конфокальной микроскопии с HPA. Как показано на рис. 1A, входное изображение (рис. 1C) обрабатывается для создания изображений точек и микротрубочек (показаны как составные на рис. 1D) и оставшейся фоновой флуоресценции белка (рис. 1E).Одной из наших основных целей было создание модели распределения точек, которая отражает их связь с микротрубочками. Это, по-видимому, должно отражать степень, в которой точки были связаны с микротрубочками для осуществления транспорта или удержания в определенных областях клетки. В качестве простой меры этой ассоциации мы вычислили расстояние ( d ) между каждой точкой и ближайшей микротрубочкой (Рис. 1B). Мы ожидаем, что точки, которые связаны с микротрубочками, будут иметь небольшое расстояние по сравнению с теми, которые не связаны, и, возможно, также, что распределение расстояний будет отражать степень, в которой высвобожденные пузырьки диффундируют, прежде чем снова связываться.Мы добавили эту меру к нашей предыдущей модели распределения везикулярных объектов [8], которая включала зависимость от дробного расстояния между ядром и плазматической мембраной ( r , рассчитанного по L1 и L2) и угла (α) к большой оси ячейка (см. Методы). Мы также создали модель для интенсивности фона, которая аналогичным образом зависела от микротрубочек и формы клеток (см. Методы). Мы объединили оценочные параметры этих моделей с пятью параметрами, которые описывают размер и форму точек, и двумя параметрами, которые измеряют количество флуоресценции в точках и фоне.В результате были получены двадцать два параметра (таблица S1), которые можно легко определить по каждому изображению субклеточного распределения белка в отдельной клетке. Мы использовали эти параметры как в качестве признаков для описания паттернов белков, так и, позднее, для построения генеративных моделей паттернов точечных точек.

Рис. 1.

(a) Краткое изложение процесса обучения модели и классификации. (b) Иллюстрация системы координат для функции плотности вероятности. Для каждого пикселя изображения вычисляется расстояние между ним и ближайшей точкой на ядерной мембране (L1), а также между ним и ближайшей точкой на клеточной мембране (L2), которые используются для вычисления радиального положения ( r ) как L1 / (L1 + L2).Кроме того, вычисляются расстояние до ближайшей точки на сегментированной микротрубочке ( d ) и угол между пикселем и большой осью клетки (α). (c) Двухцветное изображение везикулярного белка (TFRC, рецептор трансферрина, зеленый) и микротрубочек (красный) в клетке U-2OS. (d) Сегментированное изображение микротрубочек (красный) и точки (зеленый). (e) Оставшаяся интенсивность фона.

https://doi.org/10.1371/journal.pcbi.1004614.g001

Идентификация точечных подшаблонов и основных видов вариации

Ряду белков в HPA присвоены аннотации «везикул» или «цитоплазмы».Мы рассмотрели, можем ли мы использовать изображения HPA, чтобы отнести эти белки к более конкретной органелле или структуре. Изучив аннотации UniProt и основную литературу для белков, субклеточное расположение которых было достаточно хорошо охарактеризовано, мы выбрали одиннадцать белков, которые присутствуют в одиннадцати конкретных типах точечных паттернов (таблица 1) (мы называем эти белки «основателями», поскольку они позволили нам для определения конкретных подтипов). Мы выбрали эти паттерны из-за того, что белки показали схожий паттерн для всех трех типов клеток в HPA, и они представляют широкий спектр мембранных и немембранных компартментов (хотя, конечно, есть дополнительные паттерны точечных точек, для которых мы сделали не нашел подходящих учредителей).В частности, они охватывают все основные отделы эндомембранной системы. Мы рассчитали значения признаков для всех клеток для каждой комбинации одиннадцати белков и трех клеточных линий. Мы подтвердили, что характеристики точно отражают взаимосвязь между пузырьками и микротрубочками, сравнив совокупное распределение экспериментально измеренного расстояния между точками и микротрубочками с рассчитанным по модели; распределения были очень похожи для всех одиннадцати паттернов (S1 Рис).Затем мы спросили, можно ли отличить эти шаблоны друг от друга на изображениях HPA. Чтобы обеспечить визуальную основу для иллюстрации того, как белки различаются по характеристикам, мы вычислили первые три основных компонента. На рис. 2 показано положение каждой комбинации антитело-клеточная линия в двух проекциях этого трехмерного пространства, а также репрезентативные изображения вдоль каждой главной оси. Для данной клеточной линии одиннадцать паттернов можно приблизительно разделить, хотя положение данного белка иногда варьируется от клеточной линии к клеточной линии.Например, белки 2, 3, 6 и 7 расположены близко друг к другу в pc1 и pc2, но разделены pc3. Из рассмотрения проекции каждого числового признака на три наиболее важные оси главных компонентов, а также примеров изображений, кажется, что первый компонент в основном представляет собой вариации признаков 12, 13 и 5, которые фиксируют взаимосвязь с микротрубочками и вариации в интенсивность. Второй в первую очередь представляет собой изменение характеристик 21, 22, 2 и 8, которые фиксируют интенсивность и расстояние от ядра, в то время как третий главный компонент представляет изменение характеристик 1, 3 и 4, которые фиксируют размер точек и изменение размера.Этот рисунок не позволяет точно оценить перекрытие между образцами, но представлен, чтобы дать визуальный обзор основных режимов изменения с образцами.

Рис. 2. Распределение клеток комбинаций белков и линий клеток в первых трех основных компонентах, полученных из всего пространства признаков с помощью PCA.

Число для каждой точки указывает индекс белка, а цвет указывает линию клеток (красный для A-431, зеленый для U-2OS и синий для U-251MG).Серые эллипсы представляют диапазон 1,5 стандартных отклонений, которые содержат от 50% до 80% ячеек. Стрелки суммируют состав каждого основного компонента, показывая направление, в котором каждая функция увеличивается (список функций см. В таблице S1). На левой панели показаны первый и второй основные компоненты, а на правой панели показаны второй и третий основные компоненты. Проекции объектов с магнитудой менее 0,1 были удалены для целей визуализации.

https: // doi.org / 10.1371 / journal.pcbi.1004614.g002

Построение классификатора для подшаблонов пунктиров

Эти результаты предполагают, что набор признаков может быть надежной основой для измерения вариации паттернов точечных точек, и поэтому мы стремились определить, можем ли мы использовать их для предсказания компартментальной локализации других белков в одном из одиннадцати паттернов. Чтобы сделать это, мы сначала использовали функции для построения статистики разделимости, полученной на основе точности классификации, для сравнения двух наборов ячеек (см. Методы) и оценили степень, в которой можно было различить одиннадцать шаблонов.Мы использовали подход к классификации, основанный на частоте ошибок Байеса, чтобы избежать проблем с дисбалансом между количеством белков в каждом классе и учесть классовые различия в масштабе для различных функций (см. Методы).

Для каждого типа ячеек отдельно мы классифицировали каждое изображение как принадлежащее к одному из одиннадцати шаблонов, используя перекрестную проверку удерживаемого изображения: для каждого удерживаемого изображения мы вычислили разделимость между ячейками, содержащимися в этом изображении, и ячейками каждый из паттернов-основателей.Изображение получило ярлык узора, который был наименее отделен от него. Используя этот метод для каждого типа ячеек, мы достигли средней точности класса 86,9% (Таблица 2). Мы сравнили эти результаты с теми, которые использовали ту же процедуру классификации, но исключили особенности, относящиеся к распределению микротрубочек, что привело к средней точности 82,8%. Это демонстрирует, что связь с микротрубочками предоставляет информацию, которая улучшает нашу способность различать точечные узоры. Дальнейшее изучение таблицы 2 показывает, что рисунок ямок с покрытием является единственным, который постоянно трудно различить.Частично это может быть связано с тем, что использовались двухмерные конфокальные изображения, и, таким образом, особенности не могут легко различить, находятся ли точки на поверхности или внутри клетки (для другого рисунка точек поверхности, кавеол, их распределение или размер должны позволять отличаться).

Таблица 2. Способность различать 11 классов пунктуации.

Классификаторы были обучены с использованием 5-кратной перекрестной проверки, и был предсказан класс удерживаемого изображения. Результаты показаны для классификаторов, построенных с использованием всех функций, а значения в скобках предназначены для обучения без функций микротрубочек.

https://doi.org/10.1371/journal.pcbi.1004614.t002

Аннотации других точечных белков

Затем мы спросили, можно ли использовать классификационный подход, чтобы назначить точечную аннотацию подшаблона к изображению белков, отличных от основателей. Мы не хотели просто назначать субклеточное расположение класса, с которым белок был наиболее похож (поскольку белок на самом деле может не принадлежать ни к одному из наших классов), но хотели убедиться, что мы назначаем аннотации только для белков с высокой степенью сходства с одним из основателей.Для каждого типа клеток мы определили порог статистики отделимости, который можно использовать для определения того, следует ли отнести новый белок к определенному классу. Этот порог был определен как оптимальная точка кривой рабочих характеристик приемника (см. «Методы» и фиг. S2) для каждого типа ячеек.

Чтобы назначить субклеточное расположение новому изображению, мы измерили отделимость между ним и каждым паттерном основателя. Если значение для одного из шаблонов было ниже порога, мы назначали соответствующую метку шаблона этому изображению.В том редком случае, когда изображение ниже порогового значения нескольких шаблонов, мы присвоили ему ярлык «неоднозначный». Эта процедура классификации была применена к остальным изображениям в наборе данных HPA; результаты содержатся в наборе данных S1. Сто двадцать пять белков были идентифицированы как принадлежащие к одному из одиннадцати классов в A-431, 60 в U-2OS и 365 в U-251 MG. Список наиболее достоверных назначений показан в таблице 3. С целью предоставления улучшенных аннотаций для баз данных белков мы также создали XML-файл, который можно использовать для обновления этих баз данных.Файл (S2 Dataset) содержит информацию об идентификаторах антител против HPA, генах-мишенях и предлагаемую аннотацию. Из-за природы иммунофлуоресцентного мечения метка, специфичная для последовательности, может присутствовать более чем на одной изоформе белка, каждая из которых может демонстрировать специфический для состояния паттерн локализации. Имея это в виду, мы также сообщаем об известных белковых генных продуктах, предоставленных ENSEMBL 79, и о проценте совпадающих пептидов после выравнивания между последовательностями генного продукта и антигена в области, охватываемой антителом.Мы также предоставляем аннотации ко всем изоформам белков, которые соответствуют последовательности антител. Для тех белков и изоформ, которым присвоено местоположение с высокой степенью достоверности, мы также предоставляем XML-файл для обновления их записи UniProt (S3 Dataset).

Таблица 3. Белки с наивысшим рейтингом, отнесенные к одному из десяти субпаттернов с высокой степенью достоверности.

Верхний белок для каждого типа клеток для каждого субпаттерна (кроме Coated Pits) включается, если его разделимость составляет менее 0,70 (что более избирательно, чем порог, определенный на S2 рис.).Меры разделимости для всех белков включены в набор данных S1.

https://doi.org/10.1371/journal.pcbi.1004614.t003

Чтобы дать независимую оценку точности процедуры аннотации, мы провели поиск литературы, описывающей локализацию наиболее достоверных аннотаций. Нам удалось найти литературу, подтверждающую предложенную нами маркировку для многих белков (хотя они часто анализировались только на других типах клеток). Например, из наиболее успешных для клеток A-431, BRD4, как предполагается, участвует в протолитическом пути лизосом [11].Для U-2OS RAB5C является классическим ранним эндосомным белком [12], а prohibitin (PHB) — многофункциональным мембранным белком [13], одна из ролей которого заключается в регуляции деградации PAR1 [14]. Для клеток U-251MG наиболее популярными являются катепсин H (CTSH), лизосомальный фермент, DTX3L, который регулирует эндосомный сортировку [15], и LY6K, который, как и другие антигены Ly6, связан с гликозилфосфатидилинозитол-заякоренными гликопротеинами (такими как как TEX101 [16]), которые обычно встречаются у кавеол. Эти результаты увеличивают нашу уверенность в предлагаемых аннотациях.

Многие из проанализированных белков (которые были белками с аннотациями «везикулы» или «цитоплазма») не были с высокой степенью достоверности отнесены ни к одному из 11 паттернов. Для этого есть как минимум три возможных причины. Во-первых, окрашивание может иметь достаточно низкую интенсивность или качество, так что передний план не может быть адекватно идентифицирован. Во-вторых, неназначенные белки могут быть цитоплазматическими белками без различимого точечного рисунка или везикулярными белками из органелл, которые мы не рассматривали.В-третьих, они могут присутствовать более чем в одном из одиннадцати шаблонов, так что их шаблон недостаточно хорошо соответствует ни одному из них.

