Ст 137 ТК РФ с комментариями и изменениями на 2020-2021 год
1. Удержания из заработной платы работника могут производиться в случаях, установленных законодательством, т.е. независимо от волеизъявления работодателя, и по его решению. Ст 137 ТК РФ определяет основания удержаний, производимых по решению работодателя для погашения задолженности работника, и содержит исчерпывающий перечень таких оснований.
Надо подчеркнуть, что работодатель вправе, но не обязан производить удержания. Это прямо вытекает из ч. 2 статьи 137 ТК РФ.
2. Основания и правила удержаний из заработной платы работника установлены Трудовым кодексом в соответствии с Конвенцией МОТ N 95. Статья 8 Конвенции предусматривает, что удержания из заработной платы разрешено производить в условиях и в пределах, предписанных национальным законодательством или определенных в коллективных договорах или в решениях арбитражных судов. Трудящиеся должны быть уведомлены об условиях и пределах таких удержаний.
3. От удержаний необходимо отличать взыскание суммы причиненного работником ущерба (см. коммент. к ст. 248).
4. Наряду с удержаниями, осуществляемыми по распоряжению работодателя и имеющими цель погасить задолженность работника, существуют удержания, производимые на основании федеральных законов. Они направлены на выполнение обязанностей работника перед государством или иными лицами. Действующим законодательством установлена возможность удержания из заработной платы налогов с доходов физических лиц, административных штрафов, штрафов в качестве уголовного наказания, определенных сумм (части заработной платы) при отбывании наказания в виде исправительных работ, денежных сумм по решению суда (исполнительному листу).
5. Ст 137 ТК РФ устанавливает порядок и условия удержаний. Во-первых, работодатель должен соблюдать установленный срок — месяц со дня окончания срока, установленного для возвращения аванса, погашения задолженности и т.п. Во-вторых, отсутствие разногласий с работником по поводу оснований и размеров удержаний.
6. Особую трудность на практике вызывает вопрос об определении наличия (отсутствия) счетной ошибки.
Под счетной ошибкой следует понимать ошибку в арифметических действиях при расчете подлежащих выплате сумм, а также иные технические ошибки (опечатки, описки и т.п.). Неправильное применение соответствующих правовых норм счетной ошибкой не является.
7. По решению работодателя могут быть удержаны суммы, излишне выплаченные работнику в качестве гарантийных выплат при невыполнении норм труда или простое. Это возможно в том случае, когда орган по рассмотрению индивидуального трудового спора установит вину работника в невыполнении норм труда или в простое (см. также коммент. к ст. ст. 155, 157).
8. Могут быть удержаны суммы, выплаченные работнику в качестве оплаты отпуска, в случае его увольнения до окончания того рабочего года, за который предоставлен отпуск. Исключение составляют основания увольнения по инициативе работодателя, не связанные с виновным поведением работника (п. п. 1, 2, 4 ч. 1 ст. 81), и увольнение в связи с отказом работника от перевода на другую работу, необходимого ему в соответствии с медицинским заключением, выданным в порядке, установленном федеральными законами и иными нормативными правовыми актами РФ, либо отсутствием у работодателя соответствующей работы (п. 8 ч. 1 ст. 77).
Комментарий к статье 137 ТК РФ. 2016-2019г. ЮрИнспекция
Перечень оснований и размеров удержаний из заработной платы регулируется статьями 137 и 138 Трудового кодекса РФ. В статье 137 Трудового кодекса РФ перечислены удержания, производимые работодателем в свою пользу в счет погашения задолженности перед ним работника: – для возмещения неотработанного аванса, выданного работнику в счет заработной платы; – для погашения неизрасходованного и своевременно не возвращенного аванса, выданного в связи со служебной командировкой или переводом на другую работу в другую местность, а также в других случаях; – для возврата сумм, излишне выплаченных работнику вследствие счетных ошибок, а также сумм, излишне выплаченных работнику в случае признания органом по рассмотрению индивидуальных трудовых споров вины работника в невыполнении норм труда или простое; – при его увольнении до окончания того рабочего года, в счет которого он уже получил ежегодный оплачиваемый отпуск, за неотработанные дни отпуска. Однако при увольнении по основаниям, которые с точки зрения законодателя являются уважительными и которые перечислены в данном пункте, удержание за неотработанные дни отпуска не производится. Перечисленные удержания работодатель вправе произвести, если работник не оспаривает их основания и размера и если не истек месячный срок, установленный для добровольного возвращения сумм. Если хотя бы одно из этих условий не соблюдено, то есть если работник оспаривает удержание или месячный срок истек, то работодатель теряет право на бесспорное взыскание сумм, и оно может быть осуществлено только в судебном порядке. Кроме того, удержания из заработной платы производятся для погашения обязательств работника перед государством (налоги, штрафы) и перед третьими лицами (алименты, выплаты по исполнительным листам) . Но само удержание во всех случаях осуществляет работодатель, поскольку он начисляет и выплачивает заработную плату. В последней части статьи 137 Трудового кодекса РФ установлено общее правило, по которому излишне выплаченная заработная плата взысканию не подлежит. Исключение составляют следующие случаи: – заработная плата излишне выплачена в результате счетной ошибки; – органом по рассмотрению индивидуальных трудовых споров признана вина работника в невыполнении норм труда или простое; – заработная плата была излишне выплачена работнику в связи с его неправомерными действиями, установленными судом. В этих случаях удержание также производится в месячный срок со дня обнаружения факта излишней выплаты. По общему правилу, изложенному в статье 138 Трудового кодекса РФ, удержания из заработной платы, производимые работодателем в силу предоставленных ему прав, не могут превышать 20 процентов от заработной платы, причитающейся работнику (за вычетом НДФЛ) . Другие правила действуют при удержаниях из заработной платы по исполнительным документам. В соответствии с Федеральным законом от 21 июля 1997 г. № 119-ФЗ «Об исполнительном производстве» при исполнении исполнительного документа с должника не может быть удержано более 50 процентов от заработной платы до полного погашения взыскиваемых сумм. При удержании из заработной платы по нескольким исполнительным документам за работником должно быть сохранено 50 процентов заработка. Эти ограничения размера удержаний не применяются при отбытии исправительных работ, взыскании алиментов на несовершеннолетних детей, возмещении вреда, причиненного здоровью, возмещении вреда лицам, понесшим ущерб в результате смерти кормильца, и возмещении за ущерб, причиненный преступлением. В перечисленных случаях размер удержаний не может превышать 70 процентов от заработной платы (ст. 66 Трудового кодекса РФ).когда суд принимает сторону работодателя
Удержания из зарплаты: ограничения удержаний
В Трудовом кодексе установлены предельные размеры сумм, которые можно удержать с работника. Их общий размер при каждой выплате заработной платы не может превышать 20 процентов, а в отдельных случаях (например, при удержании по нескольким исполнительным документам) – 50 процентов (ч. первая, вторая ст. 138 ТК РФ, ч. 2 ст. 99 Федерального закона от 2 октября 2007 г. № 229-ФЗ). Однако иногда размер удержаний из заработной платы может достигать 70 процентов, например, если сотрудник (ч. третья ст. 138 ТК РФ):
- отбывает исправительные работы;
- выплачивает алименты на несовершеннолетних детей;
- возмещает вред, причиненный здоровью другого лица;
- возмещает вред лицам, понесшим ущерб в связи со смертью кормильца;
- возмещает ущерб, причиненный преступлением.
Как выиграть спор о законности удержаний из зарплаты
Споры об удержаниях из зарплаты для возмещения задолженности организации всегда непростые. Работодатель их выигрывает в том случае, если:
- есть законные основания для удержаний из зарплаты;
- сумма удержаний не превысила установленные законом пределы;
- удержание было произведено в установленный срок;
- получено согласие работника (при необходимости).
Кроме того, решения судов зависят от того, по какому основанию была удержана часть зарплаты сотрудника.
Рассмотрим их более подробно.
Удержания в связи со счетной ошибкой. В законе не раскрыто понятие «счетная ошибка», но оно выработалось судебной практикой. Нередко работодатели толкуют его слишком широко и из-за этого проигрывают дела. Верховный Суд РФ разъяснил, что счетной следует считать ошибку, которая была допущена в арифметических действиях, то есть связанных с подсчетом (определение Верховного Суда РФ от 20 января 2012 г. № 59-В11-17). В то время как технические ошибки, в том числе совершенные по вине работодателя, счетными не являются. Аналогичного мнения придерживается большинство нижестоящих судов и Роструд (письмо Роструда от 1 октября 2012 г. № 1286-6-1).
Работодатели выигрывают спор, когда действительно имели место ошибки в подсчетах. Например, бухгалтер при расчете средней зарплаты в математическом действии вместо умножения сделал вычитание, что привело к излишней выплате работнику денежных средств (апелляционное определение Свердловского областного суда от 8 апреля 2015 г. по делу № 33-4782/2015).
В случаях, когда работодатель допустил не счетную, а техническую ошибку, учел неверно периоды и т. д., правильно оцените перспективы спора. Лояльные к компании работники зачастую сами сообщают о том, что им излишне перечислили деньги, и выражают готовность вернуть средства добровольно.
Удержания из зарплаты за неотработанные дни отпуска. Когда увольняется сотрудник, которому отпуск был предоставлен авансом, часто встает вопрос о возврате отпускных за неотработанные дни. Работодатель вправе удержать такие суммы, но их размер не может превышать 20 процентов от выплат, причитающихся работнику при увольнении (ч. вторая ст. 137, ст. 138 ТК РФ).
Когда суммы недостаточно, чтобы погасить всю задолженность, либо сотруднику не полагаются выплаты при увольнении, работодатель не может удержать отпускные за неотработанные дни. Верховный Суд РФ указал, что в такой ситуации взыскивать с работника сумму задолженности в судебном порядке неправомерно, так как законодательство не содержит оснований для этого (определение Верховного Суда РФ от 14 марта 2014 г. № 19-КГ13-18).
Удержания из зарплаты аванса. Работодатель может принять решение об удержании аванса, выданного сотруднику в связи с командировкой, переводом на работу в другую местность и в других случаях. Сделать это можно, если со дня окончания срока, предусмотренного для возвращения аванса, не прошел месяц и работник не оспаривает основание и размер удержаний (ч. третья ст. 137 ТК РФ). Если работодатель выполнит эти требования закона, то впоследствии сотрудник не сможет оспорить действия работодателя.
По вопросу о взыскании аванса практика сложилась противоречивая. Некоторые суды считают, что если работодатель при увольнении сотрудника не удержал часть выплаченных сумм, то взыскивать их в судебном порядке неправомерно (апелляционное определение Красноярского краевого суда от 23 июля 2014 г. по делу № 33-7059/2014). Другие суды полагают, что возможность взыскания аванса в суде предусмотрена частью второй статьи 137 Трудового кодекса. Наличие недобросовестности в действиях работника или счетной ошибки не обязательно (апелляционное определение Верховного суда Республики Башкортостан от 27 августа 2015 г. по делу № 33-14673/2015).
Трудовой кодекс статья 137. Что она говорит?
Юридическая консультация > Трудовое право > Статья 137 Трудового кодекса – практический аспект деликатного вопросаПрактика показывает, что возникновение трудового спора между сотрудником и работодателем относительно части удерживаемых денежных средств вторым из заработка первого – явление далеко нередкое. Трудовой Кодекс статья 137 раскрывает все нюансы столь деликатной проблемы.
Содержание статьи 137 ТК РФ – ограничение удержаний из заработной платы
Трудовые споры возникают достаточно часто…
Удерживать какую-то часть из средств, заработанных сотрудником возможно лишь в ситуациях, которые зафиксированы в Трудовом Кодексе или затронуты федеральными законами иного рода.
Для того, чтобы удержать часть заработка, предназначенного служащему, работодатель должен вынести соответствующее решение относительно взыскания подобного рода.
Удерживать определенную долю из зарплаты работника с целью своевременно погасить задолженность, возникшую перед работодателем, можно в ряде случаев:
- если требуется возместить неотработанный аванс, который выдавался сотруднику в счет зарплаты;
- с целью погасить неизрасходованный или в свое время не возвращенный аванс, выданный по случаю служебной командировки или, если имел место перевод на иную работу в другой регион и т.п.
- при осуществлении возврата сумм, которые были выплачены служащему в результате счетных ошибок, а также тех сумм, которые работнику излишне были вручены, в ситуациях признания специальным органом, который создается для решения конкретных трудовых споров, вины сотрудника в простое или в том, что не выполнил трудовые нормы;
- если служащий увольняется до конца того года, в счет которого он уже успел получить причитающийся ему оплачиваемый отпуск. Удерживаться ничего не будет лишь тогда, когда увольнение работника происходило в соответствии с основаниями, предусмотренными рядом статей настоящего Кодекса.
За работодателем остается право принимать решение относительно удержания из зарплаты служащего определенной доли не позднее, чем через месяц с момента окончания срока, который был установлен для осуществления возврата аванса, погашения задолженности или ошибочно начисленных выплат, но только в тех случаях, если работником не производится оспаривание самого факта, либо размеров удержания.
Сумма заработных выплат, излишне выданных работнику, не может с него взыскиваться в конкретных случаях:
- если имело место наличие счетной ошибки;
- если инстанцией, занимающейся рассмотрением подобных фактов, признается доля вины работника в неисполнении или нарушении трудовых норм, простое;
- если зарплата была излишне выдана работнику в связи с его действиями, носящими неправомерный характер и установленными в судебном порядке.
Комментарий к статье 137 ТК РФ
Трудовой кодекс даст ответы на все вопросы
В соответствии с тем, что заработная плата, по сути, основной источник дохода во многих российских семьях, Трудовым Кодексом установлено, что осуществлять финансовые удержания из зарплаты допускается только в ситуациях, предусмотренных положениями данной статьи.
Какие-либо еще случаи удержаний определяются только по положениям федерального закона. К таковым можно отнести:
Во всех этих ситуациях удержание осуществляется исключительно на основании закона или исполнительных документов, произведенных работодателем. Как показывает практика, особенно тяжело происходит решение проблемы, когда необходимо установить наличие или отсутствие счетной ошибки.
Речь идет о неточности арифметических действий, связанных с расчетами сумм, которые подлежат выплате, о возможных опечатках, описках. Счетной ошибкой не могут быть признаны: неверное применение соответствующих правовых норм, ошибочный перевод денежной суммы на банковский счет.
В соответствии с решением, принятым работодателем, вычесть из зарплаты сотрудника излишне выплаченную денежную сумму можно, как гарантийную выплату в случае неисполнения им трудовых норм или простое. Однако осуществить подобное возможно только в том случае, когда специальным органом вина работника будет установлена.
Удержать зарплату могут на выплату алиментов, погашения налоговой задолженности
Возможно удержание сумм, выданных работнику, в счет оплаты отпуска, но только в том случае, если увольнение имело место до окончания того года, за который отпуск и предоставлялся. Предусмотрены и исключения.
К таковым относятся: основание увольнения по инициативе работодателя, не связанные с виновным поведением служащего, а также, увольнение в связи с отказом сотрудника переводиться на другую работу.
Право работодателя вернуть денежные средства за дни отпуска не отработанные сотрудником, не могут быть определены в зависимость от наличия, либо отсутствие у конкретного работника на время увольнения начисленной, но пока невыплаченной зарплаты, из которой и может быть осуществлено удержание подобного рода.
В противном случае, произошло бы нарушение принципа равенств всех работников. Они были бы поставлены в различные ситуации, в зависимости от того, имело ли место начисление каких-либо сумм. Нельзя удерживать из зарплаты служащего части денежных средств в любых других ситуациях, кроме описанных выше.
Невозможно осуществить взыскание с заработных выплат служащего в том случае, если ее излишняя выплата связана с неправильным применением законов, либо нормативных актов иного рода (имеется ввиду, неверное определение размера оклада, тарифного разряда и т.п.).
Чтобы сотрудник имел представление обо всех деталях произведенного удержания и его законности, он должен быть ознакомлен с содержанием статьи 137 ТК РФ. В этом случае, удастся максимально безболезненно решить спорный вопрос относительно правомерности такого удержания.
«Время говорить»: о нарушениях трудового кодекса. Смотрите познавательное видео:
Заметили ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, чтобы сообщить нам.
Поделиться
ВКонтакте
Класс
Telegram
Ст. 137 ТК РФ. Ограничение удержаний из заработной платы
В ст. 137, 138 ТК РФ установлен порядок удержания сумм из заработка работника и ограничения по их размерам. Удержания допускаются только в случаях, предусмотренных ТК и федеральными законами. Установление правил и ограничений направлено на обеспечение охраны прав работников на зарплату.
Общий порядок
Удержания из заработка работника для погашения возникшей у него задолженности перед нанимателем осуществляются с целью:
- Компенсации неотработанного аванса, предоставленного сотруднику в счет з/п.
- Погашения неизрасходованного и невозвращенного своевременно аванса, предоставленного служащему в связи с переводом в другую местность на другую работу или служебной командировкой либо в иных случаях.
- Возврата сумм, выплаченных сотруднику в связи с допущенными счетными ошибками, при признании вины работника в неисполнении трудовых норм либо в простое. В последнем случае основанием является решение органа, уполномоченного рассматривать индивидуальные трудовые споры.
Согласно положениям ч. 2 ст. 137 ТК РФ, допускаются удержания при увольнении сотрудника до завершения года, в счет которого предоставлялся оплачиваемый отпуск. Удержание производится за неотработанные дни. Исключением из правила, по ст. 137 ТК РФ, являются случаи расторжения договора по основаниям, установленным в 77 статье (ч. 1 п. 8), ст. 81 (ч. 1 п. 1, 2, 4), ст. 83 (п. 1, 2, 5, 6, 7).
Сроки
Как устанавливается в ч. 3 ст. 137 ТК РФ, наниматель может вынести распоряжение об удержании указанных в абз. 2, 3, 4 второй части нормы, до истечения 1 мес. с даты завершения срока, отведенного для возврата аванса, неправильно рассчитанных выплат или погашения задолженности. Данное правило действует, если работник не возражает против оснований и величины удержания.
Исключения
Они предусматриваются в ч. 4 ст. 137 ТК РФ. Зарплата, излишне выплаченная сотруднику, не может взыскиваться с него, кроме случаев:
- Допущения ошибки при расчетах.
- При признании вины гражданина в простое или неисполнении трудовых норм, что подтверждается комиссией по трудовым спорам.
- Излишней выплаты заработка вследствие неправомерных действий сотрудника, установленных судом.
Ст. 137 ТК РФ с комментариями
Содержание нормы согласуется с положениями Конвенции МОТ «Об охране заработной платы». В 8 статье указанного документа предусмотрено, что удержания с заработка могут производиться в пределах и в порядке, закрепленном в национальном законодательстве, в коллективных соглашениях либо решениях арбитражных судебных инстанций. Работники должны быть ознакомлены с установленными правилами.
Необходимо отметить, что отечественное законодательство не предусматривает возможность производить удержания на основании коллективного договора, так как соответствующие условия ухудшили бы положение гражданина в сравнении с установленными в законодательстве, что недопустимо.
Запрещены всякие вычеты по усмотрению нанимателя, связанные с возложением на сотрудника части производственных затрат, удовлетворения претензий, предъявленных третьими лицами обеим сторонам правоотношений (нанимателю и сотруднику) без решения судебной инстанции либо согласия служащего.
