Апк рф ст 271: АПК РФ Статья 271. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции

Содержание

АПК РФ Статья 271. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции

2. В постановлении арбитражного суда апелляционной инстанции должны быть указаны:

1) наименование арбитражного суда апелляционной инстанции, состав суда, принявшего постановление; фамилия лица, которое вело протокол судебного заседания;

2) номер дела, дата и место принятия постановления;

3) наименование лица, подавшего апелляционную жалобу, и его процессуальное положение;

4) наименования лиц, участвующих в деле;

5) предмет спора;

6) фамилии лиц, присутствовавших в судебном заседании, с указанием их полномочий;

7) дата принятия обжалуемого решения арбитражным судом первой инстанции;

(в ред. Федерального закона от 28.11.2018 N 451-ФЗ)

(см. текст в предыдущей

редакции)

8) краткое изложение содержания принятого решения;

9) основания, по которым в апелляционной жалобе заявлено требование о проверке законности и обоснованности решения;

10) доводы, изложенные в отзыве на апелляционную жалобу;

11) объяснения лиц, участвующих в деле и присутствующих в судебном заседании;

12) обстоятельства дела, установленные арбитражным судом апелляционной инстанции; доказательства, на которых основаны выводы суда об этих обстоятельствах; законы и иные нормативные правовые акты, которыми руководствовался суд при принятии постановления; мотивы, по которым суд отклонил те или иные доказательства и не применил законы и иные нормативные правовые акты, на которые ссылались лица, участвующие в деле;

13) мотивы, по которым суд апелляционной инстанции не согласился с выводами суда первой инстанции, если его решение было отменено полностью или в части;

14) выводы о результатах рассмотрения апелляционной жалобы.

3. В постановлении арбитражного суда апелляционной инстанции указывается на распределение между сторонами судебных расходов, в том числе судебных расходов, понесенных в связи с подачей апелляционной жалобы.

4. Копии постановления арбитражного суда апелляционной инстанции направляются лицам, участвующим в деле, в пятидневный срок со дня принятия постановления.

5. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции вступает в законную силу со дня его принятия.

6. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции может быть обжаловано в арбитражный суд кассационной инстанции, если иное не предусмотрено настоящим Кодексом.

(в ред. Федерального закона от 27.07.2010 N 228-ФЗ)

(см. текст в предыдущей редакции)

Открыть полный текст документа

Ст. 271 АПК РФ. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции

2. В постановлении арбитражного суда апелляционной инстанции должны быть указаны:

2) номер дела, дата и место принятия постановления;

3) наименование лица, подавшего апелляционную жалобу, и его процессуальное положение;

4) наименования лиц, участвующих в деле;

5) предмет спора;

6) фамилии лиц, присутствовавших в судебном заседании, с указанием их полномочий;

7) дата принятия обжалуемого решения арбитражным судом первой инстанции;

8) краткое изложение содержания принятого решения;

10) доводы, изложенные в отзыве на апелляционную жалобу;

11) объяснения лиц, участвующих в деле и присутствующих в судебном заседании;

14) выводы о результатах рассмотрения апелляционной жалобы.

5. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции вступает в законную силу со дня его принятия.

См. все связанные документы >>>

1. По результатам рассмотрения апелляционной жалобы арбитражный суд апелляционной инстанции принимает постановление, которое подписывается судьями, рассматривавшими дело. Постановление должно состоять из вводной, описательной, мотивировочной и резолютивной частей.

2. Во вводной части постановления указываются: наименование арбитражного суда апелляционной инстанции, принявшего постановление; состав суда, принявшего постановление; номер дела, дата и место принятия постановления; наименования лиц, участвующих в деле; предмет спора; фамилии присутствующих в судебном заседании лиц с указанием их полномочий; фамилия лица, которое вело протокол судебного заседания; наименование лица, подавшего апелляционную жалобу; дата принятия решения арбитражным судом первой инстанции и фамилии судей, его принявших.

При применении ст. 271 АПК следует иметь в виду, что датой принятия постановления суда апелляционной инстанции считается дата его изготовления в полном объеме. При этом изготовление постановления в полном объеме применительно к ст. 176 АПК может быть отложено на срок, не превышающий пяти дней со дня объявления резолютивной части.

В описательной части постановления указываются: краткое изложение содержания принятого решения; основания, по которым в апелляционной жалобе поставлен вопрос о проверке законности и обоснованности решения; доводы, изложенные в отзыве на апелляционную жалобу; объяснения лиц, присутствовавших в судебном заседании.

В мотивировочной части постановления указываются: обстоятельства дела, установленные арбитражным судом апелляционной инстанции; доказательства, на которых основаны выводы суда об этих обстоятельствах; законы и иные нормативные правовые акты, которыми руководствовался суд при принятии постановления; доводы, по которым суд отклонил те или иные доказательства и не применил законы и иные нормативные правовые акты, на которые ссылались лица, участвующие в деле; при отмене или изменении решения суда первой инстанции — мотивы, по которым суд апелляционной инстанции не согласился с выводами суда первой инстанции; выводы по результатам рассмотрения апелляционной жалобы.

3. В резолютивной части постановления указывается: одно из решений, предусмотренных ст. 269 АПК; о распределении между сторонами судебных расходов, в том числе в связи с подачей апелляционной жалобы; о взыскании судом государственной пошлины.

4. Копии постановления направляются лицам, участвующим в деле, в пятидневный срок со дня принятия постановления. Постановление суда апелляционной инстанции вступает в законную силу с момента его принятия и может быть обжаловано в суд кассационной инстанции в срок, установленный ст. 276 АПК.

В порядке, предусмотренном ст. 178 АПК, суд апелляционной инстанции вправе в течение двух месяцев со дня вступления в законную силу принятого им постановления принять дополнительное постановление по заявлению лица, участвующего в деле, или по своей инициативе независимо от того, последовало ли в связи с этим обращение лиц, участвующих в деле, в суд кассационной инстанции. Вопрос о принятии дополнительного постановления разрешается коллегиальным составом судей в судебном заседании с извещением лиц, участвующих в деле. В случае отказа в принятии дополнительного постановления выносится определение, которое может быть обжаловано в суд кассационной инстанции применительно к ч. 5 ст. 178 АПК.

5. Постановление суда апелляционной инстанции может быть разъяснено, в нем могут быть исправлены допущенные описки, опечатки и арифметические ошибки в порядке, предусмотренном в ст. 179 АПК.

Вопросы об отсрочке или о рассрочке исполнения постановления апелляционной инстанции, об изменении способа и порядка его исполнения (ст. 324 АПК) рассматриваются арбитражным судом апелляционной инстанции, если эти вопросы разрешаются одновременно с принятием названного постановления.

В иных случаях вопросы об отсрочке или о рассрочке исполнения постановления, об изменении способа и порядка его исполнения рассматриваются судом первой инстанции.

последние изменения и поправки, судебная практика

СТ 271 АПК РФ

2. В постановлении арбитражного суда апелляционной инстанции должны быть указаны:

2) номер дела, дата и место принятия постановления;

3) наименование лица, подавшего апелляционную жалобу, и его процессуальное положение;

4) наименования лиц, участвующих в деле;

5) предмет спора;

6) фамилии лиц, присутствовавших в судебном заседании, с указанием их полномочий;

Бесплатная юридическая консультация по телефонам:

7) дата принятия обжалуемого решения арбитражным судом первой инстанции и фамилии принявших его судей;

8) краткое изложение содержания принятого решения;

10) доводы, изложенные в отзыве на апелляционную жалобу;

11) объяснения лиц, участвующих в деле и присутствующих в судебном заседании;

14) выводы о результатах рассмотрения апелляционной жалобы.

5. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции вступает в законную силу со дня его принятия.

Комментарий к Ст. 271 Арбитражного процессуального кодекса РФ

1. Свои выводы апелляционная инстанция излагает в форме постановления, в том числе и когда изменяет решение арбитражного суда первой инстанции или выносит новое решение. Кодекс раскрывает содержание апелляционного постановления, подробно перечисляя сведения, которые должны быть в нем указаны. Как процессуальный документ постановление апелляционной инстанции состоит из вводной, описательной, мотивировочной и резолютивной частей.

Постановление подписывается всеми судьями, принимавшими участие в его вынесении (в том числе и имеющим особое мнение по делу). Нарушение этого правила является безусловным основанием для отмены такого постановления, если оно становится предметом проверки в кассационном порядке.

2. Апелляционное постановление должно быть хорошо мотивировано, ибо в противном случае оно не может служить осуществлению задач, возложенных на арбитражный суд апелляционной инстанции. Постановление апелляционной инстанции не только содействует правильному разрешению конкретного дела, но и влияет на формирование судебной практики.

Чрезвычайно важное значение имеют положения п. 12 ч. 2 ст. 271, реализация которых на практике позволит раскрыть фактическую и правовую основу апелляционного постановления.

Оставляя жалобу без удовлетворения, апелляционная инстанция должна в постановлении привести мотивы, по которым она пришла к таким выводам. Отменяя или изменяя решение суда первой инстанции, апелляционная инстанция указывает в постановлении доводы, по которым проверяемые судебные акты признаны неверными.

3. В резолютивной части постановления должны быть сформулированы выводы, вытекающие из мотивировочной части и соответствующие полномочиям апелляционной инстанции.

В постановлении указываются точные и конкретные основания, по которым отменяется или изменяется решение.

В тех случаях, когда апелляционная инстанция удовлетворяет жалобу, она должна взыскать с другой стороны пошлину, уплаченную лицом, подавшим апелляционную жалобу.

Если апелляционная инстанция изменит решение или вынесет по делу новое решение, то она должна соответственно изменить и распределение судебных расходов, о чем также должно быть указано в резолютивной части постановления.

Постановление апелляционной инстанции вступает в законную силу немедленно. Оно может быть пересмотрено в кассационном порядке, в порядке надзора и по вновь открывшимся обстоятельствам.

4. Статья 271 (ч. 4) Кодекса обязывает в краткий срок направить участвующим в деле лицам вынесенное постановление.

Не соглашаясь с постановлением, они могут заблаговременно продумать свою позицию в случае подачи кассационной или иной жалобы.

Статья 271 АПК РФ. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции

1. По результатам рассмотрения апелляционной жалобы арбитражный суд апелляционной инстанции принимает судебный акт, именуемый постановлением, которое подписывается судьями, рассматривавшими дело.2. В постановлении арбитражного суда апелляционной инстанции должны быть указаны:1) наименование арбитражного суда апелляционной инстанции, состав суда, принявшего постановление; фамилия лица, которое вело протокол судебного заседания;2) номер дела, дата и место принятия постановления;3) наименование лица, подавшего апелляционную жалобу, и его процессуальное положение;4) наименования лиц, участвующих в деле;5) предмет спора;6) фамилии лиц, присутствовавших в судебном заседании, с указанием их полномочий;7) дата принятия обжалуемого решения арбитражным судом первой инстанции;8) краткое изложение содержания принятого решения;9) основания, по которым в апелляционной жалобе заявлено требование о проверке законности и обоснованности решения;10) доводы, изложенные в отзыве на апелляционную жалобу;11) объяснения лиц, участвующих в деле и присутствующих в судебном заседании;12) обстоятельства дела, установленные арбитражным судом апелляционной инстанции; доказательства, на которых основаны выводы суда об этих обстоятельствах; законы и иные нормативные правовые акты, которыми руководствовался суд при принятии постановления; мотивы, по которым суд отклонил те или иные доказательства и не применил законы и иные нормативные правовые акты, на которые ссылались лица, участвующие в деле;13) мотивы, по которым суд апелляционной инстанции не согласился с выводами суда первой инстанции, если его решение было отменено полностью или в части;14) выводы о результатах рассмотрения апелляционной жалобы.3. В постановлении арбитражного суда апелляционной инстанции указывается на распределение между сторонами судебных расходов, в том числе судебных расходов, понесенных в связи с подачей апелляционной жалобы.4. Копии постановления арбитражного суда апелляционной инстанции направляются лицам, участвующим в деле, в пятидневный срок со дня принятия постановления.5. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции вступает в законную силу со дня его принятия.6. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции может быть обжаловано в арбитражный суд кассационной инстанции, если иное не предусмотрено настоящим Кодексом.

Комментарии к статье

Арбитражный процесс: Учебник (7-е издание, переработанное и дополненное) (отв. ред. В.В. Ярков) («Статут», 2017)

Курс доказательственного права: Гражданский процесс. Арбитражный процесс. Административное судопроизводство (2-е издание, переработанное и дополненное) (под ред. М.А. Фокиной) («Статут», 2019)

Комментарий к Арбитражному процессуальному кодексу Российской Федерации (постатейный) (4-е издание, исправленное и переработанное) (под ред. В.В. Яркова) («Статут», 2020)

Стадии в арбитражном процессе (Подготовлен для системы КонсультантПлюс, 2020)

Как уточнить исковые требования в арбитражном процессе (КонсультантПлюс, 2020)

Как подаются и рассматриваются коллективные иски в арбитражном процессе (КонсультантПлюс, 2020)

Злоупотребление правами в рамках гражданского и арбитражного процесса (Подготовлен для системы КонсультантПлюс, 2020)

Отвод судьи в арбитражном процессе: шаг вперед или элемент единообразия? (Сидоркин С.В.) («Арбитражный и гражданский процесс», 2020, № 5)

Претензионный порядок в арбитражном процессе. Новеллы в законодательстве (Скутин А.Ф.) («Администратор суда», 2019, № 2)

Вопросы обжалования мирового соглашения в арбитражном процессе (Андреев А.В.) («Арбитражный и гражданский процесс», 2019, № 2)

Доказательственное право в арбитражном процессе: проблемы и особенности (Коваль В.Н.) («Вестник гражданского процесса», 2019, № 1)

Так все-таки как правильно исчислять сроки на подачу кассационной жалобы в случае наличия апелляционной инстанции?

Суды якобы уже разъяснили этот вопрос.

«1. Предусмотренный законом двухмесячный срок на кассационное обжалование исчисляется в соответствии с требованиями ст. 113, 114, 180, 271 АПК РФ: 1 месяц со дня изготовления решения в полном объеме + 2 месяца на кассационное обжалование; в случае рассмотрения дела в апелляционном порядке — 2 месяца со дня изготовления постановления». («Обобщение практики применения Федеральным арбитражным судом Восточно-Сибирского округа норм статьи 281 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации в 2007 году» (одобрено Постановлением Президиума ФАС Восточно-Сибирского округа от 20.10.2009 N 7).

«30. Согласно части 2 статьи 176, части 1 статьи 259 и части 1 статьи 276 АПК РФ срок на подачу апелляционной (кассационной) жалобы исчисляется не с даты направления копии изготовленного судебного акта лицам, участвующим в деле, а с даты изготовления арбитражным судом первой (апелляционной) инстанции судебного акта в полном объеме». Постановление Пленума ВАС РФ от 25.12.2013 N 99 «О процессуальных сроках»

Вроде бы позиция ясна — двухмесячный срок на полачу кассационной жалобы должен исчисляться (в случае наличия апелляционного обжалования) с момента изготовления постановления суда апелляционной инстанции в полном объеме.

Но соответсвует ли указанная позиция судов реальному тексту АПК РФ? Предлагаю выстроить логическую цепочку из норм АПК.

1. Кассационная жалоба может быть подана в срок, не превышающий двух месяцев со дня вступления в законную силу обжалуемых решения, постановления арбитражного суда, если иное не предусмотрено настоящим Кодексом. (п.1 ст.276 АПК РФ).

Т.е. 2 месяца

а) со дня вступления в силу решения суда первой инстанции или

б) 2 месяца со дня всупления в силу постановления суда апелляционной инстанции.

Вот тут начинается инетерсное.

Решение суда первой инстанции вступает в силу (в случае, если оно не обжаловано в апелляции) в течение месяца, который начинает исчисляться с момента изготовления решения суда первой инстанции в полном объеме (п.2 ст.176, п.1 ст.180 АПК РФ). Т.е. если решение первой инстанции в апелляции не обжаловано, то срок на подачу кассации 3 месяца со дня изготовления решения суда в полном объеме.

Однако в случае наличия апелляции такое правило не действует. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции вступает в силу со дня его принятия (п.5 ст.271 АПК РФ).

Т.е. срок на подачу кассационной жалобы, как исчисляемый «со дня вступления в силу постановления суда» в случае, если ранее была апелляция, должен исчисляться с даты принятия постановления суда апелляционной инстанции. При этом оговорок, позволяющих трактовать дату «принятия постановления» как дату изготовления постановления апелляционной инстанции в полном объеме АПК РФ не содержит.

Собственно и ВАС РФ предавая иное толкование порядку исчисления срока ссылается на ст.176 АПК РФ которая говорит исключительно о «дате принятия решения» в разрезе судопроизводства в суде первой инстанции, но ни коим образом не относится к апелляционнойму судопроизводству.

Так что когда в следующий раз в постановлении апелляционной инстанции Вы обнаружете вот такое :»Постановление вступает в законную силу со дня его принятия и может быть обжаловано в течение двух месяцев со дня изготовления постановления в полном объеме» есть повод задуматься а так ли это.

Коллеги, поправьте, если я не прав.

Статья 271. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции

2. В постановлении арбитражного суда апелляционной инстанции должны быть указаны:

2) номер дела, дата и место принятия постановления;

3) наименование лица, подавшего апелляционную жалобу, и его процессуальное положение;

4) наименования лиц, участвующих в деле;

5) предмет спора;

6) фамилии лиц, присутствовавших в судебном заседании, с указанием их полномочий;

7) дата принятия обжалуемого решения арбитражным судом первой инстанции;

8) краткое изложение содержания принятого решения;

10) доводы, изложенные в отзыве на апелляционную жалобу;

11) объяснения лиц, участвующих в деле и присутствующих в судебном заседании;

14) выводы о результатах рассмотрения апелляционной жалобы.

5. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции вступает в законную силу со дня его принятия.

Комментарий к ст. 271 АПК РФ

Во вводной части постановления указываются: наименование арбитражного суда апелляционной инстанции, принявшего постановление; состав суда, принявшего постановление; номер дела, дата и место принятия постановления; наименования лиц, участвующих в деле; предмет спора; фамилии присутствующих в судебном заседании лиц с указанием их полномочий; фамилия лица, которое вело протокол судебного заседания; наименование лица, подавшего апелляционную жалобу; дата принятия решения арбитражным судом первой инстанции и фамилии судей, его принявших.

В резолютивной части постановления указывается: одно из решений, предусмотренных ст. 269 АПК; о распределении между сторонами судебных расходов, в том числе в связи с подачей апелляционной жалобы; о взыскании судом государственной пошлины.

2. Копии постановления направляются лицам, участвующим в деле, в пятидневный срок со дня принятия постановления. Постановление суда апелляционной инстанции вступает в законную силу с момента его принятия и может быть обжаловано в суд кассационной инстанции в срок, установленный ст. 276 АПК.

Арбитражный суд апелляционной инстанции может принять дополнительное постановление по основаниям и в порядке, которые предусмотрены ст. 178 АПК, в течение двух месяцев со дня вступления в силу постановления суда апелляционной инстанции.

Постановление суда апелляционной инстанции может быть разъяснено, в нем могут быть исправлены допущенные описки, опечатки и арифметические ошибки в порядке, предусмотренном в ст. 179 АПК.

Замечания на протокол судебного заседания рассматриваются составом судей по правилам, предусмотренным ч. 8 ст. 155 АПК.

Судебная практика по статье 271 АПК РФ

Определение Верховного Суда РФ от 23.01.2017 N 304-ЭС17-279 по делу N А03-4955/2016

Последним обжалуемым судебным актом является постановление Седьмого арбитражного апелляционного суда от 14.07.2016, которое согласно части 5 статьи 271 АПК РФ вступило в законную силу 14.07.2016, следовательно, двухмесячный срок на подачу жалобы истек 14.09.2016.
Кассационная жалоба подана 30.12.2016 (согласно оттиску почтового штемпеля на конверте) — с пропуском двухмесячного срока.

Определение Верховного Суда РФ от 17.02.2017 N 305-АД17-2107 по делу N А40-47801/2016

Последним оспариваемым судебным актом по настоящему делу является постановление Девятого арбитражного апелляционного суда от 10.10.2016, вступившее в законную силу согласно части 5 статьи 271 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации — 10.10.2016.
На момент обращения заявителя в Верховный Суд Российской Федерации — 06.02.2017 (кассационная жалоба подана через систему подачи документов в электронном виде «Мой арбитр») срок, установленный частью 1 статьи 291.2 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации, истек.

Определение Верховного Суда РФ от 22.02.2017 N 301-АД17-2378 по делу N А29-148/2016

Последним оспариваемым судебным актом по настоящему делу является постановление Второго арбитражного апелляционного суда от 14.11.2016, вступившее в законную силу согласно части 5 статьи 271 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации со дня его принятия — 14.11.2016.
На момент обращения заявителя в Верховный Суд Российской Федерации — 04.02.2017 (согласно оттиску почтового штемпеля на конверте) срок, установленный частью 1 статьи 291.2 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации, истек. При этом ходатайство о восстановлении пропущенного процессуального срока на подачу кассационной жалобы предпринимателем ни в тексте самой жалобы, ни в виде отдельного документа не заявлено.

Определение Верховного Суда РФ от 14.03.2017 N 306-АД17-3229 по делу N А12-1137/2016

Последним оспариваемым судебным актом по настоящему делу является постановление Двенадцатого арбитражного апелляционного суда от 12.05.2016, вступившее в законную силу согласно части 5 статьи 271 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации со дня его принятия — 12.05.2016.
На момент обращения заявителя в Верховный Суд Российской Федерации — 15.02.2017 (согласно оттиску почтового штемпеля на конверте) срок, установленный частью 1 статьи 291.2 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации, истек. При этом ходатайство о восстановлении пропущенного процессуального срока на подачу кассационной жалобы предпринимателем ни в тексте самой жалобы, ни в виде отдельного документа не заявлено.

Определение Верховного Суда РФ от 16.03.2017 N 310-АД17-3622 по делу N А48-2922/2016

Последним оспариваемым судебным актом по настоящему делу является постановление Девятнадцатого арбитражного апелляционного суда от 01.09.2016, вступившее в законную силу согласно части 5 статьи 271 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации — 01.09.2016.
На момент обращения управления в Верховный Суд Российской Федерации — 25.02.2017 (согласно оттиску почтового штемпеля на конверте) срок, установленный частью 1 статьи 291.2 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации, истек.

Определение Верховного Суда РФ от 21.03.2017 N 309-АД17-3788 по делу N А60-21229/2016

Последним оспариваемым судебным актом по настоящему делу является постановление Семнадцатого арбитражного апелляционного суда от 08.11.2016, вступившее в законную силу согласно части 5 статьи 271 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации — 08.11.2016.
На момент обращения управления в Верховный Суд Российской Федерации — 25.02.2017 (согласно оттиску почтового штемпеля на конверте) срок, установленный частью 1 статьи 291.2 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации, истек.

Определение Верховного Суда РФ от 29.03.2017 N 307-АД17-2891 по делу N А56-17173/2016

Последним оспариваемым судебным актом по настоящему делу является постановление Тринадцатого арбитражного апелляционного суда от 03.10.2016, вступившее в законную силу согласно части 5 статьи 271 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации — 03.10.2016.
Первоначально поданная (10.02.2017) кассационная жалоба предприятия возвращена без рассмотрения по существу, поскольку представлена по истечении двухмесячного срока, установленного частью 1 статьи 291.2 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации, и не содержала ходатайства о его восстановлении.

Определение Верховного Суда РФ от 17.04.2017 N 305-ЭС17-5432 по делу N А40-194221/2016

Последним обжалуемым судебным актом является постановление Девятого арбитражного апелляционного суда от 01.02.2017, вступившее в законную силу, согласно части 5 статьи 271 АПК РФ, со дня его принятия — 01.02.2017, следовательно, двухмесячный срок на подачу жалобы истек 03.04.2017 (с учетом выходных дней).

Определение Верховного Суда РФ от 24.04.2017 N 303-ЭС17-6498 по делу N А51-14669/2016

Постановление Пятого арбитражного апелляционного суда от 17.11.2016 вступило в законную силу 17.11.2016 согласно части 5 статьи 271 АПК РФ, следовательно, двухмесячный срок на подачу жалобы истек 17.01.2017.
Кассационная жалоба подана 12.04.2017 (согласно оттиску почтового штемпеля на конверте) — с пропуском двухмесячного срока.

Определение Верховного Суда РФ от 27.04.2017 N 308-АД17-4546 по делу N А53-24010/2016

Последним оспариваемым судебным актом по настоящему делу является постановление Пятнадцатого арбитражного апелляционного суда от 22.11.2016, вступившее в законную силу согласно части 5 статьи 271 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации — 22.11.2016.
Первоначально поданная (15.03.2017) кассационная жалоба арбитражного управляющего возвращена без рассмотрения по существу, поскольку представлена по истечении двухмесячного срока, установленного частью 1 статьи 291.2 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации, и не содержала ходатайства о его восстановлении.

Определение Верховного Суда РФ от 27.04.2017 N 308-АД17-4671 по делу N А53-24826/2016

Последним оспариваемым судебным актом по настоящему делу является постановление Пятнадцатого арбитражного апелляционного суда от 11.01.2017, вступившее в законную силу согласно части 5 статьи 271 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации — 11.01.2017.
Первоначально поданная (17.03.2017) кассационная жалоба административного органа возвращена без рассмотрения по существу, поскольку представлена по истечении двухмесячного срока, установленного частью 1 статьи 291.2 Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации, и не содержала ходатайства о его восстановлении.

Вопросы упрощенного производства

Правила АПК РФ и ГПК РФ об упрощенном производстве с учетом предложенного Верховным Судом РФ весьма спорного проекта реформы процессуального законодательства становятся все более актуальными как для науки, так и для процессуальной практики.

Анонсированное расширение категорий споров, которые могут разрешаться в его (производства) рамках, приводит нас к необходимости рассмотрения такого порядка если не в качестве потенциально основного, то уже далеко не второстепенного способа рассмотрения гражданских и административных дел.

Судебное представительство в рамках упрощенного производства имеет свои особенности, связанные с повышенной процессуальной ответственностью сторон за совершение распорядительных действий, прежде всего за определение предмета и оснований иска, уточнение требований и своевременное заявление возражений на них. Отдельного повествования заслуживают вопросы доказывания, корректного раскрытия сторонами доказательств. К примеру, интернет-система КАД до настоящего времени не предоставляет сторонам возможности дистанционного ознакомления с приобщенными к делу аудио- и видеодоказательствами, которые, как правило, фигурируют в спорах, связанных с взысканием штрафных санкций за нарушение исключительных прав.

Что касается определения Судебной коллегии по экономическим спорам ВС РФ от 9 декабря 2017 г. № 305-ЭС17-8639, в котором указано, что отсутствие мотивировочной части обжалуемого решения арбитражного суда не может препятствовать рассмотрению апелляционной жалобы по существу, то оно ничего нового к пониманию закона не добавляет.

Так, на возможность самостоятельного обжалования решения, вынесенного в рамках упрощенного судопроизводства только в резолютивной части, прямо указывают положения ч. 4 ст. 229 АПК РФ, в соответствии с которыми решение арбитражного суда первой инстанции по результатам рассмотрения дела в порядке упрощенного производства может быть обжаловано в арбитражный суд апелляционной инстанции в срок, не превышающий пятнадцати дней со дня его принятия, а в случае составления мотивированного решения арбитражного суда – со дня принятия решения в полном объеме.

Аналогичного понимания придерживается и Пленум ВС РФ в п. 39 Постановления от 18 апреля 2017 г. № 10 «О некоторых вопросах применения судами положений Гражданского процессуального кодекса Российской Федерации и Арбитражного процессуального кодекса Российской Федерации об упрощенном производстве». Как указано в руководящем разъяснении, поскольку арбитражный суд, исходя из ч. 2 ст. 229 АПК РФ, составляет мотивированное решение только по заявлению лица, участвующего в деле, рассмотренном в порядке упрощенного производства, то при отсутствии соответствующего заявления лица, участвующего в деле, обжалованию подлежит решение, принятое путем подписания резолютивной части.

При этом обязанность суда апелляционной инстанции снова рассмотреть дело по имеющимся, а в случаях, предусмотренных законом, и вновь представленным, доказательствам и принять на их основании мотивированный акт предусмотрена ч. 1 ст. 268, ст. 271, 272.1 АПК РФ, на что и обратила внимание нижестоящих судов Коллегия по экономическим спорам.

В этом контексте следует уточнить, что текст постановления Пленума ВС РФ от 18 апреля 2017 г. № 10 еще не в полной мере изучен арбитражными судами. В судебной практике до сих пор нередки случаи, когда предусмотренный ч. 2 ст. 229 АПК РФ пятидневный срок на подачу заявления об изготовлении мотивированного решения рассматривается в качестве пресекательного и не подлежащего восстановлению. Хотя такое понимание преодолено в п. 40 названного постановления: пропущенный по уважительной причине срок на обращение с заявлением о составлении мотивированного решения (например, при отсутствии у лица, участвующего в деле, сведений о судебном акте, принятом в процедуре упрощенного производства) может быть восстановлен судом по ходатайству лица, участвующего в деле, в порядке, предусмотренном ст. 112 ГПК РФ, ст. 117 АПК РФ.

Основная же проблема с судебной проверкой решения, вынесенного без мотивировочной части, заключается в том, что бремя первичного рассмотрения дела фактически переносится на суд апелляционной инстанции, особенно в тех распространенных случаях, когда возникают вопросы к установлению факта надлежащего извещения ответчика. К примеру, по основаниям неправильного указания его наименования при регистрации дела в системе КАД.

В подобной ситуации мотивы суда первой инстанции, связанные с оценкой представленных сторонами доказательств, принятием или непринятием их доводов, остаются неизвестными для иных субъектов процессуальной деятельности. Хорошо, когда резолютивная часть решения содержит выводы об отказе или полном удовлетворении исковых требований. Когда же речь идет о частичном удовлетворении иска, тем более если суд не соглашается с расчетами сторон и производит собственные исчисления, «ребус» о наличии в судебном акте рациональной составляющей напоминает поиски черной кошки в темной комнате.

Причем означенная проблема носит далеко не надуманный характер, поскольку категории дел, отнесенные законодателем к рассматриваемым в порядке упрощенного производства, например споры в области электроэнергетики, никогда не являлись «тривиальными».

Одновременно, с позиции общих начал гражданского и арбитражного процессов, вызывает возражения введение в соответствии с п. 39 постановления Пленума ВС РФ отдельного, не предусмотренного АПК РФ правила о праве арбитражного суда изготовить мотивированное решение по своей инициативе, пусть даже ни одна из сторон об этом не ходатайствовала. В этом случае решение вступает в законную силу, и срок на его обжалование исчисляется со дня принятия решения путем вынесения (подписания) резолютивной части.

Даже если абстрагироваться от вечного вопроса о праве Пленума ВС РФ подменять собой законодателя, очевидно, что, взявшись за написание мотивированного решения после поступления на него апелляционной жалобы, любой человек будет стремиться вместо вынесения суждения по существу спора пусть подспудно, но опровергнуть доводы жалобы. Это, в свою очередь, свидетельствует о дисбалансе между такой «новацией» и принципами состязательности сторон, беспристрастности суда.

Упрощенный порядок по АПК РФ с учетом присущих ему особенностей может стать тем локомотивом, который втянет отечественную систему судопроизводства в профессиональный и цифровой процессы. Но лично мне хотелось бы понимать, о чем думал суд, принимая то или иное решение, пусть даже его мнение будет изложено в лапидарной форме и непонятно вне контекста пространных состязательных документов сторон, как это принято во многих правовых системах.

Рисунки и данные в «Артифизиологии» показывают настройку формы, подобную V4, в глубокой сети, обученной для классификации изображений.

( A ) Одномерный масштабный вид разветвления и пространственного разрешения единиц для всех 21 подслоя, выровнены с их именами, указанными в столбце ( C ). Цветные треугольники в сверточных (Conv) слоях указывают на переход к сверточным единицам, серые треугольники обозначают переход на максимальное объединение единиц, а круги (или овалы) указывают пространственное положение единиц вдоль горизонтального измерения.Для слоев Conv и их подслоев каждый кружок на диаграмме представляет количество уникальных единиц, перечисленных в столбце ( D ). Например, для каждого оранжевого круга / овала в четырех подслоях, связанных с Conv1, имеется 96 различных единиц в модели (ядра Conv1 изображены на рисунке 1). Входное изображение шириной 227 пикселей (вверху, желтый) подвергается субдискретизации на подслое Conv1 (оранжевый; «шаг 4» указывает, что единицы появляются только каждые четыре пикселя) и снова на каждом подслое объединения («шаг 2»), пока пространственный разрешение уменьшается до сетки 6 × 6 при переходе от Pool5 к FC6.Пирамида поддержки, сходящаяся к центральному блоку в Conv5 (темно-синий треугольник), обозначена треугольниками и линейными сегментами, начиная с Conv1. Каждый блок в слоях FC6, FC7 и FC8 (оттенки зеленого; показаны не все блоки) получает входные данные от всех блоков в предыдущем слое (в слоях FC нет пространственного измерения, блоки изображены в линию только для удобства) . Зеленые треугольники указывают на полное разветвление до трех примеров модулей на каждом уровне FC. ( B ) Максимальная ширина (в пикселях) RF для блоков в пяти сверточных слоях (цвета соответствуют цветам в ( A )) на основе разветвления, начиная с входного изображения.Для слоев FC все изображение доступно каждому модулю. ( C ) Имена подслоев, выровненных со схемой в ( A ). Имена, выделенные жирным шрифтом, соответствуют восьми основным слоям, каждый из которых начинается с линейного ядра (цветные треугольники в ( A )). ( D ) Количество уникальных единиц измерения, то есть размеров объекта, в каждом подслое (двойные кавычки повторяют значения из предыдущей строки). ( E ) Ширина и высота пространственной (сверточной) сетки на каждом подуровне или «1» для слоев FC.Общее количество единиц в каждом подуровне можно вычислить, умножив количество уникальных ядер ( D ) на количество пространственных позиций ( E ). ( F ) Размер ядра соответствует количеству изученных весов для каждого уникального линейного ядра. Слои объединения имеют пространственные ядра 3×3, но не имеют весов — максимум берется за необработанные входные данные. Ядра Conv2 имеют глубину всего 48, потому что половина модулей Conv2 принимает входные данные из первых 48 измерений функций в Conv1, тогда как другая половина принимает входные данные из последних 48 функций Conv1; входные данные аналогичным образом сгруппированы в Conv4 и Conv5 (см. Крижевский и др.рисунок 2). В нижней строке приведены итоги. В дополнение к весам, связанным с каждым ядром, существует также одно значение смещения для каждого ядра (не показано), которое добавляет 10 568 свободных параметров к ~ 60,9 миллионам уникальных весов.

Обзорный обзор подходов к оказанию помощи, ориентированных на пациента, в здравоохранении | BMC Health Services Research

Мид Н., Бауэр П. Ориентированность на пациента: концептуальная основа и обзор эмпирической литературы. Soc Sci Med. 2000, 51: 1087-1110. 10.1016 / S0277-9536 (00) 00098-8.