Сравнение моделей на разные выкройки

Наши модели позволяют нам задаться вопросом, различаются ли разные подклассы точечных по своему отношению к микротрубочкам. Мы выполнили простую характеристику этой взаимосвязи, вычислив среднее фактическое расстояние каждой точки от микротрубочек, а также среднее расстояние от микротрубочек, предсказанное нашей подобранной моделью.S3 Фиг. Показывает сравнение этих двух расстояний для каждого шаблона по всем типам ячеек и для каждой комбинации шаблона и типа ячейки. Доверительный интервал среднего расстояния от микротрубочек определяли методом Тьюки-Крамера после двухфакторного дисперсионного анализа [17] (по белкам и типам клеток). Все символы расположены довольно близко к диагонали, что указывает на то, что модель хорошо согласуется с измерениями. При усреднении по всем трем типам клеток ретромеры, рециркулирующие эндосомы и ранние эндосомы показывают наиболее тесную ассоциацию с микротрубочками, а тельца RNP, везикулы COPI и покрытые ямки показывают наименьшую.Когда каждая комбинация белка и типа клеток рассматривается отдельно, мы видим большую вариабельность расстояний (возможно, из-за различий в белках, связывающих микротрубочки, размере или форме клеток). COPII, лизосомы и COPI демонстрируют наименьшие различия между тремя типами клеток, а покрытые ямки и рециклирующие эндосомы — наибольшие.

Еще один способ сравнения различных паттернов — это изучение различий в функциях моделей между ними. Простая визуализация этого показана на рис. 3, на котором для каждого шаблона показаны относительные значения каждой функции.В U-2OS, например, первые четыре характеристики (относящиеся к размеру и интенсивности) четко различают группу тел RNP, поздних эндосом, рециркулирующих эндосом, лизосом и COPII от других, а также высокое значение mx5 (количество точек ) отделяет тела RNP от этой группы. Могут быть идентифицированы и другие отличительные признаки или комбинации признаков, такие как ретромеры, имеющие наименьшее значение для mx12 (что согласуется с их тесной ассоциацией с микротрубочками). Эти различия обеспечивают интерпретируемое обоснование способности классификаторов различать закономерности.

Рис 3. Сравнение характеристик моделей для разных лекал.

Значения для каждого объекта были оценены по z-шкале, чтобы сопоставить их по одной шкале между объектами, а среднее значение для каждого объекта показано как функция номера объекта (определения функций см. В Таблице S1).

https://doi.org/10.1371/journal.pcbi.1004614.g003

Генеративная модель распределения точечных белков

Трудный вопрос, который часто вызывает споры, заключается в том, как лучше всего описать субклеточный паттерн данной органеллы или структуры (особенно новой).Описания с использованием неструктурированного текста или терминов геномной онтологии откладывают вопрос, предполагая, что слов будет достаточно, чтобы читатель мог мысленно построить шаблон. Альтернативой является показ изображения в качестве примера, но это не дает представления об изменении в шаблоне (можно найти различия между любыми двумя изображениями в качестве примера, но это не касается того, являются ли эти различия статистически значимыми). К сожалению, эти два метода передачи информации о распределении и вариации белкового паттерна не обеспечивают количественного или, тем более, вероятностного или статистического представления наблюдаемого паттерна.В качестве альтернативы можно указать значения для описательного вектора признаков или матрицы для каждого шаблона (который может использоваться для классификатора), но это позволяет только распознавать новые примеры, но не создавать пример шаблона. Векторы признаков также не обязательно позволяют создать явную модель взаимосвязи между компонентами ячеек. Конечно, ни один из вышеперечисленных подходов не полезен, если нам нужно представление in silico геометрии клетки и выраженных паттернов (т.е.потребителем представления является компьютер, а не клеточный биолог).Например, информация о субклеточных паттернах необходима для точного математического моделирования клеточной биохимии и поведения [4–6]. В качестве решения мы ввели построение генеративных моделей клеточной организации непосредственно из изображений [7, 8, 18–20]. Эти модели предназначены для улавливания основных свойств определенного шаблона; в статистических терминах, чтобы зафиксировать распределение, из которого взяты все примеры этого шаблона. Такую модель можно использовать для синтеза новых изображений клеток из этого распределения.

Таким образом, мы построили генеративную модель точечных паттернов, структура которых показана на рис. 4. Модель начинается с моделей ядер и формы клеток (d _n, d _c) и распределения микротрубочек (d _m) и связей. их к моделям распределения точек с использованием mx7 через mx11, чтобы уловить зависимость от формы клеток и mx12 и mx13, чтобы уловить зависимость от микротрубочек (см. Методы). Кроме того, размер, форма и интенсивность везикул моделируются независимо от формы клеток и микротрубочек с mx1 по mx6.Фоновая интенсивность моделируется аналогичным образом в зависимости от формы клеток и микротрубочек (от mx14 до 20) и масштабируется, чтобы соответствовать доле интенсивности с mx21 и mx22. Мы проиллюстрировали, что изображения, сгенерированные из моделей, изученных для каждого из классов шаблонов, аналогичны реальным изображениям на Рис. 5 и S4 Рис.

Рис. 4. Графическое представление байесовской иерархической структуры генеративной модели точки, обусловленной геометрией клетки и микротрубочками.

Форма ядра берется из d _n, форма клетки берется из d _c, в зависимости от формы ядра [8].Паттерн микротрубочек синтезируется из d _m в зависимости от сформированной клетки и формы ядра [9]. Распределение формы и положения точек, d _p, моделируется с помощью компонентов p _p, которые моделируют положение точек в зависимости от структуры клетки, ядра и микротрубочек, и n _p, s _p и i _p, которые независимо моделируют количество, размер и интенсивность точек. Фоновый узор аналогичным образом создается в зависимости от структуры клетки, ядра и микротрубочек с помощью p _b, а его интенсивность определяется с помощью i _b.

https://doi.org/10.1371/journal.pcbi.1004614.g004

Рис. 5. Репрезентативные изображения из четырех шаблонов и соответствующие синтезированные изображения в ячейках U-2OS.

В левом столбце показаны изображения клеток, наиболее близкие к медиане пространства параметров для клеток этого паттерна, а в правом столбце показаны синтезированные клетки из генеративной модели протеинового паттерна в зависимости от геометрии клетки и микротрубочек левой панели. Зеленый, красный и синий каналы представляют точки, микротрубочки и ядра соответственно.

https://doi.org/10.1371/journal.pcbi.1004614.g005

Предполагая, что распределения одиннадцати паттернов точек не зависят друг от друга, мы можем объединить модели и синтезировать ячейки, содержащие все одиннадцать. На рис. 6 показан пример «типичной» ячейки при этом предположении (с использованием средних значений всех параметров модели).

Рис. 6. Изображение синтетической ячейки, содержащее одиннадцать точечных рисунков.

Синтетические распределения для всех паттернов были независимо созданы в одной и той же ячейке; это предполагает, что позиции точек не влияют друг на друга (например,g., что пероксисомы не более или менее вероятно находятся рядом с тельцами RNP). Ядро показано темно-серым цветом, а микротрубочки — светло-серым. Цвета узоров такие же, как на рис. 3.

https://doi.org/10.1371/journal.pcbi.1004614.g006

Обсуждение

С развитием систем для флуоресцентной маркировки и получения изображений тысяч субклеточных белковых паттернов возникла потребность в автоматизированных методах анализа и моделирования паттернов на этих изображениях [21].Цели такого анализа включают, но не ограничиваются этим, определение органелл, в которых локализуются различные белки, и изучение статистической зависимости между различными белками. Однако предыдущие методы не смогли распознать субпаттерны основных типов органелл. Более того, необходимы методы для описания взаимоотношений между клеточными компонентами таким образом, который не только может быть интерпретирован человеком, но и позволяет нам генерировать новые примеры этих паттернов для будущего использования при моделировании клеток [22].

Здесь мы описали новую основу для построения моделей субклеточных паттернов точечных точек в зависимости от геометрии клетки и микротрубочек. Эти модели используют интерпретируемые особенности, которые фиксируют определенные способы, которыми субпаттерны пунктиров различаются между типами клеток (например, различия, отмеченные в начале результатов), и могут генерировать синтетические экземпляры клеток, репрезентативные для моделируемой популяции. Мы продемонстрировали ценность этой структуры, изучая модели непосредственно из изображений одиннадцати хорошо охарактеризованных паттернов точечных белков в трех типах клеток.Мы показали, что основная вариация этих паттернов соответствовала зависимости от микротрубочек, общей интенсивности, а также размера и формы точек. Учитывая параметры модели, мы построили конвейер, демонстрирующий как высокую способность этой модели различать паттерны одного и того же типа клеток, так и способность автоматически назначать аннотации 550 белкам (многие из которых ранее были плохо охарактеризованы в отношении субклеточного расположения).

Скрининг и анализ с высоким содержанием становятся все более частыми, включая тонкий анализ изменений местоположения, вызванных химическими соединениями или ингибирующими РНК, и анализ паттернов в масштабе протеома.Описанные нами особенности должны быть полезны для улучшения способности различать различные везикулярные и точечные паттерны и, что наиболее важно, для обеспечения интерпретируемой и переносимой основы для их сравнения.

Работа, представленная здесь, представляет собой важный шаг на пути к объединению детальных моделей, полученных из больших коллекций изображений белков, содержащихся в дискретных объектах, с моделями роста сети микротрубочек, изученными с помощью обратного моделирования [9, 18]. Он служит важным компонентом нашего проекта CellOrganizer (http: // cellorganizer.org /) [20], целью которого является получение подробной модели пространственной организации и взаимоотношений между различными паттернами субклеточного местоположения. Мы планируем расширить эту работу, объединив ее с моделями динамики субклеточного паттерна, а также расширить модель, чтобы уловить дальнейшую зависимость между компонентами. Есть надежда, что подобные подходы позволят создавать модели, которые фиксируют существенное поведение клеток, не требуя одновременного измерения тысяч различных белков в одной и той же живой клетке, что невозможно при современных технологиях.

Материалы и методы

Коллекции изображений

В качестве данных использовались изображения конфокальной иммунофлуоресцентной микроскопии фиксированных клеток из линий клеток A-431, U-2OS и U-251MG из HPA [10]. Были выбраны все антитела, субклеточный паттерн которых был аннотирован как «везикулы» или «цитоплазма» (всего 2357, 3038 и 1730 белков для каждой линии; S1 Dataset содержит полный список проанализированных белков). Изображения были проанализированы как 8-битные изображения TIFF с тремя каналами, каждый из которых был получен с использованием различной длины волны излучения флуоресценции из одного поля изображения.Три канала показывают расположение определенного точечного белка, ядерной окраски и микротрубочек. Каждое из изображений имеет размер 1728 × 1728 пикселей, а размер пикселя соответствует 0,08 мкм в плоскости образца. Белки-основатели для одиннадцати паттернов были выбраны, как описано в результатах. После сегментирования полей изображений для этих белков на отдельные участки клеток с использованием метода засеянных водоразделов [2] было обнаружено, что набор изображений основателей содержит 1099 клеток, 333 из A-431, 327 из U-2OS и 439 из U-251MG. (количество клеток для каждой из 33 комбинаций антитела и линии клеток варьировало от 12 до 85).

Параметризация микротрубочек и точек

На изображениях клеток из-за вариаций интенсивности флуоресценции в цитоплазме сегментация точек и микротрубочек из изображений паттернов белков представляет собой сложную проблему, когда глобальные пороговые методы могут превышать пороговые области цитоплазмы, содержащие структуры низкой интенсивности. Изображение входной ячейки было очищено от шума путем размытия с помощью фильтра Гаусса со стандартным отклонением 0,75. Мы изолировали изображения с высокой пространственной частотой переднего плана и изображения с низкой пространственной частотой фоновой интенсивности путем фильтрации нижних частот сглаженного изображения с помощью гауссовского фильтра со стандартным отклонением в 4 пикселя и вычли это фоновое изображение из сглаженного изображения, в результате чего получилось изображение с высоким разрешением. частотный сигнал переднего плана (т.е. точка). Пиксели с отрицательными значениями сигнала переднего плана были удалены, и изображение переднего плана было вычтено из первого сглаженного изображения, чтобы получить фоновое изображение (оба значения суммируются с общей интенсивностью изображения). Чтобы увеличить скорость, с которой модель смеси Гаусса может быть помещена на изображение переднего плана, мы исключили все пиксели ниже порога Ридлера-Кальварда [23] и все однопиксельные объекты. Мы использовали скелетированный сигнал переднего плана изображения микротрубочек для моделирования расстояний от объектов до микротрубочек.Этот подход привел к разумному определению как точек, так и микротрубочек и был достаточным, чтобы уловить вариации паттернов основателя, проанализированных в этой статье.

Расчет расстояния между каждой точкой и ближайшей микротрубочкой

Центроиды всех точек были вычислены путем подбора смеси гауссиан для различения перекрывающихся точек [7]. Расстояние между центроидом каждой точки и ближайшей к ней микротрубочкой находили с помощью преобразования расстояния скелетонизированного изображения микротрубочек.

Регистрация положения везикул и фона относительно микротрубочек, границ клеток и ядер

Функция плотности вероятности (PDF) для положения точки (p _p) относительно геометрии клетки и микротрубочек была оценена путем расширения модели, описанной ранее [8], путем добавления членов, описывающих расстояние от микротрубочек, d : (1)

Термины β ₁ — β ₄ описывают зависимость объектов от радиальных и угловых координат в зависимости от формы ячейки [2, 8], и β ₅ и β ₆ описывают зависимость объектов, подлежащих локализации, по отношению к микротрубочкам.Мы аналогичным образом построили PDF для интенсивности фона (которая предположительно является результатом растворимого непунктатного белка).

Генеративные модели

Байесовская иерархическая структура для генеративной модели точек показана на рис. 3 в виде графической модели. Многомерная статистическая модель была построена из независимых распределений значений следующих статистических данных для каждой ячейки: размер точки (s _p), количество точек на ячейку (n _p) и интенсивность (i _p).