Налогообложение
По смыслу 1 части ст. 137 ТК РФ, удержание из заработка сотрудника может осуществляться в случае, прямо установленном в федеральном законе. В настоящее время в НК предусматривается обязанность нанимателя как налогового агента исчислять и перечислять в бюджет НДФЛ.
Удержания налога производятся по правилам ст. 226 НК. При этом его сумма не может превышать 50 % з/п. Удержание осуществляется непосредственно из дохода в момент фактической выплаты.
Штрафы
Они также относятся к удержаниям, разрешенным ст. 137 ТК РФ. В КоАП содержится ст. 32.2, согласно положениям которой штраф должен быть выплачен путем перечисления/внесения установленной суммы в банковскую либо другую организацию.
При неуплате в срок копия постановления о вменении данной административной санкции направляется уполномоченным органом/служащим нанимателю для принудительного удержания суммы из заработка виновного.
Штраф может быть наложен на виновного и в качестве уголовного наказания. Взыскание установленной суммы производится по судебному приговору.
Как устанавливает 31 статья УИК (Уголовно-исполнительного кодекса), лицо должно отчислить вмененный ему штраф до истечения месяца с даты вступления решения судебной инстанции в силу.
Если предписание не исполнено добровольно в установленный срок, взыскание может быть обращено на имущество виновного. Если величина взыскания меньше 2-х МРОТ, материальных ценностей лица недостаточно для погашения задолженности, допускается удержание суммы из заработка виновного. Контроль исполнения предписаний суда возлагается на служащих ФССП.
Удержания при исправительных работах
Они также производятся на основании приговора.
Согласно положениям 40 статьи УИК, из заработка осужденного осуществляются удержания в размере, определенном судом. Своевременное и правильное взыскание установленных сумм возлагается на нанимателя. Правила удержания закреплены 44 статьей УИК.
Исполнительное производство
Оно осуществляется на основании документов, выданных по судебным приказам/решениям, мировым соглашениям и пр.
Согласно 64 статье ФЗ № 119, удержание с зарплаты может осуществляться для взыскания:
- периодических выплат;
- сумм размером не больше 2-х МРОТ;
- задолженностей при отсутствии у должника имущества, достаточного для погашения обязательств.
Нюанс
Законодательство предусматривает возможность произвести удержание из зарплаты для погашения задолженности сотрудника перед нанимателем в случаях, установленных ст. 137 ТК РФ, и в качестве компенсации последним имущественного ущерба.
Правила возмещения убытков работодателю закреплены в 248 статье.
Задолженность по авансу
Неиспользованные средства, выданные сотруднику в связи с командировкой, переводом и пр., должны быть возвращены им добровольно. О произведенных затратах работник должен отчитаться. При уклонении от возврата суммы будут взысканы в принудительном порядке.
При этом должны выполняться 2 условия:
- Сотрудник не оспаривает основания и величину взыскания.
- Работодателем было издано распоряжение до истечения месяца с даты окончания срока, предусмотренного для возврата авансовых сумм.
Пояснения к ч. 3
Возражения сотрудника должны быть оформлены письменно. Работник в своем заявлении может ссылаться на незаконность/необоснованность удержания сумм, а также неверное определение величины взыскания.
Срок для возврата неотработанного аванса, предоставленного в счет з/п, определяется по соглашению сторон. Для сумм, выданных в связи с командировкой, период возврата составляет 3 дня с даты возвращения сотрудника.
Неотработанные отпускные дни
При увольнении сотрудника до завершения года, в счет которого ему предоставлялся отпуск, удержания, предусмотренные в 137 норме, производятся в момент окончательного расчета. Правила предоставления оплачиваемых дней отдыха закрепляет 122 статья Кодекса.
Перечень исключений из данного правила прямо закреплен ч. 3 137 статьи и считается исчерпывающим.
Счетная ошибка
На практике нередки случаи излишней выплаты гражданину сумм з/п в связи с неправильными арифметическими действиями лица, ответственного за расчеты.
Для удержания таких сумм должны исполняться 2 условия, о которых говорилось выше: отсутствие возражений со стороны сотрудника и соблюдение нанимателем месячного срока для издания распоряжения о взыскании. В случае пропуска указанного периода суммы могут быть удержаны только в судебном порядке.
При реализации положений части 4 ст. 137 ТК РФ следует учесть один важный нюанс. В качестве счетной ошибки не могут признаваться неправильное применение законодательства, регламентирующего порядок оплаты труда, условий коллективного соглашения либо трудового контракта. Соответственно, излишне выплаченные средства в таких случаях взысканию не подлежат. Удержание этих сумм может быть обжаловано в суде.
Ст. 137 ТК РФ. Ограничение удержаний из заработной платы
В ст. 137, 138 ТК РФ установлен порядок удержания сумм из заработка работника и ограничения по их размерам. Удержания допускаются только в случаях, предусмотренных ТК и федеральными законами. Установление правил и ограничений направлено на обеспечение охраны прав работников на зарплату.
Общий порядок
Удержания из заработка работника для погашения возникшей у него задолженности перед нанимателем осуществляются с целью:
- Компенсации неотработанного аванса, предоставленного сотруднику в счет з/п.
- Погашения неизрасходованного и невозвращенного своевременно аванса, предоставленного служащему в связи с переводом в другую местность на другую работу или служебной командировкой либо в иных случаях.
- Возврата сумм, выплаченных сотруднику в связи с допущенными счетными ошибками, при признании вины работника в неисполнении трудовых норм либо в простое. В последнем случае основанием является решение органа, уполномоченного рассматривать индивидуальные трудовые споры.
Согласно положениям ч. 2 ст. 137 ТК РФ, допускаются удержания при увольнении сотрудника до завершения года, в счет которого предоставлялся оплачиваемый отпуск. Удержание производится за неотработанные дни. Исключением из правила, по ст. 137 ТК РФ, являются случаи расторжения договора по основаниям, установленным в 77 статье (ч. 1 п. 8), ст. 81 (ч. 1 п. 1, 2, 4), ст. 83 (п. 1, 2, 5, 6, 7).
Сроки
Как устанавливается в ч. 3 ст. 137 ТК РФ, наниматель может вынести распоряжение об удержании указанных в абз. 2, 3, 4 второй части нормы, до истечения 1 мес. с даты завершения срока, отведенного для возврата аванса, неправильно рассчитанных выплат или погашения задолженности. Данное правило действует, если работник не возражает против оснований и величины удержания.
Исключения
Они предусматриваются в ч. 4 ст. 137 ТК РФ. Зарплата, излишне выплаченная сотруднику, не может взыскиваться с него, кроме случаев:
- Допущения ошибки при расчетах.
- При признании вины гражданина в простое или неисполнении трудовых норм, что подтверждается комиссией по трудовым спорам.
- Излишней выплаты заработка вследствие неправомерных действий сотрудника, установленных судом.
Ст. 137 ТК РФ с комментариями
Содержание нормы согласуется с положениями Конвенции МОТ «Об охране заработной платы». В 8 статье указанного документа предусмотрено, что удержания с заработка могут производиться в пределах и в порядке, закрепленном в национальном законодательстве, в коллективных соглашениях либо решениях арбитражных судебных инстанций. Работники должны быть ознакомлены с установленными правилами.
Необходимо отметить, что отечественное законодательство не предусматривает возможность производить удержания на основании коллективного договора, так как соответствующие условия ухудшили бы положение гражданина в сравнении с установленными в законодательстве, что недопустимо.
Запрещены всякие вычеты по усмотрению нанимателя, связанные с возложением на сотрудника части производственных затрат, удовлетворения претензий, предъявленных третьими лицами обеим сторонам правоотношений (нанимателю и сотруднику) без решения судебной инстанции либо согласия служащего.
Налогообложение
По смыслу 1 части ст. 137 ТК РФ, удержание из заработка сотрудника может осуществляться в случае, прямо установленном в федеральном законе. В настоящее время в НК предусматривается обязанность нанимателя как налогового агента исчислять и перечислять в бюджет НДФЛ.
Удержания налога производятся по правилам ст. 226 НК. При этом его сумма не может превышать 50 % з/п. Удержание осуществляется непосредственно из дохода в момент фактической выплаты.
Штрафы
Они также относятся к удержаниям, разрешенным ст. 137 ТК РФ. В КоАП содержится ст. 32.2, согласно положениям которой штраф должен быть выплачен путем перечисления/внесения установленной суммы в банковскую либо другую организацию.
При неуплате в срок копия постановления о вменении данной административной санкции направляется уполномоченным органом/служащим нанимателю для принудительного удержания суммы из заработка виновного.
Штраф может быть наложен на виновного и в качестве уголовного наказания. Взыскание установленной суммы производится по судебному приговору.
Как устанавливает 31 статья УИК (Уголовно-исполнительного кодекса), лицо должно отчислить вмененный ему штраф до истечения месяца с даты вступления решения судебной инстанции в силу.
Если предписание не исполнено добровольно в установленный срок, взыскание может быть обращено на имущество виновного. Если величина взыскания меньше 2-х МРОТ, материальных ценностей лица недостаточно для погашения задолженности, допускается удержание суммы из заработка виновного. Контроль исполнения предписаний суда возлагается на служащих ФССП.
Удержания при исправительных работах
Они также производятся на основании приговора.
Согласно положениям 40 статьи УИК, из заработка осужденного осуществляются удержания в размере, определенном судом. Своевременное и правильное взыскание установленных сумм возлагается на нанимателя. Правила удержания закреплены 44 статьей УИК.
Исполнительное производство
Оно осуществляется на основании документов, выданных по судебным приказам/решениям, мировым соглашениям и пр.
Согласно 64 статье ФЗ № 119, удержание с зарплаты может осуществляться для взыскания:
- периодических выплат;
- сумм размером не больше 2-х МРОТ;
- задолженностей при отсутствии у должника имущества, достаточного для погашения обязательств.
Нюанс
Законодательство предусматривает возможность произвести удержание из зарплаты для погашения задолженности сотрудника перед нанимателем в случаях, установленных ст. 137 ТК РФ, и в качестве компенсации последним имущественного ущерба.
Правила возмещения убытков работодателю закреплены в 248 статье.
Задолженность по авансу
Неиспользованные средства, выданные сотруднику в связи с командировкой, переводом и пр., должны быть возвращены им добровольно. О произведенных затратах работник должен отчитаться. При уклонении от возврата суммы будут взысканы в принудительном порядке.
При этом должны выполняться 2 условия:
- Сотрудник не оспаривает основания и величину взыскания.
- Работодателем было издано распоряжение до истечения месяца с даты окончания срока, предусмотренного для возврата авансовых сумм.
Пояснения к ч. 3
Возражения сотрудника должны быть оформлены письменно. Работник в своем заявлении может ссылаться на незаконность/необоснованность удержания сумм, а также неверное определение величины взыскания.
Срок для возврата неотработанного аванса, предоставленного в счет з/п, определяется по соглашению сторон. Для сумм, выданных в связи с командировкой, период возврата составляет 3 дня с даты возвращения сотрудника.
Неотработанные отпускные дни
При увольнении сотрудника до завершения года, в счет которого ему предоставлялся отпуск, удержания, предусмотренные в 137 норме, производятся в момент окончательного расчета. Правила предоставления оплачиваемых дней отдыха закрепляет 122 статья Кодекса.
Перечень исключений из данного правила прямо закреплен ч. 3 137 статьи и считается исчерпывающим.
Счетная ошибка
На практике нередки случаи излишней выплаты гражданину сумм з/п в связи с неправильными арифметическими действиями лица, ответственного за расчеты.
Для удержания таких сумм должны исполняться 2 условия, о которых говорилось выше: отсутствие возражений со стороны сотрудника и соблюдение нанимателем месячного срока для издания распоряжения о взыскании. В случае пропуска указанного периода суммы могут быть удержаны только в судебном порядке.
При реализации положений части 4 ст. 137 ТК РФ следует учесть один важный нюанс. В качестве счетной ошибки не могут признаваться неправильное применение законодательства, регламентирующего порядок оплаты труда, условий коллективного соглашения либо трудового контракта. Соответственно, излишне выплаченные средства в таких случаях взысканию не подлежат. Удержание этих сумм может быть обжаловано в суде.
Может ли работодатель удерживать алименты только на основании заявления работника (при отсутствии исполнительного документа)? Если это возможно, то какие документы, должен представить работник?
Точно можно этим воспользоваться?
|
Консультация предоставлена 10.04.2017 года
Может ли работодатель удерживать алименты только на основании заявления работника (при отсутствии исполнительного документа)? Если это возможно, то какие документы, в том числе заявления, в этом случае должен представить работник?
По данному вопросу мы придерживаемся следующей позиции:
Работодатель не вправе удерживать алименты только на основании заявления работника.
Обоснование позиции:
В соответствии со ст. 137 ТК РФ удержания из заработной платы работника могут производиться только в случаях, предусмотренных ТК РФ и иными федеральными законами.
Статьей 109 Семейного кодекса РФ (далее — СК РФ) предусмотрено, что администрация организации по месту работы лица, обязанного уплачивать алименты на основании нотариально удостоверенного соглашения об уплате алиментов или на основании исполнительного листа, обязана ежемесячно удерживать алименты из заработной платы и (или) иного дохода лица, обязанного уплачивать алименты, и уплачивать или переводить их за счет лица, обязанного уплачивать алименты, лицу, получающему алименты, не позднее чем в трехдневный срок со дня выплаты заработной платы и (или) иного дохода лицу, обязанному уплачивать алименты.
Как видим, в силу ст. 137 ТК РФ и ст. 109 СК РФ работодатель обязан удерживать алименты на основании нотариально удостоверенного соглашения об уплате алиментов*(1) или на основании исполнительного листа.
Отметим, что некоторые специалисты считают возможными любые удержания из заработной платы по заявлению работника. Они утверждают, что трудовое законодательство не содержит на этот счет ограничений. Отмечается также, что подобные отношения имеют гражданско-правовой характер и не являются трудовыми, поэтому ст. 137 ТК РФ и ст. 138 ТК РФ на них не распространяются.
На наш взгляд, сторонники этой точки зрения упускают из виду, что заработная плата, из которой производятся удержания, является элементом именно трудовых отношений и в рамках этих отношений законодателем приняты меры к охране зарплаты от различных удержаний.
Статья 137 ТК РФ запрещает любые удержания из заработной платы работника, которые не предусмотрены Трудовым кодексом РФ или иным федеральным законом (смотрите, например, решение Тамбовского областного суда от 19.10.2016 по делу N 7-423/2016, определение Московского городского суда от 12.09.2016 N 4г-10226/16, решение Волгоградского областного суда от 20.01.2016 по делу N 07-48/2016).
Поэтому мы полагаем, что заявление работника само по себе не позволяет производить удержание. Оно может являться основанием для удержаний только тогда, когда такой порядок установлен конкретной нормой федерального закона*(2). В тех же случаях, когда возможность удержания из заработной платы в пользу третьих лиц или в пользу самого работодателя не предусмотрена ни одним законом, заявление работника с просьбой о таком удержании не должно влечь никаких последствий.
Таким образом, на наш взгляд, работодатель не вправе удерживать алименты только на основании заявления работника, поскольку закон не предусматривает такой возможности.
Работник, получив заработную плату, может распорядиться деньгами по своему усмотрению, в частности перечислить часть заработной платы в качестве добровольной выплаты алиментов. Работодатель же в такой ситуации может лишь помочь и перевести внесенные работником в кассу или на банковский счет деньги в пользу указанного в заявлении третьего лица (смотрите также Энциклопедию решений. Удержание алиментов).
К сведению:
Говорить о наличии сформировавшейся официальной позиции по вопросу о возможности удержания из заработной платы работника по заявлению работника не приходится.
В письме Роструда от 18.07.2012 N ПГ/5089-6-1 отмечено, что никакие другие дополнительные вычеты из заработной платы по решению работодателя, помимо предусмотренных ст. 137 ТК РФ, не допускаются, за исключением случаев, когда другими федеральными законами на работодателя возлагается обязанность производить удержания из заработной платы работников. Поэтому удерживать по заявлению работника суммы из его зарплаты в счет погашения банковского кредита работодатель не вправе. А уже в письме от 26.09.2012 N ПГ/7156-6-1 Роструд высказал мнение, что подобная ситуация (погашение кредита без получения денежных средств на счет либо на руки) правомерна, поскольку речь идет не об удержании, а о волеизъявлении работника распорядиться начисленной заработной платой, и что положения ст. 138 ТК РФ в данном случае не применяются.
Суды также не выработали единого подхода к решению данного вопроса. Так, одни суды приходят к выводу, что перечисление работодателем части заработной платы по заявлению работника по реквизитам, указанным работником, в пользу третьих лиц по существу не является удержанием, предполагающим принудительное изъятие и распоряжение в отношении заработной платы работника помимо его воли (смотрите, например, апелляционное определение СК по административным делам Волгоградского областного суда от 27.01.2016 по делу N 33а-1665/2016). Другие придерживаются позиции, согласно которой одного лишь заявления работника для удержаний из заработной платы недостаточно; для того, чтобы работодатель мог производить такое удержание, необходимы соответствующие правовые основания (смотрите, в частности, апелляционное определение СК по гражданским делам Верховного Суда Республики Коми от 11.09.2014 по делу N 33-4498/2014).
Учитывая отсутствие единого подхода к решению данного вопроса в правоприменительной практике, мы не исключаем, что удержание алиментов только на основании заявления работника может быть расценено органами контроля как нарушение трудового законодательства, за что работодатель и (или) его должностные лица могут быть привлечены к административной ответственности по ст. 5.27 КоАП РФ.
Ответ подготовил:
Эксперт службы Правового консалтинга ГАРАНТ
Наумчик Иван
Контроль качества ответа:
Рецензент службы Правового консалтинга ГАРАНТ
Воронова Елена
*(1) Нотариально удостоверенное соглашение об уплате алиментов признается исполнительным документом в силу п. 2 ст. 100 СК РФ, п. 3 ч. 1 ст. 12 Федерального закона от 02.10.2007 N 229-ФЗ «Об исполнительном производстве».
*(2) Так, например, в соответствии с п. 3 ст. 28 Федерального закона от 12.01.1996 N 10-ФЗ «О профессиональных союзах, их правах и гарантиях деятельности» работодатель удерживает из заработной платы и перечисляет на счет профсоюза членские профсоюзные взносы на основании письменных заявлений работников членов профсоюза. Пунктом 2 ст. 5 Федерального закона от 30.04.2008 N 56-ФЗ «О дополнительных страховых взносах на накопительную пенсию и государственной поддержке формирования пенсионных накоплений» предусмотрено удержание работодателем по заявлению работника дополнительных страховых взносов на накопительную пенсию. Отказать в осуществлении таких удержаний по заявлению работника работодатель не может.
Доктор Мишель Л. Дью, доктор медицины — Канзас-Сити, Миссури — Кардиология
Главы книги: Байби К., Лоухорн С., Стивенс Т., Дью М. Основные сведения о сердечно-сосудистых заболеваниях у женщин, J&B Learning, июнь 2009 г.
Статьи в журнале:
1. Херндон Б.Л., Влах В., Роса М., Вилли С.К. Иммуноглобины, связанные с Helicobactor Pylori, при саркоидозе. Journal of Investigative Medicine 52 (2): 137-143, 2004.
2. Маринак Дж., С. К. Вилси, М. Дью, М. Поуракбар, Б. Херндон. Фармакодинамические эффекты дофамина, стратифицированные по расе.American Journal of Therapeutics 8 (1): 27-34, январь-февраль 2001 г.