CAS Статья PubMed Google ученый

Стюарт М., Белль Браун Дж., Уэстон В.В., Маквинни И.Р., Маквиллиам К.Л., Фриман Т.Р.: Медицина, ориентированная на пациента, трансформирующая клинический метод. 2003, Абингдон: Radcliffe Medical Press, 2

Google ученый

Купер К., Смит Б. Х., Хэнкок Э: Ориентированность на пациента в физиотерапии с точки зрения пациента с хронической болью в пояснице.Физиотерапия. 2008, 94: 244-252. 10.1016 / j.physio.2007.10.006.

Артикул Google ученый

Cott CA: Клиентоориентированная реабилитация: перспективы клиента. Disabil Rehabil. 2004, 16: 1411-1422.

Артикул Google ученый

Литтл П., Эверит Х., Уильямсон И., Уорнер Дж., Мур М., Гулд С., Ферье К., Пейн С.: Предпочтения пациентов в отношении ориентированного на пациента подхода к консультации в первичной медико-санитарной помощи: обсервационное исследование.BMJ. 2001, 322: 468-472. 10.1136 / bmj.322.7284.468.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

Gzil F, Lefeve C, Cammelli M, Pachoud B, Ravaud JF, LePlege A: Почему реабилитация еще не полностью ориентирована на человека и должна ли она быть в большей степени ориентирована на человека ?. Disabil Rehabil. 2007, 29: 1616-1624. 10.1080 / 09638280701618620.

Артикул PubMed Google ученый

Ballweg DD: Внедрение ориентированной на развитие семейной помощи в отделении интенсивной терапии новорожденных в качестве инициативы по повышению качества. J Perinat Neonat Nurs. 2001, 15: 58-73. 10.1097 / 00005237-200112000-00006.

CAS Статья Google ученый

Бергер Дж. Л.: Включение приливной модели в междисциплинарный план оказания помощи — проект улучшения качества программы. J Psychiatr Mental Health Nurs. 2006, 13: 464-467.10.1111 / j.1365-2850.2006.01007.x.

CAS Статья Google ученый

Биклер Б. Практика оказания помощи пациентам. AORN J. 1994, 60: 242-245. 10.1016 / S0001-2092 (07) 62742-2.

CAS Статья PubMed Google ученый

10.

Boltz M: Системный подход к улучшению ухода за пожилыми пациентами в отделении интенсивной терапии. AACN Adv Crit Care.2011, 22: 142-149. 10.1097 / NCI.0b013e31821455c9.

Артикул PubMed Google ученый

11.

Booth BJ, McBride T: Ориентация на пациента и рамки качества. Врач Ост Фам. 2007, 36: 20-22.

PubMed Google ученый

12.

Бриггс Р.У .: Принятие клинических решений физиотерапевтами в сфере ухода за пациентами в конце жизни, ориентированного на пациента. Вверх Гериатр Rehabil. 2011, 27: 10-17.10.1097 / TGR.0b013e3181ff668a.

Артикул Google ученый

13.

Браун Р., Миллер Э: Ведущий своего лидера. Медсестра Менеджер. 2003, 34: 58-62.

Артикул Google ученый

14.

Кокс JL: Сочувствие, идентичность и участие в человеко-ориентированной медицине: социокультурный контекст. J Eval Clin Pract. 2011, 17: 350-353. 10.1111 / j.1365-2753.2010.01580.x.

Артикул PubMed Google ученый

15.

de Lusignan S, Wells S, Russell C: Модель ориентированного на пациента консультирования медсестер в первичной медико-санитарной помощи. BJN. 2003, 12: 85-90.

Артикул PubMed Google ученый

16.

DiGioia A, Greenhouse PK, Levison TJ: Совместная помощь, ориентированная на пациента и семью: ортопедическая модель. Clin Orthop Rel Res. 2007, 463: 13-19.

Google ученый

17.

Энгуиданос С.М., Дэвис К., Кац Л.: Изменение парадигмы в управлении гериатрической помощью: переход от медицинской модели к уходу, ориентированному на пациента.Социальная работа здравоохранения. 2005, 41: 1-16.

Артикул PubMed Google ученый

18.

Ford PE, Rolfe S, Kirkpatrck H: Путешествие к ориентированной на пациента помощи в Онтарио, Канада: внедрение рекомендаций по передовой практике. ЦНС. 2011, 25: 198-206.

PubMed Google ученый

19.

Ханто А., Дженсен Л., Мальтеруд К.: Взаимопонимание: модель общения для общей практики.Scand J Prim Health Care. 2002, 20: 244-251. 10.1080 / 028134302321004926.

Артикул PubMed Google ученый

20.

Hatzichristou D, Tsimtsiou Z: Профилактика и лечение сердечно-сосудистых заболеваний и эректильной дисфункции: к общей модели ухода, ориентированной на пациента. Am J Cardiol. 2005, 96: 80М-84М.

Артикул PubMed Google ученый

21.

Келлехер С: Предоставление ориентированной на пациента помощи в отделении интенсивной терапии.Стенд Нурс. 2006, 21: 35-40.

Артикул PubMed Google ученый

22.

Кибичо Дж., Овчарзак Дж .: Модель аптечных услуг, ориентированная на пациента, при оказании помощи пациентам с ВИЧ в аптечных учреждениях сообщества: теоретическая и эмпирическая основа. Уход за больными СПИДом ST. 2012, 26: 20-28. 10.1089 / apc.2011.0212.

Артикул Google ученый

23.

Маккормак Б. Концептуальная основа для личностно-ориентированной практики с пожилыми людьми.Int J Nurs Pract. 2003, 9: 202-209. 10.1046 / j.1440-172X.2003.00423.x.

Артикул PubMed Google ученый

24.

Росвик Дж., Киркевольд М., Энгедал К., Брукер Д., Киркевольд О: Модель использования системы VIPS для ориентированного на человека ухода за людьми с деменцией в домах престарелых: качественное оценочное исследование. Int J Older People Nurs. 2011, 6: 227-236. 10.1111 / j.1748-3743.2011.00290.x.

Артикул PubMed Google ученый

25.

ван дер Эйк М., Фабер М.Дж., Аль-Шамма С., Муннеке М., Блум Б.Р.: Переход к ориентированной на пациента системе здравоохранения для пациентов с болезнью Паркинсона. Паркинсонизм, связанный с расстройством. 2011, 17: 360-364. 10.1016 / j.parkreldis.2011.02.012.

Артикул PubMed Google ученый

26.

Эпштейн Р.М., Фрэнкс П., Фиселла К., Шилдс К.Г., Мелдрам С.К., Кравиц Р.Л., Дуберштейн П.Р .: Измерение ориентированной на пациента коммуникации при консультациях врача и пациента: теоретические и практические вопросы.Soc Sci Med. 2005, 61: 1516-1528. 10.1016 / j.socscimed.2005.02.001.

Артикул PubMed Google ученый

27.

Colquhoun HL, Letts LJ, Law MC, MacDermid JC, Missiuna CA: обзор использования теории в исследованиях перевода знаний. CJOT. 2010, 77: 270-279. 10.2182 / cjot.2010.77.5.3.

Артикул PubMed Google ученый

28.

Всемирная организация здравоохранения: [http: // www.who.int/topics/health_promotion/en/

29.

Beck RS, Daughtridge R, Sloane PD: Взаимодействие между врачом и пациентом в отделении первичной медико-санитарной помощи: систематический обзор. J Am Board Fam Med. 2002, 15: 25-38.

Google ученый

30.

Чан З, Кан С., Ли П., Чан И., Лам Дж .: Систематический обзор качественных исследований: опыт пациентов в предоперационном общении. J Clin Nurs. 2012, 21: 812-824. 10.1111 / j.1365-2702.2011.03942.x.

Артикул PubMed Google ученый

31.

Дэвис Э.Л., О Б., Бутоу П.Н., Маллан Б.А., Кларк С.: Раскрытие информации о больных раком и общение между пациентом и врачом в отношении использования дополнительной и альтернативной медицины: систематический обзор. Онколог. 2012, 17: 1475-1481. 10.1634 / theoncologist.2012-0223.

Артикул PubMed PubMed Central Google ученый

32.

Эдвардс А., Грей Дж., Кларк А., Дандон Дж., Элвин Дж., Гафф С. Вмешательства для улучшения коммуникации риска в клинической генетике: систематический обзор. Советы по обучению пациентов. 2008, 71: 4-25. 10.1016 / j.pec.2007.11.026.

CAS Статья PubMed Google ученый

33.

Эдвардс А., Худ К., Мэтьюз Э, Рассел Д., Рассел И., Баркер Дж.: Эффективность индивидуальных вмешательств по информированию о рисках в здравоохранении: систематический обзор.МДМ. 2000, 20: 290-297. 10.1177 / 0272989X0002000305.

CAS Статья Google ученый

34.

Иган М., Берубе Д., Расин Г., Леонард С., Рочон Е. Методы улучшения вербального общения между людьми с болезнью Альцгеймера и их официальными и неформальными лицами, осуществляющими уход: систематический обзор. Int J Болезнь Альцгеймера. 2010, 2010: 1-12.

Артикул Google ученый

35.

Eggenberger E, Heimerl K, Bennett MI: Обучение коммуникативным навыкам при лечении деменции: систематический обзор эффективности, содержания обучения и дидактических методов в различных условиях оказания помощи. Int Psychogeriatr. 2013, 25: 345-358. 10.1017 / S1041610212001664.

Артикул PubMed Google ученый

36.

Fawole OA, Dy SM, Wilson RF, Lau BD, Martinez KA, Apostol CC: систематический обзор мероприятий по улучшению качества связи для пациентов с запущенными и тяжелыми заболеваниями.J Gen Intern Med. 2013, 28: 570-577. 10.1007 / s11606-012-2204-4.

Артикул PubMed Google ученый

37.

Финке Э., Лайт Дж., Китко Л.: систематический обзор эффективности общения медсестры с пациентами со сложными коммуникационными потребностями с акцентом на использование усиливающих и альтернативных способов общения. J Clin Nurs. 2008, 17: 2102-2115. 10.1111 / j.1365-2702.2008.02373.x.

Артикул PubMed Google ученый

38.

Хэнкок К., Клейтон Дж. М., Паркер С. М., Уолдер С., Бутов П. Н., Каррик С.: Несоответствующие представления о коммуникации в конце жизни: систематический обзор. J Управление симптомами боли. 2007, 34: 190-200. 10.1016 / j.jpainsymman.2006.11.009.

Артикул PubMed Google ученый

39.

Харрингтон Дж., Нобл Л. М., Ньюман С. П.: Улучшение общения пациентов с врачами: систематический обзор интервенционных исследований. Советы по обучению пациентов. 2004, 52: 7-16.10.1016 / S0738-3991 (03) 00017-X.

Артикул PubMed Google ученый

40.

Генри С.Г., Фурель-Форбис А., Роджерс М.А., Эггли С.: Связь между невербальным общением во время клинических взаимодействий и исходами: систематический обзор и метаанализ. Советы по обучению пациентов. 2012, 86: 297-315. 10.1016 / j.pec.2011.07.006.

Артикул PubMed Google ученый

41.

Янссен С.М., Лагро-Янссен А.Л .: Пол врача, стиль общения, предпочтения пациентов и удовлетворенность пациентов гинекологией и акушерством: систематический обзор. Советы по обучению пациентов. 2012, 89: 221-226. 10.1016 / j.pec.2012.06.034.

Артикул PubMed Google ученый

42.

Laidsaar-Powell RC, Butow PN, Bu S, Charles C, Gafni A, Lam WW: Врач-пациент-компаньон общение и принятие решений: систематический обзор триадных медицинских консультаций.Советы по обучению пациентов. 2013, 91: 3-13. 10.1016 / j.pec.2012.11.007.

CAS Статья PubMed Google ученый

43.

Oliveira VC, Refshauge KM, Ferreira ML, Pinto RZ, Beckenkamp PR, Negrao Filho RF: Коммуникация, в которой ценится автономия пациента, связана с удовлетворенностью лечением: систематический обзор. J Physiother. 2012, 58: 215-229. 10.1016 / S1836-9553 (12) 70123-6.

Артикул PubMed Google ученый

44.

Parker SM, Clayton JM, Hancock K, Walder S, Butow PN, Carrick S: систематический обзор прогностического общения / общения в конце жизни со взрослыми на поздних стадиях ограничивающего жизнь заболевания: предпочтения пациента / опекуна для содержание, стиль и сроки предоставления информации. J Управление симптомами боли. 2007, 34: 81-93. 10.1016 / j.jpainsymman.2006.09.035.

Артикул PubMed Google ученый

45.

Пинто Р.З., Феррейра М.Л., Оливейра В.К., Франко М.Р., Адамс Р., Махер К.Г.: Общение, ориентированное на пациента, связано с позитивным терапевтическим альянсом: систематический обзор.J Physiother. 2012, 58: 77-87. 10.1016 / S1836-9553 (12) 70087-5.

Артикул PubMed Google ученый

46.

Родин Г., Маккей Дж. А., Циммерманн С., Майер С., Хауэлл Д., Кац М.: Связь между врачом и пациентом: систематический обзор. Поддерживающая терапия рака. 2009, 17: 627-644. 10.1007 / s00520-009-0601-у.

Артикул Google ученый

47.

Scheunemann LP, McDevitt M, Carson SS, Hanson LC: рандомизированные контролируемые испытания вмешательств для улучшения коммуникации в отделениях интенсивной терапии: систематический обзор.Грудь. 2011, 139: 543-554. 10.1378 / сундук.10-0595.

Артикул PubMed Google ученый

48.

Слорт В., Швейцер Б.П., Бланкенштейн А.Х., Абарши Е.А., Рифаген II, Эхтельд М.А.: Воспринимаемые препятствия и помощники для общения врача общей практики с пациентом в паллиативной помощи: систематический обзор. Palliat Med. 2011, 25: 613-629. 10.1177 / 0269216310395987.

CAS Статья PubMed Google ученый

49.

Tay LH, Hegney D, Ang E: Факторы, влияющие на эффективное общение между дипломированными медсестрами и взрослыми больными раком в стационарных условиях: систематический обзор. Int J Evid Based Healthc. 2011, 9: 151-164. 10.1111 / j.1744-1609.2011.00212.x.

Артикул PubMed Google ученый

50.

Томпсон Л., МакКейб Р.: Влияние альянса между врачом и пациентом и коммуникации на приверженность лечению в сфере психиатрической помощи: систематический обзор.BMC Psychiatry. 2012, 12: 87-10.1186 / 1471-244X-12-87.

Артикул PubMed PubMed Central Google ученый

51.

Uitterhoeve RJ, Bensing JM, Grol RP, Demulder PH, Van AT: Влияние обучения коммуникативным навыкам на исходы лечения больных раком: систематический обзор литературы. Eur J Cancer Care. 2010, 19: 442-457.

CAS Статья Google ученый

52.

Vasse E, Vernooij-Dassen M, Spijker A, Rikkert MO, Koopmans R: Систематический обзор коммуникативных стратегий для людей с деменцией в домах престарелых и престарелых. Int Psychogeriatr. 2010, 22: 189-200. 10.1017 / S10416102099.

Артикул PubMed Google ученый

53.

Wanyonyi KL, Themessl-Huber M, Humphris G, Freeman R: систематический обзор и метаанализ личного общения индивидуальных сообщений о здоровье: значение для практики.Советы по обучению пациентов. 2011, 85: 348-355. 10.1016 / j.pec.2011.02.006.