Было создано

экземпляров синтетических клеток, начиная с границ клетки и ядра и изображения микротрубочек случайно выбранной клетки. (Их также можно создать, сначала сгенерировав границы клеток и ядер и распределения микротрубочек с использованием моделей, изученных ранее для трех клеточных линий [18].) Чтобы добавить точку в ячейку, были взяты значения количества точек на клетку (n _{). p}) и размер (s _p) и интенсивности флуоресценции (i _p)) для каждой точки из распределений, полученных из данных 2D HPA.Они использовались для генерации точек с использованием генеративной модели на основе гауссовских объектов [8]. Положения для них были взяты из PDF положения везикул из модели выше после морфинга к конкретной геометрии клетки. Фоновая флуоресценция была добавлена с использованием PDF-файла, полученного из фоновых изображений, масштабированного в соответствии с рисунком из общего распределения интенсивности фона, полученного из изображений.

Классификация изображений

Назначение субклеточных аннотаций изображениям клеток — это задача классификации, имеющая сложности во многих биологических контекстах; в частности, это структурированный характер данных (всем клеткам с одним и тем же антителом должна быть присвоена одна и та же метка), неразделимость данных о классе (белки с разными биохимическими свойствами могут иметь похожие модели локализации) и несбалансированное количество наблюдений (некоторые изображения могут содержать много ячеек, а в других их мало).Мы разработали метод классификации, специально предназначенный для решения вышеуказанных проблем.

Учитывая параметризации шаблона, соответствующие ячейкам двух коллекций (все ячейки, содержащиеся в двух изображениях), мы выполняем задачу сбалансированной классификации, чтобы определить, насколько различимы эти две коллекции. Для каждой пары изображений мы выделяем подмножество ячеек и обучаем SVM путем взвешивания обучающих данных таким образом, чтобы во всех классах был единый априор. Затем мы классифицируем задержку и подсчитываем частоту, с которой задержке был назначен правильный набор, что приблизительно соответствует частоте ошибок Байеса [24].Этот подход аналогичен другим методам, используемым в геномике [25]. Мы принимаем среднюю точность классификации по всем задачам классификации ячеек (независимо от того, назначен ли ячейкам, принадлежащим двум изображениям, один и тот же субклеточный образец), как меру того, насколько различимы эти две коллекции, что приводит к возможному диапазону значений от 1 ( полностью отделимы) до 0 (полностью неотделимы). Практически во всех случаях мера различия находится между 0,5 и 1. Мы будем называть эту меру «несходством».

Чтобы определить порог несходства, при котором мы можем сказать, что две коллекции принадлежат одному или разным шаблонам, конвейер обрабатывает изображения каждого из наших базовых шаблонов как свою собственную коллекцию (с несколькими изображениями каждого шаблона) и выполняет указанную выше классификацию задача с использованием ячеек, содержащихся в каждом изображении. Построена кривая ROC, показывающая истинные и ложные положительные результаты классификации в зависимости от увеличения несходства. Для каждого типа ячеек мы построили верхнюю границу несходства (выше, которая считается «неодинаковой аннотацией») по отсечке, определенной в том месте, где самая верхняя левая точка кривой ROC пересекается с наклоном, где TN, FP, TP и FN — это количество истинно отрицательных, ложноположительных, истинно положительных и ложноотрицательных результатов соответственно.При сравнении нашего базового набора с изображениями, содержащими клетки с неизвестной локализацией белка, мы присваиваем неизвестному шаблону метку любого базового шаблона, который находится в пределах порога сходства. Эти пороговые значения составляли 0,78846, 0,70588 и 0,72093 для A-431, U-2OS и U-251MG соответственно.

Доступность программного обеспечения

Все программное обеспечение и данные, использованные для этой работы, доступны в виде воспроизводимого исследовательского архива (http://murphylab.web.cmu.edu/software). Программное обеспечение также будет доступно как часть системы CellOrganizer с открытым исходным кодом (http: // CellOrganizer.org). Конвейер сегментации и вычисления признаков можно использовать отдельно.

Дополнительная информация

S1 Рис. Качество подобранных распределений для точечных белков.

P-P графики, сравнивающие CDF вероятности везикулы на заданном расстоянии от микротрубочек для подобранной модели, и эмпирическое распределение показаны для средней клетки каждого паттерна (те же клетки, что показаны на Фиг.5 и S4 Фиг).

https://doi.org/10.1371/journal.pcbi.1004614.s001

(TIF)

S2 Рис. Определение порога аннотации.

Кривые рабочих характеристик приемника для статистики точности для определения классового порога показаны для трех типов ячеек. Точность, соответствующая оптимальному порогу, показана черным кружком (см. Методы).

https://doi.org/10.1371/journal.pcbi.1004614.s002

(TIF)

S3 Рис. Сравнение среднего расстояния от точек до микротрубочек, измеренного эмпирически и в нашей подобранной модели для белков, типов клеток, белков и типов клеток.

Каждый символ представляет тип ячейки; квадрат для А-431, ромб для ОС У-2 и круг для У-251 МГ. Линии представляют собой доверительные интервалы с использованием критерия диапазона Тьюки для эмпирических данных (ось x) и подобранной модели (ось y) после двухфакторного дисперсионного анализа.

https://doi.org/10.1371/journal.pcbi.1004614.s003

(TIF)

S4 Рис. Репрезентативные изображения семи паттернов и соответствующего паттерна синтезированного белка в клетках U-2OS.

В левом столбце показаны изображения клеток, наиболее близкие к медиане пространства параметров для клеток этого паттерна, а в правом столбце показаны синтезированные протеиновые паттерны из генеративной модели протеинового паттерна в зависимости от геометрии клетки и микротрубочек левой панели.

https://doi.org/10.1371/journal.pcbi.1004614.s004

(TIF)

S1 Набор данных. Результаты сравнения белков HPA с одиннадцатью классами точечных подшаблонов.

Значения в столбцах для каждого подшаблона представляют собой меры отделимости для всех ячеек данного протеина от ячеек белка-основателя для этого субшаблона.

https://doi.org/10.1371/journal.pcbi.1004614.s005

(XLS)

S1 Таблица. Параметры генеративной модели.

Радиальное положение определяется как r = L 1 / ( L 1+ L 2), где L 1 — это расстояние между центром каждой точки и ядерной мембраной, а L . 2 — расстояние от центра каждой точки до клеточной мембраны. Следовательно, r положительно, если точка находится вне ядра, и отрицательно внутри. α — угол между большой осью ячейки и вектором от центра ячейки к центру точки.Также показан компонент генеративной модели, для которого используется данный признак (см. Рис. 3).

https://doi.org/10.1371/journal.pcbi.1004614.s008

(DOCX)

Благодарности

Мы благодарим проект Human Protein Atlas, особенно Девина Салливана и Эмму Лундберг, за предоставленные изображения, а также членов групп Роде и Мерфи, особенно Ивана Цао-Берга и Армаган В. Найк, за их помощь и полезные комментарии.

Вклад авторов

Задумал и спроектировал эксперименты: GRJ JL AS GKR RFM.Проведены эксперименты: GRJ JL AS. Проанализированы данные: GRJ JL AS GKR RFM. Написал статью: GRJ JL AS GKR RFM.

Ссылки

1. Мерфи Р.Ф., Веллисте М., Поррека Г. Надежные числовые характеристики для описания и классификации паттернов субклеточного расположения на изображениях с флуоресцентного микроскопа. J VLSI Sig Proc. 2003. 35 (3): 311–21.
2. Ли Дж., Ньюберг Дж. Я., Улен М., Лундберг Э., Мерфи РФ. Автоматический анализ и повторное аннотирование субклеточных местоположений на конфокальных изображениях из Атласа белков человека.ПлоС один. 2012; 7 (11): e50514. Epub 2012/12/12. pmid: 23226299; PubMed Central PMCID: PMC3511558.
3. Блум Г.С., Гольдштейн Л.С. Путешествие по магистралям микротрубочек: как мембраны перемещаются по секреторному пути. J Cell Biol. 1998. 140 (6): 1277–80. pmid: 9508761; Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC2132669.
4. Морару II, Schaff JC, Слепченко BM, Loew LM. Виртуальная ячейка: интегрированная среда моделирования для экспериментальной и вычислительной клеточной биологии. Ann N Y Acad Sci.2002; 971: 595–6. pmid: 12438191.
5. Томита М., Хашимото К., Такахаши К., Симидзу Т.С., Мацудзаки Ю., Миёси Ф. и др. E-CELL: программная среда для моделирования целых клеток. Биоинформатика. 1999. 15 (1): 72–84. pmid: 10068694.
6. Керр Р.А., Бартол Т.М., Камински Б., Диттрих М., Чанг Дж. К., Баден С.Б. и др. Методы быстрого моделирования методом Монте-Карло для биологических реакционно-диффузионных систем в растворе и на поверхности. SIAM J Sci Comput. 2008; 30 (6): 3126. pmid: 20151023; PubMed Central PMCID: PMC2819163.
7. Чжао Т., Мерфи РФ. Автоматизированное обучение генеративных моделей субклеточного местоположения: строительные блоки для системной биологии. Цитометрия, часть A. 2007; 71A (12): 978–90. pmid: 17972315.
8. Пэн Т., Мерфи РФ. Трехмерные генеративные модели клеточной организации на основе изображений. Цитометрия, часть A. 2011; 79A: 383–91.
9. Шариф А., Мерфи РФ, Роде Г.К. Генеративная модель распределения микротрубочек и косвенная оценка ее параметров по изображениям флуоресцентной микроскопии.Цитометрия, часть A. 2010; 77A (5): 457–66. Epub 2010/01/28. pmid: 20104579.
10. Барбе Л., Лундберг Э., Оксволд П., Стениус А., Левин Э., Бьорлинг Э. и др. К конфокальному субклеточному атласу протеома человека. Протеомика клеток Mol. 2008. 7 (3): 499–508. Epub 2007/11/22. pmid: 18029348.
11. Шульце Дж., Моосмайер Д., Вайске Дж., Фернандес-Монтальван А., Хербст С., Юнг М. и др. Анализы стабилизации белков на основе клеток для обнаружения взаимодействий между низкомолекулярными ингибиторами и BRD4.Экран J Biomol. 2015; 20 (2): 180–9. pmid: 25266565.
12. Bucci C, Parton RG, Mather IH, Stunnenberg H, Simons K, Hoflack B и др. Малая GTPase rab5 функционирует как регуляторный фактор на раннем пути эндоцитоза. Клетка. 1992. 70 (5): 715–28. pmid: 1516130.
13. Мишра С., Мерфи Л.С., Мерфи Л.Дж. The Prohibitins: новые роли в различных функциях. J Cell Mol Med. 2006. 10 (2): 353–63. pmid: 16796804; Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC3933126.
14.Ван Ю.Дж., Го Х.Л., Ли С.А., Чжао Ю.К., Лю Ц.К., Ли У.Х. и др. Prohibitin участвует в активированной интернализации и деградации активированного протеазой рецептора 1. Biochimica et biophysica acta. 2014; 1843 (7): 1393–401. pmid: 24732013.
15. Холлеман Дж., Марчезе А. Убиквитинлигаза deltex-3l регулирует эндосомный сортировку рецептора CXCR4, сопряженного с G-белком. Mol Biol Cell. 2014; 25 (12): 1892–904. pmid: 247; Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC4055268.
16.Yoshitake H, Tsukamoto H, Maruyama-Fukushima M, Takamori K, Ogawa H, Araki Y. TEX101, гликопротеин-маркер зародышевых клеток, связан с локусом k комплекса лимфоцитов с антигеном 6 в семенниках мыши. Biochem Biophys Res Commun. 2008. 372 (2): 277–82. pmid: 18503752.
17. Тьюки Дж. У. Сравнение индивидуальных средних при дисперсионном анализе. Биометрия. 1949; 5 (2): 99–114. pmid: 18151955.
18. Ли Дж., Шариф А., Викинг М., Лундберг Е., Роде Г. К., Мерфи РФ.Оценка распределения микротрубочек по изображениям двумерной иммунофлуоресцентной микроскопии выявляет различия между культивируемыми линиями клеток человека. ПлоС один. 2012; 7 (11): e50292. Epub 2012/12/05. pmid: 23209697; PubMed Central PMCID: PMC3508979.
19. Бак Т.Э., Ли Дж., Роде Г.К., Мерфи РФ. К виртуальной клетке: автоматизированные подходы к построению моделей субклеточной организации, «извлеченные» из микроскопических изображений. BioEssays: новости и обзоры в области молекулярной, клеточной биологии и биологии развития.2012; 34 (9): 791–9. Epub 2012/07/11. pmid: 22777818; PubMed Central PMCID: PMC3428744.
20. Мерфи РФ. CellOrganizer: модели субклеточной организации и распределения белков на основе изображений. Методы клеточной биологии. 2012; 110: 179–93. pmid: 22482949
21. Боланд М.В., Марки М.К., Мерфи РФ. Автоматическое распознавание паттернов, характерных для субклеточных структур, на изображениях флуоресцентной микроскопии. Цитометрия. 1998. 33 (3): 366–75. pmid: 9822349
22.Салливан Д.П., Арепалли Р., Мерфи Р.Ф., Тапиа Дж.Дж., Фейдер Дж.Р., Диттрих М. и др. Автоматизация проектирования биологических моделей: трубопровод, объединяющий пространственную и молекулярную сложность. Труды 25-го издания Симпозиума Великих озер по СБИС; Питтсбург, Пенсильвания, США. 2743763: ACM; 2015. с. 321–3.
23. Ридлер Т.В., Кальвард С. Определение порогового значения изображения с использованием метода итеративного выбора. IEEE Trans Syst Man Cybernet. 1978; СМЦ-8 (8): 630–2.
24. Тумер К., Гош Дж., Редакторы.Оценка коэффициента байесовских ошибок путем комбинирования классификаторов. Распознавание образов, 1996, Труды 13-й Международной конференции по; 1996 25–29 августа 1996 года.
25. Чжан Дж.Г., Дэн Х.В. Выбор гена для классификации данных микрочипов на основе ошибки Байеса. BMC Bioinformatics. 2007; 8 (1): 370. pmid: 17
2; Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC2089123.