3. Далл Л., Т. Миллер, Б. Херндон, И. Диз, М. Истощение тромбоцитов и тяжесть стрептококкового эндокардита Канадский журнал инфекционных заболеваний 9: 359 -366, ноябрь-декабрь 1998.
4. Бамбергер Д., Б. Л. Херндон, М. Дью, Р. П. Черн, Х. Митчелл, Л. Саммерс, Р. Ф. Маркус, С. К. Ким, П. Р. Суварна. Эффективность офлоксацина, рифампицина и клиндамицина в лечении абсцессов Staphylococcus aureus и корреляция с результатами анализа внутриклеточного уничтожения бактерий in vitro.Противомикробные агенты и химиотерапия 41 (5): 1178-1181, May 1997.
5. Шарма Р., М. Дью, Б. Херндон, У Роза. Преимущества выживания клеточной активации в клеточных популяциях диагностического бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ) у больных СПИДом с пневмонией, вызванной Pneumocystis carinii (PCP). Южный медицинский журнал 90 (5): 531-4, май 1997 г.
6. Уилси С.К., Б.Л. Херндон, Л. Миллер, М. Дью. Сравнение растворимых и связанных с клетками CD4, CD8 из бронхоальвеолярного лаважа: корреляция с легочным диагнозом у лиц, инфицированных вирусом иммунодефицита человека.Journal of Leukocyte Biology 59 (6): 813-16, 1996.
Опубликованные аннотации:
1. Дью М., Бейтман Т., О’Киф Дж., Макги А.И., Бунтен Л., Маккой М., Стивенс Т. Эйдж и холестерин ЛПВП. Прогнозирование прогрессирования кальция в коронарной артерии у женщин: выводы из женских сердец: исследование ишемии с упреждающей оценкой и рекомендациями (WHISPER). Постерная презентация, Научные сессии Американской кардиологической ассоциации, Орландо, Флорида, 15-18 ноября 2009 г.
2. Магальский А., Маккой М., Забель М., МакГи Л., Гёке Дж., Бунтен Л., Дью М., Хайду М., Рид К., Рамза Б.Электрокардиографическое обследование у соревнующихся университетских спортсменов. JACC, март 2009 г .; Том 53 (10) Sup A: A142-143.
3. Dew M, Thai H, Gobar L, Walsh TK, Sorrell VS. Коррекция ослабления и суммарный показатель стресса в визуализации перфузии миокарда среди женщин с риском ишемической болезни сердца. Журнал следственной медицины. A412; S59, январь 2006 г.
4. Дью М., Кастеллано Л., Тай Х., Голдман С. Добутамин Стресс ECHO и клинические симптомы превосходят ядерные стресс-тесты в прогнозировании заболевания коронарной артерии у женщин.Journal of Investigative Medicine, 53: 1: Supplement, January 2005.
5. Херндон Б., Дью М., Райхл М. Стрептококковые углеводы как хемоаттрактант PMN в модели эндокардита in vitro. FAESB Journal 17 (7) C47, аннотация № 35.18, май, 2003 г.
6. Дью М., О’Киф Дж. Х., Гейни В., Макги А. И., Коэн М., Мутрей К., Бейтман TM. Реакция сердечного ритма во время и после тренировки добавляет прогностическую информацию к визуализации перфузии миокарда. Научные сессии Американской кардиологической ассоциации, P327, Новый Орлеан, Луизиана, 12-15 ноября 2000 г.
7. Фиорелла Р., Дью М., Херндон Б., Маршалл Б., Вилси С., Вено П., Молтени Л. Б., Молтени А. Патологический ответ легких на трахеальную инстилляцию уреазы типа Helicobacter pylori. 10-й Международный коллоквиум по фиброзу легких. Сиена, Италия, октябрь 1998 г.
8. Альба Л. М., С. К. Вилси, Б. Л. Херндон, П. Паттисон, М. Дью, Т. Эллиот. Распространенность Helicobacter pylori по отношению к тяжести заболевания при астме, ХОБЛ и саркоидозе. CHEST.114 (4): 349S, October, 1998.
9. Fiorella R, Herndon BL, Reisz G, Dew M, Mitchem R, Molteni A.Двусторонний фиброзный ответ легких после инфузии талька для плевродеза на модели кролика. FASEB J. 12 (4): A583, # 3383, 1998.
10. Herndon BL, Mullick S, Dew M., Dall L. Поверхностные антигены тромбоцитов при тромбоцитопении и стрептококковом эндокардите. FASEB J. 12 (4): A574, # 3334, 1998.
11. Дью М., С. К. Уилси, Б. Херндон, С. П. Паттисон, А. Молтени, Б. Дж. Маршалл. Интратрахеальные эффекты уреазы, измеренные с помощью бронхоальвеолярного лаважа: гистология, цитокины и химия. NIH / AAMC AMSA, Вашингтон, округ Колумбияp 8 реферативная книга, 14 марта 1998 г.
12. Далл Л., Н. Кумар, М. Дью, Б. Херндон. Агрегационная активность тромбоцитов и прилипание фибринового сгустка связаны с экзополисахаридами Viridans Streptococci. 35-е ежегодное собрание Американского общества инфекционных болезней. Сан-Франциско, Калифорния, 13 сентября 1997 г.
13. Далл Л., Херндон Б., Дью М., Дхар М. Экспрессия поверхностного антигена тромбоцитов в ответ на организм, вызывающий эндокардит. FASEB J. 11; (3), 3116, March 1997.
14. Дью М., Маринак Дж., Херндон Б.Иммунологические и гормональные эффекты почечной дозы дофамина у здоровых чернокожих и белых добровольцев, XXVIII Форум медицинских исследований студентов Среднего Запада 1997 г., Крейтон, Омаха, Северная Каролина, стр. 47 тезисов книги, 22 февраля 1997 г.
15. Молтени А., Митчем Р. , Herndon B, Reisz G, Fiorella R, Dew M. Локальный и отдаленный фиброзный ответ легких на вливание препаратов, вызывающих плевродез. 9-й Международный коллоквиум по фиброзу легких, Оахака, Мексика, ноябрь 1996 г.
16. Кларк М.С., Б.Л. Херндон, М. Дью, С.К. Уилси. Бронхоальвеолярный лаваж Il-1 и TNF коррелируют с эффектами механической вентиляции, CHEST.110: 16S, октябрь-декабрь 1996 г.
17. Хелсел Дж., Дью М., Херндон Б., Далл Л. Агрегация тромбоцитов человека в анализе бактериального вовлечения в эндокардит. 96th Am Soc Microbiology, N.O., LA, май 1996.
18. Митчем Р., Херндон Б., О’Тул Л., Рейс Дж., Уилси С., Дью М. Плевродез со спонтанным пневмотораксом: поиск идеального возбудителя. Международная конференция Американского торакального общества. Новый Орлеан, Лос-Анджелес, май 1996.
19. Шарма Р., Дью М., Херндон Б., Роза У. Ретроспективное исследование: преимущества клеточной активации в диагностическом бронхоальвеолярном лаваже (БАЛ) на выживаемость у больных СПИДом с пневмонией, вызванной Pneumocystis carinii (PCP).Ежегодная сессия Американского колледжа врачей, Сан-Франциско, Калифорния, 27-28 апреля 1996 г.
20. Mitchem R, Herndon B, Reisz G, Dew M., Molteni A. Сывороточные и отдаленные клеточные изменения, вызванные инфузией плевральных агентов плевродез. FASEB J. 10 (6): 40, A1006, 1996.
21. Herndon BL, O’Toole L, Reisz G, Willsie S, Marinac J, Dew M. Уменьшение рецептора интерлейкина 2 при инфузии дофамина у человека. FASEB J. 10 (6): 2577, A1448, 1996.
22. Каркалапуди В., Херндон Б.Л., Дью М., Черн Р., Уилси С.К.Положительное давление в конце выдоха (ПДКВ) не является причиной повреждения альвеол, связанного с вентиляцией с положительным давлением плюс ПДКВ. FASEB J. 10 (3): 2094, A362, 1996.
23. Dall L, Chung G, Herndon B, Dew M. Взаимодействие тромбоцитов и стрептококков при эндокардите: вовлечены ли микробные белки? Юго-западная ассоциация клинической микробиологии, Канзас-Сити, Миссури, октябрь 1995 г.
24. Патель С., Дью М., Херндон Б., Далл Л. Молекула адгезии тромбоцитов CD62p: роль в стрептококковом эндокардите. Юго-западная ассоциация клинической микробиологии, Канзас-Сити, Миссури, октябрь 1995 г.
25. Бамбергер Д.М., Херндон Б.Л., Дью М. Активность клиндамицина в течение 14 дней после инфицирования тканевых абсцессов S. aureus. 95-е совещание ASM Gen Meeting, Вашингтон, округ Колумбия, май 1995.
26. О’Тул Л., Херндон Б., Уилси С., Маринак Дж., Дью М., Стивенс Д., Рейс Г. Феномены, связанные с приемом почечной дозы дофамина у тяжелобольных пациентов. Респираторная медицина и реаниматология. 151 (4): A781, 1995.
27. Бамбергер Д.М., Херндон Б.Л., Дью М., Черн Р. Корреляция внутриклеточного уничтожения Staphylococcus aureus и антимикробной эффективности на модели хронического тканевого абсцесса.35-й ICAAC. Сан-Франциско, Калифорния, 1995.
Пятьдесят лет повторяющегося гидрографического разреза 137 ° в.д. в западной части северной части Тихого океана
Акамацу Х., Савара Т. (1969) Предварительный отчет о третьем рейсе CSK, январь-март 1969 г. . Oceanogr Mag 21: 83–96
. Google Scholar
Акитомо К., Авадзи Т., Имасато Н. (1991) Вариация пути Куросио к югу от Японии. 1. Баротропная модель притока – оттока. J Geophys Res 96: 2549–2560
Статья Google Scholar
Акияма Т. (1968) Парциальное давление углекислого газа в атмосфере и морской воде над западной частью северной части Тихого океана.Oceanogr Mag 20: 133–146
Google Scholar
Акияма Т. (1969) Углекислый газ в атмосфере и морской воде над западной частью северной части Тихого океана. Oceanogr Mag 21: 121–127
Google Scholar
Акияма Т., Саги Т., Юра Т. (1968) О распределении pH in situ и общей щелочности в западной части северной части Тихого океана. Oceanogr Mag 20: 1–8
Google Scholar
Элфорд М. Х., Маккиннон Дж., Симмонс Х. Л., Нэш Дж. Д. (2016) Почти инерционные внутренние гравитационные волны в океане.Annu Rev Mar Sci 8: 95–123
Статья Google Scholar
Ando K, McPhaden M (1997) Изменчивость гидрографии поверхностного слоя в тропической части Тихого океана. J Geophys Res 102: 23063–23078
Статья Google Scholar
Andow T (1987) Межгодовые изменения подповерхностного разреза океанографии вдоль меридиана 137 ° E. Oceanogr Mag 37: 47–73
Google Scholar
Aoki Y, Suga T, Hanawa K (2002) Подземные субтропические фронты северной части Тихого океана как внутренние границы вентилируемого термоклина.J Phys Oceanogr 32: 2299–2311
Статья Google Scholar
Bakker DCE et al (2016) Многолетний рекорд высококачественных данных f CO 2 в версии 3 Атласа Surface Ocean CO 2 (SOCAT). Earth Syst Sci Data 8: 383–413
Статья Google Scholar
Bates NR (2007) Межгодовая изменчивость океанического стока CO 2 в субтропическом круговороте Северной Атлантики за последние два десятилетия.Журнал Geophys Res 112: C09013. https://doi.org/10.1029/2006JC003759
Артикул Google Scholar
Бесшо С. (1995) Геострофический баланс западного северо-тихоокеанского тропического течения. Geophys Mag Ser 2 (1): 1–4
Google Scholar
Bingham FM, Lukas R (1995) Распределение промежуточных вод в западной экваториальной части Тихого океана в январе – феврале 1986 года.Deep Sea Res II 42: 1545–1573
Статья Google Scholar
Bingham FM, Suga T, Hanawa K (2002) Происхождение вод наблюдалось вдоль 137 ° E. Журнал J. Geophys Res 107: 3073. https://doi.org/10.1029/2000JC000722
Артикул Google Scholar
Cannon GA (1966) Тропические воды в западной части Тихого океана, август – сентябрь 1957 г. Deep Sea Res Oceanogr Abstr 13: 1139–1148
Article Google Scholar
Cerovečki I, Giglio D (2016) Уменьшение объема воды в субтропическом режиме в северной части Тихого океана в 2006–2009 годах, оцененное по наблюдениям Арго: влияние формирования поверхности и изменчивости океана в масштабе бассейна.J Clim 29: 2177–2199
Статья Google Scholar
Чао SY (1984) Бимодальность Куросио. J Phys Oceanogr 14: 92–103
Статья Google Scholar
Chen R, Flierl GR, Wunsch C (2015) Количественная оценка и интерпретация полос в субтропическом круговороте: спектральная перспектива. J Phys Oceanogr 45: 487–506
Google Scholar
Chen X, Qiu B, Du Y, Chen S, Qi Y (2016) Межгодовая и междекадная изменчивость Северного экваториального противотечения в западной части Тихого океана.J Geophys Res 121: 7743–7758
Статья Google Scholar
Cromwell T, Montgomery RB, Stroup EC (1954) Экваториальное подводное течение в Тихом океане, обнаруженное новыми методами. Science 119: 648–649
Статья Google Scholar
Dore JE, Lukas R, Sadler DW, Church MJ, Karl DM (2009) Физическая и биогеохимическая модуляция закисления океана в центральной части северной части Тихого океана.Proc Natl Acad Sci 106: 12235–12240
Статья Google Scholar
Ducet N, Le Traon PY, Reverdin F (2000) Глобальное картирование океанской циркуляции с высоким разрешением по данным TOPEX / Poseidon и ERS-1 и -2. J Geophys Res 105: 19477–19498
Статья Google Scholar
Durack PJ, Wijffels SE (2010) Пятидесятилетний тренд солености мирового океана и его связь с широкомасштабным потеплением.J Clim 23: 4342–4362. https://doi.org/10.1175/2010JCLI3377.1
Артикул Google Scholar
Feely RA, Gammon RH, Taft BA, Pullen PE, Waterman LS, Conway TJ, Gendron JF, Wisegarver DP (1987) Распределение химических индикаторов в восточной экваториальной части Тихого океана во время и после Эль-Ниньо 1982–83 годов / юг событие колебания. J Geophys Res 92: 6545–6558
Статья Google Scholar
Feely RA, Boutin J, Cosca CE, Dandonneau Y, Etcheto J, Inoue HY, Ishii M, Quéré CL, Mackey DJ, McPhaden M, Metzl N, Poisson A, Wanninkhof R (2002) Сезонная и межгодовая изменчивость CO 2 в экваториальной части Тихого океана.Deep Sea Res II 49: 2443–2469
Статья Google Scholar
Fine RA, Lukas R, Bingham FM, Warner MJ, Gammon RH (1994) Западный экваториальный Тихий океан: перекресток водных масс. J Geophys Res 99: 25063–25080
Статья Google Scholar
Fu LL, Ubelmann C (2014) О переходе от профильного высотомера к полосному высотомеру для наблюдения за топографией поверхности мирового океана.J Atmos Ocean Technol 31: 560–568
Статья Google Scholar
Fujii M, Chai F, Shi L, Inoue HY, Ishii M (2009) Сезонная и межгодовая изменчивость океанического круговорота углерода в западной и центральной тропико-субтропической части Тихого океана: исследование с физико-биогеохимическим моделированием. J Oceanogr 65: 689–701
Статья Google Scholar
Fujii Y, Nakano T, Usui N, Matsumoto S, Tsujino H, Kamachi M (2013) Пути промежуточных вод северной части Тихого океана, идентифицированные с помощью касательной линейной и сопряженной моделей модели общей циркуляции океана.Журнал Geophys Res 118: 2035–2051. https://doi.org/10.1002/jgrc.20094
Артикул Google Scholar
Фукасава М., Терамото Т., Тайра К. (1995) Гидрографическая структура в сочетании с глубоким пограничным течением на севере бассейна Сикоку. J Oceanogr 51: 187–205
Статья Google Scholar
Fushimi K (1987) Изменение парциального давления углекислого газа в поверхностных водах западной части северной части Тихого океана во время явления Эль-Ниньо 1982/83 года.Tellus 39B: 214–227
Артикул Google Scholar
Фусими К., Хирота М., Немото К., Мурата А.М. (1993) Распределение метана в поверхностной морской воде и потоки воздух / море над западной частью северной части Тихого океана. Oceanogr Mag 43: 33–46
Google Scholar
Гонсалес-Давила М., Сантана-Касиано Дж. М., Гонсалес-Давила Э. Ф. (2007) Межгодовая изменчивость углеродного цикла верхнего слоя океана в северо-восточной части Атлантического океана.Geophys Res Lett 34: L07608. https://doi.org/10.1029/2006GL028145
Артикул Google Scholar
Gouriou Y, Toole J (1993) Средняя циркуляция верхних слоев западной экваториальной части Тихого океана. J Geophys Res 98: 22495–22520
Статья Google Scholar
Gregg MC (1987) Диапикальное перемешивание в термоклине: обзор. J Geophys Res 92: 5249–5286
Статья Google Scholar
Гуань Б. (1986) Структура течения и ее изменение в экваториальной области западной части северной части Тихого океана.Чин Дж. Океанол Лимнол 4: 239–255
Статья Google Scholar
Guo XY, Zhu XH, Long Y, Huang DJ (2013) Пространственные вариации в переносе питательных веществ Куросио из Восточно-Китайского моря на юг Японии. Биогеонауки 10: 6403–6417
Статья Google Scholar
Ханава К. (1987) Межгодовые вариации зимних выходов на поверхность воды субтропического режима в западной части северной части Тихого океана.Atmos Ocean 25: 358–374
Статья Google Scholar
Ханава К., Хосино И. (1988) Температурная структура и смешанный слой в районе Куросио над хребтом Идзу. J Mar Res 46: 683–700
Статья Google Scholar
Ханава К., Талли Л.Д. (2001) Режим воды. В: Черч Дж. И др. (Ред.) Циркуляция океана и климат. Academic, London, pp. 373–386
. Google Scholar
Ханава К., Ватанабе Т., Ивасака Н., Суга Т., Тоба И. (1988) Термические условия на поверхности в западной части северной части Тихого океана во время событий ENSO.J Meteorol Soc Jpn 66: 445–456
Статья Google Scholar
Hasunuma K, Yoshida K (1978) Разделение субтропического круговорота в западной части северной части Тихого океана. J Oceanogr Soc Japan 34: 160–172
Статья Google Scholar
Hayashi K (2008) Следует ли рассматривать любую воду с низким потенциалом завихренности, наблюдаемую в разрезе 137 ° в.д., как воду субтропического режима северной части Тихого океана? Weather Serv Bull 75 (Sp): S97 – S103 (на японском языке)
Google Scholar
Hayashi S, Miyashita I, Fujita I (1968) Морская метеорологическая сводка в западной части северной части Тихого океана зимой.Oceanogr Mag 20: 105–120
Google Scholar
Hayashi S, Takano H, Yamashita A (1970) Морская метеорологическая сводка западной части северной части Тихого океана зимой 1967, 1968 и 1969 годов. Oceanogr Mag 22: 95–123
Google Scholar
Хирота М., Немото К., Мурата А., Фушими К. (1991) Наблюдение за концентрацией углекислого газа в воздухе и поверхностных водах моря в западной части северной части Тихого океана.Oceanogr Mag 41: 19–28
Google Scholar
Hirota M, Nemoto K, Murata A, Fushimi K (1992) Наблюдение за парниковыми газами и веществами, разрушающими озоновый слой, на борту исследовательского судна Ryofu Maru Японского метеорологического агентства. Weather Serv Bull 59: 145–159 (на японском)
Google Scholar
Хирота М., Немото К., Мурата А.М., Фушими К. (1993) Наблюдение за концентрациями метана в воздухе и поверхностных водах моря в западной части северной части Тихого океана.Oceanogr Mag 43: 21–31
Google Scholar
Hood M, Fukasawa M, Gruber N, Johnson GC, Koertzinger A, Sabine C, Sloyan B, Stansfield K, Tanhua T (2009) Повторная гидрография с судов: стратегия устойчивой глобальной программы. В: Hall J, Harrison DE, Stammer D (eds) OceanObs’09: устойчивые наблюдения за океаном и информация для общества, том 2. Публикация ЕКА, WPP-306, Венеция, 21–25 сентября 2009 г. https://doi.org /10.5270/oceanobs09.cwp.44
Hosoda S, Suga T, Shikama N, Mizuno K (2009) Глобальное изменение солености поверхностного слоя, обнаруженное ARGO, и его последствия для интенсификации гидрологического цикла. J Oceanogr 65: 579–586