Артикул PubMed Google ученый

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно.Ниже приведены наиболее частые причины:

В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
Дата на вашем компьютере в прошлом.Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

RA Mayes | Ramsey Electronics

Номер детали

Описание

Проходные коаксиальные соединители

ВНУТРЕННИЙ НА ВНУТРЕННИЙ

СОЕДИНЕНИЕ 105

BNC Суперобложка Фото

СОЕДИНЕНИЕ 103

Проходной разъем BNC 50 Ом Фото

СОЕДИНЕНИЕ275-75

BNC Проходной разъем 75 Ом Фото

СОЕДИНЕНИЕ 175

SMA Суперобложка Фото

CONN390

SMA Проходной соединитель Фото (заменяет старый номер детали CONN157)

СОЕДИНЕНИЕ 283

МСБ Разъем от Джека к Переборке Джека Фото

СОЕДИНЕНИЕ 174

TNC Суперобложка Фото

СОЕДИНЕНИЕ 60

TNC Фото

СОЕДИНЕНИЕ 159

Тип F Проходной соединитель (солдат) Фото

СОЕДИНЕНИЕ 294

Тип F Проходной соединитель (гнездо-гнездо)

СОЕДИНЕНИЕ 173

Тип N Суперобложка Фото

СОЕДИНЕНИЕ 104

Тип N Проходной соединитель Фото

СОЕДИНЕНИЕ 209

Тип N к проходному разъему SMA Фото

CONN307

УВЧ Разъем переборки с внутренней резьбой Фото

Соединители D-Sub с РЧ фильтром

ЖЕНСКИЙ НА МУЖСКОЙ

СОЕДИНЕНИЕ 278

ДБ 9 10 ПФ Разъем (с фильтром RF) Фото
Используется для очень высоких скоростей. данные, <= 400 Мбит / с (требуется для USB 2.0)
* Включает экранированный пылезащитный колпачок EMI39 RF Техническая записка

СОЕДИНЕНИЕ 207

ДБ 9 100 Разъем PF (с фильтром RF) Фото
Используется для высокоскоростной передачи данных, <= 150 Мбит / с (требуется для USB 1.x или 10/100 Ethernet)
* Включает пылезащитный колпачок EMI39 RF

CONN67

ДБ 9 1000 Разъем PF (с фильтром RF) Фотография для RS-232
* Включает EMI39 Защитный колпачок RF

СОЕДИНЕНИЕ 113

ДБ 9 Смена пола от женщины к женщине Фото

CONN311

ДБ 9 Смена пола от мужчины к мужчине Фото

СОЕДИНЕНИЕ 259

DB15 100 Разъем PF (с фильтром RF) Фото
Используется для интерфейса с фильтром VGA

CONN216

DB15 1000 Разъем PF (с фильтром RF) Фото
Используется для VGA фильтрованный интерфейс

СОЕДИНЕНИЕ 204

DB15 820 Разъем PF (с фильтром RF) Фото

СОЕДИНЕНИЕ 346

DB25 100 Разъем PF (с фильтром RF) Фото

КОНН. 156

DB25 1000 Разъем PF (с фильтром RF) Фото

КОНН. 345

DB25 310 Разъем PF (с фильтром RF) Фото

CONN260

DB37 1000 Разъем PF (с фильтром RF) Фото

СОЕДИНЕНИЕ 261

DB37 310 Разъем PF (с фильтром RF) Фото

СОЕДИНЕНИЕ 288

DB50 1000 Разъем PF (с фильтром RF) Фото

СОЕДИНЕНИЕ 276

DB50 310 Разъем PF (с фильтром RF) Фото

STEDC2010 (Новый)

20 Отдельные отфильтрованные строки

Разъемы Ethernet

STE10GBE

Фильтр 10 GIGABIT Ethernet с POE, Интерфейс Ethernet обеспечивает 10GBASE-T Ethernet используя стандартные кабели CAT6A или CAT7.Данные

STERJ4510G

10/100/1000 / 10,000 Ethernet-фильтр с POE, RF-экранированный, с крышкой порта, но NO Filtering Данные

STEGBE4590

10/100/1000 Ethernet-фильтр с POE , вставка 100 дБ Потери от 10 кГц до 10 ГГц Данные

STEGBE4591

Ethernet-фильтр 10/100/1000 с POE , но Без автоматического определения режима POE, вставка 100 дБ Потери от 10 кГц до 10 ГГц Данные

СТЕРЖ45

RJ45 Комплект адаптера Фото ЭТО ПАРА ПЕРЕХОДНИКОВ Техническая записка
Подключается к DB9 с фильтром RF 100 пФ (не в комплекте)
RJ45 подключается к розетке DB9 на внутренней стороне
RJ45 подключается к штекеру DB9 снаружи

USB-коннекторы

STEUSB3CC

Экранированный USB 3.x Высокоскоростной интерфейс

Данные

USB Type C Входные и выходные разъемы

STEUSB312

Фильтр электромагнитных помех Ulimate High Speed USB 3.x Данные (НАИЛУЧШИЙ для USB 3.x)

STEUSB3AA

Нефильтрованный экранированный USB2.0 / 3,0 / 3,1 A-A разъем ввода / вывода Данные

STEUSB2071

Фильтр электромагнитных помех Ulimate High Speed USB 2.x Данные Фото

STEUSB-S

USB-S Комплект экранированного адаптера Фото Техническая записка
Подключается к DB9 с фильтром RF (не входит в комплект)
USB-A подключается к гнезду DB9 на внутренней стороне
USB-B подключается к штекеру DB9 снаружи
Используйте 100 пФ DB9 для USB1.x и 10 пФ DB9 для USB2.0.

STEUSB-AS

USB-AS экранированный Комплект Адаптера Фото
Подключается к DB9 с фильтром RF (не входит в комплект).
USB-A подключается к гнезду DB9 на внутренней стороне
USB-A подключается к гнезду смены пола DB9 на внешней стороне
Используйте 100 пФ DB9 для USB1.x и 10 пФ DB9 для USB2.0.

Другие разъемы

ВОЛОКНО-ОПТИЧЕСКОЕ

CONN271

ФК Симплекс к FC Simplex Fiber Bulkhead Фото

СОЕДИНЕНИЕ 374

ST Многомодовый в ST Многомодовый Переборка Фото

CONN317

СОЕДИНИТЕЛЬ FIBER APC FC BULKHEAD (гнездо к гнезду)

КОМПЛЕКТЫ ПЕРЕХОДНИКОВ ДАННЫХ

STE1394

IEEE Комплект адаптера 1394 (FireWire) Фото
Подключается к DB9 10pF с фильтром RF (не входит в комплект)
ЭТО ПАРА АДАПТЕРОВ

СТЕВГА

VGA Комплект адаптера интерфейса монитора Фото
Подключается к РФ Фильтрованный DB15 (не входит в комплект)
ЭТО ПАРА ПЕРЕХОДНИКОВ

STEHR210 (Новый)

HDMI (Компактный) Разъем ввода-вывода, который передает видео 4K до 2160p Данные

CONN351

DB9 — RJ11 / Мужской Фото
Подключается к РФ DB9 с фильтром (не входит в комплект)
ЭТО ОДИН ПЕРЕХОДНИК

CONN352

DB9 — RJ11 / Женский Фото
Подключение к РФ DB9 с фильтром (не входит в комплект)
ЭТО ОДИН ПЕРЕХОДНИК

СОЕДИНЕНИЕ199

PS / 2 К DB9 F-F, ПОДКЛЮЧАЕТСЯ К ВЧ-ФИЛЬТРУЮЩЕМУ DB9
ЭТО ОДИН АДАПТЕР

СОЕДИНЕНИЕ 187

PS / 2 К DB9 M-M, ПОДКЛЮЧАЕТСЯ К ВЧ-ФИЛЬТРУЮЩЕМУ DB9
ЭТО ОДИН АДАПТЕР

Фильтры переменного / постоянного тока

STEIEC25010C

Модуль ввода питания IEC , 10 А, 350 В переменного тока, 1000 В постоянного тока, данные

STERF8

4 полюса Клеммная колодка AC с фильтром Фото 0 — 250 В переменного тока, 20 А

СТЕРФ13

4 полюса Клеммная колодка DC с фильтром Фото 0 — 100 В постоянного тока, 20 А

СТЕФИЛ24

6 полюсов Клеммная колодка AC с фильтром Фото 0 — 250 В переменного тока, 20 А

STEFILT8

6 полюсов Клеммная колодка DC с фильтром Фото 0 — 100 В постоянного тока, 20 А

BJ4Term

Установка одного двойного бананового разъема внутри и за пределами 4 клеммной перегородки
(4 клеммной перегородки не включены) Фото

BJ6Term

Установка двух двойных банановых домкратов внутри и за пределами 6 клеммной перегородки
(6 клеммных перегородок не включены) Фото

PWRSTRP

6 Розетка 120 В переменного тока УДЛИНИТЕЛЬ (Тип B) Фото

PS38

4 Розетка 120 В переменного тока УДЛИНИТЕЛЬ (Тип B)

PS26

6 розетка 220 В переменного тока ЕВРОПЕЙСКИЙ ШУКО (ТИП F) Фото

52904

4 Розетка 220 В переменного тока ЕВРОПЕЙСКИЙ ШУКО (ТИП F) Фото

52205

5 Розетка 220 В переменного тока ИНДИЯ (ТИП M) Фото

56125

5 Розетка 220 В переменного тока ИЗРАИЛЬ (ТИП C) Фото

52125

5 Розетка 220 В переменного тока Великобритания (ТИП G) Фото

53326

6 розетка 220 В переменного тока КИТАЙ АВСТРАЛИЯ (ТИП I) Фото

58206

6 розетка 220 В переменного тока ИНДИЯ (ТИП D) Фото

55506

6 розетка 220 В переменного тока ШВЕЙЦАРИЯ (ТИП J) Фото

52150

4 Розетка 220 В переменного тока ВЕЛИКОБРИТАНИЯ (ТИП G)

PS29

Мощность 12 В постоянного тока поставка — 90/240 В перем. Тока авто переключение

PS40

Вилка в стиле США для PS29

Прочие опции

СТИВЕНТ

ВАРИАНТ ВЕНТИЛЯЦИИ 80 ММ (ВКЛЮЧАЕТ 3 «ВЕНТИЛЯТОР 120 или 230 В переменного тока) Фото

STEVENT2

ВАРИАНТ ВЕНТИЛЯЦИИ 60 ММ (ВКЛЮЧАЕТ 1.265 «120 В перем. Тока ПОКЛОННИК) Фото

STEVENT3

ОПЦИЯ ВЕНТИЛЯЦИИ 120 ММ (ВКЛЮЧАЕТ ВЕНТИЛЯТОР 4,72 ДЮЙМА, 48 КУЛЬТОВ / МИН, 120 В переменного тока)

СТИВЕНТ-ВЕНТИЛЯТОР

ВАРИАНТ ВЕНТИЛЯЦИИ ДЛЯ STE, ВКЛЮЧАЕТ ДВА ЗАЩИТНЫХ ВЕНТИЛЯТОРА

RFINHIBIT

Реле переменного тока и магнитный переключатель Выключает все кондиционеры внутри ящика при открытии крышки или двери.Снова загорается при закрытии крышки. 15 ампер макс

STEINHIBIT

ВЫКЛЮЧАТЕЛЬ ВЫКЛЮЧАЕТ ВСЕ ПИТАНИЕ В КОРОБКЕ, КОГДА КРЫШКА ИЛИ ДВЕРЦА ОТКРЫВАЕТСЯ И СНОВА ВКЛЮЧАЕТСЯ ПРИ ЗАКРЫТИИ КРЫШКИ, 15 AMP MAX.

STEMAGSWT

Магнитный Датчик и магнитный фланец Фото

СТЬЮИНДАУ

9.ЗАЩИТНОЕ ОКНО ОБЗОРА 5 «Ш x 3,5» В ДЛЯ КОРПУС STE

ПЕРЧАТКИ ЗАЩИТНЫЕ

ПРЕДОСТАВЛЯЕТ ЗАЩИТНЫЕ ПЕРЧАТКИ ДЛЯ МАНИПУЛЯЦИИ ИЛИ НАЖМИТЕ КНОПКИ НА EUT

РФ50

Лист поглотителя микроволн 1/2 «x 24″ x 24 »

РФ75

Лист поглотителя СВЧ 3/4 «x 24» x 24 «

STERTF006

Излучатель с диапазоном частот от 700 МГц до 6 ГГц с Антенна, кабель и разъем SMA

СТАЛЬНАЯ

12 В постоянного тока / 12 Светодиодная доска Фото (9.5 дюймов x 1,0 дюйма x 0,5 «В)

Дополнительное оборудование безопасности

Запираемые защелки	Защелки запорные


Болты защиты от взлома	Аппаратное обеспечение безопасности

 2nd IF = 450KHz
10
Q7
2SC4211
Q6
2SC4215
ЯВЛЯЮСЬ
DET
ЕСЛИ
AMP
D30
1SV307
КЕРАМИЧЕСКИЙ
БНФ
IC18
TC4W53FU
ЕСЛИ
AMP
W / N
ЮЗ
1-й ЕСЛИ = 38.85 МГц
FI3
CFWM450D
D51 ~ D52
1СВ271 Х2
Q4 ~ Q5
2SC4215 X2
FIL
ЮЗ
IC17
TC4W53FU
FI4
CFG450H
D44: MA8051
IC40: TA31136FN
2-й IF
IC
W / N
ЮЗ
КЕРАМИЧЕСКИЙ
БНФ
D28
1SV307
FI1
FL-306
D50: 1SV271
Q3: 2SC4215
1-й МИКС
FIL
ЮЗ
XTAL
БНФ
10
2 квартал
3SK184
D31
1SV307
FIL
ЮЗ
IF AGC
Q77
2SD1819A
FI2
FL-307
AGC
AMP
FIL
ЮЗ
БУФФ
Q68
XP4315
БУФФ
Q78
2SD1819A
D6, D37
HVU350 X2
РФ
AMP
РФ
БНФ
D29
1SV307
XTAL
БНФ
Q69
DTB123EK
Q1
3SK184
D7, D8
HVU350 X2
ЕСЛИ
AMP
D38
1SV271
РФ
БНФ
МУРАВЕЙ
ЮЗ
LPF
TX и RX = 118,0 ~ 136,975 МГц
D53.D54: MA2S11
Q73: 2SC4081
РФ АРУ
AGC
AMP
D1 ~ D3
UM9401F X3
RX
ATT
1-й Lo: 79.15 МГц ~ 98,125 МГц
БУФФ
НАСТРОЙКА
2-я нижняя: 38,4 МГц
SQLI
LPF
FISW
+ 5В
IC16
TC4W53FU
IC4: BA3308F
D14: MA8036L
R110
IC51
TA75S01F
IC5
TA75S01F
IC19
NJM2902V
MOD / AF
ЮЗ
ЭКСТМИЧЕСКИЙ
ВХОД / ВНЕШНИЙ
ПО микрофона
EPTT
AF OUT
AF
AMP
ALC
AMP
MIC
УРОВЕНЬ ADJ
LPF
Q33
XP4315
АКК
TRC
Q15
2SC4228
Q14
2SC4403
БУФФ
БУФФ
IC13
TC9260F
AF
AMP
S MUTE
ЮЗ
E-VOL
R MUTE
R150
POWER ADJ
X1
Артикул КЛ 658
TX: 118,0 ~ 136,975 МГц
RX: 79,15 ~ 98,125 МГц
LPF
VCO
НАСТРОЙКА
ADJ
RMUTE
Q12
2SC4403
Q43
2SC4226
БУФФ
БУФФ
Q44: 2SC4226
D64: HVU350
ИС ФАПЧ
S MUTE
PWR
DET
БТР
CNT
БТР
AMP
D4, D5
RB706F X2
TCXO
(12.8 МГц)
НАСТРОЙКА
БУФФ
AF
AMP
BEEP
D43: 1SS352
Q74: 2SB798
Q75: 2SC4081
Q86: XP4315
Т1
СТ-82П
IC42
TA75S01F
IC50
TA75S01F
T MUTE
AMP
12,8 МГц
IC30
TC4S66F
PWR
AMP
Q99
2SC4116
Q79
2SK880
R59
IC6: TC4S66F
Q80: DTA144EU
Q81: DTC144EU
Q51
MRF137
Q11
2SC4081
PWR
CNT
PTTS
IC37
TDA7233D
ИМПЕДАНС
ПЕРЕРАБАТЫВАТЬ
Q98
2SA1586
D10, D11
MA77 X2
TMUTE
PTT
ПРОДОЛЖЕНИЕ
ПРЕД
ВОДИТЬ МАШИНУ
MOD V
R / T
ЮЗ
T8
R / T
ПРОДОЛЖЕНИЕ
D27: MA111
Q52: 2SA1622
HPF
MOD ADJ
R121
IC22
TC4W53FU
Q21
2SK3075
ПРЕД
ВОДИТЬ МАШИНУ
IC28
TC4S66F
J7
ВНЕШНИЙ МИКРОФОН
УРОВЕНЬ ADJ
R336
J6
Q83, Q84
2SC4215 X2
ТРИПЛЕР
AMP
Q20
2SK3074
ПРЕД
AMP
SQL
ПРОДОЛЖЕНИЕ
RSSI
Техас: 118.0 ~ 136,975 МГц
Q42
2SC4403
IC11: NJM2107F
IC31
TA75S01F
TX VCO
IC2
TB31207AFN
AF MUTE
EXT SP
D66: SB07-03C
Q100: FW215
Q101: DTC144EU
SMUTE
IC41
TA8208H
Q59: 2SC4226
D65: HVU350
ПЕТЛЯ
FIL
SP MUTE
RX VCO
PWR
AMP
AF MUTE
IC5
BU4094BC
Q94
FW215
SP OUT
ЮЗ
LEDC2
БУФФ
8В
D62: SB07-03C
Q96: DTC144EU
Q97: DTC144EU
Q72: XP4315
Q53: DTB123EK
S2
IC2
S-80942ANNP
Процессор
VUP
D57: SB07-03C
IC47: HIP4081A
SP OUT
ПРОДОЛЖЕНИЕ
R8
ЮЗ
R8
S3
MOD / AF
ЮЗ
TRC
AF
HD6433823A19D
ЗАЩИЩАТЬ
В / м
ЛИНИЯ
ФИЛЬТР
D56
DE5SC6M
AF
AMP
Q71: DTC144EE
Q70: DTB123EK
S4
AF
ВЛАСТЬ
AMP
IC44
uPC311
MOD
IC1
D6
DA204U
Q92, Q93
2СК2414 Х2
Полевой транзистор
ВОДИТЕЛЬ
IC48
TC4W53FU
СБРОС НАСТРОЕК
ВДН
R / T
R / T
ПРОДОЛЖЕНИЕ
РАСШИРЯТЬ
В5: DTA143ZU
Q6: DTC114EU
DS1
HLC7453-012400
VCO
R / T SW
4 квартал
XP4315
LEDC1
БУФФ
ЖК-дисплей
Рябь
FIL
+ 8В
Q1: DTA143ZU
Q7: DTC114EU
Q58
XP1113
Q16
2SC4116
ЖК-дисплей
ЗАДНИЙ СВЕТ
DS2 ~ DS7
CL-170Y-CD X6
DC-DC
DET
T8
ЮЗ
T8
S5
PRI
PBRC3.68AR
(3,68 МГц)
S7
IC26
TA78L05F
TMUT
X1
+5
REG
+ 5В
CPU5V
+ 8В
REG
+ 5В
EEPROM
DC-DC
ПЕРЕРАБАТЫВАТЬ
AMP
Полевой транзистор
ВОДИТЕЛЬ
IC46
MC33063AD
ИСТОЧНИК ПОСТОЯННОГО ТОКА
13,8 В или 24,0 В
Q91
2SK2414
ВЛАСТЬ
УСИЛЕНИЕ ВВОДА / ВЫВОДА
S1
НАБИРАТЬ НОМЕР
IC3
TC7W04FU
+ 5В
IC4
25LC160T-1 / SN
IC29
BA08FP
УСИЛЕНИЕ ВВОДА / ВЫВОДА
+ 5В
ТЕКУЩИЙ
AMP
+ 5В
+ 5В
REG
+ 8В
REG
D36
DSA3A1
ПРЕОБРАЗОВАТЕЛЬ DC-DC
Q22: 2SC4211
Q23: 2SB1132
D15: MA111
+ 8В
Клонирование ввода / вывода
ЛИНИЯ
ФИЛЬТР
VCC
ПЕРЕДНИЙ БЛОК
J2
IC15
MC33063AD
DC-DC
DET
ВЛАСТЬ
AMP
Q87, Q88
2СК2414 Х2
Полевой транзистор
ВОДИТЕЛЬ
DC-DC
ПЕРЕРАБАТЫВАТЬ
КОНТРОЛЬ
D55: SB07-03C
IC43: HIP4081A
ЗАЩИЩАТЬ
ВЛАСТЬ
SW CTRL
ВЛАСТЬ
ЮЗ
D26
DE5SC6M
IC7
S-81350HG
TS
VCC
8В
ПРИМЕЧАНИЯ
Q102
2SC4081
Q90
2SA1471
RX
Техас
ВЛАСТЬ
SW CTRL
Q89
XP1501AB
RX / TX
ДАННЫЕ
АВТОБУС
PTT
PSWC
MIC
ВЕШАТЬ
РАЗЪЕМ МИКРОФОНА
ИЗМЕНЕНИЯ
SP
SP
10
11
12
APPD.ЧКД.
DWN.BY: DATE
1999.11.09
БЛОКИРОВАТЬ
ДИАГРАММА
ИКОМ
МОДЕЛЬ
DWN.No.
AX-2270
5B1
Icom Inc
Q2: 2SA1622
Q3: 2SC4211
D5: MA111
S8
IC47A
HIP4081A
DC-DC
ПЕРЕРАБАТЫВАТЬ
КОНТРОЛЬ
REF, V
КОНТРОЛЬ
W1
SQL
IC45
NJM072BM
D35: MA8330
Q82: 2SC4081
PSWC
S6
СКАНИРОВАТЬ