Статья 313 Гражданского кодекса. Гражданский кодекс Российской Федерации (Гражданский кодекс Российской Федерации)

Положения п. 2 ст.313 ГК РФ разрешает третьему лицу взыскать денежное обязательство просроченного должника. Рассмотрим основные вопросы и проблемы, возникающие в практике арбитражных судов при применении данного правила, в том числе в делах о банкротстве.

Возможность выполнения обязательства третьим лицом не является чем-то новым и необычным для внутреннего законодательства — соответствующие нормы действовали в советский период 1. Поэтому вполне понятно, что подобная норма нашла свое место в нынешнем Гражданском кодексе. Кодекс Российской Федерации (статья 313 «Исполнение обязательства третьим лицом»).

Оригинальная версия ст. 313 Гражданского кодекса Российской Федерации предусмотрены два отдельных случая, когда кредитор был обязан принять денежное взыскание, предложенное третьим лицом:

, когда исполнение обязательства было возложено должником на третье лицо;

, когда исполнение обязательства предлагается третьим лицом (без согласия должника), которому грозит потеря своих прав на имущество должника (право аренды, залога и т. Д.)) в результате взыскания кредитором данного имущества.

С 1 июня 2015 года вступила в силу новая редакция ст. 313 ГК РФ (введен Федеральным законом от 08.03.2015 № 42-ФЗ), что позволяет любому третьему лицу, даже при отсутствии наложения со стороны должника или наличия охраняемого законом проценты, чтобы погасить просроченную задолженность. В этом случае кредитор не вправе отказаться от предложенного исполнения, но обязан его принять (п. 2 ст. 313 ГК РФ).В свою очередь, в силу п. 5 ст. 313 ГК РФ к третьему лицу, исполнившему обязательство должника, права кредитора переходят по обязательству в соответствии со ст. 387 ГК РФ, то есть в порядке суброгации (цессионное законодательство). Таким образом, можно сказать, что, исходя из положений ст. 313 ГК РФ, третье лицо сегодня имеет практически неограниченную возможность осуществить принудительный выкуп денежного права требования от кредитора.

Следует отметить, что положения, закрепленные в ст. 313 ГК РФ, довольно противоречивы. С одной стороны, они укрепляют позицию кредитора, позволяя ему получить исполнение обязательства от третьей стороны, не вникая в отношения между должником и третьей стороной. С другой стороны, они позволяют третьей стороне беспрепятственно вмешиваться в правоотношения между кредитором и должником, что, по мнению автора данной статьи, не совсем соответствует принципам автономии воли и недопустимости произвольного произвола. вмешательство кого-либо в частные дела.Романы, п.2, ст. 313 ГК РФ также указывают на дальнейшее ослабление принципа относительности обязательственных отношений, из которого следует, что никто не может вмешиваться в отношения между кредитором и должником.

Положения п. 2 ст. 313 ГК РФ не было бы столь спорным, если бы законодатель упомянул, что третье лицо имеет право предложить исполнение за должника только в случаях, когда у такого третьего лица есть законный интерес.Однако по тем или иным причинам законодатель этого не сделал. Однако, исходя из принципа добросовестности (п. 3 ст. 1 ГК РФ), ничто не мешает толкованию нормы п. 2 ст. 313 ГК РФ по аналогичной схеме. Со временем именно такой подход к толкованию п. 2 ст. 313 ГК РФ начинает преобладать в судебной практике.

Действие романа п. 2 ст.313 ГК РФ в срок

Анализируя новую редакцию ст. 313 ГК РФ вопрос о его временном действии не может быть оставлен без внимания. По правилу, содержащемуся в п. 2 ст. 2 Федерального закона от 08.03.2015 № 42-ФЗ новые положения Гражданского кодекса Российской Федерации распространяются на правоотношения, возникшие после дня вступления в силу настоящего Федерального закона. Для правоотношений, возникших до дня его вступления в силу, новые положения Гражданского кодекса Российской Федерации должны распространяться на те права и обязанности, которые возникают после дня его вступления в силу.Таким образом, содержание п. 2 ст. 2 Федерального закона от 08.03.2015 № 42-ФЗ дает основание сделать вывод о том, что новая редакция ст. 313 ГК РФ распространяется на случаи исполнения обязательства третьим лицом, имевшие место с 1 июня 2015 года. Кроме того, для применения ст. 313 ГК РФ в новой редакции не имеет значения момент возникновения обязательства или момент его просрочки, важен только момент исполнения этой обязанности третьим лицом.Если исполнение обязательства третьим лицом произошло до 1 июня 2015 года, правовая основа регулирования этих правоотношений, ст. 313 ГК РФ в предыдущей редакции, то есть действует на момент исполнения.

Аналогичной точки зрения придерживается Судебная коллегия по экономическим спорам ВС РФ. Так, в Постановлении от 13.10.2016 № 305-ЕС16-8619 по делу № А41-61444 / 2015 судьи ВС РФ подчеркнули, что для применения новой редакции ст.313 ГК РФ юридически значимым обстоятельством является не момент возникновения основного обязательства (как ошибочно полагали апелляционные суды и районный суд), а момент исполнения обязательства третьим лицом, что влечет за собой возникновение прав и обязанностей у сторон правоотношений.

Экономическая коллегия ВС РФ также не оставила без внимания ситуацию, связанную с исполнением обязательства третьим лицом до 1 июня 2015 года.В Постановлении № 306-ЕС16-17647 (7) от 30 марта 2017 г. по делу № А12-45752 / 2015 судьи ВС РФ пришли к выводу, что с момента предыдущей редакции ст. 313 ГК РФ не содержало положений о том, что в отсутствие возложения исполнение третьим лицом просроченного денежного обязательства влечет за собой переход к нему прав кредитора по исполненному обязательству в соответствии со ст. 387 ГК РФ права кредитора не могут быть переданы такому третьему лицу по правилам суброгации.Единственным исключением являются случаи, когда третье лицо рискует потерять свое право на имущество должника в результате обращения взыскания со стороны кредитора.

Применение п. 2 ст. 313 ГК РФ по делам о банкротстве

Нетрудно представить, какой огромный потенциал заложен в п. 2 ст. 313 ГК РФ, в первую очередь для осуществления действий, направленных на перехват управления в делах о банкротстве.В ситуации, когда даже незначительные претензии одного кредитора способны вызвать решающий голос для принятия желанного решения и изменить соотношение сил во всей процедуре, положения п. 2 ст. 313 ГК РФ стали идеальным правовым инструментом. Нет необходимости вести переговоры и погашать требования, играть в тайную игру — достаточно просто перевести сумму на счет интересующего кредитора, и заинтересованное лицо становится законным владельцем заветного права (требования).Некоторые юристы, занимающиеся банкротством, давно заметили перспективность п. 2 ст. 313 ГК РФ и активно им пользуются, доставляя серьезные проблемы кредиторам и их законным интересам. В этой связи неудивительно, что основное внимание судебной практики сосредоточено именно на применении п. 2 ст. 313 ГК РФ по делам о банкротстве.

За короткий срок Верховным Судом РФ разработан ряд правовых позиций, существенно нивелирующих недостатки данной нормы.

В первую очередь следует обратить внимание на пояснения, содержащиеся в п. 4 пункт 21 Постановления Пленума Вооруженных Сил Российской Федерации от 22 ноября 2016 г. № 54 «О некоторых вопросах применения общих положений Гражданского кодекса Российской Федерации об обязательствах и их исполнении» (далее — Постановление № 54). В соответствии со статьями 71.1, 85.1, 112.1, 113 и 125 Федерального закона от 26.10.2002 № 127-ФЗ «О несостоятельности (банкротстве)» Пленума ВС РФ (далее — в качестве Закона о банкротстве) устанавливают особые правила в отношении п. 2 ст.313 ГК РФ, в связи с чем исполнение обязательств должника его учредителями (участниками), собственником имущества должника — унитарным предприятием, либо третьим лицом или третьими лицами после введения первой процедуры банкротства допускается в порядке, предусмотренном законодательством о банкротстве.

Позже аналогичная правовая позиция была закреплена в п. 28 Обзора судебной практики по вопросам участия уполномоченных органов в делах о банкротстве и применяемых в этих случаях процедур банкротства (утвержден Президиумом ВС РФ 12 / 20/2016, далее — Обзор практики банкротства), где Верховный Суд РФ подчеркнул, что после введения первой процедуры в деле о банкротстве третье лицо в индивидуальном порядке вправе урегулировать только претензии уполномоченного органа. по обязательным платежам согласно положениям ст.71.1, 85.1, 112.1 и 129.1 Закона о банкротстве. При этом, опасаясь, видимо, того, что указанная правовая позиция может быть истолкована как ограничение обращения прав (требований) в отношении неплатежеспособного должника, Верховный Суд Российской Федерации дополнительно указал, что указанное постановление не имеет означают, что банкротный кредитор не вправе уступать свое требование должнику на основании договора уступки. Таким образом, ВС РФ существенно сузили круг отношений, на которые распространяется п. 2 ст.313 ГК РФ: при введении в отношении должника какой-либо из процедур по делу о банкротстве третье лицо лишается возможности исполнения обязательства перед должником в соответствии с п. Изобразительное искусство. 313 ГК РФ.

Вторым важным уточнением Пленума ВС РФ является правовая позиция, сформулированная в п. 3 п. 21 Постановления № 54. Это касается проблемы, связанной с возможностью применения положений п. 2 ст.313 ГК РФ в ущерб интересам кредитора, в том числе по делам о банкротстве. По мнению ВС РФ, в случае, если при исполнении обязательства за должника третье лицо действовало недобросовестно, исключительно с намерением причинить вред кредитору или должнику по этому обязательству, например, в случаях если третье лицо погасило только основной долг должника с целью получения дополнительных голосов на собрании кредиторов при рассмотрении дела о банкротстве без понесения затрат на получение требований о финансовых санкциях, лишая кредитора права голоса, суд на основании ст.10 ГК РФ может признать передачу прав кредитора третьему лицу недействительной. Смысл этих разъяснений сводится к тому, что поскольку положения п. 2 ст. 313 ГК РФ, в первую очередь, предназначены для защиты законных интересов кредитора, третье лицо не может использовать данное положение в нарушение его цели. Если это произошло, то третье лицо не вправе рассчитывать на возникновение юридической силы по переходу к нему прав требований, суброгация признается судом несостоявшейся.Однако это не означает, что кредитор не должен возвращать переведенные деньги такому третьему лицу в разумные сроки. Если кредитор этого не сделал, то третье лицо вправе обратиться к нему с иском о взыскании неосновательного обогащения, исходя из положений ст. 1102 ГК РФ и правовой позиции, сформулированной в п. 4 п.20 Постановления № 54.

Интересно отметить, что приведенный Пленумом ВС РФ пример, в котором третье лицо погасило только основной долг должника с целью получения дополнительных голосов на собрании кредиторов при рассмотрении дела о банкротстве без понесение затрат на получение требований о финансовых санкциях, не является спекулятивным, а взято из практики Коллегии по экономическим спорам ВС РФ.Речь идет об Определении от 16 июня 2016 г. № 302-ES16-2049 по делу № A33-20480 / 2014.

По данному делу Экономическая коллегия ВС РФ пришла к выводу, что действия третьего лица по перечислению предприятию суммы, составляющей основной долг компании, на самом деле были направлены на принудительный выкуп определенных прав должником в для получения или контроля процедуры банкротства (поскольку предприятие являлось заявителем по делу) или дополнительных голосов на собрании кредиторов без дополнительных затрат на приобретение требований о финансовых санкциях (которые в силу пункта 3 статьи 137 Закона о банкротстве, подлежат удовлетворению после погашения основной суммы долга и причитающихся процентов.Фактически третье лицо использовало учреждение, закрепленное в ст. 313 ГК РФ, не в соответствии с его назначением (исполнение обязательства третьим лицом). В действиях третьего лица, по мнению судей ВС РФ, прослеживались явные признаки злоупотребления правом (ст. 10 ГК РФ). В результате таких действий предприятие, против своей воли лишенное прав требования к должнику, утратило возможность влиять на ход процедуры банкротства, в связи с чем отказ кредитора в спорной ситуации принятие исполнения, предложенного третьей стороной, должно считаться законным, а суброгация — недействительной.