Статья Google Scholar
Hsu AC, Xue H, Chai F, Xiu P, Han YS (2017) Изменчивость тихоокеанского северного экваториального течения и ее последствия для миграции личинок японского угря ( Anguilla japonica ).Fish Oceanogr 26: 251–267
Статья Google Scholar
Ху Д., Цуй М. (1991) Западное пограничное течение Тихого океана и его роль в климате. Чин Дж. Океанол Лимнол 9: 1–14
Статья Google Scholar
Hu S, Hu D (2014) Изменчивость тихоокеанского северного экваториального течения по данным многократных судовых акустических измерений профилометра доплеровского течения.J Oceanogr 70: 559–571
Статья Google Scholar
Inoue HY (2000) CO 2 Обмен между атмосферой и океаном: исследования углеродного цикла Научно-исследовательского метеорологического института с тех пор. В: Handa N, Tanoue E, Hama T (eds) Динамика и характеристика морского органического вещества. Terra Scientific, Tokyo, pp. 509–531
Глава Google Scholar
Иноуэ Х., Сугимура Й. (1988a) Распределение и вариации углекислого газа в океане в западной части северной части Тихого океана, восточной части Индии и Южном океане к югу от Австралии.Tellus 40B: 308–320
Артикул Google Scholar
Inoue H, Sugimura Y (1988b) Распределение p CO 2 в поверхностных водах западной и центральной экваториальной части Тихого океана во время явления Эль-Ниньо / Южного колебания 1986/87 года. Geophys Res Lett 15: 1499–1502
Статья Google Scholar
Inoue HY, Sugimura Y (1992) Вариации и распределение CO 2 в экваториальной части Тихого океана и над ней в период от явления Эль-Ниньо 1986/88 г. до явления Ла-Нинья 1988/89 г.Tellus 44B: 1–22
Google Scholar
Inoue HY, Sugimura Y, Fushimi K (1987) p CO 2 и δ 13 C в воздухе и поверхностных водах моря в западной части северной части Тихого океана. Tellus 39B: 228–242
Артикул Google Scholar
Inoue HY, Matsueda H, Ishii M, Fushimi K, Hirota M, Asanuma I, Takasugi Y (1995) Долгосрочная тенденция парциального давления углекислого газа ( p CO 2 ) в поверхностных водах западной части северной части Тихого океана, 1984–1993 гг.Tellus 47B: 391–413
Артикул Google Scholar
Иноуэ Х.Й., Исии М., Мацуеда Х., Сайто С., Мидорикава Т., Немото К. (1999) МРТ-измерения парциального давления CO 2 в поверхностных водах Тихого океана в период с 1968 по 1970 год: переоценка и сравнение данных с данными 1980-х и 1990-х годов. Tellus 51B: 830–848
Артикул Google Scholar
IPCC (1990) Изменение климата: межправительственная группа экспертов по научной оценке изменения климата.Издательство Кембриджского университета, Кембридж
Google Scholar
IPCC (2013) Изменение климата 2013: основы физических наук. В: Вклад Рабочей группы I в пятый оценочный доклад межправительственной группы экспертов по изменению климата. Cambridge University Press, Cambridge
Ishida H, Watanabe WY, Ishizaka J, Nakano T, Nagai N, Watanabe Y, Shimamoto A, Maeda N, Magi M (2009) Возможно, недавние изменения в вертикальном распределении и размерном составе хлорофилла -a в западной части северной части Тихого океана.J Oceanogr 65: 179–186
Статья Google Scholar
Ishii M, Inoue HY, Matsueda H, Tanoue E (1998) Тесная связь между сезонным биологическим производством и динамикой растворенного неорганического углерода в секторе Индийского океана и западной части Тихого океана в секторе Антарктического океана. Deep Sea Res I 45: 1187–1209
Статья Google Scholar
Ishii M, Inoue HY, Matsueda H, Saito S, Fushimi K, Nemoto K, Yano T, Nagai H, Midorikawa T. (2001) Сезонные колебания общего неорганического углерода и контролирующие его процессы в поверхностных водах западного Севера Тихоокеанский субтропический круговорот.Mar Chem 75: 17–32
Статья Google Scholar
Ishii M, Inoue HY, Midoriakwa T, Saito S, Tokieda T, Sasano D, Nakadate A, Nemoto K, Metzl N, Wong CS, Feely RA (2009) Пространственная изменчивость и десятилетний тренд океанического CO 2 в теплой / пресной воде западной экваториальной части Тихого океана. Deep Sea Res II 56: 591–606
Статья Google Scholar
Исии М., Косуги Н., Сасано Д., Сайто С., Мидорикава Т., Иноуэ Х.Й. (2011) Закисление океана у южного побережья Японии: результат наблюдений за временными рядами параметров CO 2 с 1994 по 2008 год.Журнал Geophys Res 116: C06022. https://doi.org/10.1029/2010JC006831
Google Scholar
Японское метеорологическое агентство (2013) Отчет о морской диагностике, 2-е изд. http://www.data.jma.go.jp/kaiyou/shindan/sougou/index.html. По состоянию на 30 августа 2017 г. (на японском языке)
Японское метеорологическое агентство (2017) Отчет о морской диагностике. http://www.data.jma.go.jp/kaiyou/shindan/index.html. По состоянию на 30 октября 2017 г. (на японском языке)
Jing Z, Wu L (2010) Сезонное изменение турбулентного диапикнального перемешивания в северо-западной части Тихого океана, вызванное ветровым напряжением.Geophys Res Lett 37: L23604. https://doi.org/10.1029/2010GL045418
Артикул Google Scholar
Камия Х. (2013) О международном сотрудничестве в области океанографических и морских метеорологических наблюдений с исследовательских судов. Weather Serv Bull 80 (Sp): S125 – S138 (на японском языке)
Google Scholar
Канеко I (1998) Эксперимент по циркуляции Мирового океана (WOCE).Weather Serv Bull 65 (Sp): S159 – S161 (на японском языке)
Google Scholar
Kaneko I (2002) Результаты наблюдений WHP, проведенных JMA. Weather Serv Bull 69 (Sp): S147 – S160 (на японском языке)
Google Scholar
Канеко И., Такацуки Ю., Камия Х, Кава С. (1998) Свойства воды и распределение течений вдоль секции WHP-P9 (137 ° –142 ° в.д.) в западной части северной части Тихого океана.J Geophys Res 103: 12959–12984
Статья Google Scholar
Канеко И., Такацуки Ю., Камия Х. (2001) Циркуляция средних и глубинных вод в Филиппинском море. J Oceanogr 57: 397–420
Статья Google Scholar
Карл Д., Лукас Р. (1996) Программа временных рядов океана Гавайев (HOT): предыстория, обоснование и практическая реализация. Deep Sea Res II 43: 129–156
Статья Google Scholar
Katsura S, Oka E, Qiu B, Schneider N (2013) Формирование и субдукция тропических вод северной части Тихого океана и их межгодовая изменчивость.J Phys Oceanogr 43: 2400–2415
Статья Google Scholar
Кавабе М. (1980) Колебания уровня моря вдоль южного побережья Японии и большой меандр в Куросио. J Oceanogr Soc Jpn 36: 97–104
Статья Google Scholar
Kawabe M (1993) Глубоководные свойства и циркуляция в западной части северной части Тихого океана. В: Teramoto T (ed) Глубокая циркуляция океана: физические и химические аспекты, том 59.Серия Elsevier Oceanography. Elsevier, Amsterdam, pp. 17–37.
Глава Google Scholar
Кавабе М. (1995) Вариации пути течения, скорости и объемного переноса Куросио в зависимости от большого меандра. J Phys Oceanogr 25: 3103–3117
Статья Google Scholar
Кавабе М., Тайра К. (1998) Водные массы и свойства на 165 ° в.д. в западной части Тихого океана.J Geophys Res 103: 12941–12958
Статья Google Scholar
Каварада Ю., Сано А. (1969) Распространение хлорофилла и феофитина в западной части северной части Тихого океана. Oceanogr Mag 21: 137–146
Google Scholar
Каварада Ю., Киту М., Фурукава К., Сано А. (1968) Планктон в западной части северной части Тихого океана зимой 1967 года (CSK). Oceanogr Mag 20: 9–29
Google Scholar
Кавасима К., Нагаи Н. (1990) Распространение планктонных хетогнатов в западной части северной части Тихого океана.Oceanogr Mag 40: 53–64
Google Scholar
Килинг К.Д. (1968) Двуокись углерода в поверхностных водах океана: 4. Глобальное распространение. J Geophys Res 73: 4543–4553
Статья Google Scholar
Ким Х., Кимура С., Шинода А., Китагава Т., Сасай Й., Сасаки Х. (2007) Влияние Эль-Ниньо на миграцию и перенос личинок японского угря ( Anguilla japonica ).ICES J Mar Sci 64: 1387–1395
Статья Google Scholar
Kimura Y (1982) Кратковременное изменение температуры вдоль 137 ° E в субтропическом регионе западной части северной части Тихого океана. Oceanogr Mag 32: 1–10
Google Scholar
Кимура С., Цукамото К. (2006) Фронт солености в Северном экваториальном течении: ориентир нерестовой миграции японского угря ( Anguilla japonica ), связанный с пополнением запаса.Deep Sea Res II 53: 315–325
Статья Google Scholar
Кимура С., Цукамото К., Сугимото Т. (1994) Модель миграции личинок японского угря: роль пассатов и фронта солености. Mar Biol 119: 185–190
Статья Google Scholar
Кимура С., Иноуэ Т., Сугимото Т. (2001) Колебания в распределении воды с низкой соленостью в Северном экваториальном течении и ее влияние на перенос личинок японского угря.Fish Oceanogr 10: 51–60
Статья Google Scholar
Kitou M (1974) Chaetognatha. В: Marumo R (ed) Морской планктон. University Tokyo Press, Tokyo, pp 65–85 (на японском языке)
Google Scholar
Kitou M, Tanaka O (1969) Примечание о виде Calanoides (Copepoda, Calanoida) из западной части северной части Тихого океана. Oceanogr Mag 21: 67–81
Google Scholar
Кобаши Ф., Кавамура Х. (2002) Сезонная изменчивость и природа нестабильности субтропического противотечения в северной части Тихого океана и противотечения Гавайских островов Ли.Журнал Geophys Res 107: 3185. https://doi.org/10.1029/2001JC001225
Артикул Google Scholar
Кобаши Ф., Кубокава А. (2012) Обзор субтропического противотечения в северной части Тихого океана и субтропического фронта: роль модовой воды в циркуляции океана и климате. J Oceanogr 68: 21–43
Статья Google Scholar
Кобаши Ф., Мицудера Х., Се С.П. (2006) Три субтропических фронта в северной части Тихого океана: данные наблюдений для подземного фронтогенеза, индуцированного водой.Журнал Geophys Res 111: C09033. https://doi.org/10.1029/2006JC003479
Артикул Google Scholar
Кукетсу С., Дои Т., Мурата А. (2013) Десятилетние изменения растворенного неорганического углерода в Тихом океане. Global Biogeochem Cycles 27: 65–76
Статья Google Scholar
Кубокава А. (1999) Вентилируемый термоклин, на который сильно влияет глубокий перемешанный слой: теория субтропического противотока.J Phys Oceanogr 29: 1314–1333
Статья Google Scholar
Кубокава А., Инуи Т. (1999) Субтропическое противотечение в идеализированной океанской GCM. J Phys Oceanogr 29: 1303–1313
Статья Google Scholar
Kunze E, Firing E, Hummon JM, Chereskin TK, Thurnherr AM (2006) Глобальное глубинное перемешивание, полученное на основе пониженных профилей сдвига ADCP и деформации CTD. J Phys Oceanogr 36 (8): 1553–1576
Статья Google Scholar
Курихара К. (1984) Анализ статистической взаимосвязи между окончанием Байу в Токио и температурой морской воды в западной тропической части Тихого океана.Geophys Mag 41: 159–171
Google Scholar
Курихара К. (1985) Взаимосвязь между температурой приземного воздуха в Японии и температурой морской воды в западной тропической части Тихого океана летом. Tenki 32: 407–417 (на японском языке)
Google Scholar
Курода К. (2017) Линия 137 ° восточной долготы, инициированная доктором Джотаро Мацудзава из Японского метеорологического агентства. Уми но Кенкью (Океанография в Японии) 26: 251–258 (на японском языке с аннотацией на английском языке)
Google Scholar
Линдстром Э., Лукас Р., Файн Р., Фрайринг Э., Годфри С., Мейерс Г., Цучия М. (1987) Исследование циркуляции западного экваториального Тихого океана.Nature 330: 533–537
Статья Google Scholar
Lueker TJ, Dickson AG, Keeling CD (2000) Ocean p CO 2 рассчитано на основе растворенного неорганического углерода, щелочности и уравнений для K 1 и К 2 : проверка на основе лабораторных измерений CO 2 в газе и морской воде при равновесии.Mar Chem 70: 105–119
Статья Google Scholar
Лукас Р. (2001) Опреснение верхнего термоклина в субтропическом круговороте северной части Тихого океана, связанное с десятилетними изменениями количества осадков. Geophys Res Lett 28: 3485–3488
Статья Google Scholar
Лукас Р., Линдстрем Э. (1991) Смешанный слой западной экваториальной части Тихого океана. J Geophys Res 96: 3343–3358
Статья Google Scholar
Луо Дж. Дж., Ямагата Т. (2003) Модельное исследование потепления 1988–89 годов в северной части северной части Тихого океана.J Phys Oceanogr 33: 1815–1828
Статья Google Scholar
Мантуя, штат Нью-Джерси, Hare SR, Zhang Y, Wallace JM, Francis RC (1997) Тихоокеанские междекадные колебания климата с воздействием на производство лосося. Bull Am Meteorol Soc 78: 1069–1079
Статья Google Scholar
Мантила А.В., Рид Дж.Л. (1983) Абиссальные характеристики вод Мирового океана. Deep Sea Res 30: 805–833
Статья Google Scholar
Масудзава Дж. (1967) Океанографический разрез от Японии до Новой Гвинеи на 137 ° в.д. в январе 1967 г.Oceanogr Mag 19: 95–118
Google Scholar
Masuzawa J (1968) Второй рейс CSK, Риофу Мару, январь-март 1968 года. Oceanogr Mag 20: 173–185
Google Scholar
Masuzawa J (1969) Вода в субтропическом режиме. Deep Sea Res 16: 463–472
Google Scholar
Масудзава Дж. (1970) Геострофический поток Северного Экваториального течения к югу от Японии.J Oceanogr Soc Jpn 26: 61–64
Статья Google Scholar
Масудзава Дж. (1972) Характеристики воды центральной части северной части Тихого океана. В: Stommel H, Yoshida K (eds) Kuroshio — его физические аспекты. University Tokyo Press, Tokyo, pp 95–127
Google Scholar
Masuzawa J (1978) Совместное исследование Куросио и прилегающих регионов (CSK) и I. Kaiyo Kagaku (Extra) 1: 16–20 (на японском языке)
Google Scholar
Масудзава Дж., Нагасака К. (1975) Океанографический разрез 137 ° в.д.J Mar Res 33 (Suppl): 109–116
Google Scholar
Масудзава Дж., Акияма Т., Каварада Ю., Савара Т. (1970) Предварительный отчет о круизе Ryofu Maru Ry7001 в январе – марте 1970 г. Oceanogr Mag 22: 1–25
Google Scholar
Максименко Н.А., Банг Б., Сасаки Х. (2005) Наблюдательные свидетельства чередования зональных джетов в Мировом океане. Geophys Res Lett 32: L12607. https: // doi.org / 10.1029 / 2005GL022728
Артикул Google Scholar
McWilliams JC (2016) Субмезомасштабные течения в океане. Proc R Soc A 472: 20160117
Артикул Google Scholar
Майклс А.Ф., Кнап А.Х. (1996) Обзор американского исследования временных рядов Бермудских островов в Атлантическом океане JGOFS и программы Hydrostation S. Deep Sea Res II 43: 157–198
Статья Google Scholar
Мидорикава Т., Умеда Т., Хираиси Н., Огава К., Немото К., Кудо Н., Исии М. (2002) Оценка сезонной чистой продукции сообщества и потока CO 2 на основе баланса углерода выше температуры минимальный слой в западной субарктике северной части Тихого океана.Deep Sea Res I 49: 339–362
Статья Google Scholar
Midorikawa T., Nemoto K, Kamiya H, Ishii M, Inoue HY (2005) Постоянно сильное океаническое погружение CO 2 в западной субтропической части северной части Тихого океана. Geophys Res Lett 32: L05612. https://doi.org/10.1029/2004GL021952
Артикул Google Scholar
Midorikawa T, Ishii M, Nemoto K, Kamiya H, Nakadate A, Masuda S, Matsueda H, Nakano T., Inoue HY (2006) Межгодовая изменчивость зимнего океанического CO 2 и воздуха-моря CO 2 поток в западной части северной части Тихого океана в течение 2 десятилетий.Журнал Geophys Res 111: C07S02. https://doi.org/10.1029/2005jc003095
Артикул Google Scholar
Midorikawa T, Ishii M, Saito S, Sasano D, Kosugi N, Motoi T, Kamiya H, Nakadate A, Nemoto K, Inoue HY (2010) Тенденция к снижению pH, оцененная на основе 25-летнего временного ряда карбонатных параметров в западная часть северной части Тихого океана. Tellus Ser B 62: 649–659
Артикул Google Scholar
Мидорикава Т., Исии М., Сасано Д., Косуги Н., Сугимото Н., Хираиси Н., Масуда С., Сузуки Т., Такамура Т. Р., Иноуэ Г. Ю. (2011) Подкисление океана в субтропической северной части Тихого океана, оцененное на основе накопленных данных по карбонатам.Pap Meteorol Geophys 62: 47–56
Статья Google Scholar
Midorikawa T, Ishii M, Kosugi N, Sasano D, Nakano T, Saito S, Sakamoto N, Nakano H, Inoue HY (2012) Недавнее замедление океанических p CO 2 увеличение в западной части северной части Тихого океана зимой. Geophys Res Lett 39: L12601. https://doi.org/10.1029/2012GL051665
Артикул Google Scholar
Miyake Y, Sugimura Y (1969) Углекислый газ в поверхностных водах и атмосфере Тихого, Индийского и Антарктического океанов.Rec Oceanogr Wks Jpn 10: 23–28
Google Scholar
Miyake Y, Sugimura Y, Saruhashi K (1974) Содержание углекислого газа в поверхностных водах Тихого океана. Rec Oceanogr Wks Jpn 12: 45–52
Google Scholar
Murata AM, Fushimi K (1996) Временные изменения атмосферного и океанического CO 2 в западной части северной части Тихого океана с 1990 по 1993 год: возможная связь с событием ENSO 1991/92 года.J Metereol Soc Jpn 74: 1–20
Статья Google Scholar
Мурата А.М., Канеко И., Немото К., Фусими К., Хирота М. (1998) Пространственные и временные вариации поверхностной морской воды f CO 2 в Куросио у побережья Японии. Mar Chem 59: 189–200
Статья Google Scholar
Нагаи Н., Тадокоро К., Курода К., Сугимото Т. (2015) Широтное распределение хетогнат зимой вдоль меридиана 137 ° в.д. в Филиппинском море.Plankton Benthos Res 10: 141–153
Статья Google Scholar
Нагасака К. (1981) Долгосрочные колебания температуры морской воды. Tenki 28: 553–556 (на японском языке)
Google Scholar
Нагасака К., Савара Т. (1972) Предварительный отчет о круизе НИС Риофу-Мару в январе – марте 1971 года. Oceanogr Mag 24: 25–38
Google Scholar
Накамура Х. (1996) Пикностад на дне вентилируемой части в центральной субтропической части северной части Тихого океана: его распространение и формирование.J Oceanogr 52: 171–188
Статья Google Scholar
Nakano T (2013) О повторном посещении разовых разделов WOCE (Эксперимент по циркуляции Мирового океана) Японского метеорологического агентства. Weather Serv Bull 80 (Sp): S111 – S124 (на японском языке)
Google Scholar
Накано Т. (2016) Выводы за полвека океанографических наблюдений. http://www.nippon.com/en/currents/d00309/.По состоянию на 30 октября 2017 г.