Присутствие ревматоидного фактора во время хронической инфекции ВГС связано с увеличением количества зрелых активированных В-клеток памяти, которые являются гипореактивными на стимуляцию В-клеточного рецептора и сохраняются на ранней стадии терапии без IFN

Abstract

Примерно половина людей с хронической инфекцией вируса гепатита C (HCV) имеют циркулирующий ревматоидный фактор (RF), и у части этих людей развивается криоглобулинемический васкулит.Фенотип / функция В-клеток по отношению к РФ в сыворотке неясен. Мы исследовали распределение субпопуляций В-клеток, состояние активации (CD86), состояние клеточного цикла (Ki67) и реакцию ex vivo на стимуляцию BCR, TLR9 и TLR7 / 8 у доноров, инфицированных хроническим гепатитом С с или без РФ, и неинфицированных доноров. Зрелые активированные B-клетки инфицированных HCV доноров имели более низкую экспрессию CD86 по сравнению с неинфицированными донорами, а в присутствии RF они также демонстрировали сниженную экспрессию CD86 в ответ на стимуляцию BCR и TLR9.Кроме того, зрелые активированные В-клетки памяти доноров RF + HCV реже экспрессировали Ki67 ⁺, чем доноры RF- HCV, и не пролиферировали также в ответ на стимуляцию BCR. Пропорции зрелых активированных В-клеток были увеличены, в то время как наивные В-клетки были ниже в периферической крови HCV-RF + по сравнению с RF- и неинфицированными донорами. Ни один из этих параметров не нормализуется к 8 неделе лечения противовирусными препаратами прямого действия (DAA), не содержащими IFN, у доноров RF + HCV, в то время как у доноров RF- пропорции зрелых активированных B-клеток нормализовались.Эти данные показывают, что, хотя хроническая инфекция HCV сама по себе приводит к более низкому состоянию активации зрелых активированных B-клеток памяти, присутствие RF в сыворотке связано с более выраженным состоянием невосприимчивости и чрезмерной представленностью этих B-клеток в крови. Этот фенотип сохраняется, по крайней мере, в течение раннего временного окна после удаления HCV от хозяина.

Образец цитирования: Reyes-Avilés E, Kostadinova L, Rusterholtz A, Cruz-Lebrón A, Falck-Ytter Y, Anthony DD (2015) Присутствие ревматоидного фактора во время хронической инфекции HCV связано с расширением зрелых активированных B-клеток памяти которые являются гипореактивными на стимуляцию рецептора В-клеток и сохраняются на ранней стадии терапии без интерферона.PLoS ONE 10 (12): e0144629. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0144629

Редактор: Наглаа Х. Шукри, Исследовательский центр больниц Монреальского университета (CRCHUM), КАНАДА

Поступила: 3 сентября 2015 г .; Одобрена: 21 ноября 2015 г .; Опубликовано: 9 декабря 2015 г.

Это статья в открытом доступе, свободная от всех авторских прав, и ее можно свободно воспроизводить, распространять, передавать, модифицировать, надстраивать или иным образом использовать в любых законных целях.Работа сделана доступной по лицензии Creative Commons CC0, выделенная в общественное достояние.

Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в документе и его файлах с вспомогательной информацией.

Финансирование: Эта работа была поддержана NIH R01 DK068361, R21 AI100809-01, VA Merit 110BX001894-01, T32-AR007505-25 и T32AI089474. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что конкурирующих интересов не существует.

Сокращения: ALT, аланинаминотрансфераза; АСТ, аспартатаминотрансфераза; APRI, Индекс соотношения AST / PLT; BCR, Рецептор В-клеток; CD, Кластер дифференциации; CFSE, Сукцинимидиловый эфир карбоксифлуоресцеина; DAA, Противовирусная терапия прямого действия; ELISA, Иммуноферментный анализ; FCS, фетальная телячья сыворотка; ВГС, вирус гепатита С; МФО, Средняя интенсивность флуоресценции; PBMC, Мононуклеарные клетки периферической крови; PBS, забуференный фосфатом физиологический раствор; PLT, Тромбоцит; РФ, ревматоидный фактор; TLR, толл-подобный рецептор; UD, неинфицированные доноры

Введение

По оценкам, 170 миллионов человек во всем мире хронически инфицированы вирусом гепатита С (ВГС) [1] и 3.4–4,4 миллиона человек в США [2]. ВГС поражает печень, где хроническая инфекция может привести к циррозу, печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциноме [3, 4]. Инфекция HCV также приводит к аутоиммунитету, включая криоглобулинемию, характеризующуюся накоплением комплексов, состоящих из IgG, связанного с HCV, и IgM, который связывается с Fc-частью IgG (ревматоидный фактор или RF-активность) [5–7]. Симптомы включают слабость и артралгию, а в более тяжелых случаях могут развиться невропатия, почечная недостаточность и летальный исход [8, 9].Распространенность криоглобулинов и RF колеблется от 19% до 50% при хронической инфекции HCV [10].

У здоровых доноров в крови чаще всего встречаются наивные и находящиеся в состоянии покоя В-клетки памяти [11]. При хронической ВИЧ-инфекции зрелые активированные В-клетки памяти (CD21 ^{— / lo} CD27 ⁺) демонстрируют сниженную пролиферативную способность и повышенную экспрессию CD86 [12, 13]. При инфекции HCV с криоглобулинемией CD21 ^lo CD27 ⁺ B-клетки снижали мобилизацию кальция после стимуляции BCR [14, 15].Снижение передачи сигналов BCR также наблюдалось в CD21 ⁺ CD27 ⁺ B-клетках доноров HCV с криоглобулинемией [16]. Дальнейшая характеристика необходима для оценки того, какая субпопуляция В-клеток (CD21 ^{— / lo} CD27 ⁺ или CD21 ⁺ CD27 ⁺) не регулируется во время инфекции HCV. Мы показали, что при инфекции ВГС увеличивается доля зрелых активированных В-клеток, и это связано с более низким циклом клеточного цикла (экспрессия ki-67) [17]. Связаны ли эти наблюдения со статусом РФ, неизвестно.Наши результаты здесь показывают, что RF-позитивность является доминирующим фактором, связанным с увеличенными пропорциями зрелых активированных B-клеток памяти, и эти клетки имеют фенотип, связанный с состоянием невосприимчивости. Несмотря на более чем 4-недельную элиминацию вируса, это чрезмерное количество гипочувствительных зрелых активированных В-клеток памяти остается у доноров RF + HCV, но не у доноров RF- HCV.

Материалы и методы

Участники исследования

субъектов с хроническим гепатитом С RF- (n = 23), RF + (n = 20) и неинфицированных доноров (n = 23) были зачислены из клиники Кливленда и университетских больниц для взятия венозной крови в Медицинском центре Кливленда и университетских больницах Кливленда. утверждены протоколы Институционального наблюдательного совета.Все пациенты дали письменное информированное согласие в соответствии с Хельсинкской декларацией. У субъектов, инфицированных вирусом гепатита C, сывороточные антитела к вирусу гепатита C были положительными в течение по крайней мере 6 месяцев, положительными по РНК вируса гепатита C с помощью ПЦР и не лечились по поводу инфекции вируса гепатита C. Статус RF определяли с помощью ELISA (см. Ниже). Неинфицированные доноры имели отрицательные антитела к ВГС и ВИЧ и были взяты из популяции пациентов Кливленда, штат Вирджиния, посещающих общую медицинскую клинику. Характеристики испытуемых представлены в Таблице 1 . Возраст, раса / этническая принадлежность и пол не различались.Из 20 доноров HCV RF + 5 были проверены на криоглобулины в сыворотке и дали отрицательный результат.

Образцы пролонгированной противовирусной терапии прямого действия (ПППД) без ИФН

Образцы периферической крови от 20 пациентов, получавших терапию ПППД без IFN (Софосбувир 90 мг / Ледипасвир 400 мг / весовой рибавирин (терапия 1000–1200 мг / день n = 19, или Омбитасвир, Паритапревир в сочетании с Ритонавиром, Дасабувиром, Рибавирином, n = 1) были получены на исходном уровне и на 8-й неделе. Критерии включения включали хроническую инфекцию HCV (> 6 месяцев серопозитивной или РНК-положительной), генотип 1 HCV и отсутствие в сыворотке поверхностного антигена гепатита B и антител к ВИЧ.Исходные характеристики 20 субъектов исследования показаны в таблице S1 . Ни один из них не был проверен на криоглобулины в сыворотке.

Проточный цитометрический анализ

Анализ девяти параметров проточной цитометрии был проведен на 200 мкл цельной крови. Лимфоциты оценивали по прямому и боковому разбросу и окрашивали по следующим параметрам: анти-CD19-PECy5 (клон HIB19), анти-CD20-APC-H7 (клон L27), анти-CD10-APC (клон HI10a), анти-CD21. — PE (клон B-ly4), анти-CD27-PECy7 (клон M-T271) (все от BD Biosciences, Сан-Хосе, Калифорния) и анти-CD38-Alexa Fluor 700 (клон HIT2, Biolegend, Сан-Диего, Калифорния) .По крайней мере, 20000 событий CD19 + B-клеток были получены на цитометре LSRII, управляемом программным обеспечением FACSDiVa версии 6.2. Анализ проводился с использованием программного обеспечения FlowJo Version 10. Гранулы BD TruCOUNT (BD Biosciences) использовали для абсолютного подсчета CD19 + B-клеток. Для CD86 FITC (клон 2331, BD Biosciences, Сан-Хосе, Калифорния) цельную кровь окрашивали в течение 10 минут в темноте при комнатной температуре, затем лизировали в течение 2 минут 2 мл BD Lyse (BD Pharmigen, Сан-Диего, Калифорния) и промывали. с 2 мл 0,1% BSA + PBS, затем зафиксировали 200 мкл стабилизирующего фиксатора BD (BD Biosciences).Для Ki-67 (клон B56, BD Biosciences) цельную кровь окрашивали, как указано выше, но пермеабилизировали с помощью BD Cytofix / Permeabilization (BD Biosciences) на льду в течение 20 минут, промывали 2 мл Perm Wash (BD Biosciences) и окрашивали 20 мкл анти-Ki-67 FITC в течение 30 минут на льду, дважды промывали 2 мл перманентной промывки и фиксировали.

Сортировка зрелых активированных В-клеток памяти и анализ Phosflow

В-клеток были обогащены Rosette Sep (Stemcell, Ванкувер, Канада) из 100 мл крови неинфицированных (n = 3) и ВГС RF + (n = 3) доноров.Зрелые активированные В-клетки памяти (CD19 + CD20 + CD21- / lo + CD27 +) были отсортированы с использованием FACS Aria, и 3000 клеток стимулировали в течение 5 минут только RPMI 1640 или RPMI 1640 с анти-IgG BCR (10 мкг / мл анти-Fab2 Фрагмент IgG, Jackson ImmunoResearch West Grove, PA). Клетки фиксировали 1 мл BD Cytofix (BD Biosciences) и инкубировали при 37 ° C в течение 10 минут. Клетки промывали 2 мл PBS, затем суспендировали в 500 мкл холодного 90% метанола + PBS и хранили при -20 ° C в течение 30 минут. Затем образцы промывали 2 мл PBS и 2 мл PBS + 0.1% BSA, затем инкубировали с 20 мкл антитела против Syk (pY348) (клон I120-722, Biolegend San Diego, CA) в течение 60 минут на льду. Клетки промывали PBS + 0,1% BSA, фиксировали и собирали, как указано выше.

Обнаружение IgM ревматоидного фактора (RF)

Образцы сыворотки были собраны с использованием пробирок для сыворотки Vacutainer (BD Biosciences) и заморожены при -20 ° C. RF IgM измеряли с помощью ELISA (ALPCO, Салем, NH). Предел обнаружения составляет 25 МЕ / мл, образцы с содержанием IgM RF более 25 МЕ / мл считались положительными.

BCR, TLR9 и TLR7 / 8 индуцировали положительную регуляцию CD86 с помощью проточной цитометрии

Мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC) выделяли с использованием фиколла (Fisher Scientific, Hudson, NH) и центрифугирования. Где указано, 5×10 ⁶ PBMC культивировали в течение 3 дней в присутствии анти-BCR (4 мкг / мл анти-IgG Fab’2-фрагмента, Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA), агониста TLR9 (CpG 2006; 1 мкг / мл. , Operon, Huntsville, AL) или агонист TLR7 / 8 (R848; 1 мкг / мл, Invivogen, Сан-Диего, Калифорния).На 3 день РВМС окрашивали на маркеры субпопуляции В-клеток, желтый краситель жизнеспособности (Invitrogen, Carlsbad, CA) и CD86 FITC (клон 2331, BD Biosciences, Сан-Хосе, Калифорния). Получение проточной цитометрии было выполнено на 30 000–50 000 CD19 + B-клеток, как упоминалось ранее.

Пролиферация при анализе разбавления красителя CFSE

PBMC (3×10 ⁶-5×10 ⁶) метили 1,2 мкМ 5 (6) -карбоксифлуоресцеина диацетата, сукцинимидилового эфира (Molecular Probes Invitrogen, Grand Island, NY) в присутствии 0.2% BSA + PBS [18]. Чтобы погасить окрашивание, добавляли 2,5 мл FBS и инкубировали на льду в течение 5 минут. Клетки промывали 0,2% BSA и культивировали в полной среде RPMI 1640 (1% пенициллин / стрептомицин и 1% L-глют с 10% FCS), анти-BCR (4 мкг / мл анти-Fab ₂ фрагмент IgG, Jackson ImmunoResearch) или CpG 2006 (1 мкг / мл, Operon Huntsville, AL) и комбинация BCR и CpG 2006. Клетки окрашивали на 6-й день на маркеры субпопуляции B-клеток, и, как упоминалось ранее, было получено 30 000–50 000 событий CD19 +.

Статистический анализ

Для определения значимости различий между двумя группами было выполнено

непараметрических U-критериев Манна-Уитни. Непараметрический тест Краскела-Уоллиса использовался для оценки различий между более чем двумя группами. Мы выполнили парный тест t для сравнения продольно собранных образцов от доноров, не получавших IFN. Анализы выполняли с использованием программного обеспечения Graph Pad Prism Version 6. Значения p ≤ 0,05 считались статистически значимыми.

Результаты

Зрелые активированные В-клетки памяти доноров ВГС реже экспрессируют CD86 и имеют ограниченный ответ на стимуляцию BCR при наличии сывороточного РФ

Предыдущие исследования охарактеризовали фенотип и функцию В-клеток в условиях криоглобулинемии, но оценка криоглобулинов в сыворотке крови широко варьируется как в клинической практике, так и в опубликованной литературе [19]. RF является составной частью криоглобулинов [20], и его обнаружение воспроизводимо.Мы сосредоточились на наличии RF при инфекции HCV и его связи с фенотипом и функцией B-клеток.

Во-первых, уровни РНК HCV в плазме были выше у доноров RF + HCV по сравнению с донорами RF- HCV (p = 0,0123) ( Рис. 1A) . Следовательно, В-клетки доноров RF + HCV могут отражать повышенное состояние активации в результате большей стимуляции антигеном и вирусом. Мы охарактеризовали В-клетки следующим образом ( Рис. 1B) : Незрелые переходные (CD19 ⁺ CD20 ⁺ CD10 ⁺), далее характеризуемые как незрелые переходные стадии Т1 (CD19 ⁺ CD20 ⁺ CD10 ⁺ CD21 ^—) и незрелая переходная стадия Т2 (CD19 ⁺ CD20 ⁺ CD10 ⁺ CD21 ⁺) [21], Наивная (CD19 ⁺ CD20 ⁺ CD10 ^— CD27 ⁺), зрелая активированная память (CD19 ⁺ CD20 ⁺ CD10 ^— CD27 ⁺ CD21 ^—), покоящаяся память (CD19 ⁺ CD20 ⁺ CD10 ^— CD27 ⁺ CD21 ⁺), тканеподобная память (CD19 ⁺ CD20 ⁺ CD10 ^— CD27 ^— CD21 ^—) и плазмобластные клетки (CD19 ⁺ CD20 ^— CD1485 ^+.