Между тем данный пример — далеко не единственный способ нечестного использования п. 2 ст. 313 ГК РФ. Еще один яркий пример — дело (Определение ВС РФ от 15 августа 2016 г. № 308-ЕС16-4658 по делу № А53-2012 / 2015), по которому третье лицо частично погасило требования всех кредиторов, подавших исковые требования. заявление о банкротстве, так что сумма требования каждого из них составила 299 000 руб., то есть 1 000 руб. ниже порога для возбуждения дела о банкротстве.Это продолжалось до тех пор, пока суд не приступил к рассмотрению заявления о признании должника банкротом, поданного одним из кредиторов. Анализируя сложившуюся ситуацию, Коллегия по экономическим спорам Вооруженных Сил Российской Федерации выразила мнение, что для суда первой инстанции не могло не быть очевидным наличие нескольких исков, которые последовательно частично погашались третьими лицами в Таким образом, чтобы сумма оставшейся задолженности не могла превышать пороговую величину, однозначно свидетельствовало о трудностях с ликвидностью активов должника, о его несостоятельности.Суд не мог не принять во внимание вышеуказанные требования, составляющие немногим менее 300 000 рублей. каждая в совокупности, по-видимому, превысила этот порог. В связи с этим суд должен был назначить судебное заседание по совместному рассмотрению этих требований, но этого не было сделано. Кроме того, судьи ВС РФ отметили, что, несмотря на то, что ст. 313 ГК РФ предусматривает обязанность кредитора в определенных случаях принять исполнение, предложенное должнику третьим лицом, в указанных действиях третьего лица есть явные признаки злоупотребления правом, поскольку третье лицо, по сути, не преследовало цели погашения долгов предприятия (тем более, что финансовые санкции остались также не отмененными).Напротив, его действия были направлены на лишение компании статуса заявителя в деле о банкротстве, в том числе лишение полномочий, предоставляемых этим статусом, путем назначения временного администратора (п. 9 п. 3 ст. 41 Закона о банкротстве). Закон). На основании изложенных обстоятельств Коллегия по экономическим спорам Вооруженных Сил Российской Федерации пришла к выводу, что при выборе временного администратора суд должен учитывать кандидатуру лица, предложенного первым заявителем по делу о банкротстве. .

Стоит отметить, что дальнейшее развитие судебной практики еще больше снизило привлекательность п. 2 ст. 313 ГК РФ как инструмент перехвата контроля в делах о банкротстве. В пункте 27 Обзора практики несостоятельности сформулирована правовая позиция, суть которой заключается в том, что передача статуса заявителя по делу о банкротстве другому лицу не дает ему права пересмотреть кандидатуру арбитража. менеджер, предложенный первым заявителем.В ВС РФ указали, что, несмотря на то, что в силу п. 5 ст. 313 ГК РФ на стороне заявителя по делу о банкротстве, суброгация имела место, изменение субъектного состава правоотношений не дает новому заявителю права пересмотреть кандидатуру конкурсного управляющего предложенный его законным предшественником. В таком случае лицо, указанное в первом заявлении о признании должника банкротом, подлежит назначению временным администратором.Право предложить кандидатуру конкурсного управляющего или саморегулируемой организации с учетом специфики неплатежеспособности не может перейти ко второму заявителю вне зависимости от того, погашено ли первоначально поданное требование должником после подачи заявления. с судом или по нему осуществлено процессуальное правопреемство (абзац второй пункта 9 статьи 42 Закона о банкротстве).

Опасения юридического сообщества по поводу того, что в новой редакции п. 2 ст.313 ГК РФ оказались крайне неудачными и приведут к массовым злоупотреблениям в делах о банкротстве, оправданных. Однако довольно оперативная реакция Верховного Суда РФ привела к серьезному нивелированию неудачных формулировок законодателя. Тем не менее, положения п. 2 ст. 313 ГК РФ по-прежнему представляют угрозу для добросовестных участников гражданского оборота. Хотя правовые позиции, разработанные ВС РФ, способны нейтрализовать простые схемы поглощения в процедурах банкротства, продолжают успешно реализовываться более сложные варианты.Это обстоятельство требует дополнительного внимания со стороны судов к делам, связанным с применением механизма п. 2 ст. 313 ГК РФ, а также пресечение действий недобросовестных третьих лиц. Ситуация с п. 2 ст. 313 ГК РФ, дает возможность еще раз убедиться в том, что законодатель более щепетильно относится к формулировкам норм и уже на стадии законопроекта моделирует потенциальные ситуации, в которых возникает двусмысленность или непродуманное расположение нормы может привести к многочисленным случаям несправедливого толкования.

1 См., Например, ст. 38 Основы гражданского права СССР и республик, 1961 г., ст. 171 ГК РСФСР, ст. 62 Основ гражданского законодательства Союза ССР и республик 1991 г.

1. Кредитор обязан принять исполнение, предложенное должнику третьим лицом, если исполнение обязательства поручается должником указанному третьему лицу.

2. Если должник не возложил исполнение обязательства на третье лицо, кредитор обязан принять исполнение, предложенное за должника таким третьим лицом в следующих случаях:

1) должник просрочивает исполнение денежного обязательства;

2) такое третье лицо рискует утратить свое право на имущество должника в результате обращения взыскания на это имущество.

3. Кредитор не обязан принимать исполнение, предложенное должнику третьим лицом, если из закона, других правовых актов, условий обязательства или его сути следует, что должник обязан лично исполнить обязательство. .

4. В случаях, когда в соответствии с настоящей статьей допускается исполнение обязательства третьим лицом, оно вправе исполнить обязательство также путем уплаты долга в депозит нотариуса или проведения зачета с соблюдением правил, установленных настоящим Кодексом для должника.

5. Третье лицо, исполнившее обязательство должника, передает права кредитора по обязательству в соответствии со статьей настоящего Кодекса. Если права кредитора по обязательству частично перешли к третьей стороне, они не могут быть использованы им в ущерб кредитору, в частности, такие права не имеют преимуществ, когда они удовлетворяются за счет обеспечения. обязательства или когда у должника недостаточно средств для полного удовлетворения требования.

6. Если третье лицо исполнило обязательство должника, которое не является денежным, оно несет перед кредитором установленную для этого обязательства ответственность за недостатки в исполнении вместо должника.

Комментарий к Ст. 313 ГК РФ

1. По общему правилу исполнение должно осуществляться должником — стороной обязательства. Однако в большинстве случаев кредитору безразлично, кто предоставит ему соответствующую имущественную выгоду, поскольку это не приводит к изменению субъектов обязательства, и должник остается ответственным перед кредитором.

Учитывая это, комментируемая статья обеспечивает возможность исполнения обязательства за должника третьим лицом.

2. Привлечение к исполнению третьих лиц (поручение исполнения), как правило, осуществляется должником.

Правовой основой для передачи исполнения обычно является договор последнего с третьей стороной. Вместе с тем комментируемая статья выводит за свои пределы вопрос об основаниях для наложения взыскания, а также в целом — об отношениях третьего лица с должником (см .: Брагинский М.И., Витрянский В.В. Договорное право: Общие положения … М., 1998. С. 300 (автор главы М.И. Брагинский)). Соответственно, кредитор, принимая исполнение от третьей стороны, не должен проверять наличие и действительность правовой основы для такой уступки.

3. Пункт 1 комментируемой статьи устанавливает общее правило, согласно которому третье лицо, исполняющее обязательство для должника, является надлежащим субъектом исполнения. Как следствие, такое исполнение должно быть принято кредитором.В противном случае кредитор будет считаться просроченным в акцепте исполнения (см. Пункт 2 статьи 406 Гражданского кодекса и комментарии к нему).

Освобождение от этого правила — обязанность лично исполнить обязательство должника — может быть установлено законом (см., Например, пункт 1 статьи 770, статья 780 Гражданского кодекса) или следовать из условий обязательства. или его суть. Итак, специфика предмета предполагает личное выполнение обязательства по созданию произведения литературы, науки или искусства.В такой ситуации кредитор имеет право не принимать исполнение, выполненное третьей стороной.

4. Первоначальное предложение пункта 1 комментируемой статьи не должно толковаться изолированно от второго и приводить к выводу о невозможности навязать исполнение третьему лицу в тех случаях, когда исполнение должно быть выполнено лично должник.

Пункт 1 комментируемой статьи направлен на защиту интересов кредитора. При этом законодатель не вмешивается во взаимоотношения должника и третьего лица.Единственным последствием возложения на третье лицо исполнения обязательства с нарушением запрета, установленного законом или договором, является право кредитора не принимать такое исполнение (подробнее см .: Сарбаш С.В. Исполнение договорного обязательства. М., 2005. С. 126 — 129).

Следует иметь в виду, что закон не возлагает на кредитора обязанность воспользоваться предоставленной ему возможностью отказа. Поскольку рассматриваемая норма направлена именно на ее защиту, кредитор может самостоятельно решить, соответствует ли исполнение, предложенное третьим лицом в нарушение установленных запретов, его интересам.Принятие кредитором такого исполнения придает ему надлежащий характер и, как следствие, прекращает обязательство.

5. Когда исполнение обязательства возлагается на третье лицо, должник не выходит из правоотношения. Такое наложение исполнения отличается от перевода долга (см. Ст. 391 Гражданского кодекса и комментарии к нему), результатом которого является замена должника. В результате должник продолжает нести ответственность перед кредитором, и кредитор не имеет права предъявлять претензии третьему лицу.

Должник, доверивший исполнение обязательства третьему лицу, несет прямую ответственность перед кредитором за действия указанного лица (см. Ст. 403 ГК РФ и комментарии к ней). Так, в случае нарушения денежного обязательства третьим лицом, которому было поручено исполнение этого обязательства, проценты, предусмотренные ст. 395 ГК РФ, взыскиваются не с этого лица, а с должника по тем же основаниям, что и за собственные нарушения (п.9 Постановления Верховного Суда и Высшего Арбитражного Суда N 13/14).

Поскольку третье лицо не вступает в правоотношения с кредитором, оно не приобретает никаких требований к кредитору даже в случае исчезновения основания для наложения (например, при расторжении договора третьего лица с кредитором). должник, на основании которого произведено взыскание). В такой ситуации третье лицо не вправе требовать от кредитора возврата исполненного, но может предъявить требование о возврате неоправданно сохраненного имущества от должника (п.13 письма ВАС Н. 49).

6. Должник имеет право поручить третьему лицу исполнение не только договорных, но и иных, в частности деликтных или условных, обязательств.

7. Когда исполнение возложено на третью сторону, надлежащее исполнение последней прекращает обязательство (см. Статью 408 Гражданского кодекса и комментарии к ней).

8. Третье лицо может исполнить обязательство за должника и при отсутствии его возложения по собственной инициативе.По смыслу пункта 2 комментируемой статьи в таком случае третье лицо должно получить согласие должника на такое исполнение. Согласие является односторонней сделкой должника и порождает юридические последствия с момента восприятия воли третьей стороной. Последствия, аналогичные согласию, также возникают при последующем одобрении исполнения третьей стороной должником. Поскольку законом не предусмотрены особые правила относительно формы такого согласия (одобрения) в силу положений п. 1 ст.159 ГК РФ (см. Комм. К нему), это может быть совершено устно, в том числе посредством неявных действий.

9. Последствия для должника исполнения, совершенного третьим лицом по собственной инициативе, регулируются правилами гл. 50 ГК «Действия в чужом интересе без заказа».

При отсутствии условий, указанных в ст. 980 ГК РФ (например, если третье лицо не было лишено возможности добиваться согласия или действия третьего лица были исключительно с целью возникновения долга должника перед ним или снижения деловой репутации последнего) , исполнение третьей стороной ведет к неоправданному обогащению должника.Однако возврат такого неосновательного обогащения должен быть исключен в силу п. 4 ст. 1109 ГК. Кроме того, должник, которому таким исполнением был причинен имущественный или моральный ущерб, вправе требовать его возмещения (подробнее см .: Сарбаш С. В. Исполнение договорного обязательства. С. 140).

10. В качестве исключения п. 2 комментируемой статьи предусматривает возможность исполнения обязательства третьим лицом даже при отсутствии согласия должника (более того, даже если это запрещено).В качестве основания для такого исполнения комментируемая норма устанавливает опасность потери права третьим лицом на имущество должника в результате требования кредитора на это имущество.

Эта формулировка, позаимствованная, по-видимому, из § 268 ГГУ, не кажется полностью удачной. Это оставляет без реальной защиты другие законные интересы третьей стороны, не подпадающие под указанные условия.

Еще менее успешными являются примеры прав третьих лиц, которые могут быть потеряны, цитируемые в закомментированном правиле — право на аренду и право залога.Взыскание взыскания с имущества собственника по его обязательствам является производным способом приобретения права собственности (см. Ст. 237 ГК РФ и комментарии к ней). Таким образом, в силу свойств, присущих как закону об аренде (статья 617 Гражданского кодекса), так и праву залога (см. Статью 353 Гражданского кодекса и комментарий к ней), эти права не прекратят свое действие, но будут переданы как обременение новому собственнику (иное мнение см .: Сарбаш С.В. Исполнение договорного обязательства, п.144). Только в случае продажи заложенного имущества на публичных торгах (подпункт 4 пункта 1 статьи 352 ГК РФ) право залога прекращается. Соответственно, прокомментированное правило защищает только интересы последующих залогодержателей при обращении взыскания на предмет залога и его продаже первым залогодержателем.