Nakano T, Kaneko I, Endoh M, Kamachi M (2005) Межгодовая и десятилетняя изменчивость керна минимума солености NPIW, наблюдаемая вдоль повторяющихся гидрографических разрезов JMA. J Oceanogr 61: 681–697
Статья Google Scholar
Накано Т., Канеко I, Сога Т., Цуджино Х., Ясуда Т., Ишизаки Х., Камачи М. (2007) Среднеглубинное опреснение субтропического круговорота в северной части Тихого океана, наблюдаемое вдоль гидрографических разрезов JMA и WOCE.Geophys Res Lett 34: L23608. https://doi.org/10.1029/2007GL031433
Артикул Google Scholar
Накано Т., Китамура Т., Сугимото С., Суга Т., Камачи М. (2015) Долгосрочные изменения тропических вод северной части Тихого океана вдоль повторяющегося гидрографического разреза 137 ° в.д. J Oceanogr 71: 229–238
Статья Google Scholar
Nan F, Yu F, Wang R, Si G (2015) Изменения солености океана в субтропическом круговороте северо-западной части Тихого океана: квазидесятилетние колебания и тенденция опреснения.J Geophys Res 120: 2179–2192
Статья Google Scholar
Nan’niti T (1960) Долгопериодические колебания Куросио. Pap Meteorol Geophys 11: 339–347
Статья Google Scholar
Национальный центр геофизических данных (2006) 2-минутные данные глобального рельефа с привязкой к сетке (ETOPO2) v2. Национальный центр геофизических данных, NOAA. https://doi.org/10.7289/v5j1012q. Доступ 9 января 2008 г.
Ниллер П.П., Максименко Н.А., Пантелеев Г.Г., Ямагата Т., Олсон Д.Б. (2003) Приповерхностная динамическая структура расширения Куросио.Журнал J. Geophys Res 108: 3193. https://doi.org/10.1029/2002JC001461
Артикул Google Scholar
Nishikawa H, Toyoda T, Masuda S, Ishikawa Y, Sasaki Y, Igarashi H, Sakai M, Seito M, Awaji T. (2015) Изменения запасов неоновых летающих кальмаров ( Ommastrephes bartramii ), вызванные ветром — весенняя когорта в субтропической северной части Тихого океана. Fish Oceanogr 24: 229–241
Статья Google Scholar
Nitani H (1975) Вариант реки Куросио к югу от Японии.J Oceanogr Soc Jpn 31: 154–173
Google Scholar
Нитта Т., Ямада С. (1989) Недавнее повышение температуры поверхности моря в тропиках и его связь с циркуляцией в Северном полушарии. J Meteorol Soc Jpn 67: 375–382
Статья Google Scholar
Огава К., Такатани С. (1998) Глобальное исследование загрязнения морской среды / Программа мониторинга загрязнения морской среды (GIPME / MARPOLMoN).Weather Serv Bull 65 (Sp): S139 – S141 (на японском языке)
Google Scholar
Ока Э (2009) Сезонные и межгодовые изменения воды в субтропическом режиме северной части Тихого океана в 2003–2006 гг. J Oceanogr 65: 151–164
Статья Google Scholar
Oka E, Qiu B (2012) Прогресс исследований воды в режиме северной части Тихого океана за последнее десятилетие. J Oceanogr 68: 5–20
Статья Google Scholar
Oka E, Suga T (2005) Дифференциальное образование и циркуляция воды центрального режима северной части Тихого океана.J Phys Oceanogr 35: 1997–2011
Статья Google Scholar
Oka E, Qiu B, Takatani Y, Enyo K, Sasano D, Kosugi N, Ishii M, Nakano T, Suga T (2015) Десятилетняя изменчивость субтропического режима субдукции воды и ее влияние на биогеохимию. J Oceanogr 71: 389–400
Статья Google Scholar
Oka E, Katsura S, Inoue H, Kojima A, Kitamoto M, Nakano T, Suga T (2017) Долгосрочные изменения и колебания солености в субтропическом круговороте западной части северной части Тихого океана, выявленные в результате 50-летних наблюдений вдоль 137 ° в.J Oceanogr 73: 479–490
Статья Google Scholar
Olsen A, Key RM, van Heuven S, Lauvset SK, Velo A, Lin X, Schirnick C, Kozyr A, Tanhua T, Hoppema M, Jutterström S, Steinfeldt R, Jeansson E, Ishii M, Pérez FF, Suzuki T (2016) Проект анализа глобальных океанических данных, версия 2 (GLODAPv2) — внутренне согласованный продукт данных для мирового океана. Earth Syst Sci Data 8: 297–323
Статья Google Scholar
Purkey SG, Johnson GC (2012) Глобальное сокращение придонных вод Антарктики между 1980-ми и 2000-ми годами.J Clim 25: 5830–5844
Статья Google Scholar
Qiu B (1999) Сезонная модуляция вихревого поля субтропического противотока в северной части Тихого океана: наблюдения и теория TOPEX / Посейдона. J Phys Oceanogr 29: 2471–2486
Статья Google Scholar
Qiu B, Chen S (2005) Изменчивость струи расширения Куросио, круговорота рециркуляции и мезомасштабных водоворотов в десятилетних масштабах времени.J Phys Oceanogr 35: 2090–2103
Статья Google Scholar
Цю Б., Чен С. (2006) Десятилетняя изменчивость в формировании воды субтропического режима северной части Тихого океана: океанический или атмосферный контроль. J Phys Oceanogr 36: 1365–1380
Статья Google Scholar
Qiu B, Chen S (2010a) Межгодовая изменчивость субтропического противотечения в северной части Тихого океана и связанное с ним мезомасштабное поле вихрей.J Phys Oceanogr 40: 213–225
Статья Google Scholar
Qiu B, Chen S (2010b) Межгодовая изменчивость в бифуркации северного экваториального течения у Филиппин. J Phys Oceanogr 40: 2525–2538
Статья Google Scholar
Qiu B, Chen S (2012) Многолетняя изменчивость уровня моря и круговой циркуляции в северо-западной части тропического Тихого океана.J Phys Oceanogr 42: 193–206
Статья Google Scholar
Qiu B, Chen S (2013) Одновременные декадные мезомасштабные вихревые модуляции в субтропическом круговороте западной части северной части Тихого океана. J Phys Oceanogr 43: 344–358
Статья Google Scholar
Qiu B, Joyce TM (1992) Межгодовая изменчивость в средних и низких широтах западной части северной части Тихого океана. J Phys Oceanogr 22: 1062–1079
Статья Google Scholar
Цю Б., Чен С., Хакер П. (2007) Влияние мезомасштабных водоворотов на изменчивость воды в субтропическом режиме из исследования системы расширения Куросио (KESS).J Phys Oceanogr 37: 982–1000
Статья Google Scholar
Qiu B, Chen S, Carter GS (2012) Параметрическая субгармоническая нестабильность, изменяющаяся во времени, из повторных CTD-съемок в северо-западной части Тихого океана. Журнал J. Geophys Res 117: C09012. https://doi.org/10.1029/2012JC007882
Google Scholar
Qiu B, Rudnick DL, Chen S, Kashino Y (2013a) Квазистационарные северные экваториальные подводные струи через тропический север Тихого океана.Geophys Res Lett 40: 2183–2187
Статья Google Scholar
Qiu B, Chen S, Sasaki H (2013b) Генерация северных экваториальных подводных струй за счет взаимодействий триадных бароклинных волн Россби. J Phys Oceanogr 43: 2682–2698
Статья Google Scholar
Qiu B, Chen S, Schneider N, Taguchi B (2014a) Совместное десятилетнее предсказание динамического состояния системы расширения Куросио.J Clim 27: 1751–1764
Статья Google Scholar
Qiu B, Chen S, Klein P, Sasaki H, Sasai Y (2014b) Сезонная мезомасштабная и субмезомасштабная изменчивость вихрей вдоль субтропического противотечения в северной части Тихого океана. J Phys Oceanogr 44: 3079–3098
Статья Google Scholar
Qiu B, Nakano T, Chen S, Klein P (2017) Субмезомасштабный переход от геострофических потоков к внутренним волнам в северо-западной части верхнего слоя Тихого океана.Нац Коммуна 8: 14055. https://doi.org/10.1038/ncomms14055
Артикул Google Scholar
Qu T, Lindstrom E (2002) Климатологическая интерпретация циркуляции в западной части южной части Тихого океана. J Phys Oceanogr 32: 2492–2508
Статья Google Scholar
Рейнвилл Л., Джейн С. Р., Кронин М. Ф. (2014) Вариации воды в субтропическом режиме северной части Тихого океана по прямым наблюдениям.J Clim 27: 2842–2860
Статья Google Scholar
Рид Дж. Л. (1965) Промежуточные воды Тихого океана. В: Исследования океанографии Джона Хопкинса, том 2. Издательство Университета Джона Хопкинса, Балтимор, стр. 85
Рид Дж. Л. (1973) Мелкие минимумы солености в Тихом океане. Deep Sea Res 20: 51–68
Google Scholar
Рен Л., Райзер С.К. (2010) Наблюдения за изменениями солености в субтропическом термоклине северной части Тихого океана в десятилетнем масштабе времени.Deep Sea Res II 57: 1161–1170
Статья Google Scholar
Revelle R, Suess HE (1957) Обмен углекислого газа между атмосферой и океаном и вопрос об увеличении атмосферного CO 2 в течение последних десятилетий. Tellus 9: 18–27
Статья Google Scholar
Rhein M, Rintoula S, Aoki S, Campos E, Chambers D, Feely R, Gulev S, Johnson G, Josey S, Kostianoy A, Mauritzen C, Roemmich D, Talley L, Wang F (2013) Наблюдения: океан.В: Stocker TF, Qin D, Plattner GK, Tignor M, Allen SK, Boschung J, Nauels A, Xia Y, Bex V, Midgley PM (ред.) Изменение климата 2013: основы физических наук. Вклад рабочей группы I в пятый оценочный доклад межправительственной группы экспертов по изменению климата. Cambridge University Press, Cambridge
Roemmich D, Boebel O, Desaubies Y, Freeland H, King B, LeTraon PY, Molinari R, Owens WB, Riser S, Send U, Takeuchi K, Wijffels S (2001) Argo: the глобальный массив поплавков профилирования.В: Коблинский С.Дж., Смит Н.Р. (ред.) Наблюдение за океанами в 21 веке. Офис проекта GODAE, Бюро метеорологии, Мельбурн, стр. 248–258
Google Scholar
Sagi T (1969a) Концентрация кальция и соотношение хлористости кальция в западной части северной части Тихого океана. Oceanogr Mag 21: 61–66
Google Scholar
Sagi T (1969b) Содержание аммиака в морской воде в западной части северной части Тихого океана.Oceanogr Mag 21: 113–119
Google Scholar
Саги Т. (1970) О распределении нитратного азота в западной части северной части Тихого океана. Oceanogr Mag 22: 63–74
Google Scholar
Саги Т., Юра Т., Акияма Т. (1974) Содержание кадмия в морской воде в прилегающих регионах Японии и в западной части северной части Тихого океана. Oceanogr Mag 25: 101–110
Google Scholar
Saiki M (1982) Связь между геострофическим потоком Куросио в Восточно-Китайском море и его большим меандром на юге Японии.Oceanogr Mag 32: 11–18
Google Scholar
Saiki M (1987) Межгодовая вариация субтропического круговорота в западной части северной части Тихого океана. Уми — Сора 63: 113–125 (на японском языке с аннотацией на английском языке)
Google Scholar
Saito S, Ishii M, Midorikawa T, Inoue HY (2008) Точное спектрофотометрическое измерение pH морской воды T с помощью автоматизированного прибора с использованием проточной ячейки в замкнутом контуре.В: Технический отчет, том 57. Метеорологический научно-исследовательский институт, Цукуба
Сано А., Сато Н., Кубо Н. (1979) Плавающие нефтяные твердые частицы, смолистые шарики, в западной части северной части Тихого океана. Oceanogr Mag 30: 47–54
Google Scholar
Сасано Д., Исии М., Мидориаква Т., Накано Т., Токиеда Т., Учида Х. (2011) Тестирование нового датчика быстрого реагирования «РИНКО». Пап Meteorol Geophys 62: 63–73
Статья Google Scholar
Сасано Д., Такатани Ю., Косуги Н., Накано Т., Мидорикава Т., Исии М. (2015) Многолетние тенденции кислорода и их контролирующие факторы в западной части северной части Тихого океана.Global Biogeochem Cycles 29: 935–956
Статья Google Scholar
Shibano R, Yamanaka Y, Okada N, Chuda T., Suzuki S, Niino H, Toratani M (2011) Реакция морской экосистемы на проходы тайфунов в западной субтропической части северной части Тихого океана. Geophys Res Lett 38: L18608. https://doi.org/10.1029/2011GL048717
Артикул Google Scholar
Шигехара К., Кимура К., Охояма Дж., Кубо Н. (1979) Флуоресцентные материалы в морской среде и нефтяное загрязнение: I.Аналитический метод и предварительный отчет о результате. Oceanogr Mag 30: 61–74
Google Scholar
Shuto K (1996) Внутренние колебания температуры и солености воды вдоль меридиана 137 ° в.д. J Oceanogr 52: 575–595
Статья Google Scholar
Smith WHF, Sandwell DT (1997) Глобальная топография морского дна по данным спутниковой альтиметрии и судовых глубинных зондирований.Science 277: 1956–1962
Статья Google Scholar
Сога Т., Такацуки Ю., Хаяси К. (2005) Изменчивость воды в субтропическом режиме северной части Тихого океана вдоль 137 ° в.д. после середины 1990-х годов. Weather Serv Bull 72 (Sp): S131 – S138 (на японском языке)
Google Scholar
Sudo H (1986) Изменение свойств глубинной воды ниже 4000 м в бассейне Сикоку. Ла Мер 24: 21–32
Google Scholar
Suga T, Hanawa K (1990) Климатология смешанного слоя в северо-западной части субтропического круговорота северной части Тихого океана и область формирования воды субтропического режима.J Mar Res 48: 543–566
Статья Google Scholar
Suga T, Hanawa K (1995a) Циркуляция воды в субтропическом режиме в северной части Тихого океана. J Phys Oceanogr 25: 958–970
Статья Google Scholar
Suga T, Hanawa K (1995b) Межгодовые вариации воды субтропического режима северной части Тихого океана в разрезе 137 ° E. J Phys Oceanogr 25: 1012–1017
Статья Google Scholar
Suga T, Hanawa K, Toba Y (1989) Вода в субтропическом режиме в разрезе 137 ° E.J Phys Oceanogr 19: 1605–1618
Статья Google Scholar
Suga T, Takei Y, Hanawa K (1997) Распределение термостада в субтропическом круговороте северной части Тихого океана: вода центрального режима и вода субтропического режима. J Phys Oceanogr 27: 140–152
Статья Google Scholar
Суга Т., Като А., Ханава К. (2000) Тропические воды северной части Тихого океана: их климатология и временные изменения, связанные со сменой климатического режима в 1970-х годах.Prog Oceanogr 47: 223–256
Статья Google Scholar
Сугимото С., Ханава К. (2011) Квазидесятилетние модуляции промежуточной акватории северной части Тихого океана в поперечном сечении вдоль меридиана 137 ° в.д.: влияние низкой активности Алеутских островов. J Oceanogr 67: 519–531
Статья Google Scholar
Сугимото С., Ханава К. (2014) Влияние вариации траектории Куросио к югу от Японии на формирование воды субтропического режима.J Phys Oceanogr 44: 1065–1077
Статья Google Scholar
Сугимото С., Како С.И. (2016) Десятилетние вариации глубины зимнего смешанного слоя к югу от расширения Куросио и его влияние на зимнюю температуру смешанного слоя. J Clim 29: 1237–1252
Статья Google Scholar
Сугимото Т., Тадокоро К. (1998) Меж десятилетние вариации биомассы планктона и физической среды в северной части Тихого океана.Fish Oceanogr 7: 289–299
Статья Google Scholar
Sugimoto S, Hanawa K, Narikiyo K, Fujimori M, Suga T (2010) Временные вариации переноса Куросио и его связь с атмосферными вариациями. J Oceanogr 66: 611–619
Статья Google Scholar
Suzuki T, Ishii M, Aoyama M, Christian JR, Enyo K, Kawano T, Key RM, Kosugi N, Kozyr A, Miller LA, Murata A, Nakano T, Ono T, Saino T, Sasaki K, Sasano D, Takatani Y, Wakita M, Sabine CL (2013) Проект синтеза данных Pacifica.ORNL / CDIAC-159 NDP-092
Suzuoki T, Matsuzaki M (1983) Распределение смолистых шариков и динамика поверхностных вод в западной части северной части Тихого океана. Oceanogr Mag 33: 19–26
Google Scholar
Судзуоки Т., Сиракава К. (1979) Визуальное наблюдение за плавающими загрязнителями в открытом океане. Oceanogr Mag 30: 55–60
Google Scholar
Свердруп Х.У., Джонсон М.В., Флеминг Р.Х. (1942) Океаны, их физика, химия и общая биология.Прентис-Холл, Нью-Йорк
Google Scholar
Takahashi T (1961) Двуокись углерода в атмосфере и в воде Атлантического океана. J Geophys Res 66: 477–494
Статья Google Scholar
Takahashi T, Sutherland SC (2017) Глобальное парциальное давление CO в поверхностных водах океана 2 База данных : измерения, выполненные в течение 1957–2016 годов (версия 2016) NOAA / NCEI / OCADS NDP-088 (V2016)
Takahashi T, Feely RA, Weiss RF, Wanninkhof RH, Chipman DW, Sutherland SC, Takahashi TT (1997) Глобальный воздушный поток CO 2 .Proc Natl Acad Sci 94: 8292–8299
Статья Google Scholar
Такатани С., Саги Т., Имаи М. (1986) Распределение плавающих смол и нефтяных углеводородов на поверхности в западной части северной части Тихого океана. Oceanogr Mag 36: 33–42
Google Scholar
Такатани С., Оикава К., Кан О (1999) Долгосрочный мониторинг фонового загрязнения морской среды (загрязнения нефтью) в западной части северной части Тихого океана.Weather Serv Bull 66: S89 – S96
. Google Scholar
Такатани И., Сасано Д., Накано Т., Мидорикава Т., Исии М. (2012) Уменьшение растворенного кислорода после середины 1980-х годов в субтропическом круговороте западной части Северной Пацифики вдоль повторяющегося участка 137E. Глобальные биогеохимические циклы 26: GB2013. https://doi.org/10.1029/2011gb004227
Артикул Google Scholar
Такеучи К. (1986) Численное исследование сезонных колебаний субтропического фронта и субтропического противотечения.J Phys Oceanogr 16: 919–926