Рис. 1. Повышенная вирусная нагрузка у доноров HCV RF + и стратегия стробирования для подсчета частот субпопуляций B-клеток из цельной крови.

( A), РНК HCV копирует МЕ / мл RF- HCV (●, n = 23) и RF + HCV (▼, n = 23). ( B) Показан образец неинфицированного донора для общего количества незрелых переходных B-клеток (CD19 + CD20 + CD10 +) и стадии его дифференцировки: стадия T1 (CD19 ⁺ CD20 ⁺ CD10 ⁺ CD21-) и стадия T2 ( CD19 ⁺ CD20 ⁺ CD10 ⁺ CD21 ⁺).Зрелые активированные В-клетки (CD19 ⁺ CD20 ⁺ CD10 ^— CD21 ^— CD27 ⁺), покоящиеся В-клетки памяти (CD19 ⁺ CD20 ⁺ CD21 ⁺ CD27 ⁺), наивные (CD19 ⁺ CD20 ⁺ CD21 ⁺ CD27 ^—), тканеподобные В-клетки памяти (CD19 ⁺ CD20 ⁺ CD10 ^— CD21 ^— CD27 ^— клеток и Plast клеток) (CD19 ⁺ CD20 ^— CD38 ⁺)

https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0144629.g001

CD86 (B7.2), как известно, активируется в состояниях активации В-клеток и способствует взаимодействию Т-лимфоцитов с В-клетками [22]. Мы определили, что только циркулирующие зрелые активированные В-клетки памяти (CD19 ⁺ CD21 ^— / ^lo CD27 ⁺) от доноров HCV снижали экспрессию CD86 по сравнению с неинфицированными донорами (UD), независимо от присутствия RF ( ВГС RF-: 11,0% против UD: 24,30%, p = 0,001; HCV RF +: 6,14% против UD: 24,30%, p = 0.003) (Рис. 2A и 2B). Плазмобластные В-клетки имеют самую высокую экспрессию CD86 в наших когортах (S1A фиг. ). В-клетки экспрессируют TLR7 и TLR9 [23], а их стимуляция увеличивает экспрессию CD86 [24, 25]. Максимальная экспрессия CD86 происходит через 72 часа с этими стимулами [26]. Мы оценили, могут ли зрелые активированные В-клетки памяти увеличивать экспрессию CD86 после 3-дневной стимуляции BCR (F (ab ’) ₂ IgG), TLR9 (CpG2006) или TLR7 / 8 (R848). Удивительно, но только зрелые активированные В-клетки памяти доноров RF + HCV показали заметно более низкую экспрессию CD86 после стимуляции BCR (RF + HCV: 52.2% против UD 62,4%, p = 0,0365) и стимуляции CpG 2006 (RF HCV +: 51,8% против RF HCV — 63,5%, p = 0,0441; RF HCV + 51,8% против UD 64,1%, p = 0,0451) (рис. 2C и 2D) . Чтобы подтвердить, была ли стимуляция анти-BCR (F (ab ‘) ₂ IgG-фрагмент) непосредственно на зрелых активированных B-клетках, мы отсортировали зрелые активированные B-клетки памяти 3-х HCV RF + и 3-х неинфицированных доноров и выполнили фос-поток для фосфорилированных Syk. Y348 [27]. Действительно, стимуляция F (ab ’) ₂ IgG приводит к увеличению pSyk Y348 после 5 минут стимуляции как в HCV RF +, так и в UD (S1B и S1C фиг.) .В целом, экспрессия CD86 ниже на зрелых активированных B-клетках памяти доноров HCV RF + и HCV RF- в периферической крови, но только зрелые активированные B-клетки памяти HCV RF + являются гипочувствительными к дальнейшей стимуляции ex vivo .

Рис. 2. Зрелые активированные В-клетки памяти доноров HCV демонстрируют низкую экспрессию CD86 и имеют ограниченный ответ на стимуляцию BCR у доноров RF + HCV.

( AB) Репрезентативная и сводная информация об экспрессии CD86 в цельной крови неинфицированных доноров (UD n = 23), отрицательных по ревматоидному фактору HCV (HCV RF-, ● n = 23) и положительных по ревматоидному фактору HCV (ВГС РФ +, ▼ n = 20).(CD) Репрезентативные и сводные данные экспериментов CD86 ex vivo, в которых мононуклеарные клетки периферической крови культивировали в течение 3 дней только в среде, фрагмент анти-IgG F (ab ‘) ² (4 мкг / мл), CpG (1 мкг / мл) , R848 (мкг / мл) и клетки окрашивали на маркеры субпопуляции B-клеток и CD86. UD (▄, n = 15), HCV RF- (●, n = 14), HCV RF + (▼, n = 15). Краскал-Уоллис был использован для анализа различий между тремя группами (*) доноров, а критерий Манна-Уитни (p≤0,05) использовался между двумя группами доноров.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0144629.g002

Зрелые активированные В-клетки памяти доноров RF + HCV демонстрируют сниженную экспрессию Ki67 и реже пролиферируют в ответ на стимуляцию BCR

HCV напрямую способствует пролиферации наивных (CD27 ^—) и В-клеток памяти (CD27 ⁺) через связывание с CD81 [28]. Затем мы исследовали состояние клеточного цикла (экспрессию Ki67) субпопуляций В-клеток в периферической крови. Зрелые активированные В-клетки памяти доноров RF + HCV имеют значительно более низкую экспрессию Ki67, чем неинфицированные доноры (RF + HCV: 2.76% по сравнению с UD: 5,77%, p = 0,0016), тогда как разницы между донорами HCV RF + и HCV RF- не наблюдалось (рис. 3A и 3B) . Это не было связано с различиями в объеме экспрессии Ki67 B-клеток (CD19 ⁺ CD20 ⁺), и мы не наблюдали различий в состоянии клеточного цикла в других подмножествах B-клеток (данные не показаны). Плазмобласт имел самую высокую экспрессию Ki67 (S2A фиг.) . Затем мы оценили пролиферативный потенциал ex vivo с помощью анализа разбавления красителя CFSE для PBMC, выделенных от необработанных инфицированных HCV доноров с или без RF и неинфицированных доноров.Клетки культивировали в течение 6 дней в присутствии анти-BCR (F (ab ’) ₂ IgG-фрагмент), TLR9 (CpG 2006) или комбинации стимулов. Было показано, что CpG 2006 индуцирует пролиферацию памяти и наивных В-клеток в отсутствие помощи Т-клеток [29, 30]. Объемные В-клетки (CD19 ⁺ CD20 ⁺) доноров RF + HCV менее пролиферативны, чем клетки неинфицированных доноров в присутствии стимуляции BCR (RF + HCV: 6,21% против UD: 11,45%, p = 0,002) (Рис. 3C и 3D) . Объемные В-клетки доноров RF + HCV также показали тенденцию к снижению чувствительности к агонисту TLR9 по сравнению с донорами RF-HCV (p = 0.09). Зрелые активированные В-клетки памяти показали аналогичный паттерн, наблюдаемый в объемных В-клетках, где они менее пролиферативны в присутствии стимуляции BCR (HCV RF +: 11,8% против UD: 24,8%, p = 0,042) (рис. 3E) . Таким образом, циркулирующие зрелые активированные В-клетки памяти доноров RF + HCV реже участвуют в клеточном цикле по сравнению с неинфицированными донорами, и эти В-клетки имеют пониженный пролиферативный ответ на стимуляцию BCR, когда присутствует RF.

Рис. 3. Зрелые активированные В-клетки памяти доноров RF + HCV имеют пониженный ki-67 и с меньшей вероятностью пролиферируют в ответ на стимуляцию BCR.

( AB) Представитель и сводка для экспрессии Ki-67 в цельной крови неинфицированных доноров (UD n = 23), HCV RF- ( ● n = 20) и HCV RF + ( ▼ n = 20). (CD) Репрезентативные и сводные данные разведения красителя CFSE в экспериментах ex vivo, в которых мононуклеарные клетки периферической крови культивировали в течение 6 дней только в среде, анти-BCR (анти-IgG F (ab ‘) ² фрагмент, 4 мкг / мл), CpG 2006 (1 мкг / мл), R848 (мкг / мл) и клетки окрашивали на маркеры субпопуляции B-клеток.UD (▄, n = 11), HCV RF- (●, n = 11), HCV RF + (▼, n = 10). Краскал-Уоллис был использован для анализа различий между тремя группами (*) доноров, а критерий Манна-Уитни (p≤0,05) использовался между двумя группами доноров.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0144629.g003

Ревматоидный фактор у доноров ВГС связан с увеличением доли зрелых активированных В-клеток памяти и уменьшением доли наивных В-клеток в цельной крови

Циркулирующие зрелые активированные В-клетки памяти от необработанных доноров, инфицированных HCV, демонстрируют сниженную активацию и пролиферацию, но только доноры RF + HCV демонстрируют ограниченную активацию для стимуляции ex vivo .Затем мы проверили, изменено ли распределение субпопуляций В-клеток у доноров ВГС RF +. Абсолютное количество CD19 + B-клеток аналогично среди неинфицированных доноров , RF- и HCV RF + (фиг. 4A). Пропорции зрелых активированных B-клеток были выше у доноров HCV RF + по сравнению с неинфицированными донорами (HCV RF +: 3,9% против UD: 0,77%, p = 0,0002) и с донорами RF HCV (HCV RF +: 3,9% против HCV RF-: 2,1%, p = 0,008) ( Фиг.4B и 4C ). Доля наивных В-клеток была значительно ниже у доноров RF + HCV по сравнению с неинфицированными донорами (RF + HCV: 64.8% по сравнению с UD: 75,1%, p = 0,0024) и донорам RF-HCV (RF + HCV: 64,8% по сравнению с RF- HCV: 77,3%, p = 0,0009) ( Fig. 4D ). Мы не нашли доказательств того, что устойчивость к гибели клеток участвует в чрезмерном представлении зрелых активированных В-клеток памяти или снижении количества наивных В-клеток у доноров ВГС RF + путем сравнения экспрессии Bcl-2 и аннексина V в этих подмножествах среди групп (данные не показаны). . Взятые вместе, присутствие RF при хронической инфекции HCV связано с большей долей зрелых активированных В-клеток памяти, тогда как пропорции наивных В-клеток ниже.

Рис. 4. RF + HCV (доноры имеют большую долю зрелых активированных B-клеток памяти и меньшую долю наивных B-клеток по сравнению с неинфицированными донорами и RF- донорами HCV.

( A) Абсолютное количество CD19 + B-клеток на мкл цельной крови. (B) Типичный график потока распределения измененных субпопуляций B-клеток в цельной крови от неинфицированных доноров, доноров RF- и HCV RF +. (C) Сводные данные о доле зрелых активированных B-клеток памяти (%) в целом кровь (CD19 + CD20 + CD10-CD21- / loCD27 +) для неинфицированных доноров ( ▄ n = 23) , HCV RF- (● n = 23) и доноров HCV RF + ( ▼, n = 20). (D). Сводные данные о доле наивных В-клеток (CD19 + CD20 + CD10-CD21 + CD27-) в цельной крови для неинфицированных доноров ( ▄ n = 23) , HCV RF- (● n = 23) и HCV RF + доноры ( ▼, n = 20) . Краскал-Уоллис использовался для анализа различий между тремя группами доноров, а U-критерий Манна-Уитни использовался между двумя группами доноров (p≤0,05)

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0144629.g004

Кратковременная эрадикация вируса не приводит к полному удалению RF из сыворотки или восстановлению распределения субпопуляций B-клеток у доноров RF + HCV

Удаление вируса ВГС приводит к снижению криоглобулинов (состоящих из РФ) в течение 24 месяцев [31].Следовательно, вирусный клиренс должен в конечном итоге устранить РФ из сыворотки. Новые комбинированные методы лечения, такие как софосбувир / ледипасвир, улучшили клиренс вируса до неопределяемого уровня уже через 1–4 недели [32]. В начале терапии доноры RF + и RF-, инфицированные HCV, имели сопоставимые вирусные нагрузки ( рис. 5A ), а через 8 недель лечения 100% субъектов имели неопределяемые вирусные уровни (менее 15 МЕ / мл) ( S1, таблица ). . После 8 недель лечения пропорции зрелых активированных В-клеток памяти доноров RF + HCV показали небольшое снижение по сравнению с исходными уровнями, но это не было статистически значимым или сопоставимым с уровнями неинфицированных доноров (RF HCV + неделя 8: 1.44% по сравнению с UD: 0,80%) (рис. 5B) . Напротив, доля зрелых активированных В-клеток памяти доноров RF HCV снизилась после 8 недель лечения (исходный уровень RF HCV: 1,34% по сравнению с неделей 8: 0,88% p = 0,050) и до аналогичных уровней, как у неинфицированных доноров (0,80%). ) (Рис. 5B) . Наивная доля В-клеток у доноров RF + HCV продемонстрировала умеренную тенденцию к увеличению на 8 неделе лечения (исходный уровень: 75,1% по сравнению с неделей 8: 80,0%, p = 0,66) (Рис. 5C) , при этом уровни на 8 неделе сопоставимы с у неинфицированных доноров (UD: 79%).Мы наблюдали, что тенденции РФ в сыворотке крови ниже после 8 недель лечения по сравнению с исходным уровнем (средний исходный уровень: 68,08 МЕ / мл по сравнению с 8-й неделей: 34,3 МЕ / мл, p = 0,23), с 3 из 10 доноров (30%) отрицательными. для РФ (менее 25 МЕ / мл) к 8 неделе (рис. 5D). Активация В-клеток в зрелых активированных В-клетках памяти также была проанализирована в этой когорте доноров, получавших ВГС RF +. Несмотря на вирусный клиренс, мы наблюдали, что экспрессия CD86 оставалась стабильно низкой на 8 неделе в зрелых активированных В-клетках памяти доноров RF + HCV (исходный уровень: 6% по сравнению с неделей 8: 4.8%) (Рис. 5E) . Экспрессия Ki67 была ниже на зрелых активированных В-клетках памяти у доноров HCV RF + до лечения по сравнению с неинфицированными донорами (RF HCV + 1,61% против UD: 12,6%, p = 0,012) (рис. 5F) . Интересно, что уровни Ki67 у доноров RF + HCV также оставались низкими после 8 недель лечения (исходный уровень: 1,61% против 8 недели: 1,79%) (рис. 5F) . Эти данные предполагают задержку в восстановлении распределения субпопуляций и фенотипа В-клеток у доноров ВГС, у которых есть РФ в сыворотке крови, после 8 недель лечения ПППД для лечения ВГС, то есть момент времени, когда вирус больше не присутствует.

Рис. 5. Лечение ВГС не приводит к удалению ревматоидного фактора из сыворотки или восстановлению В-клеток.

( A) Уровень РНК HCV в плазме, МЕ / мл у доноров RF HCV (● n = 10) и доноров RF + HCV ( ▼, n = 20) . (B) Сводные данные о доле зрелых активированных B-клеток памяти (%) в замороженных PBMC (CD19 + CD20 + CD10-CD21- / loCD27 +) для неинфицированных доноров ( ▄ n = 10) , HCV RF- (● n = 10) , и доноры ВГС РФ + ( ▼, n = 10).( C) Сводные данные о доле наивных B-клеток (CD19 + CD20 + CD10-CD21 + CD27-) в замороженных PBMC для неинфицированных доноров ( ▄ n = 10) , HCV RF- (● n = 10) и доноры RF + HCV ( ▼, n = 10) . (D) Сводные данные по экспрессии CD86 на зрелых активированных В-клетках памяти (CD19 + CD20 + CD10-CD21- / loCD27 +) для неинфицированных доноров (n = 10) и доноры ВГС РФ + (▼, n = 10). (E) D) Сводные данные экспрессии Ki67 на зрелых активированных В-клетках памяти (CD19 + CD20 + CD10-CD21- / loCD27 +) для неинфицированных доноров (n = 10) и доноров HCV RF + (▼, n = 10).Краскал-Уоллис использовался для анализа различий между тремя группами доноров (*), а U-критерий Манна-Уитни использовался между двумя группами доноров (p≤0,05)

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0144629.g005

Обсуждение

Мы показали, что присутствие ревматоидного фактора (RF) у доноров, хронически инфицированных ВГС, связано со снижением активации и пролиферации в субпопуляции зрелых активированных В-клеток памяти (CD21 ^{— / lo} CD27 ⁺).Эта же подгруппа чрезмерно представлена в периферической крови. Сохранение RF после удаления HCV сопровождается задержкой в нормализации активации, клеточного цикла и распределения зрелых активированных B-клеток памяти у доноров RF + HCV, но без задержки в нормализации частоты зрелой активированной субпопуляции RF-доноров HCV. Следовательно, присутствие RF тесно связано с дисфункцией B-клеток и изменением пропорций субпопуляции B-клеток.