11. В виде исключения из общего правила ст. 408 ГК РФ (см. Комментарий к нему) надлежащее исполнение третьей стороной в случаях, указанных в пункте 2 комментируемой статьи, не влечет за собой прекращение обязательства должника, а передачу прав кредитора по этому обязательство перед третьим лицом.

Данная ситуация является частным случаем перехода прав кредитора к другому лицу в силу закона (см. Ст. 387 ГК РФ и комментарии к ней). Соответственно, положения пунктов 2, 3 ст. 382, арт. Изобразительное искусство. 383 — 386, 388, 412 Гражданский кодекс.

Судебная практика по статье 313 ГК РФ

Определение Верховного Суда Российской Федерации от 15.01.2018 N 305-ES17-3836 (3) по делу N A41-74729 / 2015

Удовлетворение ходатайства компании «Dimension-Market» о процессуальной замене Компания «Эквивалент» Арбитражный суд Московской области руководствовался статьей 48 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации, статьями и Гражданским кодексом Российской Федерации и исходил из того, что в рассматриваемом деле исполнение Обязательство должника со стороны третьего лица по внесению денег на депозит нотариуса было законным и влекло за собой переход требования к лицу, исполнившему обязательство.

Определение Верховного Суда РФ от 16 января 2018 г. N 305-ES17-20328 по делу N A40-155058 / 2016
В своих выводах суды руководствовались положениями статьи 48 Арбитражного процессуального кодекса. Российской Федерации, а также статьи ,,, Гражданского кодекса Российской Федерации. Выводы судов соответствуют нормам права, нет оснований пересматривать эти выводы.
Нарушений норм материального и (или) процессуального права, которые повлияли бы на исход судебного разбирательства, по основаниям кассационной жалобы не установлено.

Определение Верховного Суда РФ от 05.02.2018 N 306-ES18-10 по делу N A57-30945 / 2016
При удовлетворении иска суды руководствовались статьями ,,, Гражданского кодекса Российской Федерации. Российская Федерация, статьи 155, 161 и 164 Жилищного кодекса Российской Федерации, Правила предоставления коммунальных услуг собственникам и пользователям помещений в многоквартирных домах и жилых домах, утвержденные постановлением Правительства Российской Федерации от 06.05.2011. N, положения статьи 13 Федерального закона от 23.11.2009 N 261-ФЗ «Об энергосбережении и повышении энергоэффективности и о внесении изменений в отдельные законодательные акты Российской Федерации», а также после изучения и оценки представленных по делу доказательств по правилам статьи 71 Арбитражного процессуального кодекса. Российской Федерации, признал требования истца обоснованными и подлежащими удовлетворению.

Определение Верховного Суда РФ от 14.02.2018 N 305-ES17-18572 по делу N A40-212952 / 16
В кассационной жалобе банк выражает несогласие с выводами судов и обращает внимание на то, что Компания «Высота» произвела погашение просроченной задолженности в полном объеме по правилам статьи Гражданского кодекса Российской Федерации, в связи с чем Яхудин Р.У С. не было оснований отказываться от спектакля. Он считает действия общества «Высота» по внесению средств на депозит нотариуса оправданными, поскольку Яхудин Р.С. не предоставил информацию о банковских реквизитах для обработки платежа.

Определение Верховного Суда РФ от 02.02.2018 N 302-ES17-21717 по делу N A19-5909 / 2015
Апелляционный суд, отклонив заявление Перетолчина Е.Г. Заменить истца в размере 9 708 руб.70 копеек, руководствуясь статьями ГК РФ, ст. 48 Арбитражного процессуального кодекса РФ, исходили из того, что Э.Г. Перетолчин не представил в дело какого-либо юридического обоснования исполнения должником обязательств в размере 9 708 руб. 70 коп., Доказательств наличия гражданско-правовой сделки указанного лица с ответчиком судом не установлено.

Определение Верховного Суда Российской Федерации от 26 февраля 2018 г. N 307-ES17-18665 по делу N A56-81591 / 2009
Со ссылкой на пункты 1, 2, 5 статьи, пункт 1 статьи ГК РФ суды указали, что в рассматриваемом деле имело место погашение просроченной задолженности общества перед А.Ю. Куликовой, что в силу вышеуказанных правовых норм приводит к исполнению кредитором третьих лиц. Суды отметили, что Закон о банкротстве не содержит положений, запрещающих погашение требований кредитора третьим лицом. Отмечается, что свидетельств злоупотребления правом со стороны компании или третьих лиц нет.

Определение Верховного Суда РФ от 02.03.2018 N 307-ES17-19861 по делу N A56-40013 / 2016
Оценив доказательства по делу в соответствии со статьей 71 АПК РФ, суд Первая инстанция, исходя из положений соглашения, руководствуясь статьями 10 Гражданского кодекса Российской Федерации, исходила из присутствия в действиях Попова Д.Файл. Признаки злоупотребления законом, признавая, что выплата долга обществу при отсутствии каких-либо экономических и разумных оснований свидетельствует о намерении Попова Д.В. вступить в дело о банкротстве с целью получения контроля над процедурой.

Определение Верховного Суда РФ от 28 февраля 2018 г. N 305-ES18-70 по делу N A41-27065 / 2017
Об отказе ООО «Сети Плюс» в признании ООО «Ассортмент — Сергиев Посад» неплатежеспособным (банкротом) по упрощенной процедуре банкротства ликвидируемого должника и оставления заявления без рассмотрения, суды первой и апелляционной инстанций, оценивая представленные доказательства в соответствии с положениями статьи 71 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации Федерации, руководствовались статьями 2, 4, 42 и 48 Федерального закона от 26.10.2002 N 127-ФЗ 354, и исходя из доказательства наличия задолженности, а также обязательства управляющей организации по ее выплате, срок исковой давности не пропущен.