Статья Google Scholar
Talley LD (1993) Распространение и образование промежуточных вод в северной части Тихого океана. J Phys Oceanogr 23: 517–537
Статья Google Scholar
Талли Л.Д., Пикард Г.Л., Эмери В.Дж., Свифт Дж. Х. (2011) Описательная физическая океанография: введение. Академик, Нью-Йорк, стр. 560
Google Scholar
Tans PP, Fung IY, Takahashi T (1990) Ограничения наблюдений на глобальный бюджет CO в атмосфере 2 .Science 247: 1431–1438
Статья Google Scholar
Томас Л.Н., Тандон А., Махадеван А. (2008) Субмезомасштабные процессы и динамика. В: Hecht MW, Hasumi H (eds) Моделирование океана в режиме завихрения, серия геофизических монографий, том 177. Американский геофизический союз, Вашингтон, округ Колумбия, стр. 17–38
Глава Google Scholar
Thorpe SA (1977) Турбулентность и перемешивание в шотландском озере.Philos Trans R Soc A 286: 125–181
Статья Google Scholar
Torii T, Yoshida Y, Hirayama Z (1959) Химические исследования питательных веществ в морской воде между Кейптауном и заливом Лютцов-Холм, Антарктида. Antarct Rec 8: 482–498
Google Scholar
Toyoda T et al (2017) Межгодовая и десятилетняя изменчивость глубин зимнего смешанного слоя в северной части Тихого океана, обнаруженная ансамблем океанских синтезов.Clim Dyn 49: 891–907
Артикул Google Scholar
Trenberth KE (1990) Последние наблюдаемые меж десятилетние изменения климата в северном полушарии. Bull Am Meteorol Soc 71: 988–993
Статья Google Scholar
Trenberth KE, Hurrell JW (1994) Десятилетние изменения атмосферы и океана в Тихом океане. Clim Dyn 9: 303–319
Статья Google Scholar
Ценг И-Х и др. (2016) Циркуляция северного и экваториального Тихого океана в ретроспективном моделировании CORE-II.Ocean Model 104: 143–170
Статья Google Scholar
Цучия М. (1968) Верхние воды интертропической зоны Тихого океана. В: Исследования океанографии Джона Хопкинса, том 4. Издательство Университета Джона Хопкинса, Балтимор, стр. 50
Цучия М. (1975) Подземные противотечения в восточной экваториальной части Тихого океана. J Mar Res 33 (Suppl): S145 – S175
Google Scholar
Tsuchiya M (1991) Течение антарктических промежуточных вод в западной экваториальной части южной части Тихого океана.Deep Sea Res 38 (Suppl): S273 – S279
Статья Google Scholar
Tsuchiya M, Lukas R, Fine RA, Firing E, Lindstrom E (1989) Источники воды тихоокеанского экваториального подводного течения. Prog Oceanogr 23: 101–147
Статья Google Scholar
Цукамото К. (1992) Открытие нерестилища японского угря. Nature 356: 789–791
Статья Google Scholar
Цукамото К. (2006) Нерест угрей у подводной горы.Природа 439: 929
Артикул Google Scholar
Uchida H, Johnson GC, McTaggart KE (2011) Процедуры калибровки датчика кислорода CTD. В: Руководство по повторной гидрографии GO-SHIP: собрание экспертных отчетов и руководств, отчет IOCCP 14, серия публикаций ICPO 134 Ver.1
Uda M, Hasunuma K (1969) Субтропическое противотечение на востоке в западной части северной части Тихого океана Океан. J Oceanogr Soc Jpn 25: 201–210
Статья Google Scholar
Уэхара К., Тайра К. (1990) Глубокая гидрографическая структура вдоль 12 ° и 13 ° северной широты в Филиппинском море.J Oceanogr 46: 167–176
Google Scholar
Usui N, Tsujino H, Nakano H, Matsumoto S (2013) Долгосрочная изменчивость пути Куросио к югу от Японии. J Oceanogr 69: 647–670
Статья Google Scholar
Вада А., Мидорикава Т., Исии М., Мотои Т. (2011) Изменения углеродной системы в Восточно-Китайском море, вызванные тайфунами Тина и Винни в 1997 году. J Geophys Res 116: C07014.https://doi.org/10.1029/2010JC006701
Google Scholar
Watanabe YW, Ishida H, Nakano T, Nagai N (2005) Пространственно-временное уменьшение питательных веществ и хлорофилла- a в поверхностном смешанном слое западной части северной части Тихого океана с 1971 по 2000 год. J Oceanogr 61: 1011–1016
Артикул Google Scholar
White WB (1995) Разработка глобальной системы наблюдений за изменчивостью температуры в верхних слоях океана в масштабе круговорота.Prog Oceanogr 36: 169–217
Статья Google Scholar
White WB, Hasunuma K, Solomon H (1978) Крупномасштабная сезонная, вековая изменчивость субтропического фронта в западной части северной части Тихого океана с 1954 по 1974 год. J Geophys Res 83: 4531–4544
Article Google Scholar
White WB, Meyers G, Hasunuma K (1982) Пространственно-временная статистика краткосрочной климатической изменчивости в западной части северной части Тихого океана.J Geophys Res 87: 1979–1989
Статья Google Scholar
Whitney FA, Freeland HJ (1999) Изменчивость свойств воды в верхних слоях океана в северо-восточной части Тихого океана. Deep Sea Res II 46: 2351–2370
Статья Google Scholar
Wong APS, Bindoff NL, Church JA (1999) Крупномасштабное опреснение промежуточных вод Тихого и Индийского океанов. Nature 400: 440–443
Статья Google Scholar
Wong APS, Bindoff NL, Church JA (2001) Изменения пресной воды и тепла на севере и юге Тихого океана в период с 1960-х по 1985–1994 годы.J Clim 14: 1613–1633
Статья Google Scholar
Вунш К., Феррари Р. (2004) Вертикальное перемешивание, энергия и общая циркуляция океанов. Ann Rev Fluid Mech 36: 281–314
Статья Google Scholar
Wyrtki K (1961) Физическая океанография вод Юго-Восточной Азии. В: NAGA report 2, Scripps Institute of Oceanograpthy, University of California, San Diego, p 195
Wyrtki K, Kilonsky B (1984) Средняя вода и структура течения во время эксперимента с шаттлом Гавайи-Таити.J Phys Oceanogr 14: 242–254
Статья Google Scholar
Yara Y, Vogt M, Fujii M, Yamano H, Hauri C, Steinacher M, Gruber N, Yamanaka Y (2012) Закисление океана ограничивает вызванное температурой расширение местообитаний кораллов к полюсу вокруг Японии. Биогеонауки 9: 4955–4968
Статья Google Scholar
Ясуда I (2004) Промежуточные воды в северной части Тихого океана: прогресс в SAGE (эксперименте с субарктическим круговоротом) и связанных с ним проектах.J Oceanogr 60: 385–395
Статья Google Scholar
Ясунари Т. (1990) Влияние индийских муссонов на связанную систему атмосфера / океан в тропической части Тихого океана. Meteorol Atmos Phys 44: 29–41
Статья Google Scholar
Юн Дж. Х., Ясуда И. (1987) Динамика большого меандра Куросио: двухслойная модель. J Phys Oceanogr 17: 66–81
Статья Google Scholar
Yuan X, Talley LD (1992) Минимумы солености на мелководье в северной части Тихого океана.J Phys Oceanogr 22: 1302–1316
Статья Google Scholar
Зенимото К., Китагава Т., Миядзаки С., Сасай И., Сасаки Х., Кимура С. (2009) Влияние сезонной и межгодовой изменчивости океанической структуры в западной части Тихого океана Северное экваториальное течение на перенос личинок японского угря Ангилья Японская . J Fish Biol 74: 1878–1890
Статья Google Scholar
Zhai F, Hu D, Qu T (2013) Десятилетние вариации Северного экваториального течения в Тихом океане на 137 ° E.J Geophys Res 118: 4989–5006
Статья Google Scholar
Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.
Настройка вашего браузера для приема файлов cookie
Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:
- В вашем браузере отключены файлы cookie.Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
- Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
- Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
- Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie.Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
- Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.
Почему этому сайту требуются файлы cookie?
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.
Что сохраняется в файле cookie?
Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.
Как правило, в cookie-файлах может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.
Бактериальное дезаминирование кишечника остаточного препарата леводопа от болезни Паркинсона | BMC Biology
Рост и инкубация
Clostridium sporogenes и Eggerthella lentaClostridium sporogenes ATCC15579 выращивали в обогащенном говяжьем бульоне (EBB) с 2 г / л глюкозы [14] и 0,1% Tween 80 (EBB / T) анаэробно (10% H 2 , 10% CO 2 , 80% N 2 ) в рабочей станции Don Whitley Scientific DG250 (LA Biosystems, Waalwijk, Нидерланды) при 37 ° C. Eggerthella lenta DSM2243 выращивали на модифицированной среде DSMZ 78 (DSMZ 78: экстракт говядины, 10,0 г / л; казитон, 30,0 г / л; дрожжевой экстракт, 5,0 г / л; K 2 HPO 4 , 5,0 г. / Л; Твин 80, 0,1%; менадион (витамин K3), 1 мкг / мл; цистеин, 0,5 г / л; гемин, 5 мг / л; l-аргинин 0,1–1,5%) анаэробно (1,5% H 2 , 5% CO 2 , баланс с N 2 ) в анаэробной камере Coy Laboratory (neoLab Migge GmbH, Гейдельберг, Германия) при 37 ° C в шейкере для пробирок при 500 об / мин.При использовании бактерии инокулировали из запасов глицерина, хранящихся при -80 ° C, в соответствующие среды и выращивали в течение 18-24 часов для C. sporogenes и 24-40 часов для E. lenta . Затем ночные мутные культуры разбавляли 1/50 в соответствующем объеме EBB / T или CMM для дальнейших экспериментов с 100 мкМ леводопа (D9628, Sigma), 5-гидрокситритофаном (H9772, Sigma), 50 мкМ 3- (3,4-дигидроксифенил). ) пропионовая кислота (102601, Sigma) или H 2 O в качестве контроля. Все эксперименты проводили в трех повторностях (3 биологических повтора).
Производство и очистка белка
Гены, кодирующие трансаминазу, из C. sporogenes (дополнительный файл 1: таблица S3) были амплифицированы с использованием ДНК-полимеразы Phusion High-fidelity и праймеров, перечисленных в дополнительном файле 1: таблица S3. Все амплифицированные гены были клонированы в pET15b, за исключением EDU37032, который был клонирован в pET28b (дополнительный файл 1: таблица S3). Плазмиды поддерживали в E. coli DH5α и проверяли секвенированием по Сэнгеру перед трансформацией в E.coli BL21 (DE3). Ночные культуры разводили 1:50 в свежей среде LB с соответствующим антибиотиком и выращивали до OD600 = 0,7–0,8 при встряхивании при 37 ° C. Трансляцию белка индуцировали с помощью 1 мМ изопропил-β-d-1-тиогалактопиранозида (IPTG, 11411446001, Roche Diagnostics), и культуры инкубировали в течение ночи при 18 ° C. Клетки промывали 1/5 объема в 1 × ледяном PBS и хранили при -80 ° C или использовали непосредственно для выделения белка. Осадки клеток размораживали на льду и ресуспендировали в 1/50 буфера А (300 мМ NaCl; 10 мМ имидазол; 50 мМ KPO4, pH 8.0), содержащего 0,2 мг / мл лизоцима (105281, Merck) и 2 мкг / мл ДНКазы (11284932001, Roche Diagnostics), и инкубировали не менее 10 мин на льду перед обработкой ультразвуком (10 циклов по 15 с с 30-секундным охлаждением до 8 мкм. амплитуда) с помощью Soniprep-150 plus (Beun de Ronde, Abcoude, Нидерланды). Клеточный дебрис удаляли центрифугированием при 20 000 × g в течение 20 мин при 4 ° C. Белки с 6-кратной гист-меткой очищали с использованием агарозной матрицы никель-нитрилотриуксусной кислоты (Ni-NTA) (30250, Qiagen). Бесклеточные экстракты загружали на 0.5 мл матрицы Ni-NTA и инкубировали на роликовом шейкере в течение 2 ч при 4 ° C. Матрицу Ni-NTA трижды промывали 1,5 мл буфера B (300 мМ NaCl; 20 мМ имидазол; 50 мМ KPO4, pH 8,0) перед элюированием буфером C (300 мМ NaCl; 250 мМ имидазол; 50 мМ KPO4, pH 8,0). ). Имидазол удаляли из очищенных белковых фракций с использованием центрифужных фильтров Amicon Ultra (UFC505024, Merck), трижды промывали и восстанавливали в буфере D (50 мМ трис-HCl; 300 мМ NaCl; pH 7,5). Концентрации белка измеряли спектрофотометрически (Nanodrop 2000, Isogen, De Meern, Нидерланды) с использованием прогнозируемого коэффициента экстинкции и молекулярной массы из инструмента ExPASy ProtParam (www.web.expasy.org/protparam/).
Тест активности трансаминаз
Очищенные трансаминазы инкубировали с 1 мМ субстратом, 2 мМ α-кетоглутаровой кислотой и 0,1 мМ PLP (пиридоксаль-5-фосфат, P9255, Sigma, Нидерланды) в буфере D с концентрацией фермента 50 нМ для тирозина, триптофана или 5-HTP в качестве субстрата и концентрация фермента 500 нМ для фенилаланина и леводопа в качестве субстрата. Ферментные реакции инкубировали 0,5 ч при 37 ° C; реакции были остановлены с помощью 0.7% (об. / Об.) Хлорная кислота (1: 1). Активность трансаминаз тестировали с использованием набора для определения l-глутаминовой кислоты (K-GLUT, Megazyme Inc., Wicklow, Ирландия) в соответствии с процедурой микропланшетного анализа производителя с некоторыми модификациями. Поставляемый буфер был заменен буфером D (описанным выше, чтобы предотвратить окисление субстратов / продуктов). Приготовили реакционную смесь из 50 мкл буфера D, 10 мкл реакционной смеси для гашеного образца, 20 мкл раствора NAD + / йодонитротетразолия хлорида, 5 мкл раствора диафоразы и 5 мкл раствора глутаматдегидрогеназы (GIDH) и восстановили до конечного объема 290 мкл с H 2 O.Поглощение при 492 нм измеряли после 10 мин инкубации с использованием считывающего устройства для микропланшетов (спектрофотометр Synergy HTX, BioTek, BioSPX, Нидерланды), и фон вычитали из начального считывания перед добавлением раствора GIDH.
Целевой мутагенез
Нарушения генов в Clostridum sporogenes проводили с использованием системы ClosTron [42, 43]. Эта система способствует целенаправленному мутагенезу с использованием интрона Ll.LtrB группы II Lactococcus lactis .Интроны, нацеленные на fldC (CLOSPO_311) или CLOSPO_1732 (кодирование трансаминазы), были сконструированы с использованием инструмента дизайна интронов ClosTron (http://www.clostron.com) и были заказаны в pMTL007C-E2 от ATUM (Ньюарк, Калифорния, США). ), что приводит к pMTL007C-E2_Cs-fldC-561a и pMTL007C-E2_Cs-CLOSPO_1732-493s соответственно. Плазмиды были перенесены на C. sporogenes путем конъюгации, как описано ранее [43], с использованием E. coli CA434 ( E. coli HB101 (Bio-Rad Laboratories, Нидерланды)), несущего широкий хозяин IncPß + конъюгационный плазмида pRK24 [44] как штамм-донор. E. coli CA434, несущая pMTL007C-E2_Cs-fldC-561a или pMTL007C-E2_Cs-CLOSPO_1732-493s, была выращена в бульоне Лурия (LB) с 10 мкг / мл тетрациклина и 25 мкг / мл хлора-T-LR00K для pMTL7 E2 соответственно). Суспензии клеток из 1 мл ночной культуры промывали один раз PBS, и осадок клеток ресуспендировали в 200 мкл ночной суспензии клеток C. sporogenes . Бактериальную смесь наносили каплями по 10 мкл на чашки с триптиказо-соевым агаром (TSA) и инкубировали в течение 24 ч в анаэробных условиях при 37 ° C.Последовательно к планшетам с пятнами добавляли 1 мл PBS и смесь донор-реципиент соскребали с планшета; последовательно соскобленную суспензию распределяли по чашкам с TSA, содержащим 50 мкг / мл неомицина (для предотвращения роста E. coli ) и 15 мкг / мл хлорамфеникола для отбора конъюгатов C. sporogenes . Устойчивые к хлорамфениколу колонии C. sporogenes повторно наносили штрихами на чашки TSA, содержащие 50 мкг / мл неомицина и 2,5 мкг / мл эритромицина (для выбора для вставки интрона), несколько раз.Чтобы убедиться, что плазмиды были интегрированы, колонии были проверены и отобраны на их чувствительность к хлорамфениколу, а геномная ДНК была проверена с помощью ПЦР (дополнительный файл 1: рис. S1F и 2A).
Образцы кала от пациентов с болезнью Паркинсона и здорового контроля соответствующего возраста
Образцы кала от пациентов с диагнозом БП ( n = 10) и здорового контроля соответствующего возраста ( n = 10) были взяты из группы двигательного расстройства. Center в Медицинском центре Университета Раша, Чикаго, Иллинойс, США, опубликовано ранее [34].Все испытуемые дали согласие на использование своих образцов для исследования. БП диагностировали в соответствии с критериями банка мозга Великобритании, как описано ранее [34]. Субъектам исследования были предоставлены расходные материалы и инструкции по сбору фекалий в домашних условиях с использованием системы газогенерирующих пакетов BD Gaspak EZ Anaerobe с индикатором (Ref 260683; Becton, Dickinson and Company, Sparks, MD), чтобы свести к минимуму воздействие фекалий до высоких концентраций. кислородная атмосфера, которая может изменить микробиоту. Субъектам было предложено опорожнить кишечник в течение 24 часов после посещения с целью исследования.Перед тем, как принести анаэробный мешок с фекалиями в больницу, испытуемые хранили запечатанный анаэробный мешок с фекалиями в холодной среде. Затем образцы фекалий немедленно хранили при -80 ° C до анализа.