У пациентов с криоглобулинемией, инфицированных ВГС, маргинальная зона, такая как В-клетки, которые являются IgM + CD21 ^lo CD27 ⁺, усилена на периферии [14].Эта субпопуляция В-клеток имеет низкую экспрессию CD21, что отличает ее от типичных циркулирующих В-клеток маргинальной зоны (IgM + CD27 + CD21 ^hi), происходящих от линии В2 [14, 33, 34]. Маргинальная зона, такая как IgM + CD21 ^lo CD27 ⁺ B-клеток, у пациентов с криоглобулинемией, инфицированных HCV, демонстрирует пониженный приток кальция в ответ на стимуляцию BCR [15]. Зрелые активированные B-клетки памяти (CD27 + CD21 ^lo), описанные здесь, подобны этим маргинальным зонам, подобным B-клеткам, описанным ранее.В частности, мы также находим здесь пониженную реакцию на стимуляцию BCR (фиг.2D и фиг.3D) . Напротив, в то время как CD5 описан как маркер B-клеток B1a, которые были охарактеризованы как продуцирующие RF у пациентов с ревматоидным артритом [35], RF-экспрессирующие B-клетки при хронической инфекции HCV — это CD5- [14]. В целом, изученные здесь зрелые активированные В-клетки подобны маргинальной зоне, такой как В-клетки, хотя требуется дальнейшая функциональная характеристика.

В то время как работа Ni et al. Наблюдала, что циркулирующие В-клетки CD19 ⁺ у доноров ВГС не имели увеличения экспрессии CD86 по сравнению со здоровым контролем [36], результаты других исследований показали циркулирующие В-клетки памяти (CD19 ⁺ CD27 ⁺) доноров, инфицированных HCV с криоглобулинемией [37] и без криоглобулинемии [38], имеют повышенную экспрессию CD86.Terrier et al. Также обнаружили, что экспрессия CD86 увеличивается на уровне РНК и белка, а экспрессия Ki67 увеличивается на уровне белка в CD21 ^lo CD27 ⁺ B-клетках криоглобулинемических субъектов, инфицированных HCV [39]. В отличие от этих предыдущих сообщений, мы обнаружили, что циркулирующие зрелые активированные В-клетки памяти (CD27 ⁺ CD21 ^—/^lo) доноров, инфицированных HCV, имели пониженную экспрессию CD86 и Ki67. Наше исследование отличается от этих других исследований отсутствием связи между индексом повреждения печени (APRI) и экспрессией CD86 или Ki67 по сравнению с исследованием Santer et al, где В-клетки памяти доноров HCV с выраженным фиброзом печени имели самый высокий уровень экспрессии CD86. [37].Кроме того, в наше исследование были включены только нелеченые пациенты, инфицированные ВГС, в отличие от других исследований [39]. Другие особенности нашего исследования, которые отличаются от этих других исследований, включают: анализ образцов цельной крови в реальном времени, преобладающую мужскую популяцию, контрольную группу неинфицированных доноров, которые близко совпадают по возрасту и клиническим характеристикам, а также схожие расовые и социально-экономические факторы.

Чтобы выяснить, реагируют ли зрелые активированные В-клетки памяти доноров, инфицированных ВГС, на дальнейшую стимуляцию, мы изолировали РВМС участников, инфицированных ВГС, и обнаружили, что эта подгруппа неспособна увеличивать экспрессию CD86 в ответ на стимул BCR и TLR9, когда РФ присутствует в сыворотке. (Доноры ВГС РФ +).Это подтверждает идею о том, что такое же функциональное состояние in vivo наблюдается в прямых анализах ex vivo . Также, в соответствии с нашими данными, Terrier et al. Показали, что CD21 ^lo CD27 ⁺ B-клетки неспособны активировать маркеры активации (CD69, CD25) и пролиферировать после стимуляции BCR [39]. В модели волчанки у мышей (В-клетки AM14) BCR обладает RF-активностью, и его стимуляция не способствует активации В-клеток (анергии), но вовлечение TLR9 приводит к активации и пролиферации В-клеток [40].Следовательно, TLR9 может играть роль в активации В-клеток в присутствии аутоантигена [41]. Здесь мы наблюдали, что реакция ex vivo как на BCR, так и на TLR9 ограничена у доноров RF + HCV по сравнению с RF- и UD HCV, что позволяет предположить, что присутствие RF связано с выраженной невосприимчивостью к дальнейшей стимуляции.

Мы также стремились определить, реагируют ли зрелые активированные В-клетки памяти доноров RF + HCV на стимуляцию BCR с помощью анализа фосфотока проксимальных сигнальных событий.Мы наблюдали, что отсортированные зрелые активированные В-клетки памяти доноров RF + HCV на самом деле реагируют на стимуляцию IgG, поскольку они могут повышать уровни pSYK до 40% после стимуляции, величина, сопоставимая с неинфицированными донорами ( S1B Рис. ). Следовательно, проксимальные сигнальные события BCR могут фактически быть интактными в этих зрелых активированных клетках HCV RF ⁺, что указывает на потенциально нарушенное или подавленное дистальное сигнальное событие. Возможно, продуктивная передача сигналов BCR подавляется ингибирующими комплексами, такими как SHIP1 (SRC-homology-2-domain -sing inositol-5-phosphatase 1) и DOK (стыковочный белок) [42].Альтернативно, другой тип клеток во фракции PBMC может действовать отрицательным регуляторным образом дополнительных клеток.

В целом, наши данные предполагают, что чрезмерное количество циркулирующих зрелых активированных В-клеток памяти доноров RF + ВГС согласуется с профилем В-клеток, которые избегают делеции и сохраняются в состоянии невосприимчивости к антигенной стимуляции [43]. Повышенная доля зрелых активированных В-клеток памяти в цельной крови доноров ВГС была ранее описана другими [44] и нами [17].Мы первые, кто подчеркивает, что это чрезмерное количество связано с присутствием РФ во время инфекции ВГС, а не исключительно с криоблобулинемией. Кроме того, мы наблюдали снижение наивных пропорций В-клеток (CD21 ⁺ CD27 ^—) у доноров RF + HCV. Мы изучили экспрессию CD21 (MFI) на наивных В-клетках, чтобы понять, связано ли подавление этого маркера с чрезмерной представленностью зрелых активированных В-клеток памяти у доноров RF + HCV. Наивные B-клетки доноров HCV RF + показали пониженную экспрессию CD21 в отличие от доноров RF HCV (MFI: HCV RF +: 5569 против MFI HCV RF-: 7111, p = 0.0489) ( S2B Рис ). Это открытие аналогично предыдущему сообщению о пациентах с ревматоидным артритом и общим вариабельным иммунодефицитом, где наивные В-клетки являются CD21 ^{— 10}, аутореактивными и не могут активироваться или пролиферировать после стимуляции BCR [45]. Однако мы не наблюдали корреляции CD21 MFI на наивных В-клетках и пропорции зрелых активированных В-клеток памяти (данные не показаны), что затрудняет вывод о том, что зрелые активированные В-клетки возникают из наивных В-клеток в этих условиях.

Мы также наблюдали, что у нелеченых доноров RF + HCV были повышенные уровни вируса в сыворотке по сравнению с донорами RF-HCV, что согласуется с Racanelli et al. [46] Это вызывает вопросы о том, есть ли прямой вклад вируса в распределение и активацию субпопуляций В-клеток. Появление новых методов лечения DAA дает возможность оценить эффекты быстрого удаления HCV из системы без использования иммуномодулирующих препаратов (IFN). Данные, представленные здесь, указывают на умеренную тенденцию к снижению RF в течение первых 8 недель лечения ПППД без интерферона HCV.В то же время не было значительного снижения доли зрелых активированных В-клеток, состояния активации (экспрессия CD86) или состояния клеточного цикла (экспрессия Ki67) доноров RF + HCV на 8-й неделе. Тем не менее, у доноров RF- HCV это соотношение не наблюдалось. зрелых активированных В-клеток памяти нормализовались после 8 недель терапии до уровней, аналогичных уровням у неинфицированных доноров. Следовательно, RF, а не вирусная нагрузка, по-видимому, тесно связаны с изменениями подгруппы В-клеток в пропорции и активации.Дальнейшее исследование кинетики нормализации RF с использованием терапии без IFN должно дать лучшее понимание восстановления B-клеток. Эта информация может помочь в клиническом ведении пациента, инфицированного HCV RF +, во время или вскоре после терапии ПППД.

Вспомогательная информация

S1 Фиг. Плазмобласты демонстрируют усиление CD86 и F (ab ’) 2 IgG, способствующее усилению регуляции pSYK Y348 в зрелых активированных В-клетках памяти доноров RF + HCV.

( A), Сводные данные CD86 (%) в плазмобластах (CD19 + CD20- CD38 +) в цельной крови для неинфицированных доноров ( ▄ n = 20) , HCV RF- (● n = 17) , и доноры ВГС РФ + ( ▼, n = 17) .(B) Анализ потока фосфора на отсортированных зрелых активированных В-клетках памяти (3000), которые стимулировали средой (заштрихованная гистограмма), 5 минут с 10 мкг F (ab ‘) ₂ IgM Fc5 _μ (пунктирная линия) или 5 минут с 10 мкг F (ab ‘) ₂ IgG (сплошная линия) неинфицированных доноров (n = 3) и доноров RF + HCV (n = 3).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0144629.s001

(TIF)

S2 Рис. Плазмобласты имеют высокую экспрессию ki67, а наивные В-клетки доноров RF + HCV не способны увеличивать CD21.

(A) Сводные данные ki67 (%) в плазмобластах (CD19 + CD20- CD38 +) в цельной крови для неинфицированных доноров ( ▄ n = 20) , HCV RF- (● n = 17) и HCV РФ + доноры ( ▼, n = 17) . (B) Сводные данные о средней интенсивности флуоресценции CD21 на наивных (CD19 ⁺ CD20 ⁺ CD21 ⁺ CD27 ^—) В-клетках. Краскал-Уоллис был использован для анализа различий между тремя группами (*) доноров, а критерий Манна-Уитни (p≤0,05) использовался между двумя группами доноров.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0144629.s002

(TIF)

Благодарности

Мы благодарим участников исследования за их время и приверженность этим усилиям. Спасибо Дагу Баздару и доктору Кэри Шайву за советы, касающиеся проточной цитометрии и протокола красителя CFSE и Ki-67. Мы также благодарим доктора Сьюзан Мойр (NIAID) за бесценные советы по фенотипу и биологии субпопуляции B-клеток. Спасибо доктору Луису Мунис-Феличиано и доктору Майку Фриману за вычитку рукописи.

Вклад авторов

Задумал и разработал эксперименты: ERA DDA. Проведены эксперименты: ERA ACL AR LK YFY. Проанализированы данные: ERA ACL YFY DDA. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: DDA. Написал бумагу: ERA DDA.