Определение судебной коллегии по гражданским делам Верховного Суда Российской Федерации от 20.03.2018 N 127-KG18-1
Согласно пункту 5 статьи Гражданского кодекса Российской Федерации, при отсутствии По такому соглашению права кредитора переходят к третьему лицу, исполнившему обязательство должника в соответствии со статьей Гражданского кодекса Российской Федерации.При этом согласно пункту 3 статьи Гражданского кодекса Российской Федерации, если должник не был письменно уведомлен о переходе прав кредитора к другому лицу, новый кредитор несет риск неблагоприятных для него последствий. . Обязательство должника прекращается его исполнением перед первоначальным кредитором до получения уведомления о передаче прав другому лицу.
1. Кредитор обязан принять исполнение, предложенное должнику третьим лицом, если исполнение обязательства поручается должником указанному третьему лицу.
2. Если должник не налагал исполнение обязательства на третью сторону, кредитор обязан принять исполнение, предложенное должнику такой третьей стороной в следующих случаях:
1) просрочка исполнения должником денежного обязательства;
2) такое третье лицо рискует утратить свое право на имущество должника в результате обращения взыскания на это имущество.
3. Кредитор не обязан принимать исполнение, предложенное должнику третьим лицом, если из закона, иных правовых актов, условий обязательства или его сущности следует, что должник обязан исполнить обязательство лично.
4. В случаях, когда в соответствии с настоящей статьей допускается исполнение обязательства третьим лицом, оно вправе исполнить обязательство также путем уплаты долга в депозит нотариуса или проведения зачета соблюдение правил, установленных настоящим Кодексом для должника.
5. Права кредитора по обязательству в соответствии со статьей 387 настоящего Кодекса переходят к третьему лицу, исполнившему обязательство должника.Если права кредитора по обязательству частично перешли к третьей стороне, они не могут быть использованы им в ущерб кредитору, в частности, такие права не имеют преимуществ, когда они удовлетворяются за счет обеспечения. обязательства или когда у должника недостаточно средств для полного удовлетворения требования.
6. Если третье лицо исполнило обязательство должника, не являющееся денежным, оно несет установленную для этого обязательства ответственность перед кредитором за недостатки в исполнении вместо должника.
Комментарий к статье 313 ГК РФ
По общему правилу исполнение должно осуществляться должником — стороной обязательства. Однако в большинстве случаев кредитору безразлично, кто предоставит ему соответствующую имущественную выгоду, поскольку это не приводит к изменению субъектов обязательства. Учитывая это, комментируемая статья обеспечивает возможность исполнения обязательства за должника третьим лицом.
2. Исполнение может быть осуществлено третьим лицом, если должник поручит ему исполнение (п. 1 комментируемой статьи). Правовой основой для передачи исполнения обычно является договор последнего с третьей стороной. Более того, природа такого соглашения не имеет значения. Выполняя исполнение перед кредитором за должника, третье лицо может действовать во исполнение своего собственного обязательства перед должником по ранее заключенному между ними контракту (например, по контракту на поставку с условием отгрузки).Аналогичным образом, посредством такого исполнения третьей стороной может произойти само заключение соглашения с должником (например, реального договора пожертвования или займа) (подробнее см .: Договорное и обязательное право (общая часть): постатейно -статический комментарий к статьям 307–453 ГК РФ, стр. 102–104 (авторы комментария — Сарбаш С.В., Карапетов А.Г.)).
Должник имеет право навязать третьему лицу исполнение не только договорного, но и другого, в частности деликтного или условного обязательства.
3. Кредитор не обязан проверять наличие уступки, на основании которой третье лицо исполняет обязательство за должника, и не несет риска отсутствия такой уступки (например, в связи с недействительность договора должника с третьим лицом). Грант, полученный добросовестным кредитором от третьей стороны в качестве исполнения, не может быть востребован от кредитора как неосновательное обогащение. Эти правила последовательно применялись давно. Судебная практика по денежным обязательствам (см. п.12 Письма ВАС РФ от 21 мая 2004 г.).49; пункт 14 Письма Высшего Арбитражного Суда № 147; постановление Президиума ВАС РФ от 15.07.2014 № 3856/14; п.20 Постановления Пленума Высшего Арбитражного Суда № 54). Аналогичное решение следует принять для неденежных вкладов.
4. Пункт 2 комментируемой статьи предусматривает возможность исполнения обязательства третьим лицом даже при отсутствии наложения со стороны должника (более того, даже в случае его несогласия или запрета).
Одним из оснований для такого исполнения, закрепленным в предыдущей редакции комментируемой статьи, является опасность потери права третьим лицом на имущество должника в результате обращения кредитора взыскания на это имущество (подпункт 2 пункта 2 прокомментированной статьи).
Эта формулировка кажется не совсем удачной. Это крайне казуистично, в результате чего буквальный текст комментария к норме охватывает отдельные ситуации и, наоборот, оставляет без реальной защиты другие законные интересы третьей стороны, не подпадающие под указанные условия.В связи с этим его широкое толкование и распространение положений подп. 2 шт. 2 комментария ст. для всех случаев наличия охраняемого законом интереса третьего лица (см .: Договорно-обязательственное право (общая часть): постатейный комментарий к статьям 307-453 Гражданского кодекса Российской Федерации. С. 107 (авторы комментариев — С.В. Сарбаш и А.Г. Карапетов).
5. С 01.06.2015 список случаев, когда третье лицо может исполнить обязательство должника по собственной инициативе (при отсутствии согласия должника и даже если это запрещено), расширен за счет ситуация, когда должник просрочен по уплате денежной задолженности (подпункт 1 пункта 2 комментируемой статьи).
К сожалению, эти правила не ограничиваются необходимостью наличия законных интересов третьих лиц. Они создают юридическую возможность произвольного вмешательства в интересы кредитора, позволяя фактически принудительно «выкупить» у него просроченные денежные требования (поскольку в силу пункта 4 комментария последствия такого исполнения будут передача таких требований третьему лицу в порядке суброгации).
6. Третье лицо имеет право исполнить любое просроченное денежное обязательство, в том числе то, которое неразрывно связано с личностью кредитора (например, алименты — см. Пункт 20 Постановления Пленума Верховного Суда РФ №54).
Однако применение правил пп. 1 пункт 2 комментируемой статьи может быть заблокирован специальным законодательством. Так, поскольку Закон о банкротстве (статьи 71.1, 85.1, 112.1, 113, 125) устанавливает особые правила исполнения обязательств должника его учредителями (участниками), собственником имущества должника — унитарным предприятием или третьим лицом после введения первой процедуры банкротства допускается только с соблюдением порядка, предусмотренного законодательством о банкротстве (п.21 Постановления Пленума Верховного Суда РФ от 21 декабря 2004 г.54).
7. В случаях, указанных в пунктах 1 и 2 комментируемой статьи, надлежащим субъектом исполнения является третье лицо, исполняющее обязательство должника. Как следствие, такое исполнение должно быть принято кредитором. В противном случае кредитор будет считаться просрочившим акцепт исполнения (см. Пункт 2 статьи 406 Гражданского кодекса и комментарий к нему).
Следует иметь в виду, что правила пунктов 1 и 2 комментариев.Изобразительное искусство. не отменяют общие требования к надлежащему исполнению (см. статьи 311, 314-317 Гражданского кодекса и комментарии к ним). Соответственно, кредитор обязан принять исполнение, предложенное третьей стороной, и считается просроченным, если оно не принято, только тогда, когда это целесообразно с точки зрения предмета, периода времени, места, а также метода исполнения.
8. Освобождение от этого правила — обязанность лично исполнить обязательство должника — может быть установлено законом (см., Например, пункт 1 статьи 770, статья 780 Гражданского кодекса) или следовать из условий обязательство или его сущность.Итак, специфика предмета предполагает личное выполнение обязательства по созданию произведения литературы, науки или искусства. В такой ситуации кредитор вправе не принять исполнение, предложенное третьим лицом (п. 3 комментария ст.), Даже при наличии обстоятельств, указанных в пп. 1 и 2 комментария ст. (Пункт 20 Постановления Пленума ВС № 54).
Комментарий к пункту 3 Ст. направленный на защиту интересов кредитора.При этом законодатель не возлагает на кредитора обязанность воспользоваться предоставленным ему вариантом отказа. Кредитор может самостоятельно решить, отвечает ли предложение третьего лица в нарушение установленных запретов его интересам. Принятие кредитором такого исполнения придает ему надлежащий характер и, как следствие, прекращает обязательство.
9. Когда исполнение возложено на третью сторону, надлежащее исполнение последней прекращает обязательство (см. Ст.408 ГК РФ и комментарии к нему).
Последствия такого исполнения в отношениях между третьим лицом и должником регулируются соглашением между ними (п. 21 Постановления Пленума № 54). Рецепты стр. 5 комментариев. Изобразительное искусство. к случаям, когда исполнение обязательства было поручено должником третьему лицу, не применяются.
10. В виде исключения из общего правила ст. 408 ГК РФ (см. Комментарии к нему), надлежащее исполнение третьим лицом в случаях, указанных в пункте 2 комментария.Ст., Влечет за собой не прекращение обязательства должника, а передачу прав кредитора по этому обязательству третьему лицу (п. 5 комментария).
Данная ситуация является частным случаем суброгации — передачи прав кредитора другому лицу в силу закона (см. Ст. 387 Гражданского кодекса и комментарии к ней). Соответственно, положения п. 3 ст. 382, арт. 383–386, 388, 412 Гражданский кодекс. Таким образом, если должник не был письменно уведомлен о переходе прав кредитора к другому лицу, новый кредитор несет риск возникших для него неблагоприятных последствий.Обязательство должника прекращается исполнением его перед первоначальным кредитором до получения уведомления о переходе прав к другому лицу (п. 21 Постановления Пленума Верховного Суда № 54).
Правила стр. 5 комментариев. Изобразительное искусство. о суброгации применяются, если иное не предусмотрено законом. Например, если третье лицо по собственной инициативе исполняет просроченную денежную задолженность должника по обязательству, неразрывно связанному с лицом, последнее прекращается, поскольку передача такого требования другому лицу невозможна из-за требования ст.383 ГК.
Применение правил п. 5 комментариев. Изобразительное искусство. о суброгации может быть основано на ст. 10 ГК РФ блокируется судом (переход прав кредитора к третьему лицу может быть признан недействительным), если установлено, что при исполнении обязательства перед должником третье лицо действовало недобросовестно, исключительно с умысел причинения вреда кредитору или должнику по данному обязательству (п.21 Постановления Пленума № 54; определения ВС от 16 июня 2016 г.302-ES16-2049; от 15 августа 2016 г. № 308-ES16-4658). В такой ситуации, по мнению Верховного суда, третье лицо может взыскать с кредитора исполнение по правилам о неосновательном обогащении (п.20 Постановления Пленума Верховного Суда № 54).
11. В силу пункта 4 комментария. Изобразительное искусство. Вышеупомянутые последствия также возникают в случае выполнения третьим лицом обязанности нотариуса (статья 327 Гражданского кодекса).Следует иметь в виду, что комментарий. Изобразительное искусство. не устанавливает особых правил, размещаемых третьими лицами. Последний может (должен) использовать данный суррогат исполнения только при наличии обстоятельств, указанных в пп. 1 и 1.1 ст. 327 ГК РФ, соблюдение всех установленных ст. 327 ГК (см. Комментарий к нему) рецептов.
Аналогично, стр. 4 комментария. Изобразительное искусство. распространяет вышеупомянутые последствия на случай, когда третья сторона компенсирует свое однородное требование к кредитору против требования последнего к должнику.Этот зачет является исключением из общих правил о проверке читаемости зачитываемых требований (ст. 410 Гражданского кодекса), но во всех других отношениях должен соответствовать установленным ст. 410-412 CC условия.
Если есть наложение, такой залог или зачет, сделанный третьей стороной, прекращается. В ситуации, когда залог или зачет производится третьим лицом в случаях, указанных в пункте 2 комментария. Ст., Существует эффект суброгации — передача прав кредитора по данному обязательству третьему лицу (п.5 комментариев.Изобразительное искусство.).
12. Комментарий по п. 5. Изобразительное искусство. также регулирует вопрос о возможной конкуренции между требованиями кредитора и требованиями третьего лица, полученными им в порядке суброгации, с частичным исполнением обязательства должником.
Воплощая принцип, еще известный в римском праве — nemo subrogat contra se (никто не допускает вступления в свои права против своих интересов), — комментарий. норма устанавливает, что права кредитора, частично переданные третьему лицу, не могут быть использованы таким третьим лицом в ущерб кредитору.Если у должника недостаточно средств для полного удовлетворения требования, требования первоначального кредитора должны быть сначала удовлетворены и только в оставшейся части суброгации (третье лицо). Аналогичным образом, при недостаточном обеспечении сначала урегулируются требования первоначального кредитора, а только затем требования третьей стороны.
Подобное решение, хотя и соответствует традициям гражданского права и является системным для современного российского законодательства (см., Например, пункт 4 статьи 364 ГК РФ и комментарии к нему), кажется спорным.Нет оснований отдавать предпочтение первоначальному кредитору, который был наделен правом отказаться от частичной выплаты и, таким образом, не мог допустить соответствующего конфликта своих интересов с интересами третьей стороны (см .: Павлов А.А., Заброцкая А.М. Новые принципы регулирования солидарных обязательств // Вестник ВАС. 2011. № 9. С. 85).
13. Когда исполнение обязательства возлагается на третье лицо, должник не выходит из правоотношения.Такое наложение исполнения отличается от перевода долга (см. Ст. 391 Гражданского кодекса и комментарий к нему), результатом которого является замена должника. В результате должник продолжает нести ответственность перед кредитором, и кредитор не имеет права предъявлять претензии третьему лицу.
Должник, доверивший исполнение третьему лицу, несет прямую ответственность перед кредитором за действия указанного лица (см. Ст. 403 ГК РФ и комментарии к ней).Так, в случае нарушения денежного обязательства третьим лицом, которому было поручено исполнение этого обязательства, проценты, предусмотренные ст. 395 ГК РФ, взыскиваются не с этого лица, а с должника по тем же основаниям, что и за собственные нарушения (п. 46 Постановления Пленума Верховного Суда № 7).
Так как по правилам ст. 403 ГК РФ являются особыми по отношению к требованиям пункта 6 комментариев. Изобразительное искусство., последние не применяются, когда должник возлагает на третью сторону исполнение неденежного обязательства. За неисполнение или ненадлежащее исполнение третьим лицом кредитору в силу ст. 403 ГК РФ должник несет ответственность, если иное не предусмотрено законом (п. 22 Постановления Пленума Верховного Суда № 54).
14. С учетом изложенного, правила пункта 6 комментария. Изобразительное искусство. об ответственности третьего лица за недостатки предоставленного морального исполнения может применяться только в том случае, если третье лицо осуществляет такое исполнение по своему усмотрению (например, в случае, указанном в подпункте 2 пункта 2 комментария статья).Впрочем, даже в той ситуации, рецепт пункта 6 комментариев. Изобразительное искусство. выглядит спорно, поскольку на кредитора как ответственного лица накладывается субъект, которого он не выбирал в качестве должника, и поэтому он не брал на себя риски, связанные, например, с его неплатежеспособностью. Для получения дополнительной информации о возможных вариантах решения этой проблемы см .: Договорное и обязательственное право (общая часть): постатейный комментарий к Ст. 307–453 ГК РФ. Стр.114–115 (авторы комментария — С. В. Сарбаш, А. Г. Карапетов)).
Судебная практика по ст. 313 ГК РФ
Позиции вышестоящих судов в соответствии со статьей 313 Гражданского кодекса.
Верховный Суд Российской Федерации
Определение от 4 октября 2019 года по делу № А02-2271 / 2016
Определение от 3 октября 2019 г. по делу № А10-5362 / 2017
Определение от 01 октября 2019 г. по делу №А07-2379 / 2019
Определение от 01.10.2019 по делу № А27-23002 / 2018
Определение от 20 сентября 2019 г. по делу № А65-15281 / 2017
Определение от 28 августа 2019 г. по делу № А40-122605 / 2017
Определение от 19 августа 2019 года по делу № А40-213378 / 2018
Определение от 5 августа 2019 г. по делу № A70-9400 / 2018
Определение от 18.07.2019 по делу № А40-74771 / 2018
Определение от 12 июля 2019 г.A02-999 / 2018
Полный текст ст. 313 ГК РФ с комментариями. Новая действующая редакция с дополнениями на 2020 год. Юридические консультации по статье 313 Гражданского кодекса Российской Федерации.
1. Кредитор обязан принять исполнение, предложенное должнику третьим лицом, если исполнение обязательства поручается должником указанному третьему лицу.
2. Если должник не возложил исполнение обязательства на третье лицо, кредитор обязан принять исполнение, предложенное за должника таким третьим лицом в следующих случаях:
1) должник задерживает исполнение денежного обязательства;
2) такое третье лицо рискует утратить свое право на имущество должника в результате обращения взыскания на это имущество.
3. Кредитор не обязан принимать исполнение, предложенное должнику третьим лицом, если из закона, иных правовых актов, условий обязательства или его сущности следует, что должник обязан исполнить обязательство лично.
4. В случаях, когда в соответствии с настоящей статьей допускается исполнение обязательства третьим лицом, оно вправе исполнить обязательство также путем уплаты долга в депозит нотариуса или проведения зачета соблюдение правил, установленных настоящим Кодексом для должника.
5. Права кредитора по обязательству в соответствии со статьей 387 настоящего Кодекса переходят к третьему лицу, исполнившему обязательство должника. Если права кредитора по обязательству частично перешли к третьей стороне, они не могут быть использованы им в ущерб кредитору, в частности, такие права не имеют преимуществ, когда они удовлетворяются за счет обеспечения. обязательства или когда у должника недостаточно средств для полного удовлетворения требования.
6. Если третье лицо исполнило обязательство должника, не являющееся денежным, оно несет установленную для этого обязательства ответственность перед кредитором за недостатки в исполнении вместо должника.
(В редакции Федерального закона от 1 июня 2015 г. от 8 марта 2015 г. N 42-ФЗ.
Комментарий к статье 313 ГК РФ
1. В интересах участников гражданского оборота в пункте 1 комментируемой статьи закреплена презумпция в пользу возможности наложения должником взыскания на третье лицо и установлены основания, позволяющие это презумпция оспаривания.
Ссылка на «существо обязательства» означает, что допустимость передачи исполнения зависит от характера действий, составляющих его предмет. В частности, при отсутствии прямого указания в обязательстве должник не может передать исполнение третьему лицу в случаях, когда обязательство носит творческий характер (например, договор с художником, режиссером, писателем, ученым, так далее.).
Для ряда случаев специальные правила устанавливают презумпцию, прямо противоположную той, которая закреплена в прокомментированной статье.Итак, в силу п.1 ст. 770 ГК РФ научные исследования по договору на выполнение научно-исследовательских работ должны проводиться стороной лично, если заказчик не дал согласия на привлечение к исполнению третьих лиц.
2. Возложение обязательства на третье лицо широко распространено в гражданском обороте, особенно в отношении предпринимательской деятельности и, прежде всего, в субдоговорных отношениях. Чаще, чем другой пункт 1 комментируемой статьи применяется при субподряде (от имени подрядчика субподрядчик передает выполненное напрямую заказчику), в случае субаренды (субарендатор от имени арендатора передает аренда напрямую арендодателю).
3. Пункт 2 комментируемой статьи предусматривает защиту интересов третьего лица, в том числе в случаях, когда этот интерес не совпадает с интересами самого должника.
Императивная норма, закрепленная в пункте 2, создает определенные обязательства между третьей стороной и кредитором. Указанное обязательство, вытекающее из закона, имеет свое содержание, адресованное кредитору, имеющему право третьего лица требовать от кредитора принять предлагаемое исполнение.Совершение третьим лицом соответствующих действий влечет прекращение этого обязательства, как если бы эти действия были совершены самим должником.
4. Судебная практика:
— Постановление Пленума Высшего Арбитражного Суда РФ от 12.07.2012 N 42;
— информационное письмо Президиума ВАС РФ от 13.09.2011 N 147;
— информационное письмо Президиума ВАС РФ от 29 декабря 2001 г. N 65;
— определение Второго арбитражного апелляционного суда от 07.02.2014 по делу № A82-8769 / 2013.
Консультации и комментарии юристов по статье 313 ГК РФ
Если у вас остались вопросы по статье 313 ГК РФ и вы хотите быть уверены в актуальности предоставленной информации, то вам можете проконсультироваться у юристов нашего сайта.
Вы можете задать вопрос по телефону или на сайте. Первичные консультации проводятся бесплатно с 9:00 до 21:00 ежедневно по московскому времени.Вопросы, поступившие с 21:00 до 9:00, будут обработаны на следующий день.
На практике довольно часто должники поручают исполнение своих обязательств третьим лицам. Закон не запрещает организациям совершать такие действия. При этом основное обязательство не меняется, и перевод долга (замена исполнителя) не осуществляется. Основные положения, касающиеся возложения исполнения обязательств на третьих лиц, закреплены в ст. 313 ГК РФ.Рассмотрим норму подробнее.
Общие сведения
п. 1 ст. 313 ГК РФ устанавливает, что кредитор обязан принять исполнение обязательства от третьего лица, если оно возложено на него должником.
В этом случае обязанное лицо в любом случае несет ответственность за неправомерные действия третьего лица. Между третьей (третьей стороной) стороной и кредитором не возникает взаимных прав и обязательств.
IN юриспруденции по ст. 313 ГК РФ часто рассматриваются дела о зачете встречных требований должника к третьему лицу. Например, согласно п. 3 статьи 706 ГК РФ, генеральный подрядчик несет ответственность за последствия ненадлежащего выполнения или невыполнения задания субподрядчиком, а перед ним, в свою очередь, за нарушения, допущенные заказчиком. . Если иное не предусмотрено договором или законом, субподрядчик и заказчик не могут предъявлять друг к другу претензии, связанные с невыполнением условий договоров, заключенных ими с генеральным подрядчиком.
Положение, закрепленное п. 1 ст. 313 ГК РФ, не может рассматриваться как возможность получения кредитором неосновательного обогащения, поскольку имеет иной правовой характер.
Нюансы
Правила, предусмотренные ст. 313 ГК РФ, нельзя считать полностью новыми для внутреннего законодательства … Аналогичные положения, за исключением закрепленных в абзаце втором, присутствовали в ст.171 Кодекса 1964 года. Согласно ранее действовавшему положению, погашение договорного обязательства может быть частично или полностью передано третьей стороне, если соответствующая возможность предусмотрена правилами или третья сторона связана с одним из стороны сделки по договору или в административном подчинении.
Если в рамках правоотношений законодательством или соглашением не установлено, что гражданин должен лично исполнять обязательство, кредитор должен принять исполнение от третьего лица.Изобразительное искусство. 313 ГК РФ, в отличие от ранее действовавшей нормы, не ограничивает возмещение долга договорными правоотношениями.
Сфера действия нормы
Положения ст. 313 ГК РФ применяются только к гражданско-правовым отношениям … Порядок возложения к исполнению обязанностей, вытекающих из налоговых, административных и иных общественных отношений, закреплен в нормах соответствующей правовой отрасли.
Этот вывод подтверждается положениями ст. 2 Кодекса. Согласно абзацу третьему настоящей статьи имущественные отношения, основанные на административной или иной властной подчиненности одного участника другому, в том числе налоговые и иные финансовые отношения, являются гражданско-правовыми и не применяются, если иное не предусмотрено законом.
Требования к исполнителю
При рассмотрении споров многое зависит, в том числе от дополнительных требований, предъявляемых законодательством к должнику.Например, у исполнителя должна быть лицензия.
В одном из споров инстанция руководствовалась правилами, разрешающими расчеты в рублях по экспортным операциям с использованием института возложения погашения обязательства покупателем-нерезидентом на резидента — третье лицо. Между тем, подобные операции разрешено совершать только со счетов категории «Т» нерезидентов, имеющих право заниматься предпринимательской деятельностью на основании учредительной документации, регистрационных документов, разрешений, выданных российскими компетентными органами, а также в качестве иных документов, подтверждающих правоспособность хозяйствующих субъектов.
Проведение расчетов в рублях за экспортируемую продукцию на территории Российской Федерации покупателем-нерезидентом в обход установленных требований является нарушением требований законодательства о валютном контроле и регулировании.
Обязанность принять исполненная
Установлена абзацем вторым ст. 313 ГК РФ. Согласно положениям, кредитор должен принять от третьего лица предложенное им исполнение, если оно не было поручено ему должником в следующих случаях:
Допущения о просрочке выплаты долга.
Третье лицо может потерять право на имущество, принадлежащее должнику, в результате обращения взыскания на стоимость.
Это правило не распространяется на случаи, когда обязанность должника лично выплатить долг не вытекает из содержания правоотношений или закона.
Важный момент
Закон не требует согласия должника на проведение расчетов третьей стороной. Если последний не знает об возражениях должника, которые, например, могут признать основание возникновения обязательства недействительным или полностью прекратить его, исполненные могут быть возвращены кредитором позже как неоправданное обогащение.
Вексель правоотношения
Одним из способов передачи материальных ценностей ООО, его участников может считаться договор дарения. Данная сделка регулируется положениями главы 32 Гражданского кодекса.
Как правило, дарение подразумевает передачу индивидуально определенных объектов. Предоставление предметов с общими характеристиками имеет ряд особенностей. Например, бездокументарные долевые ценные бумаги, «пакет» векселей могут быть переданы в дар.Такие правоотношения регулируются положениями ст. 313 ГК РФ. Передачу векселя целесообразно осуществлять с указанием индивидуализирующих признаков (номера, серии, список индоссаментов и т. Д.).
Передача прав третьему лицу
Они указаны в п. 5 ст. 313 ГК РФ. Решения судов, рассматривающих споры, основываются, в том числе, на положениях ст. 387. Если в соответствии с этим положением права кредитора переходят к третьей стороне, то они не могут быть использованы в ущерб первоначальному кредитору.Таким образом, эти юридические возможности не имеют преимущества, когда требования удовлетворяются обеспечением или когда должник не имеет достаточных средств для полного погашения всех обязательств.
Анализ Art. 313 ГК РФ с комментариями юристов, следует отметить, что специалисты обращают внимание на то, что при переходе прав кредитора к третьему лицу, исполнившему обязательство, должник вправе направить у него несогласие, о котором он мог заявить первоначальному кредитору.
Кроме того, в рамках данных правоотношений применяются положения статьи 412 Кодекса. В соответствии с ними должник может зачесть встречное требование первому кредитору против требований третьего лица. Выполнение этого положения зависит от ряда условий. Прежде всего, вы можете зачесть требование, возникшее на основании, которое имело место в момент получения должником уведомления об уступке. В этом случае срок предъявления требования должен наступить до получения уведомления, должен определяться моментом требования или не указываться в договоре.В такой ситуации при ненадлежащем исполнении обязательства кредитор может потребовать от должника его надлежащего исполнения.
Исключения
Как упоминалось выше, исполнение третьим лицом не принимается, если обязательство должно выполняться лично должником. Это правило, в частности, распространяется на случаи выполнения условий договора о создании продукта интеллектуального труда.
В порядке, установленном пунктом 1770 статьи ГК РФ, исполнитель обязан проводить научно-исследовательские работы лично.Он может привлекать третье лицо только с согласия заказчика.
Другой случай предусмотрен статьей 780 Кодекса. Как установлено нормой, исполнение условий договоров об оказании платных услуг осуществляется исполнителем лично. Погашение обязательства по оплате может быть возложено на стороннюю организацию, если иное не предусмотрено законодательством, другими нормативными актами или договором.
Заключение
По мнению ряда экспертов, необходимость навязывания исполнения обязательства необоснованно нарушает усмотрение участников правоотношений, что, в свою очередь, не соответствует принципам гражданского права.Более того, такая ситуация влечет за собой нарушение прав первоначального кредитора. На практике этому человеку часто приходится выяснять, доверил ли должник исполнение третьему лицу или нет. Это возможно не во всех случаях. Учитывая такие трудности, некоторые эксперты предлагают убрать формулировку о привлечении к исполнению из пункта 1 313 статьи Кодекса.
Влияние мутации missense R84Q на свойства фермента пирролин-5-карбоксилатсинтазы человека, анализ in-silico
Тип документа: Оригинальная статья
Авторы
¹ Кафедра биологии, Университет Паяме Нур, Авадж, Иран
² Кафедра биологии, факультет естественных наук, Университет Лорестан, Хорамабад, Иран
³ Департамент промышленной и экологической биотехнологии, Национальный институт генной инженерии и биотехнологии (NIGEB), Тегеран, Иран
⁴ Исследовательский центр прикладной микробиологии, Университет медицинских наук Бакияталла, Тегеран, Иран
⁵ Департамент биотехнологии растений, Национальный институт генной инженерии и биотехнологии (NIGEB), Тегеран, Иран
Аннотация
Фермент ∆- (1) -пирролин-5-карбоксилатсинтаза (P5CS) млекопитающих катализирует сопряженное фосфорилирование и восстановительное превращение глутамата в ∆- (1) -пирролин-5-карбоксилат (P5C), что является критическим этапом в пролине , биосинтез орнитина, цитруллина и аргинина.У растений и млекопитающих P5CS состоит из двух отдельных ферментных доменов: N-концевой γ-глутамилкиназы (γ-GK) и C-концевой γ-глутамилфосфатредуктазы (γ-GPR). Гипераммонемия описывается как новое врожденное заболевание с рядом клинических симптомов, связанных со сниженным синтезом пролина, орнитина, цитрулина и аргинина. Миссенс-мутация R84Q, которая изменяет консервативный остаток в домене γ-GK, ответственна за это нарушение. В этом исследовании с использованием подходов in-silico в качестве нового метода биоинформатики был проведен анализ последовательности, и была предсказана третичная структура домена γ-GK человеческого P5CS, который включает миссенс-мутацию R84Q, а также влияние мутации на структурные и функциональные характеристики. проанализированы особенности фермента P5CS.Наш анализ показал, что это замещение влияет на доступность молекулярной поверхности и полную энергию моделируемой структуры. Мы пришли к выводу, что эта мутация приводит к снижению активности фермента P5CS и нарушению синтеза этих аминокислот.