Инкубация фекальных метаболитов пациентов с PD и HC
Образцы стула суспендировали 1: 1 (мас. / Об.) В EBB / T и инкубировали анаэробно (10% H 2 , 10% CO 2 , 80% N 2 ) в рабочей станции Don Whitley Scientific DG250 (LA Biosystems, Waalwijk, Нидерланды) при 37 ° C с 100 мкМ 3- (3,4-дигидроксифенил) -DL-лактатом натрия (39363, Sigma).Образцы отбирали через 0, 20 и 45 ч и анализировали с помощью ВЭЖХ-ED, как описано ниже.
ВЭЖХ-ED / УФ-анализ и подготовка образцов
Для суспензий бактериальных клеток 1 мл метанола добавляли к 0,25 мл клеточной суспензии и хранили при -20 ° C до дальнейшего использования. Для инкубации фекальных метаболитов 300 мкл метанола добавляли к 75 мкл фекальной суспензии и хранили при -20 ° C до дальнейшего использования. Метаболиты из образцов стула экстрагировали путем суспендирования стула в воде в соотношении 1: 1 (мас. / Об.) С последующей гомогенизацией путем интенсивного встряхивания, сохраняя образцы как можно более холодными.Гомогенизированные суспензии центрифугировали при 3500 × g в течение 20 мин при 4 ° C и последовательно к 0,4 мл супернатанта добавляли 1,6 мл метанола. Из образцов бактериальной инкубации, фекалий или стула клетки и белковые осадки удаляли центрифугированием при 20000 × g в течение 10 минут при 4 ° C. Супернатант переносили в новую пробирку, и фракцию метанола упаривали в скоростной вакуумной сушилке Savant (SPD131, Fisher Scientific, Landsmeer, Нидерланды) при 60 ° C в течение 1.5–2 ч. Водную фракцию восстанавливали 0,7% HClO 4 до соответствующего объема. Образцы фильтровали и вводили в систему HPLC-ED (Alliance Separations Module 2695, Waters Chromatography BV, Etten-Leur, Нидерланды; электрохимический детектор Dionex ED40, Dionex, Саннивейл, США, с рабочим электродом из стеклоуглерода (амперометрия постоянного тока при 0,8 или 1,0 В, с Ag / AgCl в качестве электрода сравнения)). Образцы анализировали на колонке C18 (Kinetex 5 мкМ, C18 100 Å, 250 × 4,6 мм, Phenomenex, Утрехт, Нидерланды) с использованием градиента воды / метанола с 0.1% муравьиная кислота (0–10 мин, 95–80% H 2 O; 10–20 мин, 80–5% H 2 O; 20–23 мин, 5% H 2 O; 23– 31 мин, 95% H 2 O). Метаболиты фекальной суспензии вводили дважды и анализировали при амперометрии постоянного тока при 0,8 В (для DHPPA) и при 1,0 В (для 3-HPPA). Снижение напряжения делает обнаружение более селективным для более легко окисляемых соединений [45], таких как DHPPA, но делает 3-HPPA невидимым для обнаружения. Для обнаружения метаболитов C. sporogenes и выделения пиков использовалась другая система HPLC-ED (Jasco AS2059 plus autosampler, Jasco Benelux, Утрехт, Нидерланды; насос Knauer K-1001, Separations, H.I. Ambacht, Нидерланды) с тем же детектором (ED40) и тем же градиентом, что и описанный выше. Метаболиты фенилаланина были обнаружены путем введения тех же образцов в систему HPLC-UV (Alliance Separations Module 2695, Waters Chromatography B.V, Etten-Leur, Нидерланды; УФ-детектор TSP UV6000LP (длина волны 260 нМ) Thermo Scientific, Нидерланды). Образцы для выделения пика разделяли на колонке Vydac Semi-preparative C18 (218TP510, 5 мкм, 300 Å, 10 мм × 250 мм, VWR International B.V, Амстердам, Нидерланды) со скоростью 3 мл / мин, используя тот же градиент, что и выше. Запись и анализ данных проводились с использованием программного обеспечения Chromeleon (версия 6.8 SR13). Достоверность была проверена с использованием двухвыборочного теста с равной дисперсией (гомоскедастический) t Стьюдента (Microsoft Excel 2019, версия 1808).
Экстракция катехолов из стула для количественной оценки DHPPA
Катехолы были извлечены из образцов стула пациентов с болезнью Паркинсона и HC с использованием порошка активированного оксида алюминия (199966, Sigma), как описано ранее [14] с некоторыми модификациями.Объем 200 мкл 50% суспензии стула (описанной выше) использовали с 1 мМ DHBA (3,4-дигидроксибензиламингидробромид, 858781, Sigma) в качестве внутреннего стандарта. Образцы доводили до pH 8,6 с помощью 800 мкл буфера TE (2,5% EDTA; 1,5 M Tris / HCl, pH 8,6) и добавляли 5–10 мг оксида алюминия. Суспензии перемешивали на роликовом шейкере при комнатной температуре в течение 20 минут, затем последовательно центрифугировали в течение 30 с при 20000 × g и трижды промывали 1 мл H 2 O путем аспирации. Катехолы элюировали, используя 0.7% HClO 4 и фильтровали перед введением в систему HPLC-ED, как описано выше (амперометрия постоянного тока при 0,8 В). Стандартную кривую вводили для количественного определения концентраций DHPPA в 50% (мас. / Об.) Образцах стула. Достоверность проверяли с помощью непарного непараметрического критерия Манна-Уитни (GraphPad Prism, версия 7).
Эксперименты в ванне для органов
Образцы дистальных отделов подвздошной кишки были взяты у взрослых самцов мышей C57BL / 6 J дикого типа (18–20 недель), которых умерщвляли для другой цели.Собранную ткань немедленно удаляли, помещали и промывали 0,85% NaCl. Кольца диаметром примерно 3 мм были вырезаны и помещены в ванну для органов (Станция для ванн для тканей с датчиком силы SSL63L, Biopac Systems Inc., Варна, Болгария), заполненная раствором Кребса-Хенселейта (NaCl, 7,02 г / л; KCl, 0,44 г. / Л; CaCl 2 .2H 2 O, 0,37 г / л; MgCl 2 .6H 2 O, 0,25 г / л; NaH 2 PO 4 .H 2 O, 0,17 г / л; глюкоза 2,06 г / л; NaHCO 3 , 2.12 г / л), насыщенный газовой смесью карбогена (5% CO 2 , уравновешенный O 2 ) при 37 ° C. Кольца подвздошной кости уравновешивали не менее 45–60 мин с заменой раствора Кребса-Хенселейта примерно каждые 15 мин. Последовательно добавляли 50 мкМ ацетилхолина (ACh) (Sigma, A2661), чтобы вызвать стабильную повторяющуюся реакцию мышечных сокращений, а через ~ 5 мин — 100 мкМ DHPPA (102601, Sigma) ( n = 6 биологических повторов, 1 –4 технических повтора), 3-HPPA (, Sigma) ( n = 4 биологических повтора, 2 технических повтора) или леводопа (D9628, Sigma) ( n = 3 биологических повтора, 2 технических повтора). в течение ~ 15 мин до промывания подвздошных колец.Этот шаг повторяли 1–4 раза перед препарированием подвздошной кишки. В качестве контроля добавляли ACh в течение не менее 20 минут с 0,05% этанолом (растворитель DHPPA) или без него через 5 минут для проверки спонтанного уменьшения. Для кривой доза-ответ ( n = 4 биологических повтора) каждые 15 мин кумулятивная доза DHPPA увеличивалась в 2 раза в диапазоне от 8 до 512 мкМ. Данные были записаны и проанализированы в BioPac Student Lab 4.1 (сборка: 12 февраля 2015 г.). Частоты были извлечены с помощью быстрого преобразования Фурье (БПФ) в ячейках с 5-минутными интервалами.Была извлечена максимальная амплитуда всех наблюдаемых частот и вычислено среднее уменьшение всех частот с течением времени. Достоверность проверяли с использованием одностороннего дисперсионного анализа с повторными измерениями (RM) с последующим тестом Тьюки (GraphPad Prism, версия 7).
ЯМР
Образцы заменяли один раз на 99,9 ат.% D 2 O с промежуточной лиофилизацией, окончательно растворяли в 650 мкл D 2 O. Одно- и двумерные спектры ЯМР 1 H и 13 C регистрировали при температуре зонда 25 ° C на спектрометре Varian Inova 500 (Отделение ЯМР, Университет Гронингена).Химические сдвиги выражены в миллионных долях относительно внешнего ацетона (δ 1 H 2,225; δ 13 C 31,08). Спектры ЯМР 1D 500 МГц записывали с шириной спектра 5000 Гц в 16k комплексных точек данных с использованием импульса WET1D для подавления сигнала HOD. Гомоядерная развязка 1 D 125 МГц 13 C ЯМР-спектры записывали со спектральной шириной 31000 Гц в 64k комплексных точках данных. 2D 1 H- 13 C HSQC-спектроскопия была выполнена с использованием редактирования множественности, отображая сигналы CH 2 в отрицательной плоскости, в то время как CH и CH 3 остаются в положительной плоскости.2D 13 C- 1 H HMBC спектроскопия была проведена с подавлением корреляций одинарных связей. Спектры обрабатывали с помощью MestReNova v9.1 (Mestrelabs Research SL, Сантьяго-де-Компостела, Испания).
LC-MS
Анализ ВЭЖХ-МС выполняли с использованием системы ВЭЖХ Accella1250 в сочетании со настольным ESI-MS Orbitrap Exactive (Thermo Fisher Scientific, Сан-Хосе, Калифорния, США) в режиме отрицательных и положительных ионов. Образцы анализировали на колонке C18 (Shim Pack Shimadzu XR-ODS 3 × 75 мм) с использованием градиента вода / ацетонитрил с 0.1% муравьиная кислота (0–5 мин, 98–90% H 2 O; 5–10 мин, 90–5% H 2 O; 10–13 мин, 5% H 2 O; 13– 14 мин, 98% H 2 O). Анализ данных проводился с использованием программного обеспечения Qual Browser Thermo Xcalibur (версия 2.2 SP1.48).
ВЭЖХ-МС анализ образцов экстракции оксида алюминия был выполнен с использованием системы UPLC Waters Acquity Class-I (Waters Chromatography BV, Etten-Leur, Нидерланды), соединенной с MaXis Plus Q-TOF (Bruker, Billerica, MA, USA). в режиме отрицательных ионов с добавлением после колонки 3 мкл / мин ESI Tune Mix (G1969-85000; Agilent Technologies, Мидделбург, Нидерланды) для калибровки массы.Образцы анализировали на колонке C18 (Shim Pack Shimadzu XR-ODS 3 × 75 мм) с использованием градиента вода / ацетонитрил с 0,1% муравьиной кислоты (0–5 мин, 98–90% H 2 O; 5–10 мин, 90–5% H 2 O; 10–13 мин, 5% H 2 O; 13–15 мин, 2% H 2 O; 15–17 мин, 98% H 2 O ). Анализ данных выполнялся с помощью Bruker Compass Data Analysis (версия 4.2 SR1).
Bioinformatics
Филогенетические деревья
Белки были обработаны методом BLAST против локальной базы данных BLAST, созданной из последовательностей белков проекта дорожной карты проекта NIH Human Microbiome Project (HMP) (PRJNA43021) с использованием BLAST 2.9.0+, NCBI. 100 лучших совпадений BLASTp были выровнены с помощью инструмента множественного выравнивания на основе ограничений (COBALT, NCBI) и преобразованы в дерево расстояний с помощью NCBI TreeView (параметры: быстрое минимальное развитие; максимальная разница последовательностей, 0,85; расстояние, Гришин).
Анализ данных последовательностей
Данные демультиплексированных последовательностей парных концов из образцов кала и сигмовидной кишки пациентов с БП и здоровых людей из контрольной группы от Keshavarzian et al. [34] (биопроект PRJNA268515) анализировали с помощью Kraken2 (v2.0.9, 7 апреля 2020 г.), система таксономической классификации k -mer [46] с использованием стандартной базы данных Kraken2. Для дальнейшей оценки численности видов выход Kraken2 был проанализирован с помощью Bracken (байесовская переоценка численности с помощью KrakEN; v2.6.0, 3 апреля 2020 г.) [47]. Количество картированных считываний от бактерий с кластером генов fld [11] было извлечено из результатов Брекена, и численность была рассчитана относительно общего числа картированных считываний бактерий.
JDB | Бесплатный полнотекстовый | Костный морфогенетический белок-2 в развитии и костном гомеостазе
BMP-2 играет много ролей во время развития.С самых ранних стадий эмбриогенеза BMP-2 регулирует формирование дорсальной / вентральной (D / V) и передней / задней (A / P) осей [59,60,61,62]. Регулируя формирование осей, BMP-2 также участвует в образовании сомитов и соматическом хондрогенезе, особенно в позвоночном и осевом скелете [63,64,65]. Кроме того, BMP-2 имеет решающее значение почти на каждой стадии развития нервной системы и необходим для закрытия нервной трубки [11,12,22,66]. БМП-2 также участвует в разработке оптической системы.В частности, он способствует ремоделированию склеры, а также способствует формированию системы сетчатки [13,67,68]. Однако сверхэкспрессия BMP-2 может привести к ранней миопии, и, следовательно, его активность должна строго регулироваться во время эмбриогенеза и на протяжении всего развития [67,68,69]. Помимо формирования клеточного паттерна, нейрогенеза и развития глаз, BMP-2 участвует в формировании пальцев. BMP-2 способствует запрограммированной гибели клеток, чтобы инициировать апоптоз в дистальных отделах конечностей, обеспечивая образование пальцев; Отсутствие БМП-2 приводит к неправильному развитию цифр [7,20,28,70].Одновременно BMP-2 участвует в формировании мезодермы и кардиогенезе [34]. BMP-2 играет важную роль во время эпителиально-мезенхимального перехода (EMT) и образования миокардиальных клеток для обеспечения правильного развития сердца [6,23,71]. BMP-2 KOs у мышей приводили к порокам сердца, сердечных клапанов и нерегулярному формированию паттерна миокарда, что приводило к летальности на ранних эмбриональных стадиях [23,24,26,34,35]. Кроме того, у мышей с дефицитом BMP-2 обнаруживалась деформация как хориона, так и амниона, что свидетельствует о разнообразной роли BMP-2 во многих процессах развития сердца [35,72,73,74].Помогая кардиогенезу, BMP-2 также участвует в формировании легочной системы. Например, когда легкое начинает развиваться на ранних стадиях эмбриона, BMP-2 активирует сигнальные пути BMP, стимулирует образование альвеолярных клеток и регулирует ремоделирование легких [75,76,77]. BMP-2 также регулирует легочную спецификацию и ветвление, увеличивая площадь альвеолярной поверхности [76,77]. Наконец, BMP-2 необходим для правильного остеогенеза, хондрогенеза и адипогенеза во время развития [2,16,18,78].BMP-2 является лигандом, необходимым для активации путей Smad и Non-Smad, ведущих к развитию костей, хрящей и жира; КО или недостаточная экспрессия BMP-2 приводят к неспособности этих клеток и тканей формироваться [18,32,79,80]. Таким образом, БМП-2 играет важную роль на многих этапах разработки и демонстрирует свою многофункциональность.2.1. Рецепторы и экспрессия BMP-2
За последние десятилетия исследователи обнаружили несколько мутаций в гене BMP-2, раскрывая важность BMP-2 в регуляции гомеостаза и выживаемости костей.Например, мутации в гене BMP-2 могут вызывать измененную передачу сигналов, приводящую к брахидактилии и летальности, поскольку нижестоящие эффекторные белки и сигнальные пути не активируются эффективно [34,81,82,83]. Чтобы BMP-2 вызвал свои многочисленные клеточные ответы, он должен связываться со специфическими рецепторами и активировать сигнальный каскад. Однако, прежде чем исследовать функциональную роль BMP-2, мы сначала должны исследовать, как BMP-2 становится функциональным (или как он транскрибируется и транслируется). После того, как ген BMP-2 транскрибируется и транслируется, BMP-2 еще не функционирует.Чтобы стать активным, новообразованный препропротеин подвергается протеолитическому расщеплению под действием пропротеинконвертазы субтилизин / кексин типа 5 (PCSK5) на С-конце [84]. Функционально расщепленный 115 аминокислот (AA) белок BMP-2 секретируется из клетки и служит аутокринным или паракринным фактором, связывающимся с рецепторами как на остеобластах, так и на остеокластах [46,47,85]. После попадания в костный матрикс или кровь, BMP-2 может дополнительно обрабатываться протеазами. В частности, эти протеазы, расположенные в сыворотке, способны расщеплять BMP-2, 4 и 7, что может де-дифференцировать мышечные клетки тритона и позволить им повторно войти в клеточный цикл.Здесь дедифференцированные клетки способны передавать судьбы других клеток, в зависимости от того, каким факторам они подвергаются [86,87]. Следует изучить дальнейшие исследования, выясняющие этот механизм на других животных. Связывание BMP-2 с рецепторами серин / треонинкиназ BMP типа I и типа II приводит к активации нескольких нижестоящих сигнальных путей наряду с положительной регуляцией гена BMP-2. Клетки могут экспрессировать различные типы рецепторов, расположенных на поверхности клетки. BMP-2 может связываться с рецептором BMP типа Ia (BMPRIa), рецептором BMP типа Ib (BMPRIb) и рецептором активина типа Ia [88,89].BMPRIa располагается на большинстве клеточных поверхностей, тогда как BMPRIb встречается реже [90,91,92]. BMP-2 предпочтительно связывается с предварительно сформированными комплексами BMPRII-BMPRIa / b или связывается с BMPRIa специфически на своей петле beta4beta5, которая затем может олигомеризоваться с BMPRII [93,94]. Кроме того, BMPRII может также олигомеризоваться только с BMPRIa / b, когда BMP-2 связывается, что вызывает олигомеризацию рецепторов типа I с рецепторами типа II и активирует различные пути передачи сигналов [95]. BMPR, как известно, экспрессируются как на остеобластах, так и на остеокластах, что имеет решающее значение для ремоделирования кости и гомеостаза.На этих клетках передача сигналов рецептора BMP также регулируется локализацией рецепторов в определенных мембранных доменах. Рецепторы могут быть локализованы в кавеолах, ямках, покрытых клатрином (CCPs), и липидных рафтах, расположенных на плазматической мембране [96,97,98,99,100]. Их локализация может определять, какие сигнальные пути активируются [96,97,99,101]. Поскольку BMPR регулируют многие пути, мутации могут быть вредными. Например, на ранних стадиях развития большинство генных мутаций в гене BMPRIa приводит к более короткой последовательности белка, что приводит к неадекватной передаче сигналов BMP, поскольку специфические лиганды неспособны связываться с BMPRs [102,103,104,105,106,107].BMPRIa имеет около 60 известных мутаций, которые вызывают синдром ювенильного полипоза, который может приводить к нерегулируемому росту клеток и вызывать образование эктопических полипов [102,103,104,105,106,107]. Кроме того, BMP-2 может связываться с тремя рецепторами типа II, включая рецептор BMP типа II (BMPRII), рецептор активина типа IIa (ActRIIa) и рецептор активина типа IIb [1,108]. BMP-2 связывается с BMPRIa с наивысшим сродством [94,109]. Как только BMP-2 связывается с BMPR, фосфорилирование BMPRIa с помощью BMPRII приводит к адипогенезу, хондрогенезу и остеогенезу, тогда как фосфорилирование BMPRIb приводит к апоптозу и гибели клеток [28, 34,95,110,111,112].