Список литературы

1. Hanafiah KM, Groeger J, Flaxman AD, Wiersma ST. Глобальная эпидемиология вирусной инфекции гепатита С: новые оценки возрастных антител к серологической распространенности ВГС. Гепатология. 2013; 57 (4): 1333–42.pmid: ISI: 000317363600008.
2. Чак Э., Талал А.Х., Шерман К.Э., Шифф Э.Р., Сааб С. Инфекция вируса гепатита С в США: оценка истинной распространенности. Liver Int. 2011. 31 (8): 1090–101. pmid: ISI: 000293634
5.
3. Wald O, Weiss ID, Galun E, Peled A. Хемокины при вирусной инфекции гепатита C: патогенез, прогноз и терапия. Цитокин. 2007. 39 (1): 50–62. Epub 2007/07/17. pmid: 17629707.
4. Себастьяни Г., Гкуватсос К., Пантопулос К.Хронический гепатит С и фиброз печени. Всемирный гастроэнтерологический журнал: WJG. 2014. 20 (32): 11033–53. Epub 2014/08/30. pmid: 25170193; PubMed Central PMCID: PMC4145747.
5. Чарльз Э.Д., Дастин Л.Б. Криоглобулинемия, вызванная вирусом гепатита С. Почки международные. 2009. 76 (8): 818–24. Epub 2009/07/17. pmid: 19606079; PubMed Central PMCID: PMC2755598.
6. Али А, Зейн Н. Инфекция гепатита С: системное заболевание с внепеченочными проявлениями. Кливлендский медицинский журнал клиники.2005. 72 (11): 1005–8, 10–4, 16 пасс. Epub 2005/12/01. pmid: 16315439.
7. Shihabi ZK. Криоглобулины: важный, но игнорируемый клинический тест. Летопись клинической и лабораторной науки. 2006. 36 (4): 395–408. Epub 2006/11/28. pmid: 17127726.
8. Вигани А.Г., Маседо де Оливейра А., Тоццо Р., Паван М.Х., Гонкалес Э.С., Фейс В. и др. Связь криоглобулинемии с устойчивым вирусологическим ответом у пациентов с хроническим гепатитом С. Журнал вирусного гепатита.2011; 18 (4): e91–8. Epub 2010/10/26. pmid: 20969676.
9. Terrier B, Cacoub P. Криоглобулинемический васкулит: обновленная информация. Современное мнение в ревматологии. 2013; 25 (1): 10–8. Epub 2012/12/01. pmid: 23196322.
10. Zignego AL, Piluso A, Giannini C. Хроническая инфекция HBV и HCV: аутоиммунные проявления и лимфопролиферация. Обзоры аутоиммунитета. 2008. 8 (2): 107–11. Epub 2008/08/14. pmid: 18700171.
11. Мойр С., Фаучи А.С. В-клетки при ВИЧ-инфекции и заболеваниях.Nat Rev Immunol. 2009. 9 (4): 235–45. Epub 2009/03/26. doi: nri2524 [pii] pmid: 19319142.
12. Хо Дж, Мойр С., Маласпина А., Хауэлл М.Л., Ван В., ДиПото А.С. и др. Две чрезмерно представленные популяции В-клеток у ВИЧ-инфицированных подвергаются апоптозу по разным механизмам. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2006; 103 (51): 19436–41. Epub 2006/12/13. DOI: 0609515103 [pii] pmid: 17158796.
13. Мойр С., Маласпина А., Пикерал О.К., Донохью Е.Т., Васкес Дж., Миллер Н.Дж. и др.Снижение выживаемости В-клеток у ВИЧ-инфицированных пациентов, опосредованное измененной экспрессией рецепторов суперсемейства TNF. J Exp Med. 2004. 200 (7): 587–99. Epub 2004/10/28. pmid: 15508184.
14. Чарльз ЭД, Грин Р.М., Марукиан С., Талал А.Х., Лейк-Бакаар Г.В., Якобсон И.М. и др. Клональная экспансия иммуноглобулина M + CD27 + B-клеток при смешанной криоглобулинемии, связанной с HCV. Кровь. 2008. 111 (3): 1344–56. Epub 19.10.2007. DOI: кровь-2007-07-101717 [pii] pmid: 17942751.
15. Чарльз ЭД, Брунетти С., Марукиан С., Ритола К.Д., Талал А.Х., Маркс К. и др.Клональные В-клетки у пациентов со смешанной криоглобулинемией, ассоциированной с вирусом гепатита С, содержат расширенное подмножество анергических В-клеток CD21low. Кровь. 2011. 117 (20): 5425–37. Epub 23.03.2011. DOI: кровь-2010-10-312942 [pii] pmid: 21421840.
16. Visentini M, Cagliuso M, Conti V, Carbonari M, Cibati M, Siciliano G и др. Клональные B-клетки пациентов с HCV-ассоциированной смешанной криоглобулинемией содержат истощенные маргинальные зоны и клетки с низким содержанием CD21, сверхэкспрессирующие Stra13. Европейский журнал иммунологии.2012. 42 (6): 1468–76. Epub 2012/06/09. pmid: 22678901.
17. Сугальский Дж. М., Родригес Б., Мойр С., Энтони Д. Д.. Искажение субпопуляций В-клеток периферической крови связано с изменением клеточного цикла и внутренней устойчивостью к апоптозу и отражает состояние иммунной активации при хронической вирусной инфекции гепатита С. J Immunol. 2010. 185 (5): 3019–27. Epub 2010/07/27. pmid: 20656924; PubMed Central PMCID: PMC3805966.
18. Куа Б.Дж., Уоррен Х.С., округ ЧР. Мониторинг пролиферации лимфоцитов in vitro и in vivo с помощью внутриклеточного флуоресцентного красителя сукцинимидилового эфира диацетата карбоксифлуоресцеина.Протоколы природы. 2007. 2 (9): 2049–56. Epub 2007/09/15. pmid: 17853860.
19. Cacoub P, Comarmond C, Domont F, Savey L, Saadoun D. Криоглобулинемия, васкулит. Американский журнал медицины. 2015. Epub 2015/04/04. pmid: 25837517.
20. Антонеску С., Майерат С., Мантегани А., Фрей П.С., Спертини Ф., Тиссот Дж. Д.. Инфекция вируса гепатита С (ВГС): активность ревматоидного фактора в сыворотке крови и генотип ВГС коррелируют с клональностью криоглобулина. Кровь. 1998. 92 (9): 3486–7.Epub 1998/10/27. pmid: 9787197.
21. Сурьяни С., Фулчер Д.А., Сантнер-Нанан Б., Нанан Р., Вонг М., Шоу П.Дж. и др. Дифференциальная экспрессия CD21 позволяет идентифицировать различные по развитию и функциональности подмножества переходных В-клеток человека. Кровь. 2010. 115 (3): 519–29. Epub 2009/12/08. pmid: 19965666.
22. Mongini PK, Tolani S, Fattah RJ, Inman JK. Рецептор антигена запускал повышающую регуляцию CD86 и CD80 в В-клетках человека: усиливающая роль костимулирующего комплекса CD21 / CD19 и IL-4.Клеточная иммунология. 2002. 216 (1–2): 50–64. Epub 2002/10/17. pmid: 12381350.
23. Хорнунг В., Ротенфуссер С., Бритч С., Круг А., Ярсдорфер Б., Гизе Т. и др. Количественная экспрессия мРНК toll-подобного рецептора 1–10 в клеточных субпопуляциях мононуклеарных клеток периферической крови человека и чувствительность к олигодезоксинуклеотидам CpG. J Immunol. 2002. 168 (9): 4531–7. Epub 2002/04/24. pmid: 11970999.
24. Бауэр М., Хег К., Вагнер Х., Липфорд ГБ. ДНК активирует иммунные клетки человека зависимым от последовательности CpG образом.Иммунология. 1999. 97 (4): 699–705. Epub 1999/08/24. pmid: 10457226; PubMed Central PMCID: PMC2326885.
25. Сигналы Agrawal S, Gupta S. TLR1 / 2, TLR7 и TLR9 непосредственно активируют субпопуляции наивных В-клеток периферической крови и В-клеток памяти человека для производства цитокинов, хемокинов и гематопоэтических факторов роста. J Clin Immunol. 2011; 31 (1): 89–98. Epub 2010/09/08. pmid: 20821041; PubMed Central PMCID: PMC3064903.
26. Леншоу Д. Д., Сперлинг А. И., Кук М. П., Фриман Г., Ри Л., Деккер Д. К. и др.Дифференциальная регуляция костимулирующих молекул B7-1 и B7-2 после взаимодействия рецептора Ig антигеном. J Immunol. 1994; 153 (5): 1990–7. Epub 1994/09/01. pmid: 7519638.
27. Флинн Р., Аллен Дж. Л., Лузник Л., Макдональд К. П., Паз К., Александр К. А. и др. Ориентация на Syk-активированные В-клетки при хронической болезни трансплантат против хозяина у мышей и человека. Кровь. 2015; 125 (26): 4085–94. Epub 2015/04/09. pmid: 25852057; PubMed Central PMCID: PMC4481596.
28. Роза Д., Салетти Дж., Де Грегорио Э., Зорат Ф., Комар С., Д’Оро У и др.Активация наивных В-лимфоцитов через CD81, патогенетический механизм заболеваний В-лимфоцитов, связанных с вирусом гепатита С. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2005; 102 (51): 18544–9. Epub 2005/12/13. DOI: 0509402102 [pii] pmid: 16339892.
29. Цзян В., Ледерман М.М., Хардинг К.В., Родригес Б., Мохнер Р.Дж., Зиг С.Ф. Стимуляция TLR9 заставляет наивные В-клетки пролиферировать и достигать усиленной антигенпредставляющей функции. Европейский журнал иммунологии. 2007. 37 (8): 2205–13. Epub 2007/07/11. pmid: 17621369.
30. Poeck H, Wagner M, Battiany J, Rothenfusser S, Wellisch D, Hornung V и др. Плазмацитоидные дендритные клетки, антиген и CpG-C лицензируют В-клетки человека для дифференцировки плазматических клеток и выработки иммуноглобулинов в отсутствие помощи Т-клеток. Кровь. 2004. 103 (8): 3058–64. pmid: 15070685.
31. Дор М.П., Фаттович Г., Сепульведа А.Р., Реалди Г. Криоглобулинемия, связанная с инфекцией вируса гепатита С. Заболевания органов пищеварения и науки. 2007. 52 (4): 897–907. Epub 2007/03/24.pmid: 17380399.
32. Kowdley KV, Gordon SC, Reddy KR, Rossaro L, Bernstein DE, Lawitz E, et al. Ледипасвир и софосбувир в течение 8 или 12 недель при хроническом гепатите С без цирроза печени. Медицинский журнал Новой Англии. 2014. 370 (20): 1879–88. Epub 2014/04/12. pmid: 24720702.
33. Баумгарт Н. Двойная жизнь клетки B-1: самореактивность выбирает защитные эффекторные функции. Обзор Nature Immunology. 2011; 11 (1): 34–46. Epub 2010/12/15. pmid: 21151033.
34. Веллер С., Браун М.К., Тан Б.К., Розенвальд А., Кордье С., Конли М.Э. и др. В-клетки «памяти» IgM крови человека представляют собой циркулирующие В-клетки маргинальной зоны селезенки, несущие предразличный репертуар иммуноглобулинов. Кровь. 2004. 104 (12): 3647–54. Epub 2004/06/12. pmid: 151^{; PubMed Central PMCID: PMC25.}
35. Mantovani L, Wilder RL, Casali P. Человеческие ревматоидные B-1a (CD5 + B) клетки продуцируют соматически гипермутированные ревматоидные факторы IgM с высоким сродством. J Immunol.1993. 151 (1): 473–88. Epub 1993/07/01. pmid: 7686945; PubMed Central PMCID: PMC4625548.
36. Ni J, Hembrador E, Di Bisceglie AM, Jacobson IM, Talal AH, Butera D, et al. Накопление В-лимфоцитов с наивным фенотипом в состоянии покоя в подгруппе пациентов с гепатитом С. J Immunol. 2003. 170 (6): 3429–39. Epub 2003/03/11. pmid: 12626604.
37. Сантер Д.М., Ма М.М., Хокман Д., Ланди А., Тиррелл Д.Л., Хоутон М. Повышенная активация памяти, но не наивных В-клеток у пациентов с криоглобулинемией и прогрессирующим фиброзом печени, инфицированных вирусом хронического гепатита С.ПлоС один. 2013; 8 (6): e68308. Epub 2013/07/11. pmid: 23840845; PubMed Central PMCID: PMC3695964.
38. Oliviero B, Cerino A, Varchetta S, Paudice E, Pai S, Ludovisi S и др. Повышенная дифференцировка B-клеток и снижение пролиферативной способности при хроническом гепатите C и хронических вирусных инфекциях гепатита B. Журнал гепатологии. 2011; 55 (1): 53–60. Epub 2010/12/15. pmid: 21145853.
39. Terrier B, Joly F, Vazquez T., Benech P, Rosenzwajg M, Carpentier W, et al.Экспансия функционально анергических CD21- / низкомаргинальных зоноподобных клонов B-клеток в аутоиммунных заболеваниях, связанных с вирусной инфекцией гепатита С. J Immunol. 2011. 187 (12): 6550–63. Epub 2011/11/16. pmid: 22084433.
40. Leadbetter EA, Rifkin IR, Hohlbaum AM, Beaudette BC, Shlomchik MJ, Marshak-Rothstein A. Комплексы хроматин-IgG активируют В-клетки путем двойного взаимодействия IgM и Toll-подобных рецепторов. Природа. 2002. 416 (6881): 603–7. Epub 2002/04/12. pmid: 11948342.
41. Авалос А.М., Бускони Л., Маршак-Ротштейн А.Регуляция аутореактивных ответов В-клеток на эндогенные лиганды TLR. Аутоиммунитет. 2010. 43 (1): 76–83. Epub 2009/12/18. pmid: 20014959; PubMed Central PMCID: PMC3059585.
42. Cambier JC, Gauld SB, Merrell KT, Vilen BJ. В-клеточная анергия: от трансгенных моделей к естественным анергическим В-клеткам? Обзор Nature Immunology. 2007. 7 (8): 633–43. Epub 2007/07/21. pmid: 17641666; PubMed Central PMCID: PMC3714009.
43. Merrell KT, Benschop RJ, Gauld SB, Aviszus K, Decote-Ricardo D, Wysocki LJ, et al.Идентификация анергических В-клеток в репертуаре дикого типа. Иммунитет. 2006. 25 (6): 953–62. Epub 2006/12/19. pmid: 17174121.
44. Оливьеро Б., Мантовани С., Людовизи С., Варчетта С., Меле Д., Паолуччи С. и др. Скошенные В-клетки при хронической инфекции вируса гепатита С сохраняют свою способность реагировать на активацию, вызванную вирусом. Журнал вирусных гепатитов. 2015; 22 (4): 391–8. Epub 2014/09/27. pmid: 25258145.
45. Иснарди И., Нг Ю.С., Менард Л., Мейерс Г., Саадун Д., Срданович И. и др.Рецептор комплемента 2 / CD21 — наивные В-клетки человека содержат в основном аутореактивные невосприимчивые клоны. Кровь. 2010. 115 (24): 5026–36. Epub 2010/03/17. pmid: 20231422; PubMed Central PMCID: PMC3373152.
46. Раканелли В., Фрассанито М.А., Леоне П., Галиано М., Де Ре В., Сильвестрис Ф. и др. Продукция антител и поведение in vitro подмножеств CD27-определенных B-клеток: стойкая инфекция вирусом гепатита С меняет правила. J Virol. 2006. 80 (8): 3923–34. Epub 2006/03/31. pmid: 16571809; PubMed Central PMCID: PMC1440441.
47. Снайдер Н., Гаджула Л., Сяо С.Ю., Грейди Дж., Люксон Б., Лау Д.Т. и др. APRI: простой и проверенный прогностический фактор фиброза печени при хроническом гепатите C. J Clin Gastroenterol. 2006. 40 (6): 535–42. Epub 2006/07/11. DOI: 00004836-200607000-00013 [pii]. pmid: 16825937.

Упаковка из 30 шт. DuPont ProClean PC271S из микропористой пленки с застежкой-молнией Белый PC271SWHLG00300B Большие лабораторные пальто и куртки Инструменты и предметы домашнего обихода icil.org.tr

Упаковка из 30 шт. DuPont ProClean PC271S из микропористой пленки с застежкой-молнией Белые инструменты PC271SWHLGLG & Товары для дома icil.org.tr

В упаковке 30 шт. Из микропористой пленки DuPont ProClean PC271S с застежкой-молнией Белое PC271SWHLG00300B Большое платье из микропористой пленки PC271S с застежкой-молнией Белое PC271SWHLG00300B Большая упаковка из 30 шт. DuPont ProClean, большая, упаковка из 30 шт .: Промышленная и научная пленка ProClean с застежкой-молнией, DuPont Закрытие, Белый цвет, Покупайте здесь онлайн, Самые новые и лучшие здесь, Новые стили каждую неделю, Покупки в Интернете по сниженной цене! В упаковке 30 шт. Из микропористой пленки DuPont ProClean PC271S с застежкой-молнией Белый PC271SWHLG00300B Большой лед.org.tr.

В упаковке 30 микропористых платьев из пленки DuPont ProClean PC271S с застежкой-молнией Белое PC271SWHLG00300B Большое

перейти к содержанию

Микропористое пленочное платье DuPont ProClean с застежкой-молнией, белое, большое, 30 шт. В упаковке: промышленные и научные. Платье из микропористой пленки DuPont ProClean с застежкой-молнией, белое, большое, 30 шт. В упаковке: промышленные и научные. Зубчатые швы имеют несколько переплетенных нитей, которые вшиты вокруг необработанных краев материала одежды, чтобы создать прочный, устойчивый к нагрузкам шов。 Эластичные отверстия для более плотного прилегания к запястью。 Обвязанная горловина для меньшего отделения частиц。 Передняя застежка-молния для легкого надевания и снятия。 ProClean предлагает улучшенную защиту от брызг неопасных легких жидкостей.。 Описание продукта DuPont ProClean — это микропористая композитная ткань, которая обеспечивает барьер для неопасных жидкостей и сухих частиц в чистых помещениях. 。 От производителя Для разных работ требуются разные уровни защитного снаряжения и одежды. DuPont Personal Protection предлагает широкий выбор защитной одежды и аксессуаров для удовлетворения этих разнообразных потребностей. 。。。

В упаковке 30 шт. Из микропористой пленки DuPont ProClean PC271S с застежкой-молнией, белое PC271SWHLG00300B, большое

Винтажная латунная грандиозная викторианская тарелка с хрустальной ручкой Фонтенбло Privacy 2.375, розетки Hazet 900TZ-19, Globe Electric 65580 Jackson 1-Light Plug-in Pendant Matte Black. Baldwin PS.TAP.R.RSR.481.6L.DS Конический правосторонний переходной рычаг с Rustic Arch Rose, темная бронза. В шкиве с готовым отверстием Browning 2AK44X1 используется ремень 3L, 1 отверстие, 2 канавки, Frigidaire 5303281378 Винт для кухонной плиты / духовки. 1-пара MCR Safety 3213LCHVSP Grain Cow Full Leather Driver Мужские перчатки промышленного класса с оранжевыми кончиками пальцев с повышенной видимостью и кремовыми вставками для больших пальцев Keystone, латунный переходник Flair-It 41121 BestPEX 3/8 x 1/2 MPT.Набор из 50 M6 x 1 мм Размер резьбы Мелкие детали из цинкового сплава FSCM6X10SHIZ Железный винт с накатанной головкой с лопаточной головкой, длина 10 мм, длина 2 зубья 3-3 / 4 Обычная длина Hardslick Finish YG-1 45321CH HSSCo8 Концевая фреза со сферической головкой, двойная 1/2, Elana Rays Tantra Heart Art Appeelz Съемная настенная графика 14 x 14. Fulham Lighting Fh21-UNV-750L-CEC FireHorse 11-Аварийный балласт-Универсальное напряжение-750 Начальный световой поток. Винт с накатанной головкой из нержавеющей стали, длина 10 мм Мелкие детали FSCM4X10WTSS Размер резьбы M4 x 0,7 мм, ITM 267NC0331 Метчик для низа из быстрорежущей стали 3 / 4-10 NC 1 упаковка.1,125 Диаметр резания Хвостовик Weldon 4,25 Общая длина 30 градусов спирали YG-1 E2248 Концевая фреза с квадратным носом из кобальтовой стали Светлая поверхность без покрытия Диаметр хвостовика 0,75 6 канавок, КОРИЧНЕВЫЙ RUBRE-116 Резиновый подшипник. 8 x 2-1 / 2-дюймовый 100-компонентный труднодоступный крепеж 014973372392 Винты для плоского листового металла с квадратным приводом. Ekena Millwork ONL25X05X01BRMA-CASE-2 Накладка 25 W x 5 1/8 H x 3/4 D Заводская грунтовка 25 W x 5 1/8 H x 3/4 D, HSS-E-PM 3 Канавки Покрытие TiCN Правая насечка 5 / 8-11 Левая спиральная заглушка с фаской WIDIA GTDGT8 Victory GT90 HP Tap, JCKing Cool White 6500K 60 Вт Запасные лампы накаливания из 6 диммируемых ламп переменного тока 110-130 В 6 Вт T45 E26 с винтовой светодиодной классической лампой накаливания.

Верх

В упаковке 30 шт. Из микропористой пленки DuPont ProClean PC271S с застежкой-молнией Белый PC271SWHLG00300B Большой

Large, 30 штук: Industrial & Scientific, Платье из микропористой пленки DuPont ProClean с застежкой-молнией, белое, покупайте здесь онлайн, новейшие и лучшие здесь, новые стили каждую неделю, покупки в Интернете по сниженной цене! .

АПК РФ Статья 271. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции

Ст. 271 АПК РФ. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции

последние изменения и поправки, судебная практика

Комментарий к Ст. 271 Арбитражного процессуального кодекса РФ

Статья 271 АПК РФ. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции

Комментарии к статье

Так все-таки как правильно исчислять сроки на подачу кассационной жалобы в случае наличия апелляционной инстанции?

Статья 271. Постановление арбитражного суда апелляционной инстанции

Комментарий к ст. 271 АПК РФ

Судебная практика по статье 271 АПК РФ

Вопросы упрощенного производства

Рисунки и данные в «Артифизиологии» показывают настройку формы, подобную V4, в глубокой сети, обученной для классификации изображений.

Обзорный обзор подходов к оказанию помощи, ориентированных на пациента, в здравоохранении | BMC Health Services Research

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Что сохраняется в файле cookie?

RA Mayes | Ramsey Electronics

IC-A110 VHF-AM Блок-схема бортового приемопередатчика æ © ¡ICOM orporated

Abstract

Введение

Материалы и методы

Участники исследования

Образцы пролонгированной противовирусной терапии прямого действия (ПППД) без ИФН

Проточный цитометрический анализ

Сортировка зрелых активированных В-клеток памяти и анализ Phosflow

Обнаружение IgM ревматоидного фактора (RF)

BCR, TLR9 и TLR7 / 8 индуцировали положительную регуляцию CD86 с помощью проточной цитометрии

Пролиферация при анализе разбавления красителя CFSE

Статистический анализ

Результаты

Зрелые активированные В-клетки памяти доноров ВГС реже экспрессируют CD86 и имеют ограниченный ответ на стимуляцию BCR при наличии сывороточного РФ

Зрелые активированные В-клетки памяти доноров RF + HCV демонстрируют сниженную экспрессию Ki67 и реже пролиферируют в ответ на стимуляцию BCR

Ревматоидный фактор у доноров ВГС связан с увеличением доли зрелых активированных В-клеток памяти и уменьшением доли наивных В-клеток в цельной крови

Кратковременная эрадикация вируса не приводит к полному удалению RF из сыворотки или восстановлению распределения субпопуляций B-клеток у доноров RF + HCV

Обсуждение

Вспомогательная информация

S1 Фиг. Плазмобласты демонстрируют усиление CD86 и F (ab ’) 2 IgG, способствующее усилению регуляции pSYK Y348 в зрелых активированных В-клетках памяти доноров RF + HCV.

S2 Рис. Плазмобласты имеют высокую экспрессию ki67, а наивные В-клетки доноров RF + HCV не способны увеличивать CD21.

Благодарности

Вклад авторов

Список литературы

5.

В упаковке 30 микропористых платьев из пленки DuPont ProClean PC271S с застежкой-молнией Белое PC271SWHLG00300B Большое

В упаковке 30 шт. Из микропористой пленки DuPont ProClean PC271S с застежкой-молнией, белое PC271SWHLG00300B, большое

В упаковке 30 шт. Из микропористой пленки DuPont ProClean PC271S с застежкой-молнией Белый PC271SWHLG00300B Большой

Оставить комментарий Отменить ответ