Статья 327 ГК РФ с комментариями — Исполнение обязательства внесением долга в депозит

Комментарий к статье 327 Гражданского Кодекса РФ

Ст. 327 ГК РФ.

Статья 327 ГК РФ. Исполнение обязательства внесением долга в депозит

Оглавление

Ч.1 статьи 327 ГК РФ

П.1 статьи 327 ГК РФ

П.2 статьи 327 ГК РФ

П.3 статьи 327 ГК РФ

П.4 статьи 327 ГК РФ

Ч.1.1 статьи 327 ГК РФ

Ч.2 статьи 327 ГК РФ

Ч.3 статьи 327 ГК РФ

Ч.4 статьи 327 ГК РФ

Статья 327 ГК РФ Исполнение обязательства внесением долга в депозит

Статья 327 ГК РФ и комментарии к ней

Комментарий к статье 327 ГК РФ

Другой комментарий к статье 327 Гражданского Кодекса РФ

Статья 327. Исполнение обязательства внесением долга в депозит

Комментарий к статье 327 Гражданского Кодекса РФ

Другой комментарий к статье 327 ГК РФ

Исполнение обязательства внесением долга в депозит

Понятие депозита, внесение в него средств в качестве погашения долга

Условия исполнения обязательства внесением долга в депозит

Случаи, при которых имеется возможность по исполнению обязательства посредством вложения материальных средств в депозит

Процедура выполнения обязательства посредством вложения суммы задолженности в депозит

Автор статьи

Кузнецов Федор Николаевич

Вопросы и ответы юристов

Обновленная информация о влиянии на здоровье томатного ликопина

Erica N. Story

Рэйчел Э.Копек

Стивен Дж. Шварц

G. Keith Harris

Abstract

ВВЕДЕНИЕ

ЛИКОПЕН ХИМИЯ

ИСТОЧНИКИ ЛИКОПЕНА, ПОТРЕБЛЕНИЕ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ ДОСТУПНОСТЬ

ПОТЕНЦИАЛЬНАЯ ПОЛЬЗА ЛИКОПЕНА ДЛЯ ЗДОРОВЬЯ

Рак

Сердечно-сосудистые заболевания

Другие болезни

ЛИКОПЕНОИДЫ: ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ ОКСИДАТИВНЫЕ МЕТАБОЛИТЫ ЛИКОПЕНА

ВЫВОДЫ

Благодарности

Глоссарий

ЦИТИРОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА

Обзор испытаний по замещению сурфактанта

Каковы доказанные клинические преимущества ПАВ?

Какое поверхностно-активное вещество наиболее эффективно?

Имеет ли значение метод дозирования и введения поверхностно-активного вещества?

Методика введения

Повторная обработка / несколько доз

Важна ли продолжительность введения ПАВ?

Ранний диабет и аномальное постнатальное развитие островков поджелудочной железы у мышей, лишенных Glut-2

Определение дислексии | SpringerLink

Автоматизированное изучение субклеточных вариаций паттернов точечных белков и генеративная модель их связи с микротрубочками

Abstract

Сведения об авторе

Introduction

Результаты

Зависимость расположения белкового паттерна на микротрубочках

Идентификация точечных подшаблонов и основных видов вариации

Построение классификатора для подшаблонов пунктиров

Аннотации других точечных белков

Сравнение моделей на разные выкройки

Генеративная модель распределения точечных белков

Обсуждение

Материалы и методы

Коллекции изображений

Параметризация микротрубочек и точек

Расчет расстояния между каждой точкой и ближайшей микротрубочкой

Регистрация положения везикул и фона относительно микротрубочек, границ клеток и ядер

Генеративные модели

Классификация изображений

Доступность программного обеспечения

Дополнительная информация

S1 Рис. Качество подобранных распределений для точечных белков.

S2 Рис. Определение порога аннотации.

S4 Рис. Репрезентативные изображения семи паттернов и соответствующего паттерна синтезированного белка в клетках U-2OS.