Кроме того, различные паттерны олигомеризации рецепторов определяют пути активации BMP-2. Напр., Передача сигналов Smad активируется, когда BMP-2 связывается с предварительно сформированными гетеромерными комплексами, тогда как передача сигналов Non-Smad (такая как ERK) активируется, когда BMP-2 связывается с BMPRIa, а BMPRII рекрутируется после [18,19,109]. Следовательно, локализация и олигомеризация BMPR будут определять сигнальный ответ после связывания BMP-2. [16,17,113,114,115]. Помимо BMPR, существуют корецепторы, такие как BMP и мембраносвязанный ингибитор активина (BAMBI), Dragon, эндоглин и бетагликан, которые могут быть связаны с BMPRIa, которые могут усиливать или ингибировать передачу сигналов BMP [112].Например, BAMBI — это псевдорецептор, расположенный рядом с BMPR. Когда BMP-2 связывается, BMPR активируют BAMBI, а BAMBI снижает ответ передачи сигналов BMP как негативный регулятор [116,117,118]. Кроме того, ДРАКОН усиливает передачу сигналов BMP во время развития, особенно в нервной системе [119, 120, 121]. Эндоглин, трансмембранный гликопротеин типа 1, является корецептором BMPRII и имеет решающее значение для кардиогенеза и ангиогенеза, наряду с влиянием на передачу сигналов Non-Smad, влияя на рост и адгезию клеток [122, 123, 124].Бетагликан — это обычно экспрессируемый протеогликан, который служит корецептором BMPRII. Одна из его функций — негативно регулировать передачу сигналов BMP путем активации ингибина, который затем связывается с рецептором и предотвращает связывание BMP-2 [125,126,127,128]. Наряду с этими корецепторами и ассоциированными белками предыдущие исследования продемонстрировали сайт связывания гепарина на BMP-2, который регулирует его активность [129, 130, 131, 132]. Этот сайт связывания гепарина регулирует активность BMP-2, поскольку, когда он проходит через ECM клеток, он связывается с белками ECM, такими как фибронектин и тенасцин C [133, 134, 135].Это связывание ограничивает паттерны миграции и движения BMP-2, ограничивая его биодоступность и активность по всему телу, что может быть полезно при поддержании доставки rhBMP-2 в клинических применениях [136, 137]. Это дополнительно демонстрируется тем, что когда этот сайт связывания мутируется, активность BMP-2 увеличивается [129,138]. Эта обширная регуляция BMP-2 представляет собой комбинацию отрицательной обратной связи, корецепторов / белков и связывающих доменов. Кроме того, исследования показали, что BMP-2 экспрессируется во множестве клеток.Экспрессируясь в основном по всему телу, BMP-2 способен эффективно функционировать и активировать многие сигнальные пути, перечисленные выше. Например, BMP-2 экспрессируется во многих тканях, включая печень и легкие, а также в костях (прежде всего в остеобластах и остеоцитах) [37, 139]. Кроме того, BMP-2 может быть паракринным или аутокринным, действуя как местный или системный фактор для инициирования межклеточных ответов или перемещаясь через сыворотку к клеткам-мишеням [140, 141, 142]. Более того, в отсутствие BMP-4 было показано, что BMP-2 компенсирует его функции, особенно в хондроцитах, костях и во время развития [32,143].Эти паттерны экспрессии жизненно важны для обеспечения надлежащего поддержания альвеолярной ткани, гепатоцитов, процессов развития и гомеостаза костей.2.2. Структура BMP-2 и связывание рецептора
BMP-2 был впервые обнаружен в 1965 году из-за его мощных остео- и хондроиндуктивных способностей; однако структура BMP-2 не была кристаллизована до 1999 года. После того, как BMP-2 был синтезирован в виде пропротеина из 453 остатков, он стал гликозилированным и в дальнейшем протеолитически расщеплялся и димеризовался. Это дает окончательный зрелый гомодимер с дисульфидной связью.Каждый соответствующий мономер имеет длину 114 остатков. Трехмерная визуализация кристаллизованной структуры димера показала, что биологически активная форма этого белка имеет размеры 70 Ǻ × 35 Ǻ × 30, при этом центр мономера имеет толщину 10. Каждый индивидуальный мономер содержит цистиновый узел, образованный шестью остатками цистеина, образующими три внутрицепочечных дисульфидных мостика. Эта структура имеет решающее значение для BMP-2, поскольку она обеспечивает стабильность, которой в противном случае не хватало бы из-за отсутствия гидрофобного ядра.Однако это быстро решается, когда два мономера образуют димер, дополнительно стабилизируя структуру BMP-2, а также создавая дополнительную стабильность за счет создания гидрофобного ядра между двумя мономерами. Топография сворачивания BMP-2 включает ключевые компоненты других белков суперсемейства TGF-β. Вкратце, они состоят из двух отдельных антипараллельных β-листов, состоящих из девяти β-нитей. Нити не образуют четыре антипараллельных β-листа, потому что они слишком далеко друг от друга, чтобы участвовать в водородных связях.На втором листе используется подтверждение скрученного кроссовера. Также существует четырехвитковая α-спираль, которая расположена перпендикулярно β нитям [144]. БМП-2, как и БМП-4, может существовать в растворимой форме, поэтому его можно легко транспортировать. Когда BMP-2 находится в растворимой форме, он связывается с более низким сродством со своим рецептором типа II, BMPRII [145, 146]. Однако в большинстве случаев BMP-2 предпочтительно связывается с рецепторами типа I, в первую очередь с BMPRIa [21, 147]. Для того чтобы точно определить, как достигается и облегчается связывание BMP-2 и BMPRIa, необходимо разрешить связанную кристаллическую структуру.После кристаллизации было обнаружено, что BMP-2 связывается с BMPRIa через спиральную бороздку димера BMP-2. Он связан таким образом, что оба мономера BMP-2 вступают в контакт с рецептором, а С-конец рецепторных цепей находится на расстоянии 65 ° друг от друга. Общую структуру BMPRIa можно сравнить с левой рукой, где большой палец — это основа спирали, три вытянутых средних пальца — это центральный бета-лист, а мизинец или мизинец слегка согнут, что указывает на петлю между листами β1 – β2. .В 2001 году были обнаружены два связывающих эпитопа на BMP-2, известные как эпитопы «запястья» и «сустава». Эпитоп на запястье охватывает большую площадь, что коррелирует с высоким сродством к связыванию BMPRIa, в то время как эпитоп сустава включает меньшую площадь, которая имеет низкое сродство к связыванию BMPRII. Это связано с тем, что связывающие остатки, расположенные в эпитопе суставов пальцев, обнаруживаются только в одном мономере BMP-2, тогда как связывающие остатки в эпитопе запястья обнаруживаются в обоих мономерах. Интересно, что расстояние между эпитопами запястья и сустава составляет 10–15, но расстояния между двумя рецепторами намного больше: 40–55.Это расстояние между двумя рецепторами способствует дальнейшей стабилизации общей связанной структуры BMP2 и его рецепторов [148]. Существует несколько механизмов регуляторной обратной связи, которые помогают контролировать активность, индуцированную BMP-2. Один из этих механизмов — через антагонисты BMP, такие как Noggin. Было обнаружено, что структура и комплекс Noggin ингибируют передачу сигналов BMP путем прямого связывания и блокирования критических эпитопов на рецепторах как типа I, так и типа II. Noggin представляет собой двенадцатичленный белок цистеинового узла; следовательно, он может имитировать те эпитопы запястья и суставов, которые содержит BMP-2, чтобы облегчить конкурентное связывание с рецепторами BMP, таким образом ингибируя передачу сигналов, индуцированную BMP-2 [149].Это означает, что как расположение, так и близость рецепторов имеют решающее значение для правильного связывания BMP-2 и последующей активации пути [148].2.3. BMP-2 Signaling Pathways
Многие важные сигнальные пути для остеогенеза, выживания клеток и апоптоза активируются BMP-2 [20,22,28,41,150]. Как только BMP-2 связывается с BMPR, он активирует сигнальные пути Smad и Non-Smad (Рисунок 3). Путь Smad активируется, когда BMPRIa и BMPRIb фосфорилируют нижестоящие белки, а именно Smad1 / 5/8 [109].Фосфорилированный Smads рекрутирует Smad4, и этот комплекс перемещается в ядро и действует как фактор транскрипции для генов, таких как RUNX2 и Osx [15,151]. Кроме того, при определенных обстоятельствах BMP-2 может также активировать передачу сигналов Smad2 / 3 через BMPRIa. Фактически, Smad2 / 3 преимущественно активировался в эмбриональных и трансформированных клетках, подтверждая неразборчивость BMP-2 в регулировании процессов развития и деления клеток [152,153,154]. Однако этот процесс до конца не изучен, и BMP-2 может также вызывать этот ответ в других клетках.Таким образом, будущие исследования должны изучить эту область, чтобы более подробно описать действия БМП-2, а текущую информацию о неразборчивости БМП-2 можно найти в обзорной статье Никеля и Мюллера [155]. Недавно мы идентифицировали казеинкиназу 2 (CK2) как ключевой регулятор пути передачи сигналов BMP [156]. Без присутствия лиганда BMP-2 CK2 связывается с BMPRIa, предотвращая активацию нижестоящих эффекторных белков. Однако, когда BMP-2 связывается, CK2 высвобождается и наблюдается повышенная регуляция остеогенеза [156, 157, 158].В пути, отличном от Smad, передача сигналов MAPK активирует регулируемую внеклеточными сигналами киназу (ERK), фосфатидилинозитол-2 киназу (PI3K) и пути TAB1 / TAK1 [31,156,157,158,159]. Каждое из этих сигнальных событий, за исключением TAB1 / TAK1, который активирует NF-kB и p38, приводит к дифференцировке предшественников остеобластов в остеобласты. Было показано, что NF-kB ингибирует функцию остеобластов на моделях мышей с остеопорозом и требует дальнейших исследований [160, 161]. Другие пути, которые могут быть активированы BMP-2 для дифференциации миобластов и других преостеобластов в остеобласты, включают EIF2AK3-EIF2A-ATF4 и RhoA / Rb [162, 163, 164].Как упоминалось ранее, локализация BMPR на плазматической мембране определяет эндоцитоз и активацию сигнальных путей. Предыдущие исследования впервые продемонстрировали, что BMPR преимущественно локализованы в CCP [97]. Однако последующие исследования показали, что BMPRs также локализуются в кавеолах и что кавеолы являются важными регуляторами сигнальных путей Smad [96]. Данные продемонстрировали, что BMP-2 преимущественно связывается с агрегатами BMPRIa в кавеолах с большей силой и частотой, чем CCPs, чтобы активировать сигнальные пути Smad [96,99,101,114,165].Хотя BMPRs в основном обнаруживаются в кавеолах или CCPs, они также могут локализоваться на липидных рафтах [97,98,114]. Кроме того, было показано, что BMP-2 активирует сигнальный путь Wnt; однако вовлеченные белки и индуцирует ли BMP-2 путь Wnt / β-Catenin или наоборот, все еще неизвестны [157, 166, 167].2.4. Внутриклеточная и внеклеточная регуляция BMP-2
Сигнальные каскады для любого клеточного пути должны регулироваться, и передача сигналов BMP-2 ничем не отличается, особенно из-за множественных сигнальных путей, активируемых BMP-2.Были идентифицированы различные белки, регулирующие этот ответ. Активность BMP-2 усиливается или ингибируется внутриклеточно и внеклеточно. Например, гены Twisted gastrulation (Tsg) и Shrew способствуют активности BMP-2 и усиливают его активность [168, 169, 170]. Кроме того, BMP-2 регулируется внутриклеточно и внеклеточно несколькими секретируемыми антагонистами. Такие факторы, как ноггин, склеростин (SOST) и фоллистатин, напрямую связываются с BMP-2 в ECM, чтобы предотвратить его взаимодействие с BMPR, особенно во время развития [171, 172, 173].В частности, другие белки ЕСМ, включая фибронектин, фибриноген и тенасцин C, способны связываться с гепариновыми доменами BMP-2, регулируя его активность и миграцию [130, 133, 135, 174, 175, 176]. Кроме того, хордин — это белок, секретируемый костными клетками позвоночника, который может напрямую связываться с BMP-2 и предотвращать его взаимодействие с BMPR [170, 171, 177]. Внутриклеточно ингибирующие Smads (I-Smads) 6 и 7 непосредственно регулируют передачу сигналов Smad, индуцированную BMP-2, обычно путем предотвращения нижестоящих сигнальных каскадов [178].Несмотря на эти многочисленные правила, у пациентов с остеопорозом и остеоартритом все еще наблюдается аномальная потеря костей и хрящей. Основные механизмы являются активной областью настоящих исследований, но предполагается, что остеобласты пациентов с остеопорозом обладают нерегулярной функцией BMPRIa, что приводит к нарушению регуляции транспорта BMPR и гомеостаза кости [179]. Идентифицированные в настоящее время агонисты и антагонисты BMP-2, которые могут быть вовлечены, суммированы в таблице 1. Кроме того, мы также включаем известные ассоциированные белки с BMPR, которые ограничивают активность BMP-2, в таблицу 2.2,5. Регуляция сигнального пути BMP-2 с помощью казеинкиназы 2 (CK2)
Недавно CK2 был идентифицирован не только как ключевой регулятор пути BMP-2, но также как ингибитор этого пути. При ингибировании этого пути CK2 связывается с тремя сайтами фосфорилирования BMPRIa, предотвращая активацию нижестоящих белков [156]. Чтобы наблюдать взаимодействие BMPRIa и CK2, мы сконструировали мутанты BMPRIa для каждого сайта фосфорилирования по конкретным аминокислотам (AA 213–217; AA 324–238; AA 475–479) [157].Мутанты BMPRIa приводили к усилению адипогенеза, остеогенеза и хондрогенеза, предотвращая связывание CK2 [158]. Кроме того, чтобы понять взаимосвязь между CK2 и BMPRIa, наша лаборатория удалила ген BMPRIa у мышей, что неожиданно привело к увеличению образования кости [180, 181]. Затем в лаборатории Ноэ были сконструированы пептиды, имитирующие три сайта фосфорилирования для BMPRIa, которые были названы CK2.1, CK2.2 и CK2.3. Эти пептиды были способны связывать и предотвращать взаимодействие CK2 с BMPRIa, что приводило к усилению адипогенеза, остеогенеза и хондрогенеза, подобно мутантам BMPRIa [31,115,156,157,182,183].Кроме того, сверхэкспрессия мутанта BMPRIa (SLKD), в котором отсутствует серин AA для предотвращения связывания CK2, привела к повышенной минерализации посредством передачи сигналов киназы, связанной с внеклеточными сигналами, /, итоген-активированной протеинкиназы (ERK / MEK), что указывает на то, что BMP 2 сигнальный путь регулируется CK2 [157,158]. Это говорит о том, что экзогенный BMP-2 не нужен для активации нижестоящих путей, если присутствуют ингибиторы CK2.2.6. Эндоцитоз и деградация BMP-2 и BMPR
Как указано в предыдущих разделах, комплексы BMP-2-BMPR могут быть эндоцитозированы в клетки через CCP, кавеолы или липидные рафты.Однако при эндоцитозе комплекс продолжает действовать как сигнальная эндосома и деградирует (или возвращается в цикл) в плазматическую мембрану [213]. Во-первых, чтобы регулировать сигнальную активность BMP-2 после эндоцитоза, этот белок должен быть деактивирован или деградирован, чтобы предотвратить непрерывную экспрессию. Данные продемонстрировали, что для подавления активности BMP-2, BMP-2 убиквитинируется по нескольким остаткам лизина, инициируя его деградацию [214]. Кроме того, если этот путь протеасомного убиквитинирования ингибируется, активность BMP-2 увеличивается, и белок секретируется из клеток быстрее [214, 215].Тем не менее, ход деградации BMP-2 и механизм рециклинга BMP-2 остаются неизвестными и требуют дальнейших исследований. Что касается BMPR, предыдущие исследования показали, что BMPRII и BMPRIa регулируются Dullard, которая является фосфатазой, при эндоцитозе. Когда Dullard ингибируется, передача сигналов BMP усиливается, а когда Dullard активен, BMPRIa и BMPRII деактивируются и дефосфорилируются, чтобы ингибировать передачу сигналов BMP [150, 216, 217]. Кроме того, после эндоцитоза BMPR была идентифицирована также убиквитинлигаза, названная Smurf1, которая убиквитинирует комплексы BMPR и вызывает деградацию [218, 219, 220, 221].Вместе эти белки регулируют активность BMP-2 / BMPR внутриклеточно.Высокопроизводительный вычислительный скрининг высокопроизводительных металлоорганических каркасов с помощью машинного обучения
За последние два десятилетия количество работ по металлоорганическим каркасам (МОФ) в области адсорбции и разделения газов резко выросло из-за их высокой доли пустот и сверхвысокой удельной поверхности. С быстрым ростом баз данных MOF высокопроизводительный вычислительный скрининг (HTCS) стал основным методом выбора высокопроизводительных целевых материалов из большого количества MOF.Традиционные методы HTCS, например, . Великий канонический Монте-Карло (GCMC) и теория функционала плотности (DFT) могут ускорить открытие материалов; однако у этих методов есть некоторые недостатки, такие как высокая стоимость вычислений и низкая скорость, учитывая обширную и почти бесконечную базу данных MOF, а также различные системы разделения и различные условия эксплуатации. Машинное обучение (ML) — это потенциальный метод скрининга с возможностью точного прогнозирования высокопроизводительных материалов посредством обучения данных, полученных с помощью HTCS, а модель машинного обучения, которая точно соответствует сложной системе, может повысить скорость скрининга в 2 раза. –3 порядка.В этой работе, с учетом HTCS MOF с помощью ML в последние годы, соответствующий прогресс исследований, включая хранение CH 4 , хранение H 2 , CO 2 разделение, и т. Д. суммируется с целью прояснить потенциальные проблемы и проблемы, связанные с HTCS с помощью машинного обучения, путем категоризации приложений и разработок машинного обучения в этой области. Затем был спроектирован и разработан ряд алгоритмов машинного обучения для адаптации к различным системам MOF и для поиска дескрипторов ключей на основе машинного обучения для обратного проектирования новых MOF с превосходной производительностью.Следовательно, метод HTCS с помощью машинного обучения может ускорить разработку MOF и продвигать их приложения в различных областях.
% PDF-1.6 % 879 0 объект > / OCGs [904 0 R] >> / Страницы 855 0 R / Тип / Каталог >> эндобдж 903 0 объект > / Шрифт >>> / Поля 908 0 R >> эндобдж 877 0 объект > поток заявка / pdf